01.06.2013 Views

Fitopatologia: zdrowe rośliny - zdrowi ludzie Phytopathology ...

Fitopatologia: zdrowe rośliny - zdrowi ludzie Phytopathology ...

Fitopatologia: zdrowe rośliny - zdrowi ludzie Phytopathology ...

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne (PTFit.)<br />

Oddział Bydgoski Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy<br />

im. J. J. Śniadeckich w Bydgoszczy<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong><br />

<strong>Phytopathology</strong>: healthy plants - healthy people<br />

Bydgoszcz, 20-22 września 2011


Komitet organizacyjny<br />

Prof. dr hab. inż. Czesław Sadowski – przewodniczący; prof. dr hab.<br />

Małgorzata Mańka, czł. koresp. PAN; dr inż. Aleksander Łukanowski; dr<br />

inż. Małgorzata Jeske; dr inż. Anna Baturo-Cieśniewska; dr inż. Grzegorz<br />

Lemańczyk; dr inż. Dariusz Pańka; dr inż. Leszek Lenc; dr hab. Jacek<br />

Piszczek; dr inż. Teresa Pastuszewska<br />

SponSorzy<br />

Wojewódzki Fundusz Ochrony Środowiska i Gospodarki Wodnej w Toruniu<br />

Bayer CropScience Polska<br />

Komitet Ochrony Roślin PAN<br />

Przedsiębiorstwo Nasienne „ROLNAS” Sp. z o.o.<br />

ProCam Polska<br />

„Polski Cukier” Krajowa Spółka Cukrowa S.A.<br />

Przygotowano do druku z materiałów dostarczonych przez autorów<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

Rozpowszechnianie:<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej UTP<br />

e-mail: fitopato@utp.edu.pl<br />

Wydawnictwo:<br />

Bydgoskie Towarzystwo Naukowe<br />

ul. Jezuicka 4, 85-102 Bydgoszcz<br />

tel. 52 322 22 68<br />

btn@um.bydgoszcz.pl<br />

www.btn.bydgoszcz.eu<br />

Bydgoszcz 2011


SPIS TREŚCI<br />

Tytułem wstępu........................................................................................................................11<br />

REFERATY PLENARNE.........................................................................................................13<br />

A. Grzywacz - Zdrowe lasy - <strong>zdrowe</strong> społeczeństwo..............................................................15<br />

H. Wiśniewska - Mikotoksyny w żywności i paszach...........................................................18<br />

M. Mańka - Czterdzieści lat Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego..............................23<br />

Cz. Sadowski, T. Pastuszewska, M. Nowakowski, A. Łukanowski,<br />

D. Pańka, G. Lemańczyk -<br />

90 lat fitopatologii w Bydgoszczy - wczoraj, dziś, jutro...........................................................32<br />

WYSTĄPIENIA.........................................................................................................................49<br />

H. Kwaśna, L. Szwajkowska-Michałek, P. Łakomy, J. Perkowski -<br />

Penicillium adametzii i jego możliwości w biologicznej ochronie roślin................................51<br />

H. Stępniewska, M. Latała, A. Misiek - Wpływ grzyba ektomikoryzowego<br />

Hebeloma crustuliniforme na wzrost i rozwój wybranych patogenów<br />

zgorzelowych siewek drzew w warunkach laboratoryjnych...................................................55<br />

D. Pańka, D. Piesik, M. Jeske - Wpływ endofita Neotyphodium lolii<br />

na produkcję związków fenolowych i uwalnianie lotnych związków organicznych<br />

przez życicę trwałą (Lolium perenne L.) zainfekowaną przez Fusarium poae......................57<br />

J. Jaroszuk-Ściseł, E. Kurek, A. Słomka, A. Baturo-Cieśniewska,<br />

L. Lenc - Enzymy degradujące roślinne i grzybowe ściany komórkowe<br />

syntetyzowane przez szczepy F. culmorum różnie oddziałujące<br />

na wzrost roślin zbożowych (ryzosferowe i patogeniczny)......................................................61<br />

M. Szczech - Wykorzystanie grzybów Trichoderma w uprawach<br />

integrowanych i do zagospodarowania odpadów organicznych<br />

– projekt programu operacyjnego innowacyjna gospodarka.................................................64<br />

T. M. Dolińska, M. Schollenberger, A. Bartkowska -<br />

Pasożytowanie grzybów z rodzaju Cladosporium<br />

na Gymnosporangium sabinae (rdza gruszy)..........................................................................67<br />

J. Szymona - Problemy ochrony ekologicznych roślin sadowniczych..................................70<br />

A. Kuzdraliński, E. Solarska - Zanieczyszczenie przez mikotoksyny<br />

ziarna ekologicznego owsa w zależności od sposobu ochrony.................................................72<br />

D. Krzyżanowska, M. Potrykus, E. Łojkowska, S. Jafra -<br />

Selekcja mikroorganizmów o potencjalnym zastosowaniu<br />

w biologicznej ochronie ziemniaka przed bakteriami pektynolitycznymi.............................75<br />

L. Lenc, Cz. Sadowski - Występowanie Fusarium spp. na kłosach i ziarnie<br />

pszenicy ozimej uprawianej w różnych systemach uprawy i monokulturze.........................79<br />

E. Arseniuk, E. Reszka, A. Małkus - Mapa genetyczna Stagonospora nodorum.............82<br />

A. Łukanowski, A. Baturo-Cieśniewska, Cz. Sadowski -<br />

Wykorzystanie Real Time PCR do ilościowego<br />

oznaczania Fusarium culmorum i genów warunkujących produkcję<br />

trichotecenów w ziarnie pszenicy ozimej.................................................................................85<br />

3


4<br />

Z. Machowicz-Stefaniak, E. Zalewska, E. Król, B. Kowalik -<br />

Patogeniczność i charakterystyka genetyczna izolatów Phomopsis diachenii Sacc.<br />

uzyskanych z kminku zwyczajnego Carum carvi L................................................................88<br />

M. Kałużna, J. Puławska, P. Sobiczewski - Nowa metoda określania<br />

genetycznego zróżnicowania sprawców raka bakteryjnego drzew owocowych.....................91<br />

M. Michalecka, S. Masny, T. Malinowski, A. Bielenin -<br />

Zmienność genetyczna populacji grzyba Venturia inaequalis w Polsce................................95<br />

A. Baturo-Cieśniewska, Cz. Sadowski - Molekularna identyfikacja<br />

chemotypów polskich izolatów Fusarium culmorum<br />

uzyskanych z pszenicy ozimej i jarej......................................................................................101<br />

W. Irzykowski, M. Korbas, E. Jajor, M. Jędryczka -<br />

Sekwencje polimorficznych fragmentów minisatelitarnych grzyba<br />

Leptosphaeria maculans w populacjach traktowanych<br />

i nie traktowanych fungicydami.............................................................................................104<br />

M. Wit, A. Waśkiewicz, E. Jabłońska, R. Warzecha, P. Ochodzki,<br />

W. Wakuliński - Występowanie i charakterystyka typów kojarzeniowych<br />

MAT1 i MAT2 Fusarium verticillioides.................................................................................107<br />

M. Potrykus, W. Śledź, E. Łojkowska - Zastosowanie Multiplex PCR<br />

do identyfikacji bakterii pektynolitycznych powodujących choroby ziemniaka..................109<br />

M. Bełka, M. Mańka - Zróżnicowanie populacji grzybów rodzaju Rhizoctonia<br />

w wybranych szkółkach leśnych na terenie Wielkopolski....................................................112<br />

J. Behnke-Borowczyk, H. Kwaśna - Zastosowanie klonowania<br />

i sekwencjonowania w badaniu różnorodności mikroorganizmów glebowych.....................114<br />

M. Rataj-Guranowska, N. Łukaszewska-Skrzypniak -<br />

Zgodność wegetatywna u Verticillium dahliae..........................................................................117<br />

Z. Machowicz-Stefaniak, E. Zalewska - Występowanie<br />

i szkodliwość Colletotrichum dematium (Fr.) grove<br />

dla kminku zwyczajnego Carum carvi L...............................................................................120<br />

B. Zimowska - Patogeniczność Phoma strasseri Moesz dla łodyg<br />

i rozłogów mięty pieprzowej Mentha piperita L....................................................................123<br />

S. Martyniuk - Czynniki ograniczające wykorzystywanie preparatów<br />

mikrobiologicznych w rolnictwie (ochrona roślin, stymulowanie plonów)...........................126<br />

M. Dynowska, E. Sucharzewska, G. Barańska, P. Troska -<br />

Grzyby z rodzaju Fusarium w mikologii medycznej.............................................................132<br />

Ł. Stępień, G. Koczyk, A. Waśkiewicz - Zróżnicowanie gatunków<br />

Fusarium izolowanych z ananasa oraz syntetyzowanych przez nie mikotoksyn..................135<br />

D. Pańka, M. Jeske - Wpływ zasiedlenia kostrzewy łąkowej przez<br />

Neotyphodium uncinatum na jej plonowanie,<br />

zdrowotność i zawartość ergowaliny......................................................................................139<br />

J. Błaszkowski - Problemy w morfologicznym identyfikowaniu<br />

arbuskularnych grzybów mikoryzowych (Glomeromycota)<br />

tworzących glomoidalne zarodniki.........................................................................................142<br />

K. Matkowski, E. Moszczyńska, E. Pląskowska - Choroby drzew<br />

i krzewów ozdobnych na terenie Wrocławia..........................................................................145<br />

G. Lemańczyk - Chwasty żywicielami patogenicznych izolatów<br />

Rhizoctonia cerealis i R. solani...............................................................................................147


D. Abramowski, J. Floryszak-Wieczorek - Udział tlenku azotu<br />

w nabywaniu odporności liści ziemniaka na Phytophthora infestans.................................150<br />

A. Dawidziuk, J. Kaczmarek, M. Jędryczka -<br />

Modelowanie matematyczne jako narzędzie skuteczniejszego<br />

zwalczania suchej zgnilizny kapustnych w rzepaku.............................................................152<br />

B. Meszka, A. Broniarek-Niemiec, A. Bielenin - Aktualne problemy<br />

ochrony roślin jagodowych przed chorobami.........................................................................156<br />

H. Pospieszny, B. Hasiów-Jaroszewska, N. Borodynko -<br />

Biologiczne i genetyczne zróżnicowanie izolatów wirusa mozaiki pepino<br />

(Pepino mosaic virus) występujących w Polsce.....................................................................159<br />

B. Hasiów-Jaroszewska, N. Borodynko, H. Pospieszny -<br />

Genetyczne uwarunkowania oddziaływań pomiędzy<br />

wirusem mozaiki pepino (Pepino mosaic virus) a gospodarzem..........................................162<br />

K. Golnik, M. Szyndel - Poszukiwanie nowych wzorów rekombinacji<br />

w genomach izolatów wirusa Y ziemniaka (Potato virus Y, PVY).......................................164<br />

E. Kalinowska, E. Paduch-Cichal, M. Chodorska -<br />

Wykrywanie i charakterystyka molekularna izolatów wirusa<br />

czerwonej pierścieniowej plamistości borówki wysokiej.......................................................167<br />

M. Kamińska, H. Berniak, P. Kamiński - Fitoplazmy przyczyną zaburzeń<br />

w kwitnieniu roślin kapustowatych.......................................................................................169<br />

M. Cieślińska, H. Morga, D. Kruczyńska - Zróżnicowanie fitoplazm<br />

porażających drzewa owocowe w Polsce................................................................................172<br />

P. Sobiczewski, B. Meszka, H. Bryk, C. Ślusarski, A. Chałańska,<br />

S. Berczyński, E. Malusa - Zmiany w populacjach<br />

mikroorganizmów i nicieni w glebie po odkażaniu<br />

metodami konwencjonalnymi i proekologicznymi.................................................................175<br />

M. Golanowska, S. Jafra - Potencjał antagonistyczny bakterii<br />

izolowanych z rizosfery i syntetycznego peptydu CAMEL<br />

względem Pseudomonas syringae...........................................................................................180<br />

J. Puławska, A. Mikiciński, P. Sobiczewski - Zróżnicowanie wirulencji<br />

Erwinia amylovora – jaka jest rola plazmidów?...................................................................183<br />

J. Puławska, A. Willems, S. Sule, P. Sobiczewski -<br />

Rhizobium skierniewicense i Rhizobium nepotum - nowe gatunki<br />

bakterii wywołujących guzowatość korzeni...........................................................................187<br />

A. Mikiciński, P. Sobiczewski, J. Puławska - Mechanizmy działania<br />

izolatów bakterii Pantoea agglomerans i Pseudomonas spp.<br />

przydatnych w ochronie roślin przed zarazą ogniową (Erwinia amylovora)......................190<br />

POSTERY................................................................................................................................195<br />

I. Adamska, B. Czerniawska - Grzyby na roślinach z rodzaju<br />

Sambucus i Tilia.....................................................................................................................197<br />

R. Andrzejak - Antagonistyczne oddziaływanie grzybów glebowych<br />

wobec różnych izolatów rodzaju Fusarium wyosobnionych<br />

z wypustek szparaga lekarskiego...........................................................................................199<br />

A. Baturo-Cieśniewska, A. Łukanowski - Zdrowotność 8 odmian<br />

pszenicy jarej uprawianej w systemie ekologicznym na tle systemu<br />

integrowanego i konwencjonalnego........................................................................................201<br />

5


6<br />

N. Borodynko, H. Pospieszny - Klinika chorób roślin.....................................................204<br />

J. Ciesielska, P. Sobiczewski, C. Ślusarski, B. Meszka, E. Malusa -<br />

Alternatywne metody fumigacji: projekt Life+ wspierający integrowane<br />

i zrównoważone metody zwalczania organizmów szkodliwych<br />

w glebie w uprawach ogrodniczych.............................................................................................206<br />

B. Cwalina-Ambroziak, B. Bogucka, M. Nowak -<br />

Patogeny nadziemnej części ziemniaka nawożonego dolistnie............................................209<br />

B. Cwalina-Ambroziak, M. Nowak - Wpływ ochrony biologicznej<br />

i chemicznej na nasilenie zarazy i alternariozy ziemniaka..................................................212<br />

B. Cwalina-Ambroziak, M. Nowak - Wpływ ochrony biologicznej<br />

i chemicznej na zbiorowisko grzybów kolonizujących organy pomidora<br />

(Lycopersicum esculentum Mill.) i glebę..................................................................................215<br />

J. Dłużniewska - Wpływ preparatów Antifung, Bioczos i Biosept<br />

na rozwój i antagonizm Trichoderma harzianum.................................................................218<br />

T. M. Dolińska, M. Schollenberger, A. Bartkowska -<br />

Lecanicillium lecanii jako pasożyt wybranych rdzy.............................................................220<br />

K. Gleń, K. Znój, R. Witkowicz - Mikoflora ziarna zbóż<br />

pod wpływem nawożenia gleby PRP® Sol i NPK.................................................................222<br />

T. Góral, D. Walentyn-Góral - Odporność pszenicy, pszenicy twardej<br />

i pszenżyta na rozprzestrzenianie się Fusarium w kłosie (typ odporności 2).....................225<br />

M. Grabowski, K. Oberc - Możliwości zastosowania wybranych<br />

preparatów biotechnicznych do zwalczania grzybów z rodzaju Monilia.............................228<br />

J. Grajewski, A. Błajet-Kosicka, M. Twarużek, R. Kosicki,<br />

K. Mazurkiewicz-Zapałowicz, K. Kalczyńska -<br />

Występowanie toksyn fuzaryjnych w orkiszu<br />

z ekologicznego systemu uprawy............................................................................................231<br />

E. Hanus-Fajerska, A. Wiszniewska, P. Czaicki -<br />

Opracowanie protokołu kultywacji zróżnicowanych genotypów Daphne<br />

(Thymelaeaceae) w celu testowania odporności na Thielaviopsis basicola.............................234<br />

E. Jajor, K. Pieczul, A. Perek, J. Horoszkiewicz-Janka -<br />

Zmienność genetyczna izolatów Alternaria brassicae pochodzących<br />

z terenu Wielkopolski.............................................................................................................238<br />

A. Jakubowska, M. Michalecka, A. Bielenin - Nowe dla Polski<br />

patogeny inwazyjne drzew owocowych z rodzaju Monilinia................................................240<br />

A. Jamiołkowska - Plon owoców i grzyby zasiedlające perykarp<br />

papryki słodkiej (Capsicum annuum L.) uprawianej w polu...............................................244<br />

R. Janas, J. Sobolewski, J. Robak - Skuteczność wybranych środków<br />

biologicznych i chemicznych stosowanych w uprawach pietruszki na nasiona.......................246<br />

R. Janas - Mikoflora nasion rokietty siewnej (Eruca sativa)<br />

uprawianej w systemie ekologicznym....................................................................................249<br />

R. Jankowiak - Grzyby ofiostomatoidalne jako pospolite<br />

symbionty korników żerujących na drzewach iglastych<br />

w Polsce: przegląd 10 letnich badań.........................................................................................252<br />

R. Jankowiak - Wpływ temperatury na wzrost i przeżywalność kolonii<br />

dwóch gatunków grzybów z rodzaju Geosmithia...................................................................255


M. Jędryczka, J. Kaczmarek, W. Irzykowski, X. Duan,<br />

I. Dymarski, M. Kamiński, A. Brachaczek - Od inokulum do plonu<br />

– kompleksowa analiza wpływu porażenia przez Sclerotinia sclerotiorum<br />

na produkcję nasion rzepaku ozimego w gospodarstwie wielkotowarowym.......................258<br />

J. Kaczmarek, A. Brachaczek, M. Jędryczka - Wykorzystanie<br />

monitorowania stężeń zarodników grzybów rodzaju Fusarium<br />

do optymalizacji zwalczania fuzariozy kłosów pszenicy ozimej...........................................261<br />

J. Kamasa, K. Krawczyk - Identyfikacja bakterii Acidovorax avenae<br />

porażających orchidee.............................................................................................................265<br />

Z. Kaniuczak - Efektywność produkcyjna i ekonomiczna zabiegów<br />

fungicydowych w uprawie pszenżyta jarego i ich wpływ<br />

na plon ziarna oraz wskaźniki ekonomiczne.........................................................................267<br />

I. Kiecana, E. Mielniczuk, J. Perkowski, M. Cegiełko -<br />

Szkodliwość gatunku Fusarium avenaceum (Fr.) Sacc.<br />

dla wybranych genotypów owsa (Avena sativa L.)......................................................................270<br />

W. Kita, M. Tołtyrzewska, R. Sadowski - Badania zdrowotności<br />

jęczmienia ozimego w systemie PDO.....................................................................................272<br />

K. Koczwara, D. Pańka - Wykorzystanie metody PCR do identyfikacji<br />

endofita Neotyphodium lolii oraz jego wpływ na indukcję specyficznych<br />

mechanizmów obronnych w roślinie......................................................................................274<br />

T. Kosiada - Wpływ temperatury oraz światła na niektóre gatunki<br />

grzybów rodzaju Ascochyta......................................................................................................276<br />

M. Kowalik, B. Kierpiec, J. Bonio, M. Żołna - Plamistości i nekrozy<br />

na liściach azalii Rhododendron L. w Ogrodzie Botanicznym<br />

Uniwersytetu Jagiellońskiego................................................................................................278<br />

M. Kowalik - Grzyby towarzyszące roślinom tataraku zwyczajnego<br />

a Corus calamus L. w okresie wegetacji................................................................................282<br />

B. Kowalska, U. Smolińska - Podatność wybranych odmian<br />

cebuli (Allium cepa L.) na porażenie przez bakterie patogeniczne......................................286<br />

K. Krawczyk, A. Zwolińska, J. Kamasa, A. Maćkowiak-Sochacka -<br />

Wpływ sposobu inokulacji i warunków hodowli<br />

na objawy chorób bakteryjnych kukurydzy...............................................................................289<br />

T. P. Kurowski, B. Majchrzak, E. Jaźwińska, E. Kowalska -<br />

Zbiorowiska grzybów zasiedlających ziarniaki pszenicy ozimej<br />

uprawianej po roślinach kapustowatych nawożonych siarką..............................................291<br />

T. P. Kurowski, U. Wysocka, M. Damszel - Grzyby zasiedlające ziarniaki<br />

pszenicy jarej uprawianej w systemie konwencjonalnym i ekologicznym...........................294<br />

H. Kurzawińska, S. Mazur - Wykorzystanie niektórych preparatów<br />

biotechnicznych w ochronie naci ziemniaka przed<br />

Phytophthora infestans (Mont.) de Bary...............................................................................297<br />

G. Lemańczyk, J. Zdunek, D. Pańka, L. Lenc, Cz. Sadowski -<br />

Redukcja fuzariozy kłosów (Fusarium culmorum – chemotypy DON i NIV)<br />

i mikotoksyn w pszenicy ozimej przy wczesnym stosowaniu fungicydów...........................299<br />

M. Łobczowski, W. Pusz, E. Pląskowska - Zbiorowiska grzybów fyllosfery<br />

buraka cukrowego (Beta vulgaris L. subsp. vulgaris) uprawianego w różnych<br />

systemach uprawy przy zróżnicowanej dawce nawożenia azotem.......................................303<br />

7


8<br />

A. Maćkowiak-Sochacka, A. Zwolińska - Przeżywalność bakterii<br />

Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus w różnych warunkach otoczenia<br />

w kontekście utylizacji bulw ziemniaków porażonych bakteriozą pierścieniową...................305<br />

E. Matyjaszczyk, J. Sobczak - Środki ochrony roślin zawierające<br />

substancje aktywne pochodzenia naturalnego...............................................................................307<br />

K. Mazurkiewicz-Zapałowicz, D. Ładczuk, M. Wolska -<br />

Organizmy wpływające na zdrowotność Typha spp. w litoralu jezior<br />

Drawieńskiego Parku Narodowego (NW Poland).................................................................311<br />

E. Mielniczuk, I. Kiecana, M. Cegiełko, A. Pastucha - Gatunki z rodzaju<br />

Fusarium zagrażające uprawie owsa (Avena sativa L.).......................................................314<br />

A. Mikiciński, P. Sobiczewski, S. Berczyński - Możliwości wykorzystania<br />

wybranych fungicydów i związków pochodzenia naturalnego<br />

w ochronie roślin sadowniczych przed bakteriozami............................................................317<br />

E. B. Moliszewska, I. Pisarek - Następcze oddziaływanie osadów ściekowych<br />

na zbiorowiska grzybów glebowych i zdrowotność roślin uprawnych..................................320<br />

E. Moszczyńska, K. Matkowski, E. Pląskowska, A. Biesiada -<br />

Zbiorowiska grzybów fyllosfery jeżówki purpurowej<br />

(Echinacea purpurea (L.) Moench.) nawożonej mocznikiem i saletrą amonową..................323<br />

M. Nowakowski, P. Skonieczek, T. Piętka - Wpływ uprawy rodów<br />

gorczycy białej na populację mątwika burakowego w glebie................................................325<br />

P. Ochodzki, T. Góral, R. Warzecha, M. Żurek, K. Nawrot -<br />

Porównanie porażenia przez Fusarium i zawartości mikotoksyn<br />

w ziarnie kukurydzy konwencjonalnej i modyfikowanej genetycznie............................................328<br />

R. Ogórek, E. Pląskowska - Epicoccum nigrum jako czynnik<br />

biologicznej kontroli in vitro patogenów roślinnych..............................................................332<br />

R. Ogórek, E. Pląskowska, A. Skrobiszewski - Wpływ biostymulatora<br />

Asahi SL na wzrost wybranych grzybów z rodzaju Fusarium<br />

na różnych podłożach hodowalnych.......................................................................................334<br />

D. Packa, T. Kulik, M. Hościk - Badania mikroskopowe przy użyciu<br />

skaningowego mikroskopu elektronowego ziarniaków dawnych<br />

pszenic porażonych przez Fusarium culmorum....................................................................336<br />

T. Pastuszewska, G. Gryń - Wpływ gatunku gleby na przeżywalność<br />

bakterii Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus.......................................................339<br />

A. Perek, E. Jajor, K. Pieczul, I. Świerczyńska, M. Korbas -<br />

Charakterystyka molekularna polskich i szkockich izolatów<br />

Plasmodiophora brassicae (kiła kapusty)..............................................................................341<br />

K. Pieczul, J. Horoszkiewicz-Janka, J. Danielewicz -<br />

Identyfikacja chemotypów DON i NIV u izolatów<br />

Fusarium culmorum i Fusarium graminearum........................................................................343<br />

K. Pieczul, J. Piszczek - Analiza zmienności genetycznej genu CYP51<br />

u izolatów Cercospora beticola sprawcy chwościka buraka..................................................345<br />

E. Pląskowska, H. Gołębiowska - Wpływ uproszczeń uprawowych<br />

na zasiedlenie ziarna żyta przez Fusarium spp........................................................................347<br />

E. Potocka, E. Solarska, A. Kuzdraliński -<br />

Zanieczyszczenie mikotoksynami ziarna żyta i pszenżyta ozimego....................................349


W. Poznań, M. Ziemichód, E. Arseniuk - reakcje odmian ozimej<br />

pszenicy i ozimego pszenżyta w stadium siewki i po wykłoszeniu<br />

w polu na stagonospora nodorum...........................................................................................351<br />

M. Ptaszek, A. Trzewik, L. Orlikowski, T. Orlikowska - Zmienność w obrębie<br />

izolatów Phytophthora cambivora z różnych roślin żywicielskich oraz wody.....................355<br />

W. Pusz, M. Łobczowski - Wpływ zastosowania biostymulatorów Hergit<br />

i Sunagreen na zasiedlenie łodyg i nasion rzepaku ozimego przez grzyby.........................357<br />

K. Sadowska, A. Pukacka, N. Łukaszewska-Skrzypniak,<br />

M. Rataj-Guranowska - Metody krioprezerwacji bakterii i grzybów<br />

stosowane w banku patogenów roślin i badania ich bioróżnorodności................................359<br />

M. Schollenberger, E. Wysocka, T. Dolińska - Reakcja izolatów<br />

Botrytis cinerea pochodzących z roślin ozdobnych na wybrane fungicydy..........................361<br />

M. Słowik-Borowiec, E. Szpyrka, A. Kurdziel - Pozostałości środków<br />

ochrony roślin w owocach z terenu południowo-wschodniej Polski.....................................363<br />

U. Smolińska, B. Kowalska, M. Szczech, W. Kowalczyk -<br />

Wykorzystanie materiałów odpadowych do namnażania<br />

antagonistycznych grzybów Trichoderma.............................................................................366<br />

J. Sobczak, W. Kawczyńska, K. Radziemska-Bonowicz,<br />

B. Śliwa, E. Wiercińska - Rejestracja fungicydów w Polsce – stan obecny......................368<br />

S. Sobkowiak, J. Śliwka, M. Chmielarz, R. Lebecka,<br />

E. Zimnoch-Guzowska - Odporność na metalaksyl izolatów<br />

Phytophthora infestans występujących na terenie Polski w latach 2006-2010...................372<br />

E. Starzycka, M. Starzycki - Badania in vivo i in vitro zmian pH zachodzących<br />

pod wpływem mikotoksyny grzyba Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary.......................377<br />

S. Stępniewska-Jarosz, H. Ratajkiewicz - Grzyby patogeniczne chwastów<br />

– potencjalne zagrożenie roślin uprawnych..........................................................................380<br />

J. Strakowska, L. Błaszczyk, J. Chełkowski - Aktywność celulolityczna<br />

grzybów z rodzaju Trichoderma i gatunku Phlebiopsis gigantea........................................382<br />

M. Szczech, M. Oskiera - Przeżywalność mikroorganizmów<br />

w mikrogranulach alginianowych z dodatkiem materiałów wspomagających...................385<br />

W. Szewczyk, M. Baranowska - Ocena zdrowotności dębu na podstawie<br />

stopnia ubytku aparatu asymilacyjnego wybranych drzewostanów<br />

dębowych Nadleśnictwa Smolarz...........................................................................................388<br />

D. Szopińska, K. Tylkowska, M. Jarosz, Ch. Song, S. Kopacz -<br />

Kiełkowanie, wigor i zdrowotność nasion kopru (Anethum graveolens L.)<br />

produkowanych w Polsce........................................................................................................390<br />

E. Szpyrka, M. Słowik-Borowiec, A Kurdziel - Pozostałości środków<br />

ochrony roślin w warzywach kapustnych..............................................................................393<br />

J. Szwejda-Grzybowska, R. Kosson, M. Tuszyńska, M. Szczech -<br />

Mikotoksyny w warzywach ekologicznych.............................................................................396<br />

A. Tratwal, F. Walczak - Występowanie i szkodliwość ważnych<br />

gospodarczo chorób zbóż i kukurydzy w Polsce w latach 2006-2010...................................399<br />

A. Trzewik, M. Ptaszek, L. B. Orlikowski, T. Orlikowska -<br />

Zróżnicowanie genomowe i patogeniczność izolatów Phytophthora plurivora<br />

z różnych źródeł wody............................................................................................................402<br />

9


10<br />

U. Wachowska, B. Rychcik, W. Mikołajczyk, K. Kurek -<br />

Mikroorganizmy zasiedlające ziarno pszenicy orkisz (Triticum spelta)<br />

uprawianej w systemie konwencjonalnym i ekologicznym...................................................404<br />

U. Wachowska, A. D. Stasiulewicz-Paluch, K. Kurek, W. Mikołajczyk -<br />

Reakcja epifitów i endofitów ziarna pszenicy ozimej<br />

na zabiegi biologiczne i chemiczne.........................................................................................407<br />

A. Wagner, E. Wrona - Wpływ wybranych zapraw na zdrowotność nasion<br />

Zinnia elegans L. i Tagetes erecta L.......................................................................................411<br />

J. Walczewski, E. Arseniak - Wykorzystanie techniki podwojonych haploidów<br />

do podniesienia odporności pszenicy oraz pszenżyta na Stagonospora nodorum...................413<br />

D. Walentyn-Góral, T. Góral - Ocena patogeniczności izolatów<br />

Ascochyta fabae Speg. wobec bobiku (Vicia faba L.) metodą odciętych liści.......................416<br />

Z. Weber - Zależność między ospowatością sadzeniaków<br />

i występowaniem rizoktoniozy na ziemniaku w okresie wegetacji......................................418<br />

M. Werner, L. Irzykowska, Z. Karolewski - Genetyczne zróżnicowanie<br />

kasztanowców oraz ocena występowania patogenów i szkodników.............................................420<br />

M. Werner - Aktywność preparatu Antifung 20 SL wobec wyosobnionych<br />

z wypustek szparaga lekarskiego grzybów rodzaju Fusarium.............................................422<br />

A. Węgierek, J. Puławska, E. Arseniuk - Zróżnicowanie szczepów<br />

bakterii Clavibacter michiganensis w obrębie podgatunku sepedonicus<br />

za pomocą testów biochemicznych i molekularnych – VNTR i MP-PCR...................................424<br />

B. Wiewióra - Mikroorganizmy zasiedlające nasiona kostrzewy<br />

czerwonej (Festuca rubra L.) i ich wpływ na zdolność kiełkowania.....................................428<br />

LISTA UCZESTNIKÓW.........................................................................................................433


Tytułem wstępu<br />

Rok 2011 jest rokiem kolejnego, XIV Zwyczajnego Walnego Zgromadzenia<br />

Członków Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego, wraz z towarzyszącym<br />

mu Sympozjum Naukowym „Zdrowe <strong>rośliny</strong> – <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>”. W tym właśnie<br />

roku przypadają też dwie ważne rocznice: czterdzieści lat od założenia Polskiego<br />

Towarzystwa Fitopatologicznego i dziewięćdziesiąt lat istnienia i rozwoju<br />

fitopatologii w ośrodku bydgoskim.<br />

Organizatorzy postanowili więc wykorzystać sposobność spotkania polskich<br />

fitopatologów w Bydgoszczy aby przypomnieć wydarzenia minionych<br />

lat. Tak powstał pomysł wzbogacenia sesji otwierającej Sympozjum naukowe<br />

o dwa wystąpienia natury historycznej, dotyczące wspominanych rocznic. Program<br />

popołudniowej sesji we wtorek 20 września ukształtował się wobec tego<br />

następująco:<br />

1. Zdrowe lasy – <strong>zdrowe</strong> społeczeństwo – prof. dr hab. Andrzej Grzywacz,<br />

czł. rzecz. PAN<br />

2. Mikotoksyny w żywności i paszach – dr hab. Halina Wiśniewska,<br />

prof. IGR PAN<br />

3. Czterdzieści lat Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego –<br />

prof. dr hab. Małgorzata Mańka, czł. koresp. PAN<br />

4. 90 lat fitopatologii w Bydgoszczy - wczoraj, dziś, jutro –<br />

prof. dr hab. Czesław Sadowski, dr inż. Aleksander Łukanowski<br />

Małgorzata Mańka<br />

Czesław Sadowski<br />

11


REFERATY PLENARNE


ZDROWE LASY – ZDROWE SPOŁECZEŃSTWO<br />

Andrzej Grzywacz<br />

Wydział Leśny SGGW w Warszawie, Zakład Mikologii i Fitopatologii Leśnej<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

andrzej_grzywacz@sggw.pl<br />

Pojęcie bioklimatu rekreacyjnego stanowi syntezę oddziaływań zewnętrznych<br />

na organizm turystów i osób wypoczywających w ekosystemach leśnych.<br />

Właściwości prozdrowotne poszczególnych typów lasu zależą od wielu czynników<br />

natury ekologicznej: składu gatunkowego drzewostanu, struktury i jego<br />

budowy pionowej, wieku i zwarcia koron drzew, elementów składających się<br />

na typ siedliskowy lasu, dominującego zbiorowiska roślinnego i jego stanu<br />

zdrowotnego, stopnia zniekształcenia. Bioklimat warstwy rekreacyjnej możemy<br />

określić za pomocą różnorodnych cech i wskaźników: insolacji, uwilgotnienia,<br />

przewietrzania, produkcji tlenu, produkcji ozonu, struktury jonowej<br />

powietrza, różnego typu promieniowania, składu fitoaerozoli (w tym fitoncydów,<br />

olejków eterycznych), składu aeroplanktonu (wirusy, bakterie, zarodniki<br />

grzybów, pyłki roślin, roztocza, owady, złuszczone fragmenty roślin i zwierząt).<br />

Cechy te mają wpływ na filtracyjno-detoksykacyjne, bioterapeutyczne<br />

i psychoregulacyjne oraz estetyczne właściwości leśnych zbiorowisk roślinnych.<br />

Zespołem bodźców fizycznych, chemicznych i biologicznych występujących<br />

w lasach, a oddziaływujących na organizm ludzi przebywających na<br />

terenach leśnych, zajmuje się dynamicznie rozwijająca się, stosunkowo nowa<br />

gałąź wiedzy – geoekologia turystyki i wypoczynku. Wiemy już sporo o wpływie<br />

na człowieka otaczających go poszczególnych gatunków drzew leśnych<br />

oraz typów siedliskowych lasu.<br />

W Polsce jest 9,3 mln ha lasów i gruntów związanych z gospodarką leśną,<br />

z czego 9,1 mln ha drzewostanów, co oznacza 29,1 % lesistości lub 30,4 %<br />

udziału w powierzchni lądowej kraju, a na 1 mieszkańca przypada 0,24 ha<br />

lasu (GUS 2010).<br />

Liczne czynniki natury abiotyczne, biotycznej i antropogenicznej obniżają,<br />

zaburzają funkcje i pożytki z lasów o charakterze produkcyjnym (gospodarczym),<br />

ochronnym (ekologicznym) i społecznym (publicznym), w tym bioklimat<br />

rekreacyjny ekosystemów leśnych. Obecnie 470 tys. ha Lasów Państwowych<br />

jest uszkodzonych, z różnym nasileniem przez przemysłowe zanieczyszczenia<br />

powietrza, głównie w województwach: śląskim, opolskim, dolnośląskim i łódz-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 15-17<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

15


16<br />

kim. Szkody górnicze występują na obszarze 36 tys. ha, powodując osiadanie<br />

terenu, zawodnienie lub osuszanie lasów. Ponad 60% takich zjawisk występuje<br />

w katowickiej dyrekcji LP, a 25% w łódzkiej dyrekcji LP (okolice Bełchatowa).<br />

W ostatnim 10 leciu zwalczano, głównie chemicznie, szkodliwe owady średnio<br />

na powierzchni 110 tys. ha (17 – 1184), chorobotwórcze grzyby na powierzchni<br />

52 tys. ha (25 – 93), zabezpieczano uprawy i młodniki od szkód powodowanych<br />

przez zwierzynę łowną na powierzchni 82 tys. ha (56 – 112). Zabiegi ochronne<br />

obejmowały tylko fragment obszarów występowania szkodników i chorób<br />

lasu. Dotkliwie niszczą lasy pożary, jest ich przeciętnie 10 tys. rocznie, co powoduje<br />

utratę 4770 ha drzewostanów, najczęściej w okresie wiosny (marzec<br />

– maj). Najczęstszą przyczyną pożarów jest podpalenie – 45 %, nieostrożność<br />

34 %, nieustalone przyczyny 15 %, a pozostałe 5 % powodują wyładowania<br />

atmosferyczne, wady i nieprawidłowości eksploatacji urządzeń technicznych<br />

i środków transportowych. Choroby infekcyjne, głównie powodowane przez<br />

grzyby, w stopniu groźnym występują na obszarze ponad 450 tys. ha Lasów<br />

Państwowych, czyli 6,5 % powierzchni drzewostanów. Jest to głównie huba korzeni,<br />

opieńkowa zgnilizna korzeni, choroby drewna kłód i strzał, osutki drzew<br />

iglastych i zamierania drzewostanów liściastych (dąb, buk, jesion, brzoza, olsza).<br />

Lokalnie, bardzo poważne uszkodzenia drzewostanów, mogą powodować<br />

i powodują ekstremalne czynniki meteorologiczne.<br />

Sumarycznie o stanie lasów całego kraju informuje nas monitoring, czyli<br />

system ciągłego zbierania informacji o stanie środowiska leśnego, stanie zdrowotnym<br />

drzewostanów. Funkcjonuje od 1984 r., opiera się na sieci stałych<br />

powierzchni obserwacyjnych (I i II rzędu), wyznaczonych w drzewostanach<br />

sosnowych, świerkowych, jodłowych oraz dębowych, bukowych, brzozowych,<br />

w 56 dzielnicach przyrodniczo-leśnych. Na drzewach próbnych obserwuje się:<br />

stanowisko biosocjalne drzew, defoliację i odbarwienie, dokonuje pomiaru<br />

pierśnic, ocienienia i widoczność korony, typ przerzedzenia koron, liczbę roczników<br />

igieł na pędzie oraz długość igieł lub wielkość liści, udział martwych<br />

gałęzi, pędy wtórne, urodzaj nasion, kwitnienie. Szczególne znaczenie mają<br />

szacunki defoliacji i odbarwienia aparatu asymilacyjnego, które określa się<br />

w 5 klasach, ponad to wyróżnia się klasy uszkodzeń drzewostanów. Na przykład<br />

w 2009 r. wykonano następujące czynności i obserwacje monitoringowe:<br />

uszkodzeń drzewostanów, symptomów i przyczyn uszkodzeń drzew, depozytu<br />

zanieczyszczeń i jakości powietrza atmosferycznego, opadów podokapowych<br />

i roztworów glebowych, parametrów meteorologicznych, składu chemicznego<br />

aparatu asymilacyjnego, miąższości i przyrostu miąższości drzewostanów.<br />

Ogółem bez uszkodzeń (klasa 0) było 24,2 % badanych drzew, w klasie ostrzegawczej<br />

(1) – 58,1 %, z lekkimi i średnimi uszkodzeniami (2) – 16,9 %, z dużymi<br />

uszkodzeniami (3) – 0,6 %, drzew martwych (4) było 0,2 %. W 2009 r. wynik<br />

monitoringu w klasach uszkodzeń (łącznie klasy 2 – 4) przedstawiał się następująco:<br />

sosna – 17,3 % liczby badanych drzew, świerk 28,8 %, jodła 15,5 %,


dąb 29,6 %, buk 9,2 %, brzoza 18,28 %. Badania monitoringowe wykonuje co<br />

roku Instytut Badawczy Leśnictwa w Sękocinie Starym k. Warszawy, wyniki<br />

są dokładnie analizowane co do ich geograficznego rozmieszczenia, tendencji<br />

zmian, przyczyn występowania uszkodzeń drzewostanów, są podstawą do<br />

podejmowania decyzji gospodarczych i zabiegów ochrony. W ostatnich latach<br />

obserwuje się pozytywne tendencje w tym względzie.<br />

Uszczerbek w zasobach leśnej przyrody powoduje szkodnictwo leśne czyli<br />

kradzieże drewna, kłusownictwo, bezprawne korzystanie z lasu, kradzieże<br />

i niszczenie mienia, zaśmiecanie lasów. Podczas masowych grzybobrań i zbiorów<br />

innych płodów runa leśnego także dochodzi do aktów niszczenia i wandalizmu,<br />

objawów niskiej kultury zachowania się w lesie.<br />

Niektóre obszary leśne objęte są stałym zakazem wstępu, nie pełnią funkcji<br />

turystycznych i wypoczynkowych, należą do nich: uprawy leśne do 4 m wysokości,<br />

powierzchnie doświadczalne i drzewostany nasienne, ostoje zwierząt,<br />

źródliska rzek i potoków, obszary zagrożone erozją. Niekiedy wprowadza się<br />

okresowy zakaz wstępu do lasu stanowiącego własność Skarbu Państwa: gdy<br />

wystąpiło zniszczenie lub znaczne uszkodzenie drzewostanów lub degradacja<br />

runa leśnego, występuje duże zagrożenie pożarowe, wykonywane są zabiegi<br />

gospodarcze związane z hodowlą, ochroną lasu lub pozyskaniem drewna.<br />

Szacuje się, że około 1,5 – 2,5 mln ha lasów stale lub okresowo jest niedostępna<br />

dla rekreacji lub funkcje te pełni w ograniczonym zakresie, między innymi<br />

z powodu chorób i szkodników. Oznacza to, że z teoretycznie 0,24 ha lasu<br />

przypadającego na 1 mieszkańca Polski, w rzeczywistości lasów dostępnych<br />

dla turystyki i rekreacji, pełniących funkcję zdrowotne, jest tylko 0,18 ha. Stan<br />

lasów i ich ogólna kondycja wpływa lokalnie i generalnie na ludzi i <strong>zdrowi</strong>e społeczeństwa.<br />

Działania z zakresu ochrony lasu, to nie tylko ochrona i kształtowanie<br />

ekosystemów leśnych i ich stanu zdrowotnego, to również dbałość o dobry<br />

bioklimat rekreacyjny, tak potrzebny społeczeństwu.<br />

Summary<br />

HEALTHY FORESTS – HEALTHY SOCIETY<br />

The paper presents a concept of recreational bioclimate and factors that<br />

positively influence the health of people resting in forests. Different features<br />

of forest ecosystems affect the filtration, detoxification, biotherapeutic,<br />

psychoregulatory and aesthetic characteristics of recreation sites.<br />

The focus was also on the biotic, abiotic and anthropogenic factors, reducing<br />

the healing abilities of forests. The results of the monitoring of the forest<br />

health condition across the country were discussed. The average area of forest<br />

per capita in Poland is 0.24 ha. However, after taking into account the forest<br />

area to which access is permanently prohibited, only 0.18 hectare of damaged<br />

and diseased forests per inhabitant serves the tourism, recreation and healthimproving<br />

functions.<br />

17


18<br />

MIKOTOKSYNY W ŻYWNOŚCI I PASZACH<br />

Halina Wiśniewska<br />

Instytut Genetyki Roślin, Polska Akademia Nauk, ul. Strzeszyńska 34,<br />

60-479 Poznań<br />

hwis@igr.poznan.pl<br />

Większość gatunków grzybów ma pozytywny wpływ na środowisko. Usuwają<br />

resztki organiczne tworząc humus. Stanowią składnik diety ludzkiej, wykorzystywane<br />

są w procesach biotechnologicznych, mają zastosowanie w przemyśle<br />

farmaceutycznym. Tylko około 8 tys. gatunków grzybów to patogeny porażające<br />

<strong>rośliny</strong> uprawne. Żywność może być skażona mikotoksynami (metabolitami<br />

wtórnymi), tworzonymi przez grzyby toksynotwórcze. Zawartość mikotoksyn<br />

jest ważnym wskaźnikiem jakości ziarna zbóż, produktów spożywczych i pasz.<br />

Mikotoksyny wykazują działanie toksyczne dla człowieka, zwierząt roślin i drobnoustrojów.<br />

Obecnie temat mikotoksyn, chodź jeszcze nie do końca poznany,<br />

jest bardzo ważnym zagadnieniem dotyczącym głównie bezpieczeństwa żywności.<br />

Poznano aktualnie 400 metabolitów grzybów toksycznych, jednak nie<br />

wszystkie występują w łańcuchu pokarmowym i na szczęście. Problem zanieczyszczenia<br />

mikotoksynami ziarna zbóż i produktów żywnościowych jest bardzo<br />

stary. Od wieków, bowiem obserwowano zatrucia wywołane przez spożycie<br />

zapleśniałej żywności lub pasz. W późnym średniowieczu wystąpiły epidemie<br />

po zjedzeniu chleba żytniego. Dziś wiemy, że alkaloid zawarty w sklerotach<br />

sporyszu jest bardzo toksyczny, powoduje niedokrwistość, bolesne obumieranie<br />

dystalnych części ciała. Dawniej objawy te nazywano „ogień św. Antoniego”.<br />

Wiek XIX- „choroba żółtego ryżu” (przyczyną toksyny Penicillium),<br />

„pokarmowa toksyczna aleukia” w Rosji - wywołana była trichotecenami tworzonymi<br />

przez grzyby z rodzaju Fusarium, „bałkańska endemiczna nefropatia”,<br />

wywołana ochratoksyną A. W 1960 roku w Anglii śmierć 100 000 indyków<br />

spowodowana była karmieniem paszą zanieczyszczoną aflatoksyną B 1 . Od epidemii<br />

w Anglii rozpoczęły się bardzo intensywne badania dotyczące toksyn<br />

tworzonych przez grzyby oraz ich wpływu na organizm człowieka i zwierząt.<br />

Każdy gatunek, a nawet szczep ma specyficzny profil metabolitów wtórnych<br />

a także związków toksycznych.. Zanieczyszczenie mikotoksynami dotyka corocznie<br />

25% światowych plonów w różnych regionach geograficznych. Grzy-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 18-22<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


y, bowiem są organizmami o dużych możliwościach adaptacyjnych i rozwoju<br />

w szerokim zakresie warunków środowiska.<br />

Z punktu widzenia praktyki rolniczej mikotoksyny możemy podzielić na<br />

grupę powstającą w wyniku chorób roślin podczas wegetacji i mikotoksyny<br />

tworzące się podczas niewłaściwego przechowywania zbóż, roślin oleistych<br />

w silosach. Tworzenie mikotoksyn uzależnione jest od wielu czynników. Do<br />

czynników biologicznych należy poziom zainfekowania grzybem, zakażenie<br />

kilkoma różnymi gatunkami grzybów, których wzajemne oddziaływanie może<br />

wpływać na produkcję mikotoksyn. Czynniki fizyczne to: czas, temperatura,<br />

wilgotność oraz stopień uszkodzenia ziarna. W skali europejskiej i świata najważniejsze<br />

pod względem ekonomicznym i toksykologicznym są: aflatoksyna<br />

B 1, ochratoksyna A, deoksyniwalenol, zearalenon i fumonizyna B 1 . O ile profil<br />

metabolitów wtórnych F. culmorum, F. graminearum i F. cerealis jest stosunkowo<br />

dobrze poznany, to o metabolitach F. avenaceum i F. poae porażających<br />

zboża wiadomo jeszcze niewiele. W zależności od organu, który uszkadzany<br />

jest przez mikotoksyny możemy je podzielić na: hepatoksyny ( aflatoksyna B 1<br />

i inne), nefrotoksyny (ochratoksyna A), kariotoksyny (moniliformina), dermatotoksyny<br />

(T-2 i inne), neurotoksyny (fumonizyna B 1 , alkaloidy sporyszu) oraz<br />

pulmotoksyny (powodują obrzęki płuc - fumonizyna B 1 ). Wydzielono również<br />

mikohormony (zearalenon i pochodne), immunotoksyny ( trichoteceny i inne)<br />

oraz związki rakotwórcze (aflatoksyny, ochratoksyna A, fumonizyny).<br />

Duża grupa grzybów toksynotwórczych to grzyby rozwijające się na roślinach<br />

podczas wegetacji. Wymienić należy toksynotwórcze grzyby z rodzaju<br />

Fusarium, a wytwarzane przez nie mikotoksyny są jednymi, które najczęściej<br />

występują w płodach rolnych. Grzyby z rodzaju Fusarium porażają kłosy<br />

zbóż drobnoziarnistych i kukurydzy oraz części innych roślin np. szparagi.<br />

Skutkiem porażenia zbóż gatunkami Fusarium jest kumulacja mikotoksyn<br />

w ziarnie jeszcze przed żniwami. W dużych ilościach mikotoksyny pojawiają<br />

się w latach, w których podczas kwitnienia i tworzenia ziarna jest wilgotno.<br />

Zanieczyszczenie ziarna mikotoksynami powodowane jest z jednej strony przez<br />

coraz szerzej stosowane uprawy zbóż w monokulturach, z pominięciem fitosanitarnego<br />

płodozmianu, oraz oszczędnościowe systemy uprawy. Powodują one<br />

znaczący wzrost inokulum patogenów Fusarium w środowisku uprawnym.<br />

Zidentyfikowano około 400 metabolitów wtórnych tworzonych przez gatunki<br />

Fusarium, poznano ich budowę. Pierwsze dwie grupy to trichoteceny A i B.<br />

Negatywnie oddziaływują na skórę i błony śluzowe, hamują syntezę białka,<br />

osłabiają układ immunologiczny. Tworzone są na przykład przez F. culmorum,<br />

F. graminearum F. moniliforme, F. proliferatum, F. sporotrichioides, F. poae.<br />

Kolejne trichoteceny grupy C i D - są 10 razy bardziej toksyczne niż grupa<br />

A i B. Powodują podrażnienie skóry, ból gardła, zmęczenie, zapalenie ucha,<br />

kaszel, uszkadzają szpik i odgrywają rolę w śmiertelnym zapaleniu płuc. Tok-<br />

19


20<br />

syny o odmiennej budowie niż trichoteceny to zearalenon - powoduje zanik<br />

rui, ronienie zwierząt, i zaburzenie laktacji. Natomiast fumonizyna uszkadza<br />

płuca, wątrobę, trzustkę, powoduje choroby mózgu i jest najprawdopodobniej<br />

sprawcą raka krtani. Tworzone przez Fusarium verticilioides i F. proliferatum<br />

- patogeny porażające przede wszystkim kukurydzę. Kolejna mikotoksyna<br />

o budowie odmiennej od trichotecen to moniliformina. Pogarsza przyrost drobiu.,<br />

powoduje zaburzenia rytmu serca. Metabolitami najczęściej zanieczyszczającymi<br />

ziarno zbóż są metabolity z grupy trichotecenów: deoksynivalenol,<br />

niwalenol, tworzone są przez toksynotwórcze gatunki F. culmorum i F. graminearum.<br />

W ziarniakach kukurydzy najczęściej występują fumonizyny, zearalenon<br />

i deoksyniwalenol i pochodne.<br />

Drugą grupą grzybów tworzących mikotoksyny to grzyby przechowalnicze.<br />

Wymienić tu należy grzyby należące do dwóch rodzajów Penicyllium, Aspergillus.<br />

Duże ilości tych toksyn pojawiają się w płodach rolnych (ziarnie zbóż)<br />

i ogrodniczych (owoce i warzywa) przechowywanych w nieszczelnych silosach<br />

lub na strychu bez paraizolacji. Z najważniejszych toksyn tworzonych przez<br />

grzyby podczas złego przechowywania to aflatoksyny B1 i pochodne B 2 , G 1 , G 2 ,<br />

M 1 , M 2 - tworzone przez grzyby należące zasadniczo do dwóch gatunków Aspergillus<br />

flavus Link i A. parasiticus Speera. Obecność aflatoksyn (szczególnie B 1 )<br />

stwierdza się w orzeszkach ziemnych, migdałach, ziarnie zbóż, soi, kukurydzy,<br />

przyprawach, śrutach roślin oleistych, bawełny, kukurydzy i innych. Aflatoksyny<br />

mogą przechodzić do mleka. Są rakotwórcze, mutagenne, osłabiają układ<br />

odpornościowy a u drobiu są powodem chudnięcia, depresji i porażenia mięśni.<br />

Drugą toksyną mogącą powstać podczas niewłaściwego przechowywania ziarna<br />

to ochratoksyna A, wytwarzana przez Aspergillus ochraceus i Penicillium<br />

verrucosum. Może przedostawać się do krwi i tkanek (podroby, szynki, kiełbasy).<br />

Jest bardziej toksyczna niż aflatoksyna. Powoduje uszkodzenie nefronów<br />

i w rezultacie śmierć. Obniża masę ciała zwierząt, powoduje niedostatek wit.<br />

A,C,E, jest przyczyną obniżenia krzepliwości i odporności.<br />

Unia Europejska wprowadza rygorystyczne zalecenia, co do progów zawartości<br />

mikotoksyn. Mikotoksyny są bardzo trudne do wyeliminowania,<br />

ponieważ są odporne na wysoką temperaturę. Przemiał - nie usuwa toksyn<br />

fuzaryjnych, przechodzą do wszystkich produktów przemiału i przez produkty<br />

piekarnicze i zwierzęce mogą przenikać do organizmu stanowiąc zagrożenie<br />

dla ludzi i zwierząt.<br />

Summary<br />

MYCOTOXINS IN HUMAN FOOD AND ANIMAL FEEDS<br />

Most of fungal species have a positive influence on the environment, as<br />

decomposers and sources of food for people and animals. Moreover, fungi<br />

are used in biotechnological processes and in pharmaceutical industry. Only


about 8 000 species of fungi are pathogens infecting crop plants. Food may<br />

be contaminated with fungal toxins, i.e. mycotoxins (secondary metabolites),<br />

produced by toxin-producing fungi. Mycotoxin content is an important indicator<br />

of the quality of cereal grain, food products, and animal feeds. Mycotoxins<br />

are poisonous for people, animals, plants, and microorganisms, so they are of<br />

special importance for food safety. The problem of mycotoxin contamination of<br />

cereal grain and food products is very old. For many centuries, poisonings have<br />

been caused by consumption of mouldy food or animal feeds In the late Middle<br />

Ages, epidemics were caused by rye bread consumption, because the alkaloid<br />

contained in ergot sclerotia is very toxic. In the past, ergotism was known as “St.<br />

Anthony’s Fire”. In the 19 th century, yellow rice disease was caused by toxins<br />

of Penicillium, whereas alimentary toxic aleukia in Russia, by trichothecenes<br />

produced by Fusarium spp., and Balkan endemic nephropathy, by ochratoxin<br />

A. In 1960, in England, 100 000 turkeys died due to feed contaminated with<br />

aflatoxin B 1 . Since the epidemic in England, intensive research has been<br />

conducted to investigate mycotoxins and their influence on human and animal<br />

health. Mycotoxin synthesis depends on many factors. Biotic factors include<br />

the scope of infection by the pathogen and infection by several fungal species,<br />

whose interactions may affect mycotoxin production. Physical factors include<br />

time, temperature, moisture content, and grain damage level. On the European<br />

and global scale, the most important mycotoxins, in respect to economy and<br />

toxicology are: aflatoxin B1, ochratoxin A, deoxynivalenol, zearalenone, and<br />

fumonisin B 1 . Depending on the organ damaged by mycotoxins, they can be<br />

divided into: hepatotoxins (aflatoxin B 1 , etc.), nephrotoxins (ochratoxin A),<br />

cardiotoxins (moniliformin), dermatoxins (T-2, etc.), neurotoxins (fumonisin<br />

B 1 , ergot alkaloids), and pulmotoxins (fumonisin B 1 ). Additionally, some<br />

mycotoxins are classified as mycohormones (zearalenon and its derivatives),<br />

immunotoxins richothecenes, etc.), and carcinogens (aflatoxins, ochratoxin A,<br />

fumonisins). Contamination with these compounds affects annually 25% of<br />

crop yields in the world in various geographic regions. Fungi are able to adapt<br />

and grow in a wide range of environmental conditions. Considering farming<br />

practices, mycotoxins can be divided into: those produced as a result of plant<br />

diseases during the growing season; and those produced during inadequate<br />

storage of cereals and oil seeds.<br />

Many toxin-forming fungi develop on plants during the growing season.<br />

These include Fusarium and Claviceps species. Fusarium species infect heads<br />

of small-grain cereals and maize, as well as parts of other plants, e.g. asparagus<br />

shoots. Cereal infection results in mycotoxin accumulation in grain even before<br />

harvest. High concentrations of mycotoxins are recorded in the years when<br />

humidity is high at the time of flowering and grain formation. The observed<br />

increase in grain contamination with mycotoxins is caused by the more and<br />

21


22<br />

more common minimum tillage system as well as cereal monocultures, without<br />

the phytosanitary crop rotation. They cause a considerable increase in the<br />

inoculum of Fusarium pathogens in the agroecosystem.<br />

About 400 secondary metabolites produced by Fusarium species have been<br />

identified so far and their structure has been analysed. The first 2 groups are<br />

trichothecenes A and B. They negatively affect the skin and mucous membranes,<br />

inhibit protein synthesis, and impair the immune system. They are produced<br />

e.g. by F. culmorum, F. graminearum F. moniliforme, F. proliferatum, F.<br />

sporotrichioides, and F. poae. Another 2 groups - trichothecenes C and D -<br />

are 10-fold more toxic than groups A and B. They cause skin irritation,<br />

throat ache tiredness, ear inflammation, cough, bone marrow damage,<br />

and play a role in deadly pneumonia. Another kind of toxin is zearalenone<br />

- an oestrogenic toxin. It leads to anoestrus or abortion in animals, poor<br />

appetite, and disturbed lactation. Yet another group of toxins, fumonisins,<br />

cause damage to the liver, pancreas, lungs, causes brain tumours, and most<br />

probably also cancer of the larynx. It is produced by Fusarium verticilioides and<br />

F. proliferatum - pathogens infecting mostly maize. Moniliformin also differs in<br />

structure from trichothecenes. It reduces the growth rate of poultry and causes<br />

cardiac arrhythmia. The most frequent metabolites contaminating cereal grain<br />

are some trichothecenes: deoxynivalenol and nivalenol, both produced by F.<br />

culmorum and F. graminearum. In maize grain, most frequent are fumonisins,<br />

zearalenone, and deoxynivalenol and its derivatives.<br />

Another major group of fungi producing mycotoxins are storage fungi.<br />

These include Penicillium and Aspergillus species. Large amounts of the toxins<br />

appear in field crops (cereal grain) and garden crops (fruits and vegetables),<br />

stored in the attic without vapour barrier or in silos that are not air-tight.<br />

The most important toxins produced by fungi during inappropriate storage<br />

are aflatoxin B1, and its derivatives B 2 , G 1 , G 2 , M 1 , M 2 - mostly produced by<br />

Aspergillus flavus Link and A. parasiticus Speera. Aflatoxins (B 1 in particular)<br />

are found in peanuts, almonds, cereal grain, soybeans, maize, seasonings,<br />

ground oil seeds, cotton seeds etc. Aflatoxins can be found also in milk. They<br />

are carcinogenic, mutagenic, impair the immune system, while in poultry they<br />

lead to weight loss, depression, and muscle paralysis. Another toxin that can<br />

be produced during inadequate grain storage is ochratoxin A, synthetized by<br />

Aspergillus ochraceus and Penicillium verrucosum. It can be carried with blood<br />

to other tissues. It is more toxic than aflatoxin. It causes kidney damage and,<br />

consequently, death. It leads to animal weight loss, deficits of vitamins A, C,<br />

and E, reduced coagulation, and resistance to diseases.<br />

The European Union has introduced rigorous limits of mycotoxin content<br />

in food. Mycotoxins, however, are very difficult to eliminate, because they are<br />

resistant to high temperatures. Also grinding does not remove Fusarium toxins.


CZTERDZIEŚCI LAT POLSKIEGO TOWARZYSTWA<br />

FITOPATOLOGICZNEGO<br />

Małgorzata Mańka<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Wydział Leśny, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

mmanka@au.poznan.pl<br />

W 2011 roku upływa czterdzieści lat od założenia Polskiego Towarzystwa<br />

Fitopatologicznego.<br />

Zebranie trzydziestu jeden członków-założycieli Polskiego Towarzystwa<br />

Fitopatologicznego odbyło się w Poznaniu 11 listopada 1971 roku. Wybrano<br />

na nim Tymczasowy Zarząd Główny i przyjęto projekt statutu Towarzystwa.<br />

Wskutek dalszych starań Zarządu uzyskano decyzję Urzędu Spraw Wewnętrznych<br />

Prezydium Rady Narodowej m. Poznania o »wpisaniu do rejestru<br />

stowarzyszeń i związków tut. Urzędu w dniu 25 maja 1972 r. stowarzyszenia<br />

p.n. „Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne”, pod Nr 230«.<br />

Skład Tymczasowego Zarządu Głównego, podany w piśmie (L.dz. 13/72)<br />

skierowanym dnia 30.VIII.1972 r. do wymienionego Urzędu, był następujący:<br />

»przewodniczący – prof. Karol Mańka, sekretarz – dr habil. Maria Gierczak,<br />

członkowie: prof. dr Józef Kochman (Warszawa), prof. dr Wanda Truszkowska<br />

(Wrocław), prof. dr Władysław Błaszczak (Poznań), doc. dr habil. Antoni<br />

Golenia (Poznań) i doc. dr Tadeusz Glaser (Poznań), wszyscy bezpartyjni.<br />

Wiek i miejsce pracy wymienionych osób przedstawia się następująco:<br />

prof. dr Karol Mańka – 57 lat, WSR Poznań<br />

prof. dr Józef Kochman – 67 lat, SGGW Warszawa<br />

prof. dr Wanda Truszkowska – 53 lata, WSR Wrocław<br />

prof. dr Władysław Błaszczak – 55 lat, WSR Poznań<br />

dr habil. Maria Gierczak – 39 lat, WSR Poznań<br />

doc. dr habil. Antoni Golenia – 50 lat, Instytut Ochrony Roślin w Poznaniu<br />

doc. dr Tadeusz Glaser – 50 lat, WSR w Poznaniu«.<br />

W tym czasie 169 osób zdeklarowało chęć zostania członkami Polskiego Towarzystwa<br />

Fitopatologicznego. Oficjalne ich przyjęcie nastąpiło podczas Walnego<br />

Zgromadzenia w Poznaniu 28 listopada 1972 roku.<br />

Pierwszym powołanym do życia oddziałem Towarzystwa był Oddział we<br />

Wrocławiu, utworzony 19 lipca 1972 roku (20 członków). Następnie powsta-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 23-31<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

23


24<br />

ły oddziały w Poznaniu (55 członków), Warszawie (58 członków) i Krakowie<br />

(36 członków). Po powołaniu do życia Oddziałów w Olsztynie (1977), Lublinie<br />

(1978), Bydgoszczy (1978) oraz Szczecinie (1983) Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne<br />

ma obecnie osiem oddziałów. Liczba członków Towarzystwa, wynosząca<br />

początkowo 169, po różnorodnych fluktuacjach wynosi obecnie około<br />

300 osób.<br />

Pierwsze Walne Zgromadzenie Członków Towarzystwa odbyło się, jak<br />

wspomniano, w Poznaniu 28 listopada 1972 roku. Pierwsze Nadzwyczajne<br />

Walne Zgromadzenie Członków Towarzystwa wraz z ogólnopolskim sympozjum<br />

naukowym „Zagadnienie odporności roślin na choroby” odbyło się w Krakowie<br />

5-7 września 1974 roku. Potem kolejno nastąpiły:<br />

II Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Zwalczanie chorób roślin<br />

a środowisko” – Poznań, 22-24. 09. 1975,<br />

III Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Chemiczne metody<br />

ochrony roślin przed chorobami” – Skierniewice, 12-14. 09. 1978,<br />

IV Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Nowe kierunki w fitopatologii”<br />

– Lublin, 8-10. 09. 1981,<br />

V Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Systemy ochrony roślin<br />

przed chorobami” – Wrocław, 5-7. 09. 1984,<br />

VI Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum naukowe – Bydgoszcz,<br />

16-18. 09. 1987,<br />

VII Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Niepatogeniczna mikoflora<br />

w patologii roślin” – Szczecin, 12-14. 09. 1990,<br />

VIII Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Biotyczne środowisko<br />

uprawne a zagrożenie chorobowe roślin” – Olsztyn, 7-9. 09. 1993,<br />

IX Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Nowe kierunki w fitopatologii”<br />

– Kraków, 11-13. 09. 1996,<br />

X Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Bioróżnorodność w fitopatologii<br />

europejskiej na przełomie wieków” – Poznań, 7-9. 09 .1999,<br />

XI Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „<strong>Fitopatologia</strong> polska<br />

w Europie” – Warszawa, 17-19. 09. 2002,<br />

XII Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Aktualne problemy<br />

w fitopatologii” – Lublin, 20-22. 09. 2005,<br />

XIII Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „Choroby roślin na tle<br />

zmian klimatycznych” – Wrocław, 17-19. 09. 2008,<br />

XIV Zwyczajne Walne Zgromadzenie i sympozjum „<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong><br />

<strong>rośliny</strong> – <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>” – Bydgoszcz, 20-22. 09. 2011.<br />

Z okazji 15-lecia istnienia Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego miało<br />

też miejsce Nadzwyczajne Walne Zgromadzenie, które odbyło się w Zielonce<br />

koło Poznania (18-19. 09. 1986).<br />

Od początku swego istnienia Towarzystwo zabiegało o posiadanie własnego<br />

czasopisma naukowego. Obiektywne trudności sprawiły, że początkowo trze-


a było publikować prace z sympozjów w Zeszytach Problemowych Postępów<br />

Nauk Rolniczych z podtytułem Phytopathologia Polonica i kolejnym rzymskim<br />

numerem. W ten sposób wydano 10 tomów noszących numery Zeszytów 160,<br />

198, 213, 230, 250, 275, 289, 301, 307, 374 (odpowiednio Phytopathologia Polonica<br />

I - X), po czym ukazały się dwa kolejne tomy Phytopathologia Polonica (XI<br />

i XII), wydane już przez Towarzystwo niezależnie. W 1991 roku Towarzystwo<br />

zaczęło wydawać w języku angielskim nowy półrocznik naukowy, stanowiący<br />

kontynuację tej samej inicjatywy wydawniczej pod tytułem Phytopathologia<br />

Polonica, a którego numeracja (arabskimi i rzymskimi liczbami) nawiązywała<br />

w latach 1991-1995 do wspomnianych wyżej Zeszytów Problemowych PNR.<br />

Od 1996 roku Phytopathologia Polonica miała pojedynczą numerację (tom 11<br />

i dalsze), a od 2002 roku stała się kwartalnikiem. Od 2009 roku czasopismo<br />

nosi tytuł Phytopathologia – zgodnie z decyzją Zarządu Głównego Polskiego<br />

Towarzystwa Fitopatologicznego podjętą w dniu 16 września 2008 roku.<br />

Czasopismo jest dostępne w wersji elektronicznej na stronie WWW Polskiego<br />

Towarzystwa Fitopatologicznego http://www.up.poznan.pl/ptfit/phytopathologia_pl.html<br />

Czasopismo jest indeksowane w bazach danych: CAB ABSTRACTS i AGRO<br />

LIBREX.<br />

Życie Towarzystwa toczyło się od początku także w sekcjach, które powoływano<br />

zależnie od potrzeb i inicjatywy Członków. Były to, razem z później<br />

powstałymi: Sekcja Historii Fitopatologii w Polsce, Sekcja Metodyczna, Sekcja<br />

Popularyzacji Fitopatologii, Sekcja Nazewnictwa Fitopatologicznego nazwana<br />

później Sekcją Nazewnictwa Chorób Roślin (i Dydaktyki), Sekcja Współpracy<br />

z Zagranicą, Sekcja Wirusologiczna, Sekcja Chorób Nasion, Sekcja Biologicznej<br />

Ochrony Roślin przed Chorobami, Sekcja Mikologii i Mikotoksyn, Sekcja<br />

Genetyki i Biochemii Patogenów Roślin, Sekcja Chorób Drzew Leśnych i Parkowych,<br />

Sekcja Nowych Patogenów i Chorób Roślin. Obecnie działa w Towarzystwie<br />

dziewięć sekcji (w układzie alfabetycznym):<br />

Sekcja Bakteryjnych Chorób Roślin (przewodniczący: prof. dr hab. Piotr Sobiczewski)<br />

Sekcja Biologicznej Ochrony Roślin przed Chorobami (przewodniczący: prof.<br />

dr hab. Leszek Orlikowski, obecnie prof. dr hab. Czesław Sadowski),<br />

Sekcja Chorób Roślin Drzewiastych (przewodniczący: prof. dr hab. Ryszard<br />

Siwecki, obecnie prof. dr hab. Zbigniew Sierota),<br />

Sekcja Dydaktyki i Nazewnictwa (przewodniczący: prof. dr Wanda Truszkowska,<br />

prof. dr hab. Zbigniew Borecki, prof. dr hab. Tomasz Majewski,<br />

obecnie dr hab. Małgorzata Schollenberger, prof. SGGW),<br />

Sekcja Genetyki i Biochemii Patogenów Roślin (przewodnicząca: prof. dr hab.<br />

Maria Rataj-Guranowska),<br />

Sekcja Mikologii i Mikotoksyn (przewodniczący: prof. dr hab. Jerzy Chełkowski),<br />

25


26<br />

Sekcja Nowych Patogenów i Chorób Roślin (przewodniczący: prof. dr hab. Leszek<br />

Orlikowski)<br />

Sekcja Patologii Nasion (przewodniczące: dr Krystyna Grzelak, dr Elżbieta<br />

Zakrzewska, obecnie prof. dr hab. Krystyna Tylkowska),<br />

Sekcja Wirusologiczna (przewodniczący: prof. dr hab. Selim Kryczyński,<br />

obecnie prof. dr hab. Marek Szyndel).<br />

Działające w ramach Towarzystwa Sekcje oraz niektóre Oddziały zaznaczyły<br />

również swą aktywność publikacjami materiałów z organizowanych<br />

przez siebie konferencji, sympozjów, itp. Spośród pierwszych wydawnictw należy<br />

tu wspomnieć o książce „Twórcy polskiej fitopatologii” (1978) opracowanej<br />

głównie staraniem Sekcji Historycznej, a wydanej z okazji III Zwyczajnego<br />

Walnego Zgromadzenia w Skierniewicach. Zawiera ona życiorysy „ojców fitopatologii<br />

polskiej” – Wincentego Siemaszki, Józefa Trzebińskiego, Ludwika<br />

Garbowskiego i Karola Zaleskiego. Warto też wymienić katalog bibliograficzny<br />

opracowany z inicjatywy prof. dr. hab. Józefa Gondka, a ujmujący publikacje<br />

fitopatologiczne zgromadzone na wystawie zorganizowanej w Bibliotece<br />

Głównej Akademii Rolniczej w Krakowie z okazji I Nadzwyczajnego Walnego<br />

Zgromadzenia Towarzystwa w 1974 roku. Do kolejnych dokonań publikacyjnych<br />

należy książka „Polskie nazwy chorób roślin uprawnych”, zawierająca na<br />

148 stronach ponad 1500 nazw chorób występujących na drzewach owocowych<br />

i roślinach jagodowych, roślinach warzywnych, ozdobnych, zbożach i trawach,<br />

trawach w uprawach trawnikowych, buraku i ziemniaku, roślinach przemysłowych<br />

oraz motylkowatych pastewnych. Jest to plon wieloletniej pracy Sekcji<br />

Nazewnictwa Chorób Roślin pod przewodnictwem najpierw prof. dr Wandy<br />

Truszkowskiej, a następnie prof. dr. hab. Zbigniewa Boreckiego. Wydanie to<br />

(1996) zawiera polskie nazwy infekcyjnych chorób roślin wraz z nazwami czynników<br />

sprawczych (grzybów, bakterii, wirusów, wiroidów oraz roślin kwiatowych),<br />

ułożone według grup roślin, a w ramach tych grup – według gatunków<br />

roślin. Kolejne wydania (w wersji elektronicznej) będą zawierały także polskie<br />

nazwy chorób drzew i krzewów leśnych oraz parkowych. Dzięki inicjatywie<br />

Zarządu Głównego PTFit różne ośrodki fitopatologiczne w kraju zaczęły opracowanie<br />

kolejnych pozycji z serii „Diagnostyka chorób roślin” (np. chorób roślin<br />

warzywnych oraz buraka i ziemniaka). Materiały wydawane jako pokłosie<br />

długich serii regularnie organizowanych konferencji (np. Sekcji Biologicznej<br />

Ochrony Roślin przed Chorobami) stanowią także swoiste serie wydawnicze.<br />

Wydawnictwa Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego wymienione są<br />

na stronie internetowej http://www.up.poznan.pl/ptfit/wydawn.html<br />

Najbardziej regularna praca Towarzystwa koncentruje się w Oddziałach,<br />

w ramach zebrań naukowych i fitopatologicznych spotkań terenowych. Podczas<br />

swego istnienia Towarzystwo zorganizowało ponad tysiąc takich zebrań.<br />

Niekiedy działalność ta przybierała szersze rozmiary, angażując zaintereso-


wanie ogólnokrajowe lub nawet międzynarodowe. Tak np. we wrześniu 1994<br />

roku Towarzystwo zorganizowało (z ramienia European Foundation for Plant<br />

Pathology) trzecią konferencję EFPP, która zgromadziła około 180 naukowców<br />

z Europy i spoza Europy, a jej pokłosie zostało wydane nakładem Towarzystwa<br />

jako książka pt. „Environmental Biotic Factors in Integrated Plant<br />

Disease Control, Proceedings of 3rd Conference of European Foundation for<br />

Plant Pathology, Poznań, Poland, September 5-9, 1994” (Poznań 1995, pod<br />

red. M. Mańki). Patronatem Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego objęta<br />

była też międzynarodowa konferencja naukowa na temat ospowatości śliwy<br />

European Meeting ‘04 on Plum Pox (Rogów, 1-4. 09. 2004), której pokłosie<br />

zawarte jest w Phytopathologia Polonica 36 (2005).<br />

Działalność sekcji PTFit przybiera również szerszy charakter, dzięki organizowaniu<br />

międzynarodowych spotkań naukowych i publikowaniu materiałów<br />

w języku angielskim.<br />

Sekcja Bakteryjnych Chorób Roślin była współorganizatorem krajowych<br />

oraz międzynarodowych spotkań naukowych, w tym międzynarodowych<br />

warsztatów naukowych Improvement and unification of plant disease diagnostics<br />

(30.08-01.09.2004), których pokłosie zawiera Phytopathologia Polonica<br />

35 (2005) oraz międzynarodowej konferencji Biological and pro-ecological<br />

methods for control of diseases in orchards and small fruit plantations (29-<br />

31.08.2005), których plon zawiera Phytopathologia Polonica 39 (2006). Konferencje<br />

te odbyły się w Instytucie Sadownictwa i Kwiaciarstwa w Skierniewicach.<br />

W 2010 roku Przewodniczący i członkowie Sekcji byli organizatorami<br />

12th Interantional Workshop on Fire Blight w Warszawie (16-20. 08. 2010,<br />

129 uczestników z 32 krajów).<br />

Sekcja Biologicznej Ochrony Roślin przed Chorobami zorganizowała czternaście<br />

konferencji (w tym dziewięć międzynarodowych), których materiały<br />

ukazują się w jednolitej szacie graficznej, z własnym logo. We współpracy z Instytutem<br />

Sadownictwa i Kwiaciarstwa zorganizowano w Skierniewicach:<br />

1991 – I Konferencja – Wykorzystanie metod biologicznych w ochronie roślin<br />

przed chorobami,<br />

1992 – II Konferencja – Zmianowanie a biologiczna ochrona roślin przed chorobami,<br />

1992 – III Konferencja – Mikoryza endotroficzna a biologiczna ochrona roślin<br />

przed chorobami,<br />

1993 – IV Konferencja – Grzyby ryzosferowe a zdrowotność roślin,<br />

1994 – V Konferencja – Rola mikroorganizmów i niektórych roślin w ochronie<br />

upraw przed grzybami chorobotwórczymi,<br />

1995 – VI Konferencja – Biological control of soil-borne and post-harvest<br />

pathogens,<br />

1996 – VII Konferencja – Effectiveness of some microorganisms and plant extracts<br />

in the control of plant diseases,<br />

27


28<br />

1997 – VIII Konferencja – Trichoderma spp., other macroorganisms and plant<br />

extracts in plant disease control,<br />

1998 – IX Konferencja – Biological agents and their effectiveness in the control<br />

of plant pathogens,<br />

1999 – X Konferencja – Methods of estimation of biological control agents in<br />

the protection of plants against soil-borne and leaf pathogens,<br />

2001 – XI Konferencja – Use of microorganisms and plant extracts in the control<br />

of plant diseases – results of the last 10-year-study,<br />

2003 – XII Konferencja – Chitosan and other compounds in the control of plant<br />

diseases.<br />

We współpracy z Akademią Rolniczą, potem Uniwersytetem Technologiczno-Przyrodniczym,<br />

w Bydgoszczy:<br />

2006 – XIII Konferencja (Bydgoszcz) – New Achivements in Biological Control<br />

of Plant Diseases,<br />

2009 – XIV Konferencja (Ciechocinek) – Nowe osiągnięcia w biologicznej ochronie<br />

roślin przed chorobami (New achievements in biological control of<br />

plant diseases).<br />

Sekcja Chorób Roślin Drzewiastych, oprócz serii krajowych konferencji,<br />

współorganizowała też w następujące międzynarodowe konferencje:<br />

2004 – Phythophthora spp. in nurseries and forest stands (Europejski Ośrodek<br />

Edukacji Ekologicznej w Jedlni k. Radomia),<br />

2004 – Root and Butt Rots of Forest Trees – jedenasta międzynarodowa konferencja<br />

grupy badawczej IUFRO Working Party 7.02.01 (materiały<br />

konferencji w postaci książki “Root and Butt Rots of Forest Trees.<br />

Proceedings of the 11 th International Conference on Root and Butt<br />

Rots, Poznań and Białowieża, Poland August 16-22, 2004” [red. M.<br />

Mańka i P. Łakomy] zostały wydane w 2005 roku i zawierają na 524<br />

stronach prace uczestników z 22 krajów na pięciu kontynentach),<br />

2005 – Possible limitation of dieback phenomena in broadleaved stands through<br />

silvicultural and protective measures (Puszczykowo k. Poznania) oraz<br />

2008 – międzynarodowa konferencja Rola i znaczenie ektomikoryzy dla optymalnego<br />

wzrostu i rozwoju drzew leśnych – 10 lat realizacji programu wdrożenia<br />

polskiej technologii mikoryzacji sadzonek drzew leśnych w Lasach<br />

Państwowych (Jaszowiec i Rudy Raciborskie).<br />

Sekcja Genetyki i Biochemii Patogenów Roślin zorganizowała, we współpracy<br />

z Instytutem Ochrony Roślin w Poznaniu konferencje poświęcone metodom<br />

przechowywania i konserwacji patogenów roślin oraz trzy cykle konferencji<br />

połączonych z warsztatami poświęconymi zagadnieniom zgodności<br />

wegetatywnej grzybów:<br />

1997 – I Konferencja: Metody różnicowania, identyfikacji i przechowywania<br />

patogenów roślin,


2000 – II Konferencja i warsztaty: Test zgodności wegetatywnej – technika i zastosowanie<br />

do różnicowania Fusarium oxysporum (4 dni w kwietniu i 3<br />

dni w październiku 2000),<br />

2001 – III Konferencja i warsztaty: Test zgodności wegetatywnej – technika<br />

i zastosowanie do różnicowania Fusarium oxysporum<br />

2008 – III Konferencja: Metody przechowywania i konserwacji patogenów roślin<br />

(podtemat: patogeniczność).<br />

Sekcja Mikologii i Mikotoksyn zorganizowała, głównie we współpracy z Instytutem<br />

Genetyki Roślin PAN w Poznaniu, piętnaście konferencji i spotkań<br />

(w tym dwa międzynarodowe):<br />

2001 – XI Konferencja – Grzyby mikroskopowe – badania genetyczne i molekularne<br />

nad patogenami roślin i ich metabolitami,<br />

2002 – VII European Seminar – Fusarium – Mycotoxins, Taxonomy and<br />

Pathogenicity,<br />

2002 – XII Conference – Workshop: Microscopic Fungi – Host Resistance<br />

Genes, Genetics and Molecular Research,<br />

2002 – IV Krajowa Konferencja – Rośliny zbożowe – genetyczne podstawy hodowli<br />

odpornościowej,<br />

2003 – V Krajowa Konferencja – Rośliny zbożowe – markery DNA dla roślin<br />

zbożowych i traw,<br />

2003 – VI Krajowa Konferencja – Rośliny zbożowe – markery molekularne dla<br />

odporności, jakości i identyfikacji,<br />

2004 – VII Krajowa Konferencja – Rośliny zbożowe – markery molekularne dla<br />

odporności, jakości i identyfikacji,<br />

2005 – VIII Krajowa Konferencja – Rośliny zbożowe – markery molekularne<br />

dla odporności, jakości i identyfikacji,<br />

2006 – IX Krajowa Konferencja Naukowa – Rośliny zbożowe – markery dla<br />

genów odporności,<br />

2007 – XIV Konferencja Krajowa – Grzyby mikroskopowe i ich metabolity,<br />

2008 – XV Krajowa Konferencja – Grzyby mikroskopowe i ich metabolity,<br />

2009 – XVI Krajowa Konferencja – Grzyby mikroskopowe i ich metabolity,<br />

2009 – Forum fuzariozy kłosów,<br />

2010 – XVII Krajowa Konferencja – Grzyby mikroskopowe i ich metabolity,<br />

2010 – Dyskusja panelowa – Wykorzystanie analiz DNA dla identyfikacji grzybów<br />

mikroskopowych.<br />

Sekcja Nowych Patogenów i Chorób Roślin zorganizowała dwie ogólnopolskie<br />

konferencje w Skierniewicach (2008 i 2010).<br />

Sekcja Patologii Nasion, po serii konferencji krajowych, również cyklicznie<br />

organizuje międzynarodowe konferencje:<br />

2000 – International Seed Health Conference: Seed health as quality criterion<br />

(wspólnie z IHAR Radzików),<br />

29


30<br />

2003 – 2nd International Seed Health Conference: Healthy seed for healthy<br />

crop (wspólnie z Akademią Rolniczą im. Augusta Cieszkowskiego w<br />

Poznaniu),<br />

2006 – 3rd International Seed Health Conference: Microorganisms on seeds<br />

– harmfulness and control (wspólnie z Akademią Rolniczą w Bydgoszczy)<br />

oraz<br />

2009 – 4th International Seed Health Conference: Seed – source of infection<br />

(wspólnie z Uniwersytetem Przyrodniczym we Wrocławiu).<br />

Sekcja Wirusologiczna organizuje co roku sympozja naukowe poświęcone<br />

wirusowym chorobom roślin. Sympozja, których do 2010 roku włącznie odbyło<br />

się piętnaście, organizowane są wspólnie z naukowymi konferencjami „Grupy<br />

Roboczej Wirusów Roślin” działającej przy Komitecie Ochrony Roślin Polskiej<br />

Akademii Nauk.<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne nadaje swym zasłużonym członkom<br />

godność Członka Honorowego, przyznawaną uchwałą Walnego Zgromadzenia<br />

Członków. Członkami honorowymi zostali:<br />

prof. zw. dr hab. Aniela Kozłowska – 5 września 1974 roku,<br />

prof. zw. dr. hab. Józef Kochman – 5 września 1974 roku,<br />

prof. zw. dr Wanda Truszkowska – 16 września 1987 roku,<br />

prof. dr Józef Gondek – 8 września 1981 roku,<br />

prof. zw. dr hab. Zbigniew Borecki – 12 września 1990 roku,<br />

prof. zw. dr Karol Henryk Mańka – 12 września 1991 roku,<br />

prof. zw. dr hab. Barbara Łacicowa – 11 września 1996 roku,<br />

prof. dr hab. Janina Mikołajska – 7 września1999 roku,<br />

prof. dr hab. Zofia Pokacka – 7 września1999 roku,<br />

prof. dr hab. Tadeusz Madej – 17 września 2002 roku,<br />

prof. dr hab. Stanisław Sadowski – 20 września 2005 roku,<br />

prof. dr hab. Hanna Zarzycka – 20 września 2005 roku,<br />

prof. dr hab. Zofia Fiedorow – 17 września 2008 roku.<br />

Zarząd Główny przedstawi XIV Zwyczajnemu Walnemu Zgromadzeniu<br />

w Bydgoszczy (20 września 2011 roku) wnioski o nadanie godności członka<br />

honorowego Panu prof. dr. hab. Selimowi Kryczyńskiemu i Panu prof. dr.<br />

hab. Janowi Kućmierzowi.<br />

Biogramy i listy publikacji członków honorowych są zamieszczane w dedykowanych<br />

im – z okazji jubileuszów pracy naukowej – tomach czasopisma<br />

Phytopathologia Polonica oraz Phytopathologia.<br />

Od 2008 roku Towarzystwo nadaje także odznaki honorowe. Według pierwszych<br />

słów Regulaminu: »”Odznaka Honorowa Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego”<br />

jest odznaką ustanowioną przez Zarząd Główny Polskiego Towarzystwa<br />

Fitopatologicznego 16 września 2008 roku, w celu wyróżnienia osób<br />

szczególnie zasłużonych dla rozwoju i upowszechniania nauki o chorobach roślin<br />

oraz dla działalności Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego«.


Od 1973 Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne jest członkiem International<br />

Society for Plant Pathology, a od 1990 roku – członkiem-założycielem European<br />

Foundation for Plant Pathology. Wspomniana wyżej trzecia konferencja<br />

EFPP we wrześniu 1994 roku w Poznaniu wiązała się z polską prezydencją<br />

European Foundation for Plant Pathology. Dwadzieścia lat po tej konferencji<br />

– w 2014 roku – nasze Towarzystwo będzie organizowało kolejną, jedenastą<br />

konferencję EFPP – tym razem w Krakowie. Konferencja ta, zwyczajem praktykowanym<br />

przez towarzystwa fitopatologiczne organizujące kolejne konferencje<br />

EFPP, będzie połączona z XV Zwyczajnym Walnym Zgromadzeniem<br />

Członków PTFit.<br />

Literatura<br />

Mańka K., Mańka M., 1996. 25-lecie Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego.<br />

W: Nowe kierunki w fitopatologii. Materiały z Sympozjum Kraków<br />

11-13 września 1996. Red. Kowalski S. i Kowalik M. Polskie Towarzystwo<br />

Fitopatologiczne oraz Katedra Ochrony Roślin i Katedra Fitopatologii Leśnej<br />

Akademii Rolniczej w Krakowie, Kraków, 13-20.<br />

31


32<br />

90 LAT FITOPATOLOGII W BYDGOSZCZY - WCZORAJ,<br />

DZIŚ, JUTRO<br />

Czesław Sadowski 1 , Teresa Pastuszewska 2 , Mirosław<br />

Nowakowski 2 , Aleksander Łukanowski 1 , Dariusz Pańka 1<br />

i Grzegorz Lemańczyk 1<br />

1 Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy im. J.J. Śniadeckich, Wydział<br />

Rolnictwa i Biotechnologii, Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

2 Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin PIB w Radzikowie, Oddział w Bydgoszczy,<br />

Al. Powstańców Wielkopolskich 10, 85-090 Bydgoszcz<br />

sadowski@utp.edu.pl<br />

„Żaden naród nie żyje dłużej<br />

niż jego dokumenty”<br />

Początek badań fitopatologicznych w ośrodku bydgoskim wiąże się z przejęciem<br />

22.I.1920 roku przez władze polskie od prof. dra Schandera – dyrektora<br />

naczelnego instytutu niemieckiego 22 obiektów przy Placu Weyssenhoffa 11,<br />

należących do „Kaiser Wilhelm Institut für Landwirtschaft” i uruchomieniem<br />

Państwowego Instytutu Rolniczego (PIR) z Działem Chorób Roślin. W dniu<br />

21.VI.1921 roku minister b. dzielnicy pruskiej podpisał rozporządzenie „Celem<br />

popierania rolnictwa w Rzeczypospolitej Polskiej, a w szczególności na<br />

ziemiach b. dzielnicy pruskiej, wznawia się działalność b. Instytutu Rolniczego<br />

imieniem cesarza Wilhelma w Bydgoszczy, pod nazwą Państwowy Instytut<br />

Naukowo-Rolniczy w Bydgoszczy” (PINR). Rozporządzenie to raczej zatwierdzało<br />

formalnie istniejący stan. Oficjalna nazwa to Państwowy Instytut Naukowo-Rolniczy<br />

(obowiązująca do lipca 1927). Często jednak używano innych<br />

nazw, nawet w dokumentach urzędowych i publikacjach: Państwowy Naukowy<br />

Instytut Rolniczy w Bydgoszczy, Państwowy Instytut Naukowy Gospodarstwa<br />

Wiejskiego w Bydgoszczy, Państwowy Instytut Naukowo-Badawczy<br />

w Bydgoszczy. Występowała także zmienność nazw powstających jednostek.<br />

Początkowo, na wzór niemiecki przyjmowano nazwę „Działy”, później „Wydziały”.<br />

Likwidacja Ministerstwa b. dzielnicy pruskiej (przełom 1921/22) spowodowała<br />

podporządkowanie Ministerstwu Rolnictwa i Dóbr Państwowych<br />

w Warszawie, któremu podlegał też PINGW w Puławach. Powstała koncepcja<br />

merytorycznej i organizacyjnej integracji obu Instytutów. Rozporządzeniem<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 32-47<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Prezydenta Rzeczpospolitej z 15.VII.1927 roku połączono Państwowy Instytut<br />

Naukowy Gospodarstwa Wiejskiego w Puławach, Państwowy Instytut Naukowo-Rolniczy<br />

w Bydgoszczy, Stację Botaniczno-Rolniczą we Lwowie, Krajowy<br />

Zakład Sadowniczy w Zaleszczykach, Morskie Laboratorium na Helu i powołano<br />

PAŃSTWOWY INSTYTUT GOSPODARSTWA WIEJSKIEGO z siedzibą w Puławach.<br />

Ważnym wydarzeniem dla PINR w Bydgoszczy był II Ogólnopolski Zjazd<br />

Naukowo-Rolniczy (6-8 lipca 1922). Jak podaje Z. Jaśkowski [2000] wybór<br />

Bydgoszczy na miejsce zjazdu wynikał z jego ówczesnej pozycji. Instytut zajmował<br />

zespół nowoczesnych gmachów i obiektów badawczych. Był to na owe<br />

czasy najnowocześniejszy, nie tylko w Polsce, ale także w tej części Europy<br />

ośrodek. Posiadał komplet sal wykładowych, auli, gabinetów konferencyjnych,<br />

idealnie nadających się na miejsca obrad plenarnych i kameralnych. Instytut<br />

w okresie międzywojennym był znany zarówno w kraju jak i za granicą, jako<br />

silny ośrodek naukowy, skupiający wybitnych specjalistów w dziedzinie nauk<br />

rolniczych i biologicznych. Wielu z nich studiowało w okresie zaborów na najlepszych<br />

ówczesnych uczelniach Rosji, Niemiec, Szwajcarii, Wielkiej Brytanii.<br />

Jeden z 3 referatów plenarnych wygłosił prof. Ludwik Garbowski. „Projekt założenia<br />

Związku Polskich Stacji Oceny Nasion”. Na Zjeździe powołano komisję<br />

do zorganizowania takiego Związku. We wnioskach Zjazdu postulowano m. in.<br />

konieczność podniesienia oświaty w zakresie zwalczania chorób i szkodników<br />

roślin (m. in. w szkołach powszechnych i na kursach dla dorosłych), wydania<br />

ustawy o ochronie prawnej roślin. Zjazd podjął również uchwały, jak się wydaje<br />

nieprzemijające, aktualne i dzisiaj w zakresie organizacji instytutów i badań<br />

rolniczych; m.in. wnioskował:<br />

„Instytuty naukowe, których ilość powinna być możliwie ograniczona (co<br />

najmniej 3), powinny mieścić się w głównych strefach klimatycznych, tak aby<br />

ich oddziaływanie było równomierne na cały kraj”. „Co do zasad organizacji<br />

wewnętrznej, instytuty naukowe powinny mieć autonomiczny charakter niezbędny<br />

do ich naukowej działalności”. „Co do źródeł finansowania, to fundusze<br />

publiczne (rządowe, samorządowe, Izb Rolniczych), stanowić powinny fundament<br />

materialny, istnienia, trwałości i działalności instytucji doświadczalnych”.<br />

„Fundusze na badania, jak i na inwestycje powinny być udzielane w tej<br />

wysokości, aby praca doświadczalna nie napotykała przeszkód materialnych<br />

ani aby ich braki nie zniechęcały moralnie personelu do wydajnej pracy. Uposażenia<br />

pracowników winny być obowiązkiem moralnym społeczeństwa, ustalane<br />

do cen zboża”.<br />

Dział/Wydział Chorób Roślin w Bydgoszczy dysponował zespołem kompletnych<br />

pomieszczeń badawczych. Kierownikiem od początku był sławny już<br />

w świecie botanik, mikolog, dr filozofii, prof. Ludwik Marcelian Garbowski,<br />

później Dyrektor Instytutu.<br />

Ludwik Garbowski (1872-1954), jak pisze prof. T. Majewski [1978] „zajmuje<br />

specjalne miejsce w gronie twórców polskiej fitopatologii. Przyrodnik<br />

33


34<br />

z zamiłowania, a zarazem humanista, gruntownie wykształcony w dziedzinie<br />

nauk ścisłych, chemii i bakteriologii, miłośnik kultur starożytnych, biegle<br />

władający łaciną i językiem starożytnej Grecji, poświęcił większą część życia<br />

nauce o chorobach roślin. Prace Jego Zespołu miały zasadnicze znaczenie dla<br />

rozwoju fitopatologicznych badań bydgoskiego ośrodka naukowego w odrodzonym<br />

kraju. Należy podkreślić, że zawsze wiązały się z bieżącymi potrzebami<br />

polskiego rolnictwa, co pozostawiło niezatarty ślad do dzisiaj”.<br />

Jednym z ważniejszych osiągnięć Wydziału było podjęcie po raz pierwszy<br />

w Polsce i rozwinięcie badań nad rakiem ziemniaka (Synchytrium endobioticum),<br />

groźną wówczas chorobą w Europie. Prace nad zlokalizowaniem ognisk<br />

choroby prowadzono początkowo na terenie zachodnich województw kraju<br />

(wówczas rejony zachodnie Polski stanowiły wschodnią granicę zasięgu występowania<br />

raka w Europie). Później, w miarę rozprzestrzeniania się choroby,<br />

również na terenie innych województw. Pozwoliły one na określenie stopnia zagrożenia,<br />

które zresztą w tym czasie nie było duże. Opracowano metodykę oceny<br />

odporności ziemniaka na porażenie przez S. endobioticum. Oceniono odporność<br />

uprawianych wówczas w Polsce odmian. Nawiązanie współpracy z placówkami<br />

hodującymi nowe odmiany w kraju, polegającej na wykonywaniu oceny rakoodporności<br />

materiałów hodowlanych, przyczyniło się do wyhodowania przez te<br />

placówki już w okresie międzywojennym kilku wartościowych, rakoodpornych<br />

odmian, które, wraz z będącymi już w uprawie rakoodpornymi odmianami,<br />

mogły być użyte jako sposób zwalczania raka i ograniczenia rozprzestrzeniania.<br />

Prace tej jedynej w Polsce placówki nad S. endobioticum zwróciły uwagę<br />

na konieczność zwalczania tego patogena i równocześnie dały metodyczne podstawy<br />

zwalczania. Opanowanie w Polsce tej groźnej choroby jest w dużej mierze<br />

zasługą prof. L. Garbowskiego. Organizował kursy dla lustratorów, celem<br />

wykrycia jak największej liczby występujących ognisk, brał udział w licznych<br />

konferencjach. W 1927 delegowany do Holandii, Anglii, Szkocji, Irlandii dla<br />

szczegółowego zaznajomienia się z metodyką badania odporności i walki z patogenem.<br />

Podkreślić należy jego bezkompromisowość w tej działalności pomimo<br />

licznych głosów, nawołujących do zaprzestania wykrywania i publikowania<br />

informacji o występowaniu patogena. Stawiano za wzór Niemców, którzy<br />

wysoką opinię swoich placówek zawdzięczali w dużej mierze nie ujawnianiu<br />

prawdziwego stanu, a faktycznie byli rozsadnikami raka na całą Europę. Garbowski<br />

w ostry sposób polemizował z tym stanowiskiem.<br />

Drugim ważnym zagadnieniem były wirusy ziemniaka. Były to pierwsze<br />

prace w Polsce. Pozwoliły zainteresowanym tym zagadnieniem poznać poglądy<br />

dotyczące istoty wirusów i metod ich zwalczania. Należy wymienić podręcznik<br />

prof. Garbowskiego „Choroby wirusowe ziemniaków”, w którym omówiono<br />

poszczególne wirusy ziemniaka i metody ich zwalczania. Zwrócono także po<br />

raz pierwszy w Polskiej literaturze na zagadnienie chorób wirusowych innych


oślin (pomidora, tytoniu, ogórka, fasoli, cebuli, drzew owocowych). Ocena zdrowotności<br />

sadzeniaków za pomocą metody „wstępnej oceny kiełków”, nazwanej<br />

później „próbą oczkową”, była po raz pierwszy w Polsce sprawdzona w doświadczeniach<br />

w Bydgoszczy. Kierując się potrzebami gospodarczymi zainicjowano<br />

badania nad biologią grzybów powodujących rdze na zbożach i fizjologiczną<br />

specjalizację ich ras. Wystąpienie rdzy źdźbłowej na pszenicy w 1932, w klęskowym<br />

nasileniu na terenie kraju, wywołało szczególne zainteresowane. Posługując<br />

się testowymi odmianami ze Stanów Zjednoczonych, stwierdzono, że<br />

najpospoliciej w południowej i środkowej Polski części występowała rasa nr 40,<br />

na północy rasa nr 21. Przeprowadzono również badania nad podatnością na<br />

porażenie kilkudziesięciu odmian pszenicy.<br />

W celu udokumentowania nasilenia i terytorialnego występowania chorób<br />

i szkodników roślin na terenie Polski, zainicjowana została przez bydgoską<br />

placówkę ich rejestracja. Jakkolwiek przed I wojną były próby prowadzenia rejestracji<br />

chorób i szkodników roślin na terenie zaborów, to nie było planowego<br />

ich rejestrowania na całym obszarze Polski. W Bydgoszczy, w Kaiser Wilhelm<br />

Institut fur Landwirtschaft, R. Schandner opublikował 2 roczne sprawozdania<br />

dot. występowania chorób i szkodników roślin w 1907 i 1908, obejmujące<br />

Księstwo Poznańskie i Prusy Zachodnie. Opublikowane przez Garbowskiego<br />

wyniki z lat 1921-25 obejmowały zachodnią i północną część kraju, Wielkopolskę,<br />

Pomorze i częściowo Śląsk. Wykryto wiele bardzo ważnych pod względem<br />

gospodarczym chorób grzybowych, bakteryjnych i wirusowych. Garbowski<br />

czynił starania, aby działalność rejestracyjną poszerzyć na cały kraj. Dopiero<br />

jednak na wniosek Wydziału Chorób Roślin w Bydgoszczy, Ministerstwo Rolnictwa<br />

powierzyło w 1930 roku prowadzenie rejestracji na terenie całego kraju<br />

temuż Wydziałowi. Do publikacji tych materiałów przeznaczono nowe czasopismo<br />

„Rocznik Ochrony Roślin”. Część A wydawnictwa obejmowała choroby<br />

roślin, część B szkodniki. Ukazały się 3 obszerne publikacje; za lata 1926-30<br />

(Garbowski, Juraszkówna), 1931-33 (Garbowski), 1934 (Leszczenko). Wydział<br />

Chorób Roślin w Bydgoszczy był pierwszą placówką PINGW, która (jeszcze<br />

jako PINR) zaczęła wydawać własne systematyczne publikacje (pod redakcją<br />

L. Garbowskiego). Od 1926 roku „Prace Wydziału Chorób Roślin w Bydgoszczy”<br />

(do 1937 roku ukazało się 16 zeszytów, w których opublikowano szereg<br />

wartościowych rozpraw naukowych).<br />

Po II wojnie (w 1951) Wydział wznowił swoją działalność, wcielono go do<br />

Instytutu Ochrony Roślin, a w 1960 roku bydgoski oddział zlikwidowano.<br />

W pierwszych latach po II wojnie w Wydziale Chorób Roślin PINGW, a później<br />

w Oddziale IOR, rozpoczęto badania nad podatnością odmian pszenicy<br />

w stadium kłosa na rdzę źdźbłową, rdzę brunatną pszenicy, mączniaka prawdziwego.<br />

W tym okresie opublikowano także kilka cennych prac dotyczących<br />

zgorzeli podstaw źdźbła. Prowadzono również badania nad zwalczaniem śnieci<br />

35


36<br />

cuchnącej pszenicy preparatami chemicznymi, badania nad występowaniem<br />

chorób fasoli, bakteriozy soi. Jednak prace po II wojnie nie miały już takiego<br />

rozmachu. Wpływ miały braki w wyposażeniu pracowni spowodowane przez<br />

zniszczenia wojenne, brak współczesnej literatury fitopatologicznej, brak pomocniczych<br />

pracowników naukowych.<br />

Główny animator prac naukowych, prof. L. Garbowski poświęcał czas<br />

przede wszystkim pisaniu swojego trzeciego podręcznika „Zarys fitopatologii<br />

ogólnej” (1964) Podręcznik ukazał się dopiero 10 lat po śmierci autora,<br />

przygotowany pod względem redakcyjnym przez prof. Z. Boreckiego. Jak<br />

napisał prof. Kochman w przedmowie do podręcznika, jest to „uwieńczeniem<br />

życiowej działalności uczonego i jednego z pionierów fitopatologii polskiej.<br />

Pan prof. T. Majewski (1978) w swoim opracowaniu „Twórcy polskiej Fitopatologii”<br />

pisze: „Profesor Ludwik Garbowski zachował się w pamięci ludzi<br />

znających go z codziennej pracy jako człowiek, który ponad wszystko cenił<br />

u ludzi wiedzę i wartości charakteru. Pracował po 12-14 godzin na dobę. Po<br />

wielogodzinnej pracy czytał dzieła Sofoklesa, Homera, Tacyta i innych klasyków.<br />

Konserwatysta w sposobie bycia, pełen życzliwości dla otaczających go<br />

ludzi, lecz wiele wymagający od siebie i innych, 45 lat swego długiego życia<br />

poświęcił fitopatologii”.<br />

Samodzielna Pracownia Badania Odporności na Choroby i Szkodniki<br />

Kwarantannowe Ziemniaka. Drugą placówką prowadzącą badania<br />

fitopatologiczne Bydgoszczy, która rozpoczęła swoją działalność zaraz po zakończeniu<br />

II wojny w 1945 roku był Dział Chorób i Szkodników Ziemniaka<br />

PINGW – Oddział w Bydgoszczy.<br />

1951 – Dział ten wszedł w skład IHAR, a w 1966 przejął go Instytut Ziemniaka<br />

w Boninie,<br />

1966 – Pracownia Badania Odporności na Raka Ziemniaczanego, Instytut<br />

Ziemniaka,<br />

1973 – Samodzielna Pracownia Badania Odporności na Choroby i Szkodniki<br />

Kwarantannowe, Instytut Ziemniaka,<br />

1990 – Samodzielna Pracownia Chorób i Szkodników Kwarantannowych,<br />

Instytut Ziemniaka<br />

1997 – Pracownia Chorób i Szkodników Kwarantannowych Ziemniaka,<br />

IHAR, Oddział w Bydgoszczy,<br />

2002 – Pracownia Chorób i Szkodników Kwarantannowych Ziemniaka Zakład<br />

Technologii Produkcji Roślin Okopowych IHAR, Oddział w Bydgoszczy<br />

Kierownicy Placówki: dr Piotr Leszczenko (1945-1959), prof. dr hab. Kazimierz<br />

Malec (1959-1986), dr Krystyna Stefan (1987-1999), dr inż. Elżbieta<br />

Malinowska (08.1999 - 2006), dr inż. Teresa Pastuszewska (od 2007).


W Dziale Chorób i Szkodników Ziemniaka kontynuowano badania nad<br />

rakiem ziemniaka, prowadzone do 1939 roku w Wydziale Chorób Roślin<br />

PINGW. Początkowo oceniano odporność na porażenie przez S. endobioticum<br />

odmian ziemniaka będących w uprawie i równocześnie nawiązano współpracę<br />

z placówkami hodującymi nowe odmiany ziemniaka, polegającą na ocenie<br />

rakoodporności materiałów hodowlanych uzyskiwanych przez te placówki.<br />

Rezultatem współpracy jest wyhodowanie w okresie powojennym ponad 240<br />

odmian ziemniaka, odpornych na raka. Wprowadzenie do powszechnej uprawy<br />

tych odmian, z równoczesnym wycofaniem z uprawy odmian podatnych<br />

na raka, przyczyniło się do prawie zupełnej likwidacji choroby w kraju. Rak<br />

ziemniaka przestał być problemem w uprawie ziemniaka i nie powoduje strat<br />

gospodarczych.<br />

W okresie międzywojennym dopiero zaczęto zwalczanie przez uprawę rakoodpornych<br />

odmian ziemniaka, w czasie II wojny oraz pierwszych dziesiątkach<br />

lat okresu powojennego choroba znacznie rozprzestrzeniła się na tereny<br />

przedtem od niej wolne. W 1956 roku na terenie kraju notowano więcej niż 64<br />

tysiące ognisk choroby. Ze względu na szeroko prowadzone prace hodowlane<br />

po II wojnie i spowodowany tym znaczny ilościowy wzrost materiałów hodowlanych<br />

ziemniaka poddawanych ocenie rakoodporności, w celu umożliwienia<br />

wykonania tej oceny przez jedną placówkę w kraju, zmodyfikowano i udoskonalono<br />

opracowaną w okresie międzywojennym metodykę oceny odporności<br />

ziemniaka na porażenie przez S. endobioticum.<br />

Podjęto także badania nad wirulencją grzyba, przeprowadzaną w próbach<br />

gleby pochodzących z ognisk występowania choroby. W latach sześćdziesiątych<br />

wykryto po raz pierwszy na terenie kraju kilkanaście ognisk dwóch nowych,<br />

bardziej wirulentnych patotypów, zdolnych do porażania odmian ziemniaka<br />

odpornych na porażenie przez jedyny dawniej znany i rozpowszechniony patotyp.<br />

Przy współpracy bydgoskiego ośrodka, hodowlane placówki w kraju wyhodowały<br />

dotychczas kilka odmian ziemniaka odpornych na porażenie przez<br />

te patotypy. Wprowadzenie ich do uprawy na terenach występowania bardziej<br />

wirulentnych patotypów grzyba przyczyniło się do zupełnej likwidacji ognisk<br />

choroby w jednym z rejonów jej występowania i do prawie zupełnej likwidacji<br />

w drugim. Badano stopień odporności rakoodpornych odmian ziemniaka światowego<br />

sortymentu na porażenie przez S. endobioticum. Prowadzono także badania<br />

nad odpornością odmian i rodów na porażenie przez Ervinia carotovora<br />

subsp. atroseptica i Rhizoctonia solani, wpływem zwalczania mszyc na ziemniaku<br />

za pomocą chemicznych środków systemicznych na porażenie sadzeniaków<br />

przez wirusy, wpływem ciężaru sadzeniaka i gęstości sadzenia na stopień<br />

porażenia roślin wybranych odmian ziemniaka przez wirusy, wpływem terminu<br />

sadzenia i wczesnego usuwania naci na występowanie chorób wirusowych.<br />

Wyniki wieloletnich polowych obserwacji nad porażeniem odmian i rodów<br />

37


38<br />

ziemniaka przez Streptomyces scabies, Rhizoctonia solani, Alternaria spp.,<br />

Phytophthora infestans i wirusy. stanowiły źródło informacji dla hodowców.<br />

Od 1966 roku Pracownia rozszerzyła swą tematykę badawczą o dziedzinę<br />

hodowli odmian ziemniaka odpornych na porażenie przez nicienia – mątwika<br />

ziemniaczanego (Globodera rostochiensis patotyp Ro1) oraz zbadanie składu<br />

patotypów populacji polskiej mątwika. Opracowano nową metodę oceny odporności<br />

lub podatności materiałów hodowlanych ziemniaka na porażenie mątwikiem<br />

patotyp R o 1 Wieloletnia działalność badawcza we współpracy z całą<br />

polską hodowlą ziemniaka przyniosła efekt w postaci wprowadzenia do powszechnej<br />

uprawy ponad 90% odmian jadalnych i 20% odmian skrobiowych<br />

ziemniaka, które są odporne na patotyp R o 1 oraz dwie odmiany (po 1 odmianie<br />

jadalnej i skrobiowej) odporne na mątwika agresywnego Globodera pallida.<br />

Poza płodozmianem, jedynie uprawa odmian odpornych ma obecnie decydujące<br />

znaczenie w zwalczaniu mątwika ziemniaczanego.<br />

Pracownia zajmowała się również badaniem nad innym nicieniem – niszczykiem<br />

ziemniaczkiem (Ditylenchus destructor), prowadząc prewencyjną<br />

kontrolę materiałów nasiennych i hodowlanych ziemniaka w celu wykrycia<br />

jego występowania oraz ocenę odporności rodów, odmian i różnych gatunków<br />

ziemniaka na porażenie. Nie znaleziono wśród ocenianych rodów i odmian całkowicie<br />

odpornych, natomiast wśród różnych gatunków ziemniaka znaleziono<br />

15 linii charakteryzujących się pewną odpornością na porażenie przez tego<br />

szkodnika.<br />

W połowie lat siedemdziesiątych XX wieku Pracownia rozpoczęła badania<br />

nad bakteriozą pierścieniową ziemniaka, chorobą wywoływaną przez gatunek<br />

bakterii Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms). Badania początkowo<br />

miały na celu ewentualne wykrycie źródeł choroby na terenie kraju,<br />

w materiałach hodowlanych i nasiennych ziemniaka. Opracowano metodykę<br />

badania podatności odmian ziemniaka na sztuczne zakażenie zawiesiną bakterii.<br />

Do wykrywania i identyfikacji Cms w roślinie ziemniaka zastosowano po<br />

raz pierwszy w Polsce serologiczną metodę immunofluorescencji pośredniej.<br />

Na zlecenie MRiGŻ Pracownia uczestniczyła w zorganizowaniu systemu badań<br />

bakteriozy pierścieniowej w laboratoriach służby ochrony roślin – przeszkolono<br />

pracowników, zakupiono odpowiedni sprzęt i odczynniki.<br />

W kolejnych latach tematykę badawczą rozszerzono o wybrane zagadnienia<br />

z biologii Cms oraz epidemiologii choroby, której patogen jest sprawcą –<br />

bakteriozy pierścieniowej. Do wykrywania i identyfikacji bakterii wprowadzono<br />

nowoczesne metody diagnostyczne jak metoda hybrydyzacyjna FISH oraz<br />

molekularna PCR z zastosowaniem specyficznych starterów. Podjęto badania<br />

dotyczące zdolności Cms do przetrwania i zachowania zdolności do zakażania<br />

na różnych powierzchniach oraz możliwości chemicznej inaktywacji Cms na<br />

badanych powierzchniach z zastosowaniem różnych dezynfektantów.


Organizatorem i wieloletnim kierownikiem tej placówki był prof. dr hab.<br />

Kazimierz Malec (1916-1994), którego, bez wątpienia, należy uznać za kontynuatora<br />

prac L. Garbowskiego nad S. endobioticum i innymi patogenami<br />

ziemniaka. Zajmował się uprawą i nasiennictwem ziemniaka oraz problemami<br />

odporności ziemniaka na choroby i szkodniki, przede wszystkim na raka<br />

ziemniaka i mątwika ziemniaczanego oraz metodami ich zwalczania. Zorganizował<br />

badania odporności ziemniaka na raka ziemniaka, opracował i modyfikował<br />

metodykę dotyczącą tego zagadnienia. Wyhodowane dzięki jego pracom<br />

odmiany ziemniaka odporne na raka zostały wprowadzone do powszechnej<br />

uprawy na terenie całego kraju, co przyczyniło się rozwiązania problemu raka<br />

w Polsce. Zainicjował hodowlę odpornościową na mątwika ziemniaczanego i ich<br />

uprawę na gruntach zasiedlonych przez tego nicienia, jako najskuteczniejszą<br />

metodę jego zwalczania. Profesor był członkiem prestiżowych organizacji naukowych,<br />

brał udział w komitetach redakcyjnych czasopism naukowych:<br />

§ członek Bydgoskiego Towarzystwa Naukowego (od 1965), w latach 1968-<br />

1974 sekretarz Komisji Nauk Rolniczych i Biologicznych,<br />

§ członek Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego (od 1978), współzałożyciel<br />

i z-ca Oddziału w Bydgoszczy,<br />

§ członek Grupy Roboczej Nematologii Komitetu Ochrony Roślin PAN (od<br />

1975),<br />

§ członek Grupy Roboczej Odporności Roślin na Choroby i Szkodniki Komitetu<br />

Ochrony Roślin PAN (od 1980),<br />

§ przewodniczący Komitetu Redakcyjnego Biuletynu Instytutu Ziemniaka<br />

(od 1969 r. do marca 1993),<br />

§ członek Rady Naukowej Instytutu Ziemniaka przez kilka kadencji.<br />

Opublikował 56 oryginalnych prac naukowych. Niektóre prace (m. in. „Biotypy<br />

grzyba Synchytrium endobioticum /Schilb./ Perc. Polsce”) nie zostały opublikowane<br />

na żądanie Ministerstwa Rolnictwa, ze względu na tajemnicę służbową.<br />

Przyczynił się do wyhodowania ponad 100 rakoodpornych i ponad 20<br />

mątwikoodpornych odmian ziemniaka. Pana profesora wspominamy nie tylko<br />

jako znakomitego naukowca, wybitnego specjalistę chorób ziemniaka, któremu<br />

poświecił całe swoje życie zawodowe, ale także jako człowieka szlachetnego,<br />

niezwykle skromnego, wiele wymagającego od siebie i pełnego życzliwości<br />

dla otaczających go ludzi. Szacunek budziły Jego zainteresowania i znajomość<br />

kultury antycznej. Marzeniem Profesora było znalezienie wolnego czasu aby<br />

móc czytać w oryginale dzieła starożytnych Greków i Rzymian.<br />

Aktualna tematyka badawcza Pracowni:<br />

§ wybrane zagadnienia z biologii Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus<br />

oraz epidemiologii bakteriozy pierścieniowej ziemniaka, określenie<br />

czasu przeżycia patogena w środowisku wodnym oraz glebowym,<br />

§ ocena odmian ziemniaka pod względem podatności na porażenie przez Clavibacter<br />

michiganensis subsp. sepedonicus,<br />

39


40<br />

§ analiza patogeniczności w populacji Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus,<br />

§ chemiczna inaktywacja Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus na<br />

różnych powierzchniach; badanie skuteczności działania wybranych dezynfektantów,<br />

§ badanie wpływu różnych roślin uprawnych na zmiany w populacji mątwika<br />

ziemniaczanego (Globodera rostochiensis) w glebie.<br />

Zakład Badań Chorób i Szkodników Roślin Korzeniowych IHAR -<br />

Oddział w Bydgoszczy. W 1951r, po likwidacji PINGW i utworzeniu w Bydgoszczy<br />

placówki IHAR – Zakładu Buraka i Innych Roślin Korzeniowych<br />

zorganizowano w jego ramach Pracownię Badań Chorób i Szkodników. Jej<br />

kierownikiem został prof. Edward Berbeć. W 1981 roku powstał Zakład Badań<br />

Chorób i Szkodników Roślin Korzeniowych z trzema pracowniami: Entomologii<br />

i Ochrony Roślin Korzeniowych, Fitopatologii (kierownik: doc. Barbara<br />

Osińska) oraz Immunologii (kierownik: mgr Krystyna Pawelska). W 1992<br />

roku nazwę Zakładu przemianowano na Zakład Chorób i Szkodników Roślin<br />

Korzeniowych z pracowniami – Hodowli Odpornościowej oraz Fitopatologii<br />

i Entomologii. Po włączeniu Instytutu Ziemniaka do IHAR, w skład Zakładu<br />

weszła także Pracownia Chorób i Szkodników Kwarantannowych Ziemniaka,<br />

a nazwę Zakładu zmieniono na Zakład Chorób i Szkodników. Od 2003 roku<br />

funkcjonuje on jako Pracownia Hodowli Odpornościoweji Technologii Produkcji<br />

Roślin Korzeniowych (kierownicy: dr Jadwiga Szymczak-Nowak, dr Paweł<br />

Skonieczek) w Zakładzie Technologii Produkcji Roślin Okopowych. Do wymienionego<br />

Zakładu włączono także Pracownię Chorób i Szkodników Kwarantannowych<br />

Ziemniaka (kierownicy: dr Elżbieta Malinowska, dr Teresa Pastuszewska).<br />

W początkowym okresie (1950-1960) działalności placówki prowadzono<br />

prace dotyczące występowania, zwalczania i wrażliwości odmian buraka na<br />

Cercospora beticola oraz nad rozprzestrzenianiem się i szkodliwością kędzierzawki<br />

wirusowej, a także zwalczaniem jej przenosiciela płaszczyńca burakowego.<br />

Pracownia Fitopatologii zajmowała się chorobami powodowanymi przez<br />

grzyby, a w szczególności sprawcami zgorzeli siewek buraka, ich patogenicznością<br />

i zwalczaniem metodą chemiczną. Badano też wpływ skracania rotacji na<br />

zdrowotność buraka (Aphanomyces cochlioides, Polymyxa betae – rizomania<br />

buraka). Pracownia Immunologii poszerzyła zakres badań nad wirusami i nad<br />

poszukiwaniem kryterium do selekcji odpornych form buraka na porażenie<br />

przez wirusy mozaiki i żółtaczki. Prowadzono także badania nad rozprzestrzenianiem,<br />

identyfikacją i znaczeniem gospodarczym chorób wirusowych brukwi<br />

i rzepy ścierniskowej oraz odpornością nowych rodów brukwi na wirusy.<br />

Od 1971 do 1980 roku prowadzono badania nad zdrowotnością elit i wysadków<br />

buraka, ze szczególnym uwzględnieniem występowania i rozprzestrzeniania<br />

się żółtaczki i mozaiki wirusowej oraz przyczyn zwiększającego się zagrożenia<br />

tymi chorobami.


Wyniki doświadczeń z zaprawami nasiennymi przeciwko zgorzeli siewek<br />

i drobnicy burakowej stanowiły podstawę dla aktualizacji i doboru środków<br />

oraz sposobu zaprawiania nasion buraka. W 1968 roku przyznana została<br />

przez Wojewódzką Radę Narodową w Bydgoszczy zespołowa nagroda naukowa<br />

I stopnia za prace nad płodozmianami przeciwmątwikowymi i zwalczaniem<br />

płaszczyńca burakowego, nosiciela kędzierzawki wirusowej.<br />

Następstwem prac nad skutecznością zapraw nasiennych było wprowadzenie<br />

do praktyki nasion zaprawianych Zaprawą Oxafun T (skuteczną przeciwko<br />

grzybowi Phoma betae przenoszącemu się z nasionami) i Tachigaren 70<br />

WP (skutecznym przeciwko zgorzeli siewek wywoływanej przez Aphanomyces<br />

cochlioides). Oprócz doświadczeń nad przydatnością środków ochrony roślin<br />

do zwalczania zgorzeli, prowadzono badania nad czynnikami odporności i wykorzystaniem<br />

metod hodowlanych dla ograniczenia szkodliwości tej choroby.<br />

Rozpoczęto badania nad rizomanią – wirozą buraka cukrowego i grzybem Polymyxa<br />

betae - wektorem wirusa powodującego rizomanię. Zorganizowano laboratorium<br />

do prowadzenia badań wirusologicznych metodą ELISA, co umożliwiło<br />

w 1987 roku wykrycie pierwszych ognisk choroby w naszym kraju.<br />

W Pracowni Immunologii zajmowano się testowaniem i selekcją linii buraka<br />

cukrowego tolerancyjnych na mątwika burakowego (Heterodera schachtii<br />

Schm.) oraz na żółtaczkę i mozaikę. Prowadzono również selekcję roślin krzyżowych<br />

w kierunku tolerancji na choroby wirusowe.<br />

Najważniejszymi osiągnięciami naukowymi Zakładu było:<br />

§ opracowanie zasad zmianowania i płodozmianów przeciwmątwikowych<br />

z uwzględnieniem warunków glebowych i agrotechnicznych,<br />

§ opracowanie zasad stosowania aficydów systemicznych do ochrony plantacji<br />

buraka przed żółtaczką,<br />

§ badanie odporności krajowych odmian buraka na porażenie przez mączniak<br />

rzekomy,<br />

§ badanie odporności dzikich gatunków Beta na porażenie przez chwościk<br />

oraz ujawnienie między innymi wpływu zawartości cukru w liściach i liczby<br />

szparek oddechowych na stopień odporności na tę chorobę,<br />

§ identyfikacja trzech wirusów oraz zebranie informacji o występowaniu<br />

i szkodliwości wywoływanych przez nie chorób brukwi,<br />

§ opracowanie występowania i szkodliwości mątwika korzeniowego (północnego)<br />

na marchwi oraz zebranie informacji o występowaniu innych szkodników<br />

i chorób tej <strong>rośliny</strong>,<br />

§ zastosowanie granulatów systemicznych w ochronie materiałów hodowlanych<br />

i nasiennych buraka cukrowego i pastewnego,<br />

§ unowocześnienie ochrony zasiewów punktowych buraka cukrowego przed<br />

szkodnikami przez zastosowanie insektycydów granulowanych i dodatkowe<br />

zaprawianie nasion insektycydami oraz stosowanie wieloskładnikowych<br />

zapraw nasiennych przeciwko patogenom zgorzeli siewek,<br />

41


42<br />

§ określenie występowania najważniejszych, w naszych warunkach agroekologicznych,<br />

patogenów zgorzeli siewek buraka,<br />

§ opracowanie roli i znaczenia Phoma betae w zgorzeli siewek buraka oraz<br />

czynników decydujących o porażeniu nasion tym grzybem,<br />

§ wprowadzenie do zaleceń IOR wyższych dawek zapraw tiuramowych i Tachigarenu<br />

70 WP przeciwko patogenom zgorzeli siewek,<br />

§ ustalenie przyczyny wzrostu szkodliwości Aphanomyces cochlioides na<br />

plantacjach buraka cukrowego.<br />

W latach 90-tych w Pracowni Hodowli Odpornościowej Zakładu Chorób<br />

i Szkodników Roślin Korzeniowych prowadzono badania nad zwiększeniem<br />

poziomu tolerancji i odporności form rodzicielskich i mieszańców buraka cukrowego<br />

na choroby powodowane przez wirusy i grzyby, a w Pracowni Fitopatologii<br />

i Entomologii tematyka badawcza obejmowała: określenie roli potencjału<br />

entomofagicznego obrzeży plantacji w kształtowaniu zagrożenia buraka<br />

cukrowego przez agrofagi oraz opracowanie optymalnych systemów ochrony<br />

elit i nasienników buraka przed chorobami i szkodnikami z zastosowaniem<br />

różnych pestycydów.<br />

W ostatnim dziesięcioleciu zajmowano się następującą tematyką badawczą:<br />

§ identyfikację źródeł odporności buraka cukrowego na ważniejsze patogeny<br />

grzybowe: Aphanomyces cochlioides, Polymyxa betae, Cercospora beticola,<br />

Rhizoctonia solani i Erysiphe betae,<br />

§ wytwarzanie materiałów wyjściowych buraka cukrowego do hodowli odmian<br />

tolerancyjnych na chwościk (Cercospora beticola),<br />

§ występowanie rizomanii buraka cukrowego, źródła odporności i opracowanie<br />

skutecznych metod selekcji,<br />

§ ocena antymątwikowego działania oraz wartości nawozowej nowych odmian<br />

gorczycy białej i rzodkwi oleistej,<br />

§ testowanie skuteczności środków ochrony roślin przeciwko chorobom buraka.<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej Uniwersytetu Technologiczno-Przyrodniczego<br />

jest czwartą placówką, która powstała w Bydgoszczy<br />

(1971). Twórcą, założycielem i organizatorem fitopatologii w ówczesnej<br />

Filii w Bydgoszczy Wyższej Szkoły Rolniczej w Poznaniu jest prof. dr hab. inż.<br />

Stanisław. Sadowski. Początkowo Zakładem Fitopatologii a następnie Katedrą<br />

Fitopatologii kierował do 1996 roku. W swojej pracy badawczej zajmował<br />

się głównie epidemiologią i zwalczaniem patogenów grzybowych występujących<br />

na korzeniach i częściach nadziemnych roślin motylkowych i lnu, oraz<br />

wpływem zabiegów agrotechnicznych na zdrowotność roślin. Z jego inicjatywy<br />

powstał w 1978 roku Oddział Polskiego Towarzystwa Fitopatologicznego, którego<br />

działalność integruje środowisko naukowców zajmujących się chorobami<br />

roślin z pracownikami innych instytucji związanych bezpośrednio z produkcją<br />

rolniczą i ochroną roślin uprawnych.


W Katedrze w minionym czterdziestoleciu pracowali również: prof. dr hab.<br />

Wojciech Piotrowski (1974-78) prowadził prace nad możliwością wykorzystania<br />

antybiotyków w ochronie roślin, prof. dr hab. Bronisława Sas-Piotrowska<br />

(1985-96) koncentrowała swoje zainteresowania badawcze nad problemem chorób<br />

ziemniaka rozwijających się podczas przechowywania zimowego. Dr Mariusz<br />

Piątek (1980-91) pracował nad fitosanitarnym wpływem różnych substancji<br />

organicznych wprowadzanych do gleby, jak obornik, gnojowica, osady<br />

ze ścieków miejskich. Dr Donald Zieliński (1990-97) prowadził badania nad<br />

epidemiologią Verticillium dahliae w uprawach rzepaku ozimego, jego występowaniem<br />

na plantacjach Wielkopolski, Pomorza i Kujaw, porażeniem odmian<br />

i rodów rzepaku oraz mgr R. Nyderek-Ziółkowska (1971-75) badała zdrowotność<br />

roślin motylkowatych<br />

Obecnie w Katedrze pracują: prof. dr hab. Czesław K. Sadowski (od 1996<br />

roku kierownik Katedry), adiunkci: dr inż. Anna Baturo-Cieśniewska, dr inż.<br />

Małgorzata Jeske, dr inż. Grzegorz Lemańczyk, dr inż. Leszek Lenc, dr inż.<br />

Aleksander Łukanowski, dr inż. Dariusz Pańka, oraz pracownicy techniczni<br />

Mirosława Michalska, Krystyna Michalik.<br />

Podstawowe kierunki badań Katedry:<br />

§ biologia i epidemiologia patogenów roślin (Puccinia asparagi, Peronospora<br />

parasitica, Verticillium dahliae, Colletotrichum gloeosporioides, Rhizoctonia<br />

cerealis),<br />

§ wpływ zabiegów agrotechnicznych na zdrowotność roślin, głównie rzepaku,<br />

pszenicy ozimej i jarej, żyta jarego, traw (wpływ sposobu siewu, terminu,<br />

rozstawy rzędów przedplonów, nawożenia mikro i makroelementami, podatność<br />

odmian, stosowania fungicydów),<br />

§ możliwości i skutki zaniechania chemicznych metod ochrony roślin i zastąpienia<br />

ich metodami agrotechnicznymi i biologicznymi. Szeroko zakrojone<br />

badania na polach doświadczalnych IUNG PIB Puławy, gospodarstwie<br />

ekologicznym w Kiełpinie k/Tucholi obejmują zdrowotność roślin oraz określenie<br />

ewentualnych zmian jakie zachodzą w zbiorowiskach grzybów zasiedlających<br />

<strong>rośliny</strong> uprawne i ich środowisko glebowe w wyniku stosowania<br />

różnych systemów uprawy (ekologiczny, integrowany, konwencjonalny oraz<br />

monokultura), porównanie zdrowotności odmian (pszenica ozima, jęczmień<br />

jary, ziemniak) uprawianych w systemie ekologicznym, w tym także „starych”<br />

odmian pszenicy i orkiszu,<br />

§ aspekt fitopatologiczny upraw nasiennych roślin warzywnych (kopru,<br />

marchwi, buraka ćwikłowego, pietruszki, cebuli) w warunkach gospodarstwa<br />

ekologicznego z wykorzystaniem biopreparatów w formie opryskiwań<br />

i do otoczkowania nasion (współpraca z Katedrą Maszyn Przemysłu<br />

Spożywczego Wydziału Technologii i Inżynierii Chemicznej UTP w ramach<br />

grantu celowego),<br />

43


44<br />

§ występowanie grzybów w surowcach pochodzenia roślinnego w trakcie przechowywania,<br />

przetwarzania i wytworzonych z ich udziałem produktach,<br />

§ wybrane zagadnienia z epidemiologia i biologii sprawców ostrej plamistości<br />

oczkowej. Zarówno w świecie jak i w Polsce następuje wzrost znaczenia<br />

ostrej plamistości oczkowej w zbożach ozimych powodowanej głównie przez<br />

Rhizoctonia cerealis. Określono występowanie choroby na pszenicy uprawianej<br />

w różnych systemach a także w monokulturze oraz kolejnych jej<br />

latach, porażenie różnych odmianach zbóż ozimych, wpływ zróżnicowanych<br />

zabiegów agrotechnicznych (przedplonu, zmianowania, gęstości siewu, poziomu<br />

nawożenia NPK), stosowania fungicydów i herbicydów. Badania<br />

polowe uzupełniono analizą mikologiczną podstawy źdźbła i korzeni. Tradycyjne<br />

metody identyfikacji tych patogenów uzupełniono techniką PCR<br />

(Polymerase Chain Reaction). Przy silnym porażeniu roślin straty w plonie<br />

mogą być znaczne a także może następować zmiana niektórych cech jakościowych<br />

ziarna (zawartości białka, glutenu, liczby opadania i wskaźnika<br />

sedymentacji). Zebrano kolekcję izolatów R. cerealis, R. solani oraz innych<br />

dwu- i wielojądrowych izolatów Rhizoctonia, określono ich cechy morfologiczne,<br />

wirulencję dla siewek ozimych gatunków zbóż. Podjęto próby określenia<br />

grup i podgrup anastomozowych dwu- i wielojądrowych izolatów<br />

Rhizoctonia oraz ich zróżnicowania genetycznego. Zbadano również zakres<br />

żywicieli dla R. cerealis i R. solani, zarówno wśród roślin uprawnych jak<br />

również chwastów. Z badanych chwastów największe znaczenie, jako żywiciel<br />

dla tych patogenów ma perz właściwy, natomiast miotła zbożowa okazała<br />

się rośliną stosunkowo mało wrażliwa na porażenie, zwłaszcza przez<br />

R. cerealis,<br />

§ badania nad grzybami endofitycznymi w trawach. Endofity mogą mieć pozytywny<br />

wpływ na roślinę, wyrażający się wyższą odpornością <strong>rośliny</strong> żywicielskiej<br />

na stres suszy oraz uszkodzenia wywoływane przez zwierzęta,<br />

liczne szkodniki i patogeny. Stanowią zatem cenny materiał, który można<br />

wykorzystać w biologicznej ochronie traw przed czynnikami stresowymi.<br />

Podjęte w 1999 roku badania zmierzają w kierunku wyselekcjonowania<br />

z naturalnego środowiska izolatów endofitów z rodzaju Neotyphodium<br />

w celu ich wykorzystania jako biologicznego czynnika ochrony traw i zbóż<br />

przed działaniem biotycznych i abiotycznych czynników stresowych oraz<br />

do poprawy wzrostu tych roślin. W wyniku przeprowadzonych dotychczas<br />

badań, otrzymano następujące rezultaty: (I) określono stopień zasiedlenia<br />

odmian uprawnych życicy trwałej, kostrzewy łąkowej, k. czerwonej i k. trzcinowej<br />

uprawianych w Polsce przez grzyby endofityczne kompleksu Neotyphodium/Epichloë,<br />

(II) określono zasiedlenie ekotypów tych gatunków<br />

traw w Polsce przez w/w grzyby, (III) zebrano kolekcję ekotypów traw zasiedlonych<br />

przez grzyby endofityczne, która stanowi podstawę do prowa-


dzonych aktualnie badań, (IV) określono wpływ obecności Neotyphodium<br />

spp. na porażenie roślin przez groźne patogeny, m.in. Fusarium spp., Gaeumannomyces<br />

graminis, Rhizoctonia spp., (V) wyselekcjonowano kilka izolatów<br />

o pozytywnym wpływie na roślinę i niskiej produkcji toksyn – lolitremu<br />

B i ergovaliny.<br />

Od roku 1998 poszerzano zakres badań o techniki molekularne oparte na<br />

PCR. W utworzonym laboratorium technik molekularnych stopniowo uzupełniano<br />

podstawową aparaturę (termocyklery PCR, wirówka z chłodzeniem,<br />

zestaw do elektroforezy, sprzęt do cyfrowej archiwizacji obrazów żeli agarozowych).<br />

Rozszerzany w miarę mozliwości zakres badań dotyczy:<br />

§ zmienności genetycznej grzybów metodą RAPD (Randomly Amplified Polymorphic<br />

DNA) – analizy wewnątrzpopulacyjnego zróżnicowania m.in.<br />

pategenów jęczmienia (Drechslera teres i Bipolaris sorokiniana) oraz ziemniaka<br />

(Fusarium sambucinum),<br />

§ potencjalnej mikotoksynotwórczości izolatów grzybów rodzaju Fusarium<br />

poprzez identyfikację genów (m.in. Tri5, Tri7, PKS4) odpowiedzialnych za<br />

tworzenie trichotecenów (NIV, DON i jego pochodne) i zearalenonu (ZEA),<br />

co pozwala na wstępne określenie zagrożenia skażenia mikotoksynami surowców<br />

uzyskanych w danym rejonie uprawy i sezonie wegetacyjnym,<br />

§ wpływu stosowanych chemicznych środków ochrony roślin, w tym ich<br />

zmniejszonych dawek, na tworzenie toksycznych metabolitów przez grzyby<br />

głównie rodzaju Fusarium, które powodując stres u grzybów, mogą indukować<br />

zwiększoną produkcję mikotoksyn w ziarnie zbóż,<br />

§ molekularnej diagnostyki sprawców chorób roślin powodowanych przez<br />

grzyby w fazie bezobjawowej, co pozwala na bardziej precyzyjne określenie<br />

terminu wykonania zabiegów ochronnych.<br />

Skupiono się na wysoce specyficznej detekcji sprawców chorób roślin z wykorzystaniem<br />

starterów typu SCAR (Sequence Characterized Amplified Region)<br />

warunkujących amplifikację specyficznych gatunkowo sekwencji genomu<br />

poszczególnych gatunków grzybów. W roku 2006 Katedra, jako pierwsza<br />

w Polsce stwierdziła występowanie na ziarnie zbóż w naszym kraju nowego<br />

gatunku - Fusarium langsethiae. Uzyskano specyficzny gatunkowo amplikon<br />

jako wynik reakcji PCR. Doniesienie na ten temat opublikowano w czasopiśmie<br />

Amerykańskiego Towarzystwa Fitopatologicznego - Plant Disease<br />

w roku 2008.<br />

Technika PCR wykorzystywana jest również do weryfikacji poprawności<br />

oznaczeń gatunków grzybów metodami standardowymi opartymi na cechach<br />

morfologicznych. Przykładem może być weryfikacja przynależności gatunkowej<br />

izolatów z kolekcji własnej Fusarium sambucinum, użytych następnie do<br />

badania ich zmienności genetycznej i potencjalnych zdolności mikotoksynotwórczych.<br />

Badania molekularne potwierdziły, że niektóre izolaty reprezentowały<br />

F. culmorum.<br />

45


46<br />

W roku 2010 w ramach Katedry powstało Laboratorium Biotechnologii<br />

Drobnoustrojów, a Katedra zmieniła nazwę na Katedra Fitopatologii i Mikologii<br />

Molekularnej. W maju 2011 zakupiono aparaturę Real-Time PCR, umożliwiającą<br />

ilościowe określanie patogenów w materiale roślinnym oraz ilości kopii<br />

genów kodujących mikotoksynotwórczość wybranych grzybów, co jest bezpośrednio<br />

związane z rzeczywistą ilością tworzonych metabolitów wtórnych.<br />

Pierwsze własne wyniki („Wykorzystanie Real Time PCR do analizy ziarna<br />

pszenicy ozimej pod kątem obecności Fusarium culmorum i genów warunkujących<br />

produkcję trichotecenów”) prezentowane są na tym Sympozjum. Technika<br />

Real-Time PCR posłuży także do analizy ekspresji genów klasteru Tri.<br />

Działalność dydaktyczna Katedry<br />

W ramach działalności dydaktycznej Wydziału Rolniczego UTP Katedra<br />

Fitopatologii i Mikologii Molekularnej prowadzi zajęcia ze studentami kierunku<br />

Rolnictwo i kierunku Biotechnologia. Studenci kierunku Rolnictwo<br />

zdobywają podstawowe umiejętności związane z diagnostyką patogenów roślin,<br />

a następnie wiedzę z możliwości ich zwalczania.<br />

Studenci kierunku Biotechnologia w ramach przedmiotów Mikrobiologia<br />

przemysłowa i Biotechnologia drobnoustrojów, zdobywają wiedzę i praktyczne<br />

umiejętności stosowania technik standardowych opartych na morfologii mikroorganizmów,<br />

a także powszechnie dziś stosowanych w nowoczesnej diagnostyce<br />

metod molekularnych (PCR) (m. in. w laboratoriach przemysłu spożywczego,<br />

stacjach sanitarno-epidemiologicznych) opartych na analizie materiału<br />

genetycznego mikroorganizmów. Mają możliwość samodzielnej pracy na nowoczesnej<br />

aparaturze używanej w tego typu badaniach. Poznają także potencjalne<br />

zagrożenia dla <strong>zdrowi</strong>a ludzi i zwierząt związane z ryzykiem skażenia<br />

żywności toksycznymi produktami metabolizmu grzybów (mikotoksynami).<br />

Zaznajamiają się również z możliwością wykrywania w genomie poszczególnych<br />

gatunków grzybów określonych genów odpowiedzialnym za zdolność<br />

tych mikroorganizmów do produkcji mikotoksyn.<br />

Od kilku lat istnieje także możliwość uczestnictwa studentów z zagranicy<br />

w prowadzonych w języku angielskim wykładach i ćwiczeniach w ramach<br />

międzynarodowej wymiany studentów „Erasmus”. Z tej formy skorzystało dotąd<br />

kilkudziesięciu studentów zagranicznych, głównie Turcji, Hiszpanii, Węgier.<br />

Dr D. Pańka w ramach tej współpracy prowadzi wykłady i ćwiczenia na<br />

Uniwersytecie w Salamance. Katedra była współorganizatorem międzynarodowych<br />

konferencji (XI Meeting Work Group „Integrated Control in Oilseed<br />

Crops”, „Microorganisms on Seeds – Harmfulness and Control”, w których<br />

brali udział naukowcy z większości krajów europejskich a także Kanady, Egiptu.<br />

W ramach Sekcji Biologicznej Ochrony Roślin współorganizowała konferencje<br />

„New Achievements in Biological Control of Plant Diseases i „Nowe<br />

osiągnięcia w biologicznej ochronie roślin przed chorobami”.


Katedra współpracowała/je z wieloma innymi ośrodkami naukowymi,<br />

UMCS w Lublinie, Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Uniwersytet Warmińsko-<br />

Mazurski w Olsztynie, Instytut Genetyki Roślin PAN w Poznaniu,<br />

IHAR Radzików, IUNG PIB w Puławach, Instytut Ogrodnictwa Skierniewicach.<br />

Umiejętność technik molekularnych i współpraca z Zakładem Fizyki<br />

Doświadczalnej macierzystego Uniwersytetu i Zakładem Mikrobiologii Przemysłowej<br />

UMCS w Lublinie zaowocowała cyklem wspólnych publikacji w znanych<br />

i wysoko indeksowanych czasopismach europejskich obejmujących spektrofotometryczne<br />

analizy wpływu porażenia kłosów pszenicy przez Fusarium<br />

culmorum na jakość ziarna. Współpraca z University of Arkansas, US zaowocowała<br />

półrocznym pobytem dr D. Pańki w renomowanym laboratorium prof.<br />

Charlesa P. Westa prowadzącym badania nad endofitami i ich praktycznym<br />

wykorzystaniem w rolnictwie. Pozwoliło to na dynamiczny rozwój badań w<br />

Katedrze nad tą interesującą grupą grzybów, wyrażający się znaczną liczbą<br />

opublikowanych prac z tego zakresu i złożonymi oraz otrzymanymi wnioskami<br />

o granty badawcze, także międzynarodowe. Pracownicy Katedry biorą aktywny<br />

udział w licznych konferencjach krajowych jak i zagranicznych związanych<br />

zarówno z chorobami roślin jak i szeroko pojętą rolą grzybów w środowisku,<br />

szczególnie Fusarium spp. (Włochy, Niemcy, Francja, Anglia, Holandia, Grecja,<br />

Izrael, Indie, Stany Zjednoczone, Portugalia, Hiszpania, Dania, Szwajcaria).<br />

Oprócz działalności dydaktycznej i naukowej, Katedra wykonuje badania<br />

rejestracyjne środków ochrony roślin. Posiadamy uprawnienia do tego typu<br />

badań zgodnie z zezwoleniem Ministerstwa Rolnictwa.<br />

Źródła<br />

Garbowski K.L., 1964: Zarys Fitopatologii Ogólnej, PWRiL Warszawa: 1-799.<br />

Jaśkowski Z., 2000: Bydgoski Instytut Rolniczy w Niepodległej Polsce 1920–<br />

1939. Wyd. Z. Jaśkowski, ISBN 83-914457-0-4. 1-161.<br />

Majewski T., 1978: Ludwik Garbowski. W:„Twórcy Polskiej Fitopatologii”,<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Poznań, 1-68.<br />

Malec K.: Bydgoszcz jako ośrodek badań fitopatologicznych (maszynopis 1-15).<br />

47


WYSTĄPIENIA


PENICILLIUM ADAMETZII I JEGO MOŻLIWOŚCI<br />

W BIOLOGICZNEJ OCHRONIE ROŚLIN<br />

Hanna Kwaśna, 1 Lidia Szwajkowska-Michałek, 2 Piotr Łakomy 1<br />

i Juliusz Perkowski 2<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

2 Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Chemii,<br />

ul. Wojska Polskiego 75, 60–637 Poznań,<br />

kwasna@up.poznan.pl<br />

Armillaria, Heterobasidion oraz grzyby zgorzelowe (Cylindrocarpon destructans,<br />

Fusarium oxysporum, F. sambucinum, F. solani i Rhizoctonia solani)<br />

są groźnymi patogenami lasu. Armillaria powoduje opieńkową zgniliznę<br />

korzeni, Heterobasidion hubę korzeni, pozostałe grzyby pasożytniczą zgorzel<br />

siewek. Zgnilizna tkanek korzeni i odziomkowej części pnia prowadzi do zakłóceń<br />

w procesie pobierania i przewodzenia wody i zamierania roślin. W Polsce,<br />

powierzchnia występowania wspomnianych chorób utrzymuje się od szeregu<br />

lat na wysokim poziomie (262 297 ha w 2010). Opieńkowa zgnilizna korzeni<br />

(107 100 ha w 2010) występuje w drzewostanach iglastych i liściastych<br />

wszystkich klas wieku, głównie w Polsce południowej, północno-wschodniej<br />

oraz centralnej. Huba korzeni (155 005 ha w 2010) jest najgroźniejszą gospodarczo<br />

chorobą drzew leśnych (gatunków iglastych, brzozy), zwłaszcza na<br />

gruntach porolnych, głównie w Polsce centralnej i północnej, lokalnie w południowej<br />

i wschodniej. Pasożytnicza zgorzel siewek w 2010 roku wystąpiła na<br />

192 ha szkółek.<br />

Penicillium adametzii jest grzybem glebowym. Występuje najczęściej w otoczeniu<br />

korzeni żywych drzew. Jest najczęściej występującym gatunkiem w drzewostanach<br />

iglastych (Pinus sylvestris ) i liściastych (Betula pendula, Larix decidua,<br />

Prunus serotina, Quercus robur, Q. petraea). Często występuje w glebie<br />

ugorów i nieużytków oraz odłogujących gruntów porolnych. Zasiedla również<br />

powierzchnię korzeni drzew i pniaków, zwłaszcza cienkich (1 mm śr.), pozbawionych<br />

kory, rzadziej grubszych (> 5mm diam.), pokrytych korą. Jest<br />

wyjątkowo liczny na korzeniach Q. robur. Jego frekwencja w zbiorowisku<br />

grzybów wynosi 30-71%. Obecność drewna martwego (iglastego i liściastego)<br />

powoduje ustępowanie P. adametzii z gleby. Penicillium adametzii w kultu-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 51-54<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

51


52<br />

rach dwu-grzybniowych, in vitro, ogranicza bardzo silnie wzrost H. annosum<br />

(+22) i mniej silnie wzrost A. ostoyae (+2).<br />

Powszechne występowanie P. adametzii w glebach leśnych wynikające z tolerowania<br />

szerokiego spectrum naturalnych warunków środowiska oraz silne<br />

działanie antagonistyczne w stosunku do odglebowych patogenów roślin in<br />

vitro zainicjowały badania chemiczne jego metabolitów. Badania wykazały,<br />

że ekstrakty chloroformowe z hodowli płynnej i ryżowej P. adametzii hamują<br />

wzrost Armillaria i Heterobasidion in vitro. Ekstrakty octanu etylu okazały<br />

się nieskuteczne. Armillaria gallica i A. ostoyae oraz H. abietinum i H. parviporum<br />

reagowały najsilniej. Ekstrakty chloroformowe nie hamowały wzrostu<br />

C. destructans, F. oxysporum, F. sambucinum, F. solani i R. solani in vitro.<br />

Grzybnia P. adametzii oraz ekstrakt chloroformowy stosowane w trakcie podlewania<br />

stymulowały wzrost i poprawiały zdrowotność 2-letnich sadzonek<br />

P. sylvestris inokulowanych lub nieinokulowanych Armillaria oraz zmniejszały<br />

powierzchnię nekrozy wywoływanej przez H. annosum. Płyn pohodowlany<br />

P. adametzii opóźniał wschody i poprawiał zdrowotność siewek sosny inokulowanych<br />

grzybami zgorzelowymi w pierwszych tygodniach wzrostu. Efekt inhibitujący<br />

zależał od izolatu P. adametzii. Efekt inhibitujący rósł ze wzrostem<br />

koncentracji metabolitu, a w testach z Heterobasidion rósł przy wykonaniu<br />

zabiegu w momencie inokulacji sadzonek patogenem. Chromatografia cienkowarstwowa<br />

wykazała, że ekstrakt chloroformowy P. adametzii zawiera 20<br />

różnych frakcji. Tylko cztery z nich hamowały wzrost Armillaria i cztery inne<br />

wzrost H. abietinum oraz H. annosum in vitro. Żaden nie hamował wzrostu<br />

H. parviflorum. Chromatografia gazowa połączona ze spektrometrią mas (GC-<br />

-MS) wykazała, że ekstrakt chloroformowy P. adametzii zawiera kwasy karboksylowe,<br />

glikozydy i flawonoidy. Płyn pohodowlany P. adametzii powodował<br />

okresowy lub trwały wzrost frekwencji grzybów w glebie, w tym Trichoderma<br />

znanego antagonisty patogenów odglebowych. Wzrostowi frekwencji Trichoderma<br />

towarzyszył spadek frekwencji grzybów z rzędów Mortierellales i Mucorales<br />

oraz Penicillium. Okresowa poprawa zdrowotności siewek sosny związana<br />

była ze wzrostem frekwencji T. aureoviride w glebie. Wzrost frekwencji<br />

grzybów w glebie (zwłaszcza z rzędów Mortierellales i Mucorales oraz Trichoderma)<br />

był skorelowany ze wzrostem zawartości ergosterolu w glebie.<br />

Fizjologiczne i biochemiczne cechy P. adametzii mogą umożliwiać mu naturalną<br />

i spontaniczną aktywność skutkującą ochroną drzewostanów przed chorobami<br />

korzeni. Stosowanie interwencyjne może odbyć się na drodze zmiany<br />

warunków środowiska naturalnego w kierunku sprzyjającym namnażaniu się<br />

grzyba lub lokalnego wprowadzenie grzyba lub jego metabolitów.


Summary<br />

EFFECTS OF PENICILLIUM ADAMETZII ON SOIL-<br />

BORNE FOREST PATHOGENS<br />

Armillaria, Heterobasidion and damping-off fungi (Cylindrocarpon<br />

destructans, Fusarium oxysporum, F. sambucinum, F. solani and Rhizoctonia<br />

solani) are dangerous phytopathogens. Diseases caused by them occurred in<br />

Poland in 2010 over an area of 262 297 ha. Armillaria root disease (in 107<br />

100 ha of coniferous and deciduous stands) occurs mostly in southern, northeastern<br />

and central Poland. Annosus root disease, caused by Heterobasidion<br />

(in 155 005 ha), the most dangerous disease of conifers and birch, particularly<br />

on post-agricultural soils, occurs mostly in central and northern, and locally in<br />

southern and eastern Poland. Damping-off occurs in 192 ha of forest nurseries.<br />

Penicillium adametzii is a soil fungus. It is one of the most commonly<br />

occurring fungi under coniferous (Pinus sylvestris) and deciduous (Betula<br />

pendula, Larix decidua, Prunus serotina, Quercus robur, Q. petraea) tree<br />

stands, in fallow soils and in barren post-agricultural soils in Poland. It also<br />

colonizes roots, mostly thin roots (1 mm diam) with no cortex, and less often<br />

thicker roots (> 5mm diam.) covered with cortex. Its frequency in the fungal<br />

community reaches 30-71%. The presence of coniferous wood eliminates the<br />

fungus. In paired culture, P. adametzii inhibited growth of H. annosum (+22)<br />

and of Armillaria (+2).<br />

The common occurrence of P. adametzii in forest soils, resulting from its<br />

tolerance to a wide range of conditions, and its strong antagonistic activity<br />

towards soil-borne phytopathogens prompted chemical analyses of its<br />

metabolites. Chloroform extract of P. adametzii inhibited growth of Armillaria<br />

and Heterobasidion in vitro. Armillaria gallica, A. ostoyae, H. abietinum and<br />

H. parviporum were the most responsive. Chloroform extract did not inhibit<br />

growth of C. destructans, F. oxysporum, F. sambucinum, F. solani or R. solani<br />

in vitro. Mycelium of P. adametzii and chloroform extract applied in water<br />

improved the health and stimulated growth of 2-year-old P. sylvestris plants<br />

inoculated or not inoculated with Armillaria and inhibited necrosis caused by<br />

H. annosum. Culture filtrates inhibited germination of P. sylvestris seeds and<br />

improved the health of seedlings for 2-4 weeks after inoculation with dampingoff<br />

fungi. The effect seemed to be strain-specific. Higher concentrations of<br />

metabolites increased the effect. Metabolites were most effective in protecting<br />

P. sylvestris against Heterobasidion when applied immediatelly after<br />

inoculation. Thin layer chromatography showed that chloroform extract of P.<br />

adametzii contains 20 different fractions. Only four fractions inhibited growth<br />

of Armillaria and four different fractions inhibited growth of H. abietinum or<br />

H. annosum in vitro. Gas chromatography combined with mass spectrometry<br />

53


54<br />

showed that the chloroform extract contains carboxylic acids, glycosides<br />

and flavonoids. Culture filtrates of P. adametzii caused either temporary or<br />

permanent increase in the frequency of soil fungi, including Trichoderma,<br />

which is a known antagonist of soil-borne pathogens. Increased frequency of<br />

Trichoderma was correlated with decreased frequency of fungi from the orders<br />

Mortierellales and Mucorales, and of Penicillium. Temporary improvement in<br />

the health of P. sylvestris seedlings was correlated with increased frequency<br />

of T. aureoviride in soil. Increased frequency of soil fungi (particularly of<br />

Mortierellales and Mucorales and of Trichoderma) was correlated with an<br />

increased concentration of ergosterol in soil.<br />

The physiological and biochemical properties of P. adametzii may allow<br />

it to exert natural and spontaneous biological control of Armillaria and<br />

Heterobasidion. Its future application and utilization may involve (i) increasing<br />

its frequency by creating a favorable natural habitat or (ii) local introduction<br />

of the fungus or its metabolites into the natural habitat.


WPŁYW GRZYBA EKTOMIKORYZOWEGO<br />

HEBELOMA CRUSTULINIFORME NA WZROST<br />

I ROZWÓJ WYBRANYCH PATOGENÓW ZGORZELOWYCH<br />

SIEWEK DRZEW W WARUNKACH LABORATORYJNYCH<br />

Hanna Stępniewska, Martyna Latała i Anna Misiek<br />

Uniwersytet Rolniczy, Katedra Fitopatologii Leśnej, al. 29 listopada 46,<br />

31-425 Kraków<br />

rlstepni@cyf-kr.edu.pl<br />

Grzyb Hebeloma crustuliniforme, w formie biopreparatu, stosowany jest<br />

w Polsce na skalę gospodarczą do sterowanej mikoryzacji sadzonek drzew<br />

w szkółkach leśnych. Celem niniejszych badań było określenie czy i w jaki<br />

sposób grzyb ten wpływa na wzrost i rozwój Fusarium oxysporum i Rhizoctonia<br />

solani. Oddziaływania tego rodzaju obserwuje się u innych grzybów ektomikoryzowych.<br />

W odniesieniu do H. crustuliniforme zagadnienia te są w niewielkim<br />

stopniu rozpoznane. Do badań wybrano F. oxysporum i R. solani jako<br />

grzyby, które najczęściej powodują zamieranie korzeni siewek i sadzonek<br />

drzew w szkółkach leśnych. W badaniach wykorzystano 4 szczepy F. oxysporum<br />

i 4 szczepy R. solani wyodrębnione z siewek sosny zwyczajnej z objawami<br />

zakaźnej zgorzeli oraz jeden szczep H. crustuliniforme.<br />

Zbadano: 1) wzrost grzybni F. oxysporum i R. solani w obecności kolonii H.<br />

crustuliniforme w kulturach dwuorganizmowych na pożywce stałej, 2) wzrost<br />

grzybni F. oxysporum i R. solani w obecności wydzielin H. crustuliniforme<br />

metodą dyfuzyjną, 3) wzrost grzybni R. solani na pożywce płynnej zawierającej<br />

wydzieliny H. crustuliniforme, 4) kiełkowanie zarodników F.oxysporum<br />

w obecności wydzielin H. crustuliniforme.<br />

Zaobserwowano, że nieznaczny wpływ ograniczający wzrost grzybni F. oxysporum<br />

przez grzybnię H. crustuliniforme zaznaczył się w kulturach dwuorganizmowych<br />

na pożywce stałej. W doświadczeniach z wykorzystaniem wydzielin<br />

H. crustuliniforme hodowanego na pożywce płynnej, metabolity tego grzyba nie<br />

wpłynęły hamująco na wzrost grzybni i na kiełkowanie zarodników badanych<br />

szczepów F. oxysporum. W odniesieniu do R. solani wykazano, że podobnie jak<br />

w przypadku F. oxysporum grzyb H. crustuliniforme ograniczał nieznacznie<br />

wzrost tego patogena w kulturach dwuorganizmowych na pożywce stałej. Od-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 55-56<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

55


56<br />

działywanie tego typu zaobserwowano jednak także w doświadczeniu z wykorzystaniem<br />

pożywki płynnej zawierającej wydzieliny H. crustuliniforme.<br />

Wykazano, że w warunkach przeprowadzonych doświadczeń grzyb H. crustuliniforme<br />

nie wykazywał właściwości antagonistycznych wobec F. oxysporum.<br />

Słabe właściwości antagonistyczne tego grzyba zaobserwowano w stosunku<br />

do R. solani.<br />

Summary<br />

THE IMPACT OF ECTOMYCORRHIZAL FUNGUS<br />

HEBELOMA CRUSTULINIFORME ON THE GROWTH<br />

AND DEVELOPMENT OF SELECTED DAMPING-OFF PATHOGENS<br />

OF TREE SEEDLINGS IN LABORATORY CONDITIONS<br />

In Poland Hebeloma crustuliniforme is used as a biopreparate in the<br />

controlled mycorrhization process of tree seedlings in forest nurseries. The<br />

objective of the study was to investigate whether and how the fungus affects<br />

the growth and development of Fusarium oxysporum and Rhizoctonia solani.<br />

Such effects are observed in other ectomycorrhizal fungi but are poorly<br />

recognized in relation to H. crustuliniforme. Fusarium oxysporum and R.<br />

solani were selected for the study as they are the most common root-rotting<br />

fungi associated with tree seedlings in forest nurseries. Four isolates of F.<br />

oxysporum as well as R. solani were used, all of them isolated from pine<br />

seedlings with damping-off symptoms.<br />

The following parameters were determined: 1) colony growth of F.<br />

oxysporum and R. solani in the presence of H. crustuliniforme colony in dual<br />

cultures on solid medium, 2) colony growth of F. oxysporum and R. solani<br />

in the presence of H. crustuliniforme metabolites using diffusion method,<br />

3) colony growth of R. solani in liquid medium containing metabolites of<br />

H. crustuliniforme, 4) spore germination of F. oxysporum in the presence of<br />

H. crustuliniforme metabolites.<br />

Only a slight effect of H. crustuliniforme, limiting the growth of F. oxysporum<br />

colony was observed in dual culture test on solid medium. Metabolites of H.<br />

crustuliniforme growing on liquid medium did not affect brake on the colony<br />

growth (diffusion method) and spore germination of F. oxysporum isolates<br />

examined. With respect to R. solani has been shown that, as in the case of<br />

F. oxysporum, H. crustuliniforme slightly restricted growth of the pathogen in<br />

dual culture test on solid medium. Such effects, however, were also observed<br />

in the experiment using a liquid medium containing metabolites of H.<br />

crustuliniforme.<br />

It was shown that in the conditions of the experiments, H. crustuliniforme<br />

showed no antagonistic effects against F. oxysporum. Weak antagonistic<br />

properties of this ectomycorrhizal fungus was observed in relation to R. solani.


WPŁYW ENDOFITA NEOTYPHODIUM LOLII<br />

NA PRODUKCJĘ ZWIĄZKÓW FENOLOWYCH<br />

I UWALNIANIE LOTNYCH ZWIĄZKÓW ORGANICZNYCH<br />

PRZEZ ŻYCICĘ TRWAŁĄ (LOLIUM PERENNE L.)<br />

ZAINFEKOWANĄ PRZEZ FUSARIUM POAE<br />

Dariusz Pańka 1 , Dariusz Piesik 2 i Małgorzata Jeske 1<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, 1 Katedra Fitopatatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, 2 Katedra Entomologii Stosowanej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

panka@utp.edu.pl<br />

Trawy należą do roślin, które bardzo często zawiązują symbiotyczne asocjacje<br />

z endofitycznymi mikroorganizmami. Należą do nich przede wszystkim<br />

związki z grzybami endomikoryzowymi, mutualistyczne asocjacje z grzybami<br />

z rodzajów Neotyphodium i Epichloë oraz symbiozy z tzw. p- i a-endofitami. Do<br />

grupy p-endofitów zaliczane są grzyby określane jako “Gliocladium-like” zasiedlające<br />

życicę trwałą oraz „Phialophora-like” bytujące w kostrzewach. Z kolei<br />

a-endofity obejmują grzyby z rodzaju Acremonium. Najlepiej poznanymi<br />

endofitami traw są jednak grzyby z rodziny Clavicipitaceae (Ascomycota), należące<br />

do rodzaju Neotyphodium i Epichloë. Neotyphodium spp. są niedoskonałym<br />

stadium grzybów z rodzaju Epichloë spp. Rozwinęły się najprawdopodobniej<br />

na drodze ewolucji, poprzez hybrydyzację strzępek form doskonałych.<br />

Największe znaczenie gospodarcze mają: N. lolii zasiedlający życicę trwałą,<br />

N. uncinatum – symbiont kostrzewy łąkowej (Festuca pratensis Huds.) oraz<br />

N. coenophialum zawiązujący asocjacje z kostrzewą trzcinową (Festuca arundinaceae<br />

Schreb.). Grzyby te rozwijają się w roślinie wyłącznie systemicznie,<br />

przerastając przestrzenie międzykomórkowe bez wywoływania jakichkolwiek<br />

objawów porażenia. Rozprzestrzeniają się wertykalnie za pomocą nasion <strong>rośliny</strong><br />

żywicielskiej, gdyż w warunkach naturalnych nie wytwarzają zarodników.<br />

Endofity te wpływają na roślinę zasiedlaną w złożony, wielokierunkowy<br />

sposób. Przede wszystkim warunkują wyższą odporność na stres suszy. System<br />

korzeniowy zasiedlonych roślin jest lepiej rozwinięty, korzenie są dłuższe,<br />

mają mniejszą średnicę, dzięki czemu mogą pobierać wodę z głębszych<br />

warstw gleby. Rośliny z endofitem (E+) są bardziej konkurencyjne w środowi-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 57-60<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

57


58<br />

sku i lepiej przystosowane do wzrostu w warunkach ograniczonej dostępności<br />

składników mineralnych. Są także bardziej odporne na stres biotyczny, m.in.<br />

uszkodzenia powodowane przez nicienie, żerowanie owadów i porażenie przez<br />

patogeny. W przypadku szkodników, takie oddziaływanie związane jest głównie<br />

z obecnością alkaloidów w roślinach E+, szczególnie peraminy i związków<br />

lolinowych. Ponadto, alkaloidy – ergowalina i pochodne lolitremu zapewniają<br />

asocjacji większą odporność na roślinożerców. Mechanizmy wyższej odporności<br />

traw z endofitami na porażenie przez patogeny nie są jeszcze dokładnie poznane.<br />

Pewną rolę odgrywają w tym związki o charakterze antybiotycznym produkowane<br />

przez endofita. Najprawdopodobniej symbiont indukuje specyficzne<br />

mechanizmy obronne w roślinie żywicielskiej na poziomie fizjologicznym oraz<br />

biochemicznym. Do mechanizmów tych zaliczane jest najczęściej wytwarzanie<br />

molekuł sygnałowych, produkcja białek PR (pathogenesis related), związków<br />

fenolowych, np. fitoaleksyn, lignifikacja ścian komórkowych czy produkcja<br />

reaktywnych form tlenu. Rolę w odpowiedzi <strong>rośliny</strong> na działanie czynników<br />

stresowych przypisuje się także od niedawna organicznym związkom lotnym.<br />

Celem przeprowadzonych badań było określenie wpływu endofita Neotyphodium<br />

lolii na produkcję związków fenolowych oraz organicznych związków<br />

lotnych przez trzy genotypy L. perenne porażone przez Fusarium poae. Analizowano<br />

w warunkach doświadczenia wazonowego podatność życicy trwałej na<br />

porażenie przez patogena. Oznaczano ogólną zawartość związków fenolowych<br />

w roślinach E+ i E- przed infekcją oraz przez sześć kolejnych dni po infekcji<br />

przez F. poae. Emisję organicznych związków lotnych określano dla zasiedlonych<br />

i niezasiedlonych roślin przed infekcją przez F. poae oraz po 3, 6 i 12<br />

dniach od inokulacji patogenem.<br />

W wyniku przeprowadzonych badań zaobserwowano, że wszystkie badane<br />

genotypy życicy trwałej były podatne na porażenie przez F. poae. Zanotowano<br />

także wpływ zasiedlenia roślin przez endofita na nasilenie występowania<br />

objawów chorobowych. Analiza statystyczna potwierdziła wysoce istotny<br />

(P˂0,001) wpływ genotypu <strong>rośliny</strong> żywicielskiej, obecności endofita oraz ich<br />

interakcji na poziom porażenia przez badanego patogena. Najsłabsze objawy<br />

chorobowe, na roślinach E- notowano w kombinacji z genotypem NlA6. Wskazuje<br />

to na stosunkowo wysoką odporność tego genotypu na porażenie przez F.<br />

poae. Pozostałe dwa genotypy były porażone w znacznie wyższym stopniu. Ich<br />

indeks chorobowy przekraczał wartość 42%. Endofit w tych genotypach istotnie<br />

obniżał nasilenie występowania objawów chorobowych.<br />

Zaobserwowano wpływ genotypu życicy trwałej, zasiedlenia przez endofita<br />

oraz porażenia przez F. poae na produkcję związków fenolowych w roślinach.<br />

Analiza statystyczna wykazała wysoce istotny wpływ (P


zawartość fenoli we wszystkich genotypach, w kombinacji kontrolnej. Najwyższy<br />

przyrost zanotowano w przypadku genotypu NlA6; endofit zwiększył<br />

blisko dwukrotnie ilość produkowanych fenoli w roślinach. Analiza wartości<br />

średnich wykazała wyższą zawartość fenoli w roślinach E+ w czterech kolejnych<br />

dniach od inokulacji oraz w szóstym dniu.<br />

Zaobserwowano wpływ N. lolii na emisję lotnych związków organicznych<br />

(VOCs – volatile organic compounds) przez genotypy życicy trwałej. Rośliny<br />

uwalniały następujące VOCs: (Z)-3-heksenal, octan (Z)-3-heksen-1-ylu, (Z)-<br />

-ocimen, indol, linalol, octan benzylu, salicylan metylu i β-kariofilen. Genotyp<br />

nie miał wpływu na jakościową i ilościową charakterystykę produkowanych<br />

związków. Obecność endofita w dużym stopniu zwiększała emisję (Z)-3-heksenalu,<br />

octanu (Z)-3-heksen-1-ylu, linalolu, salicylanu metylu i β-kariofilenu.<br />

Uzyskane wyniki wskazują, że N. lolii jest odpowiedzialny za wyższą zawartość<br />

związków fenolowych i produkcję organicznych związków lotnych w życicy<br />

trwałej. Pierwsza grupa związków wydaje się mieć istotne, bezpośrednie znaczenie<br />

dla wyższej odporności roślin zasiedlonych na porażenie przez F. poae.<br />

Rola drugiej grupy – VOCs jest na tym etapie badań trudna do określenia.<br />

Najprawdopodobniej uwalniane VOCs biorą udział w przekazywaniu sygnału o<br />

infekcji, indukowaniu innych mechanizmów odporności, a także bezpośrednim<br />

antybiotycznym oddziaływaniu na kiełkowanie zarodników patogena i rozwój<br />

strzępki infekcyjnej. Wyjaśnienie zagadnienia wymaga przeprowadzenia dalszych<br />

badań.<br />

Summary<br />

EFFECT OF NEOTYPHODIUM LOLII ENDOPHYTE<br />

ON PRODUCTION OF PHENOLIC COMPOUNDS AND EMISSION<br />

OF VOLATILE ORGANIC COMPOUNDS BY PERENNIAL<br />

RYEGRASS (LOLIUM PERENNE L.) INFECTED<br />

WITH FUSARIUM POAE<br />

Literature data point at Neotyphodium grass symbionts as one of the best<br />

tools of improvement of the host plant’s growth and resistance to stress factors.<br />

These endophytes often allow to protect the host grass from different pathogens.<br />

However, there is little known about mechanisms of such endophyte influence<br />

on the host and the impact of the symbiont on the emission of volatile<br />

organic compounds (VOCs) by inhabited plants. Therefore, the purpose of the<br />

presented research was to examine the effect of Neotyphodium lolii endophyte<br />

on the total phenolic compounds production and VOCs emission by three perennial<br />

ryegrass genotypes under Fusarium poae infection. Experiments were<br />

conducted in controlled conditions. Endophyte significantly decreased degree<br />

of infection of two perennial ryegrass genotypes. Moreover, N. lolii influenced<br />

the production of total phenolics in plants. Endophyte inhabited plants contained<br />

higher amounts of phenolic compounds. Increased production of these<br />

59


60<br />

secondary metabolites could be responsible for lower susceptibility of perennial<br />

ryegrass to F. poae infection and take part in the mechanisms of greater<br />

resistance of E+ genotypes. There were collected the following VOCs from<br />

perennial ryegrass genotypes: (Z)-3-hexenal, (Z)-3-heksenyl acetate, linalool,<br />

methyl salicylate, β-caryophyllene, (Z)-ocimene, indole and benzyl acetate.<br />

Endophyte increased the emission of the first 5 listed compounds. There was<br />

no effect of L. perenne genotype on the VOCs induction. Likely, emitted VOCs<br />

play role in signaling of the pathogen attack, direct induction of the specific<br />

plant resistance mechanisms and/or direct inhibition of pathogen spores germination<br />

and development of the infecting hyphae. Detail explanation of the<br />

problem calls for further research.


ENZYMY DEGRADUJĄCE ROŚLINNE I GRZYBOWE<br />

ŚCIANY KOMÓRKOWE SYNTETYZOWANE PRZEZ<br />

SZCZEPY F. CULMORUM RÓŻNIE ODDZIAŁUJĄCE<br />

NA WZROST ROŚLIN ZBOŻOWYCH<br />

(RYZOSFEROWE I PATOGENICZNY)<br />

Jolanta Jaroszuk-Ściseł 1 , Ewa Kurek 1 , Anna Słomka 1 ,<br />

Anna Baturo-Cieśniewska 2 i Leszek Lenc 2<br />

1 Uniwersytet Marii Curie-Skłodowskiej, Zakład Mikrobiologii Środowiskowej,<br />

ul. Akademicka 19, 20-033 Lublin<br />

2 Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

jolanta.jaroszuk-scisel@poczta.umcs.lublin.pl<br />

Enzymy degradujące ściany komórkowe (CWDE) syntetyzowane przez<br />

szczepy grzybowe są markerami ich agresywności w stosunku do roślin (Phalip<br />

i in. 2009), a więc odgrywają ważną rolę w kolonizacji tkanek roślinnych<br />

przez grzyby (Kang i Buchenauer 2000, Wanjiru i in. 2002, Di Pietro 2003,<br />

Tudzynski i Scheffer 2004). Mogą one uwalniać z grzybowej i roślinnej ściany<br />

komórkowej elicytory indukujące odporność roślin (Montesano i in. 2003).<br />

Porównano zdolność uwalniania do podłoża enzymów degradujących ściany<br />

komórkowe (CWDE) (glukanaz, chitynaz, ksylanaz, endocelulaz, egzocelulaz,<br />

pektynaz i poligalaktouranaz) przez trzy szczepy Fusarium culmorum, dwa ryzosferowe<br />

[promujący wzrost (PGPF), szkodliwie oddziałujący (DRMO)] i jeden<br />

patogeniczny, podczas wzrostu na podłożach uzupełnionych jednym z następujących<br />

źródeł C: glukozą, chityną, roślinną (korzeń żyta) lub grzybową (Fusarium)<br />

ścianą komórkową. Źródła C w zróżnicowany sposób wpływały na aktywność<br />

poszczególnych enzymów uwalnianych do podłóż przez poszczególne<br />

szczepy. W płynach pohodowlanych szczepu PGPF inkubowanego na podłożu<br />

uzupełnionym roślinną ścianą komórkową wykrywano statystycznie istotnie<br />

niższe aktywności ksylanaz i endocelulaz niż w przypadku płynów pohodowlanych<br />

uzyskanych z hodowli szczepu DRMO i patogenicznego. Zjawisko<br />

represji glukozowej zaobserwowano tylko w przypadku aktywności pektynaz<br />

a aktywność kwaśnych hydrolaz była wyższa niż alkalicznych. Analiza<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 61-63<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

61


62<br />

głównych składowych (ang. Principal Component Analysis, PCA) pozwoliła<br />

wyłonić dwie grupy CWDE, najprawdopodobniej działające synergistycznie<br />

podczas degradacji ścian komórkowych. Do jednej grupy należały pektynazy,<br />

egzocelulazy oraz poligalaktouronazy a do drugiej glukanazy, chitynazy, ksylanazy<br />

i endocelulazy. Preparaty enzymatyczne otrzymane z hodowli szczepu<br />

PGPF były najmniej efektywne w degradacji roślinnej ściany komórkowej<br />

natomiast najbardziej efektywne w degradacji grzybowej ściany komórkowej.<br />

Stwierdzono wysoką dodatnią korelację pomiędzy tempem degradacji roślinnej<br />

ściany komórkowej a aktywnością ksylanaz w preparatach enzymatycznych<br />

otrzymanych z hodowli poszczególnych szczepów Fusarium oraz pomiędzy<br />

tempem degradacji grzybowej ściany komórkowej a aktywnością chitynaz.<br />

Ponadto wykazano, że intensywność kolonizacji tkanek roślin zbożowych<br />

przez poszczególne szczepy Fusarium była dodatnio skorelowana z tempem<br />

rozkładu ściany roślinnej przez preparaty enzymatyczne otrzymane z hodowli<br />

poszczególnych szczepów.<br />

Summary<br />

CELL WALL DEGRADING ENZYMES SYNTHESIZED<br />

BY FUSARIUM CULMORUM STRAINS<br />

WITH DIFFERENT EFFECTS ON CEREAL PLANTS GROWTH<br />

(RHIZOSPHERIC AND PATHOGENIC)<br />

Cell wall degrading enzymes (CWDEs) synthesized by fungal strains are<br />

markers of fungal aggressiveness to plants (Phalip et al. 2009), therefore<br />

they play an important role in colonization of plant tissues by fungi (Kang<br />

and Buchenauer 2000, Wanjiru et al. 2002, Di Pietro 2003, Tudzynski and<br />

Scheffer 2004). CWDEs may release elicitors of plant induced resistance from<br />

the fungal or the plant cell wall (Montesano et al. 2003).<br />

We compared the ability of three tested Fusarium culmorum isolates<br />

differently affecting growth of cereal plants [nonpathogenic rhizosphere isolate<br />

promoting plant growth (PGPF), deleterious rhizosphere isolate (DRMO) and<br />

one pathogenic isolate] to release CWDE complexes (glucanases, chitinases,<br />

xylanases, endocellulases, exocellulases, pectinases and polygalacturonases)<br />

to culture fluids during long-term cultivation. The growth media contained<br />

various C-sources and/or inducers of lytic enzymes, namely, plant cell wall<br />

(PCW), fungal cell wall (FCW) and simple components of those cell walls,<br />

i.e., glucose and chitin. These C-sources differentially affected the activity of<br />

the individual enzymes released by the particular isolates. The activities of<br />

xylanases and endocellulases released by the PGPF isolate to the medium<br />

amended with the plant cell wall were significantly lower than the activities of<br />

these enzymes released by the DRMO and the pathogenic isolates. The activity


of pectinases was repressed by glucose and the activities of acidic hydrolases<br />

were greater than those of alkaline hydrolases. The Principal Component<br />

Analysis (PCA) revealed that the activities of the CWDE found in the<br />

supernatants of the F. culmorum cultures could be clustered into two distinct<br />

groups. One group included pectinase, exocellulase and polygalacturonase,<br />

and all the remaining hydrolases tested (glucanases, chitinases, xylanases,<br />

endocellulases) belonged to the other, suggesting that enzymes from either<br />

group may act in synergy during cell wall degradation. A crude preparation<br />

originating from a culture of the PGPF strain was the least efficient in<br />

PCW degradation but the most efficient among the tested strains in FCW<br />

degradation.<br />

A high positive correlation was found between the rate of plant cell wall<br />

degradation and xylanase activity in the enzymatic preparations obtained<br />

from the culture of particular Fusarium strains. Similarly, a high positive<br />

correlation was found between the efficiency of fungal cell wall degradation by<br />

enzymatic preparations and chitinase activity in these preparations.<br />

Moreover, it was shown that intensity of colonization of cereal plant tissues<br />

by Fusarium strains is also positively correlated with the rate of plant cell<br />

wall degradation by enzymatic preparations obtained from the particular<br />

strain cultures.<br />

Badania finansowane ze środków na naukę w latach 2010-2013 jako projekt<br />

badawczy MNiSW Nr N N310 441338<br />

63


64<br />

WYKORZYSTANIE GRZYBÓW TRICHODERMA<br />

W UPRAWACH INTEGROWANYCH<br />

I DO ZAGOSPODAROWANIA ODPADÓW<br />

ORGANICZNYCH – PROJEKT PROGRAMU<br />

OPERACYJNEGO INNOWACYJNA GOSPODARKA<br />

Magdalena Szczech<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3,<br />

96-100 Skierniewice<br />

magdalena.szczech@iwarz.pl<br />

W ciągu ostatnich lat <strong>ludzie</strong> zaczęli zdawać sobie sprawę z zagrożeń wynikających<br />

ze wzrastającego skażenia środowiska. Wiele mówi na temat<br />

skażeń gleb i wód gruntowych w wyniku nadmiernego stosowania nawozów<br />

mineralnych oraz chemicznych środków ochrony roślin. Konsumenci coraz<br />

bardziej zwracają uwagę na pozostałości pestycydów i szkodliwych substancji<br />

w produktach rolnych. Jednocześnie redukowana jest liczba chemicznych<br />

środków ochrony dopuszczonych do użycia w rolnictwie. W zawiązku z tym<br />

poszukiwane są alternatywne metody uprawy i ochrony roślin, które zastąpią<br />

wycofywane środki. Od wielu lat duże zainteresowanie budzi możliwość<br />

wykorzystania grzybów z rodzaju Trichoderma jako mikroorganizmów wspomagających<br />

wzrost i chroniących <strong>rośliny</strong> przed czynnikami stresowymi, głównie<br />

organizmami chorobotwórczymi. Tak wielkie zainteresowanie grzybami<br />

Trichoderma upatruje się w ich wszechstronnym działaniu. Grzyby te są powszechne<br />

w naturze, rosną szybko w hodowlach sztucznych i obficie produkują<br />

zarodniki konidialne. Zwalczają szeroką gamę patogenów grzybowych,<br />

a także ograniczają występowanie trudnych do zwalczania chorób bakteryjnych<br />

i wirusowych.<br />

Celem projektu jest wykorzystanie potencjału grzybów z rodzaju Trichoderma<br />

i opracowanie preparatów na bazie rodzimych szczepów przystosowanych<br />

do polskich warunków uprawy. Preparaty te będą wykorzystywane<br />

kompleksowo w integrowanej, a także ekologicznej uprawie warzyw jako zaprawy<br />

nasienne, doglebowo i w formie oprysków. Preparaty te będą stanowiły<br />

kompozycję kilku aktywnych szczepów Trichoderma, aby zwiększyć ich<br />

skuteczność wykorzystując synergistyczne działanie różnych metabolitów lub<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 64-66<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


mechanizmów korzystnych dla wzrostu i zdrowotności roślin. Ważnym aspektem<br />

projektu jest produkcja preparatów zawierających grzyby Trichoderma<br />

w oparciu o organiczne materiały odpadowe z przemysłu rolno-spożywczego<br />

i rolnictwa. Dodatkowo planowane jest wykorzystanie Trichoderma do kompostowania<br />

odpadów organicznych.<br />

Aby zrealizować zamierzone cele planowane są następujące zadania badawcze:<br />

- Selekcja polskich izolatów Trichoderma dla produkcji bio-preparatów za<br />

pomocą systemu „AMOR” opracowanego na potrzeby projektu.<br />

- Wybór materiałów odpadowych oraz opracowanie taniej i wydajnej technologii<br />

produkcji biomasy grzybów Trichoderma do zastosowania doglebowego.<br />

- Opracowanie technologii masowej produkcji zarodników konidialnych Trichoderma<br />

do komercyjnego użycia i długiego przechowywania.<br />

- Zastosowanie nowych preparatów Trichoderma w integrowanej produkcji<br />

warzyw oraz badanie ich wpływu na wzrost, plonowanie i zdrowotność roślin<br />

warzywnych w uprawach polowych i pod osłonami.<br />

- Ocena wpływu preparatów na właściwości fizyko-chemiczne gleby oraz pobieranie<br />

makro i mikroelementów przez <strong>rośliny</strong>.<br />

- Ocena trwałości i jakości pozbiorczej warzyw wyprodukowanych z użyciem<br />

preparatów zawierających grzyby Trichoderma.<br />

- Monitoring Trichoderma w środowisku glebowym.<br />

- Zastosowanie preparatów z Trichoderma w przydomowych kompostownikach<br />

oraz do odzysku odpadów w gospodarstwach warzywniczych i zakładach<br />

rolno-przetwóczych.<br />

Projekt pt. „Polskie szczepy Trichoderma w ochronie roślin i zagospodarowaniu<br />

odpadów organicznych” nr UDA-POIG.01.03.01-00-129/09-03, umowa<br />

z dnia 15.09.2009 r. Projekt badawczy współfinansowany przez Unię Europejską<br />

z Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego w ramach Działania<br />

1.3 Programu Operacyjnego Innowacyjna Gospodarka.<br />

Summary<br />

TRICHODERMA FUNGI IN INTEGRATED FARMING SYSTEM<br />

AND TO MAKE PRODUCTIVE ORGANIC WASTES<br />

Because of the growing public concern about environmental pollution, the<br />

number of pesticides permitted in agriculture is reduced, and the alternative<br />

strategies of pathogens control and cultural practices are necessary to<br />

replace hazardous chemicals. Therefore, the aim of this project is to develop<br />

commercial biocontrol preparations containing composition of selected strains<br />

of fungi genera Trichoderma for use in integrated agriculture and organic<br />

65


66<br />

farming. Organic wastes are planned as a medium to produce Trichoderma<br />

biomass. On the other hand, the next goal of the project is to use Trichoderma<br />

to utilize organic wastes collected on farms and in food industry.<br />

The innovative technology, combining recycling of farm wastes with<br />

complex of jointly acted biocontrol agents, may increase crop health and<br />

reduce food and environment pollution. The goal is to develop a cheap, easy<br />

and competitive method in agriculture for Polish and UE market.<br />

Several bio-preparations containing combinations of Trichoderma strains<br />

with different modes of action, will be find to use as soil application, seed<br />

coating or foliar spray in main vegetable crops. Plant residues and organic<br />

wastes applied as a carrier for Trichoderma, and then introduced into soil,<br />

will serve as manures enhancing plant nutrition. Selected compositions<br />

of enzymatic active strains are planned to be incorporated into composting<br />

system to accelerate decomposition of wastes and improve their quality as<br />

organic fertilizer.<br />

The recipients of the results, developed products and technologies are<br />

farmers, food industry interested in wastes recycling, producers of agricultural<br />

means and scientists.


PASOŻYTOWANIE GRZYBÓW Z RODZAJU<br />

CLADOSPORIUM NA GYMNOSPORANGIUM SABINAE<br />

(RDZA GRUSZY)<br />

Tatiana M. Dolińska, Małgorzata Schollenberger<br />

i Agnieszka Bartkowska<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, Wydział Ogrodnictwa<br />

i Architektury Krajobrazu, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

tatiana_dolinska@sggw.pl<br />

Rodzaj Cladosporium Link to ogromna grupa grzybów należących do typu<br />

workowców (Ascomycota). Obecnie do tego rodzaju zalicza się około 760 gatunków,<br />

wśród których znajdują się saprotrofy, endofity, pasożyty roślin oraz<br />

człowieka. Grzyby z tego rodzaju są także nadpasożytami, które odżywiają się<br />

pobierając składniki pokarmowe z innych organizmów. Gospodarzami ich są<br />

najczęściej grzyby – głównie rdze oraz mączniaki prawdziwe, ale także owady.<br />

W dwóch sezonach wegetacyjnych (2009 – 2010), oceniano związek pomiędzy<br />

siedemnastoma izolatami Cladosporium, a groźnym patogenem grusz i jałowców<br />

- Gymnosporangium sabinae. Badane izolaty zostały wyosobnione<br />

z rdzy i mączniaków prawdziwych pasożytujących na różnych roślinach, zarówno<br />

zielnych jak i wieloletnich. W doświadczeniu laboratoryjnym liście gruszy<br />

z objawami G. sabinae zakażano zawiesiną zarodników nadpasożyta o stężeniu<br />

1,5 x 10 7 zarodników/ml, po czym umieszczano je w wilgotnej komorze.<br />

Obserwacje przy użyciu mikroskopu stereoskopowego wykazały, że izolaty<br />

rozwijały się na spermogoniach oraz ecjach sprawcy rdzy gruszy. Porażone<br />

spermogonia zmieniały barwę z żółtopomarańczowej na brunatną. Dodatkowo<br />

pokrywał je zielony nalot złożony z trzonków i zarodników konidialnych<br />

Cladosporium spp. Podobne objawy obserwowano na ecjach. Znajdujące się<br />

w nich ecjospory ulegały odbarwieniu i stawały się jasne. Nalot nadpasożyta<br />

pokrywał ponad 50% powierzchni zarówno spermogonium, jak i ecjum. Nie zaobserwowano<br />

rozwoju testowanych izolatów na tkance liści. Obserwacje z wykorzystaniem<br />

mikroskopu świetlnego udowodniły, że nadpasożyt wykazywał<br />

dodatnie taksje w kierunku zarodników gospodarza. Dodatkowo tworzył on<br />

charakterystyczne zgrubienie bezpośrednio na powierzchni zarodników rdzy.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 67-69<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

67


68<br />

Strzępki izolatów Cladosporium otaczały ecjospory i doprowadzały do ich<br />

deformacji. Obraz uzyskany w mikroskopie skaningowym potwierdził bliski<br />

kontakt pomiędzy grzybami. Strzępki nadpasożyta ściśle przylegały do powierzchni<br />

ecjospor i formowały zgrubienie podobne do appressorium. Badane<br />

grzyby prawdopodobnie doprowadzały do rozpuszczenia ściany komórkowej<br />

gospodarza poprzez wydzielane enzymy i penetrowały wnętrze ich komórek.<br />

Wszystkie testowane izolaty z rodzaju Cladosporium reprezentowały dziesięć<br />

różnych gatunków i wszystkie te gatunki porażały G. sabinae. Do określenia<br />

tych gatunków zastosowano metodę molekularną bazującą na reakcji PCR.<br />

Amplifikacji DNA dokonano przy użyciu starterów ITS1 i ITS4.<br />

Summary<br />

PARASITING OF CLADOSPORIUM SPECIES<br />

ON GYMNOSPORANGIUM SABINAE (PEAR RUST)<br />

The genus Cladosporium Link is a large taxon of Ascomycota. Currently<br />

this taxon contains about 760 species, including saprotrophs, endophytes,<br />

plant and human parasites. Fungi of that genus are also hyperparasites<br />

which absorb nutrients from other organisms. The hosts of mycoparasites are<br />

fungi – mainly rust and powdery mildew but also insects. In two consecutive<br />

growing seasons (2009 – 2010), the relationship between seventeen<br />

isolates of Cladosporium and a dangerous pear and juniperus pathogen -<br />

Gymnosporangium sabinae was assessed. The isolates of tested fungi were<br />

collected from rust and powdery mildew fungi which have infected herbs and<br />

perennial plants. In laboratory tests leaves with symptoms of G. sabinae were<br />

inoculated with conidial suspension of mycoparasite at the concentration<br />

of 1.5 x 10 7 conidia//ml and put in high humidity chamber. An observation<br />

under stereomicroscope showed that isolates grew on spermagonia and aecia<br />

of pear rust. The colour of infected spermagonia changed from orange - yellow<br />

to brown. In addition spermagonia were covered with green conidiophore<br />

and conidia of Cladosporium sp. Similar symptoms were observed on aecia.<br />

The aeciospores from infected aecia became decolourized and pale. The<br />

hyperparasite mycelium covered over 50% of the surface of spermagonia and<br />

aecia. No development of tested isolates on leaves tissues was observed. The<br />

light microscope observations proved that hyperparasite showed positive taxis<br />

towards the host spore. Additionally formed characteristic thickenings directly<br />

on the rust spore surface. Cladosporium hyphae encircled the aeciospores,<br />

leading to their deformation. The scanning microscope observations confirmed<br />

the close contact between fungi. The hyperparasite hyphae closely adhered to<br />

the aeciospore surface and produced callosity similar to appresorium. Tested<br />

fungi probably lead to dissolving the host cell wall by the produced enzymes


which penetrated the inside of their cells. All the Cladosporium isolates<br />

represent ten various species and all of them infected G. sabinae. In order to<br />

determine fungi of Cladosporium species, a molecular method, based on the<br />

PCR reaction was employed. The internal transcribed spacer region (ITS1 and<br />

ITS 4) were used for DNA amplification.<br />

69


70<br />

PROBLEMY OCHRONY EKOLOGICZNYCH ROŚLIN<br />

SADOWNICZYCH<br />

Jerzy Szymona<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Ekologii Rolniczej, ul. Akademicka 13,<br />

20-950 Lublin<br />

jerzy.szymona@up.lublin.pl<br />

Z danych statystycznych wynika, że powierzchnia upraw sadowniczych jest<br />

niewielka w strukturze ekologicznych użytków rolnych [Czernyszewicz 2009].<br />

Matyjaszczyk, Sobczak [2008] stawiają tezę, że problemy z ochroną roślin przyczyniają<br />

się do tego faktu. W uprawach ekologicznych owoców największe problemy<br />

sprawiają następujące szkodniki: kwieciaki, zwójki, owocówki, przędziorki,<br />

pędraki, mszyce, wielkopąkowiec porzeczkowy oraz organizmy wywołujące<br />

choroby: parch, monilioza, szara pleśń, drobna plamistość liści. Lista dozwolonych<br />

środków ochrony roślin w sadach, kwalifikowanych przez Instytut Ochrony<br />

Roślin w Poznaniu jest niepełna. Dostępne środki służą jedynie do ochrony<br />

przed parchem, owocówkami, przędziorkami i drobną plamistością liści. Brakuje<br />

natomiast pestycydów chroniących przed zwójkami, kwieciakami, pędrakami,<br />

mszycami, szarą pleśnią, moniliozą i wielkopąkowcem porzeczkowym .<br />

W pracy zawarto dane lat 2008 – 2010 z gospodarstw ekologicznych, kontrolowanych<br />

przez jednostkę certyfikującą Ekogwarancja PTRE. W badanej grupie<br />

wyodrębniono gospodarstwa, w których uprawiano <strong>rośliny</strong> sadownicze. W przeprowadzonej<br />

analizie podano liczbę gospodarstw, w których zastosowano dany<br />

środek, rodzaje zastosowanych środków i w jakich uprawach, z podziałem na<br />

gatunki drzew owocowych i krzewów jagodowych.<br />

W badanym okresie trzech lat zanotowano wzrost liczby kontrolowanych<br />

gospodarstw o 15,3%, a gospodarstw, które uzyskały status ekologicznych o<br />

23,8%. W 2010 roku liczba skontrolowanych gospodarstw wyniosła 5.436, w tym<br />

gospodarstw ekologicznych było 3.971. Łączna powierzchnia użytków rolnych<br />

objętych kontrolą jednostki certyfikującej sukcesywnie rosła i w 2010 roku wynosiła<br />

119.762 ha. W okresie 2008 – 2010 powierzchnia kontrolowana wzrosła<br />

aż o 52%. Tendencje te nie przełożyły się na liczbę gospodarstw ekologicznych<br />

z uprawami roślin sadowniczych. Liczba gospodarstw z uprawą roślin jagodowych<br />

wzrosła tylko o 3%, natomiast liczba gospodarstw z drzewami owocowymi<br />

wzrosła w tym okresie o 16%. W okresie 2008 – 2010 nie zanotowano wzrostu po-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 70-71<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


wierzchni upraw sadowniczych, lecz jej spadek. Najwięcej upraw sadowniczych<br />

w badanych gospodarstwach stwierdzono w 2008 roku. Rok 2009 przyniósł spadek<br />

powierzchni uprawnej o 8%. W roku 2010 areał roślin sadowniczych wzrósł,<br />

ale pozostał nieznacznie niższy, w porównaniu do 2008 roku. Różnice te wynikały<br />

głównie ze spadku powierzchni sadów, przy tendencji systematycznego acz<br />

nieznacznego wzrostu areału krzewów jagodowych.<br />

W badanym okresie jednostka certyfikująca Ekogwarancja PTRE przebadała<br />

łącznie 142 próbki materiału roślinnego, pobranego z roślin upraw sadowniczych.<br />

W przeważającej liczbie [124 szt.] nie stwierdzono pozostałości<br />

chemicznych pestycydów. Niestety w badanym materiale znaleziono w 18<br />

próbkach pozostałości niedozwolonych pestycydów, co stanowi 14% wszystkich<br />

wykonanych analiz. Symptomatyczne jest to, że gwałtowny wzrost liczby<br />

wykrytych substancji, nastąpił w 2010 roku. Stwierdzenie przez jednostkę<br />

certyfikującą, że użyto zabronionego pestycydu, skutkuje cofnięciem certyfikatu,<br />

na produkt z tak potraktowanej <strong>rośliny</strong>. Jednak powszechnie stosowane w<br />

rolnictwie konwencjonalnym syntetyczne pestycydy, migrują poza miejsca ich<br />

użycia i są spotykane także w żywności ekologicznej. Problemem stają się więc<br />

pozostałości niedozwolonych substancji, niezawinione przez rolnika.<br />

Jak podaje Gnusowski i wsp. [2005, 2006] prowadzone w latach poprzednich<br />

badania analityczne polskiej żywności ekologicznej, nie wykazywały zanieczyszczeń<br />

niedozwolonymi substancjami. Natomiast obecne nasze badania, jak<br />

też innych autorów, wskazują na wzrost wykrywalności w ekologicznych produktach,<br />

pozostałości syntetycznych pestycydów [Gnusowski, Nowacka 2008].<br />

Dane ujęte w niniejszej pracy nie wskazują na duże zagrożenie żywności<br />

ekologicznej pozostałościami pestycydów. Jednak skutki zanieczyszczenia<br />

dla firm przetwórczych, po ich wykryciu w dużych, łączonych partiach towaru,<br />

stają się finansowo bardzo dotkliwe. Także konsumenci są zaniepokojeni<br />

wzrostem wykrywalności środków w żywności ekologicznej.<br />

Summary<br />

PROBLEMS OF ORGANIC POMOLOGICAL PLANTS SPECIES<br />

The study contains data collected from organic farms controlled by<br />

certifying unit Ekogwarancja PTRE, in 2008 – 2010. The paper quotes data<br />

on the number of forms, area of agricultural lands, and area of orchards<br />

divided into cultivation groups. The study also presents number of analyses of<br />

forbidden synthetic plant protection means remains in tested plant material.<br />

Achieved results do not indicate significant contamination of pomological<br />

organic cultivations with forbidden means, but their increase during the last<br />

year can be alarming. The survey also points out possible reasons of detected<br />

unpermitted substances in plant material, as well as consequences of their<br />

finding in organic food.<br />

71


72<br />

ZANIECZYSZCZENIE PRZEZ MIKOTOKSYNY<br />

ZIARNA EKOLOGICZNEGO OWSA W ZALEŻNOŚCI<br />

OD SPOSOBU OCHRONY<br />

Adam Kuzdraliński i Ewa Solarska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Biotechnologii, Żywienia Człowieka<br />

i Towaroznawstwa Żywności, ul. Skromna 8, 20-704 Lublin<br />

adamkuzdralinski@gmail.com, ewa.solarska@up.lublin.pl<br />

Występowanie grzybów na wiechach owsa wiąże się z ryzykiem zanieczyszczenia<br />

ziarniaków szkodliwymi dla <strong>zdrowi</strong>a ludzi i zwierząt mikotoksynami,<br />

których koncentracja uzależniona jest m.in. od stopnia odporności odmian<br />

(Bottalico i Perrone 2002, Mesterhazy i in. 1991, Mesterhazy 1997). Prawidłowo<br />

zaplanowane rolnictwo ekologiczne powinno opierać się na uprawie<br />

odpornych na choroby odmian roślin, a praktyki takie uznaje się obecnie za<br />

najskuteczniejszą metodę zapobiegania infekcjom powodowanym przez grzyby<br />

toksynotwórcze (Stankiewicz 2009).<br />

W badaniach uwzględniono odmiany owsa pochodzące z Pokazowego Gospodarstwa<br />

Ekologicznego w Chwałowicach należącego do Centrum Doradztwa<br />

Rolniczego w Brwinowie, Oddział w Radomiu. Próbki ziarna pobrane<br />

zostały w 2009 roku. Każda z odmian uprawiana była na trzech poletkach o wymiarach<br />

4x5 m. Na jednym z powtórzeń nie stosowano żadnych środków ochrony<br />

roślin, na drugim zastosowano preparat Biochikol 020 PC, a na trzecim preparat<br />

własny sporządzony w laboratorium na bazie chitozanu i grzyba Fusarium culmorum.<br />

Na żadnym z poletek nie stosowano nawożenia.<br />

Celem badań była ocena występowania grzybów toksynotwórczych na ziarniakach<br />

odmian owsa uprawianych w systemie produkcji ekologicznej za pomocą<br />

konwencjonalnej analizy mikologicznej oraz metody molekularnej PCR. W ziarniakach<br />

tego zboża określano również koncentrację wybranych mikotoksyn: aflatoksyn,<br />

ochratoksyny A, deoksyniwalenolu, toksyny T-2 i zearalenonu za pomocą<br />

testów immunoenzymatycznych ELISA oraz toksyny HT-2, diacetoscirpenolu,<br />

3-acetyldeoksyniwalenolu, 15-acetyldeoksyniwalenolu i niwalenolu za pomocą<br />

chromatografii gazowej z detektorem wychwytu elektronów (GC-ECD). Za pomocą<br />

metody PCR określano obecność grzybów z rodzaju Fusarium.<br />

Główną przyczyną fuzariozy wiech owsa był grzyb Fusarium poae, a grzybami<br />

towarzyszącymi w powodowaniu tej choroby były gatunki Fusarium gra-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 72-74<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


minearum, Fusarium culmorum, Fusarium tricinctum oraz Fusarium langsethiae.<br />

Grzyby z rodzaju Fusarium statystycznie istotnie częściej wyosabniano<br />

z ziarna owsa odmian Gniady, w porównaniu z odmianą Deresz. Najczęściej<br />

wyosobniano z ziarniaków tego zboża grzyby z rodzaju Alternaria. Z ziarna<br />

owsa odmiany Koneser wyosabniano istotnie więcej grzybów z rodzaju Alternaria,<br />

a istotnie mniej z ziarna odmian Berdysz, Gniady i Polar. Nie stwierdzono<br />

wpływu rodzaju ochrony na liczbę izolatów grzybów z wyjątkiem grzybów z rodzaju<br />

Epicoccum, które wyosabniano statystycznie istotnie rzadziej z poletek<br />

chronionych za pomocą biopreparatu własnego.<br />

Obecność deoksyniwalenolu stwierdzono w ziarniakach 9 spośród 11 odmian<br />

owsa. Dopuszczalny limit zawartości deoksyniwalenolu nie został przekroczony<br />

w żadnej próbce. Zawartość deoksyniwalenolu była statystycznie<br />

istotnie większa w próbkach ziarna owsa z odmiany Krezus, w porównaniu<br />

z odmianami Berdysz, Bingo, Cwał, Deresz, Koneser, Polar, Skorpion i Zuch,<br />

natomiast w próbkach ziarna tego zboża odmian Cwał i Polar nie stwierdzono<br />

obecności tej mikotoksyny. Nie stwierdzono, aby odmiana miała wpływ na<br />

zawartość pozostałych określanych mikotoksyn. Obecność toksyny T-2 stwierdzono<br />

w ziarniakach 10 spośród 11 odmian owsa, a zearalenonu w 6 spośród<br />

11 odmian owsa. Jedynie w próbkach ziarna odmiany Polar nie stwierdzono<br />

obecności toksyny T-2. W próbkach ziarna owsa stwierdzano również niewielką<br />

koncentrację niwalenolu oraz 3-acetyldeoksyniwalenolu. Nie stwierdzono<br />

natomiast obecności aflatoksyn i ochratoksyny A. Nie stwierdzono, aby rodzaj<br />

ochrony miał wpływ na zawartość określanych mikotoksyn.<br />

Summary<br />

MYCOTOXINS CONTAMINATION OF ORGANIC OAT KERNELS<br />

DEPENDING ON METHOD OF PROTECTION<br />

Occurrence of fungi on oat kernels is connected with the risk of mycotoxins<br />

contamination. Properly planned organic farming should be based on the<br />

cultivation of diseases resistant varieties of plants and such practice is now<br />

considered the most effective method of preventing of plant infections caused<br />

by toxigenic fungi.<br />

The aim of this study was the assessment of presence of toxigenic fungi on<br />

oat kernels and mycotoxins concentration from varieties cultivated in organic<br />

farming using conventional mycological analysis, PCR molecular method and<br />

ELISA immunosorbent assay.<br />

Each variety was grown on three plots, one of the plot was not protected<br />

(untreated plot), the second one was protected with Biochikol 020 PC, and<br />

the third was protected with self-made biopreparation based on chitosan and<br />

Fusarium culmorum. None of the plots were fertilized.<br />

73


74<br />

The main cause of Fusarium Head Blight on oats was Fusarium poae.<br />

Another species from genus Fusarium found on oat kernels were: Fusarium<br />

graminearum, Fusarium culmorum, Fusarium tricinctum oraz Fusarium<br />

langsethiae. Fungi from genus Fusarium were statistically significantly more<br />

frequently isolated from Gniady variety in comparison with Deresz. The most<br />

commonly fungi isolated from oat kernels were Alternaria spp. and also these<br />

fungi were statistically significantly more frequently isolated from Koneser<br />

variety in comparison with Berdysz, Gniady and Polar. There was no influence<br />

of protection type on the number of fungal isolates with the exception<br />

of fungi from the genus Epicoccum that were statistically significantly less<br />

frequently isolated from plots protected with self-made biopreparation based<br />

on chitosan and Fusarium culmorum.<br />

Deoxynivalenol was found in 9 out of 11 oats varieties. Deoxynivalenol content<br />

was statistically significantly higher in kernels from Krezus variety in<br />

comparison with Berdysz, Bingo, Cwał, Deresz, Koneser, Polar, Skorpion and<br />

Zuch, while in oat kernels from Cwał and Polar this mycotoxin was not detected.<br />

The presence of T-2 toxin was found in 10 out of 11 oats varieties and<br />

zearalenone in 6 out of 11. T-2 toxin was not detected in kernels from Polar.<br />

Aflatoxins and ochratoxin A were not found. The type of protection had no<br />

impact on the occurrence of determined mycotoxins.<br />

Literatura<br />

Bottalico A., Perrone G., 2002: Toxigenic Fusarium species and mycotoxins<br />

associated with head blight in small-grain cereals in Europe. Journal of<br />

Plant Pathology 108: 998–1003.<br />

Mesterházy Á., 1997: Methodology of resistance testing and breeding against<br />

Fusarium head blight in wheat and results of selection. Cereal Research<br />

Communications 25(3/2): 631-637.<br />

Mesterházy Á., Bartok T., Terren J., Korom A., 1991: Resistance level and toxin<br />

contamination in wheat and corn after artificial inoculation. Mycotoxin<br />

Research 7:64-67.<br />

Stankiewicz D., 2009: Rolnictwo ekologiczne. Biuro Analiz Sejmowych Kancelarii<br />

Sejmu RP. Indos 7(54): 1-4.


SELEKCJA MIKROORGANIZMÓW O POTENCJALNYM<br />

ZASTOSOWANIU W BIOLOGICZNEJ OCHRONIE<br />

ZIEMNIAKA PRZED BAKTERIAMI PEKTYNOLITYCZNYMI<br />

Dorota Krzyżanowska, Marta Potrykus, Ewa Łojkowska<br />

i Sylwia Jafra<br />

Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii UG-GUMed, Katedra Biotechnologii,<br />

Zakład Ochrony i Biotechnologii Roślin, ul. Kładki 24, 80-822 Gdańsk<br />

dorota.krzyzanowska@biotech.ug.gda.pl<br />

Bakterie pektynolityczne Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum<br />

(Pcc), P. atrosepticum (Pba) i Dickeya sp. (Dsp), wcześniej klasyfikowane do<br />

rodzaju Erwinia, istotnie przyczyniają się do strat w uprawie ziemniaka (Ma<br />

i in. 2007). Patogeny te wywołują czarną nóżkę – chorobę przejawiającą się<br />

gniciem podstawy pędu <strong>rośliny</strong> w okresie wegetacyjnym oraz mokrą zgniliznę<br />

przejawiającą się maceracją tkanki zainfekowanych bulw w okresie przechowywania<br />

i wysadzania.<br />

Zakład Ochrony i Biotechnologii Roślin (ZOBR) posiada pokaźną kolekcję<br />

izolatów Dsp, Pcc i Pba. Kolekcja ta rokrocznie poszerzana jest o nowe izolaty<br />

pochodzące z zainfekowanych roślin ziemniaka, w tym o wysoce wirulentne<br />

szczepy z rodzaju Dickeya sp. biowar 3, powodujące duże straty m.in. w Holandii<br />

i Finlandii (Materiały informacyjne SASA 2010). Środki zwalczania<br />

czarnej nóżki i mokrej zgnilizny ograniczają się głównie do działań profilaktycznych,<br />

takich jak stosowanie bardziej odpornych odmian, wolnych od patogenów<br />

sadzeniaków i selekcji zakażonych roślin/bulw. Fakt ten, w połączeniu<br />

z obligatoryjnym wymogiem wprowadzenia zasad integrowanej ochrony roślin<br />

od 2014 r., zachęca do poszukiwania środków ochronnych w oparciu o przyjazne<br />

środowisku rozwiązania, mogące wspomóc ograniczaną ochronę chemiczną<br />

i zaproponować narzędzia rozwijającemu się rolnictwu ekologicznemu.<br />

W ZOBR zainicjowano badania mające na celu izolację i selekcję mikroorganizmów<br />

antagonistycznych względem Dsp, Pcc i Pba, a następnie określenie<br />

możliwości ich wykorzystania do ochrony ziemniaka przed czarną nóżką i mokrą<br />

zgnilizną. W toku podjętych badań z ryzosfery różnych roślin użytkowych<br />

pozyskano 1165 izolatów bakteryjnych. Spośród tej puli wyselekcjonowano 18<br />

szczepów wykazujących in vitro antagonizm względem wybranych szczepów<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 75-78<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

75


76<br />

Dsp, Pcc i/lub Pba (łącznie 9 szczepów patogenów, po 3 z każdego gatunku)<br />

(Jafra i in, in review). Podstawą selekcji szczepów antagonistycznych była:<br />

1) zdolność do hamowania wzrostu co najmniej jednego szczepu patogennego<br />

w teście płytkowym (grupa I) oraz 2) zdolność do inaktywacji cząsteczek sygnałowych<br />

typu laktonów N-acylo homoseryny (AHL) (Jafra i in. 2004), zaangażowanych<br />

w komórkach badanych patogenów w system regulacji ekspresji<br />

czynników wirulencji (grupa II) (Pirhonen i in. 1993, Nasser i in. 1998). Wyizolowane<br />

szczepy antagonistyczne zaklasyfikowano na podstawie sekwencji<br />

16S rDNA do rodzajów Bacillus (1 izolat z grupy I i 6 z grupy II) lub Pseudomonas<br />

(11 izolatów z grupy I).<br />

Wyselekcjonowane izolaty przetestowano pod kątem zdolności do hamowania<br />

lub ograniczania maceracji tkanki bulw ziemniaka (odmiana Sante),<br />

powodowanej przez Dsp, Pcc i Pba (test koinokulacji plastrów bulw szczepami<br />

patogennymi i antagonistami). W przypadku Dsp przeprowadzono również<br />

analogiczny test na liściach cykorii. W wyniku przeprowadzonych doświadczeń<br />

wykazano, że nie ma szczepu zdolnego jednocześnie i skutecznie hamować<br />

wirulencję wszystkich przetestowanych patogenów w in planta. Testy na<br />

plastrach ziemniaka pokazały, że: 1) szczepy antagonistyczne z grupy I efektywnie<br />

(powyżej 50%) redukują macerację tkanki bulwy ziemniaka, powodowaną<br />

przez szczepy Pcc; 2) szczepy antagonistyczne z grupy II są zdolne do<br />

redukcji symptomów mokrej zgnilizny, powodowanej przez szczepy Dsp i Pba.<br />

W testach na liściach cykorii większość szczepów z grupy II zachowała zdolność<br />

do ograniczenia symptomów chorobowych, wywoływanych na tkance roślinnej<br />

przez Dsp, chociaż ich skuteczność była niższa niż na w teście na plastrach<br />

ziemniaka. Jednocześnie 4 szczepy z grupy I, wykazujące niską skuteczność<br />

w teście plastrowym, były zdolne do niemal całkowitego hamowania gnicia<br />

liści cykorii przez patogeny z rodzaju Dsp.<br />

Każdy z 18 izolatów przebadano również pod kątem produkcji sideroforów<br />

(Schwyn i in. 1987) oraz zdolności do ruchu. Cechy te uważane są za istotne<br />

w zasiedlaniu niszy ekologicznej (np. korzeni roślin) przez mikroorganizmy.<br />

Występowanie tych cech było kryterium pomocnym przy ocenie szczepów pod<br />

kątem ich wykorzystania jako biologicznych środków ochrony roślin.<br />

Wyniki przeprowadzonych testów pozwoliły na zawężenie liczby badanych<br />

szczepów antagonistycznych do 3: dwóch izolatów Pseudomonas sp. z grupy I<br />

(P103, P482) i jednego izoalatu Bacillus sp. z grupy II (P368). Wyselekcjonowane<br />

izolaty charakteryzują się zdolnością do redukcji maceracji tkanki roślinnej,<br />

dużą ruchliwością i zdolnością do wydajnego pobierania żelaza z otoczenia<br />

(produkcja sideroforów). Obecnie prowadzone są badania nad zdolnością<br />

szczepów P103, P482 i P368 do kolonizacji ryzosfery ziemniaka (odmiany Irys<br />

i Irga) w warunkach fitotronu. Dalsze badania obejmą testy dotyczące wpływu<br />

inokulacji roślin szczepami ochronnymi na populację patogenów powodujących


czarną nóżkę i mokrą zgniliznę. W przypadku pomyślnej selekcji efektywnego<br />

szczepu przeprowadzona zostanie identyfikacja kluczowego czynnika(ów)<br />

odpowiedzialnego za wykazywany efekt ochronny, a także przeanalizowane<br />

zostaną niektóre cechy (np. przeżywalność, produkcja roślinnych regulatorów<br />

wzrostu, aktywność przeciwgrzybicza) ważne z perspektywy komercyjnego<br />

wykorzystania szczepów (więcej informacji w literaturze przeglądowej (Kohl<br />

i in. 2011). Pożądanym efektem projektu jest wyselekcjonowanie stosunkowo<br />

niedrogimi metodami in vitro możliwie najbardziej obiecujących szczepu(ów),<br />

o właściwościach predestynujących je do podjęcia bardziej kosztownych testów<br />

w warunkach polowych.<br />

Summary<br />

SELECTION OF MICROORGANISMS WITH POTENTIAL IN<br />

BIOCONTROL OF BACTERIAL SOFT ROT PATHOGENS OF POTATO<br />

Pectinolytic plant pathogens of the genera Pectobacterium and Dickeya<br />

(formerly Erwinia spp.) are the causative agents of blackleg and soft rot of potato<br />

– bacterial diseases contributing to an economically significant loss in potato crop.<br />

Laboratory of Plant Protection and Biotechnology possess a collection of bacterial<br />

isolates antagonistic towards these pathogens. The antagonism observed in vitro<br />

between pectinolytic bacteria and the selected isolates depends on 1) inhibition<br />

of pathogens growth (isolates of group I) or 2) inhibition of the Quorum Sensingdependant<br />

production of virulence factors (group II members). The goal of the<br />

current project is to evaluate the potential of these strains to attenuate soft rot<br />

and blackleg in vivo. Initial trials aimed at narrowing the number of isolates<br />

tested to a relatively small group. Finding reliable criteria to reduce the<br />

number of strains under study is important as the growing costs of subsequent<br />

trials unable testing a vast amount of candidates. In this study, ability to<br />

attenuate plant tissue maceration, siderophore production and motility (the<br />

latter two wildly considered as fitness-related traits) were considered when<br />

evaluating the candidates. Currently, the number of antagonistic strains<br />

under study was reduced from 18 to 3 (two Pseudomonas sp. from group I and<br />

one Bacillus sp. from group II). Selected candidates show promising protective<br />

potential in potato tissue maceration assay and are positive for siderophore<br />

production and motility – traits believed important for the competitiveness of<br />

microorganisms in the environment. The selected strains will undergo more<br />

detailed study, both biochemical and the space-consuming tests on vegetative<br />

potato plants. During the research, an emphasis will be placed on the efficacy<br />

of the strains and their potential features considered important for biological<br />

control agents.<br />

77


78<br />

Literatura<br />

Jafra et al., 2004: J Microbiol Meth 57: 415–420.<br />

Jafra et al., in review;<br />

Kohl et al., 2011: Biological Control 57: 1–12.<br />

Ma et al., 2007: <strong>Phytopathology</strong> 97: 1150–1163.<br />

Materiały informacyjne SASA - Science and Advice for Scottish Agriculture<br />

(2010).<br />

Nasser et al., 1998: Molecular Microbiolgy 29: 1391–1405.<br />

Pirhonen et al., 1993: EMBO Journal 12: 2467–2476.<br />

Schwyn et al., 1987: Anal Biochem 160: 46–56.


WYSTĘPOWANIE FUSARIUM SPP. NA KŁOSACH<br />

I ZIARNIE PSZENICY OZIMEJ UPRAWIANEJ<br />

W RÓŻNYCH SYSTEMACH UPRAWY I MONOKULTURZE<br />

Leszek Lenc i Czesław Sadowski<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy w Bydgoszczy, Katedra Fitopatologii<br />

i Mikologii Molekularnej, ul. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

lenc@utp.edu.pl<br />

Grzyby rodzaju Fusarium mogą być przyczyną występowania chorób pszenicy<br />

przez cały okres jej wegetacji. Zgorzele siewek i podstawy źdźbła czy porażenie<br />

liści mogą znacznie obniżać plon, natomiast fuzarioza kłosów oraz zasiedlenie<br />

ziarna przez te grzyby może przyczynić się również do pogorszenia jakości ziarna<br />

skażając go mikotoksynami. Nasilenie występowania fuzariozy kłosów w latach<br />

jest zróżnicowane i zależy przede wszystkim od warunków pogodowych w okresie<br />

kwitnienia zbóż oraz od zabiegów agrotechnicznych i uprawianych odmian.<br />

Celem podjętych obserwacji było określenie nasilenia objawów fuzariozy<br />

kłosów oraz zasiedlenia ziarna przez Fusarium spp. pszenicy ozimej uprawianej<br />

w systemach: ekologicznym, integrowanym, konwencjonalnym oraz w monokulturze.<br />

Obserwacje prowadzono w latach 2002–2010 na polach doświadczalnych w<br />

Osinach należących do IUNG PIB w Puławach. Obiektem doświadczalnym były<br />

dwie odmiany pszenicy ozimej: w 2002 roku – ‘Juma’ i ‘Elena’, w latach 2003<br />

– 2007 ‘Sukces’ i ‘Zyta’ natomiast w 2008 – 2010 ‘Legenda’ i ‘Rywalka’. Nasilenie<br />

fuzariozy kłosów określano w fazie dojrzałości mleczno-woskowej. Z każdej<br />

kombinacji doświadczalnej analizowano 4 x 100 losowo wybranych kłosów i oceniano<br />

występowanie objawów chorobowych w skali 6-stopniowej (0-5), w której<br />

0 oznaczało brak objawów chorobowych, 5 – objawy obejmujące powyżej 50% powierzchni<br />

kłosa. Na tej podstawie ustalono procent porażonych kłosów, a następnie<br />

obliczono indeks porażenia (IP) wg wzoru Townsenda i Heubergera.<br />

W latach 2005 – 2010 wykonano analizę mikologiczną zebranego ziarna.<br />

Z próby zbiorczej każdej kombinacji pobrano 4 x 100 ziarniaków, odkażano<br />

przez 2,5 min. w 1% NaOCl i wykładano na pożywkę PDA. Uzyskane kolonie<br />

oznaczano mikroskopowo wg kluczy mikologicznych. Poprawność oznaczenia<br />

gatunków Fusarium sprawdzano (losowo) metodą molekularną (PCR) przy<br />

użyciu specyficznych gatunkowo starterów typu SCAR.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 79-81<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

79


80<br />

Fuzarioza kłosów w poszczególnych latach obserwacji wystąpiła w różnym<br />

nasileniu. Najwięcej objawów chorobowych obserwowano w 2002 roku (21,3%<br />

- uprawa konwencjonalna i 38,3% monokultura) oraz w 2004 i 2007 roku (odpowiednio<br />

7,2 i 7,0% - uprawa ekologiczna oraz 20,1 i 20,3% monokultura).<br />

W latach 2003, 2009 i 2010 objawy chorobowe obserwowano na 0,5% – 8,3%<br />

kłosach, natomiast w 2005 i 2006 procent porażonych kłosów wynosił od 0% do<br />

1,1%. Nasilenie fuzariozy w zależności od sposobu uprawy w poszczególnych<br />

latach było zróżnicowane. W latach 2002, 2003, 2004 i 2007 najwięcej objawów<br />

chorobowych obserwowano na kłosach pszenicy uprawianej w monokulturze<br />

natomiast w 2009 roku na pszenicy z systemu ekologicznego. Ponadto obliczenia<br />

statystyczne wykazały, że w 2002 roku w systemie integrowanym a w<br />

2007 roku w konwencjonalnym porażenie kłosów było na tym samym poziomie<br />

co w monokulturze. W latach 2005, 2006, 2008 i 2010 nie stwierdzono statystycznie<br />

istotnych różnic w nasileniu choroby w zależności od sposobu uprawy.<br />

Analiza mikologiczna również wykazała pewne zróżnicowanie w zasiedleniu<br />

ziarniaków przez Fusarium spp. (tab. 1). Najwięcej izolowano F. poae następnie<br />

F. avenaceum, F. tricinctum, F. culmorum, F. graminearum.<br />

Tabela 1. Grzyby rodzaju Fusarium wyizolowane z ziarniaków pszenicy ozimej, Osiny 2005 – 2010<br />

Procent zasiedlonych ziarniaków<br />

System uprawy<br />

Sukces Zyta<br />

2005 2006 2007 Śr. 2005 2006 2007 Śr.<br />

Ekologiczny 2,2 2,0 9,3 4,5 5,8 4,0 20,8 10,2<br />

Integrowany 1,0 3,0 24,8 9,6 9,0 6,3 27,3 14,2<br />

Konwencjonalny 8,7 10,0 18,8 12,5 6,2 12,8 32,5 17,2<br />

Monokultura 4,0 4,0 25,3 11,1 10,5 4,0 29,8 14,8<br />

System uprawy<br />

2008<br />

Legenda<br />

2009 2010 Śr. 2008<br />

Rywalka<br />

2009 2010 Śr.<br />

Ekologiczny 0,2 9,0 14,2 7,8 2,3 17,0 15,3 11,5<br />

Integrowany 2,0 14,0 3,7 6,6 3,0 15,0 2,8 6,9<br />

Konwencjonalny 7,6 19,0 5,2 10,6 7,4 23,0 2,0 10,8<br />

Monokultura 1,2 16,0 7,2 8,1 0,2 12,0 3,7 5,3<br />

Summary<br />

OCCURENCE OF FUSARIUM SPP. ON EARS AND KERNELS<br />

OF WINTER WHEAT GROWN IN VARIOUS CROPPING SYSTEMS<br />

AND MONOCULTURE<br />

Observations were carried out on winter wheat in 2002-2010 on experimental<br />

fields in Osiny owned by Institute of Soil Science and Plant Cultivation – State<br />

Research Institute in Pulawy. Fusarium head blight severity varied each year.


In years 2002, 2003, 2004 and 2007, most symptoms were observed on the ears<br />

of wheat grown in monoculture and in 2009 on wheat from organic system.<br />

In years 2005, 2006, 2008 and 2010 there was no statistically significant<br />

differences in disease severity depending on the crop. Among fungi from genus<br />

Fusarium isolated from kernels F. poae dominated followed by F. avenaceum,<br />

F. tricinctum, F. culmorum, F. graminearum<br />

81


82<br />

MAPA GENETYCZNA STAGONOSPORA NODORUM<br />

Edward Arseniuk, Ewelina Reszka i Arkadiusz Małkus<br />

Zakład Fitopatologii, Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy<br />

Instytut Badawczy w Radzikowie, 05-870 Błonie<br />

e.arseniuk@ihar.edu.pl<br />

Stagonospora nodorum jest czynnikiem sprawczym septoriozy liści i plew<br />

roślin zbożowych oraz traw. Należący do patogenów nekrotroficznych grzyb<br />

powoduje istotne ekonomicznie straty poprzez zmniejszenie ilości i jakości<br />

plonu ziarna. Grzyb wytwarza także fitotoksyny np. septorynę i ochracynę<br />

zaburzające wzrost i przebieg procesów życiowych porażonych roślin. Zakres<br />

temperatury w granicach 20 – 25 o C oraz umiarkowana wilgotność względna<br />

powietrza są czynnikami korzystnie wpływającymi na dojrzewanie i uwalnianie<br />

zarodników workowych i piknidialnych S. nodorum z resztek pożniwnych.<br />

Zarodniki stadium workowego rozsiewane z prądami powietrza najczęściej<br />

stanowią pierwotne źródło inokulum patogena. Okres intensywnego wysypu<br />

zarodników workowych to sierpień – październik w warunkach klimatu<br />

umiarkowanego półkuli północnej. Wtórnym źródłem inokulum są zarodniki<br />

piknidialne rozpryskiwane z kroplami deszczu. Dodatkowo, ziarniaki przerośnięte<br />

grzybnią patogena stanowią kolejne źródło rozprzestrzeniania patogena,<br />

wywołującego chorobę siewek w czasie kiełkowania.<br />

W IHAR-PIB w Radzikowie prowadzone są badania zmienności zdolności<br />

chorobotwórczych populacji S. nodorum. Doświadczenia te prowadzone są<br />

równolegle z monitorowaniem odporności uprawianych odmian, materiałów<br />

hodowlanych oraz identyfikacji źródeł odporności. Prowadzone są także badania<br />

nad poznaniem struktury i organizacji genomów celem zlokalizowania<br />

zarówno genów odporności u roślin, jak i genów wirulencji u patogenów biotroficznych<br />

oraz patogeniczności i agresywności u patogenów nekrotroficznych.<br />

Realizacji wyżej wymienionych celów służy m.in. mapowanie genetyczne z wykorzystaniem<br />

markerów molekularnych.<br />

Dynamiczny rozwój badań molekularnych, zapoczątkowany na początku<br />

ubiegłego wieku przez Morgana, istotnie przyczynił się do rozwoju technik<br />

badania polimorfizmu DNA z użyciem wielu typów markerów molekularnych.<br />

Mapowanie pozwala na identyfikację genów, wykrywalnych tylko na podstawie<br />

ich efektu genotypowego.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 82-84<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Wśród roślin zbożowych nie wykryto kompletnej odporności na grzyby<br />

Stagonospora spp., w tym na S. nodorum. Dlatego w hodowli odpornościowej<br />

wykorzystuje się odporność częściową. U wielu gatunków grzybów patogenicznych,<br />

szczególnie z grupy nekrotrofów, takie cechy jak patogeniczność, czy<br />

zdolność zarodnikowania warunkowane są wieloma genami o niższym efekcie<br />

jednostkowym. Poligeniczne dziedziczenie patogeniczności jest też cechą<br />

charakterystyczną dla S. nodorum. Stworzenie, więc mapy genetycznej stanowi<br />

podstawę do poszukiwania loci cech ilościowych QTL (Quantitative Traits<br />

Loci), a do tej kategorii cech należą zarówno patogeniczność, jak i odporność<br />

zbóż na badanego patogena.<br />

Celem pracy było więc skonstruowanie mapy genetycznej z wykorzystaniem<br />

markerów molekularnych typu RAPD, AFLP, a także wysoko polimorficznych<br />

markerów ISSR (inter-simple sequence repeat). Do zagęszczenia mapy molekularnej<br />

użyto także mikrosatelitarnych markerów EST-SSR oraz genów.<br />

Analizie molekularnej poddano 152 izolaty, wyprowadzone z pojedynczych<br />

askospor, uzyskane ze skrzyżowania in-vitro dwóch izolatów o przeciwstawnych<br />

typach kojarzeniowych (MAT-1, MAT-2). Łącznie do konstrukcji mapy<br />

posłużyło 330 loci. Mapę konstruowano przy użyciu programu JoinMap® 4.0.<br />

Analizę przeprowadzono przy progu istotności (LOD value) na poziomie 3.5.<br />

Summary<br />

GENETIC LINKAGE MAP OF STAGONOSPORA NODORUM<br />

Stagonospora nodorum is a causal agent of a disease called Septoria<br />

nodorum blotch (SNB), one of the most important diseases of cereals and<br />

grasses. The necrotrphic fungus causes highly significant economic losses<br />

by decreasing yield and seed quality. The fungus is producing phytotoxins:<br />

septorin and ochracin, reducing seedling growth and affecting life processes<br />

of infected plants. The temperature range from 20 – 25 o C and moderate<br />

air humidity are advantageous factors affecting maturation and releasing<br />

ascospores and pycnidiospores from plant debris. Ascospores spread by air are<br />

primary source of inoculum. Season of the most intensive spread of ascospores<br />

lasts from August through October in a moderate climatic zone of a northern<br />

hemisphere. Another type of pathogen spores, pycnidiospores splashed in rain<br />

drops become secondary source of inoculum. Mycelium in the infected seeds<br />

can infect seedling coleoptile at germination and this way to perpetuate the<br />

disease.<br />

In IHAR Radzikow a project was undertaken to study variability of<br />

pathogenicity in Polish S. nodorum population. The project is being run<br />

simultaneously with monitoring of changes in plant resistance of breeding<br />

materials in order to identify sources of resistance to SNB. There is also<br />

83


84<br />

research being done to determine the structure and organization of S. nodorum<br />

genome. The aim of this study is to localize genes of resistance on plant<br />

chromosomes and virulence genes on chromosomes of biotrophic pathogens,<br />

also pathogenicity and aggressiveness genes on chromosomes of necrotrophic<br />

S. nodorum. To achieve these aims genetic mapping was performed.<br />

Dynamic development of molecular techniques contributed to studies of<br />

DNA polymorphism. The mapping gives opportunity to identify genes only<br />

through their genotypic effects. This is of importance because until the present<br />

time complete resistance to Stagonospora spp. was not detected among<br />

cereals. Amongst many species of pathogenic fungi, especially necrotrophes,<br />

pathogenicity and sporulation are also conditioned by many genes. Polygenic<br />

inheritance of pathogenicity is also characteristic to S. nodorum. Genetic<br />

linkage maps are a fundamental tool for QTL-s (Quantitative Traits Loci)<br />

search in plants as well as in pathogenic fungi.<br />

The aim of this work was to construct a genetic linkage map of S. nodorum<br />

by employing molecular markers selection. RAPD, AFLP, highly polymorphic<br />

ISSR markers and some genes were used in this study. For a better density of<br />

S. nodorum map EST-SSR markers were added. 152 offspring isolates derived<br />

from a single pseudothecium which resulted from a cross of two opposite<br />

mating type isolates were used. Together 330 loci were identified and placed<br />

on genetic map using JoinMap®4.0. at LOD value 3.5.


WYKORZYSTANIE REAL TIME PCR DO ILOŚCIOWEGO<br />

OZNACZANIA FUSARIUM CULMORUM I GENÓW<br />

WARUNKUJĄCYCH PRODUKCJĘ TRICHOTECENÓW<br />

W ZIARNIE PSZENICY OZIMEJ<br />

Aleksander Łukanowski, Anna Baturo-Cieśniewska<br />

i Czesław Sadowski<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

luk-al@utp.edu.pl<br />

Fuzarioza kłosów stanowi jeden z najpoważniejszych problemów w uprawie<br />

zbóż, zwłaszcza pszenicy (Triticum aestivum L.). Jest przyczyną znacznego<br />

spadku plonów oraz obniżenia jakości zebranego ziarna, ze względu na jego zanieczyszczenie<br />

mikotoksynami – wysoce toksycznymi produktami wtórnego metabolizmu<br />

grzybów ją wywołujacych. Jednym z nich jest Fusarium culmorum,<br />

znany producent mikotoksyn z grupy trichotecenów: deoksyniwalenolu (DON)<br />

i jego pochodnych, niwalenolu (NIV), toksyny T-2 a także zearalenonu (ZEA).<br />

W celu ograniczenia występowania choroby stosuje się chemiczne zwalczanie<br />

jej sprawców za pomocą fungicydów. Dane literaturowe wskazują jednak,<br />

że zastosowanie fungicydów nie zawsze gwarantuje uzyskanie oczekiwanego<br />

efektu, a czasami nawet użycie niektórych ich substancji aktywnych może<br />

zwiększać stężenie mikotoksyn w ziarnie.<br />

Badania zostały podjęte w celu określenia czy: (i) substancje aktywne kilku<br />

fungicydów zastosowanych w różnych dawkach do zwalczania fuzariozy<br />

kłosów pszenicy mogą wpłynąć w zróżnicowany sposób na występowanie Fusarium<br />

culmorum w ziarnie oraz (ii) czy mają one wpływ na ilość tworzonych<br />

przez ten gatunek mikotoksyn w ziarnie.<br />

Badania prowadzono w Stacji Doświadczalnej Oceny Odmian w Lisewie<br />

Malborskim (Żuławy Wiślane). Kłosy pszenicy na wybranych poletkach w fazie<br />

pełni kłoszenia (ZGS- 59) opryskiwano metkonazolem (Caramba 60 SL,<br />

BASF), azoksystrobiną (Amistar 250 SC, Syngenta Crop Protection) i protiokonazolem<br />

z tebukonazolem (Prosaro) w trzech dawkach stanowiących:<br />

zmniejszoną, pełną, i zwiększoną w stosunku do zalecanej przez producenta<br />

dawki. Następnie, w fazie kwitnienia (ZGS-65) kłosy inokulowano zawiesiną<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 85-87<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

85


86<br />

zarodników (o stężeniu 10 6 ·ml - 1) różnych szczepów F. culmorum różniących<br />

się pod względem ilości produkowanego deoksyniwalenolu pochodzących z<br />

pszenicy ozimej.<br />

Po zbiorze, z 14g próbek ziarna z poszczególnych kombinacji doświadczalnych<br />

izolowano DNA a następnie przeprowadzono serię analiz techniką<br />

Real-Time PCR z wykorzystaniem aparatu Light Cycler 480II firmy Roche<br />

(Szwajcaria) i barwnika SYBR Green I. Wykorzystano specyficzne gatunkowo<br />

startery do ilościowego określania obecności F. culmorum w ziarnie, a także<br />

wykonano serię testów ilościowych na obecność produktu amplifikacji fragmentu<br />

genu Tri5 warunkującego zdolność badanych izolatów do tworzenia<br />

mikotoksyn z grupy trichotecenów.<br />

Uzyskane wyniki porównywano z wynikami analiz chromatograficznych<br />

pod katem korelacji ilości kopii danego genu z rzeczywista ilością mikotoksyn<br />

wytwarzanych dzięki ekspresji tego genu.<br />

Summary<br />

THE USE OF REAL TIME PCR TECHNIQUE FOR QUANTITATIVE<br />

ANALYSIS OF FUSARIUM CULMORUM AND GENES CODING<br />

PRODUCTION OF TRICHOTHECENES IN WINTER WHEAT KERNELS<br />

Fusarium head blight (FHB) is one of the most serious problems in the<br />

cultivation of cereals, especially wheat (Triticum aestivum L.). It results in<br />

significant yield decrease and lower quality of harvested grain, because of<br />

its mycotoxin contamination - a highly toxic secondary metabolic products of<br />

fungi causing it. One of them is Fusarium culmorum, widely known producer<br />

of mycotoxins from trichothecene group: deoxynivalenol (DON) and its<br />

derivatives, nivalenol (NIV), T-2 toxin and zearalenone (ZEA).<br />

In order to reduce the incidence of disease, fungicides are used. Literature<br />

data indicate, however, that the application of fungicides does not always<br />

guarantee to get the desired effect, and sometimes even use some of their<br />

active substances may increase the concentration of mycotoxins in kernels.<br />

The study was conducted to determine whether: (i) active substances<br />

of several fungicides applied at different doses to control FHB can affect<br />

occurrence of Fusarium culmorum in kernels, and (ii) whether they affect the<br />

quantity of mycotoxins produced by this species in kernels.<br />

The study was conducted at the Experimental Station for Variety Testing in<br />

Lisewo Malborskie (Żuławy Wiślane). Ears in the phase of full tillering (ZGS-<br />

59) were sprayed with metconazole (Caramba 60 SL, BASF), azoxystrobin<br />

(Amistar 250 SC, Syngenta Crop Protection) and prothioconazole with<br />

tebuconazole (Prosaro) in three doses, which were: reduced, full, and increased<br />

in relation to the manufacturer’s recommended dose. Then, in the flowering


stage (ZGS-65), ears were inoculated with spore suspension (at a concentration<br />

of 10 6 ∙ml -1 ) of different strains of F. culmorum isolated from winter wheat<br />

differing in quantity of produced DON.<br />

After harvest, DNA from 14g kernel samples from each combination was<br />

isolated and then there were conducted a series of analyses with Real-Time<br />

PCR technique using a LightCycler 480II manufactured by Roche (Switzerland)<br />

and SYBR Green I dye. There were used species-specific primers to quantify<br />

the presence of F. culmorum in kernels. It was also conducted a series of<br />

quantitative tests for the presence of: Tri5 gene fragment coding potential<br />

ability of tested isolates to produce trichothecenes.<br />

The results were compared with those obtained from chromatographic<br />

analysis for correlation of gene copy number with actual concentrations of<br />

mycotoxins.<br />

87


88<br />

PATOGENICZNOŚĆ I CHARAKTERYSTYKA<br />

GENETYCZNA IZOLATÓW PHOMOPSIS DIACHENII<br />

SACC. UZYSKANYCH Z KMINKU ZWYCZAJNEGO<br />

CARUM CARVI L.<br />

Zofia Machowicz-Stefaniak, Ewa Zalewska, Ewa Król<br />

i Barbara Kowalik<br />

University of Life Science, Department of <strong>Phytopathology</strong> and Mycology,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20- 069 Lublin<br />

zofia.machowicz@up.lublin.pl<br />

Grzyby z rodzaju Phomopsis występują powszechnie na roślinach z różnych<br />

grup botanicznych. Do licznych gatunków wykrytych na roślinach przyprawowych<br />

i leczniczych należą P. sclarea, P. subordinaria, P. levandulae. Do gatunków<br />

występujących na roślinach baldaszkowatych należą P. foeniculi i P.<br />

diachenii. W opracowaniach mikologicznych za pierwotnego gospodarza P. diachenii<br />

podawany jest pasternak zwyczajny i długo nie przypuszczano, że grzyb<br />

może porażać także inne <strong>rośliny</strong> baldaszkowate. W latach 2006 i 2007 P. diachenii<br />

izolowano z roślin kminku zwyczajnego w południowo-wschodniej Polsce.<br />

W testach patogeniczności uwzględniono rodzime izolaty grzyba oraz rozłupki<br />

i wyhodowane z nich <strong>rośliny</strong> odmiany Konczewicki. Testowano: oddziaływanie<br />

płynów pohodowlanych oraz wodnej zawiesiny zarodników czterech izolatów<br />

P. diachenii na zdolność kiełkowania rozłupek; oddziaływanie wodnej zawiesiny<br />

zarodników oraz krążków zarodnikującej grzybni na zranione i nie zranione<br />

fragmenty łodyg; oddziaływanie wodnej zawiesiny zarodników na zdrowotność<br />

siewek inokulowanych przez zraniony i nie zraniony hypokotyl.<br />

W wyniku przeprowadzonych obserwacji i reizolacji grzyba z zakażonych części<br />

roślin badane izolaty P. diachenii uznano za patogeniczne dla kminku zwyczajnego.<br />

Grzyb powodował zahamowanie kiełkowania rozłupek do 90%, nekrozę<br />

kiełków, nekrozę fragmentów łodyg oraz siewek, niezależnie od sposobu infekcji.<br />

W badaniach genetycznych uwzględniono zarówno rodzime izolaty P. diachenii<br />

jak i izolaty otrzymane z południowej części Niemiec. Do określenia podobieństwa<br />

genetycznego w obrębie populacji tego grzyba zastosowano analizę<br />

plimorfizmu DNA amplifikowanego losowo (RAPD). Spośród 15 losowo wybranych<br />

starterów , 3 okazały się przydatne do określenia zależności między badanymi<br />

izolatami. Liczba wytwarzanych z nimi produktów RAPD wynosiła od<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 88-90<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


1 do 7, a ich wielkość zawierała się w przedziale od 399 pz do 3000 pz. Genotypy<br />

P. diachenii pochodzące z kminku uprawianego w warunkach Polski nie wykazywały<br />

wyraźnego zróżnicowania w otrzymanych profilach DNA. Uzyskane wzory<br />

prążkowe posłużyły do wyliczenia współczynników podobieństwa i skonstruowania<br />

dendrogramów. Okazało się, że niezależnie od użytego startera, wydzielano<br />

dwie główne grupy skupień, w których zwykle wyodrębniano jeszcze podgrupy.<br />

Generalnie izolaty rodzime P. diachenii pochodzące z okolic Lublina cechowały<br />

się większą homogenicznością niż izolaty obce.<br />

Summary<br />

PATHOGENICITY AND GENETIC CHARACTERIZATION<br />

OF PHOMOPSIS DIACHENII SACC. ISOLATES OBTAINED FROM<br />

CARAWAY CARUM CARVI L.<br />

Fungi from the genus Phomopsis are known as commonly occurring<br />

pathogenes of plants from various botanical groups. Many species were identified<br />

both on spices and herbs included P. sclareae, P. subordinaria, P. lavandulae. P.<br />

foeniculi and P. diachenii belonging to the species occurred on Apiaceae plants.<br />

According to the mycological literature parsnip was recognized as the first<br />

host of P. diachenii and it was not expected that this species could infect other<br />

Apiaceae plants for a long time. P.diachenii was isolated from caraway plants<br />

in south-east of Poland in the years 2006 and 2007.<br />

In the pathogenicity tests the native isolates of the fungus as well as<br />

schizocarps and the Konczewicki cultivar plants grown from them were used.<br />

The following combination were studied: influence of post-culture liquid and<br />

water suspension of spores on schizocarp germination; influence of water<br />

suspension of spores and discs of mycelium carrying spores of P.diachenii on<br />

injured and uninjured parts of stems; influence of water suspension of spores on<br />

healthiness of seedlings inoculated by injured and uninjured hypocotyl.<br />

As the result of observations and reisolations of the fungus from the infected<br />

plant parts, isolates of P. diachenii were recognized as pathogenic to caraway.<br />

This fungus caused inhibition of schizocarps germination to 90%, germs necrosis,<br />

as well as necrosis of stem parts and seedlings, regardless of infection manner.<br />

In the genetic studies both native isolates of P. diachenii as well as isolates<br />

kindly provided from south part of Germany were evaluated. In order to<br />

determine genetic relationships within population of this fungus the random<br />

amplification of polymorphic DNA (RAPD) technique was used. Three out of 15<br />

randomly chosen primers, were useful for determination of genetic variability<br />

among the studied isolates. The number of amplified DNA fragments ranged<br />

from 1 to 7 per primer with sizes between 399 bp and 3000 bp. Genotypes of P.<br />

diachenii originated from caraway cultivated in Polish conditions were not clearly<br />

differentiated in their DNA profiles. On the basis of variable banding patterns<br />

89


90<br />

obtained, similarity coefficients values were evaluated and dendrograms were<br />

constructed. It was shown that independently of the primers used, two main<br />

groups of isolates were separated, and within them the subgroups were usually<br />

identified. Isolates of P. diachenii originated from Lublin region were generally<br />

more homogenous than the foreign ones.


NOWA METODA OKREŚLANIA GENETYCZNEGO<br />

ZRÓŻNICOWANIA SPRAWCÓW RAKA BAKTERYJNEGO<br />

DRZEW OWOCOWYCH<br />

Monika Kałużna, Joanna Puławska i Piotr Sobiczewski<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

monika.kaluzna@insad.pl<br />

Rak bakteryjny występuje we wszystkich rejonach uprawy drzew owocowych<br />

na świecie. Obok brunatnej zgnilizny, należy do najgroźniejszych<br />

chorób drzew pestkowych. Rak bakteryjny atakuje wszystkie organy części<br />

nadziemnej, powodując zmniejszenie plonu owoców, a niekiedy zamieranie całych<br />

drzew. Sprawcą raka jest polifagiczna bakteria Pseudomonas syringae<br />

powodująca choroby ponad 180 gatunków roślin, jednorocznych i wieloletnich.<br />

Wśród szczepów porażających drzewa owocowe wyróżnia się patowary syringae<br />

i morsprunorum, a w tym 2 rasy. Należą one odpowiednio do genomogatunków<br />

1, 2 i 3, wskazując ich specjalizację patogeniczną. Patowary P. syringae<br />

różnią się zakresem roślin-gospodarzy oraz sposobem zakażania drzew.<br />

Diagnostyka raka bakteryjnego oparta jest na fenotypowej charakterystyce<br />

jego sprawcy. Badania nad genetycznym zróżnicowaniem patogena wykazały,<br />

że patowar morsprunorum jest jednorodny, a w jego obrębie wyróżnia się dwie<br />

homogeniczne rasy. Natomiast patowar syringae jest wysoce heterogenny nawet<br />

gdy izolaty pochodzą z tego samego gatunku <strong>rośliny</strong> – gospodarza i rejonu<br />

geograficznego (Kałużna i in. 2010).<br />

W ramach badań własnych opracowano charakterystykę 150 izolatów<br />

P. syringae wyosobnionych z różnych organów czereśni, wiśni, brzoskwini<br />

i śliwy z objawami chorobowymi, pochodzących z różnych rejonów Polski. Zastosowane<br />

metody konwencjonalne: testy LOPAT, (Lelliot i in. 1966) (wytwarzanie<br />

lewanu z sacharozy, obecność oksydazy, aktywność pektynolityczna na<br />

ziemniaku, obecność dihydrolazy argininy, reakcja nadwrażliwości na tytoniu)<br />

oraz testy GATTa (Lattore i Jones 1979) (upłynnianie żelatyny, aktywność<br />

β-glukozydazy, aktywność tyrozynazy, wykorzystanie kwasu winowego)<br />

oraz test na wykorzystanie L-mleczanu pozwoliły na zaklasyfikowanie 112<br />

izolatów do patowaru syringae, 32 izolatów do patowaru morsprunorum rasa<br />

1 oraz 6 izolatów do patowaru morsprunorum, rasa 2.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 91-94<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

91


92<br />

W celu określania zróżnicowania genetycznego i pokrewieństwa izolatów<br />

zastosowano metodę Melting Profile PCR (PCR MP) (Masny i Płucienniczak<br />

2003) dotychczas używaną głównie w badaniach patogenów człowieka, wprowadzając<br />

modyfikację własną dotyczącą zastosowanej endonukleazy oraz<br />

temperatury denaturacji. Metoda obejmuje trzy główne etapy: trawienie enzymem<br />

restrykcyjnym, ligację oligonukleotydowych adapterów odpowiadających<br />

miejscom cięcia i amplifikację produktów ligacji przy zastosowaniu niskiej<br />

temperatury denaturacji T d (80-88°C). PCR MP pozwala na zróżnicowanie<br />

bakterii, nawet na poziomie szczepu, w oparciu o różnorodność zawartości par<br />

GC i długości fragmentów genomowego DNA uzyskane po trawieniu fragmentów<br />

endonukleazami (Masny i Płucienniczak 2003).<br />

Uzyskane wyniki potwierdziły jednorodność ras w obrębie patowaru morsprunorum<br />

wykazaną w charakterystyce fenotypowej oraz zróżnicowanie izolatów<br />

zaklasyfikowanych do patowaru syringae. Stwierdzono jednak, że wśród<br />

izolatów tego patowaru pochodzących z wiśni wyróżnia się homogenna grupa<br />

42 izolatów pochodzących z różnych rejonów kraju. Izolaty te wykazały niski<br />

stopień wirulencji w teście na zawiązkach owoców czereśni, podobny do izolatów<br />

patowaru morsprunorum. Może to sugerować ich przynależność do formy<br />

pośredniej pomiędzy patowarami syringae i morsprunorum.<br />

Podsumowując, należy stwierdzić, że metoda PCR MP okazała się bardzo<br />

pomocna w określaniu patowarów i ras gatunku P. syringae pochodzących<br />

z drzew pestkowych, a jednocześnie dostarczyła informacji o genetycznym<br />

zróżnicowaniu izolatów, włączając w to wirulencję.<br />

Summary<br />

NEW METHOD USED FOR DETERMINATION OF GENETIC<br />

DIVERSITY OF THE CAUSAL AGENT OF BACTERIAL CANCER<br />

ON FRUIT TREES<br />

Bacterial canker occurs in all major fruit growing areas of the world. Besides<br />

of brown rot bacterial canker is one of the most important and severe diseases<br />

of stone fruit trees. It attacks all aboveground parts of the trees, resulting<br />

in reduction of yield and sometimes leading to death of the trees. The causal<br />

agent of bacterial canker is a polyphagous bacterium Pseudomonas syringae<br />

causing diseases of over 180 plant species, both annual and perennial. Among<br />

strains attacking fruit trees two pathovars syringae and morsprunorum,<br />

including two races are discriminated. They belong to genomospecies 1,2 and 3<br />

respectively, indicating their pathogenic specialization. P. syringae pathovars<br />

differ in the host range and the way of trees infection.<br />

The diagnostic of bacterial canker is commonly based on phenotypic<br />

characterization of its causal agent. The study on genetic diversity of pathogen


showed that pathovar morsprunorum is homogeneous, with two races (1 and<br />

2) clearly differing from each other. On the other hand, pathovar syringae is<br />

a highly heterogeneous even when the isolates originate from the same host<br />

plant and geographical region (Kałużna et al. 2010).<br />

In our study 150 isolates of P. syringae obtained from various organs of sweet<br />

and sour cherry, peach and plum showing disease symptoms and originating<br />

from various geographical regions in Poland were characterized. Conventional<br />

methods consisting of LOPAT tests, (Lelliot et al. 1966) (production of levan<br />

from sucrose, oxidase, pectolytic activity on potato, the presence of arginine<br />

dihydrolase, hypersensitivity reaction on tobacco), GATTa tests (Latorre and<br />

Jones 1979) (liquefaction of gelatin, β-glucosidase activity, the activity of<br />

tyrosinase, the use of tartaric acid) and test for L-lactate utilization allowed<br />

for classification of 112 isolates to pathovar syringae, 32 isolates to pathovar<br />

morsprunorum race 1 and 6 isolates to morsprunorum race 2.<br />

In order to determine genetic diversity and phylogenetic relatedness<br />

between isolates the new method Melting Profiles PCR (PCR MP) (Masny and<br />

Płucienniczak 2003), previously used mainly in studies of human pathogens<br />

was applied. Own modification consisted changing the restriction enzyme and<br />

adjusting of denaturation temperature.<br />

This method consists of three steps: digestion with restriction enzyme,<br />

ligation of oligonucleotide adapters corresponding to the restriction sites,<br />

and PCR amplification of the ligation products using low denaturation<br />

temperatures Td (80–88°C). This DNA fingerprinting method allows for<br />

differentiation of bacteria at strain level, based on heterogeneity of their GC<br />

content and length of genomic DNA fragments obtained after digestion with<br />

endonucleases (Masny and Płucienniczak 2003).<br />

The results confirmed the homogeneity of races within pathovar<br />

morsprunorum proved in phenotypic studies and the diversity within the<br />

isolates belonging to pathovar syringae. It was found however, that among<br />

isolates of pathovar syringae originating from sour cherry the homogenous<br />

group of 42 isolates from different regions of the country was formed. These<br />

isolates showed low degree of virulence in test on sweet cherry fruitlets, similar<br />

to the those of pathovar morsprunorum. This may suggest that they belong<br />

to an intermediate form between pathovars syringae and morsprunorum. In<br />

conclusion, it should be stated that PCR MP method appeared to be very useful<br />

in discrimination of pathovars and races of P. syringae originating from stone<br />

fruits and gave additional information on their genetic diversity, including<br />

virulence.<br />

93


94<br />

Literatura<br />

Masny A., and Płucienniczak A., 2003: Ligation mediated PCR performed at<br />

low denaturation temperatures-PCR melting profiles. Nucleic Acids Res.<br />

Sep 15; 31 (18): e114.<br />

Kałużna M., Puławska J., Sobiczewski P., 2010: The use of PCR melting profile<br />

for typing of Pseudomonas syringae isolates from stone fruit trees. Eur.<br />

J. Plant Pathol., 126: 437–443.<br />

Lattore BA, and Jones AL., 1979: Pseudomonas morsprunorum, the cause of<br />

bacterial canker of sour cherry in Michigan and its epiphytic association<br />

with P. syringae. <strong>Phytopathology</strong> 69: 335–339.<br />

Lelliott RA, Billing E, Hayward AC., 1966: A determinative scheme for the fluorescent<br />

plant pathogenic Pseudomonads. J. Appl. Bacteriol. 29: 470–489.


ZMIENNOŚĆ GENETYCZNA POPULACJI GRZYBA<br />

VENTURIA INAEQUALIS W POLSCE<br />

Monika Michalecka, Sylwester Masny, Tadeusz Malinowski<br />

i Anna Bielenin<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

monika.michalecka@insad.pl<br />

Pomimo ciągłego udoskonalania programu ochrony jabłoni przed parchem<br />

jabłoni oraz wprowadzania do uprawy odmian charakteryzujących się wysoką<br />

odpornością, choroba ta nadal sprawia wiele problemów i często decydująco<br />

wpływa na powodzenie upraw jabłoni. Przyczyn niepowodzeń w ochronie<br />

jabłoni przed parchem jest wiele. Między innymi znaczną rolę odgrywają<br />

zmiany powodowane przez selektywne środki ochrony roślin, jak i uprawiane<br />

odmiany parchoodporne, które oddziałują na strukturę populacyjną sprawcy<br />

choroby – grzyba Venturia inaequalis. Ponadto, sposób reprodukcji grzyba<br />

oraz tendencja do częstych spontanicznych mutacji generują wysokie zróżnicowanie<br />

genetyczne populacji i w konsekwencji ułatwiają patogenowi adaptację<br />

do niekorzystnych warunków środowiskowych. W obrębie gatunku V. inaequalis<br />

wyróżnia się rasy fizjologiczne, będące wskaźnikami jego zdolności do<br />

porażania szerokiego zakresu gatunków i odmian roślin z rodzaju Malus.<br />

W następstwie wprowadzania do uprawy odmian jabłoni o wysokiej odporności<br />

na chorobę warunkowanej głównymi genami odporności na parcha (R),<br />

tworzą się rasy patogena zdolne do przełamywania tej odporności i wywołania<br />

choroby. W kontekście hodowli odpornościowej jabłoni przeciwko parchowi istnieje<br />

potrzeba prowadzenia badań nad mechanizmami powstawania i rozprzestrzeniania<br />

się różnych form V. inaequalis. Z praktycznego punktu widzenia<br />

poważnym problemem, u którego podłoża leżą zmiany w genotypie patogena,<br />

jest także występowanie zjawiska odporności na powszechnie stosowane<br />

fungicydy. Wiele fungicydów charakteryzuje się bowiem bardzo specyficznym<br />

mechanizmem działania na procesy fizjologiczne patogena kontrolowane pojedynczymi<br />

genami. Przy częstym stosowaniu związków z tej samej grupy<br />

w genomie grzyba zachodzą zmiany pozwalające mu na przeżycie w sadzie<br />

mimo stosowanych zabiegów chemicznych, a nawet na uzyskanie liczebnej<br />

przewagi form odpornych nad wrażliwymi.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 95-100<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

95


96<br />

Celem przeprowadzonych badań była analiza odpowiedzi patogena na<br />

dwie różne strategie zwalczania. W pierwszej części badano strukturę genetyczną<br />

populacji V. inaequalis przełamujących odporność jabłoni uwarunkowaną<br />

obecnością genu Vf, natomiast w drugiej analizowano zmiany zachodzące<br />

w populacjach patogena, będące skutkiem wieloletniego stosowania<br />

fungicydów strobilurynowych w sadach towarowych.<br />

W sezonie 2010, zaobserwowano objawy choroby na kilku odmianach<br />

uważanych dotąd za parchoodporne. Odmiany te posiadały gen odporności<br />

Vf, pochodzący od jabłoni Malus floribunda 821. W ramach oceny zróżnicowania<br />

genetycznego populacji patogena przełamujących odporność jabłoni na<br />

parcha związaną z genem Vf, przeanalizowano 8 populacji V. inaequalis pochodzących<br />

z różnych lokalizacji: sześć z odmian jabłoni posiadających gen<br />

Vf (‘Topaz’, ‘Novamac’, ‘Rajka’) oraz dwie uzyskane z odmiany bez tego genu<br />

(‘Antonówka’). Do badań każdej populacji wykorzystano około 45 reprezentatywnych<br />

plam parcha na liściach. Na podstawie wyników 5-ciu niezależnych<br />

reakcji multiplex-PCR, pozwalających na amplifikację specyficznych sekwencji<br />

DNA w obrębie 11 markerów mikrosatelitarnych (SSR), porównano ze sobą<br />

DNA 353 izolatów. Stwierdzono, że populacje przełamujące odporność związaną<br />

z genem Vf różniły się znacznie od siebie, co może sugerować brak przepływu<br />

informacji genetycznej między nimi oraz wskazywać na rożne źródła mutacji,<br />

które doprowadziły do powstania wirulencji wobec roślin posiadających gen<br />

Vf. Natomiast 2 pozostałe populacje pochodzące z odmian bez genu Vf, znacząco<br />

różniły się od ‘populacji Vf’, lecz w mniejszym stopniu między sobą, co może<br />

wynikać z wymiany informacji genetycznej między powszechnie występującymi<br />

w Polsce ‘populacjami bez Vf’ mimo odległych lokalizacji. Ponadto, wśród<br />

osobników z ‘populacji Vf’ obserwowano dość wysoki procent osobników identycznych<br />

pod względem analizowanych cech (markerów), w przeciwieństwie<br />

do bardzo niskiego odsetka w ‘populacji bez Vf’, co można tłumaczyć tym, iż<br />

‘populacje Vf’ znajdują się pod wpływem silnej presji selekcyjnej wywoływanej<br />

przez gen Vf obecny u roślin żywicielskich. Przeprowadzona analiza pozwoliła<br />

na wskazanie możliwości przełamania odporności jabłoni związanej z genem<br />

Vf na parcha i rozprzestrzeniania się nowych ras w Polsce.<br />

Jedną z powszechnie stosowanych w zwalczaniu parcha jabłoni grup fungicydów<br />

w Polsce są strobiluryny, zakłócające funkcjonowanie mitochondrialnego<br />

łańcucha oddechowego patogenów. Spośród kilku zbadanych mechanizmów<br />

odporności na te środki, wysoki poziom odporności w warunkach polowych obserwowano<br />

zwykle w związku z obecnością mutacji G143A (Fernandez-Ortuno<br />

i in. 2008). Obecność tej mutacji stwierdzono u V. inaequalis oraz u innych<br />

ważnych fitopatogenów, m.in. Blumeria graminis f. sp. tritici, Mycosphaerella<br />

fijiensis, Plasmopara viticola (Collina i in. 2005, Sierotzki i in. 2000). Wrażliwość<br />

V. inaequalis na strobiluryny szacuje się zazwyczaj na podstawie oceny


kiełkowania zarodników konidialnych pobranych z sadów i naniesionych na<br />

liście opryskane fungicydem. Obecnie jako wsparcie czy uzupełnienie dla metod<br />

konwencjonalnych proponuje się testy molekularne, bazujące na reakcji<br />

PCR. W ramach badań własnych nad wykrywaniem mechanizmu odporności<br />

V. inaequalis na strobiluryny opracowano metodę, bazującą na technice real-time<br />

PCR, z wykorzystaniem starterów specyficznych do miejsca mutacji<br />

oraz barwnika fluoryzującego SYBR Green (Michalecka i in. 2011). Metoda<br />

ta pozwala nie tylko na wykrycie sekwencji V. inaequalis zawierających oraz<br />

niezawierających mutację, ale również na określenie ich udziału w populacji<br />

patogena. Aplikacja tej metody w różnych okresach sezonu może pomóc w monitorowaniu<br />

dynamiki zmian w nasileniu form odpornych na strobiluryny<br />

w sadzie. Po wstępnej optymalizacji metody z wykorzystaniem szczepów referencyjnych<br />

V. inaequalis posiadających 100% poziom mutacji warunkującej<br />

odporność, oraz szczepów bez mutacji, przeanalizowano 17 populacji patogena<br />

(zebranych pod koniec sezonu 2009), 15 pochodzących z sadów towarowych<br />

oraz 2 z sadu ekologicznego. Dla każdej populacji, na podstawie porównania<br />

z izolatami wskaźnikowymi, określono procentowy udział mutacji odpowiedzialnej<br />

za odporność na strobiluryny. W sadach towarowych poziom odporności<br />

był bardzo wysoki i mieścił się w zakresie od 50 do 100%, natomiast w sadzie<br />

ekologicznym dla 2 badanych populacji wynosił odpowiednio 1 i 46 %. Na<br />

podstawie uzyskanych wyników stwierdzono, że w populacji patogena w naszych<br />

sadach utrzymuje się wysoki poziom odporności. Ponadto formy odporne<br />

patogena można spotkać również w sadach bez ochrony; w tym przypadku nie<br />

można wykluczyć przeniesienia się zarodników z sąsiednich sadów towarowych,<br />

jak również tendencji patogena do spontanicznych mutacji. Opracowana<br />

metoda okazała się przydatna do oszacowania poziomu odporności 17 populacji<br />

V. inaequalis na strobiluryny, jak również będzie można ją zastosować do<br />

prowadzenia monitoringu poziomu odporności w sadach jabłoniowych.<br />

Summary<br />

GENETIC VARIATION OF VENTURIA INAEQUALIS FUNGUS<br />

POPULATIONS IN POLAND<br />

Despite the continuous improvement of the apple trees protection against<br />

apple scab and the introduction of scab-resistant varieties, the disease still<br />

causes many problems in apple cultivation and has often decisive negative<br />

influence on the profitability of the crop. There are many reasons of failures<br />

in the apple trees protection against apple scab. Among others, common usage<br />

of selective fungicides and scab resistance breeding play the major role, both<br />

potentially promoting the changes in the population of Venturia inaequalis<br />

fungus, the causal agent of the disease. Moreover, the specific mode of fungal<br />

97


98<br />

reproduction as well as its tendency to frequent spontaneous mutations<br />

generate high genetic diversity of the population and, consequently, facilitate<br />

the pathogen adaptation to adverse environmental conditions. Within the<br />

species, the pathogen is conventionally classified into physiological races,<br />

which determine its ability to infect a wide range of plant species and varieties<br />

of the Malus genus. Following the introduction of highly resistant apple<br />

cultivars, containing the main scab resistance genes (e.g. Vm, Vf), new races<br />

of the pathogen are developing, capable to overcome this resistance. In the<br />

context of the apple resistance breeding, there is a need for the research on<br />

the mechanisms of emergence and spread of various forms of V. inaequalis.<br />

From a practical point of view, the occurrence of forms of pathogen resistant to<br />

commonly used fungicides is a very serious problem. When the compounds from<br />

the same group of fungicides are frequently used in the orchard, the changes<br />

occur in fungal genome, enabling for survival of resistant strains of pathogen<br />

despite the chemical treatment, and even to gain a quantitative advantage<br />

over the fungicide-sensitive forms.<br />

The aim of this study was to analyze the response of the pathogen against two<br />

different control strategies. In the first part, the genetic structure of V. inaequalis<br />

populations breaking the apple resistance associated with the main Vf gene was<br />

studied, while the second part concerned the changes in pathogen populations,<br />

resulting from continuous strobilurin treatment in commercial orchards.<br />

In the 2010 season, weather conditions were favorable for the scab<br />

development, and scab symptoms were observed in Poland on several cultivars<br />

previously considered to be scab-resistant. All of them contained main<br />

resistance gene Vf, originating from the apple tree Malus floribunda 821.<br />

In order to assess the genetic diversity of pathogen populations overcoming<br />

apple resistance related to Vf gene, eight populations of V. inaequalis from<br />

different locations were analyzed: six collected from trees of varieties with Vf<br />

gene (‘Topaz’, ‘Novamac’, ‘Rajka’) and two derived from the susceptible variety<br />

without this gene (‘Antonówka’). From 42 to 45 scab lesions collected from<br />

several trees representing each variety were used for DNA isolation. On the<br />

basis of five independent multiplex-PCR reactions, allowing for amplification of<br />

DNA sequence within the 11 microsatellite markers (SSR), DNA isolated from<br />

353 scab lesions was compared with each other. It was found that populations<br />

able to break the resistance associated with the Vf gene differed significantly<br />

from each other, which may suggest the lack of gene flow between them, and<br />

indicate the various sources of mutations, which led to the virulence towards<br />

plants containing Vf gene. However, two other tested populations originating<br />

from variety without Vf gene, differed significantly from the ‘Vf populations’,<br />

but showed higher similarity between themselves, suggesting the occurrence<br />

of genetic exchange between widely occurring in Poland ‘non-Vf populations’<br />

despite the remote locations. Moreover, among individuals from ‘Vf populations’


a high percentage of individuals identical in terms of analyzed features<br />

(markers) were observed, in contrast to a very low percentage of clones in ‘non-<br />

Vf populations’, which may be explained by the fact that ‘Vf populations’ are<br />

influenced by strong selection pressure exerted by the Vf gene in host plant.<br />

Conducted analysis allowed for the indication of possible way of overcoming<br />

scab resistance associated with Vf gene and spreading of new races in Poland.<br />

Strobilurins are among the most commonly applied fungicides for scab control<br />

in Poland. They disturb functioning of the mitochondrial respiratory chain of<br />

pathogens. Among several detected mechanisms of resistance to strobilurins,<br />

a high level of resistance in field populations was mostly associated with the<br />

presence of G143A mutation (Fernandez-Ortuno et al. 2008). This particular<br />

mutation was detected in V. inaequalis and in other important phytopathogens,<br />

including Blumeria graminis f. sp tritici, Mycosphaerella fijiensis, Plasmopara<br />

viticola (Collin et al. 2005, Sierotzki et al. 2000). Sensitivity of V. inaequalis<br />

to strobilurins is usually determined on the basis of germination of spores<br />

collected from strobilurin-controlled orchards and deposited on fungicidesprayed<br />

leaves. Molecular approaches based on PCR are currently proposed<br />

as a support or complement to conventional methods. As a part of the<br />

research devoted to the detection of V. inaequalis mechanism of resistance of<br />

to strobilurins, the method based on real-time PCR technique, using primers<br />

complementary to the site of mutation and the fluorescent dye SYBR Green,<br />

has been developed (Michalecka et al. 2011). This method not only allows the<br />

detection of V. inaequalis sequences with or without the mutation, but also to<br />

determine their ratio in the pathogen population. Application of this method<br />

at different periods during the season, may help in monitoring the dynamics of<br />

strobilurin-resistant forms in the orchard. After the initial optimization of the<br />

method using the reference strains of V. inaequalis, containing 0% or 100% of<br />

mutation, we analyzed 17 populations of V. inaequalis (collected at the end of<br />

season 2009), 15 derived from the commercial orchards and 2 from the organic<br />

orchard. The percentage of mutation conferring resistance was estimated<br />

for each population. In commercial orchards, the mutation level was high<br />

and ranged from 50 to 100%, while in the organic orchard for two examined<br />

populations the level was 1 and 46% respectively. These results indicate that the<br />

pathogen populations maintain a high level of strobilurins resistance in many<br />

commercial orchards in Poland. In addition, resistant forms of the pathogen<br />

may also be found in orchards without protection. In this case the presence<br />

of resistant strains can be explained either by the migration of spores from<br />

neighboring chemically controlled orchards to the organic ones, or by the result<br />

of spontaneous mutation(s). The method proved to be useful in estimating the<br />

level of strobilurins resistance of 17 populations of V. inaequalis, as well as it<br />

can be used to monitor the level of resistance in apple tree orchards.<br />

99


100<br />

Literatura<br />

Collina M., Landi L., Guerrini P., Branzanti M.B., Brunelli A., 2005: QoI resistance<br />

of Plasmopara viticola in Italy: biological and quantitative realtime<br />

PCR approaches. In: Dehne H-W, Gisi U,Kuck K-H, Russell PE, Lyr<br />

H. (eds) Modern Fungicides and Anti-Fungal Compounds IV. Alton, UK,<br />

BCPC, pp 81–88.<br />

Fernandez-Ortuno D., Tores J.A., de Vicente A., Perez-Garcia A., 2008: Mechanisms<br />

of resistance to QoI fungicides in phytopathogenic fungi. International<br />

Microbiology 11: 1–9.<br />

Michalecka M., Malinowski T., Broniarek-Niemiec A., Bielenin A., 2011: Realtime<br />

PCR assay with SNP-specific primers for the detection of a G143A<br />

mutation level in Venturia inaequalis field populations. Journal of Phytopatology,<br />

DOI: 10.1111/j.1439-0434.2011.01805.x.<br />

Sierotzki H., Parisi S., Steinfeld U., Tenzer I., Poirey S., Gisi U., 2000: Mode<br />

of resistance to respiration inhibitors at the cytochrome bc1 enzyme complex<br />

of Mycosphaerella fijiensis field isolates. Pest Management Science 56:<br />

833–841.


MOLEKULARNA IDENTYFIKACJA CHEMOTYPÓW<br />

POLSKICH IZOLATÓW FUSARIUM CULMORUM<br />

UZYSKANYCH Z PSZENICY OZIMEJ I JAREJ<br />

Anna Baturo-Cieśniewska i Czesław Sadowski<br />

Uniwersystet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

baturo-a@utp.edu.pl<br />

Metody oparte na technice PCR są powszechnie stosowane do diagnostyki<br />

i oznaczania gatunków należących do rodzaju Fusarium oraz do określania<br />

ich chemotypów. Identyfikacja obecności w genomie klasteru genów Tri<br />

umożliwia określenie potencjalnych zdolności izolatów Fusarium spp. do produkcji<br />

mikotoksyn z grupy trichotecenów i wyróżnienia wśród nich tych, które<br />

są zdolne do syntezy ich specyficznych typów - chemotyp DON, włączając<br />

3A-DON, 15A-DON i chemotyp NIV.<br />

Przedmiotem badań było 37 izolatów Fusarium culmorum pochodzących<br />

z różnych odmian pszenicy ozimej i jarej, uzyskanych w latach 2006-2008<br />

w różnych rejonach Polski. Po uzyskaniu kultur jednozarodnikowych izolowano<br />

całkowite DNA z grzybni wyhodowanej na płynnej pożywce glukozowo-<br />

-ziemniaczanej (PDB; Difco, USA) przy użyciu zestawu DNeasy Plant Mini<br />

Kit (Qiagen, USA).<br />

Analizy PCR dotyczące produkcji deoxyniwalenolu (DON) i niwalenolu<br />

(NIV) były oparte na starterach amplifikujących odpowiednie fragmenty genów<br />

Tri7 i Tri13. W reakcjach użyto kilku zestawów starterów: MinusTri7F/<br />

MinusTri7R i Tri13F/Tri13DONR do identyfikacji chemotypu DON oraz<br />

Tri7F/Tri7NIV i Tri13NIVF/Tri13R do identyfikacji chemotypu NIV. W celu<br />

określenia zdolności izolatów zakwalifikowanych do chemotypu DON do produkcji<br />

jego pochodnych, 3A-DON i 15A-DON, przeprowadzono analizy bazujące<br />

na genie Tri3 używając, odpowiednio, zestawów starterów Tri303F/Tri303R<br />

i Tri315F/Tri315R.<br />

Reakcje przeprowadzono w objętości 12.5μl zawierającej 50 ng DNA grzyba<br />

i odczynniki z zestawu PCR Core Kit (QIAGEN, USA) w termocyklerze Eppendorf<br />

epgradient Mastercycler. Produkty po amplifikacji poddano elektroforezie<br />

na 1.4% żelu agarozowym w boforze TBE z dodatkiem bromku etydyny.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 101-103<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

101


102<br />

Wśród badanych izolatów F. culmorum wykazano obecność zarówno chemotypu<br />

DON, jak i NIV. Wyraźnie przeważał chemotyp DON, do którego należało<br />

35 izoltów, podczas gdy do chemotypu NIV tylko 2 izolaty. Jednakowe wyniki<br />

uzyskano w przypadku zastosowania analiz opartych na genie Tri7 jak i Tri13.<br />

Analizy oparte na genie Tri3 wykazały, że wszystkie izolaty zakwalifikowane<br />

do chemotypu DON zdolne są do produkcji tylko jednej pochodnej - 3A-DON.<br />

Jest to zgodne z wynikami analiz europejskich izolatów, wśród których wyraźnie<br />

dominuje DON. Według doniesień literaturowych, w przypadku tego<br />

chemotypu u F. culmorum stwierdzono jedynie pochodną 3A-DON.<br />

Summary<br />

MOLECULAR DETERMINATION OF CHEMOTYPES OF POLISH<br />

FUSARIUM CULMORUM STRAINS ISOLATED FROM WINTER<br />

AND SPRING WHEAT<br />

PCR-based methods are useful tool for diagnosis and quantification of<br />

Fusarium species and determination of their chemotypes. Identification of the<br />

presence of the Tri cluster genes in the genome makes it possible to determine<br />

the potential ability of fungi of the Fusarium genus to produce trichothecenes<br />

and to distinguish from them isolates that are potentially able to synthesize<br />

their specific type - chemotypes DON, including 3A-DON, 15A-DON, and NIV.<br />

A total of 37 isolates of Fusarium culmorum were collected from different<br />

cultivars of winter and spring wheat between 2006 and 2008 from different<br />

Polish provinces. All isolates were derived from single conidia and next total<br />

DNA was isolated from mycelium grown on Potato Broth (PDB; Difco, USA<br />

using the DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, USA).<br />

PCR assays of deoxynivalenol (DON) or nivalenol (NIV) production were<br />

based on primers for the Tri7 and Tri13 genes. For PCR reactions few primer<br />

sets were used: MinusTri7F/MinusTri7R and Tri13F/Tri13DONR for DON<br />

chemotype isolates determination and Tri7F/Tri7NIV and Tri13NIVF/<br />

Tri13R for NIV chemotype isolates determination. To distinguish ability to<br />

production of DON derivatives 3A-DON and 15A-DON, analyses based on<br />

Tri3 gene was carried out using respectively Tri303F/Tri303R and Tri315F/<br />

Tri315R primer sets.<br />

Reactions were carried out in a volume of 12.5μl containing 50 ng<br />

of fungal DNA and reagents from PCR Core Kit (QIAGEN, USA) in an<br />

Eppendorf epgradient Mastercycler. Amplification products were separated by<br />

electrophoresis on 1.4% agarose gels with a TBE running buffer and stained<br />

with ethidium bromide.<br />

Assays showed that DON and NIV chemotypes of F. culmorum were present<br />

among the isolates tested. A clear advantage of DON (35 isolates) over NIV


(2 isolates) was found. Results with primers concerning Tri7 and Tri13 were<br />

the same. Assay based on primers for the Tri3 gene showed that all isolates,<br />

identified as DON chemotype, can produce its 3A-DON derivative. This is<br />

consistent with the results of the studies of European isolates, among which<br />

predominates DON chemotype. According to reports in the literature, in the<br />

case of this chemotype, F. culmorum is able to produce only one derivative,<br />

3A-DON.<br />

103


104<br />

SEKWENCJE POLIMORFICZNYCH FRAGMENTÓW<br />

MINISATELITARNYCH GRZYBA LEPTOSPHAERIA<br />

MACULANS W POPULACJACH TRAKTOWANYCH<br />

I NIE TRAKTOWANYCH FUNGICYDAMI<br />

Witold Irzykowski 1 , Marek Korbas 2 , Ewa Jajor 2<br />

i Małgorzata Jędryczka 1<br />

1Instytut Genetyki Roślin PAN, ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

2Instytut Ochrony Roślin - PIB, ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

wirz@igr.poznan.pl<br />

Minisatelitarne DNA (Variable Number of Tandem Repeats, VNTR) to jedne<br />

z najbardziej użytecznych fragmentów DNA, umożliwiających określanie<br />

zmienności genetycznej w obrębie badanej populacji. Określenie ‘minisatelity’<br />

odnosi się do fragmentów DNA zawierających różną liczbę powtórzeń o tej samej<br />

sekwencji nukleotydowej. Po raz pierwszy regiony powtórzone wykryto<br />

w genomie człowieka, niebawem jednak stwierdzono, że powtórzone sekwencje<br />

DNA licznie występują u wszystkich badanych organizmów. Pierwsze sekwencje<br />

minisatelitarne u grzybów stwierdzono w telomerach drożdży Saccharomyces<br />

cervisiae Meyen ex E.C. Hansen. Były to tandemowo zestawione<br />

odcinki, każdorazowo składające się z trzech fragmentów długości 12 nukleotydów,<br />

od 8 do 25 razy powtórzone w genomach badanych szczepów drożdży.<br />

Istnieje wiele teorii dotyczących funkcji tych sekwencji w genomie, jednakże<br />

nadal jest ona raczej domniemana niż poznana. Przypuszcza się, że fragmenty<br />

te powstają na skutek zaburzenia w procesie crossing-over. Sekwencja tych<br />

fragmentów w znacznej mierze pozostaje niezmienna, dlatego w przypadku<br />

minisatelit mówimy o allelach, choć fragmenty te nie stanowią części genów<br />

i nie kodują białek.<br />

Dzięki oznaczeniu sekwencji genomu, grzyb Leptosphaeria maculans<br />

(Desm.) Ces et de Not. jest obecnie jednym z niewielu gatunków o poznanej<br />

sekwencji licznych (39) fragmentów minisatelitarnych. Niektóre z nich mają<br />

wiele alleli; przykładowo fragment MinLm2 posiada aż 20 alleli, z czego 14<br />

stwierdzono w Polsce, a 12 występowało na tym samym polu rzepaku ozimego.<br />

Intensywne badania genomu grzyba L. maculans związane są z dużą ekonomiczną<br />

szkodliwością tego patogena względem rzepaku (Brassica napus L.).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 104-106<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Grzyb L. maculans obniża plonowanie rzepaku ozimego i przyczynia się do<br />

znacznych strat ekonomicznych. Patogen występuje głównie w Australii, Kanadzie<br />

oraz Europie, w tym także w Polsce. Silne porażenie roślin przez L. maculans<br />

w sezonie 2010/2011 skłania do kontynuowania badań nad genetyczną<br />

strukturą populacji tego gatunku grzyba, w celu poznania zakresu zmienności<br />

i plastyczności jego genomu.<br />

Celem niniejszego eksperymentu było porównanie polimorfizmu sekwencji<br />

minisatelitarnych w dwóch populacjach izolatów L. maculans wyodrębnionych<br />

z tej samej odmiany (Bosman, HR Strzelce) w tym samym roku (jesień<br />

2006) i na jednym polu (PSD IOR-PIB w Winnej Górze koło Środy Wielkopolskiej),<br />

lecz zróżnicowanych pod względem traktowania fungicydem zawierającym<br />

metkonazol. Badaniom poddano 40 izolatów grzyba. Oznaczono sekwencje<br />

minisatelitarne MinLm555, MinLm935-2, MinLm939, MinLm1139,<br />

MinLm2448-1, MinLm2451 oraz MinLm2452.<br />

W całej puli badanych izolatów wykazano obecność od dwóch (MinLm2448-1<br />

oraz MinLm2452) do dziesięciu (MinLm1139) powtórzeń rdzenia. W sekwencjach<br />

MinLm555 oraz MinLm935-2 nie stwierdzono zmienności innej niż liczba<br />

powtórzeń rdzenia (odpowiednio 3 allele i 7 alleli). W pozostałych przypadkach<br />

zawsze występowała dodatkowa zmienność substytucyjna w obrębie<br />

rdzenia, a w przypadku MinLm2451 także poza fragmentem minisatelitarnym<br />

od strony startera odwrotnego (Reverse Primer). Wykazano, że u L. maculans<br />

występuje wysoki polimorfizm sekwencji minisatelitarnych nawet wśród izolatów<br />

zebranych z jednego pola. Nie stwierdzono wyraźnych różnic pomiędzy<br />

zmiennością w obrębie populacji izolatów wyodrębnionych z roślin traktowanych<br />

i nie traktowanych fungicydem.<br />

Summary<br />

THE SEQUENCES OF POLYMORPHIC MINISATELLITE FRAGMENTS<br />

OF THE FUNGUS LEPTOSPHAERIA MACULANS IN POPULATIONS<br />

TREATED AND UNTREATED WITH FUNGICIDES<br />

Minisatellite DNA (Variable Number of Tandem Repeats, VNTR) is<br />

regarded as one of the most useful DNA fragments allowing the evaluation of<br />

genetic polymorphisms within a studied population. The term ‘minisatellites’<br />

refers to different number of repeats of the same DNA sequence. For the first<br />

time repeated DNA fragments were found in human genome, but very soon<br />

they were found in all living organisms. The first minisatellites in fungi were<br />

found in the telomers of yeast Saccharomyces cervisiae Meyen ex E.C. Hansen.<br />

They were tandemly arranged sections, each consisting of three fragments<br />

of 12 nucleotides long, repeated from 8 to 25 times in the genomes of tested<br />

strains of yeasts. There are many theories regarding the function of these<br />

105


106<br />

sequences in the genome, but still it is implicit rather than understood. It<br />

is believed that these fragments arise from disturbances in crossing-over.<br />

The sequence of these fragments remains largely unchanged, so different<br />

minisatellite fragments are termed alleles, although they are not part of the<br />

gene and do not encode proteins.<br />

Due to the recognition of the genome sequence, the fungus Leptosphaeria<br />

maculans (Desm.) Ces et de Not. is now one of a few species with numerous (39)<br />

known minisatellite sequences. Some of them have many alleles, for example,<br />

a fragment MinLm2 has as many as 20 alleles, of which 14 were found in<br />

Poland, and 12 occurred in the same field of winter oilseed rape. Intensive study<br />

the fungus L. maculans genome is associated with high economic harmfulness<br />

of this pathogen to oilseed rape (Brassica napus L.). The fungus L. maculans<br />

significantly reduces the yield of winter oilseed rape and contributes to major<br />

economic losses. Pathogen is predominant in Australia, Canada and Europe,<br />

including Poland. Strong damage of oilseed rape plants by L. maculans in the<br />

2010/2011 season implies a continuous demand to study the genetic structure<br />

of populations of this fungus, in order to understand the range of variability<br />

and plasticity of its genome.<br />

The aim of this experiment was to compare the polymorphism of minisatellite<br />

sequences of two populations of L. maculans isolates originating from the same<br />

cultivar (Bosman, Plant Breeding Strzelce) in the same year (autumn 2006)<br />

and at one field (Experimental Field Station, National Research Institute<br />

– Institute of Plant Protection in Winna Gora near Środa Wielkopolska),<br />

differing by fungicide treatments with metconazole. Minisatellite sequences<br />

MinLm555, MinLm935-2, MinLm939, MinLm1139, MinLm2448-1 and<br />

MinLm2452, MinLm2451 were studied in 40 isolates of the fungus. The entire<br />

pool of isolates showed the presence of two (MinLm2448-1 and MinLm2452) to<br />

ten (MinLm1139) replicates of the core sequence. In the sequences MinLm935<br />

and MinLm555-2, there was no variation other than the number of core<br />

repeats (respectively 3 and 7 alleles). In other minisatellites, there was always<br />

an additional variability consisting of substitutions within the core, and in<br />

the case of MinLm2451 also outside the minisatellite fragment, from the<br />

site of the Reverse Primer. The study demonstrated a high polymorphism of<br />

minisatellite sequences of L. maculans, even among isolates collected from<br />

one field. There were no significant differences between the variability within<br />

the population of isolates originating from plants treated and not treated with<br />

the fungicide.


WYSTĘPOWANIE I CHARAKTERYSTYKA TYPÓW<br />

KOJARZENIOWYCH MAT1 I MAT2<br />

FUSARIUM VERTICILLIOIDES<br />

Marcin Wit 1 , Agnieszka Waśkiewicz 2 , Emilia Jabłońska 1 ,<br />

Roman Warzecha 3 , Piotr Ochodzki 3 i Wojciech Wakuliński 1<br />

1Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

2Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Chemii, ul. Wojska Polskiego 75,<br />

60-625 Poznań<br />

3IHAR – Państwowy Instytut Badawczy, Radzików, 05-870 Błonie<br />

marcin_wit@sggw.pl<br />

Fusarium verticillioides jest gatunkiem powszechnie występującym na<br />

świecie znanym przede wszystkim jako patogen kukurydzy, choć udokumentowany<br />

zakres żywicieli obejmuje <strong>rośliny</strong> jedno i dwuliścienne z ponad 48<br />

rodzin. Jest to gatunek heterotaliczny o dimiktycznym systemie kojarzeniowym<br />

to znaczy charakteryzuje się występowanie w populacji jedynie dwóch<br />

dopełniających się typów kojarzeniowych plechy o czym decyduje zestaw alleli<br />

MAT1 i MAT2 zlokalizowanych w obrębie chromosomu VI. Aczkolwiek<br />

występują one w tym samym miejscu na chromosomie homologicznym w obrębie<br />

locus MAT różnią się jednak wielkością, strukturą sekwencji i prawdopodobnie<br />

nie łączy ich wspólne ewolucyjne pochodzenie stąd też określa się je<br />

jako idiomorfy. Izolaty dopełniających się typów krzyżowych występują dość<br />

powszechnie jednak stadium doskonale F.verticillioides zostało rozpoznane<br />

w naturze tylko dwukrotnie w 1931 (Floryda) i w 1994 (Wietnam). U niektórych<br />

gatunków występowanie idiomorfów MAT1 lub MAT2 jest niekiedy sprzężone<br />

z cechami istotnymi w patogenezie. Wyjątkowy przykład pod tym względem<br />

stanowi Cryptococus neophormans w przypadku którego patogeniczność<br />

wykazują jedynie izolaty MATα, locus MAT kontroluje patogeniczność Ustilago<br />

hordei, różną patogeniczność wykazują także izolaty dopełniających się<br />

typów kojarzeniowych szeregu Chromista. W podjętych badaniach podjęto<br />

próbę określenia frekwencji występowania idiomorfów MAT1, MAT2 w populacji<br />

izolatów uzyskanych w Polsce oraz porównania stopnia porażenia kolb<br />

kukurydzy po inokulacji roślin izolatami MAT1 (KFI 2856) i MAT2 (KFI 3011)<br />

F.verticillioides. Jak stwierdzono frekwencja występowania idiomorów MAT1,<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 107-108<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

107


108<br />

MAT2 wynosiła odpowiednio 55 i 45% i nie odbiegała istotnie od zakładanego<br />

rozkładu 1:1. Czteroletnie doświadczenia inokulacyjne realizowane w okresie<br />

2007 – 2010 nie wykazały istotnego wpływu izolatu o określonym typie<br />

koniugacyjnym na średni stopień porażenia kolb, który wynosił 1,77 (MAT1)<br />

i 1,81 (MAT2) w przyjętej 6 stopniowej skali porażenia. Powyższych różnic nie<br />

stwierdzono w żadnym z czterech sezonów wegetacyjnych. Spośród analizowanych<br />

parametrów istotny wpływ na stopień porażenia roślin miał sezon wegetacyjny,<br />

w którym prowadzono badania oraz zastosowana odmiana botaniczna<br />

kukurydzy. Najsilniejszemu porażeniu ulegały kolby Z. mays var. sccharata<br />

natomiast najmniejszemu Z. mays var. everta.<br />

Summary<br />

MATING TYPES MAT1 AND MAT 2 FUSARIUM VERTICILLIOIDES<br />

OCCURRENCE AND CHARACTERISTICS<br />

Fusarium verticillioides is well know maize pathogen however its occurrence<br />

has been noticed on several monocots and dicots plants of 48 family. It<br />

is heterotalic fungus with dimictic mating type governed by two alleles MAT1<br />

and MAT2 localized on VI chromosome of the species. MAT alleles are located<br />

in locus of homologous chromosome at the same position but they differ in<br />

size and sequence structure and that is why they are called as idiomorphes.<br />

Common occurrence the both F.verticillioides mating type do not directly<br />

trigger perfect stage incidence in nature, which was recognized so fare only<br />

two times in 1931 (Florida) and 1994 (Vietnam). In case of some fungi occurrence<br />

of particular idiomorphs (MAT1 or MAT2) are linked with key traits<br />

involved in pathogenesis. For example pathogenic properties exhibited only<br />

MATα strains of Cryptococus neophormans, locus MAT governed pathogenicity<br />

of Ustilago hordei and different level of pathogenicity exhibited strains of<br />

opposite types of several Chromista. The aim of this studies was frequency<br />

analysis the both idiomoprhs (MAT1 and MAT2) in population of collected in<br />

Poland F.verticillioides isolates and characteristic their pathogenic properties<br />

towards maize. It has been stated that strains with MAT1 and MAT2 idomorphs<br />

occurred with frequency 55% and 45% respectively and reflect 1:1 ratio<br />

according to χ 2 test. During four years of inoculation studies (1997 – 2010)<br />

it was not noticed any significant pathogenicity differences between applied<br />

strains. On average plants were infected with KFI 2856 (MAT1) and KFI 3011<br />

(MAT2) in 1,77 and 1,81 degree, according to 6 point scale. Infection severity<br />

was significantly modify by plant genotypes. Cobs of Z. mays var. sccharata<br />

and Z. mays var. everta were respectively the most and the least severe infected<br />

varieties by F.verticillioides regardless of cropping season.


ZASTOSOWANIE MULTIPLEX PCR DO IDENTYFIKACJI<br />

BAKTERII PEKTYNOLITYCZNYCH POWODUJĄCYCH<br />

CHOROBY ZIEMNIAKA<br />

Marta Potrykus, Wojciech Śledź i Ewa Łojkowska<br />

Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii Uniwersytetu Gdańskiego i Gdańskiego<br />

Uniwersytetu Medycznego, Katedra Biotechnologii,<br />

ul. Kładki 24, 80-822 Gdańsk<br />

marta.potrykus@biotech.ug.gda.pl<br />

Ziemniak (Solanum tuberosum) jest jedną z głównych roślin uprawnych<br />

w Polsce. Wartość plonów uzyskanych w 2007 roku wynosiła 4 miliardy złotych.<br />

Polska jest największym producentem ziemniaka wśród krajów Unii Europejskiej<br />

(UE). Średnie plony ziemniaka uzyskiwane w Polsce (207 dt/ha) są<br />

niższe niż średnie plony w UE (286 dt/ha). Jedną z przyczyn takiej sytuacji są<br />

straty w produkcji ziemniaka spowodowane przez choroby bakteryjne.<br />

Bakterie pektynolityczne z rodzaju Pectobacterium (poprzednio Erwinia<br />

carotovora) oraz Dickeya (poprzednio Erwinia chrysanthemi) powodujące choroby<br />

zwane czarną nóżką i mokrą zgnilizną przyczyniają się w znacznej mierze<br />

do obniżenia plonów ziemniaka i wysokich strat ekonomicznych. Bakterie<br />

z gatunku Pectobacterium atrosepticum (Pba) infekują <strong>rośliny</strong> i są przyczyną<br />

pojawienia się objawów chorobowych w klimacie umiarkowanym i chłodnym.<br />

Bakterie z rodzaju Dickeya powodują objawy chorobowe na roślinach ziemniaka<br />

w klimacie ciepłym i wilgotnym. Jednak, w ostatnich latach, szczepy<br />

z rodzaju Dickeya są coraz częściej izolowane z roślin ziemniaka z objawami<br />

czarnej nóżki w Polsce, Holandii oraz Finlandii (Laurila i in. 2008, Sławiak<br />

i in. 2009a b). Ostatnie doniesienia sugerują, że bakterie z rodzaju Dickeya<br />

mogą efektywnie infekować <strong>rośliny</strong> ziemniaka i wywoływać objawy chorobowe<br />

także w klimacie umiarkowanym, co może stanowić istotne zagrożenie dla<br />

upraw ziemniaka w Polsce i całej Europie. Propagacja wolnego od patogenów<br />

materiału siewnego oraz odpowiednie zabiegi fitosanitarne są jedynymi środkami<br />

dającymi możliwość ochrony uprawy ziemniaka przed chorobą zwaną<br />

czarną nóżką.<br />

W celu łatwiejszego i szybszego wykrywania i identyfikacji bakterii pektynolitycznych<br />

na roślinach ziemniaka z objawami mokrej zgnilizny i/lub<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 109-111<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

109


110<br />

czarnej nóżki opracowano test oparty na technice Multipleks PCR. W teście<br />

wykorzystano startery specyficzne dla poszczególnych gatunków bakterii pektynolitycznych.<br />

Fakt ten pozwala na jednoczesne wykrywanie bakterii z gatunku<br />

Pba, P. carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) oraz z rodzaju Dickeya<br />

(Dsp) w zawiesinie bakteryjnej. Określono poziom wykrywalności bakterii z<br />

wymienionych powyżej grup używając jako matrycy DNA genomowego w/w<br />

szczepów w stężeniu od 1000 ng do 0,001 ng w pojedynczej reakcji. Zastosowanie<br />

wybranych starterów pozwala na wykrywanie 0,1 ng DNA w przypadku<br />

Pba i Pcc, natomiast 0,01 ng DNA w przypadku Dsp w pojedynczej reakcji.<br />

Tkanki roślin ziemniaka porażonych czarną nóżką zasiedlone są przez<br />

wiele różnych gatunków bakterii, dlatego sprawdzono poziom wykrywalności<br />

DNA wymienionych wcześniej patogenów także w obecności DNA genomowego<br />

izolowanego z komórek Pseudomonas fluorescens CCM2115. W obecności<br />

DNA genomowego P. fluorescens poziom wykrywalności Pcc, Pba i Dsp obniża<br />

się dziesięciokrotnie. Dzięki zastosowaniu zmodyfikowanego protokołu izolacji<br />

całkowitego DNA genomowego (Llop i in. 1999) z homogenatów porażonych<br />

tkanek roślinnych określono również poziom wykrywalności bakterii w homogenatach<br />

tkanki bulw oraz łodygi i liści ziemniaka.<br />

Opracowany test Multipleks PCR pozwala na jednoczesne wykrycie trzech<br />

gatunków/rodzajów bakterii pektynolitycznych należących do dawnego rodzaju<br />

Erwinia w tkance ziemniaka. Test pozwala na szybką, efektywną i jednoznaczną<br />

identyfikację bakterii pektynolitycznych zasiedlających <strong>rośliny</strong> ziemniaka<br />

w uprawach polowych i w przechowalni.<br />

Summary<br />

PECTINOLYTIC BACTERIA DETECTION IN POTATO<br />

BY MULTIPLEX PCR<br />

Potato (Solanum tuberosum) is one of the most important crops in Poland,<br />

with a value of 4 billion PLN in 2007. Polish farmers take 18,4% of total potato<br />

production in European Union what makes Poland the largest potato producer<br />

in EU. However, the level of potato production per hectare in Poland is lower<br />

than the average potato production in Europe. One of the reasons of such a<br />

situation are bacterial diseases.<br />

Pectinolytic bacteria from Pectobacterium (previously Erwinia carotovora)<br />

and Dickeya (previously Erwinia chrysanthemi) genera, that cause blackleg<br />

and soft rot, contribute substantially to crops reduction, thus high economic<br />

loss to the farmers. Bacteria belonging to Pectobacterium atrosepticum<br />

(Pba) cause blackleg and soft rot in temperate climate, while bacteria from<br />

Dickeya genus are responsible for these diseases on potato plants in warm and<br />

tropical climate. However recently, Dickeya strains have been isolated from


symptomatic potato plants in Poland, the Netherlands and Finland (Laurila<br />

et al. 2008, Sławiak et al. 2009a b). The recent findings suggest, that Dickeya<br />

strains can effectively infect the potato plant and cause disease symptoms also<br />

in temperate climate, what can pose a serious threat on potato crops in Poland<br />

and in Europe. Propagation of pathogen-free seed tubers and appropriate<br />

phytosanitation are the only means to prevent the development of blackleg on<br />

potato plants in the field conditions.<br />

The development of the Multiplex PCR provides a tool for fast and easy<br />

detection of pectinolytic bacteria in symptomatic potato plants. The Multiplex<br />

PCR, that utilizes three pairs of specific primers, enables detection of all three<br />

bacterial species responsible for blackleg and soft rot: Pba, P. carotovorum<br />

subsp. carotovorum (Pcc) and Dickeya sp. (Dsp) in the tested sample. The level<br />

of detection for Dsp is 0.01 ng of genomic DNA in a single reaction, while for<br />

Pcc and Pba it is 0.1 ng.<br />

In symptomatic potato plants, different groups of bacteria are found in<br />

a great abundance. Therefore, the detection limits for Multiplex PCR were also<br />

checked in the presence of additional genomic DNA isolated from Pseudomonas<br />

fluorescens CCM2115. In this case, the detection limits for Pcc, Pca and Dsp<br />

decrease tenfold.<br />

For the detection of this pathogens in the field samples, the modified protocol<br />

for isolation of total genomic DNA from plant homogenates (Llop et al. 1999)<br />

was employed. The detection limits of the pathogens in homogenates of potato<br />

tuber and of potato stem and leaves were defined.<br />

The recommended Multiplex PCR assay enables simultaneous detection<br />

and identification of the pectinolytic bacteria (Pcc, Pba and Dsp) responsible<br />

for the occurrence of blackleg and soft rot on potato plants and tubers.<br />

Literatura<br />

Laurila J. i in. 2008. European Journal of Plant Pathology 122: 213-225<br />

Llop P. i in. 1999. Journal of Microbiological Methods 37: 23 – 31<br />

Sławiak M. i in., 2009a, European Journal of Plant Pathology 125: 245–261<br />

Sławiak M. i in., 2009b, Plant Pathology 58 (4): 794<br />

111


112<br />

ZRÓŻNICOWANIE POPULACJI GRZYBÓW RODZAJU<br />

RHIZOCTONIA W WYBRANYCH SZKÓŁKACH LEŚNYCH<br />

NA TERENIE WIELKOPOLSKI<br />

Marta Bełka i Małgorzata Mańka<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

marta.belka@up.poznan.pl<br />

Sosna zwyczajna (Pinus sylvestris L.) rośnie na 60,4% powierzchni lasów<br />

wszystkich form własności. Tak duży zasięg terytorialny najważniejszego gatunku<br />

lasotwórczego w Polsce wymaga ciągłej produkcji dobrej jakości materiału<br />

sadzeniowego do odnowień drzewostanów.<br />

Celem badań było zbadanie zróżnicowania gatunkowego i wewnątrzgatunkowego<br />

grzybów zgorzelowych rodzaju Rhizoctonia w siedmiu szkółkach<br />

leśnych położonych na terenie Wielkopolski. Zróżnicowanie gatunkowe patogenów<br />

zostało zbadane za pomocą metod molekularnych a także konwencjonalnych<br />

metod identyfikacji. Badania prowadzono w latach 2004-2010.<br />

Wszystkie uzyskane izolaty grzybów rodzaju Rhizoctonia przypisane zostały<br />

do dziewięciu różnych grup anastomozowych. Osiem spośród nich należało do<br />

Rhizoctonia wielojądrowych, natomiast jedna grupa należała do Rhizoctonia<br />

dwujądrowych.<br />

Zbadana została także patogeniczność poszczególnych izolatów dla siewek<br />

sosny oraz ich tempo wzrostu w powiązaniu z ich przynależnością do poszczególnych<br />

grup anastomozowych.<br />

Summary<br />

RHIZOCTONIA SPECIES POPULATION DIVERSITY IN CHOSEN<br />

NURSERIES IN WIELKOPOLSKA REGION<br />

Scots pine (Pinus sylvestris L.) grows on 60.4% of forest area in Poland,<br />

including all forms of ownership. Such a large area of the most important<br />

forest-forming species requires continuous production of large quantities of a<br />

high quality planting stock for reforestation.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 112-113<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


The aim of this study was examining differences in isolates of Rhizoctonia<br />

complex from seven forest nurseries located in the Wielkopolska region.<br />

The diversity of Rhizoctonia spp. has been investigated using molecular and<br />

conventional identification methods. The study was conducted in 2004-2010.<br />

All of the obtained isolates were assigned to nine different anastomosis<br />

groups. Eight of them were assigned to multinucleate Rhizoctonia and one of<br />

them was assigned to binucleate Rhizoctonia.<br />

Pathogenicity of individual isolates to Scots pine seedlings and their growth<br />

have been examined in dependence on their anastomosis groups.<br />

113


114<br />

ZASTOSOWANIE KLONOWANIA I SEKWENCJONOWANIA<br />

W BADANIU RÓŻNORODNOŚCI MIKROORGANIZMÓW<br />

GLEBOWYCH<br />

Jolanta Behnke-Borowczyk i Hanna Kwaśna<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

jbehnke@up.poznan.pl<br />

Wydaje się, że o grzybach wiemy niewiele. Nasza aktualna wiedza na temat<br />

obecności i funkcji zbiorowisk grzybowych w glebie jest niewystarczająca.<br />

Musi być uzupełniona o gatunki dotychczas pomijane ze względu na ograniczenia<br />

w ich hodowli. W sytuacji niedoskonałości hodowli ogromne zastosowanie<br />

ma metagenomika. Jest to wyłaniający się kierunek nowoczesnej mikrobiologii,<br />

który powoli rewolucjonizuje rozumienie i postrzeganie świata. Metogenomika<br />

uwzględnia m.in. klonowanie DNA pozyskiwanego bezpośrednio z naturalnych<br />

środowisk i sekwencjonowanie bibliotek genomowych. Pozwala na<br />

testowanie całych populacji mikroorganizmów występujących w danym środowisku,<br />

bez konieczności ich hodowli w laboratorium. Pozwala na odkrycie<br />

obecności nowych mikroorganizmów o potencjalnie pożytecznych funkcjach<br />

oraz na optymalizację procesów mikrobiologicznych i ich adaptację dla potrzeb<br />

komercyjnych. Metagenomika gleby jest potężnym narzędziem pozwalającym<br />

na poznanie mikrobiologicznej bioróżnorodności gleby i wykorzystanie jej dla<br />

potrzeb człowieka.<br />

W ramach metagenomiki gleby zbadano glebę leśną z Nadleśnictwa Międzychód.<br />

Całkowity DNA z gleby wyizolowano przy użyciu PowerSoil DNA Kit<br />

(Mo Bio). Następnie amplifikowano specyficzne dla grzybów (ITS 1/2 rDNA)<br />

i bakterii (16S rRNA) odcinki kwasów nukleinowych. Amplifikowany fragment<br />

poddano klonowaniu z wykorzystaniem pGEM-T Easy Vector System<br />

(Promega). Po przeprowadzeniu selekcji wstępnej na pożywce z X-gal (wybierano<br />

białe kolonie) uzyskano 81 klonów grzybowych oraz 135 klonów bakteryjnych.<br />

Utworzono oddzielne biblioteki klonów grzybowych i bakteryjnych.<br />

Poddano je selekcji wtórnej polegającej na badaniu polimorfizmu długości<br />

fragmentów restrykcyjnych (RFLP, enzymy HhaI, BsuRI). Wybrano z nich<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 114-116<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


eprezentacyjne klony do sekwencjonowania. Otrzymane sekwencje porównano<br />

z sekwencjami zdeponowanymi w NCBI. Wykonano analizę filogenetyczną<br />

badanych sekwencji.<br />

W glebie leśnej z Nadleśnictwa Międzychódu stwierdzono obecność następujących<br />

gatunków grzybów: Cadophora finlandica, Cenococcum geophilum,<br />

Gongylonema macrocystis, Phialocephala fortinii, Piloderma olivaceum, Piloderma<br />

sp., Rhizoscyphus ericae, Ascomycota spp. włączając gatunki z podgromady<br />

Pezizomycotina, i bakterii: Hydrogenophilus hirschii, Chloroflexi bacterium,<br />

Acidiobacterium, Candidatus Metachlamydia lacustris, endosymbiont<br />

Acanthamoeba sp. Stwierdzono również obecność organizmów o sekwencjach<br />

nie zdeponowanych dotychczas w NCBI. Obecności wymienionych gatunków<br />

nie stwierdzono przy zastosowaniu klasycznej metody badania mikrobioty gleby,<br />

tj. morfotypowania.<br />

Summary<br />

APPLICATION OF CLONING AND SEQUENCING IN STUDIES<br />

OF DIVERSITY OF THE SOIL MICROBIOTA<br />

Microorganisms live in all parts of the biosphere where there is liquid<br />

water. Most microorganisms remain uncharacterized. Estimates suggest that,<br />

of about 1.5 million species of fungi, of which only 70 000 species have been<br />

described, 95% remain undescribed. The reasons for this deficiency include:<br />

(i) uninvestigated habitats, (ii) the presence of axenically non-culturable<br />

organisms, (iii) inaccurate identification of catalogued samples. Strategies<br />

used to rectify this deficit include the use of comparative sequence analysis<br />

of rRNA and rDNA genes, which has already led to the discovery of many<br />

new species of Fungi and Bacteria. Culture-independent methods, mainly<br />

supported by the development of PCR-based technologies, have improved<br />

detection, identification and characterization of microorganisms directly from<br />

complex substrates such as soil, overcoming the limitations of culture-based<br />

approaches.<br />

The soil from Międzychód Forest District was studied with two independent<br />

methods for obtaining complementary results: (i) classical method based<br />

on morphology and sporulation of microorganisms (morphotyping) and (ii)<br />

molecular method. The latter involved direct extraction of total DNA from<br />

environmental (soil) samples with PowerSoil DNA Kit (Mo Bio), amplification<br />

of fungal DNA with primers specific for fungi (ITS1/2 rDNA) and bacteria<br />

(18S rRNA), cloning with pGEM-T Easy Vector System (Promega), primary<br />

selection of clones with the fungal or bacterial inserts (white colonies on medium<br />

with X-gal), creation of representative communities within clone libraries,<br />

secondary selection of clones with restriction fragment length polymorphism<br />

115


116<br />

analysis (RFLP, enzymes HhaI, BsuRI) and sequencing of the representative<br />

clones. Application of the first method helped to detect culturable and easily<br />

sporulating fungi. Application of the second method helped to detect nonculturable<br />

or morphologically similar fungi.<br />

Results from the molecular method showed that the soil from Międzychód<br />

Forest District was colonized by microbiota which included fungi: Cadophora<br />

finlandica, Cenococcum geophilum, Gongylonema macrocystis, Phialocephala<br />

fortinii, Piloderma olivaceum, Piloderma sp., Rhizoscyphus ericae, Ascomycota<br />

spp. including taxons from subphylum of Pezizomycotina, and bacteria:<br />

Hydrogenophilus hirschii, Chloroflexi bacterium, Acidiobacterium, Candidatus<br />

Metachlamydia lacustris, endosymbiont of Acanthamoeba sp. The mentioned<br />

taxons were not recorded with the classical method. Molecular method let to<br />

record also species which sequences had not been deposited at NCBI database.<br />

The molecular method is expected to contribute results that will change or<br />

enhance our understanding of the environmental role of fungal communities<br />

and their functions in the forest-soil habitat.


ZGODNOŚĆ WEGETATYWNA U VERTICILLIUM DAHLIAE<br />

Maria Rataj-Guranowska i Natalia Łukaszewska-Skrzypniak<br />

Instytut Ochrony Roślin- Państwowy Instytut Badawczy, Bank Patogenów<br />

Roślin i Badania ich Bioróżnorodności, ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

m.guranowska@iorpib.poznan.pl<br />

Verticillium dahliae Kleb. jest obok Fusarium oxysporum Schlecht.<br />

sprawcą zgorzeli naczyniowej, inaczej więdnięcia ponad dwustu gatunków<br />

roślin, w tym wielu roślin uprawnych. W obrębie patogena nie występuje nawet<br />

ograniczona specjalizacja szczepów w stosunku do gatunków roślin-gospodarzy,<br />

dlatego różnicowanie izolatów w oparciu o system form specjalnych<br />

i ras nie ma zastosowania. Jak w przypadku innych patogenów pozbawionych<br />

rozmnażania płciowego, użyteczną metodą różnicowania szczepów V. dahliae<br />

okazał się test zgodności wegetatywnej. Joaquim i Rowe w 1990 roku jako<br />

pierwsi zastosowali mutanty nit do różnicowania populacji V. dahliae z ziemniaka.<br />

Izolaty rozdzielono do czterech grup zgodności wegetatywnej; VCG 1,<br />

VCG 2 (z dwiema podgrupami VCG 2A i VCG 2B), VCG 3 i VCG 4 (z dwiema<br />

podgrupami VCG 4A i VCG 4B). Strausbaugh i in. w 1992 usunął VCG 3, badając<br />

izolaty ziemniaczane, włączając ją do VCG 4, ponieważ nieliczne izolaty<br />

tej grupy wszystkie tworzyły silniejsze heterokariony VCG 4A niż z testerem<br />

VCG 3. W badaniach własnych zaobserwowaliśmy analogiczne zjawisko (Rataj-Guranowska<br />

2006). W tej samej pracy Strausbaugh i in. wydzielono dodatkową<br />

grupę VCG 5, nigdzie nie identyfikowaną w pracach późniejszych.<br />

W 1993 roku Strausbaugh wydzielił też VCG 4A/B. Ostatnio Bhat i in. (2003)<br />

wydzielili VCG 6 dla grupy izolatów z papryki. Nikt nie potwierdził istnienia<br />

tej grupy, a przetestowane przez nas izolaty VCG 6 przesłane z USA należą do<br />

VCG 2. W naszych dziesięcioletnich badaniach (Hiemstra i Rataj-Guranowska<br />

2003, Rataj-Guranowska 2006) zaobserwowano podobne reakcje dla izolatów<br />

tworzących heterokariony z testerami VCG 1. W trzech przypadkach izolaty<br />

te zawsze tworzyły silniejsze heterokariony z testerami VCG 2. Nie zidentyfikowaliśmy<br />

ani jednego reprezentanta VCG1, badając około 90 izolatów<br />

z kilkunastu roślin. VCG 1 nie był stwierdzany w pracach ponad 60 badaczy.<br />

Wystąpił w 1-3 egzemplarzach w pracach greckich i hiszpańskich. Wyjątkiem<br />

są prace Chena (1993) oraz kilka prac Dervisa i współautorów (Dervis i in.<br />

2007, 2008). Badacze tureccy zidentyfikowali 49 izolatów VCG 1 w obrębie<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 117-119<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

117


118<br />

grupy 100 izolatów z bawełny (2008), oraz aż 189 przedstawicieli VCG 1 w obrębie<br />

207 izolatów z oliwek (2007).<br />

Sprowadziliśmy do naszej kolekcji izolaty tureckie – wg autorów przedstawicieli<br />

VCG 1.Tylko trzy z nich udało się scharakteryzować testem VCG,<br />

ponieważ reszta – aż dziewięć była zbyt zanieczyszczona drożdżami. Nieoczekiwanie<br />

wszystkie trzy zareagowały podobnie, tworząc znowu silniejsze heterokariony<br />

z testerem VCG 2 niż z testerem VCG 1. Podajemy prawdopodobny<br />

powód tak sprzecznych wyników.<br />

W świetle kilkakrotnie powtarzających się tych samych reakcji należy<br />

przypuszczać, że grupa VCG 1 powinna być włączona do VCG 2. Za przyjęciem<br />

tej hipotezy są wyniki hiszpańskich analiz molekularnych AFLP w połączeniu<br />

z sekwencjonowaniem (Collado-Romero i in. 2006).<br />

Wobec powyższych wyników i dywagacji, wydaje się, że w obrębie Verticillium<br />

dahliae istnieją tylko dwie grupy: VCG 2 i VCG 4, podzielone na podgrupy.<br />

Nawet one nie są całkowicie izolowane genetycznie, na co mamy dowód ,<br />

mianowicie jeden, jak dotąd, izolat mostowy tworzący heterokariony z obiema<br />

grupami.<br />

Summary<br />

VEGETATIVE COMPATIBILITY IN VERTICILLIUM DAHLIAE<br />

Verticillium dahliae Kleb. and Fusarium oxysporum Schlecht. cause wiltdisease<br />

more then two hundred of plant species, among them many crop plants.<br />

There is not even limited specialization of strains within this pathogen. This<br />

is the reason why differentiation based on the system of formae speciales and<br />

races is not applicable in V. dahliae. It has not sexual recombination. In such<br />

situation the vegetative compatibility is a useful method to differentiate its<br />

strains. In 1990 Joaquim and Rowe were the first researchers which applied<br />

nit mutants to differentiate V. dahliae population of isolates from potato. The<br />

isolates were devided into four vegetative compatibility groups (VCGs): VCG 1,<br />

VCG 2 (with two subgroups VCG 2A and VCG 2B), VCG 3 and VCG 4 (with two<br />

subgroups VCG 4A and VCG 4B). In 1992 Strausbaugh et al. based on study<br />

of more potato isolates cancelled VCG 3 and included this group to VCG 4, as<br />

rare representants of VCG 3 formed stronger heterokaryons with VCG 4 tester<br />

than with VCG 3 tester. In our studies we have got similar phenomenon (Rataj-<br />

Guranowska 2006). In the same work Strausbaugh et al. created also a new<br />

VCG 5, not detected in the following works. In 1993 Strausbaugh defined also<br />

VCG 4A/B. More recently Bhat et al. (2003) identified VCG 6 for the group of<br />

isolates from pepper. Nobody else identified this group. The isolates sent from<br />

USA were tested in our laboratory and were placed in VCG 2. In our lasting<br />

10-years studies. (Hiemstra and Rataj-Guranowska 2003, Rataj-Guranowska


2006) similar reactions have been observed in case of the isolates forming<br />

heterokaryons with VCG 1 testers. In three cases the isolates always formed<br />

stronger heterokaryons with VCG 2 testers. We were unable to identify a single<br />

VCG 1 isolate within 90 isolates studied and originated from different plant<br />

species from nine countries. VCG 1 was also not present in the works of more<br />

that 60 workers. It happened 1-3 times in few works of American, Greek and<br />

Spanish researchers. There are few exceptions: by Chen (1993) and Dervis et<br />

al.(2007, 2008). Turkish scientists identified 49 representants of VCG 1 within<br />

100 isolates fom cotton (2008) and as much as 189 representants of VCG 1<br />

within 207 isolates from olive trees (2007).<br />

We studied the same Turkish isolates in our laboratory, sent as VCG 1<br />

representants. Only three of them could be characterized due to the strong<br />

contamination of other nine isolates by Saccharomycetaceae. Unexpectedly all<br />

of them reacted in a similar way, they formed stronger heterokaryons with VCG<br />

2 testers than with VCG 1. We try to explain for these contradictory results.<br />

In the light of those repetitive results we might consider the possible<br />

including of VGC 1 to VCG 2. The results of Spanish molecular works by<br />

means of AFLP and the sequence analyses (Collado-Romero et al.) support our<br />

considerations.<br />

On the basis of above results and considerations, it seems that within<br />

Verticillium dahliae only two vegetative compatibility groups exist: VCG<br />

2 and VCG 4, each devided on two subgroups. Even they are not completely<br />

genetically isolated. However we can prove it on one example, so far we have<br />

identified one bridge isolate forming heterokaryons with testers of both groups.<br />

119


120<br />

WYSTĘPOWANIE I SZKODLIWOŚĆ<br />

COLLETOTRICHUM DEMATIUM (FR.) GROVE<br />

DLA KMINKU ZWYCZAJNEGO CARUM CARVI L.<br />

Zofia Machowicz-Stefaniak i Ewa Zalewska<br />

University of Life Sciences, Department of <strong>Phytopathology</strong> and Mycology,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20- 069 Lublin<br />

zofia.machowicz@up.lublin.pl, ewa.zalewska@up.lublin.pl<br />

Grzyby z rodzaju Colletotrichum występują we wszystkich strefach klimatycznych<br />

i powodują choroby różnych gatunków roślin. Mogą być polifagami,<br />

a niektóre gatunki monofagami roślin. Za gatunek typowy rodzaju został uznany<br />

C. dematium. Grzyb ten jest saprotrofem i może wtórnie zasiedlać tkanki<br />

licznych gatunków roślin, a patogeniczne szczepy mogą powodować antraknozy<br />

roślin w różnych rejonach geograficznych. W obecnych badaniach izolaty<br />

C. dematium uzyskano z roślin kminku zwyczajnego po raz pierwszy w Polsce<br />

w 2005 roku. W kolejnych latach, tj. 2006 i 2007 grzyb występował z coraz<br />

większą częstotliwością. Identyfikację gatunku przeprowadzono na podstawie<br />

cech makroskopowych, mikroskopowych i wymiarów kolonii, acerwulusów, konidiów,<br />

szczecinek i przycistek wytworzonych na PDA, uznanej przez autorów<br />

za optymalne podłoże do hodowli i oznaczania tego grzyba. Cechą charakterystyczną<br />

wszystkich izolatów było intensywne barwienie podłoża hodowlanego<br />

na kolor czerwony, co przemawia za zdolnością C. dematium do tworzenia<br />

wtórnych metabolitów. Przeprowadzone badania wykazały, że większość gatunków<br />

fylosferowych grzybów z uprawy kminku zwyczajnego ogranicza wzrost<br />

C. dematium, o czym świadczą dodatnie jednostkowe efekty biotyczne (IEB),<br />

jednakże rozmiar ograniczającego działania był zróżnicowany. Za najbardziej<br />

efektywnych antagonistów C. dematium, o czym świadczy całkowite opanowanie<br />

i destrukcja kolonii grzyba po kilku dniach hodowli dwuorganizmowych,<br />

uznano Trichoderma harzianum, T. koningii i T. viride. Przeprowadzone testy<br />

infekcyjne wykazały, że badane izolaty C. dematium mogą być patogeniczne<br />

dla kminku zwyczajnego, szczególnie w pierwszych fazach rozwoju <strong>rośliny</strong>.<br />

Szkodliwość patogenu polega na hamowaniu kiełkowania rozłupek, nekrozie<br />

kiełków, zgorzeli przedwschodowej, a nawet zamieraniu siewek. Uznano, że<br />

najszybsze chorobotwórcze oddziaływanie badanych izolatów C. dematium wy-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 120-122<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


stępowało po zastosowaniu płynów pohodowlanych patogenu jako materiału<br />

infekcyjnego. Spośród testowanych izolatów najbardziej patogeniczny okazał<br />

się izolat K 426. Wynika to najprawdopodobniej z obecności fitotoksycznych<br />

związków we wtórnych metabolitach grzyba. Spośród preparatów biotechnicznych<br />

i chemicznych w bezpośrednim ograniczaniu wzrostu i rozwoju C. dematium<br />

in vitro najefektywniejsze były Biosept 33 SL oraz Dithane Neo Tec 75<br />

WG, Helm-Cymi 72,5 WP, Kaptan 50 WP i Amistar 50 SC.<br />

Summary<br />

OCCURRENCE AND HARMFULNESS OF COLLETOTRICHUM<br />

DEMATIUM (FR.) GROVE TO CARAWAY CARUM CARVI L.<br />

Fungi from the genus Colletotrichum occur in all climatic zones and cause<br />

diseases of various species of plant. They could be polyphagic but some of the<br />

them are the pathogens of only one species of host plant. C. dematium have<br />

been recognized as typical species of its genera. This fungus is a saprotroph and<br />

it could colonize tissues of numerous species of plant as a secondary pathogen<br />

and pathogenic strains could cause anthracnose of plants in various climatic<br />

geographical regions. In the present studies the isolates of C. dematium<br />

were obtained from caraway plant for the first time in Polish conditions. In<br />

subsequent years, i.e. 2006 and 2007, the fungus appeared with increasing<br />

frequency. Identification of the species was based on the characteristics of<br />

the macroscopic and microscopic features, measurements of the diameter of<br />

colonies, acervuli, conidia, and appressoria and setae produced on PDA. This<br />

medium was recognized by the authors as the optimal medium for the culture<br />

and identification of the fungus. A characteristic feature of all isolates was<br />

intense ability to color the culture medium on the red color, which suggests the<br />

ability of C. dematium to produce secondary metabolites. The present studies<br />

showed that a lot of phyllosphere fungi obtained from plants taken from<br />

caraway plantations limited the growth of C. dematium and the positive values<br />

of IBE indicate it. However the size of limiting effect was varied. Trichoderma<br />

harzianum, T. koningii and T. viride were recognized as the most effective<br />

antagonists for C. dematium, what was indicated by complete overgrowth and<br />

destruction of the pathogen colonies by these antagonist just after a few days of<br />

dual growth. Infectious tests showed that the studies isolates of C. dematium<br />

may be pathogenic to caraway, especially in first phases of plants development.<br />

The harmfulness of the pathogen was indicated as limiting the germination of<br />

schizocarps, necrosis of germs, post-emergence damping of and even necrosis<br />

of seedlings. It was considered that the highest effect of pathogenicity of tested<br />

isolates C. dematium occurred after using the post-culture liquids of the<br />

pathogen as infectious material. Among the tested isolates of C. dematium,<br />

121


122<br />

strain K 426 was more aggressive and pathogenic. This fact is due probably<br />

to the presence of phytotoxic compounds in the secondary metabolites of the<br />

fungus. Among the biotechnical and chemical preparations in a direct reduction<br />

of the growth and development of C. dematium Biosept 33 SL and Dithane Neo<br />

Tec 75 WG, Helm-Cymi 72.5 WP, Kaptan 50 WP and Amistar 50 SC were most<br />

effective in vitro.


PATOGENICZNOŚĆ PHOMA STRASSERI MOESZ<br />

DLA ŁODYG I ROZŁOGÓW MIĘTY PIEPRZOWEJ<br />

MENTHA PIPERITA L.<br />

Beata Zimowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

beata.zimowska@up.lublin.pl<br />

Czarna zgnilizna łodyg i rozłogów różnych gatunków mięty powodowana<br />

przez Phoma strasseri jest jedną z najgroźniejszych chorób tych roślin uprawianych<br />

w Indiach, Japonii, Stanach Zjednoczonych oraz w Europie. Straty plonu<br />

sięgające nawet 90% spowodowane są zamieraniem roślin na skutek szybko<br />

postępującej degradacji tkanek łodyg i rozłogów, wynikającej z enzymatycznego<br />

rozkładu związków pektynowych przez poligalakturonazę oraz enzymy<br />

macerujące wytwarzane przez P. strasseri. Sygnalizowany od 2003 roku przez<br />

polskich producentów mięty pieprzowej problem pogarszania się zdrowotności<br />

roślin skłonił do podjęcia badań własnych nad występowaniem i szkodliwością<br />

tego patogenu. Stosując aktualne metody taksonomii grzybów z rodzaju Phoma<br />

i podłoża standardowe, z roślin mięty z symptomami zgnilizny łodyg i rozłogów<br />

uzyskano po raz pierwszy w Polsce izolaty P. strasseri. Zgodność cech diagnostycznych<br />

otrzymanych izolatów została potwierdzona na podstawie kultury<br />

wzorcowej CBS. 126. 93 otrzymanej z Centralnego Banku Patogenów w Holandii<br />

( Centraalbureau voor Schimmelcultures, Utrecht, Netherland).<br />

Dla potwierdzenia chorobotwórczych uzdolnień polskich izolatów P. strasseri,<br />

przeprowadzone zostały testy patogeniczności w warunkach in vitro,<br />

zgodnie z postulatami Kocha. W badaniach uwzględniono 6 cm fragmenty<br />

łodyg i rozłogów mięty pieprzowej oraz 4 izolaty P. strasseri pochodzące z kolekcji<br />

kultur Katedry Fitopatologii i Mikologii Uniwersytetu Przyrodniczego<br />

w Lublinie. Doświadczenie przeprowadzone w komorach wilgotnościowych<br />

uwzględniało trzy sposoby inokulacji. Dla każdego sposobu sztucznej inokulacji<br />

wykorzystano po 120 fragmentów łodyg i rozłogów ( 4 izolaty x 30 fragmentów<br />

roślin). Obserwacje procesu rozwoju symptomów chorobowych prowadzono<br />

przez okres 12 dni, po czym na podstawie opracowanej 5 stopniowej skali<br />

wyliczono indeks porażenia. Wykonane zostały również badania ultrastruktu-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 123-125<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

123


124<br />

ry sztucznie inokulowanych organów mięty, przy wykorzystaniu skaningowego<br />

mikroskopu elektronowego SEM.<br />

Uzyskane wyniki testów patogeniczności potwierdziły chorobotwórczy charakter<br />

badanych izolatów P. strasseri dla łodyg i rozłogów mięty pieprzowej,<br />

o czym świadczyły wysokie wartości indeksu porażenia we wszystkich trzech<br />

kombinacjach doświadczenia, a symptomy chorobowe na sztucznie inokulowanych<br />

organach były podobne do objawów występujących na roślinach w naturalnych<br />

warunkach uprawy. Ponadto cechy morfologiczne zreizolowanych<br />

kultur były zgodne z cechami izolatów uwzględnionych w badaniach. Badania<br />

ultrastruktury sztucznie inokulowanych łodyg i rozłogów mięty wskazały<br />

na bezpośrednią infekcję patogenu przez kutikulę oraz tworzenie na końcu<br />

strzępki kiełkowej struktury adhezyjnej w postaci apresorium. Obecność<br />

strzępek P. strasseri w komórkach epidermy już po 48 godzinach od inokulacji<br />

może wskazywać na krótki okres inkubacji patogenu.<br />

Summary<br />

PATHOGENICITY OF PHOMA STRASSERI MOESZ FOR STEMS<br />

AND RHIZOMES OF PEPPERMINT MENTHA PIPERITA L.<br />

Black stem and rhizomes rot of different species of mint caused by Phoma<br />

strasseri is one of the most dangerous diseases of these plants cultivated in India,<br />

Japan, United States and Europe. Yield losses, reaching up to 90%, are due to<br />

quickly progressing tissue degradation of stems and rhizomes, resulting from<br />

the enzymatic decomposition of pectins by polygalacturonase and macerating<br />

enzymes produced by P. strasseri. The problem of degrading healthiness of<br />

plants which has been signalized since 2003 by Polish producers of peppermint<br />

prompted studies on the occurrence and harmfulness of this pathogen. Thanks<br />

to use of the current principles of the taxonomy of fungi from genus Phoma<br />

and using the standard media, isolates of P. strasseri were obtained from the<br />

peppermint with the symptoms of stem and rhizomes rot. These species had not<br />

been found in Poland earlier. The agreement of diagnostic features of obtained<br />

isolates of P. strasseri has been confirmed on the basis of the standard culture<br />

CBS 126. 93 attained from the CBS Fungal Biodiversity Centre in Netherland<br />

(Centraalbureau voor Schimmelcultures, Utrecht, Netherland).<br />

In vitro pathogenicity tests were carried out to confirm the pathogenic<br />

character of Polish isolates of P. strasseri, according to Koch’s postulates. The<br />

studies considered 6 cm fragments of peppermint stems and rhizomes and four<br />

isolates of P. strasseri coming from the collection of cultures of the Department<br />

of Plant Pathology and Mycology, University of Life Sciences in Lublin.<br />

The pathogenicity test was conducted in moisture chambers and considered<br />

three methods of inoculation. For each method of artificial inoculation 120


fragments of stems and rhizomes (4 isolates x 30 fragments of plant) were<br />

used. The observations of disease progress were performed during 12 days,<br />

after that on the basis of five degree scale the index of infection was counted.<br />

The ultrastructural studies of artificial inoculated organs of peppermint were<br />

made using scanning electron microscope SEM.<br />

The obtained results of the pathogenicity tests confirmed the pathogenic<br />

character of studied isolates of P. strasseri for peppermint stems and rhizomes.<br />

The disease symptoms of the inoculated organs were similar to symptoms<br />

occurring on the plants in the natural conditions of cultivation. The Koch’s<br />

postulates were fulfilled.<br />

125


126<br />

CZYNNIKI OGRANICZAJĄCE WYKORZYSTYWANIE<br />

PREPARATÓW MIKROBIOLOGICZNYCH<br />

W ROLNICTWIE (OCHRONA ROŚLIN,<br />

STYMULOWANIE PLONÓW)<br />

Stefan Martyniuk<br />

IUNG-PIB, Zakład Mikrobiologii Rolniczej, ul. Czartoryskich 8, 24-100 Puławy<br />

sm@iung.pulawy.pl<br />

W praktyce rolniczej preparaty mikrobiologiczne stosowane są przede<br />

wszystkim w ochronie roślin do ograniczania rozwoju patogenów i szkodników<br />

(biologiczna ochrona), zwłaszcza w rolnictwie integrowanym i ekologicznym.<br />

Dostępne są również preparaty mikrobiologiczne wykorzystywane do stymulowania<br />

wzrostu i plonowania niektórych roślin uprawnych, a przykładami<br />

takich biopreparatów są szczepionki zawierające bakterie symbiotyczne roślin<br />

bobowatych (motylkowatych) oraz szczepionki stosowane w leśnictwie do mikoryzacji<br />

sadzonek w szkółkach drzew. W 2005 roku w krajach członkowskich<br />

OECD zarejestrowanych było około 214 biologicznych środków ochrony roślin<br />

(biopestycydów) opartych na mikroorganizmach (Kabaluk i Gazdik 2005). Jest<br />

to dość liczna grupa biopreparatów wskazująca na to, że badania prowadzone<br />

w wielu ośrodkach naukowych zakończyły się sukcesem, a więc wdrożeniem do<br />

produkcji biopestycydów, zawierających różne grupy mikroorganizmów (wirusy,<br />

bakterie i grzyby) oraz mikroskopijne nicienie (Tabela 1). Jest to również<br />

niewątpliwy sukces producentów tych środków, często niewielkich firm, którzy<br />

podjęli trud, także finansowy, związany z rejestracją swoich produktów.<br />

Trzeba w tym miejscu zaznaczyć, że rejestracja biologicznych środków ochrony<br />

(b.ś.o.) roślin odbywa się na podobnych zasadach jak chemicznych środków<br />

ochrony (Tomalak 2007, Tomalak 2010), czyli jest to proces nie tylko rygorystyczny<br />

ale także bardzo kosztowny. Prof. Tomalak w swoim opracowaniu<br />

(2007) podaje przykład szwedzkiej firmy Bioagri, która na zarejestrowanie na<br />

terenie UE dwóch biopreparatów zawierających bakterię Pseudomonas chlororaphis<br />

wydała 4,3 miliona Euro. Trudna i kosztowna procedura rejestracyjna<br />

b.ś.o. roślin powoduje, że część producentów rezygnuje z wytwarzania<br />

biopreparatów, co niewątpliwie zmniejsza ich asortyment i ogranicza zakres<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 126-131<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


stosowania biologicznej ochrony w rolnictwie i ogrodnictwie. Z tego m.in. powodu<br />

od kilku lat trwają w UE prace zmierzające do zmiany (złagodzenia)<br />

zasad rejestracji b.ś.o. roślin. Choć proces rejestracyjny tych środków jest dość<br />

kłopotliwy dla producentów i niewątpliwie wymaga zmian, to jednak należy<br />

podkreślić, że zapewnia on nie tylko bezpieczeństwo ich stosowania (dla ludzi<br />

i środowiska), ale także powoduje, że b.ś.o. są produktami rzetelnymi. Przy<br />

czym w przypadku tych środków chodzi zwłaszcza o rzetelność w procesie ich<br />

wytwarzania i czystości produktu końcowego. Jest to szczególnie ważne w odniesieniu<br />

do preparatów mikrobiologicznych, bowiem ich proces produkcyjny<br />

obejmuje m.in. kilkuetapowe rozmnażanie czystej kultury mikroorganizmu,<br />

który jest aktywnym czynnikiem preparatu. Proces ten rozpoczyna się od przygotowania<br />

czystej „kultury matecznej”, a w kolejnych etapach dochodzi do dalszego<br />

rozmnożenie mikroorganizmów w wyniku ich przenoszenia do urządzeń<br />

hodowlanych (fermentorów) zawierających coraz większe objętości sterylnych<br />

pożywek, najczęściej płynnych. Liczba tych etapów uzależniona jest oczywiście<br />

od skali produkcji. W przypadku niektórych biopreparatów, np. zawierających<br />

Bacillus thuringienis, skala produkcji jest bardzo duża i prowadzona jest ona<br />

z wykorzystaniem fermentorów o objętości nawet 100 000 litrów .<br />

Tabela 1. Biologiczne środki ochrony roślin zawierające mikroorganizmy zarejestrowane w krajach<br />

OECD [1]<br />

Grupa biopestycydów<br />

Bioherbicydy<br />

Biobakteriocydy<br />

Biofungicydy<br />

Bioinsektycydy<br />

Bionematocydy<br />

Liczba<br />

zarejestrowanych<br />

preparatów<br />

1<br />

5<br />

60<br />

83<br />

64<br />

Najważniejsze organizmy jako aktywne<br />

składniki (Liczba preparatów)<br />

Alternaria destruens<br />

Agrobacterium (3), Pseudomonas, Bacillus<br />

Trichoderma (25), Gliocladium, Pythium,<br />

Coniothyrium,<br />

Streptomyces<br />

Bacillus, Pseudomonas,<br />

Bacillus thuringiensis (72), Baeuveria basiana<br />

(10)<br />

Metharhizium (8), Peacilomyces, Verticillium,<br />

Bacillus (8), wirusy (14), Heterorahabditis<br />

(10), Steinernema (20)<br />

127


128<br />

Ponadto, procedura rejestracyjna wymaga od producentów podania wielu<br />

innych ważnych informacji, m.in. takich jak: - dokładna nazwa i charakterystyka<br />

mikroorganizmu (makroorganizmu), - dane dotyczące kolekcji, w której<br />

czysta kultura mikroorganizmu została zdeponowana, - ilościowy skład preparatu<br />

(aktywna forma mikroorganizmu i jego zawartość, a także innych składników,<br />

np. nośnika), - metoda oznaczania (identyfikacji) składu produktu,<br />

- warunki przechowywania i okres przydatności, - zakres (cel) i zasady stosowania,<br />

- wynik badań potwierdzających skuteczność biopreparatu. Wszystko<br />

to powoduje, że b.ś.o. roślin są bez wątpienia produktami rzetelnymi, znany<br />

jest bowiem ich dokładny skład, konkretny cel i zakres ich stosowania, oraz<br />

- co jest bardzo ważne – znana jest metoda badania i identyfikacji, a więc<br />

także kontrolowania, ich składu i zawartości czynnika aktywnego. Skuteczność<br />

biopreparatów jest jednym z najważniejszych czynników decydujących<br />

o wykorzystywaniu tych produktów w praktyce rolniczej, ale dokładniejsze<br />

omówienie tego zagadnienia wymagałoby obszernego opracowania. Trzeba<br />

jednak stwierdzić, że skuteczność ta jest w przypadku wielu b.ś.o. niewątpliwie<br />

mniejsza niż środków chemicznych. Dotyczy to zwłaszcza biopreparatów<br />

opartych na mikroorganizmach (bakteriach i grzybach), które aplikowane są<br />

do gleby, czyli do środowiska charakteryzującego się bardzo dużą złożonością<br />

różnego rodzaju oddziaływań, w tym antagonistycznych, oraz ogromną konkurencyjnością<br />

o energię i składniki odżywcze pomiędzy drobnoustrojami glebowymi<br />

i innymi mieszkańcami gleby. Gleba jest także środowiskiem o dużej<br />

zmienności czynników abiotycznych (wilgotność, temperatura, odczyn (pH),<br />

zabiegi agrotechniczne), które bardzo istotnie wpływają na przeżywalność i skuteczność<br />

organizmów wprowadzanych do gleby. Być może jest to jeden z ważniejszych<br />

czynników powodujących, że w ostatnim dziesięcioleciu sprzedaż<br />

preparatów zawierających makroorganizmy (pasożytnicze i drapieżne owady,<br />

drapieżne roztocza), czyli środków stosowanych w bardziej kontrolowanych<br />

i mniej złożonych warunkach (szklarnie, części nadziemne roślin) jest znacznie<br />

większa niż biopreparatów opartych na mikroorganizmach - odpowiednio<br />

55-60% i 26% ogólnej sprzedaży b.ś.o. roślin [3,4]. Warto też dodać, że choć<br />

zakres praktycznego wykorzystywania biopreparatów w ochronie roślin jest<br />

ciągle mały, ma on jednak tendencje wzrostowe. Na przykład, Tomalak [3]<br />

podaje, że w 2004 roku wartość rynku preparatów biologicznych (opartych na<br />

makroorganizmach i mikroorganizmach) stosowanych w ochronie roślin wyniosła<br />

około 2,5% ogólnej wartości rynku środków ochrony roślin, a obecnie<br />

udział ten prognozowany jest na 4,2 - 4,5%. Wzrastające zapotrzebowanie na<br />

biopreparaty związane jest prawdopodobnie głównie z rozwojem proekologicznych<br />

metod uprawy roślin, w tym rolnictwa ekologicznego.<br />

Badania nad wykorzystaniem różnych grup mikroorganizmów glebowych<br />

w praktyce rolniczej do podnoszenia żyzności gleb i plonowania roślin pro-


wadzono już od zarania rozwoju mikrobiologii glebowej. Na przykład, szczepionki<br />

zawierające bakterie symbiotyczne roślin motylkowatych (bobowatych)<br />

stosowano już po koniec XIX wieku. Szczepionki te produkowane i stosowane<br />

są w wielu krajach także obecnie i jest to właściwie jedyny przykład tak szerokiego<br />

wykorzystywania preparatów mikrobiologicznych w praktyce rolniczej<br />

(Vessey 2003). Sukces ten związany jest m.in. z tym, że szczepionki z bakteriami<br />

symbiotycznymi (rizobiami) stosowane są najczęściej do otoczkowanie<br />

nimi nasion roślin bobowatych. Taki sposób aplikacji ułatwia wprowadzenie<br />

dużej liczebności bakterii (10 3 -10 6 komórek na każde nasionko) bezpośrednio<br />

do strefy korzeniowej siewek roślin, zwiększając w efekcie szanse (konkurencyjność)<br />

bakterii szczepionkowych na zawiązanie efektywnej symbiozy (brodawek)<br />

z korzeniami roślin. Wprowadzanie biopreparatów mikrobiologicznych<br />

do całej masy gleby na polu nie daje najczęściej żadnych efektów. Próby takie<br />

prowadzono z wieloma grupami drobnoustrojów glebowych, m.in. z bakteriami<br />

fosforolitycznymi, wolno żyjącymi w glebie asymilatorami N 2 (Azotobacter<br />

spp.) i innymi. Niska skuteczność szczepionek doglebowych związana jest ze<br />

wspomnianymi już skomplikowanymi interakcjami pomiędzy organizmami<br />

glebowymi, oraz z oddziaływaniem bardzo zmiennych warunków pogodowych<br />

i abiotycznych właściwości gleb. Na przykład, bakterie należące do rodzaju<br />

Azotobacter charakteryzują się dużą wrażliwością na kwaśny odczyn gleby.<br />

Bakterie te nie występują zwykle, lub ich liczebności są bardzo niskie w glebach<br />

o pH poniżej 6,0. Szczepienie gleb kwaśnych nawet dużą masą preparatów<br />

zawierających omawiane bakterie nie może dać jakichkolwiek efektów,<br />

ponieważ nie zasiedlą one tych gleb, a staną się jedynie pożywieniem dla innych<br />

organizmów glebowych. Także szczepienie azotobakterem gleb o odczynie<br />

sprzyjającym rozwojowi tych bakterii nie daje w warunkach produkcyjnych<br />

istotnych efektów pozytywnych (Maliszewska 1953) np. w postaci przyrostu<br />

w glebach zawartości azotu czy plonów roślin, m.in. dlatego, że proces wiązania<br />

N 2 wymaga dużych ilości energii, której w glebie na ogół brakuje, a jeśli<br />

jest to toczy się o nią intensywna konkurencja. Ponadto, należy pamiętać, że<br />

każda gleba w warunkach naturalnych zasiedlona jest przez mikroorganizmy,<br />

które w toku wielowiekowego procesu glebotwórczego najlepiej przystosowały<br />

się do życia w danej glebie i skolonizowały w niej wszystkie dostępne i umożliwiające<br />

egzystencję „nisze” ekologiczne. Drobnoustroje wprowadzane do gleby<br />

w postaci szczepionek są zwykle eliminowane lub ich liczebność redukowana<br />

jest do poziomu naturalnego. Trudności w uzyskaniu istotnych efektów ze stosowania<br />

biopreparatów doglebowych wynikają także z prostych proporcji ilościowych.<br />

Na przykład, w jednym gramie gleby można znaleźć od kilkudziesięciu<br />

milionów do miliarda komórek bakteryjnych, a w nawozach naturalnych<br />

(gnojowica, obornik) ich liczebność przekracza nawet 10 11 komórek w 1 gramie.<br />

W przeliczeniu na hektar biomasa mikroorganizmów waha się od kilku do<br />

kilkunastu ton. Aby mikroorganizmy wprowadzane do gleby w bioprepara-<br />

129


130<br />

cie mogły rozwijać się i konkurować z tak ogromną biomasą drobnoustrojów<br />

glebowych, należałoby stosować bardzo duże, nieopłacalne w praktyce, ilości<br />

biopreparatów oraz zmienić środowisko glebowe tak, aby faworyzowało ono<br />

rozwój wprowadzanego organizmu. Oznaczając liczebność mikroorganizmów<br />

w jednym z ww. biopreparatów stwierdziliśmy (dane nieopublikowane), że<br />

w zalecanej dawce (1l) na hektar zawiera on mniej bakterii niż można znaleźć<br />

w 100 gramach gleby. Odpowiedź na pytanie, czy tak niewielka zawartość<br />

drobnoustrojów w tym preparacie, w dodatku nieprzystosowanych do życia<br />

w środowisku glebowym, może w jakikolwiek sposób wpłynąć na właściwości<br />

gleby i plonowanie roślin - wydaje się oczywista.<br />

Summary<br />

LIMITING FACTORS IN THE USE OF MICROBIAL PREPARATIONS<br />

IN AGRICULTURE (PLANT PROTECTION, YIELD IMPROVING)<br />

In agricultural practice microbial preparations (inoculants)are used to control<br />

plant pathogens and pests (biological control), particularly in the integrated<br />

and ecological agriculture, and to stimulate growth and yields of crops.<br />

Main principles of production and evaluation of microbial bio-preparations,<br />

as well as factors limiting their use in practice, are discussed in this article.<br />

The registration procedure of biological control agents (b.c.a.), ensures that<br />

the commercial use of b.c.a. is safe for the people and for the environment<br />

and also that these products are fair as far as their quality is concern. With<br />

respect to microbial preparation and other bio-products used to improve soil<br />

properties, particularly those designated for ecological (organic) crop production,<br />

the registration procedure is mild. This enables selling microbial bio-preparations<br />

whose quality and effectiveness have not been proven. More critical<br />

assessment of experimental results of studies on these products would result<br />

in spreading of more reliable information on the real quality and usefulness of<br />

such bio-preparations.<br />

Literatura<br />

Kabaluk T., Gazdik K., 2005: Directory of Microbial Pesticides for Agricultural<br />

Crops in OECD Countries. Agriculture and Agri-Food, Canada 2005,<br />

s. 242. http://dsp-psd.pwgsc.gc.ca/collection_2009/agr/A42-107-2007E.pdf<br />

Maliszewska W., 1953: Szczepienie roślin azotobakterem. Roczniki Nauk Rolniczych.<br />

68(A1): 3-51.<br />

Tomalak M., 2007: Rejestracja biologicznych środków ochrony roślin w Europie<br />

– nowe perspektywy. Progress in Plant Protection/Postępy w Ochronie<br />

Roślin, 47(4): 233-240.


Tomalak M., 2010: Rynek biologicznych środków ochrony roślin i przepisy legislacyjne.<br />

Progress in Plant Protection/Postępy w Ochronie Roślin 50(3):<br />

1053-1063.<br />

Vessey J.K., 2003: Plant growth promoting rhizobacteria as biofertilizers.<br />

Plant and Soil 255: 571-586.<br />

131


132<br />

GRZYBY Z RODZAJU FUSARIUM W MIKOLOGII<br />

MEDYCZNEJ<br />

Maria Dynowska 1 , Ewa Sucharzewska 1 , Grażyna Barańska 2<br />

i Piotr Troska 2<br />

1 Uniwersytet Warmińsko Mazurski, Wydział Biologii, Katedra Mikologii,<br />

ul. Oczapowskiego 1A, 10-719 Olsztyn-Kortowo<br />

2 Uniwersytet Warmińsko Mazurski, Wydział Nauk Medycznych, Oddział<br />

Klinicznej Chirurgii Onkologicznej, ul. Wojska Polskiego 37, 10-228 Olsztyn<br />

ewko@uwm.edu.pl<br />

Grzyby z rodzaju Fusarium coraz częściej wymieniane są wśród czynników<br />

potencjalnie chorobotwórczych dla człowieka. Większość z nich to formy oportunistyczne,<br />

które nie są w stanie zaatakować <strong>zdrowe</strong>go organizmu. Jedną z istotnych<br />

cech właściwości ekofizjologicznych grzybów potencjalnie chorobotwórczych<br />

dla człowieka jest powinowactwo do różnych tkanek i narządów. Grzyby<br />

z rodzaju Fusarium wykazują wyraźną tendencję do zajmowania naczyń krwionośnych.<br />

Dla określenia grzybic wywołanych przez nie używa się dwóch terminów:<br />

hialohyfomikozy lub fuzariozy. O ile w przypadku roślin stopień pasożytnictwa<br />

grzybów z rodzaju Fusarium jest wyraźnie zdefiniowany, to w mikologii<br />

lekarskiej ciągle istnieje problem właściwej oceny ich patogeniczności.<br />

Celem pracy była analiza kilku przypadków hialohyfomikozy wywołanych<br />

przez F. solani i oxysporum oraz zwrócenie uwagi, że sporadyczne notowania<br />

grzybów z tego rodzaju mogą być wynikiem błędów w standardowej diagnostyce.<br />

Materiał do badań stanowiły wymazy i fragmenty tkanki martwiczej ogniska<br />

zapalnego rany podudzia, powstałej w skutek zakłucia suchą łodygą kopru<br />

oraz wałów paznokciowych palucha, z których wcześniej wyizolowano Candida<br />

albicans (2 przypadki). Do analizy mikologicznej wzięto preparaty bezpośrednie<br />

oraz hodowle założone na agarze krwawym, podłożu Levina i Sabourauda<br />

z dodatkiem chloramfenikolu, inkubowane w temperaturze 37°C. Po<br />

48 godzinach zaobserwowano ubogą, delikatną, kłaczkowatą białą grzybnię,<br />

sugerującą obecność grzybów pleśniowych. W trzeciej dobie pojawiła się wełnista,<br />

obfita, kremowa grzybnia, na której zauważono skupienia przypominające<br />

sporodochia pełne sierpowatych zarodników. Wówczas materiał przeniesiono<br />

na podłoże PDA. Po 48 godzinach uzyskano bardzo wyraźną beżową grzybnię<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 132-134<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


powietrzną, wytwarzającą pomarańczowo-czerwony barwnik oraz grzybnię<br />

z odcieniem różowo-purpurowym. W preparacie bezpośrednim zaobserwowano<br />

fragmenty strzępek.<br />

Z rany podudzia wyizolowano Fusarium solani, z wałów paznokciowych<br />

F. solani – w jednym przypadku i F. oxysporum - w drugim. Obydwa gatunki<br />

to bardzo pospolite fitopatogeny, powodujące głównie tracheomikozy, lecz bardzo<br />

rzadko w Polsce notowane jako antropopatogeny. Należąc do fakultatywnych<br />

pasożytów roślin, część cyklu życiowego przeprowadzają na martwym<br />

podłożu organicznym - w omawianych przypadkach była to martwa tkanka<br />

ludzka. Wzmianki w piśmiennictwie o izolacji Fusarium sp. z ran oparzeniowych<br />

i chirurgicznych najprawdopodobniej dotyczą F. solani, które obok<br />

F. culmorum, F. oxysporum i F. avenaceum wymienia się najczęściej jako czynniki<br />

etiologiczne zmian skóry i tkanek podskórnych oraz przyczynę keratomikozy,<br />

zakrzepów i martwic tkanek. Wychwycenie tych grzybów w hodowli oraz<br />

prawidłowa ich identyfikacja do gatunku była możliwa dzięki zastosowaniu<br />

podłoża PDA, które powinno zostać wprowadzone do rutynowej diagnostyki<br />

grzybów izolowanych ze zmian skórnych i ran chirurgicznych.<br />

Sporadyczne izolacje grzybów z rodzaju Fusarium ze zmian skórnych mogą<br />

być spowodowane działaniem aktidionu dodawanego do standardowych podłoży<br />

Sabourauda jako inhibitora wzrostu grzybów pleśniowych.<br />

Odrębny problem stanowią mikotoksyny fuzaryjne, które w wieloraki sposób<br />

oddziaływują na organizmy stałocieplne.<br />

Summary<br />

FUNGI OF THE GENUS FUSARIUM IN MEDICAL MYCOLOGY<br />

Fungi of the genus Fusarium are increasingly frequently enumerated<br />

amongst factors being potentially pathogenic to man. Most of these fungi<br />

are opportunistic forms that are incapable of invading a healthy organism.<br />

One of the significant characteristics of ecophysiological properties of fungi<br />

potentially pathogenic to man is their affinity to different tissues and organs.<br />

Fungi of the genus Fusarium exhibit a distinct tendency to colonize blood<br />

vessels. Mycoses induced by these fungi are referred to as: hialohyphomycoses<br />

or fusarioses. Though the degree of parasitism of Fusarium genus fungi is<br />

strictly defined in the case of plants, the evaluation of their pathogenicity in<br />

medical mycology still poses some problems.<br />

The objective of this study was thus to analyze a few cases of<br />

hialohyphomycosis induced by F. solani and F. oxysporum as well as to<br />

pinpoint that sporadic records of fungi of this genus may be due to mistakes<br />

in standard diagnostics.<br />

133


134<br />

The experimental material were swabs and fragments of the necrotic<br />

tissue of an inflammatory focus of a wound at the shank resulting from cutting<br />

with a dry stalk of dill, and these of hallux nailfolds from which Candida<br />

albicans was isolated earlier (2 cases). Mycological analyses were made with<br />

direct specimens and with cultures established on blood agar, Levin and<br />

Sabouraud’s medium with the addition of chloramphenicol, and incubated<br />

at a temperature of 37°C. After 48 hours, sparse, delicate, floccular white<br />

mycelium could be observed, which suggests the presence of mould fungi. On<br />

the third day of incubation, there appeared wooly, thick and creamy mycelium<br />

with agglomerations resembling sporodochia full of crescent spores. Then,<br />

the material was transferred onto the PDA medium. After 48 h, a clear beige<br />

aerial mycelium producing an orange-red dye and mycelium with a pinkpurple<br />

shade were obtained. In turn, fragments of hyphae were observed in<br />

the direct specimens.<br />

The species isolated from the wound on shank was Fusarium solani, whereas<br />

these isolated from the nailfolds were: F. solani in one case and F. oxysporum<br />

in the other case. Both species are very common phytopathogens inducing<br />

mainly tracheomycoses, yet very rarely noted in Poland as anthropathogens.<br />

Being facultative parasites of plants, they lead part of they life cycle on a dead<br />

organic medium – which in the discussed cases was necrotic human tissue.<br />

Notes on Fusarium sp. isolation from burn and surgical wounds available in<br />

literature most probably refer to F. solani, which together with F. culmorum,<br />

F. oxysporum and F. avenaceum are most often acknowledged as etiological<br />

factors of skin and subcutaneous tissue lesions and as the causative agents of<br />

keratomycosis, intravascular clots and tissue necrosis. The capturing of these<br />

fungi in the culture and their proper identification to species was feasible<br />

owing to the use of the PDA medium that should be implemented into the<br />

routine diagnostics of fungi isolated from skin lesions and surgical wounds.<br />

The sporadic isolations of Fusarium genus fungi from skin lesions may<br />

result from the effect of actidione added to standard Sabouraud’s media as a<br />

growth inhibitor of mould fungi.<br />

A separate problem is posed by fusarium mycotoxins that exert various<br />

effects on warm-blooded organisms


ZRÓŻNICOWANIE GATUNKÓW FUSARIUM<br />

IZOLOWANYCH Z ANANASA ORAZ SYNTETYZOWANYCH<br />

PRZEZ NIE MIKOTOKSYN<br />

Łukasz Stępień 1 , Grzegorz Koczyk 2 i Agnieszka Waśkiewicz 3<br />

1 Instytut Genetyki Roślin, Pracownia Metabolomiki, ul. Strzeszyńska 34,<br />

60-479 Poznań<br />

2 Instytut Genetyki Roślin, Pracownia Biometrii, ul. Strzeszyńska 34,<br />

60-479 Poznań<br />

3 Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Chemii, ul. Wojska Polskiego 75,<br />

60-625 Poznań<br />

lste@igr.poznan.pl<br />

Ananas (Ananas comosus) jest rośliną pochodzącą z Ameryki Południowej,<br />

uprawiany głównie w takich krajach jak: Ekwador, Kostaryka, Brazylia, Kolumbia<br />

czy Hawaje, również także w subtropikalnych i tropikalnych obszarach<br />

Azji (Tajlandia, Wietnam, Filipiny) i Afryki (RPA). Dzięki dużej trwałości<br />

owocostany eksportowane są w stanie surowym praktycznie do krajów całego<br />

świata. Stosowanie prewencyjnej ochrony fungicydowej zapobiega infekcjom<br />

grzybami najczęściej atakującymi warzywa i owoce podczas przechowywania i<br />

transportu (głównie z rodzajów Penicillium i Aspergillus), nie jest jednak skuteczne<br />

w stosunku do patogenów obecnych w roślinie w momencie zbioru. Są<br />

to głównie grzyby z rodzaju Fusarium typowo powodujące fuzariozę ananasa<br />

i przyczyniające się do niszczenia owoców i ich zanieczyszczenie licznymi metabolitami<br />

wtórnymi – mikotoksynami. Dotychczas za najczęściej występujące<br />

gatunki związane z fuzariozą ananasa uważano Fusarium guttiforme i F. subglutinans<br />

f. sp. ananas, a metabolitami najczęściej przez nie syntetyzowanymi<br />

były moniliformina (MON) i bowerycyna (BEA). Choć ananas nie ma znaczenia<br />

ekonomicznego w naszej strefie klimatycznej, jednakże badania nad populacjami<br />

jego patogenów nabierają szczególnego znaczenia w kontekście transferu<br />

patogenów między kontynentami i różnymi środowiskami ich bytowania.<br />

Podjęte przez nas badania polegały na izolacji patogenów z rodzaju Fusarium<br />

z owocostanów ananasa o różnym pochodzeniu geograficznym, a także<br />

ocenie ich zróżnicowania oraz analizie jakościowej i ilościowej mikotoksyn<br />

przez nie wytwarzanych, zarówno w warunkach in vitro, jak i in planta. Czterdzieści<br />

cztery genotypy Fusarium oczyszczono poprzez wyłożenie na sterylną<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 135-138<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

135


136<br />

płytkę Petriego z pożywką PDA (Potato Dextrose Agar) fragmentów tkanki<br />

roślinnej z objawami wskazującymi na obecność patogena, a czasem przez<br />

bezpośrednie pobranie fragmentu grzybni bądź sporodochium pobranych<br />

z owocostanów i kilkakrotne pasażowanie izolatu w tej samej pożywce w celu<br />

potwierdzenia czystości i jednorodności uzyskanej kultury. W kilku przypadkach<br />

jeden owocostan zawierał genotypy różnych gatunków Fusarium. Analizę<br />

biosyntezy mikotoksyn (MON, BEA oraz fumonizyn B 1 -B 3 ) przez poszczególne<br />

izolaty przeprowadzono w kulturach na ryżu, a także w dwóch frakcjach<br />

roślinnych: skórze i soku wyciśniętego z miąższu.<br />

Za pomocą analiz sekwencji nukleotydowej fragmentu genu kodującego<br />

czynnik elongacji translacji tef-1α wszystkich uzyskanych izolatów, zidentyfikowaliśmy<br />

aż dziesięć różnych gatunków: Fusarium ananatum, F. concentricum,<br />

F. fujikuroi, F. guttiforme, F. incarnatum, F. oxysporum, F. polyphialydicum,<br />

F. proliferatum, F. temperatum i F. verticillioides, z których najczęstsze<br />

były F proliferatum i F. ananatum – gatunek znany już wcześniej, ale opisany<br />

po raz pierwszy w Południowej Afryce w 2010 roku. Porównanie uzyskanych<br />

sekwencji pozwoliło na analizę podobieństwa genetycznego badanych izolatów.<br />

Niektóre z nich są zdolne do wtórnego infekowania rodzimych gatunków<br />

strefy umiarkowanej (np. F. proliferatum, F. temperatum i F. verticillioides<br />

są ważnymi patogenami kukurydzy), ciekawą kwestią jest zatem, czy ananas<br />

może być ich wektorem.<br />

Badane izolaty różniły się znacznie szybkością wzrostu na pożywce PDA.<br />

Po 4 dniach średnica kolonii wynosiła od 20 mm w przypadku izolatu F. polyphialydicum,<br />

a do 50 mm u F. concentricum.<br />

Za pomocą markerów specyficznie identyfikujących geny TRI5, TRI13,<br />

PKS13, ZEA2 i esyn1, związanzch ze szlakami biosyntezy eniatyn, zearalenonu<br />

i trichotecenów, wykluczyliśmy zdolność badanych genotypów do syntezy<br />

wymienionych związków. Zidentyfikowaliśmy natomiast geny FUM1 i FUM8,<br />

kodujące kluczowe enzymy szlaku syntezy fumonizyn w izolatach F. fujikuroi,<br />

F. proliferatum, F. temperatum i F. verticillioides. Pierwsze trzy gatunki posiadały<br />

także gen bik2 odpowiedzialny za syntezę czerwonego barwnika o działaniu<br />

antybiotycznym – bikaweryny.<br />

Większość badanych izolatów w warunkach laboratoryjnych syntetyzowała<br />

w niewielkich ilościach BEA, ale tylko 4 izolaty przekroczyły stężenie 10 μg/g:<br />

F. proliferatum (25 μg/g i 41 μg/g), F. temperatum (12.5 μg/g) i F. ananatum<br />

(91 μg/g). Moniliformina była syntetyzowana w większych ilościach – aż 14<br />

izolatów wytwarzało MON w ilości przekraczającej 10 μg/g: jedenaście izolatów<br />

F. proliferatum (z maksimum 158 μg/g), po jednym izolacie F. concentricum,<br />

F. fujikuroi i F. oxysporum). Fumonizyny B 1 -B 3 tworzyły izolaty pięciu<br />

gatunków, przy czym F. proliferatum w znacznych ilościach (>1 mg/g). W skórze<br />

ananasa stwierdzono obecność FB 1 -FB 3 (1,37 μg/g).


Summary<br />

MYCOTOXIN DIVERSITY AMONG FUSARIUM SPECIES ISOLATED<br />

FROM PINEAPPLE<br />

Pineapple (Ananas comosus) originates from South America and is grown<br />

mainly in Ecuador, Costarica, Brazil, Colombia, Hawaii and in tropical and<br />

sub-tropical areas of Asia (Thailand, Vietnam, Philippines) and South Africa.<br />

It is relatively easy in storage and transportation so it can be found practically<br />

world wide. The use of fungicides prevents from typical storage moulds to<br />

damage the fruit (mostly Penicillium sp. and Aspergillus sp.) but does not kill<br />

the pathogen already present in the plant material. This applies mainly to<br />

Fusarium fungi which cause pineapple fusariosis, a disease with fruit rot and<br />

malformation symptoms accompanied by mycotoxin accumulation in plant tissues.<br />

Until now, Fusarium guttiforme and F. subglutinans f. sp. ananas were<br />

regarded as main pathogens related to pineapple fusariosis with moniliformin<br />

(MON) and beauvericin (BEA) being commonly synthesized metabolites. Pineapple<br />

has no economical impact in our climate zone, but studies of the pathogen<br />

populations are particularly important considering their transfer between<br />

continents and environments.<br />

Our studies were focused on isolation of Fusarium species from pineapple<br />

fruit of different origin during three year survey (2008-2010). Based on the<br />

translation elongation factor 1α (tef-1α) sequence analysis of forty-four individual<br />

isolates, ten species were identified: Fusarium ananatum, F. concentricum,<br />

F. fujikuroi, F. guttiforme, F. incarnatum, F. oxysporum, F. polyphialidicum,<br />

F. proliferatum, F. temperatum and F. verticillioides) and F. proliferatum<br />

and F. ananatum were the most frequent ones. In several cases multiple Fusarium<br />

isolates were recovered from one pineapple fruit. Using the tef-1α sequences<br />

relative genetic distances between isolates studied were calculated and<br />

phylogenetic relationships were proposed. Furthermore, we analyzed the level<br />

of mycotoxins (fumonisins B 1 -B 3 , MON and BEA) synthesized by the isolates<br />

in sterile rice cultures and also in two fractions of plant material: in fruit skin<br />

and in juice squeezed out of the fruit flesh.<br />

Some of the identified species can potentially infect various plant crops in<br />

moderate climate (e.g. F. proliferatum, F. temperatum and F. verticillioides<br />

are common maize pathogens), so the question if pineapple can be regarded as<br />

pathogen vector seems very interesting.<br />

The isolates varied considerably when we evaluated the speed of growth on<br />

PDA (Potato Dextrose Agar) medium. After four days of cultivation at 25°C the<br />

colony diameter ranged from 20 mm in case of F. polyphialydicum, to 50 mm<br />

as for F. concentricum isolate.<br />

137


138<br />

All isolates were found negative when tested for ability to produce enniatins,<br />

zearalenone and trichothecenes by identification of the essential genes<br />

of those metabolic pathways (TRI5, TRI13, PKS13, ZEA2 and esyn1) using<br />

gene-specific PCR assays. On the other hand, we identified FUM1 and FUM8<br />

genes, encoding two enzymes from fumonisin biosynthetic pathway in isolates<br />

of F. fujikuroi, F. proliferatum, F. temperatum and F. verticillioides. The first<br />

three species possessed also bik2, a gene involved in biosynthesis of bikaverin<br />

– red pigment with antibiotical properties.<br />

Most of the isolates studied synthesized small amounts of BEA in vitro,<br />

but only four of them exceeded 10 μg/g: F. proliferatum (25 μg/g and 41 μg/g),<br />

F. temperatum (12.5 μg/g) and F. ananatum (91 μg/g). Fourteen isolates synthesized<br />

more than 10 μg/g of MON: eleven isolates of F. proliferatum (with<br />

maximum of 158 μg/g) and single isolates of F. concentricum, F. fujikuroi and<br />

F. oxysporum). Fumonisins B 1 -B 3 were synthesized by isolates of 5 species, of<br />

which F. proliferatum produced them in high amounts (>1 mg/g). In pineapple<br />

skin fumonisins B 1 +B 2 +B 3 were found in amount of 1,37 μg/g.


WPŁYW ZASIEDLENIA KOSTRZEWY ŁĄKOWEJ PRZEZ<br />

NEOTYPHODIUM UNCINATUM NA JEJ PLONOWANIE,<br />

ZDROWOTNOŚĆ I ZAWARTOŚĆ ERGOWALINY<br />

Dariusz Pańka i Małgorzata Jeske<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

jeske@utp.edu.pl<br />

Kostrzewa łąkowa (Festuca pratensis Huds.) jest jednym z najważniejszych<br />

gatunków traw pastwiskowych w Europie. Na drodze swojej ewolucji, rozwinęła<br />

szereg symbiotycznych asocjacji z grzybami. Należą do nich układy endo- oraz<br />

ektomikoryzowe, jak i mutualistyczne asocjacje z endofitami rozwijającymi<br />

się systemicznie wewnątrz źdźbeł. Grzyby endofityczne przerastają tkanki roślinne<br />

międzykomórkowo, bez wywoływania jakichkolwiek symptomów wskazujących<br />

na ich obecność. Ich egzystencja jest, całkowicie zależna od <strong>rośliny</strong><br />

żywicielskiej. W „interesie” endofita jest więc działanie sprzyjające rozwojowi<br />

<strong>rośliny</strong> i zabezpieczające ją przed działaniem wielu czynników stresowych, które<br />

mogłyby doprowadzić do jej śmierci. W istocie, wpływ endofitów na roślinę<br />

żywicielską jest bardzo złożony i obejmuje wiele aspektów jej egzystencji.<br />

Najlepiej poznane endofity traw należą do rodzajów Neotyphodium i Epichloë.<br />

Szczególnie duże znaczenie gospodarcze posiadają asocjacje roślin trawiastych<br />

z rodzajów Festuca i Lolium z grzybami endofitycznymi z rodzaju<br />

Neotyphodium. Grzyby te znane są z produkcji szerokiego wachlarza związków<br />

chemicznych, które mogą wpływać istotnie na wzrost i rozwój <strong>rośliny</strong> żywicielskiej<br />

oraz jej wrażliwość na czynniki stresowe. Rośliny zasiedlone przez<br />

Neotyphodium spp. charakteryzują się zazwyczaj lepszym wzrostem, większą<br />

odpornością na stres suszy oraz mniejszą podatnością na porażenie przez patogeniczne<br />

grzyby. Biorąc pod uwagę pozytywne aspekty obecności endofitów<br />

w trawach, grzyby te mogłyby zostać wykorzystane, jako czynniki biologiczne<br />

w ochronie roślin przed chorobami. Obecność endofita może hamować między<br />

innymi rozwój niektórych patogenów z rodzaju Fusarium, Drechslera, Rhizoctonia<br />

oraz Gaeumannomyces graminis. Jednakże, niezbędnym elementem warunkującym<br />

wykorzystanie endofitów w praktyce jest brak zdolności do produkowania<br />

toksyn, które mogłyby być przyczyną chorób zwierząt gospodarskich.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 139-141<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

139


140<br />

Do najlepiej poznanych toksyn można zaliczyć m.in. ergowalinę, ergowalininę<br />

a także ergotaminę. Mogą one być przyczyną chorób zwierząt, które w sprzyjających<br />

warunkach doprowadzają nawet do ich śmierci.<br />

Celem przeprowadzonych badań była ocena w warunkach polowych dobroczynnego<br />

wpływu endofita N. uncinatum na kostrzewę łąkową, wyrażona<br />

plonowaniem, podatnością na porażenie przez patogeny oraz zawartością toksycznego<br />

alkaloidu – ergowaliny<br />

Badania przeprowadzono na odmianie Justa. Doświadczenie poletkowe<br />

założono jako dwuczynnikowe w układzie losowanych bloków, w 4 powtórzeniach.<br />

Nasiona wysiewano jako wsiewkę w jęczmień jary. Nawożenie i pielęgnację<br />

przeprowadzono zgodnie ze wskazówkami zawartymi w instrukcji<br />

odmianowej. Pierwszym czynnikiem było zasiedlenie przez N. uncinatum<br />

(kombinacje E+ i E-). Obecność endofita w roślinach potwierdzono metodą<br />

barwienia. Poziom zasiedlenia wynosił 89%. Rośliny bez endofita (E-) otrzymano<br />

z nasion, z których usunięto symbionta metodą termiczną przed założeniem<br />

doświadczenia. Drugim czynnikiem był system użytkowania kostrzewy:<br />

pastwiskowy (P) oraz kośny (K). W systemie pastwiskowym <strong>rośliny</strong> koszono<br />

pod koniec fazy krzewienia, natomiast w kośnym na początku fazy strzelania<br />

w źdźbło. Plonowanie kostrzewy łąkowej odmiany Justa analizowano w kolejnych<br />

pokosach zbieranych w latach 2007 i 2008. W roku 2007 zebrano cztery<br />

pokosy, natomiast w 2008 – trzy. Dla każdego pokosu określano plon suchej<br />

masy (SM). W latach badań analizowano również porażenie roślin przez mączniaka<br />

prawdziwego (B. graminis), rdze (Puccinia spp.) oraz kompleks plamistości<br />

liści (Bipolaris sorokiniana, Drechslera spp.). Obserwacje wykonywano<br />

w okresie wiosennym, przed pierwszym zbiorem oraz jesiennym, pod koniec<br />

okresu wegetacji. Analizy zawartości ergowaliny przeprowadzono według metodyki<br />

Rottinghaus i wsp. (1991).<br />

Zaobserwowano wpływ N. uncinatum na plonowanie kostrzewy łąkowej<br />

‘Justa’ we wszystkich kombinacjach. Obecność endofita istotnie sprzyjała<br />

wzrostowi plonowania. Najwyższe plony roczne zanotowano w 2007 r., w kombinacji<br />

E+ koszonej w dojrzałości kośnej. Drugi czynnik, system użytkowania,<br />

także istotnie wpłynął na plonowanie ‘Justy’. Wpływ ten nie był jednak<br />

jednoznaczny. Istotnie wyższe plony z poletek koszonych w dojrzałości kośnej<br />

uzyskiwano tylko w kombinacjach z roślinami zasiedlonymi przez endofita.<br />

Wynikało to m.in. z dłuższego okresu wzrostu roślin koszonych w dojrzałości<br />

kośnej, co pociągało za sobą wzrost produkcji biomasy. Proces ten był dodatkowo<br />

wspomagany przez endofita na poziomie fizjologicznym. Analiza występowania<br />

chorób grzybowych na kostrzewie łąkowej ‘Justa” w zależności od zasiedlenia<br />

przez N. uncinatum oraz systemu użytkowania wykazała niewielki<br />

wpływ pierwszego z czynników i całkowity brak wpływu czynnika drugiego.<br />

Na poletkach najczęściej występowały grzyby z rodzaju Puccinia - powodujące<br />

rdze i Drechslera - wywołujące plamistości na liściach. Objawy mączniaka


prawdziwego notowano na roślinach rzadziej. Analiza zawartości ergowaliny<br />

w zielonej masie odmiany Justa wykazała jej obecność we wszystkich pokosach<br />

zebranych z poletek E+ w latach badań. Niestety, zawsze była to zawartość<br />

istotnie wyższa, w porównaniu do kombinacji E-.<br />

Uzyskane wyniki wskazują, że endofity w badanej asocjacji wywierają zarówno<br />

pozytywny jak i negatywny wpływ na roślinę żywicielską. Zwiększają<br />

plonowanie roślin, zmniejszają porażenie przez niektóre patogeny, ale jednocześnie<br />

odpowiedzialne są za produkcję ergowaliny. Pasza z roślin zasiedlonych<br />

może więc stanowić zagrożenie dla zwierząt przy dłuższym podawaniu.<br />

Summary<br />

MEADOW FESCUE YIELDING AND ERGOVALINE PRODUCTION<br />

IN HOST-PLANTS AS AFFECTED<br />

BY NEOTYPHODIUM UNCINATUM ENDOPHYTE<br />

The objective of our research was to assess the beneficial impact of the<br />

Neotyphodium uncinatum endophyte on its natural host - meadow fescue,<br />

measured by green mass yield, susceptibility of the host plants to infection by<br />

pathogens and a content of the toxic alkaloid – ergovaline in field conditions.<br />

The research involved ‘Justa’ meadow fescue. Studied factors were as follows:<br />

endophyte infection (E+ and E-) and system of use (for pasture and for cut).<br />

There was observed an effect of N. uncinatum on ‘Justa’ meadow fescue<br />

yielding in all the combinations. The presence of endophyte significantly<br />

enhanced higher yields of dry matter as compared with the non-infested plants.<br />

The infestation of ‘Justa’ meadow fescue by the endophyte, N. uncinatum,<br />

significantly protected the plants from infection with fungi causing leaf spot.<br />

The endophyte, however, did not affect the development of powdery mildew<br />

and rust fungi. ‘Justa’ meadow fescue showed a relatively high content of<br />

ergovaline when grown in the field. The level of the toxin in the season varies<br />

a lot, which suggests a high effect of external factors on its production. Due<br />

to the toxin production, the animal feed made from infested plants can pose<br />

a threat to animals when longer administered. Neotyphodium uncinatum<br />

isolates from ‘Justa’ meadow fescue cannot be used as a biological control<br />

agents to improve the growth and resistance of other cultivars due to ability<br />

to ergovaline production.<br />

Literatura<br />

Rottinghaus G.E., Garner G.B., Cornell C.N., Ellis J.L., 1991: HPLC method<br />

for quantitating ergovaline in endophyte-infested tall fescue: Seasonal<br />

variation of ergovaline levels in stems with leaf sheaths, leaf blades, and<br />

seedheads. Journal of Agricultural and Food Chemistry 39: 112-115.<br />

141


142<br />

PROBLEMY W MORFOLOGICZNYM<br />

IDENTYFIKOWANIU ARBUSKULARNYCH GRZYBÓW<br />

MIKORYZOWYCH (GLOMEROMYCOTA) TWORZĄCYCH<br />

GLOMOIDALNE ZARODNIKI<br />

Janusz Błaszkowski<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny, Zakład Ochrony Roślin,<br />

ul. Słowackiego 17, 71-434 Szczecin<br />

janusz.blaszkowski@zut.edu.pl<br />

Aby zrozumieć wpływ bioróżnorodności na procesy zachodzące w ekosystemach<br />

należy przede wszystkim poznać gatunki w nich występujące. Najbardziej<br />

rozpowszechnionymi grzybami glebowymi w świecie, które mają kluczowe<br />

znaczenie dla roślin są arbuskularne grzyby mikoryzowe (AGM) z gromady<br />

Glomeromycota. Współżyją one w obligatoryjnej symbiozie z 70-90% lądowych<br />

roślin kuli ziemskiej. Jeszcze niedawno uznawano, że tylko rodziny Brassicaceae<br />

i Chenopodiaceae skupiają stosunkowo dużą liczbę gatunków roślin,<br />

które są niemikoryzowe lub rzadko współżyją z AGM. Jednak wyniki ostatnich<br />

badań świadczą, że mikoryzy tworzone przez niektóre gatunki AGM nie<br />

reagują w powszechnie używanych barwnikach i duża część AGM różnych<br />

ekosystemów zarodnikuje sezonowo lub nie zarodnikuje w ogóle w warunkach<br />

polowych. To mogło być przyczyną błędnego wnioskowania o statusie mikoryzowym<br />

wielu taksonów roślin i potwierdza wniosek wyrażony przez Komitet<br />

Europejskiego Banku Glomeromycota w roku 1993, że „<strong>rośliny</strong> nie posiadają<br />

korzeni, lecz mają mikoryzy”. Symbiozę roślin z grzybami z gromady Glomeromycota<br />

nazywa się arbuskularną, ponieważ jedyną strukturą tworzoną w<br />

komórkach korzeni przez grzyby 13 z 14 rodzajów tej gromady są arbuskule,<br />

tj. krzaczasto rozgałęzione końce strzępek, które biorą udział w dwustronnej<br />

wymianie węgla, fosforu i innych fizjologicznie znaczących cząstek. Współdziałanie<br />

AGM i roślin prowadzi do różnych obustronnych korzyści. Grzyby<br />

korzystają z łatwo dostępnego węgla asymilowanego przez <strong>rośliny</strong>. Korzyści<br />

odnoszone przez <strong>rośliny</strong> współżyjące z AGM przede wszystkim wynikają z poprawienia<br />

odżywienia i przez to wzrostu i produkcyjności większości roślin<br />

naczyniowych. Stymulacja wzrostu wynika ze zwiększonej ilości pobranego<br />

fosforu i w mniejszym stopniu azotu przez stosunkowo duży i fizjologicznie aktywny<br />

kompleks korzenia z grzybem. Ponadto AGM oddziaływały korzystnie<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 142-144<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


na sukcesję, konkurencyjność, fenologię roślin i ilość produkowanego przez<br />

nie pyłku oraz podtrzymywały różnorodność gatunkową zbiorowisk wskutek<br />

wyrównywania poziomu odżywienia roślin przez przemieszczanie składników<br />

pokarmowych z roślin lepiej odżywionych do roślin o słabszej kondycji za pośrednictwem<br />

pomostów grzybniowych. AGM zwiększały również tolerancję<br />

roślin na metale ciężkie, silne zasolenie gleby i uodparniały <strong>rośliny</strong> na stresy<br />

wodne oraz patogeniczne grzyby i nicienie.<br />

Obecnie gromada Glomeromycota skupia ca. 220 gatunków. Niestety większość<br />

z nich została opisana wiele lat temu i ich opisy na ogół są niekompletne,<br />

nie informują o taksonomicznie najbardziej znaczących własnościach<br />

fenotypowych i biochemicznych składowych ich zarodników i mikoryz lub są<br />

zupełnie błędne. Co więcej większość gatunków została opisana na podstawie<br />

zarodników pochodzących z pola, które zwykle są silnie zmienione w kolorze,<br />

strukturze wewnątrzkomórkowej i nie posiadają wielu struktur potrzebnych<br />

do prawidłowego rozpoznania gatunku, ponieważ są one krótkotrwałe i wrażliwe<br />

na oddziaływanie szkodliwych stresów abio- oraz biotycznych, w tym<br />

nadpasożytów. Ponadto w literaturze nie ma jasnego systemu grupowania<br />

większości (ca. 62%) opisanych gatunków AGM, tj. gatunków tworzących glomoidalne<br />

zarodniki, na podstawie ich morfologii. Trudności w identyfikowaniu<br />

glomoidalnych zarodników również wynikają z ich relatywnie najmniejszego<br />

zróżnicowania morfologicznego. Argumenty wymienione wyżej niewątpliwie<br />

zadecydowały o, na przykład, powszechnym błędnym rozpoznawaniu Rhizophagus<br />

fasciculatus (dawne Glomus fasciculatum) i R. intraradices (G. intraradices).<br />

Dlatego celem mojej prezentacji jest przedstawienie podstawowych<br />

kroków w grupowaniu i identyfikowaniu AGM tworzących glomoidalne zarodniki.<br />

Zostaną scharakteryzowane i porównane u różnych morfologicznie blisko<br />

spokrewnionych gatunków następujące cechy: sposób tworzenia zarodników,<br />

ich główne cechy morfologiczne (kolor, wymiar), składowe wewnątrzkomórkowej<br />

struktury zarodników i ich własności fenotypowe oraz biochemiczne, jak<br />

również własności trzonków zarodników.<br />

Summary<br />

PROBLEMS IN MORPHOLOGICAL IDENTIFICATION<br />

OF ARBUSCULAR MYCORRHIZAL FUNGI (GLOMEROMYCOTA)<br />

FORMING GLOMOID SPORES<br />

Recognition of species is fundamental to under standing how diversity<br />

affects ecosystem processes. The soil microorganisms having a worldwide<br />

distribution and coexisting in a symbiotic association with ca. 70–90% of<br />

vascular land plants of the Earth are arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) of<br />

the phylum Glomeromycota. Still not long ago it was believed that only the<br />

families Brassicaceae and Chenopodiaceae comprise a relatively large number<br />

of plant species that are nonmycorrhizal or rarely coexist with AMF. However,<br />

143


144<br />

results of recent studies indicate that mycorrhizae formed by some species of<br />

AMF do not react in commonly used stains and a large part of AMF of different<br />

ecosystems sporulate seasonally or not at all in field conditions. This may be<br />

the reason of the erroneous thinking of the mycorrhizal status of many plant<br />

taxa and confirms the conclusion expressed by the European Committee of<br />

the Bank of the Glomeromycota in 1993 that “The majority of plants, strictly<br />

speaking, do not have roots, they have mycorrhizae”. The symbiosis of plants<br />

with fungi of the phylum Glomeromycota is called arbuscular, because the<br />

only structure formed in root cells by fungi of 13 of 14 genera of this phylum<br />

are arbuscules, i.e., bushy branched hyphal tips that take place in a bilateral<br />

exchange of carbon, phosphorous and other physiologically important<br />

particles. The coexistence of AMF and plants results in different bilateral<br />

benefits. AMF increase the root absorptive area and hence plant nutrition,<br />

they influence the succession of plant communities, and their competitiveness<br />

and phenology. They equalize the level of nutrition of co-existing plants by<br />

forming hyphal bridges transferring nutrients between them and they improve<br />

soil structure through binding sand grains into aggregates with extraradical<br />

hyphae. Additionally, AMF have been reported to increase the tolerance of<br />

plants to heavy metals, water stresses, and pathogenic fungi and nematodes.<br />

On the other hand, it is accepted that AMF are required for up to 20% of the<br />

host’s photosynthate for establishment and maintenance.<br />

At present, the phylum Glomeromycota comprises ca. 210. Unfortunately,<br />

most of them were described many years ago and their descriptions generally<br />

are incomplete, do not inform of the taxonomically most important phenotypic<br />

and biochemical properties of the components of their spores and mycorrhizae<br />

or are completely erroneous. Moreover, most species were described from<br />

field-collected spores, which usually are highly changed in colour, subcellular<br />

structure, and lack many structures needed for their correct identification,<br />

because they are short-lived and sensitive to the influences of harmful abio-<br />

and biotic stresses, including hyperparasites. Additionally, in the literature<br />

there is no clear system of grouping of most (ca. 62%) described species of<br />

AMF, i.e., species forming glomoid spores, based on their morphology. The<br />

difficulties in identification of glomoid spores also result from their relatively<br />

least morphological diversity. The arguments listed above undoubtedly decided<br />

of, e.g., the common erroneous identification of first Rhizophagus fasciculatus<br />

(formerly Glomus fasciculatum) and then R. intraradices (G. intraradices).<br />

Therefore, the aim of my presentation is to show the basic steps in grouping<br />

and identification of AMF forming glomoid spores. The modes of spore formation,<br />

their main morphological characters (spore colour and size), the components of<br />

subcellular structure of spores and their phenotypic and biochemical properties,<br />

as well as those of their subtending hyphae will be characterized and compared<br />

in different morphologically closely related species.


CHOROBY DRZEW I KRZEWÓW OZDOBNYCH NA<br />

TERENIE WROCŁAWIA<br />

Krzysztof Matkowski, Ewa Moszczyńska i Elżbieta Pląskowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Katedra Ochrony Roślin, Zakład<br />

Fitopatologii i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

kmatkowski@gmail.com.pl<br />

Drzewa i krzewy ozdobne są nierozłącznym elementem infrastruktury miasta,<br />

poprawiają mikroklimat oraz jakość skażonego przez przemysł i transport<br />

powietrza. Dzieje się tak dzięki asymilacji dużych ilości CO 2 , wzbogacania powietrza<br />

w tlen i pochłaniania zanieczyszczeń pyłowych i gazowych. W zależności<br />

od gatunku, <strong>rośliny</strong> redukują hałas nawet do 12 dB. Miasto, jako sztucznie<br />

uformowany obszar cechuje znaczne pokrycie gleby betonem i asfaltem, co<br />

w połączeniu z panującą pomiędzy budynkami wyższą temperaturą powietrza<br />

powoduje znaczny deficyt wody u roślin. Przesuszona i uboga w składniki odżywcze<br />

gleba, dodatkowo zanieczyszczona przez gruz, metale ciężkie, i chlorki,<br />

jest silnie zakwaszona, a na skutek ciągłego udeptywania i wibracji wywołanych<br />

transportem, ma zdegradowaną strukturę. Warunki te mają negatywny<br />

wpływ na rozwój roślin, a tym samym na ich kondycję zdrowotną, co bezpośrednio<br />

przekłada się na zwiększoną predyspozycje <strong>rośliny</strong> na nieinfekcyjne<br />

i infekcyjne choroby.<br />

Ocenę zdrowotności drzew i krzewów wykonano w 2009 roku. Badaniami<br />

objęto nasadzenia parkowe, przyuliczne i działkowe oraz roślinność Wrocławskiego<br />

Ogrodu Botanicznego i Ogrodu Japońskiego. Określano gatunek oraz<br />

przybliżony wiek <strong>rośliny</strong> wykazującej objawy chorobowe. Opisywano objawy<br />

chorobowe oraz przeprowadzano czynności niezbędne do postawienia diagnozy.<br />

Na obserwowanych roślinach ozdobnych stwierdzono obecność 82 gatunków<br />

grzybów chorobotwórczych. Wśród nich dominowały mączniaki prawdziwe<br />

z najczęstszym, porażającym dęby - Microsphhaera alphitoides. Na klonach<br />

w dużym nasileniu wystąpił mączniak prawdziwy - Uncinula tulasnei. Niektóre<br />

grzyby występowały na wielu gatunkach roślin-żywicieli. Phyllactinia<br />

guttata był notowany we Wrocławiu na brzozie, dereniu, klonie i leszczynie.<br />

We Wrocławiu obserwowano również gatunki, które stosunkowo niedawno pojawiły<br />

się w Polsce i w Europie: Erysiphe flexuosa porażający kasztanowce<br />

i Erysiphe azaleae występujący na rododendronach.<br />

Równie pospolicie, jak grzyby mączniakowe występowały rdzawnikowe.<br />

Topola biała i osika zasiedlane były przez Melampsora populnea. Poraziły 115<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 145-146<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

145


146<br />

drzew. Epidemicznie na działkach i w ogrodach przydomowych wystąpiła rdza<br />

gruszy powodowana przez Gymnosporangium sabinae. W ogrodach działkowych<br />

znaleziono Cronartium ribicola. Na wielu stanowiskach barwinek został<br />

silnie porażony przez Puccinia vince. W 2009 na 96 drzewach dużym nasileniu<br />

wystąpiła antraknoza platana powodowana przez Apiognomonia veneta.<br />

W mieście obserwowano również antraknozę na lipach. Chorych było 40 roślin.<br />

Często spotykanymi we Wrocławiu gatunkami były rozszczepka pospolita<br />

oraz gruzełek cynobrowy, notowano liczne gatunki wielkoowocnikowych<br />

grzybów nadrzewnych. Wiele z nich to pasożyty ranowe np. żółciak siarkowy<br />

czy czyreń dębowy. Na terenie miasta znaleziono ponadto flagowca olbrzymiego<br />

i błyskoporka podkorowego, gatunki grzybów chronionych, wpisane do<br />

Czerwonej Księgi Roślin i Grzybów Chronionych.<br />

Summary<br />

DISEASES OF ORNAMENTAL TREES AND SHRUBS IN WROCŁAW<br />

Trees and shrubs are an indispensable element of urban area. They<br />

are decorative, significantly improve the microclimate and the quality of<br />

contaminated by industry and air transport. The city is characterized by covering<br />

the soil with concrete and asphalt, which, combined with the prevailing between<br />

buildings higher air temperature causes a significant water deficit in plants.<br />

These conditions have a negative effect on plant growth and thus on their health<br />

condition, which favors the emergence of infectious diseases and infectious.<br />

Research the health of trees and ornamental shrubs in Wroclaw was<br />

performed in 2009. Included observations of plantings for parks, streets and<br />

plots and plants in Botanical Garden and Japanese Garden. Species and<br />

determined the approximate age of the plants showing disease symptoms.<br />

Symptoms have been reported and carried out activities necessary for diagnosis.<br />

On ornamental plants found to contain 82 species of pathogenic fungi.<br />

Among them was dominated by powdery mildew of the most common -<br />

Microsphhaera alphitoides. Clones was infected most frequently by powdery<br />

mildew. Uncinula tulasnei infecting norway maple. Some fungi have occurred<br />

in many species of plant-host. Phyllactinia guttata was listed in Wroclaw<br />

on birch, dogwood, maple and hazel. In Wroclaw, also observed the species<br />

which has recently been observed in Poland and Europe: Erysiphe flexuosa<br />

infects chestnut trees and the Erysiphe azaleae on Rhododendron. Equally<br />

commonly, as Erysiphales was observed Uredinales . White poplar and aspen<br />

have been inhabited by Melampsora populnea. Epidemics was rust of pear<br />

caused by Gymnosporangium sabinae and Cronartium ribicola on Ribes<br />

nigrum and Pinus strobus. On 96 trees of plane tree anthracnose severity<br />

occurred, caused by Apiognomonia veneta. The town was also observed at<br />

anthracnose of lindens.


CHWASTY ŻYWICIELAMI PATOGENICZNYCH<br />

IZOLATÓW RHIZOCTONIA CEREALIS I R. SOLANI<br />

Grzegorz Lemańczyk<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

Grzegorz.Lemanczyk@utp.edu.pl<br />

W rozwoju chorób roślin uprawnych pewne znaczenie mogą mieć chwasty.<br />

Stanowią one zagrożenie, jako prawdopodobne źródło infekcji. Szczególną rolę<br />

mogą odgrywać podczas nieobecności na polu <strong>rośliny</strong> uprawnej. Uważa się, iż<br />

na chwastach może przetrwać do następnego zasiewu spora grupa grzybów<br />

patogenicznych. Na niektórych gatunkach mogą rozwijać się grzyby potencjalnie<br />

patogeniczne między innymi dla zbóż. Ze względu na to, iż w zbożach obserwuje<br />

się coraz więcej objawów powodowanych przez grzyby z rodzaju Rhizoctonia<br />

postanowiono sprawdzić jaką rolę odgrywają chwasty w ich rozwoju<br />

oraz czy izolaty występujące na nich mogą być patogeniczne dla zbóż.<br />

Badania polowe prowadzono w Stacji Badawczej Mochełek. W latach 2006–<br />

2008 z uprawy pszenicy ozimej, w stadium dojrzałości pełnej ziarna, zebrano<br />

14 gatunków chwastów. Dodatkowo w 2011 roku do badań pobrano 30 gatunków<br />

chwastów występujących nie tylko w zbożach, ale również w innych<br />

uprawach. Oceniono zdrowotność ich korzeni i podstawy pędów. Analizę mikologiczną<br />

przeprowadzono dla podstawy źdźbeł chwastów jednoliściennych<br />

oraz korzeni i szyjki korzeniowe chwastów dwuliściennych. Izolację grzybów<br />

wykonano z organów wykazujących zmiany chorobowe, a przy ich braku również<br />

z roślin wizualnie zdrowych.<br />

Objawy ostrej plamistości oczkowej obserwowano głównie na pędach perzu<br />

właściwego (Elymus repens), a sporadycznie na pędach miotły zbożowej (Apera<br />

spica-venti) i chwastnicy jednostronnej (Echinochloa crus-galli). Izolaty<br />

R. solani uzyskano z 15 gatunków chwastów, tj.: chwastnicy jednostronnej,<br />

wiechliny rocznej (Poa annua), życicy rocznej (Lolium temulentum), bodziszka<br />

drobnego (Geranium pusillum), chabra bławatka (Centaurea cyanus), fiołka<br />

polnego (Viola arvensis), iglicy pospolitej (Erodium cicutarium), komosy białej<br />

(Chenopodium album), krwawnika pospolitego (Achillea millefolium), maku<br />

polnego (Papaver rhoeas), maruny bezwonnej (Matricaria inodora), ostrożnia<br />

polnego (Cirsium arvense), powoju polnego (Convolvulus arvensis), rdestówki<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 147-149<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

147


148<br />

powojowatej (Fallopia convolvulus) i tobołków polnych (Thlaspi arvense). Rhizoctonia<br />

solani najczęściej izolowano z bodziszka oraz maruny. Udział tego<br />

gatunku wśród wszystkich uzyskanych izolatów nie był jednak zbyt duży. Na<br />

chwastach dominowały grzyby z rodzaju Fusarium, zwłaszcza F. avenaceum,<br />

F. oxysporum i F. culmorum. Uzyskano również sporo izolatów Alternaria<br />

alternata. Spośród grzybów potencjalnie patogenicznych dla zbóż otrzymano<br />

także Bipolaris sorokiniana. Rhizoctonia cerealis wyizolowano tylko z perzu.<br />

Do dalszych badań laboratoryjnych użyto po jednym izolacie R. solani i 2 izolaty<br />

R. cerealis uzyskanych z poszczególnych gatunków chwastów. Testowano<br />

ich wirulencję dla siewek pszenicy, pszenżyta, żyta i jęczmienia. Na podstawie<br />

przeprowadzonych badań stwierdzono, iż izolaty R. solani uzyskane<br />

z niektórych chwastów mogą być groźne dla siewek zbóż. Korzenie pszenicy<br />

i pszenżyta najsilniej porażał izolat pochodzący z ostrożnia, korzenie żyta izolat<br />

uzyskany z chabra, a korzenie jęczmienia izolat pochodzący z wiechliny.<br />

Najsilniejszemu porażeniu uległy korzenie jęczmienia. Pędy zbóż najsilniej<br />

porażał izolat uzyskany z ostrożnia. Najwięcej objawów porażenia obserwowano<br />

na pędach żyta. Izolaty R. cerealis pochodzące z perzu okazały sie bardzo<br />

wirulentne dla siewek zbóż.<br />

Przetestowano ponadto wrażliwość 34 gatunków chwastów roślin dwuliściennych,<br />

należących do 17 rodzin oraz 6 gatunków roślin jednoliściennych<br />

(chwastnica jednostronna, miotła zbożowa, owies głuchy (Avena fatua), perz<br />

właściwy, wiechlina roczna, włośnica zielona (Setaria viridis)), na porażenie<br />

przez R. cerealis i R. solani. Stwierdzono, iż R. cerealis może porażać siewki<br />

różnych gatunków chwastów, należących zarówno do roślin jednoliściennych<br />

jak również roślin dwuliściennych. Objawy porażenia obserwowano na podstawach<br />

pędu, korzeniach oraz liściach. Spośród badanych chwastów silniejszemu<br />

zainfekowaniu przez R. cerealis ulegały chwasty jednoliścienne. Najwięcej<br />

symptomów porażenia obserwowano na chwastnicy i włośnicy, a najmniej na<br />

miotle. Spośród roślin dwuliściennych R. cerealis najsilniej porażał szarłat<br />

szorstki (Amaranthus retroflexus) i bodziszek drobny, a na nawrocie polnym<br />

(Lithospermum arvense) nie stwierdzono żadnych objawów porażenia. Rhizoctonia<br />

solani, spośród roślin jednoliściennych najsilniej atakował włośnicę,<br />

a najmniej miotłę. Patogen ten znacznie silniej porażał siewki chwastów należących<br />

do roślin dwuliściennych. Najwięcej objawów porażenia przez R. solani<br />

stwierdzono na iglicy, a najmniej na gwiazdnicy pospolitej (Stellaria media),<br />

przetaczniku polnym (Veronica arvensis), sporku polnym (Spergula arvensis)<br />

i chabrze bławatku.


Summary<br />

WEEDS AS THE HOSTS OF PATHOGENIC ISOLATES OF<br />

RHIZOCTONIA CEREALIS AND R. SOLANI<br />

On some weed species there can develop fungi potentially pathogenic for<br />

cereals. Due to the fact that in cereals there are observed more and more<br />

symptoms caused by fungi of the genus Rhizoctonia, the aim of the present<br />

research was to investigate what role in their development is played by<br />

weeds and whether the isolates which occur on weeds can be pathogenic for<br />

cereals. The field experiments were performed at the Experiment Station<br />

at Mochełek. Over 2006–2011 from the arable fields, plants were collected<br />

representing 33 weed species. Their health status was evaluated and the<br />

mycological analysis – performed.<br />

The symptoms of sharp eyespot were mostly observed on the stems of<br />

Elymus repens. Rhizoctonia solani was isolated from 15 weed species, most<br />

frequently from Geranium pusillum and Matricaria inodora. The share of<br />

R. solani among all the isolates obtained was not too high. The weeds were<br />

dominated with Fusarium genus fungi, especially F. avenaceum, F. oxysporum<br />

and F. culmorum. Rhizoctonia cerealis was isolated only from E. repens.<br />

The virulence of 15 isolates of R. solani and 2 isolates of R. cerealis,<br />

obtained from respective weed species was tested for the seedlings of wheat,<br />

triticale, rye and barley. It was found that the isolates of R. solani obtained<br />

from some weeds could be dangerous for cereals seedlings. The roots of wheat<br />

and triticale were most infested by the isolate derived from Cirsium arvense,<br />

the roots of rye – the isolate from Centaurea cyanus, and the roots of barley –<br />

the isolate from Poa annua. The cereal stems were infested most by the isolate<br />

obtained from C. arvense. The isolates of R. cerealis derived from Elytrigia<br />

were very virulent for cereals seedlings.<br />

Besides there was tested the sensitivity of 34 weed species to the infection<br />

by R. cerealis and R. solani. Rhizoctonia cerealis strongly infested the seedlings<br />

of all the monocotyledonous weed species, less considerably – dicotyledonous<br />

plants. Most infection symptoms were observed on Echinochloa crus-galli and<br />

Setaria viridis, and least – on Apera spica-venti. Of all the dicotyledonous<br />

plants, R. cerealis infected most Amaranthus retroflexus and Geranium<br />

pusillum. Rhizoctonia solani, representing the monocotyledonous plants, was<br />

most attacked by S. viridis, and least – A. spica-venti. It infected the seedlings<br />

of dicotyledonous weeds much stronger. Most infection symptoms were<br />

identified on Erodium cicutarium, and least – on Stellaria media, Veronica<br />

arvensis, Spergula arvensis and C. cyanus.<br />

149


150<br />

UDZIAŁ TLENKU AZOTU W NABYWANIU ODPORNOŚCI<br />

LIŚCI ZIEMNIAKA NA PHYTOPHTHORA INFESTANS<br />

Dariusz Abramowski i Jolanta Floryszak-Wieczorek<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fizjologii Roślin,<br />

ul.Wołyńska 35, 60-637 Poznań<br />

d.abram@up.poznan.pl<br />

Rośliny uruchamiają szereg procesów obronnych w reakcji na atak patogena.<br />

Jedną z najskuteczniejszych form obrony jest aktywacja programowanej<br />

śmierci komórek w miejscu wystąpienia infekcji, co przejawia się pojawieniem<br />

lokalnych nekroz. W miejscach otaczających pierwotne źródło infekcji często<br />

dochodzi do inicjacji strategii obronnej adekwatnej do wyposażenia genetycznego<br />

<strong>rośliny</strong>-gospodarza, a w odpowiednich warunkach sygnał do wzmożonej<br />

odporności przenoszony jest do dalszych niezainfekowanych partii <strong>rośliny</strong>.<br />

W takim przypadku można mówić o uruchomieniu nabytej odporności systemicznej<br />

(SAR, ang. Systemic Acquired Resistance). Z ogólnie przyjętej definicji<br />

dla SAR wynika, że systemiczną odporność <strong>rośliny</strong> nabywają w następstwie<br />

słabej, często lokalnej infekcji pierwotnej, powodowanej przez różnorodne mikroorganizmy<br />

patogeniczne i niepatogeniczne, a jej objawy uzewnętrzniają<br />

się wzrostem odporności w przypadku zaistnienia silnej infekcji właściwej lub<br />

wtórnej. Czynnikami wzmagającymi odporność typu SAR mogą być także różne<br />

czynniki abiotyczne, w tym syntetyczne induktory. W naszych badaniach<br />

w liściach podatnej odmiany ziemniaka ‘Binje’ traktowanej analogiem strukturalnym<br />

i funkcjonalnym kwasu salicylowego (SA) – kwasem 2,6-dichloroizonikotynowym<br />

(INA) zaobserwowano znaczne ograniczenie rozwoju zarazy<br />

ziemniaka, bez wyraźnego wpływu induktora na hamowanie kiełkowania zarodników<br />

grzyba – P. infestans. INA jest pierwszym syntetycznym związkiem,<br />

który scharakteryzowano jako induktor SAR wywołujący odporność na szerokie<br />

spektrum patogenów. Bardzo istotnym dla SAR zagadnieniem jest proces<br />

ukonstytuowania się odporności w oddalonych od miejsca indukcji organach<br />

<strong>rośliny</strong>. Mimo intensywnych badań nie udało się jak dotąd zidentyfikować molekuły<br />

odpowiedzialnej za kluczowy etap transdukcji sygnału. Badania ostatnich<br />

lat dowiodły, że w przekazie sygnału patogen-roślina istotną rolę odgrywa<br />

tlenek azotu (NO). Synteza tej prostej pod względem chemicznym molekuły<br />

wzrasta gwałtownie po infekcji, a sam NO wykazuje wielopłaszczyznowe działanie<br />

w komórce roślinnej, m.in. poprzez posttranslacyjne modyfikacje białek<br />

na drodze S-nitrozylacji i nitrowania oraz poprzez dialog z siecią innych en-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 150-151<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


dogennych sygnałów komórkowych. Stąd też poznanie kinetyki generowania<br />

NO po indukcji liści ziemniaka kwasem 2,6-dichloroizonikotynowym wydaje<br />

się mieć kluczowe znaczenie w zrozumieniu roli NO w nabywaniu odporności<br />

SAR. Jak dotąd, w różnych układach patogen-roślina wykazano, że wzmożone<br />

generowanie NO pojawia się bardzo wcześnie po infekcji i wykazuje synchroniczne<br />

działanie z nadprodukcją reaktywnych form tlenu (RFT).<br />

W prezentowanej pracy przetestowano skuteczność wybranego induktora<br />

na hamowanie rozwoju choroby oraz wpływ INA na wczesne generowanie<br />

endogennego sygnału tj. tlenku azotu w liściach ziemniaka oraz na wytwarzanie<br />

anionorodnika ponadtlenkowego. Potwierdzono zaangażowanie obu<br />

wewnątrzkomórkowych sygnałów w inicjowaniu dystalnych zmian obronnych<br />

prowadzących do podwyższenia odporności liści na zarazę ziemniaka. Na<br />

podsumowanie stwierdza się, iż chemiczna ochrona roślin przed patogenami<br />

i szkodnikami jest bardzo kosztowna, a w wielu przypadkach zastosowanie<br />

skutecznych pestycydów nie jest możliwe ze względu na ich szkodliwe oddziaływanie<br />

na środowisko. Alternatywę stanowi poszukiwanie odmian o naturalnie<br />

podwyższonej odporności oraz podejmowanie badań nad nowymi formami<br />

transferu genów odporności, czy udoskonalonymi metodami immunizacji roślin.<br />

Na podkreślenie zasługuje fakt, że immunizacja polega na zmianie predyspozycji<br />

obronnych <strong>rośliny</strong> na drodze uruchamiania jej własnych istniejących<br />

mechanizmów metabolicznych, stąd też uznaje się ją za bezpieczną dla<br />

człowieka i środowiska naturalnego.<br />

Summary<br />

THE ROLE OF NITRIC OXIDE IN INDUCTION OF RESISTANCE TO<br />

PHYTOPHTHORA INFESTANS IN POTATO LEAVES<br />

Systemic acquired resistance (SAR) is the non-specific type of plant<br />

response to pathogen attack. This inducible mechanism can act against wide<br />

range of invaders. In spite of intensive studies leading to the recognition of<br />

signalling molecules involved in plant-host defence responses, SAR is still<br />

poorly understood. The action involved in SAR can be non-specifically induced<br />

in susceptible plants. In our study high systemic protection of susceptible potato<br />

leaves cv. ’Bintje’ – against late blight disease caused by Phytophthora infestans<br />

was induced by local pre-treatment with structural and functional analogue of<br />

salicylic acid such as 2,6-dichloroisonicotinic acid. Among endogenous signals,<br />

which potentially modulate defense responses in the course of resistance<br />

acquisition, a special role is played by nitric oxide. During early responses,<br />

special attention should be given for an interplay between NO and reactive<br />

oxygen species. Therefore we analyzed the kinetic of NO generation and<br />

superoxide level in induced potato leaves after INA treatment.<br />

This work was supported by Grant of Ministry of Science and Higher<br />

Education (N N303 340735)<br />

151


152<br />

MODELOWANIE MATEMATYCZNE JAKO NARZĘDZIE<br />

SKUTECZNIEJSZEGO ZWALCZANIA SUCHEJ<br />

ZGNILIZNY KAPUSTNYCH W RZEPAKU<br />

Adam Dawidziuk, Joanna Kaczmarek i Małgorzata Jędryczka<br />

Instytut Genetyki Roślin PAN, ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

adaw@igr.poznan.pl<br />

Suchą zgniliznę kapustnych wywołują dwa pokrewne gatunki grzybów:<br />

Leptosphaeria maculans [Desm.] Ces. et de Not. oraz L. biglobosa sp. nov. Shoemaker<br />

& Brun. Gospodarzami tych grzybów jest wiele roślin z rodziny kapustowatych<br />

(Brassicaceae). Jedną z głównych roślin żywicielskich jest rzepak<br />

ozimy (Brassica napus L. forma biennis), u którego wywołują suchą zgniliznę<br />

kapustnych. Choroba ta powoduje bardzo duże straty plonu nasion zarówno<br />

w Polsce jak i w Europie, Kanadzie i Australii. Do porażenia roślin rzepaku<br />

dochodzi głównie jesienią. Na porażonej słomie rzepakowej pozostałej na polu<br />

po poprzednim sezonie wegetacyjnym tworzą się pseudotecja – owocniki stadium<br />

doskonałego grzybów rodzaju Leptosphaeria. Proces ten jest silnie uzależniony<br />

od warunków meteorologicznych, takich jak temperatura i wilgotność.<br />

W pseudotecjach tworzą się askospory, tzn. zarodniki workowe. Proces ten jest<br />

inicjowany przez opady deszczu. Uwolnione askospory są głównym źródłem zakażenia<br />

roślin rzepaku. Zarodniki workowe przemieszczają się z wiatrem na<br />

duże odległości. Askospory osiadają na liścieniach oraz liściach roślin i powodują<br />

infekcję w wyniku penetracji tkanek przez aparaty szparkowe i uszkodzenia<br />

powstałe mechanicznie lub po działaniu szkodników czy przymrozków.<br />

Celem niniejszej pracy było opracowanie kompleksowego modelu prognozującego<br />

dojrzewanie owocników i uwalnianie zarodników workowych grzybów<br />

Leptosphaeria maculans i L. biglobosa, powodujących suchą zgniliznę<br />

kapustnych na rzepaku ozimym w Polsce. W opracowaniu uwzględniono<br />

zarówno procesy biologiczne związane z uzyskiwaniem poszczególnych stadiów<br />

cyklu rozwojowego grzybów, jak też strukturę populacji tych patogenów<br />

w poszczególnych regionach klimatycznych kraju. Do opracowania modelu<br />

matematycznego wykorzystano dane na temat szybkości dojrzewania owocników<br />

oraz terminów uwalniania zarodników workowych grzybów L. maculans<br />

i L. biglobosa, w latach od 1998 do 2008. Badania obejmowały łącznie<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 152-155<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


153 punkty pomiarowe przyporządkowane do różnych regionów klimatycznych.<br />

Dane meteorologiczne uzyskiwano ze stacji meteorologicznych umieszczonych<br />

średnio w odległości 11,1 km od punktów obserwacyjnych uwalniania<br />

zarodników oraz dojrzewania owocników grzybów L. maculans i L. biglobosa.<br />

Łącznie, baza danych zastosowana do analiz zawierała ponad 100 tys. wpisów<br />

na temat szybkości dojrzewania owocników, prawie 5 tys. rekordów dotyczących<br />

stężenia zarodników w powietrzu oraz 30 tys. wpisów z danymi meteorologicznymi<br />

odnoszącymi się do punktów badawczych. Opracowany model<br />

nazwano SimAsco; składa się on z dwóch modułów. Pierwszy z nich dotyczy<br />

szybkości dojrzewania pseudotecjów i zakłada, że dzień sprzyja dojrzewaniu<br />

owocników, jeśli średnia dzienna temperatura nie przekracza wartości krytycznej,<br />

a powierzchnia gleby jest wystarczająco wilgotna. Następnie założono,<br />

że dojrzewanie pseudotecjów zależy od sumy dni sprzyjających dojrzewaniu<br />

owocników po zbiorach, a ich suma potrzebna do uzyskania stadium dojrzałości<br />

ma rozkład krzywej Gaussa. Drugi moduł modelu SimAsco dotyczy prognozowania<br />

terminu uwalniania zarodników workowych grzybów L. maculans<br />

i L. biglobosa. Wykonuje on obliczenia w oparciu o przewidywaną dynamikę<br />

rozwoju owocników oraz bierze pod uwagę dzienną sumę opadów. Moduł ten<br />

wylicza prawdopodobieństwo występowania pustych pseudotecjów jako funkcji<br />

opadów. W wyniku przeprowadzonych badań stwierdzono, iż współczynnik<br />

korelacji Spearmana pomiędzy prognozą terminu pierwszej detekcji zarodników<br />

dokonaną za pomocą modelu SimAsco a obserwacją wynosił 0,94 – w tym<br />

przypadku uwzględniano wyniki uzyskane w poszczególnych miejscowościach<br />

w latach 2005-2008 oraz 0,83 gdy brano pod uwagę wszystkie miejscowości<br />

w anym roku badawczym. W przypadku terminu maksymalnego uwalniania<br />

zarodników współczynnik ten wynosił 0,65 gdy uwzględniano poszczególne<br />

miejscowości w latach 2005-2008 oraz 0,55 gdy brano pod uwagę wszystkie<br />

miejscowości w danym roku badawczym. Błąd predykcji opracowanego modelu<br />

wynosił 6-7 dni. Powyższy model skutecznie prognozuje terminy uwalniania<br />

zarodników workowych grzybów L. maculans i L. biglobosa. W późniejszych<br />

etapach prognozowania, dotyczących okresu wiosennego, należy do modelu włączyć<br />

dane na temat wpływu niskich temperatur na obniżenie zdolności owocników<br />

do uwalniania zarodników grzybów rodzaju Leptosphaeria.<br />

Summary<br />

MATHEMATICAL MODELING AS A TOOL FOR MORE EFFECTIVE<br />

OILSEED RAPE PROTECTION AGAINST STEM CANKER<br />

Stem canker is caused by two related species of fungi Leptosphaeria maculans<br />

[Desm.] Ces. et de Not. and L. biglobosa sp. nov. Shoemaker & Brun. The main<br />

hosts for these fungi are plants from the Brassicaceae family. One of the main host<br />

plant is oilseed rape (Brassica napus L. forma biennis), in which the pathogens<br />

153


154<br />

can cause stem canker. This disease is responsible for substantial seed yield<br />

losses, both in Poland and in Europe, Canada and Australia. Infection of oilseed<br />

rape occurs mainly in autumn. On infected rapeseed stubble, remaining in the<br />

field after the previous growing season, pseudothecia - perfect stage of fruiting<br />

bodies of Leptosphaeria spp. can be formed. This process is highly dependent on<br />

meteorological conditions such as temperature and humidity. Ascospores are<br />

produced in pseudothecia and this process is also initiated by rainfall. Released<br />

ascospores are the main source of infection of oilseed rape plants. Ascospores can<br />

be wind-transmitted over long distances. Ascospores attach to the cotyledons<br />

and young leaves of plants and cause infection through the tissue penetration<br />

of stomata and tissues damaged mechanically, by insects or by frosts.<br />

The aim of this study was to develop a comprehensive predictive model<br />

for the fruiting bodies maturation and ascospore release of Leptosphaeria<br />

maculans and L. biglobosa. The study took into account both, the biological<br />

processes associated with obtaining the various stages of the life cycle of both<br />

pathogens, as well as their population structure in different climatic regions<br />

of Poland. To develop a mathematical model, data on the rate of maturation<br />

of fruiting bodies and ascospore release of the fungi L. maculans and<br />

L. biglobosa, in the years from 1998 to 2008 were used. The study comprised<br />

153 experimental points, located in different climatic regions. Meteorological<br />

data were obtained from weather stations located within an average of 11.1<br />

kilometers from the experimental points. In total, the database used for the<br />

analysis contained over 100 thousand entries on the rate of fruiting bodies<br />

maturation, nearly 5 thousand records on the concentration of spores in the<br />

air and 30 thousand entries on meteorological data relating to research points.<br />

The model was termed SimAsco and it consisted two modules. The first one<br />

concerned the rate of pseudothecia maturation and assumed that the day is<br />

favorable for pseudothecia maturation, if the average daily temperature exceeds<br />

a critical value and the surface of the soil is sufficiently moist. It was assumed<br />

that the maturation of pseudothecia depends on the sum of days favorable for<br />

pseudothecia maturation after harvest, and their sum needed to achieve a stage<br />

of maturity has a Gaussian distribution. In order to estimate the ascospore<br />

release date of L. maculans and L. biglobosa the second module of the model<br />

was developed. It performed calculations based on the expected dynamics of<br />

maturation of the fruiting bodies, and took into account the daily rainfall. This<br />

module calculated the probability of occurrence of empty pseudothecia as a<br />

function of rainfall. The study showed that the correlation coefficient between<br />

the predicted timing of the first detection of ascospores made with the use of<br />

SimAsco model was 0.94 when the various experimental points in the years<br />

2005-2008 were taken into account and 0.83 when all experimental points in<br />

each test year were considered. For the period of maximal ascospore release


the Spearman correlation coefficient was 0.65 when the various experimental<br />

points in the years 2005-2008 were taken into account and it was 0.55 when<br />

all experimental points in each test year were considered. Prediction error of<br />

the models was 6-7 days. The SimAsco model successfully predicted ascospore<br />

release of L. maculans and L. biglobosa. At further steps of forecasting it is<br />

necessary to include the effect of low temperature on the viability of seudothecia<br />

and the release of the ascospores of Leptosphaeria species.<br />

155


156<br />

AKTUALNE PROBLEMY OCHRONY ROŚLIN<br />

JAGODOWYCH PRZED CHOROBAMI<br />

Beata Meszka 1 , Agata Broniarek-Niemiec 1 i Anna Bielenin 1<br />

1 Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

bmeszka@insad.pl<br />

Występowanie i znaczenie chorób powodowanych przez patogeniczne grzyby<br />

jest zmienne i zależy od wielu czynników m.in. wielkości źródła infekcji,<br />

wieku plantacji, typu uprawy, odmiany i przebiegu warunków pogodowych.<br />

Poważnym problem w uprawie, głównie deserowych odmian truskawki (‘Honeoye’,<br />

‘Elsanta’, ‘Camarosa’, ‘Albion’, ‘Aromas’), ale również borówki wysokiej, są<br />

patogeny, będące sprawcami antraknozy, zgnilizny korony truskawki i wertycyliozy.<br />

Zwalczanie ich jest bardzo trudne, często wręcz niemożliwe, ze względu<br />

na brak zarejestrowanych, skutecznych środków. Bardzo istotną rolę w zapobieganiu<br />

rozprzestrzeniania się szkodliwych agrofagów odgrywa zakładanie<br />

plantacji ze zdrowych, kwalifikowanych sadzonek, wybór odpowiedniego stanowiska,<br />

stosowanie właściwego płodozmianu, sterylnego podłoża w uprawach<br />

pod osłonami, prawidłowe nawożenie azotowe, sadzenie roślin na podwyższonych<br />

zagonach, ściółkowanie plantacji, unikanie nawadniania w postaci deszczowni<br />

na korzyść kropelkowego, usuwanie z pola porażonych roślin i owoców<br />

oraz właściwa ochrona chemiczna.<br />

Coraz większą popularnością wśród producentów roślin jagodowych cieszy<br />

się uprawa borówki wysokiej. Ze względu na wieloletni charakter plantacji, za<br />

szczególnie niebezpieczne uznaje się grzyby wywołujące choroby pędów, zwłaszcza<br />

zgorzel powodowaną przez Godronia cassandrae, grzyb który może być<br />

także przyczyną gnicia owoców w czasie ich dojrzewania. Na stopień porażenia<br />

krzewów wpływ ma przede wszystkim podatność uprawianej odmiany, a także<br />

warunki uprawy (głównie stanowisko) oraz przebieg warunków atmosferycznych.<br />

Ostatnio patogenem, który coraz częściej spotykany jest na plantacjach<br />

handlowych, jest Colletotrichum acutatum, sprawca antraknozy borówki. Grzyb<br />

ten powoduje duże straty w polu, ale przede wszystkim w czasie przechowywania<br />

i transportu owoców. Niestety, w Polsce jedynie fungicyd Switch 62,5 WG<br />

uzyskał zezwolenie do zwalczania tego patogenu w uprawie borówki wysokiej.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 156-158<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Na plantacjach porzeczek i agrestu największy problem stanowią dwie choroby:<br />

opadzina liści porzeczki (Drepanopeziza ribis) oraz amerykański mączniak<br />

agrestu (Sphaerotheca mors-uvae). Dla uzyskania dobrych efektów ochrony<br />

konieczne jest, w zależności od warunków atmosferycznych i podatności<br />

odmiany, wykonanie od czterech do sześciu zabiegów w sezonie. Asortyment zarejestrowanych<br />

fungicydów do zwalczania opadziny liści poszerzono w ostatnim<br />

roku o wysoko efektywny preparat Signum 33 WG, z grupy strobiluryn. Badano<br />

również przydatność niektórych nawozów dolistnych, powszechnie stosowanych<br />

do nawożenia upraw jagodowych oraz preparatów biologicznych, opartych na<br />

antagonistycznych grzybach Phytium oligandrum i Ampelomyces quisqualis do<br />

zwalczania najgroźniejszych patogenów atakujących <strong>rośliny</strong> jagodowe. Uzyskane<br />

wyniki wykazały, że nawozy fosforowe i oparte na węglanie potasu, jak również<br />

biopreparaty ograniczają nasilenie szarej pleśni truskawki, opadziny liści<br />

i amerykańskiego mączniaka agrestu.<br />

Summary<br />

CURRENT PROBLEMS IN CONTROL OF BERRY PLANT DISEASES<br />

The occurrence and severity of fungal diseases is variable and depends<br />

on abundance of inoculums source, age of plantation, cultivar and weather<br />

conditions. Pathogens, which cause anthracnose, crown rot or Verticillium<br />

wilt, are a big problem mainly on dessert cultivars of strawberry (Honeoye,<br />

Elsanta, Camarosa, Albion, Aromas) and blueberry. Control of these pathogens<br />

is very difficult and sometimes impossible because of lack of effective, registered<br />

fungicides. Healthy stocks, choice of good location, used of proper crop rotation,<br />

good cultural practice (fertilization, mulching, irrigation, removal of affected<br />

plants and fruit) and chemical control are helpful in reduction of losses.<br />

In the recent years, blueberry production is coming more and more popular.<br />

Perennial character of this cultivation makes fungi causing stem diseases,<br />

like Godronia cassandrae, a very dangerous. The severity of disease depends<br />

on cultivar susceptibility, weather and cultivation conditions. In Poland no<br />

fungicide is registered for control of this disease. Currently, anthracnose,<br />

caused by Colletotrichum acutatum, is a big problem on blueberry. Berries do<br />

not develop symptoms until they are matured. The symptoms are mostly visible<br />

on fruits during storage and transport. Unfortunately, only Switch 62,5 WG has<br />

temporary permission for control of this disease in Poland.<br />

On black currant and gooseberry plantations, anthracnose (Drepanopeziza<br />

ribis) and powdery mildew (Sphaerotheca mors-uvae) are the biggest problem.<br />

Usually 4 or 6 applications are needed during the season, depending on weather<br />

conditions and susceptibility of cultivar. In the last season, a new product,<br />

Signum 33 WG from strobilurin group, has been registered. Its efficacy in<br />

157


158<br />

control of these diseases is very good, even more than 80%. Effectiveness of<br />

some fertilizers commonly used on berries plantations and biological products,<br />

containing antagonistic fungi (Phytium oligandrum, Ampelomyces quisqualis)<br />

was tested against main diseases. Obtained results showed that phosphate<br />

fertilizer, potassium carbonate and bioproducts are effective against grey<br />

mould, anthracnose and powdery mildew.


BIOLOGICZNE I GENETYCZNE ZRÓŻNICOWANIE<br />

IZOLATÓW WIRUSA MOZAIKI PEPINO (PEPINO<br />

MOSAIC VIRUS) WYSTĘPUJĄCYCH W POLSCE<br />

Henryk Pospieszny, Beata Hasiów-Jaroszewska<br />

i Natasza Borodynko<br />

Instytut Ochrony Roślin – PIB, Zakład Wirusologii i Bakteriologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

H.Pospieszny@iorpib.poznan.pl<br />

Wirus mozaiki pepino (Pepino mosaic virus, PepMV) jest jednym z najważniejszych<br />

patogenów pomidora, szeroko rozpowszechnionym w świecie.<br />

PepMV po raz pierwszy został zidentyfikowany w roku 1974 na psiance<br />

melonowej (Solanum muricatum), w Peru. Od roku 1999 pojawiały się doniesienia<br />

o występowaniu PepMV na pomidorze szklarniowym początkowo<br />

w Anglii i Holandii a następnie w innych krajach Europy i poza nią, powodującym<br />

znaczne straty ekonomiczne. PepMV jako przedstawiciel rodzaju Potexvirus<br />

poraża zakres roślin ograniczony do gatunków z Solanaceae, bardzo<br />

łatwo przenosi się mechanicznie przez kontakt a także przez nasiona i owady<br />

zapylające <strong>rośliny</strong> pomidora. Na porażonych przez PepMV roślinach pomidora<br />

występują liczne typy objawów chorobowych: łagodne lub silne mozaiki, bąblastość<br />

liści, łagodne zniekształcenie liści, nekrozy i zahamowania wzrostu<br />

a nawet zamieranie roślin. Wirus wpływa negatywnie także na jakość owoców<br />

powodując nierównomierne ich wybarwianie a nawet różną plamistość i zniekształcenia.<br />

Typ objawów zależy od izolatu wirusa i warunków środowiskowych,<br />

głównie temperatury, przez to nie jest charakterystyczne dla PepMV.<br />

PepMV jest obecnie uważany za groźnego patogena i dlatego EPPO wpisało<br />

go na listę alertową i przez wiele państw wirus został objęty specjalnymi<br />

działaniami fitosanitarnymi. Wirus wykazuje duże zróżnicowanie genetyczne<br />

i dotąd wyróżniono 4 jego genotypy (szczepy): Peruwiański (LP), Europejski<br />

(EU), Chilijski 2 (CH2) i Amerykański 1 (US1). Oprócz tego zidentyfikowano<br />

rekombinanty wirusa. W Polsce, od roku 2002 zostały zidentyfikowane<br />

liczne izolaty PepMV należące do szczepów EU i CH2. Na podstawie zakresu<br />

porażanych roślin, objawów na pomidorze i analizy genetycznej, z pośród<br />

polskich izolatów wyróżniono co najmniej 5 patotypów PepMV. Dwa z nich,<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 159-161<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

159


160<br />

ostry PepMV-SW i łagodny PepMV-No należą do genotypu EU. Ostry patotyp<br />

PepMV-SW w porównaniu do łagodnego poraża szerszy zakres roślin i powoduje<br />

na nich bardziej zdefiniowane objawy. PepMV-SW poraża większość<br />

gatunków z rodzaju Nicotiana a także Physalis floridana, Solanum tuberosum<br />

i Capsicum annuum. P. floridana nie jest porażana przez inne izolaty<br />

genotypów PepMV z pomidora. Patotyp PepMV posiada bardziej ograniczony<br />

zakres porażanych roślin i indukuje łagodne objawy chorobowe. Genetyczne<br />

pokrewieństwo pomiędzy oboma patotypami wynosi ponad 99%. Trzy kolejne<br />

patotypy: łagodny PepMV-PK, nekrotyczny PepMV-Pa i żółtaczkowy PepMV-<br />

-Zl należą do genotypu CH2. PepMV-PK nie indukuje żadnych wyraźnych lub<br />

charakterystycznych objawów chorobowych na liściach pomidora a na owocach<br />

wywołuje nierównomierne ich wybarwienie. Izolaty nekrotycznego patotypu<br />

w warunkach umiarkowanej temperatury (20-25 0 C) indukują nekrozy na<br />

roślinach pomidora, jakkolwiek latem, w warunkach wysokiej temperatury te<br />

same izolaty indukują łagodne objawy, bez nekroz. Za bardzo specyficzne właściwości<br />

dla patotypu nekrotycznego PepMV-Pa należy uznać jego zdolność do<br />

indukowania lokalnych nekrotycznych plam na Datura inoxia w każdych warunkach<br />

temperaturowych. Żółtaczkowy patotyp PepMV-Zl powoduje żółknięcie<br />

najmłodszych liści już w 10-12 dni po inokulacji młodych roślin co z czasem<br />

prowadzi do żółknięcie całych roślin. Podobny charakter objawów PepMV-Zl<br />

indukuje na niektórych odmianach ziemniaka. Żółtaczkowy patotyp, zarówno<br />

w warunkach naturalnych jak i eksperymentalnych, powoduje silne zmiany<br />

na owocach, w postaci nekroz i zniekształceń, całkowicie obniżając ich wartość<br />

użytkową. Wszystkie 3 patotypy szczepu CH2 wykazują ponad 99%<br />

podobieństwo sekwencji. Znaczy to, że drobne zmiany i różnice w sekwencji<br />

nukleotydów patotypów genotypu CH2 są odpowiedzialne za istotne zmiany<br />

w typie objawów przez nie powodowanych. Wykazaliśmy w przypadku patotypu<br />

nekrotycznego, że pojedyncza mutacja w genie TBG3 powoduje przejście<br />

patotypu łagodnego w nekrotyczny. PepMV jest potencjalnie bardzo groźnym<br />

patogenem pomidora ze względu na jego wyjątkową zdolność do tworzenia<br />

licznych nowych wariantów, ułatwiających wirusowi zasiedlanie nowych nisz.<br />

Dobra znajomość tego zjawiska umożliwi podejmowanie działań skutecznie<br />

ograniczających występowanie PepMV.<br />

Summary<br />

BIOLOGICAL AND GENETIC DIVERSITY OF THE POLISH<br />

PEPINO MOSAIC VIRUS ISOLATES<br />

Pepino mosaic virus (PepMV) is a widespread virus causes a major disease<br />

of tomato crops worldwide. PepMV was first identified in 1974 in Peru on<br />

pepino (Solanum muricatum). Since 1999 the virus was reported on tomato,<br />

first in England and the Netherlands, than it has spread rapidly in Europe


and beyond, causing severe economic losses. The PepMV host range is limited<br />

mainly to the Solanaceae and virus is easily transmitted mechanically by<br />

contact, vectored by bumbles-bees and transmitted by seeds. PepMV infections<br />

in tomato are associated with wide range of leaf symptoms: mild and severe<br />

mosaic, bubbling, mild leaf distortions, necrosis and stunting. Virus also affects<br />

the quality of fruits by irregular lycopen distribution or even causing necrotic<br />

spots. Therefore, PepMV is currently considered a dangerous pathogen and<br />

included in EPPO alert as one of the most important tomato viruses worldwide.<br />

So far, four PepMV genotypes (strains) have been distinguished: Peruvian<br />

(LP), European (EU), American 1 (US1), and Chilean 2 (CH2). Additionally,<br />

at least two different recombinants were identified. In Poland, several isolates<br />

belonging to EU and CH2 strains have been found since 2002. Based on host<br />

range, symptoms and genetic analysis we distinguished at least five different<br />

pathotypes among the Polish isolates. Two of them, severe PepMV-SW and<br />

mild PepMV-No belong to the EU. Severe pathotype, in comparision to the<br />

mild one, species from Nicotiana genus and Physalis floridana , Solanum<br />

tuberosum and Capsicum annuum. P. floridana was not infected by other<br />

strains apart from LP. Pathotype PepMV-No had limited host range and<br />

caused mild symptoms. Phylogenetic analysis both pathotypes showed over<br />

99% identity between them. The three next pathotypes: mild PepMV-PK,<br />

necrotic PepMV-Pa and yellowing PepMV-Zl belong to CH2 genotype. Mild<br />

CH2 isolates did not induced any significant symptoms on tomato. Necrotic<br />

isolates at the temperate temperature caused necrosis on tomato plants wheres<br />

during summer (high temperature) induced only mild symptoms. Very specific<br />

characteristics of necrotic isolates was the induction of local necrotic spots<br />

on Datura inoxia. Yellowing pathotype caused yellowing of tomato leaves,<br />

even whole plants. PepMV-Zl caused also very severe symptoms on fruits. All<br />

pathotypes shared over 99% of nucleotide sequence identity. This suggests<br />

that minor differences in genome sequence can cause significant differences in<br />

symptoms on tomato caused by different pathotypes of the same genotype. We<br />

showed that a single mutation in TBG 3 gen converts mild pathotype of the<br />

PepMV into necrotic one. PepMV is a very dangerous pathogen of tomato due<br />

to its great ability for differentiate and the knowledge about this phenomenon<br />

is essential to develop efficient control strategies of the virus.<br />

161


162<br />

GENETYCZNE UWARUNKOWANIA ODDZIAŁYWAŃ<br />

POMIĘDZY WIRUSEM MOZAIKI PEPINO (PEPINO<br />

MOSAIC VIRUS) A GOSPODARZEM<br />

Beata Hasiów-Jaroszewska, Natasza Borodynko<br />

i Henryk Pospieszny<br />

Instytut Ochrony Roślin-Państwowy Instytut Badawczy, Zakład Wirusologii<br />

i Bakteriologii, ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

B.Hasiow@iorpib.poznan.pl<br />

Wirus mozaiki pepino (Pepino mosaic virus, PepMV) należy obecnie do<br />

najgroźniejszych patogenów pomidora. W ostatnich latach odnotowano jego<br />

nasilone występowanie w wielu krajach całego świata. Ze względu na swoją<br />

szkodliwość został umieszczony na liście alertowej EPPO (European and Mediterranean<br />

Plant Protection Organization – Europejska i Śródziemnomorska<br />

Organizacja Ochrony Roślin) i objęty szczególnymi działaniami fitosanitarnymi.<br />

Izolaty PepMV są bardzo zróżnicowane biologicznie i genetycznie. Do<br />

tej pory wyodrębniono cztery genotypy PepMV: Peruwiański (LP), Europejski<br />

(EU), Chilijski 2 (CH2) i Amerykański 1 (US1) oraz różnego typu rekombinanty<br />

między ich izolatami. W Zakładzie Wirusologii i Bakteriologii IOR – PIB<br />

zidentyfikowaliśmy i zgromadziliśmy kolekcję polskich izolatów PepMV, odmiennych<br />

biologicznie i genetycznie, należących do dwóch genotypów: europejskiego<br />

(EU) i chilijskiego 2 (CH2). Izolaty są reprezentowane przez 5 patotypów,<br />

różniących się typem objawów chorobowych indukowanych na roślinach.<br />

Uzyskanie w naszym Zakładzie infekcyjnych kopii izolatów z genotypu CH2<br />

PepMV dało szansę na prowadzenie badań nad poznaniem mechanizmów oddziaływania<br />

patogen-gospodarz i determinantów wirulencji wirusa. Niektóre<br />

typy objawów stanowią doskonałe markery ułatwiające śledzenie udziału poszczególnych<br />

genów w indukcji objawów i kształtowaniu wirulencji wirusów<br />

jako, że oba zjawiska są współzależne. Badania nad izolatami należącymi do<br />

genotypu CH2 wykazały, że pojedyncza mutacja (A 199 -G 199 ) [zmieniająca lizynę<br />

(K) w kwas glutaminowy (E)] w genie kodującym jedno z białek odpowiedzialne<br />

za transport wirusa w roślinie zmieniała typ objawów wywoływanych<br />

przez izolat łagodny na nekrotyczne na pomidorze i Datura inoxia. Mutacje<br />

wprowadzone w genie kodującym replikazę nie wpływały w sposób widoczny<br />

na objawy powodowane przez wirusa. W celu sprawdzenia czy mechanizm ten<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 162-163<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


jest typowy tylko dla izolatów z genotypu CH2 czy może uniwersalny uzyskano<br />

infekcyjną kopię łagodnego izolatu z genotypu EU i przeprowadzono<br />

reakcje ukierunkowanej mutagenezy. Wśród izolatów z genotypu EU również<br />

stwierdzono występowanie izolatów powodujących nekrozy na roślinach pomidora,<br />

jak i izolatów nie wywołujących objawów. Wstępne badania wykazały,<br />

że ta sama mutacja (K 67 -E 67 ) w TGB3 wpływa na typ wywoływanych objawów<br />

zarówno izolatów z grupy CH2 jak i EU. Wstępne badania z wykorzystaniem<br />

strategii ukierunkowanej mutagenezy i izolatów obu genotypów wskazują na<br />

białko odpowiedzialne za transport wirusa w roślinie (TGB3) jako potencjalny<br />

czynnik w specyficznej interakcji między wirusem a gospodarzem.<br />

Summary<br />

GENETIC DETERMINANTS OF HOST-PATHOGEN INTERACTIONS<br />

OF PEPINO MOSAIC VIRUS AND HOST<br />

Pepino mosaic virus (PepMV) is currently included in the European Plant<br />

Protection Organization alert list as one of the most important tomato viruses<br />

worldwide. Up to date, four PepMV genotypes: Peruvian (LP), European (EU),<br />

American 1 (US1), and Chilean 2 (CH2) and various types of interstrains recombinants<br />

have been distinguished. Several isolates of PepMV were collected<br />

between 2003–2010 in the Department of Virology and Bacteriology, Institute<br />

of Plant Protection – National Research Institute, Poznań, Poland. Isolates<br />

are represented by five pathotypes, differing in the type of symptoms they<br />

induce on plants. Necrotic PepMV isolates differ from the mild ones by one<br />

conserved amino acid substitution in protein responsible for virus movement<br />

(TGB3) and several in polymerase. By performing site-directed mutagenesis<br />

of the infectious clones, we evaluated how one mutation in TGB3 and two<br />

mutations in RdRp influence PepMV virulence. The analyses showed that the<br />

TGB3 K67E (lysine-glutamic acid) substitution is required to alter the virus<br />

from mild to aggressive in tomato and Datura inoxia. In order to check whether<br />

the discovered dependency is general for all PepMV genotypes or unique to<br />

CH2 we constructed infectious clones of EU strain and performed site-directed<br />

mutagenesis. The preliminary studies showed that again K 67 -E 67 substitution<br />

in TGB3 affects the type of symptoms caused by isolates representing EU<br />

genotype. Our studies using site-directed mutagenesis strategy and isolates of<br />

both genotypes show that TGB3 protein acts as factor in the specific interaction<br />

between virus and host.<br />

163


164<br />

POSZUKIWANIE NOWYCH WZORÓW REKOMBINACJI<br />

W GENOMACH IZOLATÓW WIRUSA Y ZIEMNIAKA<br />

(POTATO VIRUS Y, PVY)<br />

Katarzyna Golnik i Marek Szyndel<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego w Warszawie, Wydział Ogrodnictwa<br />

i Architektury Krajobrazu, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

katarzyna_golnik@sggw.pl<br />

Wirusy to jedne z najprostszych form życia występujących na ziemi. Podstawowe<br />

pojedyncze cząstki wirusów roślinnych składają się z kwasu nukleinowego<br />

będącego genomem wirusa i otaczającej go białkowej osłonki. Budowa<br />

wirusów jest tak prosta, że dyskusyjnym staje się zaliczenie ich do organizmów<br />

żywych. Mimo to wirusy mogą podlegać procesowi odpowiadającemu<br />

rozmnażaniu płciowemu, które zachodzi u organizmów bardziej rozwiniętych.<br />

Proces ten nazywany jest rekombinacją i polega na wymianie fragmentów<br />

pomiędzy dwoma genomami wirusa. Wirusy, pomiędzy którymi następuje<br />

rekombinacja nazywane są rodzicielskimi a powstały nowy genom to rekombinant.<br />

Dokładny przebieg rekombinacji nadal jest przedmiotem badań, natomiast<br />

bardzo dobrze udokumentowane są wyniki procesu rekombinacji,czyli<br />

powstające rekombinanty. Są one identyfikowane poprzez uzyskanie i analizę<br />

ich sekwencji nukleotydowych, z tego powodu rekombinacje są wykrywane,<br />

kiedy genomy rodzicielskie różniły się sekwencją nukleotydową np. należały<br />

do różnych szczepów wirusa. Rekombinanty o poznanej sekwencji mogą być<br />

łatwo identyfikowane przy użyciu metody PCR. Stosuje się tutaj zasadę, że<br />

startery znajdują się po dwóch stronach miejsca rekombinacji a każdy z pary<br />

starterów ma zdolność do specyficznego przyłączania się tylko do genomu jednego<br />

z wirusów rodzicielskich. W ten sposób produkt reakcji PCR uzyskuje się<br />

jedynie dla rekombinantów.<br />

W wielu przypadkach obserwuje się, że rekombinacja zachodzi częściej<br />

w wybranych miejscach genomu. Dla genomu wirusa Y ziemniaka (Potato virus<br />

Y, PVY), szczepów PVY N-Wi i PVY NTN , zostało opisanych kilka takich miejsc,<br />

w tym jeden w początkowej części genomu, w okolicach pięćsetnego nukleotydu<br />

(500nt), przypadającego na sekwencję kodującą wirusowe białko nazywa-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 164-166<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


ne P1. Dla omawianych szczepów PVY N-Wi i PVY NTN opisano trzy podstawowe<br />

warianty początkowego fragmentu genomu. Pierwszy z nich to sekwencja bez<br />

rekombinacji, najbardziej pochodząca od rodzicielskiego szczepu PVY N . Druga<br />

to sekwencja z typową rekombinacją, gdzie początkowy fragment genomu od<br />

1 do około 500nt pochodzi najprawdopodobniej od szczepu rodzicielskiego PVY O<br />

a dalszy fragment genomy od szczepu PVY N . Pierwszy i drugi wariant był wykrywany<br />

w sekwencjach obu szczepów PVY N-Wi i PVY NTN . W trzecim wariancie<br />

punkt rekombinacji był nieznacznie przesunięty. Trzeci wariant wykrywano<br />

jedynie dla nielicznych izolatów: punkt przypadający na 652nt był opisywany<br />

jedynie dla izolatu PVY N-Wi 261-4 a punkt przypadający na 686nt dla izolatów<br />

z podgrupy SyrIII, które mogą być zaliczane do podgrupy PVY NTN . W celu rozróżniania<br />

wariantów sekwencji opracowano metodę multiplex PCR z użyciem<br />

4 starterów. Pojedynczy starter typu „reverse” nazwany Yn837r był specyficzny<br />

dla sekwencji szczepu rodzicielskiego PVY N , przyłączał się na wysokości<br />

837nt. Z trzech starterów typu „forward” dwa Yof539 i Yof355, przyłączały się<br />

specyficznie do sekwencji szczepu rodzicielskiego PVY O a jeden – Ynf159 do sekwencji<br />

szczepu rodzicielskiego PVY N . W ten sposób najdłuższy produkt PCR,<br />

o długości 678pz (par zasad), otrzymywano w przypadku izolatów nie posiadających<br />

punktu rekombinacji. Produkt PCR o długości 482pz był otrzymywany<br />

w przypadku izolatów posiadających standardowy punkt rekombinacji około<br />

500nt. Dla sekwencji z nietypowym punktem rekombinacji otrzymywane były<br />

dwa produkty o długości 298pz i 482pz.<br />

Przygotowanym zestawem starterów przebadano 60 izolatów wirusa Y ziemniaka<br />

zebranych z terenu centralnej Polski. 55 izolatów należało do szczepu<br />

PVY N-Wi z czego dla 24 izolatów uzyskano wynik charakterystyczny dla sekwencji<br />

nie posiadających punktu rekombinacji. 23 izolaty zakwalifikowano jako<br />

posiadające typowy punkt rekombinacji około 500nt a dwa jako posiadające<br />

nietypowy punkt rekombinacji. 5 przebadanych izolatów ze szczepu PVY NTN<br />

wykazywało zaskakujące zróżnicowanie. Dla dwóch uzyskiwano wynik charakterystyczny<br />

dla szczepów nie posiadających dodatkowego punktu rekombinacji,<br />

jeden posiadał najprawdopodobniej typowy punkt rekombinacji około 500nt,<br />

jeden nietypowy punkt rekombinacji. Dla jednego izolatu ze szczepu PVY NTN<br />

i 6 izolatów ze szczepu PVY N-Wi uzyskano produkty PCR sugerujące obecność<br />

dwóch różnych rodzajów sekwencji. Dla wybranych izolatów przeprowadzono<br />

sekwencjonowanie początkowego odcinka genomu wirusa.<br />

Zastosowanie zaprojektowanych starterów pozwoliło na wytypowanie do<br />

sekwencjonowania najciekawszych izolatów z posiadanej kolekcji. Wyniki<br />

sekwencjonowania udowodniły występowanie w Polsce wariantów wirusa Y<br />

ziemniaka, wykrywanych dotychczas jedynie w innych krajach, w tym izolatów<br />

z nietypowymi miejscami rekombinacji przypadającymi na około 652nt i 686nt.<br />

165


166<br />

Summary<br />

IN SEARCH OF NEW RECOMBINATION PATTERNS IN GENOMES<br />

OF POTATO VIRUS Y (PVY)<br />

Potato virus Y (PVY) is a type species of family Potyviridae, genus Potyvirus.<br />

In Poland it occurs frequently in potato and tomato crops. Genome of<br />

the virus is a subject of frequent recombination. In this work a primer set<br />

was developed for a survey of the possible recombination points at the beginning<br />

of PVY genome. Expected recombination points were located at 500,<br />

652 and 686 nucleotide, calculated from the beginning of the genome. 4 primers<br />

were designed. Reverse primer named Yn837r was specific for parental<br />

strain PVY N and is complementary to the virus sequence beginning at the 837<br />

nucleotide. Three forward primers were named Yof539, Yof355 and Ynf159.<br />

Primers Yof539 and Yof355 were specific for parental strain PVY 0 and Ynf159<br />

for parental strain PVY N . Numbers refer to localizations at the PVY genome.<br />

All primers were used in multiplex PCR assay. Three types of products were<br />

obtained. For non recombinant sequences a 678 bp long product was obtained<br />

with primers Yn837r and Ynf159, with primers Yn837r and Yof355 – a product<br />

482bp long for sequences with recombinations and with primers Yn837r<br />

and Yof539 – a product 298 bp long only for recombinations located near nucleotides<br />

652 and 686. The assay was used to characterize 60 isolates of PVY<br />

collected in Poland and to single out isolates for further sequencing. Results<br />

showed that tested isolates of PVY are very diverse. Sequenced fragments<br />

represented isolates without recombination as well as isolates with recombinations<br />

located near 500, 652 or 686 nucleotide in the genome.


WYKRYWANIE I CHARAKTERYSTYKA MOLEKULARNA<br />

IZOLATÓW WIRUSA CZERWONEJ PIERŚCIENIOWEJ<br />

PLAMISTOŚCI BORÓWKI WYSOKIEJ<br />

Elżbieta Kalinowska, Elżbieta Paduch-Cichal<br />

i Maria Chodorska<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

elzbieta_kalinowska@sggw.pl<br />

Wirus pierścieniowej plamistości borówki wysokiej (ang. Blueberry red<br />

ringspot virus, BRRSV; rodzaj Soymovirus, rodzina Caulimoviridae) jest sprawcą<br />

choroby pierścieniowa plamistość borówki wysokiej. BRRSV poraża jedynie<br />

borówkę wysoką (Vaccinium corymbosum L.). Pierścieniową plamistość borówki<br />

wysokiej odnotowano na licznych plantacjach w Ameryce Północnej, w<br />

Azji (Japonia) i w Europie (Czechy). W 2010 roku, objawy porażenia BRRSV<br />

w postaci czerwonych plam i pierścieni obserwowano na liściach oraz pędach<br />

krzewów borówki wysokiej odmiany ‘Darrow’ i ‘Herbert’ rosnących na plantacji<br />

zlokalizowanej w centralnej Polsce.<br />

Do badań pobrano liście oraz pędy z krzewów borówki wysokiej odmiany ‘Darrow’<br />

(siedem izolatów – BRRSV03, BRRSV12, BRRSV13, BRRSV15, BRRSV16,<br />

BRRSV20, BRRSV21) oraz odmiany ‘Herbert’ (dwa izolaty – BRRSV22,<br />

BRRSV24) wykazujących objawy porażenia BRRSV.<br />

Z materiału roślinnego wyizolowano całkowite DNA i użyto w reakcji PCR wykorzystując<br />

startery RRSV3/4 zaprojektowane przez Polashock i in. (2009) amplifikującymi<br />

fragment genu aktywatora transkrypcji. Otrzymany po elektroforezie<br />

produkt (około 500 pz) dla 9 izolatów BRRSV poddano sekwencjonowaniu.<br />

Homologia otrzymanych sekwencji nukleotydów fragmentu genu aktywatora<br />

transkrypcji dziewięciu polskich izolatów w stosunku do sekwencji nukleotydów<br />

fragmentu genu aktywatora transkrypcji amerykańskiego izolatu BRRSV-NJ,<br />

zarejestrowanego w GenBank (Acc. No. AF404509) wynosiła 93-96%. Ponadto<br />

ustalono pełną sekwencję nukleotydów genomu izolatu BRRSV24, której homologia<br />

w stosunku do pełnej sekwencji nukleotydów genomu izolatu BRRSV-NJ<br />

wynosiła 95%. Ustalono także sekwencje nukleotydów genu kodującego białko<br />

transportowe dla czterech izolatów: BRRSV03, BRRSV13, BRRSV16, BRRSV20<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 167-168<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

167


168<br />

(92-94% homologii w stosunku do izolatu BRRSV-NJ). Dla izolatu BRRSV13<br />

określono także sekwencję nukleotydów genu odwrotnej transkryptazy (96%<br />

homologii w stosunku do izolatu BRRSV-NJ).<br />

Summary<br />

DETECTION AND MOLECULAR CHARACTERIZATION OF<br />

BLUEBERRY RED RINGSPOT VIRUS ISOLATES<br />

Blueberry red ringspot virus (BRRSV), a member of the Soymovirus genius<br />

in the Caulimoviridae family is associated with the red ringspot disease. The<br />

virus is reported on highbush blueberry (Vaccinium corymbosum L.). BRRSV<br />

was detected on numerous plantations in North America, Asia and Europe. The<br />

symptoms of red ringspot disease on leaves and stems were observed on blueberry<br />

cultivars ‘Darrow’ and ‘Herbert’ from Polish plantations on midsummer.<br />

In order to confirm the BRRSV infection by PCR technique, symptomatic<br />

leaves and stems from two cultivars: Darrow (seven isolates – BRRSV03,<br />

BRRSV12, BRRSV13, BRRSV15, BRRSV16, BRRSV20, and BRRSV21) and<br />

Herbert (two isolates – BRRSV22, BRRSV24) were collected. Total nucleic acids<br />

(total NA) were extracted from symptomatic leaves and stems. The primer set<br />

RRSV3/RRSV4, which amplifies the fragment of the transcriptional activator<br />

gene (Polashock et. al., 2009), was used in PCR for BRRSV detection. PCR<br />

products were analyzed by agarose gel electrophoresis and sequenced.<br />

Nucleotide sequence analysis of the 500 bp DNA amplicons of seven isolates<br />

from the Darrow cultivar and two isolates from the Herbert cultivar revealed 93-<br />

96% nucleotide sequence identity with the BRRSV-NJ putative transcriptional<br />

activator gene (GenBank Accession No. AF404509).<br />

The sequence of total genome of the BRRSV24 isolate was determined.<br />

Nucleotide sequence analysis of the genome revealed 95% identity with the<br />

BRRSV-NJ isolate. A sequence of the gene encoding movement protein of<br />

four BRRSV isolates: BRRSV03, BRRSV13, BRRSV16, BRRSV20, was also<br />

established. These four fragments revealed 92-94% identity to the BRRSV-NJ<br />

sequence. Moreover, a nucleotide sequence of the reverse transcriptase gene<br />

(96% of homology with the BRRSV-NJ sequence) of BRRSV13 isolate was also<br />

determined.


FITOPLAZMY PRZYCZYNĄ ZABURZEŃ W KWITNIENIU<br />

ROŚLIN KAPUSTOWATYCH<br />

Maria Kamińska 1 , Hanna Berniak 1 i Piotr Kamiński 2<br />

Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

1 Pracownia Wirusologii, Zakład Ochrony Roślin Sadowniczych,<br />

Oddział Sadownictwa<br />

2 Zakład Genetyki, Hodowli i Biotechnologii, Oddział Warzywnictwa<br />

maria.kaminska@insad.pl<br />

Fitoplazmy, są przyczyną destrukcyjnych chorób ponad 1000 gatunków<br />

roślin, zarówno zielnych jak i drzewiastych, głownie w klimacie ciepłym i gorącym.<br />

Występowanie fitoplazm ograniczone jest do łyka chorych roślin i organizmu<br />

wektorów, skoczków lub miodówek. Z dostępnej literatury wynika, że<br />

w Europie Południowej, Ameryce Północnej i Iranie fitoplazmy mogą stanowić<br />

problem w uprawie roślin kapustowatych. Wykazano, że były one przyczyną<br />

żółknięcia lub czerwonego zabarwienia liści, nadmiernego wybijania (proliferacji)<br />

pędów bocznych oraz zaburzeń w kwitnieniu, głównie zielenienia kwiatów<br />

i tworzenia się fyllodii czyli liściaków roślin kapusty głowiastej (Brassica<br />

oleracea var. capitata L.), brokuła (Brassica oleracea var. italica Plenck), kalafiora<br />

(Brassica oleracea var. botrytis L.) i brukselki (Brassica oleraceae L.<br />

var. gemmifera DC), a także rzepaku (Brassica napus). W Polsce, z wyjątkiem<br />

rzepaku (Starzycki i Starzycka 2000), choroby roślin kapustowatych powodowane<br />

przez fitoplazmy nie były dotychczas rejestrowane.<br />

W latach 2009-2010, w drugim roku uprawy roślin kapustowatych na nasiona,<br />

w warunkach szklarniowych, obserwowano następujące typy objawów<br />

chorobowych:<br />

1. Brukselka (B. oleraceae L. var. gemmifera) - zahamowanie wzrostu, chlorozę<br />

i redukcję blaszek liściowych do nerwów oraz brak pąków kwiatowych,<br />

2. Mieszańce międzygatunkowe B. oleracea x B. napus – <strong>rośliny</strong> wykazywały<br />

intensywny wzrost i przez cały rok były w fazie wegetatywnej,<br />

3. Kapusta pekińska (Brassica rapa L. subsp. pekinensis) – zahamowanie wzrostu,<br />

chlorozę i powiększenie liści, proliferację pędów i kwiatów oraz fyllodia,<br />

O ile objawy chorobowe na roślinach kapusty pekińskiej sugerowały symptomy<br />

porażenia przez fitoplazmy opisywane na innych gatunkach roślin, to<br />

objawy na roślinach brukselki i mieszańców międzygatunkowych nie były dotychczas<br />

znane.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 169-171<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

169


170<br />

Celem badań było opisanie zaburzeń we wzroście i kwitnieniu roślin z rodzaju<br />

Brassica i określenie ich związku z porażeniem przez fitoplazmy.<br />

Kwasy nukleinowe izolowano przy pomocy DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen,<br />

USA) z liści roślin chorych i bez objawów. Próbki do badań pobierano w dwóch<br />

terminach – na początku kwietnia i 4-8 tygodni później. W łańcuchowej reakcji<br />

polimerazy (PCR) stosowano startery uniwersalne dla fitoplazm P1/P7 a następnie<br />

R16F2n/R16R2. W celu identyfikacji fitoplazm wykrytych w roślinach<br />

prowadzono analizę RFLP produktu amplifikacji ze starterami R16F2n/R16R2<br />

stosując enzymy restrykcyjne HhaI, MseI lub RsaI oraz analizę sekwencji genu<br />

16Sr fitoplazm.<br />

Obecność fitoplazmatycznego DNA stwierdzono w pierwszej i drugiej rundzie<br />

PCR we wszystkich roślinach kapusty pekińskiej z objawami chorobowymi<br />

oraz w roślinach mieszańców międzygatunkowych. W drugiej rundzie PCR<br />

fitoplazmę wykryto w roślinach brukselki z silnymi objawami chorobowymi<br />

oraz w roślinach brukselki i kapusty pekińskiej bez objawów chorobowych.<br />

Obecność patogena stwierdzono w roślinach, z których próbki do badań pobrano<br />

w pierwszych dniach kwietnia. W próbach zebranych w drugim terminie<br />

nie stwierdzono obecności fitoplazmatycznego DNA.<br />

Analiza RFLP produktu amplifikacji, uzyskanego z trzech gatunków roślin<br />

z rodzaju Brassica o odmiennych objawach chorobowych, wykazała obecność<br />

prążków charakterystycznych dla fitoplazm z grupy 16SrI, zaś analiza sekwencji<br />

potwierdziła wyniki PCR-RFLP. Porównanie uzyskanych 16S rDNAs<br />

badanych izolatów fitoplazm wykazało wysoki poziom podobieństwa ich sekwencji<br />

nukleotydów (99,8-100 %). Były one także prawie identyczne z sekwencjami<br />

izolatów fitoplazm z podgrupy 16SrI-B, i zostały zaklasyfikowane<br />

do gatunku kandydackiego ‚Candidatus Phytoplasma asteris’.<br />

Jest to pierwsze doniesienie na temat: 1. naturalnego występowania fitoplazmy<br />

w kapuście pekińskiej, oraz 2. związku między porażeniem roślin z rodzaju<br />

Brassicacea przez fitoplazmę a brakiem pąków kwiatowych.<br />

Summary<br />

ASSOCIATION OF PHYTOPLASMA INFECTION WITH FLOWER<br />

BUD DEFICIENCY OR MALFORMATION OF BRASSICA PLANTS<br />

In the Brassicacea family, retarded growth, shoot proliferation and flower<br />

virescence associated with phytoplasma infection, have been reported from<br />

South Europe, North America and Iran. Detection of phytoplasma classified in<br />

phylogenetic group 16SrI, ‘Ca. Phytoplasma asteris’, in the plants of Brussels<br />

sprout, Chinese cabbage and interspecific genotypes of B. oleracea x B. napus,<br />

showing three type of growth abnormalities is reported in Poland.


The presence of phytoplasma in Brassica spp. plants with disease symptoms<br />

as well as asymptomatic plants, was demonstrated by polymerase chain reaction<br />

assay employing phytoplasma universal rRNA P1/P7 folowed by R16F2n/<br />

R16R2 primer pairs. Products of PCR primed by R16F2n/R16R2 primer pair<br />

from naturally infected plants were sequenced. Comparison of the obtained<br />

16S rDNAs revealed high nucleotide sequence identity between analyzed<br />

phytoplasma isolates (99.8-100 %). They were also nearly identical with the<br />

sequences of other phytoplasma isolates from sub-group 16SrI-B, and they were<br />

classified as members of ‘Candidatus Phytoplasma asteris’.<br />

This is the first report of natural occurrence of phytoplasma-associated<br />

disease in Brassica rapa subsp. pekinensis plants, and in plants of Brussels<br />

sprout and interspecific genotypes with failure of flower bud formation.<br />

171


172<br />

ZRÓŻNICOWANIE FITOPLAZM PORAŻAJĄCYCH<br />

DRZEWA OWOCOWE W POLSCE<br />

Mirosława Cieślińska, Halina Morga i Dorota Kruczyńska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Zakład Ochrony Roślin Sadowniczych,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

miroslawa.cieslinska@insad.pl<br />

W ostatniej dekadzie w sadach drzew ziarnkowych i pestkowych w Polsce<br />

notowano nasilenie występowania chorób wywoływanych przez fitoplazmy<br />

(‘Candidatus Phytoplasma’ species). Czynniki wpływające na porażenia drzew<br />

przez te patogeny mogą być związane z niekontrolowanym sprowadzaniem<br />

materiału szkółkarskiego z zagranicy oraz z ociepleniem klimatu w naszym<br />

kraju. Fitoplazmy stanowią szczególnie poważny problem w krajach Europy<br />

Południowej, gdzie panuje ciepły klimaty, a niedobór wody w glebie jest częstym<br />

zjawiskiem. Takie warunki sprzyjają namnażaniu się i rozprzestrzenianiu<br />

tych patogenów. Fitoplazmy mogą być sprawcami ważnych gospodarczo<br />

chorób kwarantannowych drzew owocowych. Do takich patogenów należą:<br />

fitoplazma ‘Candidatus Phytoplasma mali’ (‘Ca. P. mali’) wywołujący proliferację<br />

(miotlastość) jabłoni (ang. Apple proliferation, AP), ‘Candidatus Phytoplasma<br />

pyri’ (‘Ca. P. pyri’) sprawca zamierania gruszy (ang. Pear decline,<br />

PD) i ‘Candidatus Phytoplasma prunorum’ (‘Ca. P. prunorum’) powodujący<br />

europejską żółtaczkę drzew pestkowych (ang. European stone fruit yellows,<br />

ESFY). Fitoplazmy te zaklasyfikowane są do jednej grupy filogenetycznej i są<br />

ze sobą blisko spokrewnione. Na podstawie analizy porównawczej wykazano,<br />

98.6- 99% podobieństwo sekwencji nukleotydów genu 16S rRNA ‘Ca. P. mali’,<br />

‘Ca. P. pyri’ i ‘Ca. P. prunorum’, a różnice pomiędzy sekwencją AP/PD, AP/<br />

ESFY i PD/ESFY wynoszą odpowiednio 1.0-1.1, 1.3-1.5 i 1.2-1.3%.<br />

Celem badań było wykrywanie i identyfikacja fitoplazm występujących<br />

w drzewach owocowych oraz określenie zróżnicowania ich właściwości molekularnych.<br />

Testom na obecność fitoplazm poddano 672 drzew różnych odmian jabłoni,<br />

gruszy, czereśni, wiśni, brzoskwini, moreli, śliwy i nektaryny rosnących w sadach<br />

produkcyjnych i doświadczalnych oraz uprawianych amatorsko w kilku<br />

regionach Polski. Na niektórych drzewach jabłoni obserwowano miotlastość<br />

pędów i zagęszczenie korony, które są objawami charakterystycznymi dla pro-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 172-174<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


liferacji jabłoni. Z kolei, pojedyncze drzewa gruszy, z których pobierano próby<br />

pędów do badań, wykazywały osłabienie wzrostu, przedwczesne czerwienienie<br />

liści i objawy zamierania gałęzi. Na niektórych drzewach pestkowych obserwowano<br />

żółknięcie i zwijanie się liści, a dodatkowo na śliwach japońskich wtórne<br />

kwitnienie, rozetkowatość liści, nekrozę drewna, deformację owoców i zamieranie<br />

gałęzi. Z łyka pędów wszystkich badanych drzew wyizolowano DNA przy<br />

pomocy zestawu DNeasy (Qiagen). Fragmenty DNA fitoplazm amplifikowano<br />

w reakcji PCR, która przebiegała dwuetapowo. W pierwszej rundzie stosowano<br />

parę uniwersalnych starterów P1/P7. Uzyskany produkt PCR stanowił matrycę<br />

w drugiej rundzie PCR zwanej zagnieżdżoną (ang. nested PCR) z zastosowaniem<br />

pary uniwersalnych starterów R16F2n/R16R2. Przeprowadzono również<br />

PCR z użyciem jednej z par starterów specyficznych dla grup: żółtaczki astra<br />

(16SrI), żółtaczki wiązu (16SrV) i proliferacji jabłoni (16SrX). Produkty PCR<br />

rozdzielano elektroforetycznie w 1,5% żelu agarozowym, następnie barwiono<br />

bromkiem etydyny, obserwowano w świetle UV i fotografowano. W reakcji PCR<br />

ze starterami uniwersalnymi R16F2n/R16R2 uzyskano produkty o oczekiwanej<br />

wielkości dla prób pobranych z 57 drzew wszystkich badanych gatunków<br />

(tabela 1). Obecność fitoplazm wykrywano również w drzewach nie wykazujących<br />

objawów chorobowych.<br />

Tabela 1. Fitoplazmy wykryte i zidentyfikowane metodą PCR/RFLP w badanych drzewach owocowych<br />

Gatunek<br />

drzewa<br />

Liczba drzew<br />

porażonych/<br />

liczba badanych<br />

fitoplazmy zidentyfikowane w porażonych drzewach<br />

‘Ca. P.<br />

‘Ca. P. mali’ ‘Ca. P. pyri’<br />

‘Ca. P. asteris’<br />

prunorum’<br />

jabłoń 23/153 21 0 0 2<br />

grusza 6/84 0 6 0 0<br />

czereśnia 6/145 0 1 5 0<br />

wiśnia 3/102 0 0 3 0<br />

brzoskwinia 11/121 0 0 10 0<br />

morela 4/38 0 0 4 0<br />

śliwa 3/24 0 0 3 0<br />

nektaryna 2/5 1 0 1 0<br />

Stosując w PCR startery specyficzne dla fitoplazm z grupy proliferacji jabłoni<br />

(16SrX) otrzymano produkty o oczekiwanej wielkości dla wszystkich<br />

prób pobranych z 21 drzew jabłoni, 6 drzew gruszy i 29 drzew pestkowych, dla<br />

których uzyskano pozytywny wynik w reakcji ze starterami uniwersalnymi.<br />

Nie otrzymano takich produktów w wyniku PCR na matrycy DNA wyizolowanego<br />

z jabłoni odmian Pinova i Evelina. Z kolei, produkty o oczekiwanej wielkości<br />

otrzymano dla tych prób w reakcji ze starterami specyficznymi dla grupy<br />

fitoplazmy żółtaczki astra, podczas gdy dla prób pochodzących z pozostałych<br />

badanych drzew jabłoni uzyskano wyniki negatywne.<br />

173


174<br />

Po trawieniu enzymami AluI, Mse,I, RsaI i SspI produktów PCR amplifikowanych<br />

ze starterami uniwersalnymi R16F2n/R16R2 przeprowadzono analizę<br />

restrykcyjną (RFLP), a uzyskane wzory porównano z profilami analogicznych<br />

fragmentów DNA wzorcowych fitoplazm. Przy pomocy enzymów AluI i MseI<br />

możliwe było odróżnienie fitoplazm należących do grupy fitoplazmy proliferacji<br />

jabłoni (16SrX) od innych fitoplazm zaklasyfikowanych do pozostałych 13<br />

grup. Dwa pozostałe enzymy - RsaI i SspI – umożliwiły odróżnienie fitoplazm<br />

w obrębie grupy 16SrX. Analiza restrykcyjna fragmentów genu 16S rDNA potwierdziła<br />

obecność w 21 drzewach jabłoni fitoplazmy ‘Ca. P. mali’ (tabela 1).<br />

Profile uzyskane dla fitoplazmy z dwóch innych drzew jabłoni (odmian Pinova<br />

i Evelina) były takie same, jak dla fitoplazmy żółtaczki astra ‘Ca. P. asteris’,<br />

stanowiącej w doświadczeniach kontrolę pozytywną. W badanych gruszach<br />

kilku odmian zidentyfikowano ‘Ca. P. pyri’ wywołującą chorobę zamierania<br />

gruszy. Wzór restrykcyjny charakterystyczny dla ‘Ca. P. prunorum’ otrzymano<br />

po trawieniu enzymem RsaI fragmentu 16S rDNA fitoplazm wyizolowanych<br />

z większości spośród testowanych drzew pestkowych. Odmienny wzór<br />

restrykcyjny, charakterystyczny dla fitoplazmy ‘Ca. P. mali’, uzyskano dla<br />

fragmentu 16S rDNA fitoplazmy wyizolowanej z nektaryny ‘Superquine’.<br />

Profil po hydrolizie analogicznego fragmentu fitoplazmy porażającej czereśnię<br />

‘Kordia’ był zaś typowy dla ‘Ca. P. pyri’.<br />

Summary<br />

DIFFERENTIATION OF PHYTOPLASMAS INFECTING<br />

FRUT TREES IN POLAND<br />

A survey was carried out in pome and stone fruit commercial and<br />

experimental orchards located in different regions of Poland to determine the<br />

incidence of phytoplasmas. Nested PCR conducted with the universal primer<br />

pairs showed the presence of phytoplasmas in: 23 out of 153 apple trees, 6 out<br />

of 84 pear trees, 6 out of sweet cherry trees, 3 out of 102 sour cherry trees,<br />

11 out of 121 peach trees, 4 out of apricot trees, 3 out of 24 plum trees and 2<br />

out of 5 apricot trees. The restriction fragment length polymorphism (RFLP)<br />

analysis after digestion of PCR products separately with RsaI, AluI, MseI and<br />

SspI enzymes showed that most of positively-tested apple trees were infected<br />

by ‘Candidatus Phytoplasma mali’ (‘Ca. P. mali’) causing apple proliferation.<br />

‘Ca. P. asteris’ (aster yellows phytoplasma) was identified in two other apple<br />

trees (‘Pinova’ and ‘Evelina’). Restriction patterns for digested fragments of<br />

phytoplasmas from pear trees were characteristic for ‘Ca. P. pyri’ (pear decline<br />

phytoplasma). Profiles for 16S rDNA fragments of phytoplasmas infecting<br />

most of the positively-tested stone fruit trees were similar to those for ‘Ca.<br />

P. prunorum’ – the causal agent of the European stone fruit yellows disease.<br />

RFLP analysis indicated that nectarine ‘Superquine’ was infected by ‘Ca. P.<br />

mali’ and sweet cherry ‘Kordia’ by ‘Ca. P. pyri’.


ZMIANY W POPULACJACH MIKROORGANIZMÓW<br />

I NICIENI W GLEBIE PO ODKAŻANIU METODAMI<br />

KONWENCJONALNYMI I PROEKOLOGICZNYMI<br />

Piotr Sobiczewski 1 , Beata Meszka 1 , Hanna Bryk 1 ,<br />

Czesław Ślusarski 1 , Aneta Chałańska 1 , Stanisław Berczyński 1<br />

i Eligio Malusa 2<br />

1 Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

2 JWC Projects, ul. Zwycięzców 28, 03-938 Warszawa<br />

Piotr.Sobiczewski@insad.pl<br />

Badania przeprowadzono w 3 gospodarstwach położonych w rejonie Radomia<br />

(A, B i C) oraz w jednym gospodarstwie koło Skierniewic (D). W gospodarstwie<br />

A wcześniej uprawiano paprykę w tunelach, w B – pomidor w tunelach, w<br />

C – ogórek w gruncie, a w gospodarstwie D uprawiana była truskawka. Z każdego<br />

gospodarstwa pobierano próby gleby do analiz chemicznych, mikrobiologicznych<br />

i nematologicznych. Przed wykonaniem zabiegów odczyn gleby (pH)<br />

w próbach pochodzących z poszczególnych gospodarstw wynosił od 5,1 do 6,8.<br />

Najmniej składników pokarmowych było w glebie gospodarstwa D. Zawartość<br />

fosforu, potasu i magnezu wyrażona w mg na 100 g gleby wynosiła odpowiednio:<br />

fosforu od 6,4 (D) do 101,8 (A), potasu od 6,8 (D) do 70,8 (B), magnezu od<br />

6,7 (D) do 23,8 (A). Ponadto oznaczono zawartość mikroelementów, próchnicy<br />

zasolenie gleby.<br />

Jesienią 2010 r. (październik/listopad) w poszczególnych gospodarstwach<br />

wykonano odkażanie gleby wg następującego schematu:<br />

Gospodarstwo/ wykonane zabiegi (dawki/ m 2 )<br />

A B C D<br />

1/ dazomet 30 g 1/ dazomet 30 g<br />

2/ dazomet 40 g<br />

1/ dazomet 40 g<br />

2/ metam sodowy 90 ml<br />

3/ metam sodowy 60 ml<br />

4/ chloropikryna + 1.3 D 35 ml<br />

5/ chloropikryna + 1.3 D 50 ml<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 175-179<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

1) dazomet 30 g<br />

2) dazomet 40 g<br />

2) metam sodowy 90 ml<br />

3) metam sodowy 60 ml<br />

4) chloropikryna + 1.3 D<br />

35 ml<br />

5) chloropikryna + 1.3 D<br />

50 ml<br />

6) chloropikryna 40 g<br />

175


176<br />

Cztery tygodnie po fumigacji pobrano próby gleby w celu określenia liczebności<br />

bakterii, grzybów i nicieni. Stwierdzono, że we wszystkich kombinacjach<br />

wystąpiło istotne zmniejszenie liczebności grzybów po fumigacji. W zależności<br />

od gospodarstwa i zastosowanego preparatu populacja grzybów zmniejszyła<br />

się od 1,4- do około 3500-krotnie w porównaniu z kombinacją kontrolną. Wykazano<br />

bardzo wysoką skuteczność metamu sodowego i chloropikryny. Środki<br />

te prawie całkowicie wyeliminowały grzyby ze środowiska glebowego. W gospodarstwie<br />

B zastosowanie środka dazomet w wyższej dawce było bardziej<br />

efektywne niż w niższej. Natomiast ogólna liczba bakterii zwiększyła się po<br />

zastosowaniu fumigacji wszystkimi środkami w gospodarstwach A, B i D. Jedynie<br />

w gospodarstwie C wystąpiło zmniejszenie o 30% liczby bakterii po fumigacji<br />

środkiem dazomet. Na podkreślenie zasługują zmiany w populacjach<br />

fluoryzujących Pseudomonas spp. Na wszystkich odkażanych poletkach liczba<br />

tych bakterii wzrosła od 2- do 100-krotnie w porównaniu z glebą nie poddaną<br />

fumigacji. Wskazuje to, na ogromne zwiększenie potencjału biologicznego<br />

gleby, w tym jej oporności, bowiem czynniki biologicznej ochrony przed chorobami<br />

są najczęściej selekcjonowane spośród bakterii rodzaju Pseudomonas.<br />

Natomiast liczba bakterii rodzaju Bacillus odgrywających również dużą rolę<br />

w oporności gleby, na poletkach traktowanych środkiem dazomet w gospodarstwach<br />

A i B pozostała bez zmian, a w gospodarstwie D zmniejszyła się dwukrotnie<br />

po zastosowaniu tego środka w dawce 40 g/m 2 . Chloropikryna i metam<br />

sodowy zredukowały liczebność Bacillus spp. w stosunku do kontroli nawet<br />

o około 80%. Wyjątek stanowiło gospodarstwo D, gdzie chloropikryna praktycznie<br />

nie obniżyła liczebności populacji tej grupy bakterii.<br />

Analiza nematologiczna gleby wykazała, że żaden z zastosowanych fumigantów<br />

nie wpływał istotnie na ograniczenie populacji nicieni pasożytniczych<br />

dla roślin, których liczebność była poniżej progu szkodliwości. Jednak w większości<br />

przypadków dazomet i metam sodowy istotnie redukowały ogólną liczbę<br />

wszystkich nicieni występujących w glebie, chociaż w gospodarstwie D redukcja<br />

ta była nieistotna. Natomiast traktowanie mieszaniną chloropikryny i 1,3<br />

D w niższej dawce spowodowało zwiększenie liczebności nicieni.<br />

W kwietniu 2011 r. w gospodarstwie A wykonano odkażanie gleby aktywną<br />

parą wodną (CaO w temp. 70 o C) oraz biofumigację mączką z roślin Brassica<br />

carinata. Po 4 tygodniach pobrano próby gleby do analiz mikrobiologicznej<br />

i nematologicznej. Ogólna liczba bakterii istotnie nie zmieniła się po parowaniu,<br />

ale zmieniła struktura ich populacji. Podczas gdy liczba bakterii rodzaju<br />

Pseudomonas zmniejszyła się prawie pięciokrotnie, to liczba przetrwalnikujących<br />

Bacillus spp. wzrosła o połowę. Parowanie gleby spowodowało około<br />

pięciokrotne zmniejszenie liczby grzybów w glebie i całkowicie wyeliminowało<br />

szkodliwe dla papryki grzyby rodzajów Fusarium oraz Rhizoctonia. Zastosowanie<br />

biofumigacji spowodowało wzrost liczebności grzybów rodzaju Penicil-


lium, natomiast wyeliminowało inne grzyby, za wyjątkiem z rzędu Mucorales.<br />

Jednocześnie zabieg ten zmniejszył trzykrotnie liczebność populacji bakterii,<br />

przy czym liczba Pseudomonas spp. i Bacillus spp. nie uległa zmianie.<br />

Zabieg odkażania aktywną parą spowodował prawie 5-krotny spadek liczebności<br />

nematofauny glebowej, ale tylko 3,5-krotny spadek liczby nicieni<br />

pasożytniczych. W tych warunkach bardzo korzystna okazała się biofumigacja<br />

dzięki której 2-krotnie spadła liczebność nicieni, przy czym pasożytów roślin<br />

wykryto aż 4-krotnie mniej.<br />

Summary<br />

CHANGES IN THE POPULATION OF MICRORGANISMS<br />

AND NEMATODES IN SOIL AFTER FUMIGATION WITH<br />

CONVENTIONAL AND ALTERNATIVE METHODS<br />

The study was carried out on 3 farms located in the Radom area (A, B and<br />

C) and on one farm near Skierniewice (D). Before the treatments on farm A<br />

and B pepper was grown under tunnel, , on farm C - onion and on farm D –<br />

strawberries were grown in open field. From each farm the soil samples were<br />

collected for chemical, microbiological and nematological analyses. In samples<br />

collected in different farms the pH ranged from 5.1 to 6.8. The lowest<br />

amount of nutrients was found in soil of farm D. The content of phosphorus,<br />

potassium and magnesium (expressed in mg per 100g of soil) ranged widely:<br />

phosphorus from 6.4 (D) to 101.8 (A), potassium from 6.8 (D) to 70.8 (B), magnesium<br />

from 6.7 (D) to 23.8 (A). In addition, the content of microelements,<br />

organic matter and salinity was determined.<br />

Chemical fumigation with different doses of several active substances<br />

was applied during fall 2010 (October/November) at all locations as following<br />

specified:<br />

Treatments carried out (doses per m 2 )<br />

A B C D<br />

1/ dazomet 30 g 1/ dazomet 30 g<br />

2/ dazomet 40 g<br />

1/ dazomet 40 g<br />

2/ metam sodium 90 ml<br />

3/ metam sodium 60 ml<br />

4/ chloropicrin + 1.3 D 35 ml<br />

5/ chloropicrin + 1.3 D 50 ml<br />

1) dazomet 30 g<br />

2) dazomet 40 g<br />

2) metam sodium 90 ml<br />

3) metam sodium 60 ml<br />

4) chloropicrin + 1.3 D 35 ml<br />

5) chloropicrin + 1.3 D 50 ml<br />

6) chloropicrin 40 g<br />

177


178<br />

The soil was sampled 4 weeks after the treatments to assess the amount of<br />

bacteria, fungi and nematodes populations. All chemical treatments provoked<br />

a significant decrease of the number of fungi. Depending on the farm and the<br />

active substance applied, the fungi population was decreased by 1.4- to 3500fold<br />

in comparison to control. Metam sodium and chloropicrin resulted very<br />

effective: both substances almost totally eliminated the fungi from the soil<br />

environment. On the farm B, the higher dose of dazomet was more effective<br />

than the lower dose.<br />

The total number of bacteria was increased by the chemical fumigation<br />

with all active substances on the farms A, B, and D. This was noted also in<br />

farm C with the exception of dazomet, which caused a reduction of about 30%<br />

of the total number of bacteria. Interestingly, dramatic changes appeared in<br />

the population of fluorescent Pseudomonads. The number of these bacteria<br />

in all fumigated plots increased from 2- to 100-fold in comparison to not<br />

fumigated soil. This indicates a significant increase of the biological potential<br />

of the soil, and of its suppressiveness, since bacteria of the genus Pseudomonas<br />

are frequently selected for the biological control of pathogens. On the other<br />

hand, the number of bacteria of the genus Bacillus, also playing a significant<br />

role in the soil resistance, in the plots treated with dazomet at farms A and B<br />

was not changed, while at the farm D it was reduced twice after application<br />

of a dose of 40 g/m 2 . Chloropicrin and metam sodium reduced the number of<br />

Bacillus spp. by about 80% in comparison to control. Exception to this was<br />

the soil of farm D, where chloropicrin practically did not affect the population<br />

of this group of bacteria.<br />

The nematology analysis of the soil indicated that any chemical fumigant<br />

significantly limited the population of plant parasitic nematodes, which number<br />

was, anyway, below the damage threshold. However, in most cases dazomet<br />

and metam sodium reduced the total number of all nematodes present in the<br />

soil, but on the farm D the reduction was not statistically significant. The<br />

fumigation with chloropicrin and 1,3 D at lower dose resulted in an increase<br />

of the total number of nematodes.<br />

In April 2011 at location A, alternative methods of fumigation were applied<br />

with active steam (steam and CaO) at temperature of 70ºC and meal of<br />

Brassica carinata plants. After 4 weeks samples for analyses were collected.<br />

The total number of bacteria was not modified after steam treatment however<br />

the structure of their population changed. While the number of Pseudomonads<br />

decreased of about 5-fold the number of Bacillus spp. increased by about<br />

50%. Steam treatment caused about a 5-fold decrease of fungi and totally<br />

eliminated fungi harmful for pepper such as Fusarium and Rhizoctonia.<br />

Application of biofumigation resulted in an increase of Penicillium population


ut eliminated other fungi except Mucorales. At the same time, this treatment<br />

decreased 3-fold the bacteria populations, but the number of Pseudomonads<br />

and Bacillus spp. was not affected.<br />

Soil steaming with active steam caused almost a 5-fold decrease of total<br />

nematofauna population, but only a 3.5-fold reduction of parasitic nematodes<br />

number. Very effective appeared to be biofumigation, provoking a 2-fold<br />

decrease of total soil nematodes, but decreasing 4-fold the population of plant<br />

parasitic species as compared to untreated soil.<br />

The Project is funded by the Life+ Program<br />

179


180<br />

POTENCJAŁ ANTAGONISTYCZNY BAKTERII<br />

IZOLOWANYCH Z RIZOSFERY I SYNTETYCZNEGO<br />

PEPTYDU CAMEL WZGLĘDEM<br />

PSEUDOMONAS SYRINGAE<br />

Małgorzata Golanowska i Sylwia Jafra<br />

Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii UG – GUMed,<br />

Katedra Biotechnologii, Zakład Ochrony i Biotechnologii Roślin,<br />

ul. Kładki 24, 80-822 Gdańsk<br />

m.golanowska@biotech.ug.gda.pl<br />

Rak bakteryjny wywoływany przez bakterie z gatunku Pseudomonas syringae,<br />

powoduje obumieranie roślin i straty plonów na całym świecie. Bakterie<br />

z gatunku P. syringae pv. syringae oraz pv. morsprunorum są odpowiedzialne<br />

za powstawanie narośli na gałęziach i pniach drzew owocowych (w postaci<br />

objawów wtórnych zakażenia). Objawy pierwotne to chlorozy i nekrozy liści<br />

czy też zawiązków owoców [2,7]. Choroba prowadzi do spadku plonowania<br />

takich drzew owocowych, jak czereśnia, wiśnia, śliwa, brzoskwinia morela<br />

i inne. Patogen rozprzestrzenia się wraz z wiatrem i deszczem, a także za<br />

pomocą narzędzi używanych do cięcia roślin. W inicjacji procesu chorobowego<br />

uczestniczą różne czynniki warunkujące patogeniczność tych bakterii, np.<br />

toksyna-siringomycyna [3], białko nukleacji lodu (ang. ice nucleation protein)<br />

[5] czy też białka efektorowe systemu sekrecyjnego typu III (ang. Type Three<br />

Secretion System )[1].<br />

Dotychczas w ochronie drzew pestkowych stosuje się opryski związkami miedzi,<br />

takimi jak: Champion 50 SP, Cuproflow 375 SC, Funguran – OH 50 WP,<br />

które działają głównie grzybobójczo. Preparaty miedziowe stosowane w sposób<br />

ciągły i w dużych stężeniach wykazują jednak toksyczność. Alternatywę dla<br />

ochrony chemicznej może stanowić biologiczna ochrona roślin [6].<br />

W ramach prowadzonych prac przebadano 5 szczepów patogennych P. syrinage<br />

(w tym 2 szczepy P.s. pv. syringae oraz 3 szczepy P.s. pv. morsprunorum)<br />

oraz wyselekcjonowano, spośród ponad 100 izolatów, 12 izolatów potencjalnie<br />

antagonistycznych względem wyżej wymienionych patogenów. Izolaty wybrano<br />

na podstawie zdolności do hamowania wzrostu patogena w warunkach<br />

in vitro. Wyselekcjonowane szczepy scharakteryzowano pod kątem zdolności<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 180-182<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


do ruchu, produkcji substancji powierzchniowo-czynnych (biosurfaktantów)<br />

i związków chelatujących żelazo (sideroforów). Izolaty antagonistyczne zaklasyfikowano<br />

do gatunków Pseudomonas fluorescens (4 izolaty), Pseudomonas<br />

putida (6 izolaty), Delftia sp. (1 szczep) oraz Pantoea sp. (1 szczep). Wykazano,<br />

iż izolat P. fluorescens 660 ma zdolność do hamowania wzrostu P.s. pv. morsprunorum,<br />

jednak nie hamuje wzostu P. s. pv. syringae. Natomiast pozostałe<br />

izolaty P. fluorescens oraz P. putida hamują wzrost patogenów na równym<br />

poziomie. Wszystkie izolaty antagonistyczne są zdolne do ruchu na podłożu<br />

stałym, produkują siderofory oraz biosurfaktanty na poziomie wyższym w porównaniu<br />

do badanych szczepów P. syringae. Ponadto izolaty P. fluorescent wykazują<br />

lepsze zdolności do ruchu pływającego a także wyższy poziom produkcji<br />

sideroforów niż izolaty P. putida. Zbadano także właściwości bakteriobójcze<br />

syntetycznego peptydu CAMEL[4] względem patogennych szczepów P. syringae.<br />

Określono wartość MBC (Minimal Bactericidal Concentration) i stwierdzono,<br />

iż wynosi ona 1,6µM (3 µg/ml) wobec wszystkich szczepów patogennych.<br />

Na podstawie uzyskanych wyników można sądzić, iż wyselekcjonowane<br />

izolaty P. fluorescens i P. putida mogą efektywnie konkurować ze szczepami<br />

patogennymi w zasiedlaniu niszy ekologicznej. Wykazano efektywność peptydu<br />

CAMEL w stosunku do wszystkich szczepów patogennych. W przyszłości<br />

planowane jest zbadanie czy istnieje efekt synergistyczny między szczepami<br />

antagonistycznymi i peptydem CAMEL i czy możliwe jest jednoczesne zastosowanie<br />

tych dwóch czynników w ochronie drzew pestkowych przez patogenami<br />

bakteryjnymi.<br />

Summary<br />

ANTAGONISTIC POTENTIAL OF SELECTED ISOLATES<br />

AND SYNTHETIC PEPTIDE CAMEL TOWARDS PLANT PATHOGEN<br />

PSEUDOMONAS SYRINGAE.<br />

Pseudomonas syringae is known as a plant pathogenic bacterium that<br />

may infect various plants. Genus P. syringae is divided into many pathovars<br />

that differ by host plant. Pathovars syringae (2 strains) and morsprunorum<br />

(3 strains) are serious pathogens of stone fruit. Nowadays, in stonefruit plant<br />

protection, copper compounds are used which are detrimental not only for plants<br />

during fructification but also for humans. Finding a biocontrol agent seems to<br />

be promising tool in future plant protection.<br />

Twelve, out of 100, bacterial isolates were selected on the basis of antibiosis<br />

towards five pathogenic strains of P. syringae pv. syringae and pv. morsprunorum.<br />

These antagonistic isolates were then identified and subjected to evaluation of<br />

siderophore and biosurfactants production, swimming and swarming motility.<br />

In a separate experiment Minimal Bactericidal Concentration (MBC) of<br />

181


182<br />

synthetic peptide CAMEL was determined towards pathogenic strains.<br />

Twelve antagonistic isolates were classified to Pseudomonas fluorescens<br />

(4 strains), Pseudomonas putida.(6 strains), Delftia sp. (1 strain) and Pantoea<br />

sp. (1 strain). The isolate of P. fluorescens 660 specifically inhibits growth<br />

of P. syringae pv. morsprunorum strains but not those of pv. syringae. The<br />

remaining of P. fluorescens and P. putida isolates inhibit growth of all tested<br />

pathogenic strains at the similar level. The analysis of such features as motility<br />

and siderophore production indicated that P. putida strains exhibit the better<br />

swimming ability and the higher level of siderophore production comparing to<br />

P. fluorescens isolates. MBC value of CAMEL for all tested pathogenic strains<br />

was evaluated at 1,6 µM (3µg/ml). Tested pathogenic strains exhibit very low<br />

motile ability and do not produce siderophores. However, these pathogens<br />

produce similar amount of biosurfactants to selected isolates.<br />

P. putida and P. fluorescens isolates due to their high motility, siderophore<br />

production and ability to inhibit pathogens growth in vitro can be competitive in<br />

inhabitating the same biological niche as pathogenic P. syringae. Further study<br />

are necessary to indicate if Camel and the antagonistic isolates have synergistic<br />

effect and can be used in protection of stonefruits against P. syringae.<br />

Literatura<br />

Fu Z. Q., Guo M., Alfano J.R., 2006: Pseudomonas syringae HrpJ is a type III<br />

secreted protein that is required for plant pathogenesis, injection of effectors,<br />

and secretion of the HrpZ1 Harpin. J. Bacteriol. 188 (17): 6060-69.<br />

Hirano S.S., Upper C.D., 2000: Bacteria in leaf ecosystem with emphasis on<br />

Pseudomonas syringae pv. syringae pathogen, ice nucleus, and epiphyte.<br />

Microbiol. Mol. Biol. Rev. 64 (3): 624-53.<br />

Hutchinson M.L., Gross D.C., 1997: Lipopeptide phytotoxins produced by<br />

Pseudomonas syringae pv. syringae: comparison of the biosurfactant and<br />

ion channel-forming activities of syringopeptin and syringomycin. Mol.<br />

Plant Microbe Interact. 10 (3): 347-54.<br />

Kamysz W., Krolicka A,. Bogucka K., Ossowski T., Lukasiak J., Lojkowska E.,<br />

2005: Antibacterial activity of synthetic peptides against plant pathogenic<br />

Pectobacterium species. Journal of <strong>Phytopathology</strong> 153: 313-317.<br />

Maki LR., Galyan EL., Chang-Chien MM, Caldell DR., 1974: Ice nucleation<br />

induced by Pseudomonas syrinage. Appl. Microbiol. 28: 456-459.<br />

Pal KK., McSpadden-Gardener B., 2006: Biological control of plant pathogens.”<br />

The Plant Health Insructor DOI: 10.1094/PHI-A-2006- 1117-02.<br />

Saunier M., Malandrin L., Samson R., 1996: Distribution of Pseudomonas syringae<br />

pathovars into twenty-three O serogroups. Appl. Environ. Microbiol.<br />

6: 2360-2374.


ZRÓŻNICOWANIE WIRULENCJI ERWINIA AMYLOVORA<br />

– JAKA JEST ROLA PLAZMIDÓW?<br />

Joanna Puławska, Artur Mikiciński i Piotr Sobiczewski<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

jpulaw@insad.pl<br />

Bakteria E. amylovora jest patogenem ponad 130 gatunków roślin, zaliczanych<br />

do 40 rodzajów, głównie z rodziny Rosaceae. W Polsce, poza gruszą, jabłonią<br />

i pigwą, chorobę wykryto dotychczas na głogu, jarząbie, irdze, świdośliwie<br />

oraz ogniku. Generalnie uważa się, że E. amylovora jest gatunkiem jednorodnym<br />

i nie wykazuje specjalizacji patogenicznej co oznacza, że potencjalnie<br />

każdy z izolatów tego patogena jest w stanie zakazić każdą z dotychczas poznanych<br />

roślin-gospodarzy. Wyraźne różnice zaobserwowano jedynie między<br />

izolatami pochodzącymi z malin i jeżyn, a izolatami wyosobnionymi z jabłoni<br />

i grusz oraz innych roślin-gospodarzy.<br />

Intensywne badania nad genomem E. amylovora wykazały pewne różnice<br />

w obecności plazmidów w komórkach niektórych izolatów tego gatunku.<br />

Stwierdzono obecność różnej wielkości charakterystycznego dla E. amylovora<br />

plazmidu pEA29, która wahała się od ok. 27,6 do ok. 34,9 kpz. Brak genów<br />

odpowiedzialnych za transfer i mobilizację w obrębie sekwencji tego plazmidu<br />

w powiązaniu z jego wysoką stabilnością wywołało przekonanie, że powinien<br />

on występować u wszystkich dzikich szczepów E. amylovora. Jednak z czasem<br />

zaczęło pojawiać się przypuszczenie, że bakterie mogą łatwo utracić plazmid<br />

pEA29 nie tracąc przy tym patogeniczności. Kilka lat temu w Hiszpanii, Llop<br />

i in. (2006) wyizolowali z głogu izolat E. amylovora pozbawiony tego plazmidu.<br />

Stwierdzili przy tym, występowanie innego plazmidu o wielkości około 70<br />

kpz (pEI70) nie wykazującego homologii z pEA29. Również Foster i in. (2004)<br />

określili sekwencję nukleotydową oraz dystrybucję plazmidów pEU30 o wielkości<br />

30,314 kpz i pEL60 o wielkości 60,145 kpz. Pierwszy z wymienionych<br />

plazmidów stwierdzono u izolatów pochodzących z zachodniej części USA, natomiast<br />

drugi u izolatów z Libanu.<br />

W naszych badaniach analizowaliśmy skład DNA plazmidowego 120 izolatów<br />

E. amylovora pochodzących z różnych regionów Polski. Bakterie wyizolowano<br />

z jabłoni, gruszy, jarząbu, głogu i pigwy. Wszystkie izolaty posiadały<br />

plazmid pEA29. W celu określenia zróżnicowania sekwencji tego plazmidu<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 183-186<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

183


184<br />

przeprowadzono analizę restrykcyjną z zastosowaniem endonukleazy Hindlll.<br />

Profile restrykcyjne plazmidów pEA29 były identyczne dla wszystkich izolatów.<br />

Poza pEA29, u 11 izolatów stwierdzono dodatkowe plazmidy o wielkości<br />

60-70 kbp. Ich analiza z użyciem restryktazy BamHI i PCR ze starterami<br />

pEI70r i pEI70f potwierdziła tożsamość plazmidów z 10 izolatów z plazmidem<br />

pEI70 opisanym przez Llop i wsp. (2006). Żaden z izolatów nie posiadał<br />

plazmidów pEU30 i pEL60. Ponadto, u izolatu 692 stwierdzono plazmid<br />

o mniejszych rozmiarach niż pEI70. Jego profil restrykcyjny BamHI różnił<br />

się od pEI70. Cztery fragmenty tego plazmidu uzyskane po trawieniu Pstl<br />

i EcoRI poddano sekwencjonowaniu. Analiza sekwencji algorytmem BLASTn<br />

wykazała, że nie mają one podobieństwa do żadnej sekwencji zdeponowanej<br />

w GenBank. Plazmid ten nazwano pEJ60.<br />

Izolat 692 posiadający plazmid pEJ60 jak i 5 innych wyizolowanych w naszym<br />

kraju z różnych roślin gospodarzy (659, 691 -jabłoń, E6 -grusza, 650, E2<br />

- głóg) poddano testom wirulencji na czterech odmianach jabłoni. Dla porównania,<br />

do doświadczenia włączono 2 szczepy pochodzące z jabłoni z USA (B62,<br />

A90). Wszystkie te izolaty i szczepy były prawie identyczne w analizie z wykorzystaniem<br />

techniki RAPD i sekwencjonowania genów odpowiedzialnych za<br />

patogeniczność - hrpN, amsB i dspA/E. Badania wirulencji przeprowadzono<br />

na jednorocznych drzewkach jabłoni odmian Szampion, Elstar, Free Redstar<br />

i Quinte szczepionych na podkładce M.9. Młode, aktywnie rosnące pędy inokulowano<br />

przez ucięcie wierzchołka nożyczkami uprzednio zanurzonymi w wodnej<br />

zawiesinie bakterii o koncentracji 10 7 jtk w mililitrze. Każdym szczepem<br />

zainokulowano od 12 do 20 drzewek zależnie od odmiany. Obserwacje rozwoju<br />

zarazy ogniowej na pędach oraz pomiary długości porażonej części pędów wykonano<br />

po 2, 4 i 6 tygodniach od inokulacji. Wirulencję szczepów oceniano przez<br />

porównanie długości znekrotyzowanej części pędu do całkowitej długości pędu,<br />

co wyrażono w procentach. Najwyższą wirulencję na pędach każdej z odmian<br />

wykazały amerykańskie szczepy A90 i B62 (63-100%). Podobną wirulencję wykazały<br />

polskie izolaty na odmianach Elstar i Szampion. Natomiast na odmianach<br />

Quinte i Free Redstar izolaty pochodzące z Polski okazały się mało wirulentne<br />

(0-40%). Spośród polskich izolatów największą wirulencję na odmianach<br />

Free Redstar i Quinte wykazywał izolat 692 posiadający plazmid pEJ60.<br />

Przeprowadzone badania potwierdziły teorię o zróżnicowanej wirulencji<br />

wśród szczepów Erwinia amylovora, która zaznaczyła się szczególnie na odm.<br />

Quinte i Free Redstar. Interesującym jest fakt, że jednym z najbardziej wirulentnych<br />

izolatów pochodzących z naszego kraju jest izolat 692 posiadający<br />

nowy, nierozpoznany dotychczas plazmid. Dalsze badania powinny wyjaśnić<br />

jego rolę w wirulencji. Uzyskane wyniki wskazują jednocześnie na przydatność<br />

odm. Quinte i Free Redstar do selekcji izolatów/szczepów E. amylovora<br />

przeznaczonych do testów skryningowych oceny materiału hodowlanego, pod<br />

kątem odporności/podatności na zarazę ogniową.


Summary<br />

DIVERSITY OF ERWINIA AMYLOVORA VIRULENCE–<br />

WHAT IS THE ROLE OF PLASMIDS?<br />

The bacterium E. amylovora is a pathogen of more than 130 plant species<br />

belonging to 40 genera, mainly from the family Rosaceae. In Poland, apart from<br />

pear, apple and quince, the disease has been detected so far on the Crataegus,<br />

Sorbus, Cotoneaster, Amelanchier and Pyracantha. It is generally believed<br />

that E. amylovora is a homogeneous species and does not show pathogenic<br />

specialization. It means that potentially each of the isolates of the pathogen<br />

is able to infect any ofthe known host plants. Clear differences were observed<br />

only between isolates derived from raspberry and blackberry and isolates<br />

from other host plants.<br />

Research on the genome of E. amylovora showed some differences in the<br />

plasmid content. It revealed that the typical for E. amylovora plasmid pEA29<br />

can vary in size ranging of about 27.6 to 34.9 kb. The lack of genes responsible<br />

for the transfer and mobilization within the sequence of this plasmid in<br />

conjunction with its high stability caused the supposition that it should occur<br />

in all wild strains of E. amylovora. However, recent research showed that the<br />

bacteria can easily lose pEA29 without losing their pathogenicity. A few years<br />

ago in Spain, Llop et al (2006) isolated E. amylovora strain from hawthorn<br />

without this plasmid. At the same time, they found another plasmid of<br />

approximately 70 kb (pEI70) showing no homology with pEA29. Also, Foster<br />

et al (2004) determined the nucleotide sequence and distribution of plasmids<br />

pEU30 and pEL60. The first one was found in isolates from the western U.S.,<br />

while the other in isolates from Lebanon.<br />

In our study we analyzed the plasmid content of 120 isolates of E. amylovora<br />

originating from various regions of Poland. Bacteria were isolated from apple,<br />

pear, mountain ash, hawthorn and quince. All isolates contained pEA29.<br />

In order to determine the sequence diversity of this plasmid, restriction<br />

analysis was carried out using endonuclease HindIII. Restriction profiles<br />

of pEA29 plasmid were identical for all isolates. Besides pEA29, we found<br />

additional plasmids of size from 60 to 70 kbp, in 11 isolates. Their analysis<br />

using endonuclease BamHI and PCR with primers pEI70f pEI70r confirmed<br />

the identity of the plasmids from 10 isolates with a plasmid pEI70 described<br />

by Llop et al (2006). None of the isolates had pEL60 and pEU30 plasmids.<br />

In addition, isolate 692 possessed the plasmid of smaller than pEI70 size.<br />

Its BamHI restriction profile was different from pEI70. Four fragments of<br />

pEJ60 plasmid obtained after digestion with PstI and EcoRI were sequenced.<br />

BLASTn algorithm sequence analysis revealed that they have no similarity to<br />

any sequence deposited in GenBank. We called this plasmid pEJ60.<br />

185


186<br />

Our isolate 692, having pEJ60 plasmid, and 5 others without this plasmid,<br />

isolated in Poland from different plant hosts (659, 691-apple, pear-E6, 650,<br />

E2 - hawthorn) were tested for virulence on apple trees of cultivars. Szampion,<br />

Elstar, Free Redstar and Quinte grafted on M.9. For comparison, two strains<br />

isolated in the USA from the apple (B62, A90) were included. Young, actively<br />

growing shoots were inoculated by cut off their tips with scissors dipped in<br />

bacterial suspension at a concentration 10 7 cfu/ml. Depending on variety shoots<br />

on 12 to 20 trees were inoculated with each isolate/strain. Observations on the<br />

development of fire blight on shoots were performed 2, 4 and 6 weeks after<br />

inoculation. The virulence was expressed as a rate of the length ofnecrotized<br />

part of shoot to total length of shoot and expressed as the percentage. Strains<br />

A90 and B62 showed the highest virulence on each apple cultivar (63-100%).<br />

A similar virulence was shown by the other isolates on cultivars Elstar and<br />

Szampion. However, they were much less virulent on cvs. Quinte and Free<br />

Redstar (0-40%). Among those isolates, the highest virulence was shown<br />

by isolate 692 – the one having pEJ60 plasmid. All of these isolates and<br />

strains were almost identical in the analysis using the RAPD technique and<br />

sequencing of genes responsible for pathogenicity - hrpN, amsB and dspA/E.<br />

The presented study confirmed other findings regarding diversity of<br />

virulence among strains of Erwinia amylovora. It was demonstrated in our<br />

study especially on the cvs. Quinte and Free Redstar. It is interesting that<br />

one of the most virulent isolates from Poland, isolate 692 contains a new,<br />

previously unrecognized plasmid. Further studies should elucidate its possible<br />

role in virulence. The results indicate both the usefulness of cvs. Quinte and<br />

Free Redstar for selection of E. amylovora isolates/strains appropriate for<br />

screening tests intended to evaluate breeding material, in terms of resistance/<br />

susceptibility to fire blight.<br />

Literatura<br />

Foster G.C., McGhee G.C., Jones A.L., Sundin G.W., 2004: Nucleotide sequences,<br />

genetic organization, and distribution of pEU30 and pEL60 from Erwinia<br />

amylovora. Applied and Environmental Microbiology 70: 7539–7544.<br />

Llop P., Donat V., Rodríguez M., Cabrefiga J., Ruz L., Palomo J.L., Montesinos<br />

E., López M.M., 2006: An indigenous virulent strain of Erwinia amylovora<br />

lacking the ubiquitous plasmid pEA29. <strong>Phytopathology</strong> 96: 900-907.


RHIZOBIUM SKIERNIEWICENSE I RHIZOBIUM<br />

NEPOTUM – NOWE GATUNKI BAKTERII<br />

WYWOŁUJĄCYCH GUZOWATOŚĆ KORZENI<br />

Joanna Puławska 1 , Anne Willems 2 , Sandor Sule 3<br />

i Piotr Sobiczewski 1<br />

1Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

2Uniwersytet Gent, Gent, Belgia<br />

3Instytut Ochrony Roślin Węgierskiej Akademii Nauk, Budapeszt, Węgry<br />

jpulaw@insad.pl<br />

Guzowatość korzeni powodowana przez tumorogenne bakterie z rodzaju<br />

Agrobacterium (obecnie Rhizobium) powszechnie występuje na roślinach<br />

dwuliściennych, w tym na wszystkich gatunkach drzew owocowych. Guzowatość<br />

jest szczególnie groźna dla roślin młodych, a więc dla upraw szkółkarskich<br />

i młodych sadów. W Polsce choroba wyrządza także szkody w uprawach<br />

szkółkarskich róży.<br />

Agrobakterie występują powszechnie w glebach i innych środowiskach naturalnych,<br />

nawet na obszarach nigdy nie wykorzystywanych rolniczo. Przez<br />

wiele lat, klasyfikacja do gatunków A. radiobacter, A. rhizogenes i A. tumefaciens<br />

była oparta na ich zdolnościach chorobotwórczych. Jednak, geny odpowiedzialne<br />

za patogeniczność agrobakterii znajdują się przede wszystkim na<br />

koniugacyjnych plazmidach (Ti - u szczepów tumorogennych i Ri - u szczepów<br />

wywołujących włosowatość korzeni). Plazmidy te mogą być przenoszone z patogenicznych<br />

do niepatogennych agrobakterii co powoduje zmianę ich statusu<br />

taksonomicznego. Jednocześnie istniał podział na biowary na podstawie analizy<br />

cech biochemicznych i fizjologicznych. Badania filogenetyczne, w większości<br />

oparte na sekwencjach genów rybosomalnych, potwierdziły, że podział<br />

na biowary jest odzwierciedleniem relacji filogenetycznych. Stąd agrobakterie<br />

zaklasyfikowano do pięciu gatunków: A. radiobacter (biowar 1), A. rhizogenes<br />

(biowar 2), A. vitis (biowar 3), A. rubi i A. larrymoorei. W roku 2001 rodzaj<br />

Agrobacterium włączono do rodzaju Rhizobium.<br />

W toku naszych badań nad zróżnicowaniem bakterii wywołujących guzowatość<br />

korzeni natrafiliśmy na dwie grupy szczepów, których charakterystyki<br />

zarówno fenotypowe jak i molekularne, odbiegały od charakterystyk znanych<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 187-189<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

187


188<br />

gatunków Agrobacterium. Jedna grupa składała się ze szczepów wyizolowanych<br />

z guzów na chryzantemach (Ch11 i Ch12) i na Prunus cerasifera var. divaricata<br />

(AL 9.3) w naszym kraju, natomiast w skład drugiej grupy wchodziły<br />

szczepy wyizolowane z guzów na różnych roślinach w Polsce i na Węgrzech.<br />

Na podstawie badań molekularnych z zastosowaniem multipleks PCR (Puławska<br />

i in., 2006), analizach filogenetycznych opartych o sekwencje genów: 16S<br />

rRNA, glnA, gyrB i rpoB, hybrydyzację DNA-DNA, analizę cech biochemicznych<br />

z zastosowaniem zestawów: API 50 CH, API 20 NE, API ZYM i systemu<br />

BIOLOG oraz analizę estrów metylowych kwasów tłuszczowych stwierdzono,<br />

że te dwie grupy szczepów są przedstawicielami dwóch, jak dotąd nieopisanych<br />

gatunków. Szczepy Ch11, Ch12 i AL9.3 opisano jako nowy gatunek najbliżej<br />

spokrewniony z Rhizobium rubi (Agrobacterium rubi) i zaproponowano<br />

dla niego nazwę Rhizobium skierniewicense. Druga grupa szczepów została<br />

opisana jako gatunek Rhizobium nepotum będący najbliższym filogenetycznym<br />

kuzynem Rhizobium radiobacter (Agrobacterium radiobacter).<br />

Summary<br />

RHIZOBIUM SKIERNIEWICENSE AND RHIZOBIUM NEPOTUM –<br />

NOVEL BACTERIAL SPECIES CAUSING CROWN GALL<br />

Crown gall caused by bacteria of the genus Agrobacterium (at present Rhizobium)<br />

commonly occurs on dicotyledonous plants, including all species of fruit<br />

trees. The disease is particularly dangerous for young plants in nurseries and<br />

young orchards. In Poland, crown gall also causes damages in rose nurseries.<br />

Agrobacteria are common in soils and other natural environments, even<br />

in areas never used for agriculture. For many years, the classification of the<br />

species A. radiobacter, A. rhizogenes and A. tumefaciens was based on their<br />

phytopathogenic abilities. However, the genes responsible for pathogenicity<br />

are located primarily on the conjugal plasmids (Ti - in tumorigenic strains<br />

and Ri – in strains causing hairy roots). These plasmids can be transferred<br />

from the pathogenic to nonpathogenic agrobacterial cells resulting change in<br />

their taxonomic status. Agrobacteria are also divided into biovars on the basis<br />

of biochemical and physiological characteristics. Phylogenetic studies, mostly<br />

based on ribosomal gene sequence analysis confirmed that the division into<br />

biovars reflects the phylogenetic relationships. Thus agrobacteria were classified<br />

into five species: A. radiobacter (biowar 1), A. rhizogenes (biowar 2), A.<br />

vitis (biowar 3), A. rubi and A. larrymoorei. In 2001, the genus Agrobacterium<br />

was incorporated into the genus Rhizobium.<br />

In the course of our research on the diversity of bacteria that cause crown<br />

gall, two groups of strains of which phenotypic and molecular characteristics<br />

differed from those of known species of Agrobacterium, were discriminated.


One group consisted of strains isolated from tumors on chrysanthemum (Ch11<br />

and Ch12) and Prunus cerasifera var. divaricata (AL 9.3) in Poland, while the<br />

second group consisted of strains isolated from tumors on various plants in<br />

Poland and Hungary. On the basis of molecular studies using multiplex PCR<br />

(Puławska et al., 2006), phylogenetic analysis based on gene sequences: 16S<br />

rRNA, glnA, gyrB and rpoB, DNA-DNA hybridization, biochemical analysis<br />

using kits: API 50 CH, API 20 NE, API ZYM, BIOLOG and the analysis of<br />

fatty acid methyl esters, it was found that the two groups of strains create two<br />

hitherto unrecognized species. Strains Ch11, Ch12 and AL9.3 was described<br />

as a new species closely related to Rhizobium rubi (Agrobacterium rubi) and<br />

we proposed the name Rhizobium skierniewicense (Puławska et al., 2011). The<br />

second group of strains has been described as a species Rhizobium nepotum<br />

(Puławska et al., 2011b) which is closest phylogenetic relative of Rhizobium<br />

radiobacter (Agrobacterium radiobacter).<br />

Literatura<br />

Pulawska J., Willems A., Sobiczewski P., 2006: Rapid and specific identification<br />

of four Agrobacterium species and biovars using multiplex PCR. Systematic<br />

and Applied Microbiology 29: 470-479.<br />

Puławska J., Willems A., Sobiczewski P. 2011a. Rhizobium skierniewicense sp.<br />

nov. isolated from tumors on chrysanthemum and Prunus in Poland. International<br />

Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology (w druku).<br />

Puławska J., Willems A., Sule S. 2011b. Rhizobium nepotum sp. nov. isolated<br />

from different plant species. International Journal of Systematic and Evolutionary<br />

Microbiology (przedłożone do recenzji).<br />

189


190<br />

MECHANIZMY DZIAŁANIA IZOLATÓW BAKTERII<br />

PANTOEA AGGLOMERANS I PSEUDOMONAS SPP.<br />

PRZYDATNYCH W OCHRONIE ROŚLIN PRZED ZARAZĄ<br />

OGNIOWĄ (ERWINIA AMYLOVORA)<br />

Artur Mikiciński, Piotr Sobiczewski i Joanna Puławska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

amikic@insad.pl<br />

Wśród mikroorganizmów zasiedlających środowisko roślin występują bakterie<br />

wykazujące zarówno antagonizm wobec sprawcy zarazy ogniowej, jak<br />

i zdolność ochrony roślin przed tą chorobą. Badania licznych autorów wykazały,<br />

że najbardziej efektywne izolaty należą do gatunków Pseudomonas fluorescens<br />

i Pantoea agglomerans. Niektóre z nich wykorzystano do opracowania<br />

biopreparatów. Na bazie Pantoea agglomerans produkowane są Bloomtime<br />

(USA), BlossomBless (Nowa Zelandia), Poma Vita (Włochy), a Pseudomonas<br />

fluorescens ̶ BlightBan (USA).<br />

W ramach kilkuletnich badań własnych wyselekcjonowano 12 izolatów<br />

bakterii, które silnie ograniczały rozwój zarazy ogniowej na zawiązkach owoców<br />

gruszy oraz kwiatach i pędach jabłoni. Na podstawie charakterystyki fenotypowej<br />

oraz analizy sekwencji genu 16S rRNA izolaty: B90 i 48M zidentyfikowano<br />

jako Pantoea agglomerans, L16 jako Pseudomonas fluorescens, 3M<br />

jako Pseudomonas chlororaphis, 35M jako Pseudomonas syringae, 43M jako<br />

Citrobacter farmeri (lub Pantoea agglomerans), 49M jako Pseudomonas graminis,<br />

55M jako Pseudomonas mosselli, 56M jako Pseudomonas sp., 59M jako<br />

Pseudomonas fluorescens, 91M jako Pseudomonas putida, a 19CK zaklasyfikowano<br />

do rodzaju Pseudomonas. Przeprowadzone badania obejmowały określenie<br />

stosunków biotycznych między wymienionymi izolatami a E. amylovora,<br />

obecność genów kodujących syntezę wybranych antybiotyków przez te izolaty,<br />

a także zdolność wytwarzania sideroforów, acylowanych laktonów homoseryny<br />

(AHL) oraz biofilmu. Dla porównania do badań włączono szczepy C9-1 (P.<br />

agglomerans) oraz A506 (P. fluorescens), stanowiące składniki dwóch formulacji<br />

preparatu BlightBan.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 190-194<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Stosunki biotyczne badano na czterech pożywkach (agar odżywczy z sacharozą<br />

- NAS, King B /KB/, LB, minimalna 925). Spośród wszystkich izolatów<br />

tylko B90, 43M oraz 48M nie ograniczały wzrostu patogena na pożywkach<br />

NAS, KB i LB, natomiast 3M, 35M, 56M, 59M, 19CK tworzyły na nich strefy<br />

o różnej średnicy. Na pożywce KB aż 9 izolatów produkowało metabolity wtórne,<br />

toksyczne dla E. amylovora (L16, 3M, 35M, 49M, 55M, 56M, 59M, 91M,<br />

19CK). Na podkreślenie zasługuje fakt, że wszystkie izolaty w mniejszym lub<br />

większym stopniu stymulowały wzrost E. amylovora na pożywce 925. Wykazano,<br />

że izolaty 3M i 59M posiadły gen prnD odpowiedzialny za syntezę pyrrolnitryny,<br />

przy czym ostatni z wymienionych izolatów posiadał dodatkowo<br />

gen phlD, kodujący syntezę 2-4 diacetylfluoroglucinolu. Ponadto izolat 59M<br />

reagował pozytywnie ze starterami komplementarnymi do genów pltB i pltC<br />

kodujących pioluteorynę. W przypadku izolatu 35M również otrzymano produkt<br />

amplifikacji ze starterami komplementarnymi do genu pltB, przy czym<br />

sekwencja uzyskanego produktu była homologiczna do znanych genów pltB<br />

tylko w 79%, a do genu kodującego syntazę beta-ketoacylową, biorącą udział<br />

w syntezie antybiotyków poliketydowych ̶ w 100%. Również izolaty należące<br />

do rodzaju Pseudomonas (3M, 35M, 56M, 59M, 91M, 19CK oraz 49M) z wyjątkiem<br />

55M dały produkt w reakcji PCR ze starterami komplementarnymi<br />

do genu gacA, znanego jako gen regulatorowy syntezy metabolitów wtórnych.<br />

Żaden z izolatów nie posiadał genu fenazyny.<br />

Jednym z ważnych czynników decydujących o przydatności bakterii w<br />

ochronie roślin jest wytwarzanie przez nie sideroforów, czyli związków kompleksujących<br />

jony żelaza. Siderofory wiążą się z jonami Fe 3+ w kompleksy,<br />

które mogą być następnie pobrane do wnętrza komórki na zasadzie transportu<br />

aktywnego. W ten sposób bakterie wychwytują żelazo z otoczenia, czyniąc je<br />

tym samym niedostępnym dla innych mikroorganizmów. Zdolność do wytwarzania<br />

sideroforów badano na pożywce „błękitnej” według Schwyn i Neilands<br />

(1987). Siderofory wytwarzały wyłącznie izolaty należące do rodzaju Pseudomonas,<br />

ale z wyjątkiem 55M.<br />

Wiele gatunków bakterii komunikuje się między sobą za pomocą mediatorów<br />

– autoinduktorów, w procesie zwanym quorum sensing – QS. Mechanizmowi<br />

temu, podlegają m.in. pozakomórkowe wydzielanie enzymów, wytwarzanie<br />

antybiotyków czy ruchliwość. Niektóre bakterie wykorzystują do tego<br />

procesu acylowane laktony homoseryny (AHL). Zdolność wytwarzania AHL<br />

posiadały jedynie izolaty: 3M, 35M oraz 48M. W badaniach wykorzystano<br />

szczep indykatorowy Chromobacterium violaceum (McClean i in. 1997).<br />

Inną ważną cechą bakteryjnych czynników ochrony roślin jest zdolność<br />

tworzenia biofimu. Biofilm jest przestrzenną strukturą złożoną z kolonii bakterii<br />

umiejscowionych w masie zewnątrzkomórkowych polimerów (wydzielanych<br />

głównie w formie śluzu), wykazujących zdolność adhezji do różnych<br />

191


192<br />

powierzchni oraz odporną na czynniki zewnętrzne takie jak wysychanie czy<br />

działanie toksycznych substancji chemicznych – antybiotyków (Flemming<br />

1993). Zdolność tworzenia biofilmu badano wg metody Hossain i Tsuyumu<br />

(2006). Spośród badanych izolatów najsilniejszą zdolność do tworzenia biofilmu<br />

wykazały: 43M, 48M oraz L16.<br />

Podsumowując należy stwierdzić, że zdolności ochronne badanych izolatów<br />

nie korespondowały z wykrytymi wskaźnikami mechanizmów ich działania,<br />

co może być związane z ekspresją genów w danych warunkach, a także innymi,<br />

nie będącymi jeszcze przedmiotem naszych badań mechanizmami.<br />

Summary<br />

MECHANISMS OF ACTION OF PANTOEA AGGLOMERANS<br />

AND PSEUDOMONAS SPP. ISOLATES USEFUL FOR CONTROL<br />

OF FIRE BLIGHT (ERWINIA AMYLOVORA)<br />

Bacteria showing antagonism to Erwinia amylovora and ability to protect<br />

plants against this disease are present among the microorganisms inhabiting<br />

environment of various the plants. Studies of numerous authors have shown<br />

that the most effective isolates belong to Pseudomonas fluorescens and<br />

Pantoea agglomerans species. Some of them were utilized in commercial<br />

biopreparations, e.g. isolates of Pantoea agglomerans are active ingredients<br />

of Bloomtime (USA), BlossomBless (New Zeland), Poma Vita (Italy), while<br />

Pseudomonas fluorescens is formulated in BlightBan (USA).<br />

During last several years, we have selected 12 isolates which highly<br />

protected pear fruitlets and apple flowers and shoots against fire blight. On the<br />

basis of phenotypic characteristics and sequence analysis of 16S rRNA gene,<br />

the isolates were identified as follows: B90 and 48M as Pantoea agglomerans,<br />

L16 as Pseudomonas fluorescens, 3M as Pseudomonas chlororaphis, 35M as<br />

Pseudomonas syringae, 43M as Citrobacter farmeri (or Pantoea agglomerans),<br />

49M as Pseudomonas graminis, 55M as Pseudomonas mosselli, 56M as<br />

Pseudomonas sp., 59M as Pseudomonas fluorescens, 91M as Pseudomonas<br />

putida, and 19CK was classified to Pseudomonas genus. The biotic relationships<br />

between these isolates and E. amylovora on artificial media (NAS, KB, LB and<br />

minimal 925) were tested. Furthermore, the presence of genes coding for the<br />

synthesis of some antibiotics , as well as their ability to produce siderophores,<br />

acylated homoserine lactones (AHL) and the ability to biofilm formation were<br />

investigated. For comparison, the strains C9-1 (P. agglomerans) and A506 (P.<br />

fluorescens), which are components of two formulations of the biopreparation<br />

BlightBan were included.<br />

Isolates B90, 43M and 48M did not inhibit the growth of the pathogen<br />

on NAS, KB and LB media, while 3M, 35M, 56M, 59M and 19CK produced<br />

inhibition zones of different diameters. All isolates stimulated growth of E.


amylovora on medium 925. Isolates 3M and 59M possess prnD gene involved<br />

in the synthesis of pyrrolnitrin. The isolate 59M had additional phlD gene,<br />

which encodes for the synthesis of 2-4 diacetylfluoroglucinol, and reacted<br />

positively with primers complementary to the genes pltB and pltC encoding<br />

for pyoluteorin. Isolate 35M also gave a product characteristic length with<br />

primers complementary to pltB gene, however, the sequence of obtained<br />

product showed only 79% homology to known pltB genes; on the other hand<br />

it was 100% homologous to the gene encoding for beta-ketoacyl synthase,<br />

an enzyme participating in the biosynthesis of polyketide antibiotics.<br />

Additionally, isolates belonging to the genus Pseudomonas (3M, 35M, 56M,<br />

59M, 91M, 19CK, and 49M), with the exception of 55M, produced a amplicon<br />

with primers complementary to the gene gacA – the response regulator gene,<br />

which influences the production of several secondary metabolites including<br />

antibiotics. None of the isolates possessed the phenazyne gene.<br />

One of the important factor decisive on suitability of bacteria in plant<br />

protection is the production by them siderophores, i.e. compounds complexing<br />

ions of iron. Such complexes can be next downloaded to cell interior through<br />

active transport. Thus, iron present in environment is not available to<br />

other microorganisms. Interestingly, all isolates belonging to the genus<br />

Pseudomonas, again with the exception of 55M, produced siderophores when<br />

grown on a medium containing the complex CAS - Fe 3+ - HDTMA (Schwyn<br />

and Neilands 1987).<br />

Many bacterial species communicate among themselves via mediators–<br />

autoinductors in process called quorum sensing – QS. This mechanism<br />

consists among others extracellular enzymes, production of antibiotics or<br />

motility. Some bacteria use in this process N-acyl homoserine lactones (AHL).<br />

Production of N-acyl homoserine lactones (AHL) by bacteria was tested with<br />

AHL-indicator strain Chromobacterium violaceum CV026. Three isolates: 3M,<br />

35M and 48M gave positive reaction, what indicates their ability to act on<br />

other bacteria (McClean et al., 1997).<br />

Another important feature of biocontrol bacteria is ability to biofilm<br />

formation, the structure composed of bacterial colonies located in mass of<br />

extracellular polymers (secreted in form of ooze), demonstrating the ability of<br />

adhesion to various surfaces and resistant to external factors such as drying<br />

or toxic chemicals including antibiotics. The ability of biofilm formation was<br />

studied by the method of Hossain and Tsuyumu (2006). Among the studied<br />

isolates the strongest ability to form biofilm showed 43M, 48M and L16.<br />

In conclusion, the protective activity of the selected isolates against fire<br />

blight did not correspond to the studied indicators of their mechanisms of<br />

action. Thus, their activity may be associated with the expression of genes<br />

under particular conditions as well as to other mechanisms which are currently<br />

under examination.<br />

193


194<br />

Literatura<br />

Flemming H.C., 1993: Biofilms and environmental protection. Water Science<br />

and Technology 27: 1–10.<br />

Hossain M.M., Tsuyumu S., 2006: Flagella-mediated motility is required for<br />

biofilm formation by Erwinia carotovora subsp. carotovora. Journal of General<br />

Plant Pathology 72: 34-39.<br />

McClean K.H., Winson M.K., Fish L., Taylor A., Chhabra S.R., Camara M.,<br />

Daykin M., Lamb J.H., Swift S., Bycroft B.W., Steward G.S.A.B., Williams<br />

P., 1997: Quorum sensing and Chromobacterium violaceum: exploitation of<br />

violacein production and inhibition for the detection of N-acylhomoserine<br />

lactones. Microbiology 143: 3703-3711.<br />

Schwyn B., Neilands J.B., 1987: Universal CAS assay for the detestion and<br />

determination of siderophores. Analytical Biochemistry 160: 47-60.


POSTERY


GRZYBY NA ROŚLINACH Z RODZAJU SAMBUCUS I TILIA<br />

Iwona Adamska i Beata Czerniawska<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny, Zakład Ochrony Roślin,<br />

ul. Słowackiego 17, 71-434 Szczecin<br />

iwonaadamska@interia.pl<br />

Bez czarny (Sambucus nigra L.) i koralowy (S. racemosa L.) oraz lipa drobnolistna<br />

(Tilia cordata Mill.) i szerokolistna (T. platyphyllos Scop.) to <strong>rośliny</strong><br />

pospolite dla Polski. Często występują one w stanie dzikim, choć bywają one<br />

tez używane w celach dekoracyjnych do nasadzeń parkowych i przyulicznych.<br />

Jednakże mają one także i inne zastosowania. Owoców bzu czarnego używa<br />

się do produkcji soków i konfitur. Drewna lipowego używa się do wyrobów<br />

stolarskich i instrumentów muzycznych (Podbielkowski i Sudnik-Wójcikowska<br />

2003). Roślin tych używa się także w ziołolecznictwie. W przypadku bzu<br />

surowcem są najczęściej owoce i kwiatostany, rzadziej liście i kora, a lipa dostarcza<br />

kwiatostanów. Rośliny te są źródłem m.in. olejków eterycznych, flawonoidów<br />

i glikozydów (Broda i Mowszowicz 1996). Celem badań było określenie<br />

gatunków grzybów zasiedlających liście i kwiaty bzu czarnego i koralowego<br />

oraz lipy drobnolistnej i szerokolistnej.<br />

Materiałem badawczym były liście i kwiaty Sambucus nigra, S. racemosa,<br />

Tilia cordata i T. platyphyllos, które wykazywały zmiany chorobowe. Zbierano<br />

<strong>rośliny</strong> występujące zarówno w stanie dzikim, jak i nasadzenia parkowe<br />

i przyuliczne. Materiał badawczy pochodził z wybranych miejscowości Zachodniopomorskiego<br />

(Gościno, Kamień Pomorski, Kołobrzeg i Szczecin). Pobrano<br />

go w latach 2009-2010 (od czerwca do października).<br />

W trakcie badań zidentyfikowano łącznie 14 gatunków grzybów. Rośliny<br />

z rodzaju Sambucus zasiedlało 9 gatunków, a rodzaj Tilia - 7. Tylko 2 taksony<br />

grzybów znaleziono na wszystkich czterech badanych gatunkach roślin.<br />

Grzybami tymi były pospolite saprotrofy Alternaria alternata i Cladosporium<br />

spp. Ich obecność stwierdzano najczęściej na zamierających fragmentach liści.<br />

Grzybami znalezionymi tylko na roślinach z rodzaju Sambucus były: Asteromella<br />

ebuli (Fuckel) Moesz ex Bat. & Peres, Cercospora depazeoides (Desm.)<br />

Sacc., Fusarium spp., Microsphaera vanbruntiana var. sambuci-racemosae (U.<br />

Braun) U. Braun & S. Takam., Phoma exigua var. exigua Desm., Ramularia<br />

sambucina Sacc. i Septoria ebuli Roberge ex Desm.. Natomiast tylko <strong>rośliny</strong><br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 197-198<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

197


198<br />

z rodzaju Tilia zasiedlały: Asteromella tiliicola (Oudem.) Arx, Cercospora microsora<br />

Sacc., Discula umbrinella (Berk. & Broome) M. Morelet, Phyllosticta<br />

tiliae Sacc. & Speg. i Septoria tiliae Westend.<br />

Summary<br />

FUNGI ON PLANTS OF THE GENUS SAMBUCUS AND TILIA<br />

Elder (Sambucus nigra L.), red elder (S. racemosa L.), small-leaved linden<br />

(Tilia cordata Mill.) and broad-leaved linden (T. platyphyllos Scop.) are<br />

common plants in Poland. They often occur in the wild, and are also used for<br />

decorative purposes for planting in parks and on streets. Elderberry fruit used<br />

for the production of juices and preserves, and linden wood is the raw material<br />

for carpentry and for the manufacture of musical instruments (Podbielkowski<br />

and Sudnik-Wójcikowska 2003). These plants are also used in herbal medicine.<br />

The raw material obtained from elderberry are fruits and flowers, fewer<br />

leaves and bark, and lime provides inflorescences. These plants are a source<br />

of essential oils, flavonoids and glycosides (Broda and Mowszowicz 1996). The<br />

aim of this study was to determine the species of fungi colonizing leaves and<br />

flowers plants of the genus Sambucus and Tilia.<br />

Research material were the leaves and flowers of plants Sambucus nigra,<br />

S. racemosa, Tilia cordata and T. platyphyllos with symptoms of disease.<br />

Occurring plants were collected in the wild and planted in parks and on<br />

streets. The research material came from some town of Zachodniopomorskie<br />

(Gościno, Kamień Pomorski, Kołobrzeg and Szczecin). Plants were collected in<br />

2009-2010 (from June to October).<br />

During the study identified a total of 14 species of fungi. Nine species of<br />

fungi on plants of the genus Sambucus and 7 of the genus Tilia were found.<br />

Only 2 species of fungi inhabited all four test plant species (Alternaria<br />

alternata and Cladosporium spp). They were present on parts of dying leaves.<br />

Asteromella ebuli (Fuckel) Moesz ex Bat. & Peres, Cercospora depazeoides<br />

(Desm.) Sacc., Fusarium spp., Microsphaera vanbruntiana var. sambuciracemosae<br />

(U. Braun) U. Braun & S. Takam., Phoma exigua var. exigua<br />

Desm., Ramularia sambucina Sacc. and Septoria ebuli Roberge ex Desm. were<br />

found on plants of the genus Sambucus. Asteromella tiliicola (Oudem.) Arx,<br />

Cercospora microsora Sacc., Discula umbrinella (Berk. & Broome) M. Morelet,<br />

Phyllosticta tiliae Sacc. & Speg. and Septoria tiliae Westend. inhabited plants<br />

of the genus Tilia.


ANTAGONISTYCZNE ODDZIAŁYWANIE GRZYBÓW<br />

GLEBOWYCH WOBEC RÓŻNYCH IZOLATÓW<br />

RODZAJU FUSARIUM WYOSOBNIONYCH<br />

Z WYPUSTEK SZPARAGA LEKARSKIEGO<br />

Roman Andrzejak<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60-594 Poznań<br />

romstand@up.poznan.pl<br />

W warunkach in vitro oceniono wpływ dwóch zbiorowisk grzybów glebowych<br />

pochodzących z plantacji szparaga w Poznaniu i Świdwowcu. Z uzyskanych,<br />

w latach 2004-2006, prób glebowych wykonywano izolacje na pożywkę<br />

Martina-Johnsona (Martin 1950, Johnson 1957), płytki inkubowano przez 10<br />

dni, a następnie odszczepiano na pożywkę PDA. Uzyskane kultury identyfikowano<br />

wg kluczy mikologicznych. Grzyby glebowe należały do różnych gatunków:<br />

Apiospora montagnei, Aspergillus fumigatus, Chaetomium aureum,<br />

Ch. cochlioides, Cladosporium cladosporioides, Epicoccum nigrum, Fusarium<br />

oxysporum, F. solani, Gliocladium catenulatum, G. virens, Humicola fuscoatra<br />

var. fuscoatra, Mucor hiemalis, Paecilomyces lilacinus, P. marquandii,<br />

Penicillium aurantiogriseum, P. citreonigrum, P. funiculosum, P. janczewski,<br />

P. waksmanii, Phoma eupyrena, Talaromyces flavus var. flavus, Trichoderma<br />

atroviride, T. koningii, T. viride, Zygorrhynchus moelleri.<br />

Do badania wpływu zbiorowisk grzybów glebowych na wzrost in vitro patogenów<br />

wykorzystano metodę szeregów biotycznych (Mańka 1974). Do badań<br />

wybrano najliczniej reprezentowanych przedstawicieli grzybów glebowych<br />

z każdego stanowiska oraz z każdego roku (2004, 2005, 2006). Badane grzyby<br />

glebowe należały do następujących gatunków: Apiospora montagnei, Aspergillus<br />

fumigatus, Chaetomium aureum, Ch. cochlioides, Cladosporium cladosporioides,<br />

Epicoccum nigrum, Gliocladium catenulatum, G. virens, Humicola<br />

fuscoatra var. fuscoatra, Mucor hiemalis, Paecilomyces lilacinus, P. marquandii,<br />

Penicillium aurantiogriseum, P. citreonigrum, P. funiculosum, P. janczewski,<br />

P. waksmanii, Phoma eupyrena, Talaromyces flavus var. flavus, Trichoderma<br />

atroviride, T. koningii, T. viride, Zygorrhynhus moelleri. Reprezentacja<br />

danego zbiorowiska zestawiona została do oceny z grzybami rodzaju Fusa-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 199-200<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

199


200<br />

rium pochodzących z obu plantacji. Grzyby patogeniczne uzyskane z wypustek<br />

szparaga lekarskiego reprezentowały różne izolaty Fusarium culmorum,<br />

F. equiseti, F. oxysporum, F. proliferatum, F. solani, F. verticilioides. Każda<br />

kombinacja testowa miała 4 powtórzenia, uzyskane oceny uśredniano. Najbardziej<br />

ograniczającymi wzrost badanych patogenów były następujące wyosobnione<br />

z gleby gatunki grzybów: Gliocladium virens, Mucor hiemalis, Trichoderma<br />

atroviride, T. koningii, T. viride, Zygorrhynhus moelleri. Indywidualny<br />

efekt biotyczny (IEB) tych gatunków, w zależności od badanego patogena,<br />

wynosił od +6 do + 8. Sumaryczny efekt biotyczny (SEB) był jednak ujemny,<br />

oba zbiorowiska grzybów sprzyjały wzrostowi badanych izolatów rodzaju Fusarium.<br />

Najniższe wartości SEB dla wszystkich izolatów rodzaju Fusarium<br />

uzyskano ze stanowiska w Marcelinie.<br />

Summary<br />

ANTAGONISTIC EFFECTS OF SOLI FUNGUS ON DIFFERENT<br />

ISOLATES OF FUSARIUM ISOLATED FROM ASPARAGUS SPEARS<br />

In the years 2004-2006, samples of soil from two asparagus plantations were<br />

collected for mycological analysis.<br />

The research was devoted to the effect of communities of soil fungi<br />

on the growth of the Fusarium (F.culmorum, F. equiseti, F. oxysporum,<br />

F. proliferatum, F. solani, F. verticilioides ) pathogens obtained from the spears<br />

in vitro conditions. Both soil fungi communities supported the growth of all the<br />

Fusarium isolates.


ZDROWOTNOŚĆ 8 ODMIAN PSZENICY JAREJ<br />

UPRAWIANEJ W SYSTEMIE EKOLOGICZNYM NA TLE<br />

SYSTEMU INTEGROWANEGO I KONWENCJONALNEGO<br />

Anna Baturo-Cieśniewska i Aleksander Łukanowski<br />

Uniwersystet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

baturo-a@utp.edu.pl<br />

Przedmiotem badań były korzenie i podstawy źdźbła pszenicy jarej uprawianej<br />

na polach doświadczalnych należących do IUNG PIB w Puławach. W latach<br />

2005-2007, w fazie początku krzewienia i dojrzałości wczesno-woskowej, analizowano<br />

zdrowotność odmian Bryza, Ismena, Jasna, Koksa, Napola, Rokicka,<br />

Zebra i Vinjett uprawianych w systemie ekologicznym oraz odmiany Vinjett<br />

uprawianej również w systemie integrowanym i konwencjonalnym.<br />

Makroskopowej ocenie zdrowotności poddano korzenie i podstawy źdźbła,<br />

a z roślin wykazujących objawy chorobowe izolowano grzyby na pożywce PDA<br />

po odkażeniu w 1% NaOCl, wypłukaniu w wodzie sterylnej. Dane z oceny<br />

zdrowotności przeprowadzonej w skali 0-5 przetransformowano na indeks porażenia<br />

(IP) i przeanalizowano statystycznie.<br />

Ocena makroskopowa korzeni przeprowadzona w fazie początku krzewienia<br />

wykazała zróżnicowane porażenie w poszczególnych latach badań. Rośliny<br />

były najsilniej porażone w drugim roku badań, natomiast w ostatnim w tej<br />

fazie nie odnotowano objawów chorobowych na korzeniach. W pierwszym roku<br />

w systemie ekologicznym IP wynosił średnio 0,5% i wahał się w granicach od<br />

0% w przypadku odmiany Bryza do 1,4 dla odmiany Ismena. W drugim roku<br />

średnie porażenie w systemie ekologicznym wynosiło 3,5% przy najwyższej<br />

wartości dla odmiany Koksa (4,4) i najniższej dla ‘Rokickej’ (2,4). Korzenie odmiany<br />

Vinjett w obu fazach, we wszystkich latach badań, wyraźnie najsilniej<br />

były porażone w systemie konwencjonalnym, a najsłabsze porażenie stwierdzono<br />

w systemie integrowanym. W fazie dojrzałości woskowej porażenie korzeni<br />

stwierdzono we wszystkich próbach, podobnie jak we wcześniejszej fazie<br />

odmiany w poszczególnych latach reagowały w zróżnicowany sposób, jednak<br />

w systemie ekologicznym sytuacja się zmieniła. Ogólnie można zauważyć, że<br />

średnio najwyższy stopień porażenia stwierdzono w przypadku odmiany Rokicka.<br />

Najwyraźniejsze różnice między odmianami obserwowano w 2007 roku,<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 201-203<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

201


202<br />

gdzie przy średnim IP= 8,0, dla odmiany Rokickej stwierdzono IP=16,8%,<br />

a dla ‘Koksy’ 2,4%.<br />

Ocena zdrowotności podstaw źdźbła wykazała porażenie roślin we wszystkich<br />

latach badań w obu fazach. W fazie krzewienia najwyższy IP odnotowano<br />

w 2005, gdzie w systemie ekologicznym średnia wartość wynosiła 1,8%, przy<br />

najwyższej wartości (4,7)dla odmiany Rokicka i najniższej (0,2%) dla odmiany<br />

Jasna. W 2006 roku porażenie w tym systemie wahało się od 0,6% dla odmian<br />

Ismena i Zebra do 2,8% dla odmiany Jasna przy wartości średniej 1,4%.<br />

W ostatnim roku, porażenie było najsłabsze i wynosiło średnio 0,9%, a najsilniej<br />

porażona była odmiana Rokicka (1,7%). W przypadku podstawy źdźbła<br />

odmiany Vinjett w obu fazach nie zaobserwowano tak wyraźnych różnic między<br />

systemami uprawy, jak w przypadku korzeni. Jedynie w pierwszym roku<br />

w fazie krzewienia stwierdzono wyższe porażenie w systemie konwencjonalnym,<br />

a w drugim w obu fazach zauważono tendencje do nieco wyższego porażenia<br />

w systemie ekologicznym.<br />

W fazie dojrzałości woskowej porażenie w 2005 roku w systemie ekologicznym<br />

kształtowało się na poziomie 24,3%, przy indeksie porażenia 19,0 dla<br />

‘Koksy’ i 35,8% dla ‘Rokickiej’. W kolejnym roku było zbliżone i średni IP wynosił<br />

26,5%. Również w tym roku najsilniej porażona była odmiana Rokicka<br />

(IP = 32,8), a najsłabsze objawy chorobowe obserwowano u odmiany Jasna. W<br />

ostatnim roku porażenie było słabsze (IP = 12,5) i podobnie jak w latach poprzednich<br />

najwyższy IP stwierdzono u ‘Rokickiej’ (16,8%), a najzdrowsze była,<br />

podobnie jak w 2006 odmiana Jasna (IP=3,8%). Ogólnie można stwierdzić, że<br />

odmiana Rokicka najgorzej reagowała na system ekologiczny.<br />

Wśród grzybów patogenicznych izolowano m. in. Fusarium oxysporum,<br />

F. avenaceum, F. culmorum, F. graminearum, F. solani, Bipolaris sorokiniana,<br />

Rhizoctonia spp. i Gaeumannomyces graminis. Stwierdzono również stosunkowo<br />

wysoki procent Colletotrichum graminicola i Aureobasidium pullulans.<br />

Summary<br />

HEALTH OF EIGHT SPRING WHEAT CULTIVARS GROWN<br />

IN ORGANIC SYSTEM AS COMPARED WITH INTEGRATED<br />

AND CONVENTIONAL SYSTEM<br />

The subject of the study was health of roots and stem bases of spring wheat<br />

grown in experimental fields owned by IUNG PIB in Puławy. In 2005-2007,<br />

in the early tillering stage and early-wax maturity, there was assessed health<br />

of cultivars cv. Bryza, Ismena, Jasna, Koksa, Napola, Rokicka, Zebra and<br />

Vinjett grown in the organic system as well as cv. Vinjett in integrated and<br />

conventional system.<br />

There was conducted macroscopic assessment of health of roots and stem<br />

bases, and from plants showing disease symptoms there were isolated fungi


on PDA medium after disinfection with 1% solution of NaOCl and rinsing in<br />

sterile water. Data from the health assessment carried out in a 0-5 scale were<br />

transformed onto disease index (DI) and analyzed statistically.<br />

Root health assessment carried out in early tillering stage showed a different<br />

infection in particular years. Plants were affected at the highest degree in<br />

the second year of study, while in the last year in this phase there were no<br />

symptoms on the roots. In the first year in organic system mean DI value was<br />

0.5% and ranged from 0% for cv. Bryza up to 1.4 for cv. Ismena. In second year<br />

mean DI level in organic system was 3.5%; at the highest value for a cv. Koksa<br />

(4.4%) and lowest for cv. Rokicka (2.4%). Roots of cv. Vinjett in both phases,<br />

in all years of research, were clearly the most affected in conventional system,<br />

and the weakest infection was noted in integrated system. In the wax maturity<br />

stage infection was noted in all root samples, as well as in the earlier phase<br />

cultivars showed various reactions in particular years, but in organic system,<br />

the situation changed. Generally, the highest mean degree of infection was<br />

found for cv. Rokicka. The clearest differences between cultivars were observed<br />

in 2007, where at mean DI level 8.0%, for cv. Rokicka DI was 16.8%, and for<br />

cv. Koksa 2.4%.<br />

Stem base health assessment showed infection in all the years of research<br />

in both phases. In the tillering phase the highest DI was noted in 2005, where<br />

in organic system its mean value was 1.8%, while the highest (4.7%) for cv.<br />

Rokicka and lowest (0.2%) for cv. Jasna. In 2006, infection level in this system<br />

ranged from 0.6% for cv. Ismena and Zebra to 2.8% for cv. Jasna. In the last<br />

year, infection was the lowest and it mean value was 0.9%, and cv. Rokicka was<br />

infected at the highest degree (1.7%). In the case of stem bases of cv. Vinjett<br />

there was no such clear differences between cultivation systems variations in<br />

both phases, as for roots. Only in the first year in the tillering stage infection<br />

was higher in the conventional system, and in the second year, in both phases<br />

there was observed a tendency to slightly higher infestation in organic system.<br />

In 2005 stem base mean DI in wax maturity phase in 2005 was observed<br />

in organic system (24.3%), with DI=19.0% for cv. Koksa and 35.8% for cv.<br />

Rokicka. Next year showed similar mean DI=26.5%. Also in this year the most<br />

infescted ultivar was Rokicka (DI=32.8), and the weakest disease symptoms<br />

were observed in cv. Jasna. In the last year disease intensity was lower (DI<br />

= 12.5) and as in previous years, the highest DI was found for cv. Rokicka<br />

(16.8%), and was the healthiest, as in 2006, was cv. Jasna (DI = 3.8%). Overall,<br />

cv. Rokicka responded the worst for organic cultivation.<br />

Among pathogenic fungi there were isolated mainly Fusarium oxysporum,<br />

F. avenaceum, F. culmorum, F. graminearum, F. solani, Bipolaris sorokiniana,<br />

Rhizoctonia spp. and Gaeumannomyces graminis. It was also observed relatively<br />

high share of Colletotrichum graminicola and Aureobasidium pullulans.<br />

203


204<br />

KLINIKA CHORÓB ROŚLIN<br />

Natasza Borodynko i Henryk Pospieszny<br />

Instytut Ochrony Roślin–Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Wł. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

nataszaborodynko@tlen.pl<br />

Klinika Chorób Roślin jest nowo powstałą pracownią wpisaną w struktury<br />

Zakładu Wirusologii i Bakteriologii Instytutu Ochrony Roślin – Państwowego<br />

Instytutu Badawczego w Poznaniu. Jest to laboratorium bardzo dobrze wyposażone<br />

w aparaturę wraz z nowoczesną szklarnią. Klinika została powołana<br />

jako efekt realizacji projektu europejskiego WND-POIG.02.01.00-30-069/06-01<br />

i ma za zadanie prowadzenie diagnostyki chorób roślin, zarówno wirusowych,<br />

bakteryjnych, jak i grzybowych oraz badań naukowych w tym zakresie. Wiele<br />

czynników pochodzenia organicznego i nieorganicznego powoduje podobne objawy,<br />

dlatego właściwa diagnostyka jest podstawą podjęcia dalszych działań<br />

pozwalających na ochronę plantacji. Diagnostyka prowadzona jest z zastosowaniem<br />

klasycznych metod biologicznych, testów serologicznych (ELISA) i bardzo<br />

czułych i specyficznych technologiach opartych na DNA, w tym real-time<br />

PCR. Klinika jest laboratorium multidyscyplinarnym i w jej działalność są włączeni<br />

pracownicy naukowi Instytutu Ochrony Roślin–PIB z różnych dziedzin<br />

ochrony roślin. Działalność Kliniki jest skierowana do producentów, eksporterów,<br />

służb fitosanitarnych oraz działkowców.<br />

Summary<br />

PLANT DISEASE CLINIC<br />

The Plant Disease Clinic is a service laboratory situated within the<br />

Department of Virology and Bacteriology at the Institute of Plant Protection–<br />

National Research Institute. The clinic is supported by grant WND-<br />

POIG.02.01.00-30-069/06-01. It is a modern and unique unit connected with<br />

a new greenhouse in Poland. The Plant Disease Clinic is designed to provide<br />

plant disease diagnostic service for anyone interested in plant diseases. Our<br />

services include analysis of plant material for viral, bacterial and fungal<br />

pathogens as well as suggesting appropriate control measures when available.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 204-205<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Disease diagnosis is a critical initial step for successful disease management.<br />

Several different diseases and/or plant health problems can cause similar<br />

symptoms. Therefore, it is important to obtain an accurate diagnosis to choose<br />

the best disease-control measures . Accurate plant disease can be diagnosed<br />

by using biological, serological methods and sensitive and specific DNAbased<br />

technologies including real-time PCR. Our laboratory serves growers,<br />

agronomists, seed producers, plant protection service and homeowners.<br />

205


206<br />

ALTERNATYWNE METODY FUMIGACJI: PROJEKT LIFE+<br />

WSPIERAJĄCY INTEGROWANE I ZRÓWNOWAŻONE<br />

METODY ZWALCZANIA ORGANIZMÓW SZKODLIWYCH<br />

W GLEBIE W UPRAWACH OGRODNICZYCH<br />

Jolanta Ciesielska 2 , Piotr Sobiczewski 1 , Czesław Ślusarski 1 ,<br />

Beata Meszka 1 i Eligio Malusa 2<br />

1 Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

2 JWC Projects, ul. Zwycięzców 28, 03-938 Warszawa<br />

Piotr.Sobiczewski@insad.pl<br />

Intensyfikacja upraw w produkcji ogrodniczej w Polsce spowodowała<br />

wzrost nasilenia występowania chorób odglebowych. Zwalczanie organizmów<br />

powodujących te choroby było przez długi czas oparte na bromku metylu. Jednakże<br />

zakaz jego stosowania spowodował potrzebę opracowania nowych metod<br />

odkażania gleby. W zasadzie podejście zawarte w integrowanym systemie<br />

ochrony roślin pokrywa się z założeniami zrównoważonego zwalczania szkodników<br />

i patogenów glebowych. Jest ono promowane przez projekt Life+ “Zrównoważone<br />

stosowanie fumigantów chemicznych do zwalczania organizmów<br />

szkodliwych w glebie w sektorze ogrodniczym (SustUse Fumigants)” (www.<br />

sustainablefumigation.eu). W Polsce projekt jest prowadzony przez Instytut<br />

Ogrodnictwa w Skierniewicach i firmę JWC Project. Pozostali partnerzy to:<br />

Centrum Innowacji w Sektorze Rolno-Środowiskowym AGROINNOVA przy<br />

Uniwersytecie w Turynie (koordynator), firma Dow AgroSciences Italia, Uniwersytet<br />

Rolniczy w Atenach - Wydział Patologii Roślin.<br />

Głównym celem projektu jest zmniejszenie zanieczyszczenia środowiska<br />

poprzez opracowanie i rozpowszechnienie stosowania niższych dawek pestycydów<br />

oraz metod alternatywnych do odkażania gleby (solaryzacja, szczepienie,<br />

biofumigacja, odkażanie parą aktywną) w uprawach ogrodniczych. Projekt<br />

wspiera politykę Unii Europejskiej zrównoważonego stosowania pestycydów,<br />

których cele są sformułowane w Dyrektywie 2009/128/WE. Projekt składa się<br />

z 5 działań ukierunkowanych na rozpowszechnianie stosowania zrównoważonych<br />

strategii ochrony roślin przed chorobami odglebowymi w ogrodnictwie i poszerzanie<br />

świadomości producentów, techników przeprowadzających fumigację,<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 206-208<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


doradców rolnych, pracowników administracji publicznej i społeczeństwa na<br />

temat strategii zrównoważonej ochrony upraw przed agrofagami.<br />

Działania projektu SustUse Fumigants są realizowane w 24 lokalizacjach<br />

demonstracyjnych (gospodarstwa pilotażowe), określonych w 9 obszarach projektu,<br />

na różnych uprawach ogrodniczych.<br />

W Polsce doświadczenia są prowadzone na truskawkach i warzywach (pomidor,<br />

papryka i ogórek), zarówno w uprawie pod osłonami, jak i w uprawie<br />

polowej. Zastosowano następujące praktyki zwalczania szkodników i chorób<br />

odglebowych:<br />

1. stosowanie fumigantów chemicznych (dazomet, metam Na, chloropikryna<br />

i 1,3D + chloropikryna) w zredukowanych dawkach (ustalonych na podstawie<br />

oceny występowania organizmu szkodliwego) i przy zastosowaniu folii VIF ;<br />

2. odkażanie aktywną parą wodną przy użyciu innowacyjnej maszyny (producent<br />

firma Celli), która wykorzystuje egzotermiczną reakcję CaO lub<br />

KOH z wodą;<br />

3. biofumigacja z zastosowaniem mączki Brassica carinata, także w kombinacji<br />

z inokulum Trichoderma hartianum<br />

4. szczepienie roślin na podkładkach odpornych na patogeny<br />

Projekt przewiduje też szkolenia dla doradców rolnych i techników przeprowadzających<br />

fumigację w zakresie: diagnostyki i zwalczania patogenów glebowych,<br />

ryzyka środowiskowego i sanitarnego związanego z ich stosowaniem,<br />

sposobów aplikacji i rozwoju normatyw prawnych. Ponadto zostanie wykonana<br />

ocena wyników środowiskowych i opłacalności ekonomicznej testów wykonanych<br />

w 24 gospodarstwach pilotażowych.. Działalność upowszechnieniowa ma<br />

za zadanie udostępnienie operatorom wyników badań i równoległe stymulowanie<br />

programów badawczych, aby w ten sposób wnieść wkład w opracowywanie<br />

Krajowego Planu Działania, zgodnie z Dyrektywą 2009/128/WE.<br />

Summary<br />

ALTERNATIVE METHODS FOR FUMIGATION: A LIFE PROJECT<br />

SUPPORTING THE INTEGRATED AND SUSTAINABLE CONTROL<br />

OF HARMFUL SOIL ORGANISMS IN HORTICULTURE<br />

The intensification of horticultural productions has increased the<br />

occurrence of soil-borne diseases. The control of different soil pathogens and<br />

pests has, for long time, relayed on the use of methyl bromide. However, the<br />

ban of this fumigant has prompted the need of finding new methods of soil<br />

fumigation. Generally, the approach of an integrated plant control system<br />

has been proven the best method to sustainably control pests and diseases<br />

originating from the soil.<br />

This approach is promoted by the Life+ project “Sustainable use of chemical<br />

fumigants for the control of soil-borne pathogens (SustUse Fumigants)” (www.<br />

207


208<br />

sustainablefumigation.eu). In Poland the project is carried out by the Institute<br />

of Horticulture and the company JWC Project. The other partners are: Centre<br />

of Competence in the Agri-Food Sector AGROINNOVA of the University of<br />

Torino (coordinator), Dow AgroSciences Italia, Agricultural University of<br />

Athens – Department of Plant Pathology.<br />

The overall objective of the SustUse project is to contribute to the<br />

reduction of environment pollution through promoting the use of reduced<br />

doses of chemical fumigants and the application of alternative methods for<br />

soil disinfection (solarisation, biofumigation, fumigation with active steam,<br />

grafting onto resistant rootstocks) of horticultural crops. Such goal is<br />

supporting the EU strategy of sustainable use of pesticides which goals are<br />

included into the Directive 2009/128/EU.<br />

The Project is composed of 5 activities which aim at promoting the use of a<br />

sustainable strategy for the control of soil-borne pathogens and at increasing<br />

the awareness of producers and other stakeholders on the sustainable control<br />

of crops.<br />

The activities of the Project are realized in 24 demonstration sites (pilot<br />

farms), from 9 regions, on several horticultural crops. In Poland the trials are<br />

conducted on strawberry and vegetable crops (tomato, pepper and cucumber),<br />

both in open fields and under tunnel. The practices tested for the management<br />

of the soil pathogens include:<br />

1. use of chemical fumigants (dazomet, metam Na, chloropycrine and 1,3D +<br />

chloropycrine) at reduced doses, defined on the basis of pest assessment,<br />

and by application of VIF films;<br />

2. active steam fumigation by a newly developed machine that exploit the<br />

exothermic reaction of CaO or KOH with water;<br />

3. biofumigation with Brassica carinata also in association with inoculation<br />

with Trichoderma hartianum<br />

4. grafting of plants onto resistant rootstocks<br />

The Project foresees also trainings, for advisors and Professional involved<br />

in fumigation, on subjects related to diagnosis of soil pathogens and their<br />

control, environmental and health risks, legal provisions.<br />

The evaluation of the results from the 24 pilot farms will be carried out also<br />

with regards to environment and economical feasibility of the new practices..<br />

The dissemination activity shall to provide information that enables farmers<br />

to make informed decisions and also support the process of development of the<br />

National Action Plan as foreseen by the Dir. 2009/128/EU<br />

The Project is funded by the Life+ Program


PATOGENY NADZIEMNEJ CZĘŚCI ZIEMNIAKA<br />

NAWOŻONEGO DOLISTNIE<br />

Bożena Cwalina-Ambroziak 1 , Bożena Bogucka 2<br />

i Maciej Nowak 3<br />

1 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-720 Olsztyn,<br />

2 Katedra Agrotechnologii i Zarządzania Produkcją Roślinną,<br />

ul. Oczapowskiego 8, 10-719 Olsztyn,<br />

3 Tymbark SA Oddział Olsztynek, ul. Zielona 16, 11-015 Olsztynek<br />

bambr@uwm.edu.pl<br />

W badaniach podjęto próbę określenia wpływu wieloskładnikowych nawozów<br />

dolistnych z mikroelementami: Basfoliar 12-4-6, ADOB Mn and Solubor<br />

DF, aplikowanych pojedynczo i w kombinacjach, na skład zbiorowiska grzybów<br />

kolonizujących liście i łodygi ziemniaka.<br />

Materiał i metody<br />

W doświadczeniu założonym przez Katedrę Agrotechnologii i Zarządzania<br />

Produkcją Roślinną UWM w Olsztynie (układ losowanych podbloków, w czterech<br />

powtórzeniach) uprawiano 3 odmiany ziemniaka: wczesną Adam, średnio<br />

późną Pasja Pomorska i późną Ślęza. Kwalifikowane bulwy wysadzano w rzędzie<br />

co 40 cm, rozstawa międzyrzędzi 62,5 cm. Jako pierwszy czynnik doświadczenia<br />

zastosowano dwa poziomy nawożenia mineralnego: A - 80 kg N ∙ ha -1 , 80<br />

kg P ∙ ha -1 , 120 K ∙ ha -1 , B - 120 kg N ∙ ha -1 , 120 kg P ∙ ha -1 , 180 K ∙ ha -1 . Drugi<br />

czynnik stanowiły kombinacje z nawożeniem dolistnym: a. Basfoliar 12-4-6 (8 l<br />

∙ ha -1 ), b. ADOB Mn (4 l ∙ ha -1 ), c. Solubor DF (2 l ∙ ha -1 ), d. ADOB Mn (2 l ∙ ha -1 )<br />

+ Solubor DF (1 l ∙ ha -1 ), e. ADOB Mn (2 l ∙ ha -1 ) + Basfoliar 12-4-6 (4 l ∙ ha -1 ),<br />

f. Basfoliar 12-4-6 (4 l ∙ ha -1 ) + Solubor DF (1 l ∙ ha -1 ), g. Basfoliar 12-4-6 (2,7<br />

l ∙ ha -1 ) + ADOB Mn (1,3 l ∙ ha -1 ) + Solubor DF (0,7 l ∙ ha -1 ), h. bez nawożenia<br />

dolistnego. Nawozy dolistny zastosowano jednorazowo w fazie pełnego zwarcia<br />

międzyrzędzi ziemniaka. Przedplonem były zboża. Na wszystkich poletkach<br />

przeprowadzono jednakowe zabiegi ochrony roślin (zalecenia IOR/PIBw Poznaniu).<br />

W laboratorium przeprowadzono izolacje grzybów z liści i łodyg ziemniaka.<br />

Po kwitnieniu losowo pobierano po 20 liści ze środkowego piętra roślin<br />

(z poletek w poszczególnych kombinacjach), wycinano 1cm 2 fragmenty, które<br />

umieszczano w kolbach z 90 ml sterylnej wody i wytrząsano przez 10 minut.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 209-211<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

209


210<br />

Z zawiesiny pobierano po 0,2 ml na płytki Petriego i zalewano pożywką PDA<br />

z różem bengalskim i streptomycyną. Zebrane 4 tygodnie przed wykopkami<br />

łodygi cięto na 0,5 cm kawałki, odkażano w (50% etylenie i 1% podchlorynie<br />

sodu i wykładano na PDA. Wyrosłe kolonie grzybów przeszczepiano na skosy<br />

w celu identyfikacji mikroskopowej wg kluczy.<br />

Rozkład temperatur od maja do sierpnia w badanych sezonach wegetacyjnych<br />

był zbliżony, a niższe o ponad połowę opady zanotowano w sezonie wegetacyjnym<br />

2008r. niż w pozostałych.<br />

Wyniki i dyskusja<br />

Grzyby drożdżopodobne dominowały w zbiorowisku otrzymanym z liści odmiany<br />

wczesnej (60% udział) i odmian późnych (po ok. 90%). Spośród saprotrofów<br />

licznie zidentyfikowano gatunki: Cladosporium cladosporioides, Humicola<br />

spp., rzędu Mucorales, Penicillium spp. Grzyby patogeniczne nielicznie<br />

kolonizowały liście powyższych odmian, odpowiednio 10 i po 2%. Były reprezentowane<br />

przez gatunki: A. alternata (najczęściej identyfikowane), A. solani,<br />

B. cinerea, rodzaju Fusarium (8 gatunków), H. solani i R. solani. Najwięcej<br />

izolatów sprawcy alternariozy otrzymano z roślin w ubogim w opady sezonie<br />

wegetacyjnym 2008 r. Z większą częstotliwością sprawców chorób izolowano<br />

z roślin wczesnej odmiany nawożonych NPK w niższej dawce (A) niż w wyższej<br />

dawce (B), odwrotnie w przypadku odmian późnych. Najbardziej widoczny<br />

wpływ zastosowanych nawozów dolistnych na udział patogenów w zbiorowisku<br />

grzybów zasiedlających liście zaznaczy się u odmiany Adam; wynosił od<br />

4,8% (kombinacja „d”) do 18,6% w kombinacji bez nawożenia. U pozostałych<br />

odmian nawożenie dolistne nieznacznie różnicowało populacje tych grzybów<br />

w poszczególnych kombinacjach nawozowych.<br />

Patogeny bardzo licznie, w zbliżonym stopniu – po ok. 90% występowały w<br />

zbiorowisku grzybów otrzymanym z łodyg badanych odmian ziemniaka. Przewagę<br />

populacji czynników chorobotwórczych – 4% dla odmiany wczesnej i 2%<br />

dla odmian późnych - zanotowano w wariancie nawożenia z wyższą dawką<br />

niż z niższą dawką. Analizując stosowane nawozy dolistne stwierdza się największy<br />

udział – ponad 95% patogenów w zbiorowisku grzybów uzyskanych<br />

z łodyg odmiany Adam i Pasja Pomorska nawożonych łącznie trzema nawozami<br />

i odmiany Ślęza z nawożeniem ADOB Mn i Solubor DF. Wśród patogenów<br />

dominującym okazał się sprawca antraknozy ziemniaka (58,3% ogółu<br />

grzybów). Z największą częstotliwością gatunek ten zasiedlał łodygi odmiany<br />

Pasja Pomorska w kombinacji „g”(67,3%) i łodygi odmiany Ślęza w kombinacji<br />

„d”. Rzadziej izolowano gatunek A. alternata (32,4%) i grzyby rodzaju Fusarium<br />

(6,2%), sporadycznie B. cinerea. Najmniejszą liczebność sprawcy alternariozy<br />

otrzymano z łodyg roślin odmiany Adam i Pasja Pomorska nawożonych<br />

Basfoliafrem 12-4-6, a najwięcej z łodyg tej ostatniej odmiany w kombinacji<br />

z łącznie stosowanymi nawozami.


Summary<br />

PATHOGENS COLONIZING ABOVEGROUND PARTS OF PLANTS<br />

POTATO IN TREATMENTS WITH FOLIAR FERTILIZATION<br />

Three potato cultivars: early Adam, mide late Pasja Pomorska ans late<br />

Ślęza were grown in a three-year exact field experiment in Bałcyny (2008–<br />

2010). The objective of this study was to determine the effects of three foliar<br />

fertilizers: Basfoliar 12-4-6, ADOB Mn and Solubor DF (were applied alone and<br />

in combinations) on fungal communities colonizing leaves and stems of potato.<br />

Yeast-like fungi were most frequently isolated from potato leaves of all<br />

cultivars (58,0 to 93,3% of all fungi). Pathogens represented by A. alternata,<br />

A. solani, B. cinerea, C. coccodes, species of the genera Fusarium, H. solani<br />

and R. solani were isolated from potato leaves. The predominant species was<br />

A. alternata. Most isolates of pathogenic fungi were obtained from leaves<br />

of cv. Adam in the control treatment without foliar fertilization than in the<br />

treatments with foliar fertilization.<br />

Pathogenic fungi accounted for approximately 90% of all isolates<br />

colonizing the stems of three potato cultivars. The predominant species were<br />

Colletotrichum coccodes (58,3%) and Alternaria alternata (32,4%). Species of the<br />

genus Fusarium and B. cinerea were sporadic. Most populations of pathogenic<br />

fungi were obtained from potato stems cv. Adam and Pasja Pomorska<br />

fertilized Basfoliar 12-4-6+ADOB Mn+Solubor DF. Mineral fertilizers affected<br />

the abundance of pathogens; more isolates of fungi were obtained from plants<br />

grown in plots with a higher level of mineral fertilization (B) - N 120 kg x ha -1 P<br />

144 kg x ha -1 K156 kg -1 than from plants in plots with a lower level of mineral<br />

fertilization 1 (A) - N 80 kg x ha -1 P 80 kg x ha -1 K120 kg x ha -1 .<br />

211


212<br />

WPŁYW OCHRONY BIOLOGICZNEJ I CHEMICZNEJ<br />

NA NASILENIE ZARAZY I ALTERNARIOZY ZIEMNIAKA<br />

Bożena Cwalina-Ambroziak 1 i Maciej Nowak 2<br />

1 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-720 Olsztyn,<br />

2 Tymbark SA Oddział Olsztynek, ul. Zielona 16, 11-015 Olsztynek<br />

bambr@uwm.edu.pl<br />

Badania przeprowadzono w celu oszacowania porażenia roślin przez Phytophthora<br />

infestans i Alternaria spp. oraz plonu bulw ziemniaka chronionego<br />

biologicznie i chemicznie. W laboratorium wyizolowano grzyby zasiedlające<br />

łodygi ziemniaka.<br />

Materiał i metody<br />

W doświadczeniu w Tomaszkowie (2004-2005) uprawiano 4 odmiany ziemniaka:<br />

Irys, Irga, Kolia i Ślęza. Zastosowano ochronę ziemniaka w postaci<br />

3-krotnego opryskiwania roślin w 10-dniowych odstępach poniższymi fungicydami<br />

oraz biopreparatami: - Biochikol 020 PC 2% stężenie, w dawce 40 ml/<br />

roślinę, - Polyversum 0,1% stężenie, w dawce 40 ml/roślinę, - Pyton Consento<br />

450 SC w dawce 1,7 l · ha -1 (I zabieg), Bravo 500 SC w dawce 2 l · ha -1 (II), Tanos<br />

50 WG w dawce 0,7 kg · ha -1 (III). Kombinację kontrolną stanowiły poletka<br />

z roślinami bez ochrony chemicznej. Doświadczenie założono w układzie losowanych<br />

podbloków; odmiany traktowano jako bloki, natomiast kombinacje<br />

z ochroną chemiczną i biologiczną - jako podbloki. Na kombinację składało<br />

się 6 roślin na poletku, w czterech powtórzeniach. Wysadzano kwalifikowane<br />

bulwy, przedplon stanowiły zboża.<br />

W okresie wegetacji po 2 tygodniach począwszy od ostatniego zabiegu<br />

ochrony na wszystkich roślinach na poletku w fazie od kwitnienia roślin do<br />

początku żółknięcia roślin przeprowadzono 3-krotnie ocenę nasilenia zarazy<br />

ziemniaka i alternariozy według 9 o skali (Pietkiewicz 1985; 0 o - brak objawów<br />

porażenia, 9 o – najwyższy stopień porażenia). Wyniki podano w procentach<br />

jako indeks porażenia Ip. Skuteczność stosowanej ochrony w % wyliczono według<br />

wzoru Abbotta – zgodnie z zaleceniami EPPO. Po zbiorze oszacowano<br />

plon bulw z 1 <strong>rośliny</strong> w gramach. Wyniki opracowano statystycznie (STATI-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 212-214<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


STICA ® . 9.0 2009). W celu izolacji grzybów z łodyg materiał roślinny pobierano<br />

4 tygodnie przed wykopkami z poletek składających się na poszczególne<br />

kombinacje w ilości 30 sztuk. 0,5 cm kawałki łodyg po odkażeniu w 50% etanolu<br />

i 1% podchlorynie sodu wykładano na PDA. Po inkubacji grzyby przeszczepiano<br />

na skosy agarowe i identyfikowano.<br />

Wyniki i dyskusja<br />

Wysokie opady, jakie wystąpiły w sezonie wegetacyjnym 2004 r. stymulowały<br />

rozwój patogenu Phytopthora infestans. Najwyższe indeksy porażenia<br />

– ponad 70% zanotowano na odmianie Irys, Irga i Kolia podczas ostatniego<br />

terminu obserwacji w kombinacji kontrolnej. Ślęza podczas okresu badań charakteryzowała<br />

się istotnie niższym porażeniem w stosunku do pozostałych odmian<br />

i okazała się najzdrowszą odmianą. W obydwu latach badań opryskiwanie<br />

biopreparatami i fungicydami istotnie ograniczało infekcje roślin przez P.<br />

infestans. Najmniejsze porażenie przez P. infestans zanotowano na roślinach<br />

opryskiwanych fungicydami. Dowiedziono 25% skuteczności biopreparatu Polyversum<br />

oraz 29-32% fungicydu Pyton Consento 450 SC, Bravo 500 SC i Tanos<br />

50 WG w ochronie przed zarazą ziemniaka odmiany Ślęza.<br />

Rozwojowi alternariozy sprzyjały panujące w 2005 r.; umiarkowane opady<br />

i temperatury na poziomie średniej z wielu lat. Fungicydy w ostatnich dwóch<br />

terminach w pierwszym spośród badanych sezonie wegetacyjnym w istotny<br />

sposób ograniczały infekcje roślin badanych odmian przez patogeny rodzaju<br />

Alternaria. Analizując średnie dla kombinacji ochronnych w analizowanych<br />

latach stwierdza się mniejsze nasilenie choroby na roślinach chronionych biologicznie<br />

i chemicznie niż na roślinach w kombinacji kontrolnej bez ochrony.<br />

W trakcie całego okresu badawczego wykazano najwyższą skuteczność fungicydów<br />

w ochronie roślin ziemniaka przed alternariozą.<br />

Analizując średnie dla kombinacji w poszczególnych latach niniejszych badań<br />

stwierdza się, że plon bulw ziemniaka wyrosłych z roślin chronionych był<br />

istotnie wyższy niż z poletek bez ochrony. Dużą zwyżkę plonu bulw w obydwu<br />

sezonach wegetacyjnych zanotowano u odmiany Irys, Irga i Kolia opryskiwanych<br />

Biochikolem 020 PC (od 53,9 % do 65,7%) oraz u odmiany Ślęza opryskiwanej<br />

środkami chemicznymi (od 32% do 48,3%).<br />

Liczebność patogenów otrzymanych z łodyg ziemniaka chronionego (50%<br />

wśród ogółu w tej kombinacji) była mniejsza niż z roślin bez ochrony. Do najczęściej<br />

izolowanych należały grzyby rodzaju Fusarium, kolonizujące <strong>rośliny</strong><br />

we wszystkich kombinacjach ochronnych, rzadziej wyosobniano gatunki: Alternaria<br />

alternata, Colletotrichum coccodes i Rhizoctonia solani, sporadycznie<br />

Botrytis cinerea. Największe ograniczenie liczebności sprawców alternariozy<br />

i antraknozy stwierdzono w kombinacji z opryskiwaniem roślin Polyversum.<br />

213


214<br />

Summary<br />

THE EFFECT OF BIOLOGICAL AND CHEMICAL CONTROL<br />

ON THE SEVERITY OF LATE BLIGHT AND EARLY BLIGHT<br />

The study was conducted over the years 2004 and 2005 in experimental<br />

plots located in Tomaszkowo (NE Poland). Four potato cultivars were grown:<br />

Irys, Irga, Kolia and Ślęza. Potato<br />

plants were sprayed three times with Biochikol 020 PC and Polyversum,<br />

and the following fungicides: Pyton Consento 450 SC, Bravo 500 and Tanos<br />

50 WG. During the growing season, the severity of late blight and early<br />

blight was evaluated according to a nine-point scale (Pietkiewicz 1985, where<br />

0 o - no symptoms, 9 o – most severe symptoms). The results were presented<br />

as a percentage infection index Ii, and the efficacy (%) of the applied control<br />

methods was calculated using Abbott’s formula. Tuber yield (g) was estimated<br />

after harvest. Fungi were isolated from potato stems at the laboratory.<br />

In both years of the study, the symptoms of infections caused by<br />

Phytophthora infestans and fungi of the genus Alternaria were significantly<br />

reduced in unprotected treatments. Fungicides applied in combination<br />

offered the best control. Polyversum was more effective in pathogen control<br />

than Biochikol 020 PC. Fungicides and the organic control agent provided a<br />

comparable yield-protecting effect. Smaller populations of pathogenic fungi<br />

were isolated from fungicide-treated potato stems than from untreated plants.<br />

The most substantial reduction in the abundance of the causal agents of late<br />

blight and early blight was noted in the treatment with Polyversum.


WPŁYW OCHRONY BIOLOGICZNEJ I CHEMICZNEJ NA<br />

ZBIOROWISKO GRZYBÓW KOLONIZUJĄCYCH ORGANY<br />

POMIDORA (LYCOPERSICUM ESCULENTUM MILL.)<br />

I GLEBĘ<br />

Bożena Cwalina-Ambroziak 1 i Maciej Nowak 2<br />

1 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-720 Olsztyn,<br />

2 Tymbark SA Oddział Olsztynek, ul. Zielona 16, 11-015 Olsztynek<br />

bambr@uwm.edu.pl<br />

W przeprowadzonym doświadczeniu badano możliwości ograniczenia występowania<br />

grzybów patogenicznych w środowisku uprawnym pomidora pod<br />

wpływem ochrony biologicznej i chemicznej.<br />

Materiał i metody<br />

Pomidor odmiany Rumba Ożarowska uprawiano w latach 2006-2007 w hali<br />

wegetacyjnej Uniwersytetu Warmińsko-Mazurskiego w Olsztynie. Wazony napełniano<br />

substratem torfowym oraz glebą ogrodniczą w stosunku 1:3 i wysadzano<br />

do nich 4 tygodniowe <strong>rośliny</strong>. Doświadczenie obejmowało obiekty z zastosowaną<br />

następującą ochroną:<br />

– opryskiwanie roślin 0,2% regulatorem wzrostu Asahi SL w dawce 20 ml/<br />

roślinę (3-krotne),<br />

– opryskiwanie 2% Biochikolem w dawce 40 ml/roślinę (3-krotne),<br />

– podlewanie 0,1% Polyversum w dawce 40 ml/roślinę (3-krotne),<br />

– szczepionka mikoryzowa aplikowana pod korzenie rozsady przed wysadzaniem<br />

do wazonów,<br />

– opryskiwanie fungicydem Bravo 500 SC (2-krotne, zgodnie z zaleceniami<br />

Instytutu Ochrony Roślin/Państwowego Instytutu Badawczego w Poznaniu).<br />

Wazony z niechronionymi roślinami stanowiły kombinację kontrolną.<br />

Na każdą kombinację składało się sześć wazonów (6 roślin).<br />

Po zbiorze owoców pobierano próby gleby oraz materiał roślinny: łodygi<br />

i korzenie. Zdezynfekowane 0,5 cm kawałki organów roślin w 50% etanolu and<br />

1% podchlorynie sodu wykładano na podłoże glukozowo-ziemniaczane. Doświadczenie<br />

przeprowadzono w pięciu powtórzeniach (pięć płytek). Po siedmiu<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 215-217<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

215


216<br />

dniach inkubacji wyrosłe kolonie grzybów przeszczepiano na skosy agarowe,<br />

po czym identyfikowano je mikroskopowo. Próby gleby pobierano z głębokości<br />

5 cm z wszystkich wazonów w danej kombinacji. Mieszano ruchem rotacyjnym<br />

w płytce. Następnie pobierano 1 g frakcji gleby i mieszano ruchem<br />

obrotowym w kolbie ze 149 g drobnego piasku przez<br />

10 min. Porcję tej mieszaniny o objętości 300 mm 3 zalewano pożywką Martina<br />

o temperaturze 50 o C. Kolonie grzybów inokulowano na skosy agarowe,<br />

a później identyfikowano do gatunku.<br />

Wyniki i dyskusja<br />

Najwięcej gatunków grzybów zidentyfikowano w glebie (37), mniej w zbiorowisku<br />

otrzymanym z łodyg (22) i korzeni (19). Zastosowana ochrona chemiczna<br />

i biologiczna ograniczały liczebność zbiorowiska grzybów ogółem,<br />

w tym również patogenicznych, we wszystkich analizowanych środowiskach<br />

tj. na łodygach i korzeniach oraz w glebie. W niniejszych badaniach wśród patogenów<br />

licznie zasiedlających łodygi (od 12,5 do 41% odpowiednio w kombinacji<br />

z użytym fungicydem i kombinacji kontrolnej) najczęściej identyfikowano<br />

gatunki rodzaju Fusarium, które jako jedyne zasiedlały organy we wszystkich<br />

kombinacjach. Mniej licznie z łodyg pomidora izolowano pozostałe gatunki<br />

patogenów: A. alternata, B. cinerea i C. coccodes. Patogeny najrzadziej zasiedlały<br />

organy pomidora opryskiwane fungicydem Bravo 500 SC. Stwierdzono<br />

jednocześnie, że grzyby o antagonistycznym działaniu względem patogenów<br />

kolonizowały tylko łodygi pomidora chronionego biologicznie.<br />

Patogeny najliczniej kolonizowały korzenie pomidora, a ich udział w zbiorowisku<br />

grzybów otrzymanych z roślin niechronionych był przeważający. Wśród<br />

nich dominował sprawca antraknozy z 30-40% udziałem w poszczególnych<br />

kombinacjach, rzadziej gatunki rodzaju Fusarium. Te ostatnie grzyby nie zasiedlały<br />

korzeni roślin traktowanych fungicydem. Gatunek A. alternata nie<br />

zasiedlał korzeni pomidora z aplikowaną szczepionką oraz roślin opryskiwanych<br />

Biochikolem 020 PC. Wśród saprotrofów duży udział w zbiorowisku grzybów<br />

zasiedlających korzenie 15-60% miały gatunki rzędu Mucorales.<br />

W wyniku przeprowadzonych badań stwierdzono najbogatsze zbiorowisko<br />

grzybów spod uprawy pomidora, z dominującymi grzybami drożdżopodobnymi<br />

- aż 64% udział w kombinacji z zastosowanym opryskiwaniem roślin Biochikolem<br />

020 PC. Pożądane gatunki antagonistów rodzaju Paecilomyces i Trichoderma<br />

najczęściej zasiedlały glebę spod pomidora podlewanego Polyversum;<br />

z gleby na tym obiekcie nie wyosobniono patogenów. W pozostałych kombinacjach<br />

chronionych stwierdzono ograniczenie liczebności patogenów w stosunku<br />

do kombinacji niechronionej.


Summary<br />

THE EFFECTS OF BIOLOGICAL AND CHEMICAL CONTROL ON<br />

FUNGAL COMMUNITIES COLONIZING TOMATO (LYCOPERSICON<br />

ESCULENTUM MILL.) PLANTS AND SOIL<br />

Tomato plants (cv. Rumba Ożarowska) grown in the greenhouse of<br />

University of Warmia and Mazury in Olsztyn were protected with the biological<br />

control agent Polyversum, the growth promoter Biochikol 020 PC, the growth<br />

regulator Asahi SL, a mycorrhizal inoculum, and the fungicide Bravo 500<br />

SC. Unprotected plants served as control. After fruit harvest, samples of soil,<br />

stems and roots were collected, and fungi were isolated in the laboratory.<br />

The applied biological and chemical control agents effectively reduced the<br />

abundance of fungi, including pathogenic species, colonizing tomato plants<br />

and soil. The fungicide Bravo 500 SC showed the highest efficacy. Among<br />

biological control agents, Biochikol 020 PC and the mycorrhizal inoculum<br />

were most effective in controlling stem colonization by pathogens, while<br />

Polyversum offered the best protection of tomato roots and soil.<br />

217


218<br />

WPŁYW PREPARATÓW ANTIFUNG, BIOCZOS<br />

I BIOSEPT NA ROZWÓJ I ANTAGONIZM<br />

TRICHODERMA HARZIANUM<br />

Joanna Dłużniewska<br />

Uniwersytet Rolniczy, Katedra Ochrony Środowiska Rolniczego,<br />

al. Mickiewicza 21, 31-120 Kraków<br />

rrdluzni@cyf-kr.edu.pl<br />

Do środków ochrony roślin dopuszczonych do stosowania w rolnictwie ekologicznym<br />

w minionym dziesięcioleciu należały: Antifung 20 SL, zawierający 20%<br />

biohumusu jako substancji czynnej, Bioczos BR oparty na miazdze czosnkowej<br />

oraz Biosept 33 SL, produkowany w oparciu o wyciąg z owoców grejpfruta (33%).<br />

Celem pracy było określenie oddziaływania preparatów Antifung 20 SL,<br />

Biosept 33 SL oraz Bioczos BR na wzrost grzybni, kiełkowanie zarodników<br />

i aktywność antagonistyczną Trichoderma harzianum Rifai. Badano wpływ tych<br />

preparatów na: tempo wzrostu liniowego i zahamowanie grzybni, kiełkowanie<br />

zarodników i antagonizm wobec Botrytis cinerea Pers., Rhizoctonia solani Kühn<br />

oraz Fusarium solani Sacc. w warunkach in vitro i w testach wegetacyjnych.<br />

Stwierdzono, że środki Antifung i Biosept w stężeniu 100 ppm istotnie obniżały<br />

tempo wzrostu grzybni T. harzianum. Z kolei Bioczos nie wykazywał działania<br />

fungistatycznego na T. harzianum. Obserwowano również, że biopreparat<br />

Antifung w stężeniu 10 i 100 ppm znacznie obniżył aktywność antagonistyczną<br />

T. harzianum wobec patogenów B. cinerea, R. solani i F. solani.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 218-219<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

INFLUENCE OF PREPARATIONS ANTIFUNG, BIOCZOS I BIOSEPT<br />

ON DEVELOPMENT AND ANTAGONISTIC ACTIVITY<br />

TRICHODERMA HARZIANUM<br />

Research was conducted on the effect of preparations Antifung 20SL, Biosept<br />

33SL oraz Bioczos BR on mycelial growth, spore germination and antagonism of<br />

Trichoderma harzianum Rifai.<br />

It was found that preparations cause changes in the development and<br />

antagonism of T. harzianum. This isolate, in which a decrease in spore<br />

germination index and considerable changes of mycelial growth and antagonism<br />

rate were observed, proved the most sensitive to the Antifung and Biosept in<br />

concentracion 100 ppm.<br />

219


220<br />

LECANICILLIUM LECANII JAKO PASOŻYT<br />

WYBRANYCH RDZY<br />

Tatiana M. Dolińska, Małgorzata Schollenberger<br />

i Agnieszka Bartkowska<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, Wydział Ogrodnictwa<br />

i Architektury Krajobrazu, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

tatiana_dolinska@sggw.pl<br />

Lecanicillium lecanii (dawniej Verticillium lecanii) to workowiec z rzędu<br />

Hypocreales powszechnie występujący w klimacie umiarkowanym, subtropikalnym<br />

oraz tropikalnym. Jako nadpasożyt został po raz pierwszy opisany<br />

w 1979 roku na czerwcach Coccus viridis żerujących na kawie. Od tego czasu<br />

przeprowadzono wiele obserwacji tego nadpasożyta rozwijającego się na owadach<br />

z rzędów: pluskwiaki równoskrzydłe (Homoptera), chrząszcze (Coleoptera),<br />

prostoskrzydłe (Orthoptera) i motyle (Lepidoptera). Gatunek ten skutecznie<br />

hamował też rozwój wielu patogenów roślin, w tym różnych gatunków rdzy<br />

(Pucciniales) i mączniaków prawdziwych (Erysiphales). W latach 2010 – 2011<br />

przeprowadzono badania dotyczące związku pomiędzy grzybami rdzawnikowymi,<br />

infekującymi <strong>rośliny</strong> zielne i wieloletnie, a trzema izolatami L. lecanii.<br />

Dwa izolaty tego grzyba zostały wyosobnione z rdzy Cronartium ribicola<br />

porażającej liście porzeczki czarnej w Warszawie oraz Płońsku. Trzeci izolat<br />

został znaleziony w Borkach na rdzy Puccinia malvacearum rozwijającej się<br />

na malwie różowej. W badaniu laboratoryjnym, liście z objawami rdzy były<br />

zakażane zawiesiną zarodników nadpasożyta o stężeniu 1,5 x 10 7 zarodników/<br />

ml i umieszczane w wilgotnej komorze. Obserwacji dokonywano przy użyciu<br />

mikroskopu stereoskopowego, świetlnego oraz skaningowego. Najczęściej porażanymi<br />

stadiami grzybów rdzawnikowych były uredinia i telia. Świadczyła<br />

o tym biała, puszysta grzybnia nadpasożyta pojawiająca się zwykle po 3-5<br />

dniach od inokulacji. W większości przypadków stopień porażenia wynosił powyżej<br />

50%, co oznacza, że na ponad połowie powierzchni urediniów i teliów<br />

rozwijała się biała grzybnia L. lecanii. Rozwój nadpasożyta był ograniczony<br />

jedynie do powierzchni liści z objawami choroby. Zdrowe tkanki liści nigdy nie<br />

zostały porażone. Zarodniki grzybów rdzawnikowych były penetrowane przez<br />

więcej niż jedną strzępkę L. lecanii. Do infekcji dochodziło bezpośrednio przez<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 220-221<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


ściany komórkowe. Grzyb pobierał składniki odżywcze z wnętrza zarodników<br />

i doprowadzał do ich zniekształcenia i rozerwania ściany komórkowej. Nadpasożyt<br />

powodował głównie mechaniczne uszkodzenia zarodników, jednak nie<br />

można wykluczyć udziału enzymów hydrolitycznych w czasie infekcji.<br />

Summary<br />

LECANICILLIUM LECANII AS A PARASITE OF SOME CHOSEN RUSTS<br />

Lecanicillium lecanii (previous Verticillium lecanii) is placed in the order<br />

Hypocreales in Ascomycota, which in general lives in a moderate, subtropical<br />

and tropical climate zone. This hyperparasite was first described in 1979 when<br />

it parasitized scale insects Coccus viridis feeding on coffee tree. From that time a<br />

lot of observations of this mycoparasite living on insects of the type: Homoptera,<br />

Coleoptera, Orthoptera and Lepidoptera. It also inhibited the growth of many<br />

plant pathogens like variety of rust fungi (Pucciniales) and powdery mildew<br />

(Erysiphales). In the years 2010 – 2011 research were conducted on the<br />

relationship between rusts which infected herbs and perennial plants and three<br />

isolates of L. lecanii. The two of isolates were collected from rust Cronartium<br />

ribicola which was found on leaves of blackcurrant in Warsaw and Plonsk.<br />

The third of the isolate was found in Borki on rust Puccinia malvacearum on<br />

Alcea rosea. In laboratory tests leaves with rust symptoms were infected with<br />

hyperparasites spore suspension of concentration 1,5 x 10 7 conidia/ml and put<br />

in high humidity chamber. In the research the stereomicroscope, light and<br />

scanning microscope were used. The most infected with rust fungi were uredia<br />

and telia sori. The white, fluffy hyperparasite mycelium was observed at the<br />

surface of rust sori 3-5 days after inoculation. In the majority of cases the<br />

range of infection was more than 50%, which means that more than half of sori<br />

surface was overgrown by white mycelium. The growth of mycoparasites was<br />

limited to leaf surface with disease symptoms. Healthy tissues of leaves were<br />

never infected. More than one hyphae of L. lecanii penetrated rust spore. The<br />

infection spread directly through the cell wall. The fungus absorbed nutrients<br />

from the spore inside causing its deformation and disruption of the cell wall.<br />

Hyperparasite caused mechanical damage of spores, however, the participation<br />

of the hydrolitic enzymes in the course of infection cannot be excluded.<br />

221


222<br />

MIKOFLORA ZIARNA ZBÓŻ POD WPŁYWEM<br />

NAWOŻENIA GLEBY PRP® SOL I NPK<br />

Katarzyna Gleń 1 , Katarzyna Znój 1 i Robert Witkowicz 2<br />

1 Uniwersytet Rolniczy im. Hugona Kołłątaja, Katedra Ochrony Środowiska<br />

Rolniczego, Al. Mickiewicza 21, 31-120 Kraków<br />

2 Uniwersytet Rolniczy im. Hugona Kołłątaja, Katedra Szczegółowej Uprawy<br />

Roślin, Al. Mickiewicza 21, 31-120 Kraków<br />

rrglen@cyf-kr.edu.pl<br />

Nadrzędnym celem produkcji roślinnej jest uzyskanie jak najwyższych<br />

plonów odznaczających się najlepszą jakością. Osiągnięcie tego celu może być<br />

zrealizowane między innymi dzięki stosowaniu nawożenia mineralnego, które<br />

nie tylko zaspakaja zapotrzebowanie pokarmowe roślin ale czyni je odporniejszymi<br />

na czynniki infekcyjne. Oprócz zabiegów ochronnych nawożenie jest<br />

więc jednym z najważniejszych ogniw współczesnej agrotechniki.<br />

Celem pracy było porównanie i ocena mikoflory ziarna czterech gatunków<br />

zbóż: pszenicy (Torka), żyta (Bojko), jęczmienia (Rastik) oraz owsa (Polar)<br />

uprawianych przy zróżnicowanym nawożeniu mineralnym z wykorzystaniem:<br />

NPK i PRP®Sol oraz bez nawożenia mineralnego.<br />

Bezpośrednio po zbiorze ziarno czterech gatunków zbóż przewieziono do<br />

laboratorium i poddano je analizie mikologicznej. Z każdej kombinacji losowo<br />

pobrano po 100 ziarniaków. Ziarno odkażano powierzchniowo mocząc je przez<br />

30 sekund w 50% etanolu, opłukiwano dwukrotnie w sterylnej wodzie destylowanej<br />

i osuszano na jałowej bibule. W komorze szczepień wykładano po 10<br />

sztuk na zestalone podłoże hodowlane PDA w płytkach Petriego o średnicy<br />

15 cm. Płytki z nasionami przetrzymywano w komorze hodowlanej w temperaturze<br />

23°C. Po upływie 8 dni dokonano obserwacji makroskopowych wyrosłych<br />

kolonii grzybów i policzono ich ilość. Natomiast w celu rozpoznania gatunków<br />

grzybów z wyrosłych kolonii pobierano igłą mikologiczną strzępki grzybni i reizolowano<br />

je na podłoże PDA w płytkach Petriego o średnicy 90 mm. Czyste<br />

kultury grzybów mikroskopowych na podstawie kluczy mikologicznych identyfikowano<br />

do gatunku.<br />

W przeprowadzonych badaniach laboratoryjnych z ziarniaków zbóż łącznie<br />

wyosobniono 1442 kolonii grzybów mikroskopowych. Wśród nich przeważającą<br />

ilość stanowiły organizmy patogeniczne (76,11 -91,65%), z dominacją<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 222-224<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


gatunków należących do rodzaju Fusarium. Z kolei saprofity reprezentowane<br />

były przez pięć gatunków: Alternaria alternata, Cladosporium herbarium, Trichoderma<br />

viride, Penicillum chrysogenum i Penicillium expansum. Niezależnie<br />

od zastosowanego nawożenia mineralnego spośród analizowanych gatunków<br />

zbóż jęczmień odmiany Rastik był najsilniej zasiedlany przez organizmy<br />

grzybowe (436). Z kolei najmniejszą ilość kolonii grzybów (300) odnotowano<br />

dla ziarna owsa. Rodzaj nawożenia mineralnego był czynnikiem modyfikującym<br />

ilość oraz skład gatunkowy organizmów grzybowych dla każdego gatunku<br />

zboża. Na ogół ziarno żyta, jęczmienia i pszenicy pochodzące z kombinacji<br />

nawożonych NPK i PRP® SOL było w większym stopniu opanowane przez<br />

grzyby niż w obiekcie kontrolnym. Należy zaznaczyć, że przy zbilansowanym<br />

nawożeniu NPK dla żyta i jęczmienia z ziarna izolowano nieznacznie większą<br />

ilość grzybów niż przy nawożeniu PRP® SOL. Ponadto na ziarniakach żyta<br />

z poletek nawożonych nawozem PRP® SOL udział grzybów patogenicznych<br />

był mniejszy o 17,45% niż w kombinacji z nawożeniem NPK. Podobną zależność<br />

stwierdzono także dla jęczmienia jednak różnica ta była niewielka 1,87%.<br />

Zastosowane rodzaje nawożenia mineralnego wyraźnie ograniczały występowanie<br />

organizmów grzybowych na ziarniakach owsa.<br />

Summary<br />

MICLOFLORA OF CEREAL GRAINS UNDER THE INFLUENCE<br />

OF SOIL FERTILIZATION WITH PRP®SOL AND NPK<br />

The overriding aim of crop production is obtaining the largest possible<br />

yields of the best possible quality. This goal may be achieved among others<br />

due to the application of mineral fertilization which not only fulfills the plant<br />

food requirements, but also makes them more resistant to infectious agents.<br />

Therefore, beside protective measures, fertilization is one of the most important<br />

links of contemporary agrotechnology.<br />

The paper aimed at comparison and assessment of the grain microflora of<br />

four cereal species: wheat, Torka c.v., rye, Bojko c.v., barley, Rastik c.v. and<br />

oats, Polar c.v., cultivated at diversified mineral fertilization using NPK and<br />

PRP®SOL, and without mineral fertilization.<br />

Immediately after harvest grain of four cereal species was brought to the<br />

laboratory and subjected to microbiological analysis. 100 kernels were selected<br />

randomly from each combination. The grains were surface-disinfected by<br />

soaking in 50% ethanol for 30 seconds, then rinsed twice in sterile distilled<br />

water and dried on a sterile filter paper. In a vaccination chamber 10 pieces<br />

were placed on stabilized PDA medium in Petri dishes with a 15 cm diameter.<br />

The dishes with the seeds were kept in a breeding chamber at 23 o C. After 8 days<br />

macroscopic observations were conducted of the grown fungi colonies and their<br />

number was counted. In order to identify the fungi species, mycelium hyphae<br />

223


224<br />

were collected by means of mycological needle and re-isolated to PDA medium<br />

in Petri dishes with a 90mm diameter. Pure cultures of microscopic fungi were<br />

classified to the species on the basis of mycological identification keys.<br />

A total of 1442 microscopic fungi colonies were isolated from the cereal<br />

kernels in the conducted laboratory analyses. Pathogenic organisms constituted<br />

a majority (76.11 -91.65%) with dominating Fusarium species. On the other<br />

hand, saprophytes were represented by five species: Alternaria alternata,<br />

Cladosporium herbarium, Trichoderma viride, Penicillum chrysogenum and<br />

Penicillium expansum. Despite the applied mineral fertilization, barley, Rastik<br />

c.v. was the most settled by fungal organisms (436) among the analyzed cereal<br />

species. On the other hand the smallest number of colonies (300) was registered<br />

for oat grain. The kind of mineral fertilization was a factor modifying the quantity<br />

and species composition of fungal organisms for each cereal species. Generally,<br />

rye, barley and wheat grain originating from the combinations fertilized with<br />

NPK and PRP®SOL was infested by fungi to greater extent than the fungi in<br />

the control. It should be stated that at balanced NPK fertilization for rye and<br />

barley, a slightly higher number of fungi were isolated than at fertilization with<br />

PRP®SOL. Moreover, the share of pathogenic fungi was smaller by 17.45%<br />

on rye kernels from the plot fertilized with PRP®SOL fertilizer than in the<br />

combination with NPK fertilization. A similar relationship was registered<br />

also for barley, however the difference was slight, only 1.87%. Applied kinds<br />

of mineral fertilization apparently reduced fungal organism occurrence on oat<br />

kernels.


ODPORNOŚĆ PSZENICY, PSZENICY TWARDEJ<br />

I PSZENŻYTA NA ROZPRZESTRZENIANIE SIĘ<br />

FUSARIUM W KŁOSIE (TYP ODPORNOŚCI 2)<br />

Tomasz Góral i Dorota Walentyn-Góral<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Fitopatologii, Radzików, 05-870 Błonie<br />

t.goral@ihar.edu.pl<br />

Kłosy pszenicy, pszenicy twardej i pszenżyta inokulowano punktowo zawiesiną<br />

zarodników 2 izolatów F. culmorum KF846 i F. graminearum 1509.<br />

W tym celu 50 mcl zawiesiny o stężeniu 50 000 zarodników/ml wprowadzano<br />

do kwiatka w środkowym kłosku w kłosie za pomocą samo napełniającej się<br />

strzykawki. Zainokulowano po 5 kłosów każdym izolatem. Po inokulacji stosowano<br />

zraszanie w celu utrzymania wysokiej wilgotności powietrza. Po 21<br />

dniach od inokulacji przeprowadzono obserwacje porażenia kłosów.<br />

Izolat F. culmorum KF846 okazał się znacznie mnie agresywny wobec<br />

pszenicy zwyczajnej niż izolat F. graminearum 1509. Średnia liczba porażonych<br />

kłosków wyniosła 0,9 dla KF846 oraz 3,9 dla 1509. Średnio dla obu izolatów<br />

porażone było 2,4 kłoska. Zakres zmienności wyniósł od 1,0 do 4,4. Nie<br />

stwierdzono korelacji pomiędzy porażeniem kłosów przez oba izolaty. Wynikało<br />

to z małego zróżnicowania porażenia linii pszenicy przez izolat F. culmorum<br />

KF846. Odporność typu 2 korelowała istotnie z odpornością linii pszenicy<br />

w warunkach polowych. Współczynnik korelacji wyniósł r = 0,416. Wskazuje<br />

to, że w warunkach doświadczalnych w roku 2010 17,3% zmienności indeksu<br />

fuzariozy kłosów wynikało z odporności typu 2. Zmienność indeksu fuzariozy<br />

kłosów dla linii pszenicy o wysokiej odporności typu 2 (≤ 2,0 porażonych kłosków)<br />

była wysoka, w zakresie od 5.0 do 45.0%. Malała ona wraz ze spadkiem<br />

odporności typu 2. Dla wszystkich odmian o niskiej odporności typu 2 (≥ 3,5)<br />

indeks fuzariozy kłosów wynosił > 25%. Wszystkie odmiany, które w warunkach<br />

polowych wykazały wysoką odporność (IFK < 15%) charakteryzowały się<br />

wysoką odpornością typu 2.<br />

Podobnie jak w przypadku pszenicy zwyczajnej izolat KF 846 był mniej<br />

agresywny wobec pszenicy twardej niż 1509. Średnia liczba porażonych kłosków<br />

wyniosła 2,8 dla KF846 oraz 7,8 dla 1509. Średnio dla obu izolatów pora-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 225-227<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

225


226<br />

żone było 5,3 kłoska. Zakres zmienności wyniósł od 2,1 do 8,4. Pszenica twarda<br />

wykazała około dwukrotnie niższą odporność typu 2 niż pszenica zwyczajna.<br />

Odporność na oba izolaty korelowała istotnie. Współczynnik korelacji był<br />

jednakże niski.<br />

Tak jak w przypadku pszenicy zwyczajnej niższa agresywność izolatu F.<br />

culmorum KF846 słabiej różnicowała linie pszenicy twardej pod względem odporności<br />

typu 2. Odporność typu 2 korelowała istotnie z odpornością linii pszenicy<br />

twardej w warunkach polowych. Współczynnik korelacji wyniósł r= 0,380.<br />

Wskazuje to, że w warunkach doświadczalnych w roku 2010 14,4% zmienności<br />

indeksu fuzariozy kłosów wynikało z odporności typu 2.<br />

Linie substytucyjne pszenżyta Presto porażane były słabiej niż linie pszenicy.<br />

Średnio dla obu izolatów porażone było 2,1 kłoska. Zakres zmienności<br />

wyniósł od 1,4 do 2,9. Izolat F. culmorum KF846 był się znacznie mniej agresywny<br />

niż izolat F. graminearum 1509. Średnia liczba porażonych kłosków<br />

wyniosła jedynie 0,7 dla KF846 oraz 3,5 dla 1509. Najwyższą odporność posiadały<br />

linie 1D(1R), 3D(3B), 2D(2R), 3D(3A) oraz odmiana Presto. Najniższą<br />

odpornością charakteryzowały się linie 4D(4R) oraz 2D(2B). Biorąc pod uwagę<br />

poszczególne chromosomy genomu D, najbardziej odporne były linie z chromosomem<br />

3D. Najmniej odporne okazały się linie z substytucjami chromosomów<br />

4D, 5D i 6D.<br />

Summary<br />

RESISTANCE OF WHEAT, DURUM WHEAT AND TRITICALE TO<br />

SPREAD OF FUSARIUM WITHIN A SPIKE (RESISTANCE TYPE 2)<br />

Spikes of bread wheat, durum wheat and triticale were point inoculated with<br />

spore suspension (50,000 spores/ml) of 2 isolates of F. culmorum KF846 and F.<br />

graminearum 1509. Droplet of 50 mcl of suspension was injected into 2 flowers<br />

in the central spiklet of spike by using self-refilling syringe. Five spikes per<br />

cultivar were inoculated with each of isolates. After inoculation high humidity<br />

were maintained in foliar ten using sprinkler system. After 21 days after<br />

inoculation spike infection with Fusarium head blight was scored.<br />

Isolate KF846 of F. culmorum proved much less aggressive to wheat than<br />

isolate 1509 of F. graminearum. The average number of infected spikelets<br />

amounted to 0.9 for KF846 and to 3.9 for 1509. On average, for both isolates 2.4<br />

spikelets were infected. The range of variation was from 1.0 to 4.4. There was no<br />

correlation between head infections by both isolates. This was due to the small<br />

variation of head infection by the isolate F. culmorum KF846. Resistance of type<br />

2 correlated significantly with resistance of wheat lines under field conditions.<br />

The correlation coefficient was r = 0.416. This shows that under experimental<br />

conditions of 2010 17.3% of variation FHB index could be explained due to the<br />

resistance of type 2.


Variation of FHB index for wheat lines with high resistance of type 2 (≤<br />

2,0) was high, ranging from 5.0 to 45.0%. It was decreasing with decreasing<br />

resistance of type 2. For all varieties of low resistance type 2 (≥ 3.5) FHB index<br />

was above 25%. All the varieties which showed high resistance to FHB under<br />

field conditions (FHB index < 15%) were characterised by a high level of type 2<br />

resistance.<br />

Similarly as in the case of bread wheat isolate KF 846 was less aggressive to<br />

durum wheat than 1509. The average number of infected spikelets was 2.8 for<br />

KF846 and 7.8 for 1509. On average, for both isolates 5.3 spikelets were infected.<br />

The range of variation was from 2.1 to 8.4. Durum wheat has about twice lower<br />

type 2 resistance than bread wheat. Resistance to both isolates correlated<br />

significantly. However, the correlation coefficient was low. As in the case of<br />

bread wheat low aggressiveness of isolate F. culmorum KF846 less differentiated<br />

lines of durum wheat for resistance. Resistance to Fusarium spread correlated<br />

significantly with resistance of durum wheat lines to FHB under field conditions.<br />

The correlation coefficient was r = 0.380. This showed that 14.4% of variation of<br />

FHB index could be explained by the level of type 2 resistance.<br />

Substitution lines of ‘Presto’ triticale were less infected than bread wheat<br />

lines. On average, for both isolates 2.1 were infected. The range of variation was<br />

from 1.4 to 2.9. Isolate F. culmorum KF846 was much less aggressive than isolate<br />

F. graminearum 1509. The average number of infected spikelets was only 0.7<br />

for KF846 and 3.5 for 1509. The highest resistance had lines 1D(1R), 3D (3B),<br />

2D(2R), 3D(3A) and ‘Presto’ cultivar. The lowest resistant were lines 4D(4R)<br />

and 2D(2B). The most resistant were lines with chromosomes substituted by 3D<br />

chromosome. The least resistant proved lines with chromosomes substituted by<br />

4D, 5D and 6D chromosomes.<br />

227


228<br />

MOŻLIWOŚCI ZASTOSOWANIA WYBRANYCH<br />

PREPARATÓW BIOTECHNICZNYCH DO ZWALCZANIA<br />

GRZYBÓW Z RODZAJU MONILIA<br />

Marek Grabowski i Katarzyna Oberc<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Katedra Sadownictwa i Pszczelnictwa,<br />

al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków<br />

kasia.oberc@gmail.com<br />

Grzyby z rodzaju Monilia są sprawcami ważnej gospodarczo choroby, jaką<br />

jest brunatna zgnilizna, występująca na wszystkich podstawowych gatunkach<br />

sadowniczych: jabłoniach, gruszach, wiśniach, śliwach, czereśniach oraz brzoskwiniach.<br />

Porażają one zarówno owoce, jak również kwiaty, krótkopędy oraz<br />

pędy drzew. W Polsce za występowanie brunatnej zgnilizny drzew ziarnkowych<br />

i pestkowych odpowiedzialne są dwa gatunki: Monilia laxa i Monilia fructigena.<br />

Ochrona sadów przed tymi patogenami polega przede wszystkim na stosowaniu<br />

środków chemicznych, które mogą niekorzystnie wpływać na <strong>zdrowi</strong>e<br />

konsumentów. W badaniach sprawdzano możliwości zastosowania wybranych<br />

preparatów biotechnicznych, jako alternatywy dla metody chemicznej.<br />

W sezonie 2009-2011 badano w warunkach laboratoryjnych aktywność<br />

grzybobójczą preparatów Biochikol 020 PC (w stężeniach: 1 %, 2 %, 4 %) i Biosept<br />

33 SL (w stężeniach: 0,025 %; 0,05 %; 0,1 %) w stosunku do grzybów<br />

z rodzaju Monilia. Test wykonano metodą zatrutych podłoży. Patogeny M. laxa<br />

oraz M. fructigena w obydwu sezonach izolowane były w dwóch terminach:<br />

letnim (w okresie wegetacyjnym) i wiosennym (po przezimowaniu) z owoców<br />

jabłoni oraz śliwy. Hodowlę prowadzono na pożywce PDA dodając do niej testowane<br />

preparaty. Kombinacja kontrolna nie zawierała preparatów. Porównawczo<br />

zastosowano środek chemiczny Topsin M 500 SC (w stężeniach: 0,05 %;<br />

0,1 %; 0,2 %). Przez kolejne dni mierzono wzrost średnicy kolonii. W oparciu<br />

o uzyskane z pomiarów wyniki obliczono współczynnik zahamowania wzrostu<br />

liniowego badanych grzybów. Uzyskane wyniki poddano obliczeniom statystycznym<br />

metodą analizy wariancji z zastosowaniem testu t-Duncana przy poziomie<br />

istotności α = 0,05.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 228-230<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Preparat chemiczny Topsin M 500 SC najskuteczniej hamował wzrost grzybni<br />

patogenów z rodzaju Monilia wyizolowanych z owoców zebranych w sezonie<br />

wegetacyjnym. Aktywność fungistatyczna środka nie różniła się w sposób<br />

istotny statystycznie w zależności od zastosowanego stężenia. Badania wykazały<br />

wysoką skuteczność testowanych preparatów biotechnicznych. Wszystkie<br />

zastosowane stężenia środka Biosept 33 SL charakteryzował wysoki współczynnik<br />

zahamowania wzrostu liniowego grzybni patogenów z rodzaju Monilia<br />

wyizolowanych z owoców zebranych w sezonie wegetacyjnym, porównywalny<br />

z preparatem Topsin M 500 SC. Dla stężenia 0,1 % współczynnik ten<br />

wynosił 94,86 % w stosunku do M. laxa i 97,29 % w stosunku do M. fructigena.<br />

Mniej skuteczny okazał się Biochikol 020 PC, a jego aktywność fungistatyczna<br />

była zależna od zastosowanego stężenia. Współczynnik zahamowania rozrostu<br />

liniowego grzybni dla stężenia 4 % wynosił 70,07 % w stosunku do M. laxa<br />

i 92,63 % w stosunku do M. fructigena. Porównywalne wyniki otrzymano<br />

w stosunku do grzybów z rodzaju Monilia wyizolowanych z mumii (po przezimowaniu).<br />

W przypadku M. fructigena najskuteczniejszy okazał się preparat<br />

Biosept 33 SL w stężeniu 0,1 %, a jego aktywność fungistatyczna była zależna<br />

od zastosowanego stężenia.<br />

Z przeprowadzonych badań wynika, że środek biotechniczny Biosept 33 SL<br />

skutecznie ogranicza wzrost grzybni patogenów z rodzaju Monilia w warunkach<br />

in vitro, w sposób porównywalny z preparatem chemicznym Topsin<br />

M 500 SC. Najniższą skutecznością w hamowaniu wzrostu liniowego<br />

grzybni M. laxa i M. fructigena odznaczał się Biochikol 020 PC.<br />

Summary<br />

POSSIBILITY OF USING SELECTED BIOTECHNICAL<br />

PREPARATIONS FOR REMOVAL OF FUNGUS SPECIES FROM<br />

THE GENERA MONILIA<br />

Fungi from the genera Monilia are perpetrators of an economically important<br />

disease, which is brown rot, that occurs on all basic species trees: apples, pears,<br />

cherries, plums, geans and peaches. It’s infecting fruits, flowers and tree shoots.<br />

In Poland, for occurrence of brown rot on pome trees and stone fruit trees,<br />

two species of fungi are responsible: Monilinia laxa and Monilia fructigena.<br />

Protecting orchards from these pathogens is based on using chemicals, that can<br />

negatively affect the health of consumers. Studies examined the possibility of<br />

using some biotechnical preparations as an alternative to the chemical methods.<br />

In season 2009-2011 in laboratory conditions fungicidal activity of<br />

biotechnical preparations Biochikol 020 PC (in concentrations: 1 %, 2 %, 4 %)<br />

and Biosept 33 SL (in concentrations 0.025 %, 0.05 %, 0.1 %) in relation to<br />

fungus species from the genera Monilia was examined. The test was made<br />

229


230<br />

using contaminated surfaces method. Pathogens M. laxa and M. fructigena in<br />

both seasons were isolated in two terms: summer (during the growing season)<br />

and spring (after wintering) from fruits of apple-tree and plum-tree. Cultivation<br />

was performed on PDA nourishment adding to it tested preparations. The<br />

check combination contained no preparations. As a comparative chemical<br />

Topsin SC M 500 was used (in concentrations: 0.05 %; 0.1 %; 0.2 %). During<br />

the next days, increase in colony diameter was measured. Basing on the results<br />

obtained from measurements, rate of linear growth inhibition of tested fungi<br />

was calculated. The obtained results were statistically analyzed using analysis<br />

of variance (Duncan’s t-test) at the significance level α = 0.05.<br />

Chemical preparation Topsin M 500 SC most effectively inhibited the mycelia<br />

growth of pathogens from the genera Monilia isolated from fruits harvested<br />

during the growing season. Fungistatic activity did not differ a statistically<br />

significant way, depending upon the concentration. Studies have shown high<br />

efficiency of the tested biotechnical preparations. All applied concentrations<br />

of Biosept 33 SL were characterized by high rate of linear growth inhibition<br />

mycelia of pathogens from the genera Monilia isolated from fruits harvested<br />

in the growing season, comparable with the preparation Topsin M 500 SC.<br />

For a concentration of 0.1 % ratio was 94.86 % for M. laxa and 97.29 % for<br />

M. fructigena. Less effective was Biochikol 020 PC, and its fungistatic activity<br />

was dependent upon the concentration used. Coefficient of linear mycelial<br />

growth inhibition at a concentration of 4 % was 70.07 % for M. laxa and<br />

92.63 % for M. fructigena. Comparable results were obtained in comparison<br />

to the fungi from the genera Monilia isolated in the spring time analysis. In<br />

the case of M. fructigena the most effective was preparation Biosept 33 SL<br />

(at concentration 0.1 %) and it’s fungistatic activity was dependent upon the<br />

concentration, and it was: 94.46 (concentration 0.1 %), 86.51 % (concentration<br />

of 0.05 %), 85.78 (concentration 0.025 %).<br />

The studies show that a biotechnical Biosept 33 SL effectively limits the growth<br />

of mycelium from the genera Monilia pathogens in vitro, in a way comparable to<br />

the chemical preparation Topsin M 500 SC. The lowest effectiveness in inhibiting<br />

the growth of M. laxa mycelium linear and M. fructigena had Biochikol 020 PC.


WYSTĘPOWANIE TOKSYN FUZARYJNYCH W ORKISZU<br />

Z EKOLOGICZNEGO SYSTEMU UPRAWY<br />

Jan Grajewski 1 , Anna Błajet-Kosicka 1 , Magdalena Twarużek 1 ,<br />

Robert Kosicki 1 , Kinga Mazurkiewicz-Zapałowicz 2<br />

i Katarzyna Kalczyńska 1<br />

1 Uniwersytet Kazimierza Wielkiego, Instytut Biologii Eksperymentalnej,<br />

Zakład Fizjologii i Toksykologii, ul. Chodkiewicza 30, 85-064 Bydgoszcz<br />

2 Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny, Wydział Nauk o Żywności<br />

i Rybactwa, Pracownia Hydrobiologii, ul. Królewicza 4, 71-545 Szczecin<br />

jangra@ukw.edu.pl<br />

Orkisz obok pszenicy jednoziarnowej i pszenicy płaskurki należy do najstarszych<br />

podgatunków pszenicy. Przez długi czas zaniechany w uprawie, został<br />

ponownie zauważony i doceniony. Na przestrzeni ostatnich 20 lat znacznie<br />

zwiększyła się powierzchnia upraw orkiszu. Związane jest to z dużym zainteresowaniem<br />

zdrowym stylem życia i zdrową żywnością oraz intensywnym<br />

rozwojem rolnictwa ekologicznego. Orkisz ceniony jest ze względu na wysoką<br />

wartość odżywczą, właściwości lecznicze oraz liczne zalety agrotechniczne.<br />

Jedną z takich zalet ma być większa w porównaniu do innych zbóż odporność<br />

na niektóre choroby grzybowe, a co za tym idzie mniejszy stopień skażenia<br />

mikotoksynami.<br />

Celem badań było oznaczenie trichotecen i zearalenonu (wtórnych metabolitów<br />

grzybów polowych) w ziarnie orkiszu i jego produktach, pochodzących<br />

z ekologicznych systemów uprawy. Materiał do badań stanowiły 53 próby<br />

(15 – surowce 2009, 17 – surowce 2010, 10 – produkty 2009, 11 – produkty<br />

2010) ziarna, płatków, otrąb, mąki, kaszy, makaronu i kawy. Mikotoksyny<br />

(T-2 i HT-2, deoksyniwalenol – DON, niwalenol – NIV, 3-acetylodeoksyniwalenol<br />

– 3-ADON, monoacetoksyscirpenol – MAS, diacetoksyscirpenol – DAS<br />

i zearalenon – ZEA) oznaczono za pomocą HPLC-MS/MS (3200 QTRAP). W<br />

przygotowaniu prób wykorzystano kolumny Bond Elut ® Mycotoxin (Varian).<br />

W oznaczeniu zastosowano następujące wzorce wewnętrzne: 13 C-DON, 13 C-T-2,<br />

13 C-HT-2, ZAN. Spośród oznaczanych mikotoksyn w najwyższych stężeniach<br />

występował DON, zarówno w surowcach (2009 – maksymalnie 140 ppb, 2010<br />

– maksymalnie 124 ppb) jak i produktach (2009 – maksymalnie 23.3 ppb, 2010<br />

– maksymalnie 38.8 ppb). Największe stężenie DON wykryto w ziarnie orkiszu<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 231-233<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

231


232<br />

ozimego (140 ppb), jednakże wartość ta jest prawie dziesięciokrotnie niższa<br />

niż najwyższy dopuszczalny poziom DON w nieprzetworzonych zbożach (Rozporządzenie<br />

Komisji (WE) 1881/2006 oraz 1126/2007). W żadnej z badanych<br />

prób nie występował DAS. W ziarnie z 2009 roku oraz produktach z obu lat<br />

nie wykryto także 3-ADON. W przypadku prób surowców zarówno z 2009,<br />

jak i 2010 średnia zawartość toksyn (NIV, 3-ADON, MAS, T-2, HT-2) była<br />

niższa od granicy oznaczalności. Natomiast w produktach występowały tylko<br />

dwie spośród ośmiu analizowanych toksyn: ZEA oraz DON. ZEA wykryto w 4<br />

(2009) i w 5 (2010) próbach produktów. Metabolit ten w największym stężeniu<br />

występował w otrębach (2.52 ppb). Natomiast DON skażone było 40% (2009)<br />

i 27% (2010) produktów, a jego najwyższą zawartość stwierdzono w otrębach<br />

(38.8 ppb). Obecne w surowcach toksyny fuzaryjne mogą być neutralizowane<br />

podczas procesu przetwarzania ziarna, czego przykładem były badane produkty,<br />

w których to średnie zawartości analizowanych mikotoksyn były niższe<br />

w porównaniu do ich poziomu w surowcach. Niewielkie skażenie analizowanych<br />

prób mikotoksynami potwierdza, że orkisz jest odporny na większość<br />

chorób wywołanych grzybami. Ziarno orkiszu chronione jest przed patogenami<br />

i zanieczyszczeniami środowiska przez szczelną łupinę, którą stanowią ściśle<br />

przylegające do siebie plewy.<br />

Badania wykonane w ramach projektu MNiSW nr NN 305 122136.<br />

Summary<br />

OCCURRENCE OF FUSARIUM TOXINS IN SPELT FROM<br />

ECOLOGICAL SYSTEM OF FARMING<br />

Besides einkorn wheat and emmer wheat, spelt is one of the oldest wheat<br />

sub-cultivars. Its cultivation had been given up for a long time, but it has been<br />

recently re-discovered and appreciated. The area of spelt plantations largely<br />

increased during the last 20 years, which can be attributed to quite wide<br />

interests, healthy lifestyle attitude, healthy food, and intensive development of<br />

organic farming. Spelt is valued due to its high nutritional quality, medicinal<br />

properties, and numerous agricultural benefits, among which better resistance<br />

to some fungal diseases as compared to other cereals, and in consequence lower<br />

contamination with mycotoxins, can be supposed as most important.<br />

The aim of the study was determination of trichothecenes and zearalenone<br />

(the secondary metabolites of field fungi) in the spelt wheat grains and their<br />

products, originating from ecological agriculture practice. Material for study<br />

consisted of 53 samples (15 – raw material from 2009, 17 – raw material from<br />

2010, 10 – products 2009, 11 – products 2010) of grains, flakes, bran, flour, groat,<br />

pasta, and coffee. Mycotoxins (T-2 and HT-2 toxins, deoxynivalenol–DON,


nivalenol–NIV, 3-acetyldeoxynivalenol–3-ADON, monoacetoxyscirpenol–MAS,<br />

diacetoxyscirpenol–DAS, and zearalenone–ZEA) were determined using the<br />

HPLC-MS/MS method (3200 QTRAP). During sample preparation procedures,<br />

Bond Elut ® Mycotoxin columns (Varian) were used. The following internal<br />

standards were applied: 13 C-DON, 13 C-T-2, 13 C-HT-2, ZAN. Among determined<br />

mycotoxins, DON was present at highest concentrations, both in raw materials<br />

(2009 – maximum 140 ppb, 2010 – maximum 124 ppb), and products (2009 –<br />

maximum 23.3 ppb, 2010 – maximum 38.8 ppb). The highest level of DON was<br />

recorded in winter spelt grains (140 ppb), although the value was almost 10<br />

times lower than the highest permissible level of DON in non-processed cereals<br />

(Commission Regulations (EC) 1881/2006 and 1126/2007). None of examined<br />

samples contained DAS. The 3-ADON was also absent in grains from 2009<br />

and products from both years. In the case of raw materials both from 2009 and<br />

2010, mean toxins concentrations (NIV, 3-ADON, MAS, T-2, HT-2) were close<br />

to the detection limits, while products contained only two of eight analysed<br />

toxins: ZEA and DON. ZEA was recorded in 4 (2009) and 5 (2010) products,<br />

with the highest concentration in bran (2.52 ppb), whereas 40% (2009) and<br />

27% (2010) of products were contaminated with DON at the highest content<br />

in bran (38.8 ppb). Contaminants present in raw materials can be neutralized<br />

during grain processing, which was illustrated by here examined products:<br />

mean concentrations of determined mycotoxins were lower as compared<br />

to raw materials they were produced from. Negligible contamination of<br />

analyzed samples with mycotoxins confirms that spelt is resistant towards<br />

majority of fungal diseases. The spelt grain is protected against pathogens<br />

and environmental contamination by hermetic coat that is formed by closely<br />

adhering chaffs.<br />

Financial support: Ministry of Science and Higher Education Project no. NN<br />

305 122136.<br />

233


234<br />

OPRACOWANIE PROTOKOŁU KULTYWACJI<br />

ZRÓŻNICOWANYCH GENOTYPÓW DAPHNE<br />

(THYMELAEACEAE) W CELU TESTOWANIA<br />

ODPORNOŚCI NA THIELAVIOPSIS BASICOLA<br />

Ewa Hanus-Fajerska, Alina Wiszniewska<br />

i Przemysław Czaicki<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Katedra Botaniki i Fizjologii Roślin,<br />

Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków<br />

e.hanus@ogr.ur.krakow.pl<br />

Gatunki z rodzaju wawrzynek (Daphne L.) zaliczane są do roślin o dużym<br />

znaczeniu ekonomicznym. Licznych przedstawicieli rodziny wawrzynkowatych<br />

(Thymelaeaceae) z rodzaju Daphne użytkuje się w ogrodnictwie jako <strong>rośliny</strong><br />

ozdobne, a także w przemyśle farmaceutycznym, ze względu na wytwarzanie<br />

metabolitów stosowanych jako związki biologicznie aktywne, do których<br />

należą flawonoidy, diterpeny i lignany. Jednak w uprawie tych roślin napotkano<br />

problemy wywołane podatnością na biotyczne czynniki stresowe. Do ważnych<br />

sprawców chorób wawrzynka zaliczane są patogeny korzeniowe wywołujące<br />

zgorzel bądź czarną zgniliznę korzeni oraz chlorozy pędów. Thielaviposis<br />

basicola (Berk. & Broome) - zasiedlający podłoże nekrogeniczny fitopatogen<br />

o bardzo szerokim spektrum gospodarzy, spotykany jest we wszystkich rejonach<br />

świata. Zwłaszcza wysoki poziom patogeniczności T. basicola zaobserwowano<br />

w stosunku do roślin uprawianych w krajach o klimacie umiarkowanym.<br />

Patogen ten infekuje system korzeniowy ponad stu gatunków zaliczanych do<br />

trzydziestu trzech rodzin botanicznych. Do ważnej grupy patogenów Daphne<br />

sp. należą również wirusy.<br />

Dla wielu gatunków roślin zastosowanie technik in vitro pozwoliło na wydajne<br />

rozmnażanie wegetatywne. Stwarza to również możliwość uzyskania w<br />

stosunkowo krótkim czasie linii o zwiększonym stopniu odporności na choroby<br />

infekcyjne. Niestety większość gatunków Daphne sprawia trudności zarówno<br />

na etapie inicjacji kultur, jak i w trakcie dalszych etapów kultywacji eksplantatów<br />

w kulturach sterylnych. Jednym z powodów warunkujących specyficzność<br />

Daphne w kulturze jest aktywność oksydazy polifenolowej, w wyniku<br />

czego następuje szybkie brunatnienie i śmierć eksplantatów. Ze względu na<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 234-237<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


istniejącą potrzebę opracowania szczegółowych protokołów mikrorozmnażania,<br />

które będą mogły zostać wykorzystane w hodowli odpornościowej oraz<br />

w produkcji wielkotowarowej odmian ozdobnych z tego rodzaju, podjęto badania<br />

zróżnicowanych genotypów wawrzynka. Po uzyskaniu kultur pędowych<br />

Daphne caucasica, D. jasminea, i D. tangutica izolowano eksplantaty wtórne,<br />

które stanowiły szczytowe fragmenty pędów o długości 25 mm. Na etapie<br />

mikrorozmnażania stosowano zestaloną pożywkę propagacyjną zawierającą<br />

zestaw soli mineralnych z pożywki WPM oraz zestaw witamin z pożywki MS<br />

z dodatkiem 1,0 mg dm -3 2iP, 0,1 mg dm -3 NAA, 0,65 g dm -3 glukonianu wapnia,<br />

20 g dm -3 sacharozy i 6,0 g dm -3 węgla aktywowanego. W pożywce propagacyjnej<br />

pH stabilizowano na poziomie 5,6. Pasaże przeprowadzono co cztery<br />

tygodnie. Namnożone pędy ukorzeniano w warunkach sterylnych w perlicie<br />

z dodatkiem płynnej pożywki z 1/3 zawartości makro- i mikroelementów<br />

pożywki WPM oraz zróżnicowanych stężeń IBA. Kultury przetrzymywano<br />

w temperaturze 24°C±2°C. Natężenie promieniowania fotosyntetycznie czynnego<br />

na poziomie kultur wynosiło 80 mmol m -2 s -1 , przy fotoperiodzie 16/8 h.<br />

Jako źródło światła stosowano lampy fluorescencyjne o świetle białym zimnym.<br />

Na podstawie obserwacji makroskopowych, mikroskopowych i pomiarów<br />

biometrycznych dowiedziono, że zastosowany wariant pożywki propagacyjnej<br />

jest odpowiedni do prowadzenia kultur pędowych badanych genotypów. Efektywność<br />

ukorzeniania D. caucasica i D. jasminea na pożywce z dodatkiem<br />

3 mg dm -3 lub 6 mg dm -3 kwasu indolilo 3-octowego wyrażona udziałem procentowym<br />

ukorzenionych pędów okazała się stosunkowo wysoka (50-83%).<br />

Długość korzeni przybyszowych zregenerowanych u tych gatunków różniła się<br />

istotnie od kontroli. Etap ukorzeniania D. tangutica wymaga dalszej optymalizacji.<br />

Fragmentów korzeni przybyszowych użyto jako materiału donorowego<br />

do założenia sterylnych kultur korzeni, które stanowią dogodny i szybki system<br />

testowania podatności poszczególnych genotypów na T. basicola (Hanus-<br />

-Fajerska i in. 2008). Uzyskano kultury korzeni na zestalonych pożywkach<br />

przydatne do identyfikacji materiału roślinnego wykazującego podwyższony<br />

stopień odporności.<br />

Summary<br />

ELABORATION OF TISSUE CULTURE PROTOCOL<br />

TO RESISTANCE TESTING OF DAPHNE GENOTYPES<br />

(THYMELAEACEAE) TO THIELAVIOPSIS BASICOLA<br />

Species belonging to the Daphne L. genus rank among the plant material<br />

with great economic significance. Numerous members of the Thymelaeaceae are<br />

exploited as ornamental plants or material taken advantage for pharmaceutical<br />

industry because of secondary metabolites they produced which are used as<br />

biologically important compounds, especially flavonoids, diterpenes, and lignans.<br />

235


236<br />

However, cultivation of Daphne species encounter difficulties connected<br />

with plant vulnerability to numerous biotic stress factors. Among important<br />

infectious agents, which evoke diseases, are included root phathogens bringing<br />

about canker of roots and shoot chlorosis. Especially detrimental effect results<br />

from the infection of Daphne spp. with Thielaviposis basicola (Berk. & Broome)<br />

– necrotrophic pathogen known from host broad spectrum, and diagnosed all<br />

over the world. Particularly high pathogenicity level have been observed in<br />

plants cultivated in temperate climatic zone. T. basicola infects root system of<br />

more than hundred plant species from thirty three botanical families. Viruses<br />

are also important group of agents infecting Daphne species.<br />

Techniques of plant tissue culture enabled efficient vegetative propagation<br />

of numerous varieties and species. In vitro cultures are also used to obtain,<br />

in relatively short time, lines with elevated resistance to infectious diseases.<br />

Unfortunately majority of Daphne species are difficult to cultivate in vitro<br />

because of activity of polyphenol oxidase. As a result tissue browning takes<br />

place followed by necrotization of explants. Considering the urgent requirement<br />

of elaborating detailed micropropagation protocols, which are needed both in<br />

nursery production and in resistance breeding, we have undertaken experiments<br />

with diverse Daphne genotypes. From previously obtained shoot cultures of<br />

Daphne caucasica, D. jasminea, and D. tangutica, 25 mm long apical shoot<br />

fragments were isolated. During micropropagation stage solidified medium<br />

composed from WPM mineral salts and vitamin set from MS supplemented<br />

with 1.0 mg dm -3 2iP, 0.1 mg dm -3 NAA, 0.65 g dm -3 calcium glukonate, 20 g dm -3<br />

sucrose and 6.0 g dm -3 charcoal. In propagation medium pH was stabilized to<br />

5.6. Plant material was subcultured every four weeks.<br />

Obtained shoots were rooted, in aseptic conditions, in perlite moistened<br />

with liquid medium consisting of 1/3 WPM mineral salt content supplemented<br />

with different level of indole –3-butyric acid (IBA). The culture environment<br />

was maintained at 24°C±2°C, with 8-h dark period per day and 16-h light,<br />

under cool-white fluorescent lamps, with light intensity of 80 mmol m -2 s -1 .<br />

Based on macroscopic observations, microscopic observations, and biometrical<br />

measurements it was proved that applied version of medium is suitable to<br />

micropropagate D. caucasica, D. jasminea, and D. tangutica. The efficiency<br />

of rooting of D. caucasica and D. jasminea on medium supplemented with 3<br />

mg dm -3 or 6 mg dm -3 of indole –3-butyric acid respectively, expressed as the<br />

percentage of rooted shoots was proved to be relatively high (50-83 %). The<br />

length of regenerated adventitious roots were considerably different from<br />

control treatment, whereas the rooting stage of D. tangutica needs subsequent<br />

optimization. Fragments of adventitious roots were used as donor material<br />

to start aseptic root cultures, which underlie convenient and rapid system of<br />

individual genotypes testing to resistance of T. basicola (Hanus-Fajerska et al.<br />

2008). Root cultures were obtained on solidified medium useful to resistance<br />

breeding.


Literatura<br />

Hanus-Fajerska E., Farfar L., Riseman A., 2008: Podatność wawrzynka<br />

główkowego (Daphne cneorum L.) na Thielaviopsis basicola (Berk. & Br.)<br />

Ferrais. Zeszyty Problemowe Postępów Nauk Rolniczych 531: 57–62.<br />

237


238<br />

ZMIENNOŚĆ GENETYCZNA IZOLATÓW<br />

ALTERNARIA BRASSICAE POCHODZĄCYCH<br />

Z TERENU WIELKOPOLSKI<br />

Ewa Jajor, Katarzyna Pieczul, Agnieszka Perek<br />

i Joanna Horoszkiewicz-Janka<br />

Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy, Zakład Mikologii,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

a.perek@iorpib.poznan.pl<br />

Czerń krzyżowych występuje na rzepaku przez cały okres wegetacji i może<br />

być przyczyną strat w plonie nasion o znaczeniu gospodarczym. Do sprawców<br />

tej choroby zalicza się przede wszystkim gatunek Alternaria brassicae (Berkeley)<br />

Saccardo (1880). Celem pracy była molekularna charakterystyka izolatów<br />

A. brassicae pochodzących z terenu Wielkopolski. W badaniach wykorzystano<br />

83 izolaty uzyskane w latach 2007-2009 z liści i łuszczyn rzepaku. Izolację<br />

DNA przeprowadzono przy użyciu, zestawu „DNeasy Plant Mini Kit” (Qiagen).<br />

Dla oceny zróżnicowania genetycznego izolatów A. brassicae zastosowano<br />

analizę PCR - ISSR (83 izolaty) oraz sekwencjonowanie fragmentu DNA<br />

kodującego podjednostki rybosomalne oraz regiony ITS 1 i ITS 2 (15 izolatów).<br />

Wśród badanych izolatów wyodrębniono 14 grup polimorficznych. Ponad połowę<br />

izolatów zaliczono do jednej grupy ISSR, do kolejnych grup 13 oraz 6<br />

izolatów, pozostałe zawierały po 1 lub 2 izolaty. Niewielkie różnice w układzie<br />

produktów reakcji wskazują na wysokie podobieństwo badanych izolatów. Pomiędzy<br />

izolatami nie stwierdzono różnic w sekwencji badanego odcinka DNA.<br />

Dotyczyło to zarówno konserwatywnych podjednostek rybosomalnych, jak i<br />

zmiennych rejonów ITS.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 238-239<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

GENETIC DIVERSITY OF ALTERNARIA BRASSICAE ISOLATES<br />

FROM WIELKOPOLSKA REGION<br />

Alternaria blight occurs on rape for the whole vegetation period and may<br />

be a reason for seed yield loss of economic importance. The disease is mainly<br />

caused by the species Alternaria brassicae (Berkeley) Saccardo (1880). The<br />

aim of the study was molecular characterization of A brassicae isolates from<br />

Wielkopolska region. The research included 83 isolates obtained in the years<br />

2007-2009 from rape leaves and siliques. DNA isolation was performed with<br />

the use of the DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen). The assessment of genetic<br />

diversity of A. brassicae isolates included PCR – ISSR analysis (83 isolates)<br />

and sequencing of the DNA fragment coding ribosomal subunits and ITS 1 and<br />

ITS 2 regions (15 isolates). Fourteen polymorphic groups were distinguished<br />

among the examined isolates. More than a half of the isolates were included<br />

in one ISSR group, then 13 and 6 isolates were included to subsequent groups,<br />

and other groups comprised 1 or 2 isolates each. Slight differences in the<br />

arrangement of reaction products indicate high similarity of the examined<br />

isolates. No significant differences in the sequence of the examined DNA<br />

fragment were found between the isolates – both within conservative ribosomal<br />

subunits and variable ITS regions.<br />

239


240<br />

NOWE DLA POLSKI PATOGENY INWAZYJNE DRZEW<br />

OWOCOWYCH Z RODZAJU MONILINIA<br />

Anna Jakubowska, Monika Michalecka i Anna Bielenin<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18, Skierniewice<br />

anna.jakubowska@insad.pl<br />

Grzyby z rodzaju Monilinia, sprawcy brunatnej zgnilizny drzew owocowych,<br />

powodują corocznie ogromne straty zarówno w wielkości, jak i jakości<br />

plonów. Spośród ponad 20 gatunków tego rodzaju 4 mają duże znaczenie gospodarcze<br />

dla upraw drzew owocowych. Są to: M. laxa, M. fructigena, M. fructicola<br />

i M. polystroma. Dwa pierwsze, M. laxa i M. fructigena występują powszechnie<br />

w Europie, M. fructicola znana jest głównie w krajach Ameryki<br />

Północnej, Środkowej i Południowej, w Australii, Nowej Zelandii i Japonii, natomiast<br />

M. polystroma została dotychczas wykryta w Azji. W związku z rozwojem<br />

międzynarodowego handlu owocami i materiałem szkółkarskim wzrosło<br />

ryzyko rozprzestrzeniania się dwóch ostatnich, z wymienionych, patogenów<br />

na inne kontynenty, w tym także do Europy. We wszystkich krajach Unii Europejskiej<br />

M. fructicola ma status organizmu kwarantannowego (EPPO Lista<br />

A2) i podlega obowiązkowi zwalczania na wszystkich roślinach gospodarzach.<br />

W ostatnich latach gatunek ten wykryto w 11 krajach środkowo-zachodniej<br />

Europy. Występowanie M. polystroma, jak dotychczas potwierdzono w jednym<br />

komercyjnym sadzie na Węgrzech (Petróczy i Palkovics 2009). Ze względu na<br />

duże podobieństwo morfologiczne gatunków Monilinia spp. oraz możliwość<br />

ich współwystępowania na jednym gospodarzu, w celu dokładnej identyfikacji<br />

niezbędne jest zastosowanie metod molekularnych (Hughes i in. 2000, Ioos<br />

i Frey 2000, Côté i in. 2004).<br />

Celem badań była morfologiczna i molekularna identyfikacja sprawców brunatnej<br />

zgnilizny drzew owocowych w Polsce. W ramach badań nad występowaniem<br />

choroby, w 2010 roku zebrano około 700 porażonych owoców z jabłoni,<br />

brzoskwini, czereśni, wiśni i śliwy, pochodzących z różnych regionów kraju.<br />

Z pobranych próbek wycinano aseptycznie fragment miąższu z pogranicza<br />

<strong>zdrowe</strong>j i chorej tkanki, który umieszczano na pożywkę ziemniaczano-glukozową<br />

(PDA). Utworzono kolekcję 500 izolatów Monilinia spp. Ich identyfikację<br />

przeprowadzono w oparciu o klucz Lane’a (2002) oceniając wygląd kultur na<br />

pożywce, a także przy użyciu techniki multiplex PCR (Côté i in. 2004). Zasto-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 240-243<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


sowane metody pozwoliły na zaklasyfikowanie 5 izolatów do gatunku M. fructicola<br />

i 20 izolatów do gatunku M. polystroma. Pozostałe izolaty zidentyfikowano<br />

jako M. fructigena i M. laxa.<br />

W celu potwierdzenia przynależności gatunkowej wybranych izolatów<br />

M. fructicola i M. polystroma przygotowano kultury jednozarodnikowe, z których<br />

izolowano DNA. DNA amplifikowano w reakcji PCR odpowiednio ze starterami<br />

Mfc-F1 i Mfc-R1 (Hughes i in. 2000) specyficznymi do regionu ITS M. fructicola<br />

oraz starterami ITS4Mfgn (Ioos i Frey 2000) i ITSMonilia (Petróczy i Palkovics<br />

2009) specyficznymi do regionu ITS M. polystroma, a następnie sekwencjonowano.<br />

Analiza sekwencji wykazała największe podobieństwo izolatów z Polski do<br />

gatunków M. fructicola i M. polystroma.<br />

Patogeniczność izolatów M. fructicola i M. polystroma sprawdzano na śliwkach<br />

oraz jabłkach. Owoce inokulowano umieszczając pod skórką fragment<br />

grzybni pobranej z 7-dniowej kultury rosnącej na podłożu PDA. Po 3 dobach<br />

inkubacji w temperaturze pokojowej, wokół miejsca inokulacji obserwowano<br />

pojawienie się brunatnych plam gnilnych, obejmujących stosunkowo szybko<br />

cały owoc. Patogena reizolowano na pożywkę, a przynależność gatunkową potwierdzono<br />

na podstawie morfologii uzyskanych kultur i wyników amplifikacji<br />

DNA ze starterami komplementarnymi do regionu ITS M. fructicola i ITS<br />

M. polystroma.<br />

Przeprowadzone badania pozwoliły na identyfikację i charakterystykę izolatów<br />

M. fructicola wyizolowanych ze śliwek zebranych z Sadu Doświadczalnego<br />

IO w Dąbrowicach k/ Skierniewic oraz izolatów M. polystroma uzyskanych<br />

z jabłek, śliwek i owoców brzoskwini pochodzących z sadów zlokalizowanych<br />

na Górnym Śląsku (Zawada), w Nowym Dworze k/ Skierniewic i w Skierniewicach.<br />

Zarówno M. fructicola, jak i M. polystroma zostały wykryte w Polsce<br />

po raz pierwszy.<br />

Summary<br />

PATHOGENS OF FRUIT TREES BELONGING TO THE GENUS<br />

MONILINIA – NEW INVASIVE SPECIES FOR POLAND<br />

Fungi belonging to genus Monilinia, the causal agents of brown rot of fruit<br />

trees, bring huge losses in both quantity and quality of the crops each year.<br />

From over 20 species of this genus 4 are of great economic importance in the fruit<br />

production: M. laxa, M. fructigena, M. fructicola and M. polystroma. M. laxa and<br />

M. fructigena are common pathogens in Europe, M. fructicola is known mainly<br />

in countries of North, Central and South America, in Australia, New Zealand<br />

and Japan. M. polystroma has been detected in Asia so far. As a consequence<br />

of international trade development with fruits and nursery material, the risk<br />

of spread the later two pathogens to other continents, including Europe has<br />

been increased. M. fructicola is a quarantine pest for Europe (EPPO A2 list)<br />

241


242<br />

and subjected to the obligatory control in all host plants. During few years this<br />

species was detected in 11 countries in Central and Western Europe. Presence<br />

of M. polystroma was recently detected in one commercial orchard in Hungary<br />

(Petróczy and Palkovics 2009). Concerning the high morphological similarity<br />

between various Monilinia species and the possibility of their coexistence on<br />

the same host there is a need of application a molecular methods allowing for<br />

proper species identification (Hughes et al. 2000, Ioos and Frey 2000, Côté et<br />

al. 2004).<br />

The aim of this study was morphological and molecular identification of causal<br />

agents of brown rot disease in Poland. In 2010 about 700 infected fruits of apple,<br />

peach, cherry, sour cherry and plum were collected in various geographical<br />

regions in Poland. From each fruit sample the small segment from the border of<br />

healthy and diseased tissue were aseptically cut out and placed on 4 % potato<br />

dextrose agar (PDA) medium. Then collection of 500 isolates of Monilinia spp.<br />

was created. Their identification was performed using the key described by Lane<br />

(2002) based on examination of cultural characters on the medium and using<br />

multiplex PCR method of Côté et al. (2004). The morphological and molecular<br />

characterization allowed for classification of 5 isolates to M. fructicola and 20<br />

isolates to M. polystroma. The other isolates were identified as M. fructigena or<br />

M. laxa.<br />

To confirm the species affiliation of selected M. fructicola and M. polystroma<br />

isolates, monoconidial cultures were prepared and DNA was isolated. DNA was<br />

subsequently amplified in PCR with primers Mfc-F1 and Mfc-R1 (Hughes et al.<br />

2000) specific to ITS region of M. fructicola and with primers ITS4Mfgn (Ioos &<br />

Frey 2000) and ITSMonilia (Petróczy & Palkovics 2009) specific to ITS region of<br />

M. polystroma respectively. Sequence analysis showed the highest similarity of<br />

isolates from Poland to the species of M. fructicola and M. polystroma.<br />

Pathogenicity of M. fructicola and M. polystroma isolates were tested on<br />

mature plum and apple fruits. The fruits were inoculated by placing under the<br />

fruit epidermis a small mycelial plug, cut from the edge of a 7-day-old culture<br />

incubated on PDA medium. After 3 days of incubation at room temperature,<br />

around the inoculation site the brown area was observed, which finally covered<br />

the whole fruit surface relatively quickly. On the basis of growth characteristic<br />

and results obtained after DNA amplification with primers complementary to<br />

the ITS region of M. fructicola and ITS region of M. polystroma, their belonging<br />

to the species was confirmed.<br />

This study allowed for identification and characterization of M. fructicola<br />

isolates collected from plum orchard in Experiment Station Dąbrowice near<br />

Skierniewice as well as M. polystroma isolates obtained from apple, plum and<br />

peach orchards situated in Zawada (Górny Śląsk), Nowy Dwór near Skierniewice<br />

and in Skierniewice. M. fructicola and M. polystroma were detected in Poland<br />

for the first time.


Literatura<br />

Côté M.J., Tardif M.C., Meldrum A.J., 2004: Identification of Monilinia fructigena,<br />

M. fructicola, M. laxa, and M. polystroma on inoculated and naturally<br />

infected fruit using multiplex PCR. Plant Disease 88: 1219–1225.<br />

Hughes K.J.D., Fulton C.E., McReynolds D., Lane C.R., 2000: Development<br />

of new PCR primers for identification of Monilinia species. EPPO Bulletin<br />

30: 507–511.<br />

Ioos R., Frey P., 2000: Genomic variation within Monilinia laxa, M. fructigena<br />

and M. fructicola, and application to species identification by PCR. European<br />

Journal of Plant Pathology 106: 373–378.<br />

Lane C.R., 2002: A synoptic key for differentiation of Monilinia fructicola,<br />

M. fructigena and M. laxa, based on examination of cultural characters.<br />

EPPO Bulletin 32: 489–493.<br />

Petróczy M., Palkovics L., 2009: First report of Monilia polystroma on apple in<br />

Hungary. European Journal of Plant Pathology 125: 343–347.<br />

243


244<br />

PLON OWOCÓW I GRZYBY ZASIEDLAJĄCE PERYKARP<br />

PAPRYKI SŁODKIEJ (CAPSICUM ANNUUM L.)<br />

UPRAWIANEJ W POLU<br />

Agnieszka Jamiołkowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie, Katedra Ochrony i Kwarantanny Roślin,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

aguto@wp.pl<br />

Badania były prowadzone w latach 2007-2009. Ich celem była ocena plonu<br />

i zdrowotności owoców wybranych odmian papryki słodkiej. Materiał badawczy<br />

stanowiło osiem odmian papryki uprawianej w polu: Barbórka, Caryca F1,<br />

Mercedes, Ożarowska, Podstolina, Roberta F1, Robertina, Rumba F1. Owoce<br />

były zbierane kilka razy w sezonie wegetacyjnym. Oceniano średni ogólny plon<br />

owoców, a uzyskane wyniki opracowano statystycznie poddając je analizie<br />

wariancji. Różnice statystyczne porównywano testem Tukey’a przy poziomie<br />

istotności p=0,05. W pełni owocowania papryki (pierwsza dekada września)<br />

z każdej odmiany, pobierano losowo po 40 owoców do analizy mikologicznej.<br />

Fragmenty perykarpu papryki były wykładane na pożywkę mineralną. Plon<br />

handlowy papryki dla badanych odmian w okresie 3 lat wahał się od 0,7 kg/ m 2<br />

(Podstolina 2008 r.) do 3,30 kg/m 2 (Rumba 2007 r.). Najwyższy plon owoców<br />

chorych uzyskano z odmiany Podstolina (1,36 kg/m 2 ; 2008 r.), a najniższy<br />

z odmiany Rumba F1 (0,27 kg/m 2 ; 2009 r.). Analiza mikologiczna owoców wykazała,<br />

że grzyby najliczniej zasiedlające perykarp papryki to A. alternata,<br />

B. cinerea, Fusarium avenaceum, F. culmorum i Trichoderma spp. Najmniej<br />

grzybów izolowano w 2007 roku, gdy sezon wegetacyjny był najcieplejszy<br />

i charakteryzował się najmniejszą liczbą opadów. W okresie trzyletnich badań<br />

najmniej grzybów izolowano z odmian Rumba F1, Robertina, a najwięcej<br />

z odmian Ożarowska i Roberta F1. Z owoców papryki najliczniej izolowano<br />

A. alternata (od 12,8 do 46,4 % ogółu wyosobnień), które pochodziły z odmian<br />

Podstolina (2007) i Roberta F1 (2009). Kolejnym patogenem licznie występującym<br />

na owocach był B. cinerea. Najliczniej izolowanym w 2008 roku, głównie<br />

z odmian Ożarowska (100 %), Caryca F1 (86 %) i Roberta F1 (84 %).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 244-245<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

YIELD AND FUNGI COLONIZING FRUIT PERICARP OF SWEET<br />

PEPPER (CAPSICUM ANNUUM L.) CULTIVATED IN THE FIELD.<br />

The study was carried out in 2007-2009. The aim of the experiment<br />

was to estimate the yield and health of some cultivars of sweet pepper.<br />

The experimental material consisted fruits of eight cultivars of sweet<br />

pepper cultivated in the field: Barbórka, Caryca F1, Mercedes, Ożarowska,<br />

Podstolina, Roberta F1, Robertina, Rumba F1. The fruits were harvested<br />

many times in vegetable season. In experiment the mean yield of pepper was<br />

measured. The results were statistically evaluated with the variance analysis.<br />

Significance of the differences was tested with Tukey’s test at p=0.05. During<br />

full fruiting (first decade of September), 40 fruits from each cultivar were<br />

sampled for mycological analysis in the laboratory. Fragments of pericarp<br />

were placed on mineral medium in Petri dishes. Marketable yield of pepper<br />

fruits was measured in the 3 years of experiment, and it ranged from 0.7kg/m 2<br />

(Podstolina 2008) to 3.30 kg/m 2 (Rumba 2007). The highest marketable yield<br />

was collected from Roberta in 2007, while the lowest one from Podstolina in<br />

2009. From pepper pericarp A. alternata, B. cinerea, Fusarium avenaceum,<br />

F. culmorum and Trichoderma spp. were isolated. The lowest number of<br />

isolates was isolated in 2007 year, when the vegetable season was warm and<br />

dry. Least isolates were collected from Rumba F1 and Robertina, and most<br />

from Ożarowska and Roberta F1. The frequency of A. alternata was very high<br />

(12.8-46.4 % of fungal populations) for Postolina (2007) and Roberta F1 (2009)<br />

cultivars. B. cinerea was abundant in pericarp of pepper in 2008, especially in<br />

Ożarowska (100 %), Caryca F1 (86 %) and Roberta F1 (84 %).<br />

245


246<br />

SKUTECZNOŚĆ WYBRANYCH ŚRODKÓW<br />

BIOLOGICZNYCH I CHEMICZNYCH STOSOWANYCH<br />

W UPRAWACH PIETRUSZKI NA NASIONA<br />

Regina Janas, Jan Sobolewski i Józef Robak<br />

Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

rjanas@insad.pl<br />

W ostatnich latach obserwuje się spadek powierzchni upraw pietruszki<br />

i zmniejszające się zainteresowanie jej produkcją na korzyść uprawy pasternaku.<br />

Główną przyczyną jest słaba jakość nasion, niska zdolność kiełkowania,<br />

powodowana przede wszystkim wysokim zasiedleniem nasion patogeniczną<br />

mikroflorą i w konsekwencji słabe, nierównomierne wschody roślin oraz niskie<br />

plony. Dwuletnia uprawa roślin pietruszki na nasiona stwarza także duże ryzyko<br />

pojawiania się trudnych do zwalczania chorób grzybowych często przenoszonych<br />

z materiałem siewnym. Dlatego poszukuje się nowych, skutecznych<br />

środków, kompleksowo chroniących plantacje pietruszki przed chorobami,<br />

a także stymulujących odporność roślin.<br />

Celem badań była ocena skuteczności wybranych środków biologicznych<br />

i chemicznych aplikowanych donasiennie, dolistnie i doglebowo w uprawach<br />

pietruszki na nasiona.<br />

Badania prowadzono na polu doświadczalnym Instytutu Warzywnictwa<br />

i Instytutu Sadownictwa i Kwiaciarstwa (obecnie Instytut Ogrodnictwa)<br />

w Skierniewicach w latach 2008-2010. Obiektem badań były nasiona i <strong>rośliny</strong><br />

pietruszki korzeniowej odmiany Berlińska. Doświadczenia polowe, ścisłe,<br />

założono w układzie losowanych bloków w 4 powtórzeniach, wielkość poletek<br />

wynosiła 4,5 m 2 . Środki ochrony stosowano zgodnie z aktualnym programem<br />

ochrony roślin. Schemat zastosowanych środków przedstawiono poniżej (dawki<br />

środków w przeliczeniu na 1 kg nasion):<br />

1. Kontrola - nasiona nietraktowane<br />

2. Zaprawa Nasienna T 75 DS/WS - 1ml + Biojodis<br />

3. Grevit 200 SL (ekstrakt z grejpfruta) 10 ml - donasiennie (moczenie 30<br />

minut) + Biojodis (dolistnie)<br />

Nasiona wysiewano siewnikiem ręcznym, stosując normę 50 g nasion . 100 m –2 .<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 246-248<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Oceniono wpływ preparatów na jakość nasion (energię i zdolność kiełkowania),<br />

zdrowotność oraz stopień porażenia korzeni i plon roślin.<br />

Ocenę porażenia korzeni na przekroju poprzecznym prowadzono wykorzystując<br />

skalę bonitacyjną: 0 o - brak porażenia, 7 o - 100 procent porażonej powierzchni.<br />

Ocenę zdolności kiełkowania nasion przeprowadzono zgodnie z wymogami<br />

ISTA. Badano po 200 sztuk nasion z każdej kombinacji. Nasiona wykładano<br />

w szalkach Petriego na nasączonej wodą destylowaną bibule filtracyjnej, po 25<br />

sztuk w 8 powtórzeniach i inkubowano w termostacie w temp.30 o C. Po upływie<br />

10 dni oceniono energię kiełkowania a po 28 dniach zdolność kiełkowania.<br />

Zdrowotność nasion określono metodą sztucznych kultur stosując pożywkę<br />

dekstrozowo – ziemniaczaną (PDA). Nasiona wysiewano na podłoże pożywkowe<br />

w szalkach Petriego po 5 nasion przeznaczając do analizy po 250 nasion z<br />

każdej partii (50 powtórzeń) i inkubowano w termostacie w temp. 20 o C przez 7<br />

dni. Identyfikację przeprowadzono przy pomocy mikroskopu świetlnego Leica.<br />

Wyniki badań wskazują, że najlepsze efekty ochronne w uprawach pietruszki<br />

na nasiona uzyskano po łącznej aplikacji zaprawy Nasiennej T do zaprawiania<br />

nasion a następnie 4 krotnej aplikacji doglebowej preparatu Biojodis.<br />

Wymienione preparaty w największym stopniu ograniczały występowanie<br />

zgorzeli siewek i zgnilizny korzeni pietruszki w porównaniu z innymi kombinacjami.<br />

W rezultacie otrzymano najlepsze wschody roślin i najwyższy plon<br />

ogólny korzeni pietruszki w stosunku do kontroli i pozostałych kombinacji.<br />

Wynosił on odpowiednio 271,0 kg . 100 m -2 , 213,0 kg . 100 m -2 - kontrola, 230,0<br />

kg . 100 m -2 – Grevit + Biojodis. Zastosowanie zaprawy nasiennej T i dolistnej<br />

aplikacji Biojodisu wpłynęło pozytywnie na jakość i zdrowotność nasion pietruszki<br />

oraz plony nasion.<br />

Summary<br />

EFFECTIVENESS OF SOME BIOLOGICAL AND CHEMICAL<br />

COMPOUNDS USED IN THE PARSLEY SEEDS PRODUCTION<br />

In recent years, a decline in area planted with parsley and a declining<br />

interest in the crop production in favor of the parsnip are observed. The main<br />

cause is poor quality seeds, poor germination, mainly caused by high pathogenic<br />

microflora occupation of seeds and consequently weak, poor plant emergence<br />

and low yields.<br />

Thus, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of selected<br />

biological and chemical agents applied to seeds, leaves and to the soil in the<br />

parsley seed production.<br />

The results show that the best protective effects on parsley seeds was<br />

obtained after the total applications of the Mortar T to seeds and then the four<br />

times soil application with Biojodis.<br />

247


248<br />

These preparations limited greatly the presence of seedling dumping of and<br />

root rot of parsley in comparison with other combinations. The result is the<br />

best plant emergence and the highest total yield of parsley roots compared to<br />

controls and other combinations. It was respectively 271,0 kg . 100 m -2 , 213,0<br />

kg . 100 m -2 - control , 230,0 kg . 100 m -2 -Grevit + Biojodis. The use of Mortar T<br />

to seeds and the foliar application of Biojodis positively affect the quality and<br />

healthiness of parsley seeds and their yield.


MIKOFLORA NASION ROKIETTY SIEWNEJ (ERUCA<br />

SATIVA) UPRAWIANEJ W SYSTEMIE EKOLOGICZNYM<br />

Regina Janas<br />

Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

rjanas@insad.pl<br />

Rokietta siewna (Eruca sativa) popularnie nazywana rukolą jest jednoroczną<br />

rośliną z rodziny Brassicaceae zdobywającą na świecie coraz większą popularność<br />

ze względu na właściwości prozdrowotne i szerokie możliwości wielokierunkowego<br />

użytkowania. Roślina pochodzi z Basenu Morza Śródziemnego<br />

i z łatwością adaptuje się w warunkach klimatycznych Polski. Ma krótki cykl<br />

uprawy, wytwarza nasiona w tym samym roku, charakteryzuje się wysoką plennością<br />

i wyższą w porównaniu z innymi gatunkami tej rodziny botanicznej zawartością<br />

związków prozdrowotnych. Cenną właściwością rokietty siewnej jest<br />

wytwarzanie nasion olejodajnych, bogatych w nienasycone kwasy tłuszczowe<br />

i inne związki chemiczne, stymulujące odporność i wigor człowieka. Światowa<br />

literatura donosi, że stosowane jako suplement diety mają działanie antykancerogenne,<br />

stymulują odporność i siły witalne. Wyciąg z nasion ma działanie<br />

antybakteryjne i antygrzybowe. Roślina oddziaływuje na wiele gatunków allelopatycznie<br />

dodatnio i ma właściwości fitosanitarne. Dotychczasowe prace wskazują,<br />

że rokietta siewna może znaleźć zastosowanie w wielu gałęziach przemysłu<br />

m.in. w przemyśle farmaceutycznym, spożywczym i maszynowym.<br />

Celem badań było opracowanie ekologicznych metod produkcji nasion rokietty<br />

siewnej o wysokiej zdrowotności i jakości oraz wartości technologicznej.<br />

Badania prowadzono w latach 2009 – 2010 na polu doświadczalnym Instytutu<br />

Ogrodnictwa w Skierniewicach. W uprawach testowano preparaty biologiczne<br />

o różnych mechanizmach działania i oceniono ich wpływ na wzrost, rozwój<br />

i zdrowotność roślin rokietty siewnej oraz zawiązywanie nasion, ich plon,<br />

jakość i zasiedlenie mikoflorą. Uwzględniono 7 preparatów biologicznych, aplikowanych<br />

w uprawach polowych roślin nasiennych w różnych kombinacjach:<br />

1. Biojodis dolistnie, 2. EM doglebowo, 3.Tytanit dolistnie, 4.Polyversum doglebowo,<br />

5. Goemar BM 86 dolistnie, 6.Physe dolistnie, 7. Nano Gro doglebowo.<br />

Oceniano zdrowotność roślin nasiennych, porażenie nasion przez grzyby<br />

patogeniczne, energię i zdolność kiełkowania, masę tysiąca nasion masę na-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 249-251<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

249


250<br />

sion z <strong>rośliny</strong>, plon ogólny nasion, oraz wzrost siewek na płytkach Phytotoxit.<br />

Wykonano również pomiary biometryczne roślin, zawartości chlorofilu i aktywności<br />

fotosyntetycznej.<br />

Z nasion rokiety siewnej reprodukowanych w ramach doświadczeń izolowano<br />

głównie grzyby z rodzaju Alternaria należące do gatunków A. alternata,<br />

A. brassicicola, A. brassicae, Fusarium – głównie gatunek F. avenaceum i sporadycznie<br />

F.culmorum, Dreschlera, Cladosporium herbarum, Stemphylium<br />

botryosum, Trichothecium roseum, Epicoccum purpurascens i w niewielkim<br />

procencie Trichoderma viridae. Porażenie nasion było zróżnicowane w zależności<br />

od rodzaju stosowanego w uprawach środka i sposobu aplikacji. Najniższe<br />

porażenie nasion odnotowano w kombinacjach, w których <strong>rośliny</strong> nasienne<br />

traktowano dolistnie preparatem Biojodis, Physe oraz Nano Gro – stosowanym<br />

donasiennie i doglebowo.<br />

Summary<br />

MYCOFLORA OF ROCKET (ERUCA SATIVA) SEEDS GROWN<br />

IN THE ORGANIC SYSTEM<br />

Rocket (Eruca sativa) seeds, popularly known as arugula, is a one plant of<br />

the Brassicaceae family. Its popularity is increasing in the world last times<br />

because of the health benefits and great opportunities multi-use. The plant<br />

comes from the Mediterranean and easily adapts to Polish climatic conditions.<br />

It has a short growing cycle, it produces seeds in the same year, has high vigor<br />

and higher quantity of healthy compounds than other species of the botanical<br />

family. Valuable feature is the production of rocket seeds containing oil, rich in<br />

unsaturated fatty acids and other chemicals which stimulate human immunity<br />

and vigor. The world literature reports that rocket seeds used as a dietary<br />

supplement exhibit the anti cancer effects and stimulate immunity and vitality<br />

of human. Extract from the seeds has antibacterial, antifungal, allelopatic and<br />

phytosanitary properties. Previous work indicates that the rocket seed can be<br />

used in the pharmaceutical, food and machinery industries.<br />

The aim of this study was to develop the organic production methods of<br />

rocket seeds exhibiting the high health status, quality and technological value.<br />

The study was conducted in the 2009–2010 years on experimental field of the<br />

Research Institute of Horticulture in Skierniewice. In experiments, the biological<br />

compounds having different mechanisms of action, were tested. It was assesses<br />

their impact on growth, development, plant health, as well as formation of seeds,<br />

their yield, quality and microflora settlement. Seven biological compounds were<br />

applied in field and in different combinations:1st Biojodis (foliar), 2. EM (soil),<br />

3. Tytanit (foliar) , 4. Polyversum (soil), 5. Goëmar BM 86 (foliar), 6. Physe<br />

(foliar), 7. Nano Gro (soil).


Evaluated were: the health of plants, seed infection by pathogenic fungi,<br />

energy and germination capacity, weight, thousand seed weight per plant,<br />

total yield of seeds and growth of seedlings on Phytotoxit plates. Biometric<br />

measurements of plants were made also, as well as chlorophyll content in<br />

leaves and photosynthetic activity in plants.<br />

The results show, that from the rocket seed reproduced in the experiments,<br />

were isolated: mainly fungi from the genus Alternaria belonging to the species<br />

A. Alternata and also A. brassicicola, A. brassicae, Fusarium - mainly the<br />

species F. avenaceum, and occasionally F.culmorum, Dreschlera, Cladosporium<br />

herbarum, Stemphylium botryosum, Trichothecium roseum, Epicoccum<br />

purpurascens, and a small percentage of Trichoderma viridae. Contamination<br />

of seeds by fungi was varied depending on the used compound and method of<br />

its application. The lowest infection was observed in combinations, in which<br />

the plants were sprayed with Biojodis and Physe, why Nano Gro was used to<br />

seeds and soil.<br />

251


252<br />

GRZYBY OFIOSTOMATOIDALNE JAKO POSPOLITE<br />

SYMBIONTY KORNIKÓW ŻERUJĄCYCH NA DRZEWACH<br />

IGLASTYCH W POLSCE: PRZEGLĄD 10 LETNICH BADAŃ<br />

Robert Jankowiak<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

Al. 29 Listopada 46, 31-425 Kraków<br />

rljankow@cyf-kr.edu.pl<br />

Korniki (Coleoptera: Scolytidae) są związane z wieloma gatunkami grzybów.<br />

Najbardziej znanymi symbiontami tych owadów są grzyby ofostomatoidalne,<br />

które obejmują workowce należące do takich rodzajów jak Grosmannia,<br />

Ophiostoma, Ceratocystis i Ceratocystiopsis jak i grzyby anamorficzne z rodzajów<br />

Pesotum i Leptographium.<br />

W trakcie badań zebrano 5 785 chrząszczy i prawie 30 tys. fragmentów<br />

żerowisk należących do 19 gatunków korników. Chrząszcze i żerowiska pochodziły<br />

z 20 drzewostanów zlokalizowanych w różnych rejonach Polski. Grzyby<br />

izolowano z chrząszczy i żerowisk na 2 % pożywkę agarowo-maltozową (MEA)<br />

lub na selektywną pożywkę dla grzybów należących do Ophiostoma sensu lato<br />

(CMEA). Grzyby identyfikowano na podstawie cech morfologicznych. W niektórych<br />

przypadkach identyfikacja była potwierdzana także przez sekwencjonowanie<br />

DNA wybranych szczepów grzybów. Dodatkowo dla wybranych gatunków<br />

korników badano wstępne stadia sukcesji grzybów na świerku, sośnie<br />

i modrzewiu po ataku korników. W celu ustalenia stopnia patogeniczności<br />

wybranych gatunków grzybów wykonywano także testy patogeniczności z wykorzystaniem<br />

2-letnich sadzonek.<br />

Badania wykazały duże zróżnicowanie gatunkowe grzybów związanych<br />

z kornikami. Podczas badań zidentyfikowano 44 cztery gatunki grzybów ofiostomatoidalnych<br />

reprezentujących takie rodzaje jak Ambrosiella, Ceratocystiopsis,<br />

Ceratocystis, Grosmannia, Ophiostoma, Graphium, Leptographium,<br />

Pesotum i Sporothrix. Wyniki badań pokazały, że grzyby ofiostomatoidalne, za<br />

wyjątkiem Pityogenes bidentatus i Pityophthorus pityographus, były związane<br />

z wieloma gatunkami korników. Ustalono, że podstawowym czynnikiem wpływającym<br />

na różnicę w składzie gatunkowym mikobioty związanej z poszczególnymi<br />

gatunkami korników jest gatunek <strong>rośliny</strong> żywicielskiej oraz część<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 252-254<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


drzewa na której żerują korniki. Do najważniejszych symbiontów grzybowych<br />

korników występujących na sośnie (a), świerku (b), modrzewiu (c) i jodle (d)<br />

należały: a) Ambrosiella ips, A. tingens, Leptographium lundbergii, L. procerum,<br />

Ophiostoma brunneo-ciliatum, O. canum, O. canum-like, O. ips, O. minus<br />

O. piceae s. lato, Ophiostoma sp. 1, Ophiostoma sp. 2; b) Ceratocystis polonica,<br />

Grosmannia piceaperda, G. penicillata, Ophiostoma ainoae, O. bicolor,<br />

O. brunneo-ciliatum, O. piceae; c) Ceratocystis laricicola, Graphium laricis,<br />

Ophiostoma brunneo-ciliatum; d) Ophiostoma piceae, Pesotum sp.<br />

Schemat sukcesji grzybów w drewnie sosny zwyczajnej, świerka pospolitego<br />

i modrzewia europejskiego po ataku Tomicus spp., Ips typographus i I. cembrae<br />

nie odbiegał zasadniczo od ogólnego schematu przyjętego dla sukcesji<br />

grzybów w drewnie opanowanym przez korniki. Ceratocystis polonica i C. laricicola<br />

to pierwsi kolonizatorzy drewna świerka i modrzewia, zaś O. minus<br />

i A. tingens to pierwsi „najeźdźcy” drewna sosny. Później, drewno bielaste zasiedlały<br />

inny grzyby z rodzaju Ophiostoma, Leptographium, Graphium i Pesotum.<br />

Przeprowadzone testy patogeniczności wykazały, że większość grzybów<br />

związanych z badanymi kornikami to saprotrofy bądź słabe patogeny. Jednakże<br />

C. laricicola, C. polonica, G. piceaperda, L. wingfieldii i O. minus odznaczały<br />

się wysokim stopniem wirulencji w stosunku do swoich roślin żywicielskich.<br />

Summary<br />

OPHIOSTOMATOID FUNGI AS COMMON SYMBIONTS OF BARK<br />

BEETLES INFESTING CONIFEROUS TREES IN POLAND:<br />

AN OVERVIEW OF 10 YEAR STUDY<br />

Bark beetles (Coleoptera: Scolytidae) are frequently associated with<br />

fungi. The known fungal associates of these insects are ophiostomatoid fungi<br />

including ascomycetes of the genera Grosmannia, Ophiostoma, Ceratocystis<br />

and Ceratocystiopsis, and the anamorphic genera Pesotum and Leptographium.<br />

In total, 5 785 adults and almost 30 000 fragments of galleries representing<br />

19 species of bark beetle were collected in twenty stands in Poland. Fungi<br />

were isolated from beetles and their galleries on 2 % malt agar (MEA) or<br />

malt agar with cyclohexamide (CMEA) to select for the Ophiostoma species.<br />

Fungi were identified on the basis of morphological characteristics. In some<br />

cases identification based on morphology was confirmed by DNA sequencing<br />

of selected isolates. In addition, for selected species of bark beetle, the early<br />

succession of fungi in the sapwood of host trees after insect attack was<br />

described. The virulence of the most common ophiostomatoid species was also<br />

evaluated through inoculations using two-year-old seedlings.<br />

The study demonstrates a great diversity of fungi associated with bark<br />

beetles in Poland. Forty-four species of ophiostomatoid fungi, including<br />

253


254<br />

Ambrosiella, Ceratocystiopsis, Ceratocystis, Grosmannia, Ophiostoma,<br />

Graphium, Leptographium, Pesotum and Sporothrix spp. were identified. Except<br />

Pityogenes bidentatus and Pityophthorus pityographus, the ophiostomatoid<br />

fungi were associated with many species of bark beetles. The primary factor<br />

affecting the mycobiota of species of bark beetle was host tree species and part<br />

of the tree infested by beetles. The most important fungal symbionts of bark<br />

beetles infesting pine (a), spruce (b), larch (c) and fir (d) were: a) Ambrosiella<br />

ips, A. tingens, Leptographium lundbergii, L. procerum, Ophiostoma brunneociliatum,<br />

O. canum, O. canum-like, O. ips, O. minus, O. piceae s. lato,<br />

Ophiostoma sp. 1, Ophiostoma sp. 2; b) Ceratocystis polonica, Grosmannia<br />

piceaperda, G. penicillata, Ophiostoma ainoae, O. bicolor, O. brunneo-ciliatum,<br />

O. piceae s. lato; c) Ceratocystis laricicola, Graphium laricis, Ophiostoma<br />

brunneo-ciliatum; d) Ophiostoma piceae s. lato, Pesotum sp.<br />

The pattern of fungal succession in Scots pine, Norway spruce and European<br />

larch sapwood essentially agreed with a general scheme of fungal succession in<br />

tree sapwood infested by bark beetles. Ceratocystis polonica and C. laricicola<br />

were the first coloniser of spruce and larch sapwood, while O. minus and<br />

A. tingens was the first invader of pine sapwood. Later, other ophiostomatoid<br />

species colonized sapwood of trees. The pathogenicity tests showed that many<br />

of fungi associated with bark beetles were saprotrophs or weak pathogens.<br />

However, C. laricicola, C. polonica, G. piceaperda, L. wingfieldii and O. minus<br />

demonstrated high level of virulence to host trees.


WPŁYW TEMPERATURY NA WZROST<br />

I PRZEŻYWALNOŚĆ KOLONII DWÓCH GATUNKÓW<br />

GRZYBÓW Z RODZAJU GEOSMITHIA<br />

Robert Jankowiak<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

Al. 29 Listopada 46, 31-425 Kraków<br />

rljankow@cyf-kr.edu.pl<br />

Korniki (Coleoptera: Scolytidae) są najczęściej związane z grzybami ofiostomatoidalnymi,<br />

które obejmują morfologicznie podobne rodzaje: Ceratocystis,<br />

Ceratocystiopsis, Cornuvesica, Gondwanamyces, Grosmannia i Ophiostoma.<br />

Oprócz nich, także grzyby z rodzaju Geosmithia (Ascomycota: Hypocreales) są<br />

integralnym składnikiem mikobioty korników żerujących na drzewach liściastych.<br />

Jednakże, informacje o związkach zachodzących pomiędzy tymi grzybami<br />

i roślinami z rodziny Pinaceae są ograniczone. Ostatnio wykazano, że<br />

grzyby z rodzaju Geosmithia są pospolitymi symbiontami Pityogenes bidentatus<br />

- kornika, który żeruje na cienkich gałęziach i strzałkach sosny zwyczajnej.<br />

Uważa się, że kornik ten w przeciwieństwie do innych gatunków owadów,<br />

nie jest zdolny utrzymywać mutualistycznego związku z grzybami ofiostomatoidalnymi,<br />

gdyż te nie są zaadoptowane do kolonizacji bardzo szybko przesychającego<br />

substratu jakim są cienkie gałęzie lub strzałki pędów. W pracy<br />

przedstawiono wyniki badań nad wpływem temperatury na wzrost i przeżywalność<br />

kolonii dwóch gatunków grzybów z rodzaju Geosmithia.<br />

W teście temperaturowym użyto 10 losowo wybranych kolonii dwóch gatunków<br />

grzybów z rodzaju Geosmithia pochodzących z chrząszczy i żerowisk<br />

P. bidentatus (były one oznaczone jako Geosmithia sp. 1 i Geosmithia sp. 3).<br />

Wzrost grzybni określano na 2 % pożywce agarowo-maltozowej. Cztery powtórzenia<br />

każdego izolatu były inkubowane w ciemności w temperaturach: 5,<br />

10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 i 60°C. Wzrost kolonii był oszacowany na<br />

podstawie średnicy kolonii (mm) po czterech dniach inkubacji. W celu oszacowania<br />

wpływu wysokiej temperatury na przeżywalności kolonii grzybów<br />

z rodzaju Geosmithia, kolonie grzybów były inkubowane przez cztery dni w<br />

takim samym zakresie temperatur i następnie były przechowywane przez 14<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 255-257<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

255


256<br />

dni w temperaturze 25°C. W czwartym i czternastym dniu sprawdzano czy<br />

dana kolonia kontynuowała swój wzrost.<br />

Test temperaturowy. Po czterech dniach inkubacji, kolonie gatunku oznaczonego<br />

jako Geosmithia sp. 3 rosły znacznie szybciej niż kolonie grzyba<br />

Geosmithia sp. 1. Wszystkie izolaty reprezentujące gatunki oznaczone jako<br />

Geosmithia sp. 1 i Geosmithia sp. 3 wykazywały in vitro wzrost w zakresie<br />

temperaturze od 10 do 40°C. Optimum wzrostu dla wszystkich izolatów wynosiło<br />

30°C. Izolaty należące do gatunku oznaczonego jako Geosmithia sp. 1 rosły<br />

także dobrze w temperaturze 35°C.<br />

Wpływ wysokiej temperatury na przeżywalność kolonii. Cztery i 14 dni po<br />

inkubacji, wzrost badanych kolonii należących do Geosmithia sp. 1 był zahamowany<br />

odpowiednio przy temperaturze 45 i 55°C. W przypadku izolatów reprezentujących<br />

gatunek Geosmithia sp. 3, zarówno po 4 jak i 14 dniach inkubacji,<br />

wzrost kolonii nie był kontynuowany przy temperaturze 40°C.<br />

Summary<br />

EFFECTS OF TEMPERATURE ON THE GROWTH AND SURVIVAL<br />

OF COLONIES OF TWO GEOSMITHIA SPECIES<br />

The most common fungi associated with bark beetles (Coleoptera:<br />

Scolytidae) are ophiostomatoid fungi including morphologically similar genera:<br />

Ceratocystis, Ceratocystiopsis, Cornuvesica, Gondwanamyces, Grosmannia<br />

and Ophiostoma. However, apart ophiostomatoid species also anamorphic<br />

fungi from the genus Geosmithia (Ascomycota: Hypocreales) are integrated<br />

components of the mycobiota of bark beetles infesting broad-leaved trees<br />

in Europe. Information about bark beetle-associated Geosmithia species on<br />

trees from family Pineceae is very limited. Recently it has been demonstrated<br />

that Geosmithia fungi are common symbionts of Pityogenes bidentatus, which<br />

infested thin branches and stems Scots pine. Some authors made a hypothesis<br />

that bark beetles which breed in drier substrates (e.g., fast desiccating<br />

branches) are not able to maintain the mutualism with ophiostomatoid fungi,<br />

which are more sensitive to desiccation than Geosmithia species. This study<br />

reports on in vitro effect of temperature on the growth and survival of colonies<br />

of two Geosmithia species.<br />

Ten randomly chosen Geosmithia sp. colonies, representing two species<br />

(named as Geosmithia sp. 1 and Geosmithia sp. 3) were included in the<br />

temperature assay. These isolates originating from beetles and galleries of<br />

P. bidentatus. Colony growth were evaluated in vitro, on 2 % malt agar. Four<br />

replicates of each isolate were incubated at 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50,<br />

55 and 60°C in darkness. Growth rate was evaluated on the basis of colony<br />

diameter after incubation for 4 days. In order to determine the impact of high


temperatures on the survival of colonies of Geosmithia fungi, colonies were<br />

incubated for four days in the same range of temperatures and then were<br />

stored for 14 days at 25°C. Growth or no growth colony was examined 4 and<br />

14 days after incubation.<br />

Temperature assay. Among ten isolates tested, colonies of Geosmithia<br />

sp. 3 grew fastest than colonies of Geosmithia sp. 1 after 4 days incubation.<br />

The colonies of both Geosmithia species grew at 10-40°C in vitro. Optimum<br />

temperature for growth of all isolates was 30°C. Isolates of Geosmithia sp. 1<br />

grew very well also at 35°C.<br />

The effect of high temperatures on colonies survival. Four and 14 days after<br />

incubation, growth of colonies belonging to Geosmithia sp. 1 was markedly<br />

inhibited at 45 and 55°C, respectively. In case of colonies of the examined<br />

isolates of Geosmithia sp. 3, after four and 14 days of incubation no growth<br />

was observed at 40°C.<br />

257


258<br />

OD INOKULUM DO PLONU – KOMPLEKSOWA<br />

ANALIZA WPŁYWU PORAŻENIA PRZEZ SCLEROTINIA<br />

SCLEROTIORUM NA PRODUKCJĘ NASION RZEPAKU<br />

OZIMEGO W GOSPODARSTWIE WIELKOTOWAROWYM<br />

Małgorzata Jędryczka 1 , Joanna Kaczmarek 1 , Witold Irzykowski 1 ,<br />

Xiaoli Duan 2 , Ireneusz Dymarski 3 , Michał Kamiński 3<br />

i Andrzej Brachaczek 4<br />

1 Instytut Genetyki Roślin PAN, ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań, Polska<br />

2 Instytut Badania Roślin Uprawnych, AAAS, 40 Nongke nan, 230031 Hefei,<br />

Anhui, Chiny<br />

3 Instytut Zootechniki – PIB w Krakowie, Zakład Doświadczalny Pawłowice,<br />

ul. Mielżyńskich 14, 64- 122 Pawłowice, Polska<br />

4 DuPont Poland sp. z o.o., Powązkowska 44c, 01-797 Warszawa, Polska<br />

mjed@igr.poznan.pl<br />

Porażenie roślin rzepaku ozimego przez Sclerotinia sclerotiorum bywa<br />

przyczyną znacznych strat plonu nasion. Grzyb powoduje zgniliznę twardzikową<br />

– choroba ta, w odróżnieniu od suchej zgnilizny kapustnych, występuje<br />

także w Azji, w tym głównie w Chinach. Celem badań było przeprowadzenie<br />

kompleksowej analizy wpływu porażenia roślin rzepaku ozimego przez<br />

S. sclerotiorum na produkcję nasion, poczynając od oceny obfitości inokulum<br />

obecnego na płatkach rzepaku, poprzez ocenę porażenia roślin, aż do określenia<br />

ilości i jakości plonu nasion oraz zmienności genetycznej izolatów grzyba<br />

uzyskanych na różnych etapach rozwoju choroby. Badania prowadzono przez<br />

dwa sezony wegetacyjne (2009/2010 i 2010/2011) na polu doświadczalnym<br />

Instytutu Zootechniki – PIB, ZD Pawłowice w województwie wielkopolskim.<br />

Ocenie podlegało od 44 (2009/2010) do 47 (2010/2011) odmian rzepaku ozimego<br />

o zróżnicowanym podłożu genetycznym, a także odmiennym pokroju i sposobie<br />

zapylania (odmiany populacyjne i mieszańce zrestorowane).<br />

Przed założeniem doświadczeń, na polach przeznaczonych do badań<br />

sprawdzono zasobność gleby w fosfor, potas oraz magnez. Wybrano fragmenty<br />

pól o wyrównanej – średniej bądź wysokiej – ilości tych pierwiastków, oraz<br />

o lekko kwaśnym odczynie, sprzyjającym uprawie rzepaku ozimego. Jesienią<br />

2009 wybrano pole o powierzchni 25 hektarów, a każdą z odmian wysiano na<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 258-260<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


powierzchni 0,57 ha, natomiast jesienią 2010 roku wybrano pole o powierzchni<br />

38 ha i każdą odmianę wysiano na powierzchni 0,8 ha.<br />

W okresie wiosennym pobierano płatki poszczególnych odmian i oceniano<br />

ich porażenie przez S. sclerotiorum. Przed zbiorem oceniano nasilenie zgnilizny<br />

twardzikowej. Po żniwach oznaczano wysokość plonu przy 9% zawartości<br />

wody w nasionach i badano podstawowy skład chemiczny nasion, tj. zawartość<br />

tłuszczu, białka i włókna surowego oraz kwasu erukowego i glukozynolanów.<br />

Ponadto, przy wykorzystaniu markerów mikrosatelitarnych porównano<br />

zakres zmienności genetycznej izolatów grzyba S. sclerotiorum uzyskanych<br />

wiosną z płatków oraz latem z porażonych roślin rzepaku ozimego. W analizie<br />

wyników uwzględniono dane meteorologiczne z miejsca prowadzenia badań.<br />

Stwierdzono, iż badane odmiany różniły się pod względem licznych parametrów,<br />

poczynając od porażenia płatków, poprzez porażenie łodyg, plon i cechy<br />

jakościowe nasion. Porażenie roślin rzepaku przez S. sclerotiorum w przypadku<br />

każdej z odmian niekorzystnie wpływało na ich wartość gospodarczą, lecz<br />

można było wyróżnić odmiany, u których odnotowano mniejszą stratę plonu,<br />

pomimo wystąpienia objawów zgnilizny twardzikowej. Własność tę powinno<br />

się brać pod uwagę przy uprawie rzepaku, zwłaszcza w regionach o podwyższonym<br />

ryzyku wystąpienia tej choroby.<br />

Summary<br />

FROM INOCULUM TO YIELD – THE COMPLEX ANALYSIS<br />

OF THE INFLUENCE OF THE FUNGUS SCLEROTINIA<br />

SCLEROTIORUM ON THE SEED PRODUCTION OF WINTER<br />

OILSEED RAPE AT INTENSIVE PRODUCTION FARM<br />

The infection of winter oilseed rape plants by Sclerotinia sclerotiorum can<br />

lead to substantial yield losses of the seeds. The fungus causes Sclerotinia stem<br />

rot – this disease, in contrast to stem canker of brassicas is also found in Asia,<br />

especially in China, both on winter and spring oilseed rape. The aim of this<br />

study was a complex analysis of the influence of the infection of winter oilseed<br />

rape by S. sclerotiorum on the seed production, starting from the evaluation<br />

of the abundance of inoculum present on petals, though the assessment of<br />

plant infection to the evaluation of the quantity and quality of the seed yield,<br />

as well as the genetic diversity of fungal isolates obtained at different stages<br />

of disease development. The studies were done over two vegetative seasons<br />

(2009/2010 and 2010/2011) on the field of the National Research Institute<br />

of Animal Production, Experimental Station in Pawłowice, located in Great<br />

Poland region (central west of Poland). The assessment was done using from 44<br />

(2009/2010) to 47 (2010/2011) cultivars of winter oilseed rape of various genetic<br />

background, differing with plant shape and the way of pollination (populations<br />

and restored hybrids).<br />

259


260<br />

The fields planned for experiments were checked for the content of<br />

phosphorous, potassium and magnesium. The selected field fragments were of<br />

similar quality – they had intermediate to high amounts of these elements and<br />

lightly acidic pH, suitable for the cultivation of oilseed rape. In the autumn of<br />

2009 the selected field was 25 hectares and each cultivar covered the area of<br />

0,57 ha; in the autumn of 2010 the field area was 38 hectares and individual<br />

cultivars were grown on 0,8 ha.<br />

In spring the petals were collected from individual cultivars and their<br />

infection with S. sclerotiorum was evaluated in vitro, using agar media. The<br />

infection of oilseed rape plants was assessed before harvest. After harvest the<br />

seed yield was measured and re-calculated to 9% seed humidity. The study of<br />

the basic chemical composition of seeds contained the percentage of oil, protein<br />

and fiber as well as the amount of erucic acid and glucosinolates. Moreover,<br />

the range of the genetic diversity of the isolates of S. sclerotiorum was studied<br />

using microsatellite markers. The characterization concerned the isolates<br />

obtained from petals and infected plants. The analysis referred to weather<br />

data, collected at the experiment site.<br />

The studied cultivars differed in respect to many parameters, starting from<br />

the infection of petals, through the infection of stems, to yield and quality of<br />

collected seeds. The infection of plants with S. sclerotiorum resulted in lowering<br />

of the economic value of all cultivars, but it was possible to point out the cultivars<br />

of reasonably high yield, in spite of plant infection with Sclerotinia stem rot.<br />

This phenomenon should be taken into account in cultivation of oilseed rape in<br />

regions with the increased risk of incidence of this disease.


WYKORZYSTANIE MONITOROWANIA STĘŻEŃ<br />

ZARODNIKÓW GRZYBÓW RODZAJU FUSARIUM<br />

DO OPTYMALIZACJI ZWALCZANIA FUZARIOZY<br />

KŁOSÓW PSZENICY OZIMEJ<br />

Joanna Kaczmarek 1 , Andrzej Brachaczek 2<br />

i Małgorzata Jędryczka 1<br />

1 Instytut Genetyki Roślin PAN, ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

2 DuPont Poland sp. z o.o., ul. Powązkowska 44c, 01-797 Warszawa<br />

jkac@igr.poznan.pl<br />

W zestawie roślin uprawianych w Polsce dominują zboża, a wśród nich<br />

pszenica, której uprawa jest zazwyczaj wysoce opłacalna. Uzyskiwane plony<br />

pszenicy osiągają średnio połowę potencjału genetycznego, a jedną z głównych<br />

przyczyn tego zjawiska są choroby powodowane przez patogeniczne grzyby,<br />

które występują przez cały okres wegetacji pszenicy. Pod względem liczebnym<br />

oraz z uwagi na wysoką szkodliwość wielu gatunków za szczególnie groźne<br />

uważane są patogeny należące do rodzaju Fusarium. Celem pracy była optymalizacja<br />

zwalczania fuzariozy kłosów poprzez określenie stężenia zarodników<br />

grzybów rodzaju Fusarium oraz analizę skuteczności ochrony fungicydowej<br />

pszenicy po zastosowaniu różnych preparatów fungicydowych.<br />

Badania polowe prowadzono przez dwa sezony wegetacyjne (2009/2010<br />

i 2010/2011) w trzech lokalizacjach w Polsce- w Radostowie woj. pomorskie),<br />

Pawłowicach (woj. wielkopolskie) i w Głubczycach (woj. opolskie). Testowano<br />

20 wariantów ochrony fungicydowej. W zależności od kombinacji zabiegi wykonywano<br />

w terminie T0 (BBCH 19-25), T1 (BBCH 31-32), T2 (faza rozwiniętego<br />

liścia flagowego) oraz T3 (10-14 dni po terminie T2). Doświadczenia prowadzono<br />

na pszenicy ozimej odmiana Bogatka (Danko Hodowla Roślin), która<br />

jest podatna na występowanie fuzariozy kłosów. W Radostowie i Głubczycach<br />

doświadczenia założono w układzie bloków losowanych kompletnie zrandomizowanych<br />

w trzech powtórzeniach na poletkach o powierzchni 15 m 2 każde.<br />

W Pawłowicach badania wykonano na polu produkcyjnym - każdą technologię<br />

testowano na powierzchni powyżej 2 ha. Badano nasilenie fuzariozy kłosów<br />

oraz występowanie innych chorób, takich jak septorioza, brunatna plamistość<br />

liści i choroby podstawy źdźbła. Po żniwach oceniano wielkość plonu oraz pod-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 261-264<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

261


262<br />

stawowe parametry jakości ziarna: masa tysiąca ziaren, wyrównanie, gęstość<br />

i procent zawartości białka, glutenu mokrego oraz skrobi.<br />

Od 1 maja do 30 czerwca każdego roku, w pobliżu miejsc lokalizacji badań<br />

polowych prowadzono analizę stężenia zarodników grzybów rodzaju Fusarium<br />

w powietrzu. Badania wykonano metodą objętościową (wolumetryczną)<br />

przy zastosowaniu pułapki typu Hirsta (Burkard Manufacturing Inc.,<br />

Wielka Brytania).<br />

Niezależnie od lokalizacji największy procent porażonych kłosów przez<br />

grzyby rodzaju Fusarium obserwowano w wariantach kontrolnych tj. bez<br />

jakichkolwiek zabiegów fungicydowych (od 48 % w Głubczycach do 100 %<br />

w Radostowie i Pawłowicach). Zastosowanie wariantów ochronnych w istotny<br />

sposób zmniejszało porażenie kłosów (średnio o 20 %). W obrębie kombinacji,<br />

w których zastosowano ochronę fungicydową największe porażenie stwierdzono<br />

w wariantach jednozabiegowych- oprysk jedynie w fazie BBCH 31-32.<br />

W każdej lokalizacji odnotowano także wzrost wielkości plonu po zastosowaniu<br />

fungicydów- od 6 do 31 % względem kontroli. Środki ochrony roślin wpływały<br />

także na zwiększenie gęstość ziarna w stanie zsypnym oraz wyrównania.<br />

W Głubczycach stwierdzono istotnie statystyczne zwiększenie masy tysiąca<br />

ziaren oraz procentu zawartości skrobi po zastosowaniu ochrony. Takiej prawidłowości<br />

nie odnotowano jednak w Radostowie i Pawłowicach. W każdej lokalizacji<br />

nie stwierdzono wpływu zastosowanej kombinacji na zawartość białka<br />

i glutenu w ziarnie. W obu badanych sezonach i lokalizacjach stwierdzono<br />

w powietrzu zarodniki grzybów rodzaju Fusarium, a ich stężenie różniło się<br />

w czasie i przestrzeni. W zależności od zastosowanego wariantu ochrony w badanym<br />

materiale roślinnym występowały różnice w wielkości porażenia przez<br />

grzyby rodzaju Fusarium oraz w wysokości i jakości plonu. Dzięki tej zmienności,<br />

w zależności od obecności i stężenia zarodników rodzaju Fusarium, producenci<br />

pszenicy mogą wybrać takie technologie i terminy wykonania zabiegu,<br />

które zapewnią odpowiedni plon i jego wysokie parametry jakościowe.<br />

Summary<br />

THE USE OF MONITORING OF SPORE CONCENTRATION<br />

OF THE FUNGI FROM THE GENUS FUSARIUM FOR THE<br />

OPTIMIZATION OF THE PROTECTION OF WINTER WHEAT<br />

TO FUSARIUM HEAD BLIGHT<br />

In Poland cereals, especially winter wheat, dominate among agricultural<br />

crops. The cultivation of winter what is usually highly profitable for the farmers.<br />

The yield of this crop is on average the half of its genetic potential, what is<br />

mainly caused by plant pathogenic fungi, which attack wheat over the whole<br />

vegetative period. The fungi from the genus Fusarium are regarded as one of


the most damaging, due to their high incidence and severity of infections they<br />

cause. The aim of this work was the optimization of the protection of winter<br />

wheat against Fusarium head blight, based on the presence and quantity of<br />

Fusarium spp. spores in air samples and the analysis of the effect of different<br />

fungicides on yield and quality of collected wheat kernels.<br />

The field experiments were done over two vegetative seasons (2009/2010<br />

and 2010/2011) at three locations in Poland: Radostowo (Pomerania, north<br />

Poland), Pawłowice (Great Poland, central west Poland) and Głubczyce (Opole<br />

region, south west Poland). The experiment comprised 20 variants of wheat<br />

protection. The treatments were done at four plant development stages: T0<br />

(BBCH 19-25), T1 (BBCH 31-32), T2 (the stage of the developed flag leaf) and<br />

T3 (10-14 days after T2 date). The experiments were done using winter wheat<br />

cultivar Bogatka (Plant Breeding Danko), that is susceptible to Fusarium<br />

head blight. In Radostowo and Głubczyce the experiments were done in<br />

completely randomized blocks with three replicates, on individual plots of 15<br />

m 2 each. In Pawłowice the experiments were done at the production fields,<br />

each protective technology was tested at the experimnt field of more than 2<br />

ha. The evaluation comprised Fusarium head blight, tan spot, septoria leaf<br />

blotch and foot rot complex at the stalk base. After harvest the grain yield<br />

was measured as well as the basic parameters of the grain quality, including<br />

the mass of 1000 kernels, the uniformity of kernels, density and the percent of<br />

protein, wet gluten and starch content.<br />

From the 1 May to 30 June each year the analysis of the concentration of<br />

Fusarium spp. spores in air samples was done at the places located close to<br />

the field experiments. The studies were done using the volumetric method,<br />

with the use of Hirst type spore samplers (Burkard Manufacturing Inc., UK).<br />

Independently on the location the highest percent of spikes infected by<br />

Fusarium spp. was observed in control variants, deprived of any fungicide<br />

treatments (from 48 % in Głubczyce to 100 % in Radostowo and Pawłowice).<br />

The use of protective treatments significantly decreased Fusarium head blight<br />

(by 20 % on average). Among the variants with the use of fungicides, the highest<br />

infection was observed in treatments with one spray at BBCH 31-32. The<br />

increase of seed yield after the fungicide treatment depended on the protective<br />

technology and experiment site, it varied from 6 to 31 % of the control variant.<br />

The use of fungicides positively affected the bulk densities of grains, as well as<br />

their uniformity. In Głubczyce there was a significant increase of the mass of<br />

1000 kernels and the percent of starch measured after the fungicide treatment.<br />

However, such phenomenon was not found in Radostowo and Pawłowice. At<br />

all locations no correlation between the protective variant and the content<br />

of protein and gluten in seeds was found. In both vegetative seasons and<br />

at all locations the spores of Fusarium spp. were found in air samples and<br />

263


264<br />

their concentration differed in space and time. Plant protection treatments<br />

significantly affected the infection of plants with Fusarium head blight as well<br />

as the amount and quality of seed yield. This diversity allows wheat producers<br />

find optimal technologies and plant treatment times, based on the presence<br />

and concentration of the spores of Fusarium spp. in air samples. They can<br />

provide the sufficient quality and quantity of the yield of winter wheat.


IDENTYFIKACJA BAKTERII ACIDOVORAX AVENAE<br />

PORAŻAJĄCYCH ORCHIDEE<br />

Joanna Kamasa i Krzysztof Krawczyk<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Wirusologii i Bakteriologii, ul. Wł. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

jkamasa08@gmail.com<br />

Za sprawcę brunatnej bakteryjnej plamistości orchidei uważa się Acidovorax<br />

avenae ssp. cattleyae, jednakże w roślinach dostarczonych do badania<br />

w grudniu 2010 roku, stwierdzono obecność Acidovorax avenae ssp. avenae.<br />

Obydwa podgatunki opisywane były wcześniej jako heterogeniczna grupa nie<br />

fluoryzujących, oksydazo-pozytywnych Pseudomonasów (Schaad 1980).<br />

Na badanych roślinach orchidei, pochodzących z uprawy szklarniowej, zaobserwowano<br />

żółte w środkowej części i brązowe na zewnątrz, nasiąknięte<br />

wodą rozległe plamy na liściach. Łodygi kwiatów miały ciemnobrązowe przebarwienia.<br />

Bakterie izolowano z pogranicza zmienionych chorobowo i zdrowych<br />

tkanek. Po inkubacji na podłożu sojowym otrzymano okrągłe, lekko wypukłe<br />

szarobiałe kolonie bakteryjne. Badane izolaty były gram-ujemne, oksydazo-<br />

-pozytywne, nie fluoryzowały na podłożu King B. Po 24 godz. inkubacji w podłożu<br />

płynnym NB, wytwarzały charakterystyczny osad na dnie probówki. Test<br />

patogeniczności przeprowadzony został na zdrowych roślinach orchidei. Po<br />

upływie jednego tygodnia, bakterie o tej samej morfologii jak użyte do inokulacji,<br />

zostały reizolowane ze sztucznie inokulowanych liści. Według profilu metabolicznego<br />

otrzymanego przy użyciu mikropłytki GN w systemie identyfikacji<br />

bakterii BIOLOG, badane izolaty po 24 godz. inkubacji, zidentyfikowano jako<br />

A. avenae ssp. avenae, z prawdopodobieństwem 100 %.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 265-266<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

265


266<br />

Summary<br />

IDENTIFICATION OF BACTERIA ACIDOVORAX AVENAE<br />

INFECTING ORCHIDS PLANTS<br />

Although bacterial brown spot of orchid is known to be caused by Acidovorax<br />

avenae ssp. cattleyae in orchids plants, delivered to the testing on December<br />

2010, revealed the presence of Acidovorax avenae ssp. avenae. Both subspecies<br />

were described previously as a heterogenous group of non-fluorescent, oxidase<br />

positive Pseudomonads (Schaad 1980).<br />

On tested orchids plants growing in a greenhouse yellow in the middle<br />

and brown on the edge, extensive water soaked lesions on the leaves were<br />

observed. The flower’s stalks showed dark-brown discoloration. The isolation of<br />

bacteria was performed from the border of diseased and healthy leaves tissue.<br />

Bacteria producing circular, slightly convex, white-grey colonies were isolated<br />

on Tryptic Soy medium. The isolates were gram-negative, oxidase- positive<br />

and did not produce fluorescent pigment on King B medium. The isolates<br />

produced settlements in Nutrient Broth liquid medium after 24 h incubation.<br />

Pathogenicity test was performed on healthy orchids plants. Bacteria of the<br />

same colony morphology as used for inoculation, were reisolated from diseased<br />

tissue of artificially inoculated leaves after one week. According to the metabolic<br />

fingerprinting, obtained with Biolog GN Microplate, the isolates after 24 h<br />

incubation, were identified as A. avenae ssp. avenae with probability of 100 %.


EFEKTYWNOŚĆ PRODUKCYJNA I EKONOMICZNA<br />

ZABIEGÓW FUNGICYDOWYCH W UPRAWIE<br />

PSZENŻYTA JAREGO I ICH WPŁYW NA PLON ZIARNA<br />

ORAZ WSKAŹNIKI EKONOMICZNE<br />

Zdzisław Kaniuczak<br />

Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy, Terenowa Stacja<br />

Doświadczalna, ul. Langiewicza 28, 35-101 Rzeszów<br />

z.kaniuczak@iorpib.poznan.pl<br />

Opanowanie roślin zbóż przez choroby powoduje znaczne straty w plonach<br />

ziarna oraz pogorszenie jego jakości, stąd też ważnym staje się prowadzenie<br />

badań nad zwalczaniem najważniejszych chorób przy zróżnicowanym ich nasileniu<br />

jak również bieżąca analiza uzyskiwanych efektów ekonomicznych wykonywanych<br />

zabiegów.<br />

Celem badań była ocena skuteczności biologicznej oraz efektywności gospodarczej<br />

i ekonomicznej zastosowanych fungicydów w zwalczaniu chorób powodowanych<br />

przez grzyby patogeniczne w uprawie pszenżyta jarego w doświadczeniach<br />

polowych.<br />

Badania przeprowadzono w latach 2008-2010 w uprawie pszenżyta jarego,<br />

odmiany Dublet w Boguchwale. Doświadczenia założono metodą bloków<br />

losowanych w czterech powtórzeniach. Siew zbóż wykonano na glebie zasobnej<br />

w składniki pokarmowe, wytworzonej z lessu. Nasilenie występowania chorób<br />

analizowano w ciągu całego okresu wegetacyjnego zgodnie z metodą opisaną<br />

przez Lisowicza i in. (1993). W celu zwalczania chorób występujących na roślinach<br />

pszenżyta jarego zastosowano dwa zabiegi z wykorzystaniem zarejestrowanych<br />

fungicydów. Ich nazwy i dawki podano w tabeli 1. Pierwsze opryskiwanie<br />

roślin wykonano wiosną w fazie koniec krzewienia, natomiast drugie przed<br />

kwitnieniem, w fazie wzrostu BBCH 51-59.<br />

Zabiegi wykonano przy użyciu opryskiwacza, stosując 300 litrów cieczy na<br />

hektar. Ocenę porażenia pszenżyta jarego przez choroby wykonano, określając<br />

procent porażenia powierzchni dwóch górnych liści: flagowego i podflagowego<br />

na 100 źdźbłach z każdej kombinacji. Po osiągnięciu przez <strong>rośliny</strong> dojrzałości<br />

zbiorczej, przeprowadzono zbiór ziarna kombajnem poletkowym. Istotność różnic<br />

oceniano pomiędzy średnimi testem Duncan’a przy 5 % poziomie istotności.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 267-269<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

267


268<br />

W analizie ekonomicznej opłacalności chemicznego zwalczania chorób użyto<br />

metodę podaną przez mierzejewską (1985) wyliczając następujące wskaźniki:<br />

E- wskaźnik pokrycia kosztów, Q 1 - wskaźnik opłacalności zabiegów, Q 2 - procentowy<br />

wskaźnik kosztów. Do obliczenia wyżej wymienionych wskaźników<br />

przyjęto średnie ceny ziarna pszenżyta, zastosowanych środków ochrony roślin<br />

oraz koszt wykonania zabiegów.<br />

Wyniki chemicznego zwalczania chorób oraz ich wpływ na plon ziarna<br />

pszenżyta jarego i wskaźniki ekonomiczne przedstawiono w tabeli 1.<br />

W ochronie pszenżyta w 2008 r. uzyskano wzrost wartości plonu uratowanego<br />

od 331 do 565 zł/ha, średnio 465 zł/ha. Najkorzystniejszy wskaźnik<br />

pokrycia kosztów odnotowano na obiekcie z fungicydem Falcon 460 EC (3,1).<br />

Wskaźnik opłacalności zabiegów wyniósł średnio 3,3, a średni procentowy<br />

wskaźnik kosztów – 4,6.<br />

W 2009 r. efektywność produkcyjna zabiegów uzyskana na poszczególnych<br />

obiektach pszenżyta wyrażona wartością plonu uratowanego wahała się od<br />

160 do 348 zł/ha, średnio 241 zł/ha. Wskaźnik pokrycia kosztów wyniósł od 1,0<br />

do 1,5. Wskaźnik opłacalności zabiegów odpowiednio od 3,4 do 7,3, a procentowy<br />

wskaźnik kosztów wahał się od 4,5 do 9,2.<br />

W pszenżycie jarym w 2010 r. najkorzystniejszy wskaźnik pokrycia kosztów<br />

odnotowano na obiekcie, na którym zastosowano Alert 375 SC w dawce<br />

1,0 l/ha (2,4). Średni wskaźnik opłacalności zabiegów wyniósł 4,3, a procentowy<br />

wskaźnik kosztów 7,0.<br />

Tabela 1. Efektywność ekonomiczna zastosowanych fungicydów w pszenżycie jarym w latach<br />

2008-2010<br />

Lp.<br />

Fungicyd<br />

Faza wzrostu (BBCH)<br />

Koszt<br />

ochrony<br />

(PLN/ha)<br />

Zwyżka plonu Wskaźnik<br />

30–32 51–58 ha (dt/ha) (PLN/ha) E Q 1 Q 2<br />

2008<br />

1. Alert 375 SC – 154 5,1 331 2,1 2,3 3,5<br />

2. - Falcon 460 EC 157 8,7 565 3,1 2,7 3,8<br />

3. Alert 375 SC Falcon 460 EC 311 7,6 499 1,4 5,1 7,3<br />

2009<br />

1. Alert 375 SC – 154 4,0 160 1,0 3,8 5,2<br />

2. - Mirage 450 EC 138 5,4 216 1,5 3,4 4,5<br />

3. Alert 375 SC Mirage 450 EC 292 8,7 348 1,2 7,3 9,2<br />

2010<br />

1. Alert 375 SC – 154 8,48 381 2,4 3,4 5,5<br />

2. – Mirage 450 EC 139 7,37 331 2,3 3,0 5,1<br />

3. Alert 375 SC Mirage 450 EC 293 9,45 425 1,4 6,5 10,4


Summary<br />

EFFICACY OF SOME FUNGICIDES FOR CONTROL OF FUNGI IN<br />

SPRING TRITICALE AND THEIR INFLUENCE ON YIELD AND<br />

ECONOMIC INDEX<br />

The research undertaken in 2008-2010 had the objective of evaluating<br />

the economic effectiveness of using fungicides for diseases control in spring<br />

triticale. Disease occurrence on spring triticale leaf surfaces reached on average<br />

52.0 % and 86.2 %, respectively. The effectiveness of applied fungicides ranged<br />

from 42.2 % to 87.7 %. Surplus of the production saved ranged from 160 PLN/<br />

ha to 565 PLN/ha respectively. The cost coverage index ranged from 1.0 to 3.1,<br />

respectively, whereas the treatment profitability index ranged from 2.3 to 7.3,<br />

respectively. The cost index in percentage reached 3.5 and 10.4, respectively.<br />

269


270<br />

SZKODLIWOŚĆ GATUNKU<br />

FUSARIUM AVENACEUM (FR.) SACC.<br />

DLA WYBRANYCH GENOTYPÓW OWSA (AVENA SATIVA L.)<br />

Irena Kiecana 1 , Elżbieta Mielniczuk 1 , Juliusz Perkowski 2<br />

i Małgorzata Cegiełko 1<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

2 Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Chemii, ul. Wojska Polskiego 75,<br />

60-625 Poznań<br />

Irena.Kiecana@up.lublin.pl<br />

Celem pracy było określenie podatności wybranych genotypów owsa na<br />

porażenie wiech przez Fusarium avenaceum oraz zawartości moniliforminy<br />

w ziarnie.<br />

Badania przeprowadzono w 2008 roku na polach doświadczalnych k. Zamościa.<br />

Podatność wiech 16 genotypów owsa: Bingo, Chwat, Koneser, Krezus,<br />

Maczo, Polar, Sławko, Szakal, Zuch, CHD 1375/00, CHD 1430/02, CHD 1601/04,<br />

STH 8107, STH 8207, STH 8307, wskazanych przez specjalistów z zakresu hodowli<br />

zbóż z Hodowli Roślin Strzelce i Danko, określono na podstawie ścisłego<br />

doświadczenia polowego ze sztucznym zakażaniem wiech w czasie kwitnienia<br />

przez szczep F. avenaceum nr 122.<br />

Zawiesiną konidiów F. avenaceum o zagęszczeniu 5x10 5 zarodników x 1<br />

ml -1 zakażano po 80 wiech każdego genotypu. Wiechy z kombinacji kontrolnej<br />

opryskano wodą destylowaną.<br />

W fazie dojrzałości pełnej ziarna wiechy zainokulowane i kontrolne ścinano<br />

i wydzielano ziarniaki, po czym określano liczbę ziarniaków w wiesze, plon<br />

ziarna z 40 (4x10) wiech oraz masę 1000 ziaren. Uzyskane wyniki porównano<br />

z kontrolą i opracowano statystycznie.<br />

W próbach ziarna uzyskanego z wiech badanych genotypów owsa sztucznie<br />

zakażanych przez F. avenaceum, w Katedrze Chemii Uniwersytetu Przyrodniczego<br />

w Poznaniu przeprowadzono analizę zawartości moniliforminy.<br />

Sztuczne zakażanie wiech przez F. avenaceum wpłynęło istotnie na liczbę<br />

ziarniaków w wiesze u ośmiu genotypów owsa (Koneser, Maczo, Polar, Sławko,<br />

Szakal, Zuch, CHD 1375/00, CHD 1430/02). Ubytek liczby ziarniaków w<br />

wiesze wynosił od 0 (CHD 1601/04) do 61,03 % (Zuch).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 270-271<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Sztuczne zakażanie wiech przez F. avenaceum wpłynęło istotnie na obniżkę<br />

plonu u 12 analizowanych genotypów. Wyjątek stanowiła odmiana Bingo<br />

i rody hodowlane STH 8107, STH 8207 i STH 8307. Odmiana Chwat charakteryzowała<br />

się największym procentowym ubytkiem plonu ziarna (67,48 %)<br />

w porównaniu do kontroli. Natomiast najmniejszy procentowy ubytek plonu<br />

ziarna (3,84 %) zanotowano w przypadku rodu hodowlanego STH 8307.<br />

Sztuczne zakażanie wiech przez F. avenaceum wpłynęło istotnie na obniżenie<br />

masy 1000 ziaren u 11 genotypów owsa. Obniżka MTZ u badanych genotypów<br />

wynosiła od 0 (Koneser, STH 8307) do 61,77 % (Chwat).<br />

W ziarnie owsa pochodzącym z wiech sztucznie zakażanych F. avenaceum<br />

stwierdzono obecność moniliforminy na poziomie od 0,010 mg/kg (Maczo) do<br />

0,680 mg/kg (STH 8207).<br />

Summary<br />

HARMFULNESS OF FUSARIUM AVENACEUM (FR.) SACC.<br />

FOR SELECTED GENOTYPES OF OATS (AVENA SATIVA L.)<br />

Investigations were carried out in 2008 year. Inoculation experiment with<br />

16 oats genotypes: Bingo, Chwat, Koneser, Krezus, Maczo, Polar, Sławko,<br />

Szakal, Zuch, CHD 1375/00, CHD 1430/02, CHD 1601/04, STH 8107, STH<br />

8207, STH 8307, was performed in Zamość region. Fusarium avenaceum<br />

strain 122 was used in inoculation of oats panicles. The number of kernels per<br />

panicle (NK), the weight of 1000 kernels (TKW) and the kernels yield (KY)<br />

were calculated for each genotype and compared to the control – non inoculated<br />

group. Reduction of KY after inoculation with F. avenaceum ranged from 3.84 %<br />

(STH 8307) to 67.48 % (Chwat). Reduction of TKW was from 0 (Koneser, STH<br />

8307) to 61.77 % (Chwat), while NK from 0 (CHD 1601/04) to 61.03 % (Zuch).<br />

Accumulation of moniliformin in oats kernels of analysed genotypes infected<br />

with F. avenaceum was performed in Department of Chemistry University of<br />

Life Sciences in Poznań. Accumulation of this secondary metabolite ranged<br />

from 0.010 mg/kg (Maczo) to 0.680 mg/kg (STH 8207).<br />

271


272<br />

BADANIA ZDROWOTNOŚCI JĘCZMIENIA OZIMEGO<br />

W SYSTEMIE PDO<br />

Włodzimierz Kita, Magdalena Tołtyrzewska<br />

i Radosław Sadowski<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Katedra Ochrony Roślin, Zakład<br />

Fitopatologii i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

wlodzimierz.kita@up.wroc.pl<br />

Prowadzone badania miały na celu określenie zdrowotności 12 odmian<br />

jęczmienia ozimego, w tym 11 pastewnych i 1 browarnej. Zastosowano dwa<br />

poziomy agrotechniki: ekstensywny-A1= (50 + 10) = 60 N kg/ha oraz intensywny-A2=(60<br />

+ 40) = 100 N kg/ha uzupełnione o zwalczanie chorób, stosowanie<br />

regulatorów wzrostu i dolistne dokarmianie mikronawozami. Doświadczenie<br />

zostało wykonane w dwóch powtórzeniach.<br />

Wyniki badań uzyskane w ramach Porejestrowego Doświadczalnictwa Odmianowego<br />

(PDO) są cennym źródłem informacji zarówno dla producentów<br />

rolnych, jak i doradców rolniczych. Doświadczenia przeprowadzone na odmianach<br />

jęczmienia ozimego przy różnych poziomach intensywności ochrony chemicznej<br />

i nawożenia wskazują na ich zróżnicowane wymagania pokarmowe,<br />

odporność na patogeny oraz określają przydatność odmian w różnych systemach<br />

gospodarowania. Tym samym rezultaty badań ułatwiają rolnikom dokonanie<br />

trafnego doboru odmian. W wyniku przeprowadzonych badań stwierdzono,<br />

że największym zagrożeniem dla jęczmienia ozimego w okresie wegetacji<br />

jest Pyrenophora teres, natomiast główną przyczyną zmian chorobowych na<br />

podstawie źdźbła są grzyby z rodzaju Fusarium spp., zwłaszcza Fusarium culmorum,<br />

a porażenie jęczmienia w bardzo dużym stopniu zależy od cech odmiany<br />

bez względu na poziom agrotechniki. Wśród badanych odmian jęczmienia<br />

‘Rosita’ okazała się najbardziej odporną, niezależnie od sposobu uprawy.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 272-273<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

STUDIES OF HEALTHINESS OF BARLEY IN PDO’S SYSTEM<br />

The aim of the research was to determine health status of 12 winter barley<br />

cultivars, including 11 of fodder and a brewing. Two levels of agricultural technology<br />

were used extensive-A1 = (50 + 10) = 60 N kg / ha, intensive-A2 = (60 +<br />

40) = 100 N kg / ha supplemented with fungicide, growth regulators and foliar<br />

feeding microfertilizers. The experiment was performed in two repetitions.<br />

The results obtained in the Post-registration Varietal Experimentation<br />

(PDO) is a valuable source of information for agricultural producers and agricultural<br />

advisors. Experiments conducted on the winter barley varieties with<br />

different levels of intensity of chemical protection and fertilization indicate<br />

their different nutritional requirements, resistance to pathogens and determine<br />

the suitability of varieties in different farming systems. The results of<br />

research help farmers to make an accurate selection of varieties. The study<br />

results showed that the greatest threat to winter barley during the growing<br />

season is Pyrenophora teres, the main cause of lesions on the stem base are<br />

fungi of the genus Fusarium, especially Fusarium culmorum. Barley infestation<br />

depends on the characteristics of a variety irrespective of agricultural<br />

technology. Among the tested varieties of barley, ‘Rosita’ was the most resistant,<br />

regardless to cultivation system.<br />

273


274<br />

WYKORZYSTANIE METODY PCR DO IDENTYFIKACJI<br />

ENDOFITA NEOTYPHODIUM LOLII ORAZ<br />

JEGO WPŁYW NA INDUKCJĘ SPECYFICZNYCH<br />

MECHANIZMÓW OBRONNYCH W ROŚLINIE<br />

Katarzyna Koczwara i Dariusz Pańka<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

katarzyna.koczwara1987@gmail.com<br />

Życica trwała jest trawą o dużym znaczeniu gospodarczym w Polsce. Jednakże<br />

istotnym problemem podczas jej uprawy są choroby grzybowe, m.in. wywoływane<br />

przez Fusarium spp. Ich szkodliwość może być ograniczana, dzięki wykorzystaniu<br />

naturalnych układów symbiotycznych, jakie zawiązuje życica trwała<br />

z endofitem N. lolii. Symbiont może stymulować wzrost i rozwój trawy, a także<br />

zwiększać odporność na biotyczne i abiotyczne czynniki stresowe. Celem badań<br />

było określenie przydatności molekularnej metody PCR do detekcji endofita<br />

N. lolii w kolekcji ekotypów życicy trwałej oraz określenie wpływu symbionta<br />

na indukowanie w roślinie specyficznych mechanizmów obronnych, do których<br />

zaliczamy produkcję litycznych enzymów białkowych z grupy 1,3-β-glukanaz<br />

i chitynaz. Zawartość chitynaz i glukanaz w roślinach zasiedlonych (E+) i niezasiedlonych<br />

(E-) przez endofita oznaczano w warunkach wazonowych, w odstępach<br />

0, 1, 2, 3 i 4 dni od zainfekowania przez Fusarium poae. Metoda PCR<br />

okazała się być bardzo skuteczną, aczkolwiek kosztochłonną metodą detekcji<br />

N. lolii. Metoda immunologiczna i barwienia były równie skuteczne, miały zbliżony<br />

czas wykonania analizy i znacznie niższą kosztochłonność. Zasiedlenie<br />

badanej kolekcji ekotypów kształtowało się na stosunkowo wysokim poziomie<br />

i wynosiło 65% (13 E+ na 20 badanych). Rośliny zasiedlone przez endofita były<br />

istotnie mniej podatne na porażenie przez F. poae. Obecność endofita miała<br />

także wpływ na produkcję chitynaz w życicy trwałej. Ich zawartość była istotnie<br />

wyższa w kombinacjach E+ także po infekcji przez F. poae. Zawartość enzymu<br />

wzrastała w początkowym okresie, a następnie nieznacznie malała. Nie<br />

zaobserwowano istotnego wpływu obecności endofita na aktywność β-1,3 glukanaz<br />

oraz na ogólną zawartość białek w roślinach. Uzyskane wyniki wskazują<br />

na istotną rolę chitynaz w podwyższonej odporności roślin zasiedlonych przez<br />

endofita - N. lolii na porażenie przez F. poae.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 274-275<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

USE OF PCR METHOD FOR IDENTIFICATION OF<br />

NEOTYPHODIUM LOLII ENDOPHYTE AND ITS INFLUENCE<br />

ON INDUCTION OF SPECIFIC DEFENSE MECHANISMS<br />

IN HOST PLANT<br />

Perennial ryegrass is a grass of great importance in Polish farming. Diseases<br />

caused by pathogenic fungi like Fusarium ssp. are essential problem in its<br />

cultivation. Their harmfulness can be limited thanks to natural symbiotic<br />

systems between L. perenne and N. lolii. This endophyte is able to stimulate<br />

the growth of the plant and increase the resistance to biotic and abiotic stress<br />

factors. The aim of the research was to define the usefulness of PCR method<br />

for detection the endophyte in collection of L. perenne ecotypes and setting<br />

its impact on induction of specific defense mechanism, including production<br />

of pathogenesis-related proteins: chitinases and β-1,3-glucanases. The content<br />

of chitinases and glucanases in endophyte infected (E+) and uninfected (E-)<br />

plants was determined 0, 1, 2, 3 and 4 days after infection with Fusarium poae.<br />

PCR method appeared to be very effective, but costly method of identification.<br />

Immunological and staining methods appeared to be same effective, but much<br />

less costly. The endophytic fungi occurred in 13 ecotypes out of 20 (65%).<br />

Inhabited plants were much less susceptible to infection by F. poae. Occurrence<br />

of the endophyte has also affected the amount of chitinases in perennial ryegrass.<br />

Its amount was significantly higher in E+ plants. The amount of enzyme was<br />

initially growing, than slightly decreasing. No significant impact of N. lolii on<br />

glucanases production and general protein content in the plant was observed.<br />

These results indicates the important role of chitinases in increased resistance<br />

of E+ plants exposed to infection by F. poae.<br />

275


276<br />

WPŁYW TEMPERATURY ORAZ ŚWIATŁA NA NIEKTÓRE<br />

GATUNKI GRZYBÓW RODZAJU ASCOCHYTA<br />

Tomasz Kosiada<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fitopatatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60–594 Poznań<br />

kosiada@up.poznan.pl<br />

Grzyby rodzaju Ascochyta zazwyczaj są fakultatywnymi saprotrofami. Powodują<br />

choroby roślin jedno i dwuliściennych. W Polsce dotychczas stwierdzono<br />

72 gatunki grzybów rodzaju Ascochyta porażających 120 roślin należących<br />

do 53 rodzin botanicznych, w tym 16 gatunków występujących na roślinach<br />

z rodziny Poaceae. W pracy badano wpływ temperatury i światła na wzrost<br />

wybranych grzybów (A. agrostis, A. avenae, A. brachypodii, A. desmazieri,<br />

A. digraphidis, A. ducis-aprutii, A. festucae, A. graminea, A. hordei, A. hordei<br />

var. americana, A. hordei var. europea, A. hordei var. hordei, A. melicae,<br />

A. phleina, A. skagwayensis, A. sorghi, A. stipae, A. zeicola) porażających <strong>rośliny</strong><br />

jednoliścienne. Badania prowadzono na trzech rodzajach pożywek: agarowo-glukozowo-ziemniaczanej<br />

(PDA), pożywce Coon’a (CN), pożywce owsianej<br />

(OM). Do grzybów o najniższych wymaganiach termicznych można zaliczyć<br />

A. melicae. Najwyższe wymagania termiczne miał A. zeicola. Zaobserwowano<br />

również zróżnicowane wymagania termiczne izolatów w obrębie tego samego<br />

gatunku. Najszybszy wzrost in vitro zaobserwowano na pożywce CN,<br />

w temperaturze 20ºC (3,4 mm/dobę), najwolniejszy natomiast na pożywce OM<br />

w temperaturze 5ºC (1,0 mm/dobę). Wzrost radialny grzybni w ciemności i przy<br />

oświetlaniu 12 godzinnym był różny. Średnio wszystkie izolaty szybciej rosły<br />

w ciemności (3,1 mm/dobę), niż przy oświetlaniu (1,9 mm/dobę). Oświetlanie<br />

grzybów nie wpłynęło na zwiększenie tworzenia się piknidiów.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 276-277<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

THE INFLUENCE OF TEMPERATURE AND LIGHT ON SOME<br />

SPECIES OF ASCOCHYTA FUNGI<br />

Ascochyta fungi are usually facultative saprophytes. They cause diseases<br />

of monocotyledons and dicotyledons. In Poland, 72 species of Ascochyta fungi<br />

were identified so far, which infected 120 species of plants, which belong to 53<br />

botanical families, including 16 species found the plants of Poaceae family. In the<br />

present study, the influence of temperature and light on the growth of the fungi<br />

(A. agrostis, A. avenae, A. brachypodii, A. desmazieri, A. digraphidis, A. ducisaprutii,<br />

A. festucae, A. graminea, A. hordei, A. hordei var. americana, A. hordei<br />

var. europea, A. hordei var. hordei, A. melicae, A. phleina, A. skagwayensis,<br />

A. sorghi, A. stipae, A. zeicola) which affect monocotyledons was analyzed.<br />

The study was conducted on three types of media: potato dextrose agar<br />

(PDA), Coon’s agar (CN) and oatmeal agar (OM). The fungi with the lowest<br />

thermal requirements included A. melicae. The highest thermal requirements<br />

were shown by A. zeicola. Moreover, a diversity of thermal requirements was<br />

observed among isolates of the same species. The fastest growth in vitro was<br />

observed in CN medium, in 20 ºC (3.4 mm/day), while the lowest growth was<br />

observed in OM medium, in 5ºC (1.0 mm/day). The radial growth of mycelium<br />

in the dark and with 12-hour lighting was different. The average growth of all<br />

isolates was faster in the dark (3.1 mm/day), than in the light (1.9 mm/day).<br />

The lighting of the fungi did not influence the formation of pycnidia.<br />

Badania zostały zrealizowane dzięki dofinansowaniu Ministerstwa Nauki<br />

i Szkolnictwa Wyższego w ramach projektu: N N310 086136.<br />

277


278<br />

PLAMISTOŚCI I NEKROZY NA LIŚCIACH AZALII<br />

RHODODENDRON L. W OGRODZIE BOTANICZNYM<br />

UNIWERSYTETU JAGIELLOŃSKIEGO<br />

Maria Kowalik, Barbara Kierpiec, Joanna Bonio<br />

i Małgorzata Żołna<br />

Uniwersytet Rolniczy, Katedra Ochrony Roślin, Al. 29 Listopada 54,<br />

31-425 Kraków<br />

barbara.kierpiec@wp.pl<br />

Ogród Botaniczny Uniwersytetu Jagiellońskiego został utworzony w 1783<br />

roku na terenie dawnego ogrodu rodziny Czartoryskich. Jest najstarszą tego<br />

typu placówką w Polsce i stanowi wyjątkowo cenny obiekt przyrodniczy.<br />

Jedną z kolekcji Ogrodu Botanicznego stanowią <strong>rośliny</strong> wrzosowate Ericaceae,<br />

obejmujące <strong>rośliny</strong> rodzaju Rhododendron L. Na terenie Ogrodu rosną,<br />

między innymi, kilkunastoletnie krzewy azalii pontyjskiej (azalia żółta, różanecznik<br />

żółty) Azalea pontica L., Rhododendron luteum Sweet, azalii dahurskiej<br />

Rhododendron dauricum L. i azalii japońskiej (różanecznik chiński,<br />

azalia chińska) Azalea obtusa Lindl., Rhododendron molle L.<br />

Azalie to krzewy długowieczne, o zróżnicowanym pokroju, kwiatach w barwach<br />

ognistych: żółtych, czerwonych, pomarańczowych, ale również białych,<br />

kremowobiałych, liliowych, różowych. O dekoracyjności krzewów decydują<br />

także liście. Liście gatunków zimozielonych lub częściowo zimozielonych (o liściach<br />

sezonowych) są podłużnie lancetowate, zielone, błyszczące, od spodu<br />

nierzadko szczeciniasto owłosione, pokryte gruczołkami lub tarczkami.<br />

Liście azalii podatne są na występowanie przebarwień, plamistości i nekroz,<br />

wywoływanych najczęściej przez grzyby na nich bytujące. Symptomom<br />

chorobowym towarzyszy deformacja liści, a nawet ich opadanie.<br />

Celem badań była identyfikacja grzybów wywołujących plamistości i nekrozy<br />

liści azalii Rhododendron L. w Ogrodzie Botanicznym Uniwersytetu Jagiellońskiego<br />

w Krakowie.<br />

Badania wykonano w latach 2009-2010 na kilkudziesięciu krzewach azalii.<br />

Analizę stanu zdrowotnego przeprowadzano w pięciu terminach, od maja do<br />

września. Do badań laboratoryjnych corocznie pobrano liście z objawami plamistości<br />

i nekroz (500 fragmentów z liści zielonych, żywych i 500 fragmentów<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 278-281<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


z liści opadłych). Izolację i hodowlę grzybów przeprowadzono zgodnie ze standardowymi<br />

metodami stosowanymi w fitopatologii, a oznaczanie do gatunku<br />

w oparciu o klucze mikologiczne.<br />

W obu sezonach wegetacyjnych na liściach azalii widoczne były przebarwienia<br />

i plamistości zróżnicowane pod względem kształtu, koloru i wielkości. W maju<br />

i czerwcu plamistości zlokalizowane były na brzegach i wierzchołkach liści.<br />

W późniejszym czasie obserwowano rozległe plamy w obrębie blaszki liściowej,<br />

barwa plam zmieniała odcień od jasno do ciemnobrązowej. Tkanka wokół plam<br />

przybierała barwę jasnoczerwoną. Plamy ulegały nekrozie, a liście opadały.<br />

W wyniku analizy mikologicznej z porażonego materiału roślinnego wyodrębniono<br />

ponad 2600 kolonii grzybów z rodzajów: Acremonium, Alternaria,<br />

Arthrinium, Aspergillus, Chaetomium, Cladosporium, Coelophoma, Cylindrocarpon,<br />

Drechslera, Epiccocum, Farrowia, Fusarium, Gilmaniella, Humicola,<br />

Metarhizium, Mortierella, Mucor, Mycosphaerella, Myrothecium, Oidiodendron,<br />

Paecilomyces, Papularia, Papulaspora, Penicillium, Pestalotia, Phialophora,<br />

Phoma, Rhizomucor, Rhizopus, Sordaria, Talaromyces, Trichoderma<br />

oraz Ulocladium.<br />

Z liści żywych wyizolowano ponad 1400 kolonii grzybów, należących do 49<br />

gatunków. Alternaria alternata i Penicillium expansum dominowały w obu<br />

sezonach i stanowiły ponad 24% i 21% ogółu wyodrębnionych kolonii grzybów.<br />

Do dominantów zaliczono także Pestalotia sydowiana, Phoma macrostoma<br />

oraz Humicola fuscoatra v. fuscoatra. Liście z objawami plamistości zasiedlane<br />

były również przez: Phialophora cinerescens, Ph. cyclaminis, Ph. fastigiata<br />

i Ph. richardsiae stanowiące, podobnie jak grzyby rodzaju Trichoderma:<br />

T. harzianum, T. koningii, T. polysporum i T. viride oraz gatunek Epicoccum<br />

purpurascens, ponad 4% ogółu wyodrębnionych kolonii.<br />

Na porażonych tkankach bytowały licznie (stanowiące od 1-5% ogółu<br />

wyodrębnionych kolonii): Aspergillus oryzae, Fusarium culmorum, F. poae,<br />

Humicola grisea v. grisea, Mycosphaerella rhododendri, Penicillium citrinum,<br />

P. verrucosum v. verrucosum i Pestalotia truncata.<br />

Ze znekrotyzowanych tkanek liści opadłych wyizolowano ponad 1100 kolonii<br />

grzybów, należących do 46 gatunków. P. sydowiana, A. alternata oraz<br />

P. expansum (stanowiące ponad 21%, 14% i 12% ogółu wyodrębnionych kolonii),<br />

dominowały zarówno w pierwszym, jak i drugim sezonie wegetacyjnym.<br />

Wśród grzybów bytujących na opadłych liściach występowały także gatunki<br />

z rodzaju Penicillium: P. cremeo-griseum, P. herquei, P. implicatum, P. lividum,<br />

P. waksmanii i P. verrucosum v. cyclopium stanowiące ponad 11%<br />

wszystkich kolonii. Udział P. truncata wynosił niespełna 8%, a grzybów z rodzaju:<br />

Phoma: Ph. chrysanthemicola, P. exigua, P. herbarum i P. macrostoma<br />

ponad 6% ogółu wyodrębnionych kolonii. Z tkanek z objawami plamistości<br />

izolowano także w znacznej liczbie kolonii: E. purpurascens, F. culmorum,<br />

H. grisea v. grisea, Mortierella isabellina, Ph. cyclaminis oraz T. koningii.<br />

279


280<br />

Stan zdrowotny azalii Rhododendron L. w Ogrodzie Botanicznym UJ określono<br />

jako dobry, choć widoczne różnorakie przebarwienia i plamy nekrotyczne<br />

obniżały ich walory dekoracyjne.<br />

Summary<br />

SPOTS AND NECROSIS ON THE LEAVES OF AZALEAS<br />

RHODODENDRON L. IN THE BOTANIC GARDEN<br />

OF JAGIELLONIAN UNIVERSITY<br />

Botanic Garden of Jagiellonian University was established in 1783 in the<br />

former garden of the Czartoryski family. It is the oldest institution of its kind<br />

in Poland and is an extremely valuable natural object.<br />

One of the collections of the Botanic Garden are ericaceous plants Ericaceae,<br />

including plants of the genus Rhododendron L. Among other things in the<br />

garden, teenage pontic azalea bushes (golden rhododendron) Azalea pontica<br />

L., Rhododendron luteum L. Sweet, Dahuria azalea Rhododendron dauricum<br />

L., and Chinese azalea Azalea obtusa Lindl., Rhododendron molle L. is grown.<br />

Azaleas are long-lived bushes, with different conformation, flowers in fiery<br />

colors: yellow, red, orange, but also white, creamy white, lilac, pink. About<br />

decorative shrubs also determine the leaves. Leaves of evergreen or partially<br />

evergreen (with seasonal leaves) species are lengthwise lanceolate, green,<br />

shiny, underneath often bristles hairy and covered with glands.<br />

The leaves of azaleas are susceptible to the occurrence of discolorations,<br />

spots and necrosis mostly caused by fungi which inhabited them. Disease<br />

symptoms accompany deformation of the leaves, and even their fall.<br />

The aim of this study was the identification of fungi causing leaf spots<br />

and necrosis azalea Rhododendron L. in the Botanic Garden of Jagiellonian<br />

University in Krakow.<br />

The research were carried out in 2009-2010 in several azalea bushes.<br />

Analysis of health status was carried out in five periods, from May to<br />

September. For laboratory tests annually collected leaves with symptoms of<br />

spots and necrosis (500 fragments from the green leaves and 500 fragments of<br />

fallen leaves). Isolation and cultivation of fungi was carried out according to<br />

standard methods used in phytopathology and the designation to the species<br />

on the basis of mycological keys.<br />

In both growing seasons on the leaves of azaleas were visible discolorations<br />

and spots vary in terms of shape, color and size. In May and June spots were<br />

located on the edges and tops of leaves. Later, large spots were observed<br />

within the leaf, the color shade spots varied from light to dark brown. Tissue<br />

around the spots took on light red color. The spots changed into necrosis and<br />

the leaves fell.


As a result of mycological analysis of infected plant material more than 2600<br />

fungi colonies of the genera: Acremonium, Alternaria, Arthrinium, Aspergillus,<br />

Chaetomium, Cladosporium, Coelophoma, Cylindrocarpon, Drechslera, Epiccocum,<br />

Farrowia, Fusarium, Gilmaniella, Humicola, Metarhizium, Mortierella,<br />

Mucor, Mycosphaerella, Myrothecium, Oidiodendron, Paecilomyces, Papularia,<br />

Papulaspora, Penicillium, Pestalotia, Phialophora, Phoma, Rhizomucor, Rhizopus,<br />

Sordaria, Talaromyces, Trichoderma, and Ulocladium were isolated.<br />

From green leaves isolated more than 1400 fungi colonies representing 49<br />

species. Alternaria alternata and Penicillium expansum were dominated in<br />

both seasons and constituted more than 24% and 21% of the entire fungal<br />

community. For the dominants also include: Pestalotia sydowiana, Phoma<br />

macrostoma and Humicola fuscoatra v. fuscoatra. Leaves with spotted<br />

symptoms were also colonized by: Phialophora cinerescens, Ph. cyclaminis,<br />

Ph. fastigiata, Ph. fastigiata, Ph. richardsiae constitute such as fungi of genus<br />

Trichoderma: T. harzianum, T. koningii, T. polysporum, T. viride and species<br />

Epiccocum purpurascens more than 4% of all isolated colonies.<br />

Diseased tissue were inhabited (constituting from 1-5% of total isolated<br />

colonies): Aspergillus oryzae, Fusarium culmorum, F. poae, Humicola grisea<br />

v. grisea, Mycosphaerella rhododendri, Penicillium citrinum, P. verrucosum v.<br />

verrucosum and Pestalotia truncata.<br />

From the necrotic tissues of fallen leaves isolated more than 1100 fungi<br />

colonies, representing 46 species. Pestalotia sydowiana, A. alternata and<br />

P. expansum (constituting more than 21%, 14% and 12% of total isolated<br />

colonies) dominated both in the first and second growing season. Among the<br />

fungi presented on fallen leaves also occurred species of genus Penicillium:<br />

P. cremeo-griseum, P. herquei, P. implicatum, P. lividum, P. waksmanii and P.<br />

verrucosum v. cyclopium constituted more than 11% of all colonies. P. truncata<br />

was less than 8% and the fungi of genus Phoma: Ph. chrysanthemicola, Ph.<br />

exigua, Ph. herbarum and Ph. macrostoma more than 6% of all isolated<br />

colonies. From tissues with spotted symptoms was also isolated a large number<br />

of colonies: E. purpurascens, F. culmorum, H. grisea, Mortierella isabellina,<br />

Ph. cyclaminis and T. koningii.<br />

The health status of azalea Rhododendron L. in the Botanic Garden of<br />

Jagiellonian University has been identified as a good, despite of variety,<br />

visible discolorations and necrotic spots diminishing their decorative value.<br />

281


282<br />

GRZYBY TOWARZYSZĄCE ROŚLINOM TATARAKU<br />

ZWYCZAJNEGO ACORUS CALAMUS L.<br />

W OKRESIE WEGETACJI<br />

Maria Kowalik<br />

Uniwersytet Rolniczy, Katedra Ochrony Roślin, Al. 29 Listopada 54,<br />

31-425 Kraków<br />

m.kowalik@ogr.ur.krakow.pl<br />

W terapii ogrodniczej oczko wodne spełnia znaczącą rolę, jest miejscem niezwykłym,<br />

przyciągającym uwagę dzieci, osób starszych i niepełnosprawnych.<br />

W ogrodach wodnych sadzone są rozmaite gatunki roślin wodnych i strefy<br />

brzegowej. Najczęściej spotykane są, oprócz tataraku zwyczajnego, grzybienie,<br />

pałki, sity, kaczeńce, niezapominajki, paprocie, irys żółty, grążel żółty, hiacynt<br />

wodny, jeżogłówka gałęzista, kropidło wodne, salwinia pływająca.<br />

Tatarak zwyczajny Acorus calamus L. jest rośliną wieloletnią, szybko rosnącą.<br />

Czerwonawa spłaszczona łodyga, równowąskie mieczowate liście oraz<br />

walcowata żółtozielona, później jasnobrązowa kolba są widocznymi elementami<br />

oczka wodnego, a intensywny zapach zwabia owady.<br />

W środowisku oczka wodnego zagrożenie ze strony mikobiota jest podwyższone,<br />

stąd celem badań była ocena stanu zdrowotnego tataraku zwyczajnego<br />

Acorus calamus L. oraz określenie grzybów występujących w jego fyllosferze.<br />

Stan zdrowotny tataraku zwyczajnego oceniano w latach 2006 oraz 2008-<br />

2010, w dwudziestu oczkach wodnych usytuowanych w ogrodach przydomowych<br />

na terenie woj. małopolskiego i podkarpackiego. Corocznie przeprowadzano<br />

pięć obserwacji od kwietnia do października. Do badań mikologicznych<br />

pobrano 600 fragmentów tkanek tataraku, wykazujących symptomy choroby<br />

w formie plamistości i nekroz. Izolację i hodowlę grzybów przeprowadzono<br />

zgodnie ze standardowymi metodami stosowanymi w fitopatologii, a grzyby<br />

oznaczono do gatunkuw oparciu o klucze mikologiczne.<br />

W czterech sezonach wegetacji, w większości oczek wodnych na liściach<br />

tataraku najczęściej widoczne były rozległe plamistości o wymiarach 15-20<br />

x 5-8 mm. Plamistości barwy żółtawej w maju i czerwcu były zlokalizowane<br />

w szczytowych partiach liści, w okresie późnoletnim przybierały barwę brązowo-brunatną<br />

i usytuowane były na całej powierzchni liści. Tkanka wokół plam<br />

zmieniała barwę od żółtej przez czerwonawą do jasnobrązowej. W niektórych<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 282-285<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


oczkach obserwowano plamistości w postaci wąskich, wrzecionowatych, brunatnych<br />

smug. Wzdłuż nerwów widoczne były mniejsze, o wymiarach 5-8 x 4-6<br />

mm, żółtawe przebarwienia z brunatnymi, okrągłymi plamami z czerwono-rudą<br />

obwódką. Tkanka w miejscu plam ulegała nekrozie. Największe nasilenie<br />

nekroz miało miejsce w październiku.<br />

W wyniku analizy mikologicznej porażonych tkanek uzyskano 565 izolatów<br />

grzybów z rodzajów: Alternaria, Ascochyta, Aspergillus, Botrytis, Chaetomium,<br />

Epicoccum, Fusarium, Humicola, Mortierella, Nigrospora, Nowakowskiella,<br />

Paecilomyces, Penicillium, Phialophora, Phoma, Rhizopus i Sordaria.<br />

Rośliny tataraku zwyczajnego zasiedlone były przez 28 gatunków grzybów<br />

pasożytniczych, ale tyko 3 gatunki: Alternaria alternata, Epicoccum purpurascens<br />

i Penicillium verrucosum v. cyclopium towarzyszyły wegetacji tataraku<br />

zwyczajnego w czterech sezonach wegetacyjnych. Pasożyty fakultatywne<br />

A. alternata i E. purpurascens nekrotyzowały tkanki tataraku we wszystkich<br />

oczkach wodnych, uznano je za dominujące w fyllosferze tataraku, stanowiły<br />

bowiem 49,03% i 5,84% ogółu wyodrębnionych kolonii grzybów. Do dominantów<br />

zaliczono także Paecilomyces farinosus, wyizolowany w dwu latach badań, ale<br />

stanowiący 7,0% ogółu wyodrębnionych kolonii. Na znekrotyzowanych tkankach<br />

bytowały Chaetomium globusom, Ch. olivaceum, Nigrospora sphaerica,<br />

Rhizopus oryzae, R. stolonifer i Sordaria fimicola. Grzyby z rodzaju Chaetomium<br />

stanowiły ponad 4% ogółu wyodrębnionych kolonii z fyllosfery tataraku.<br />

Z tkanek z objawami plamistości izolowano Fusarium culmorum, F. poae<br />

i F. sporotrichoides (w maju i czerwcu) oraz Botrytis cinerea (we wrześniu i październiku).<br />

Grzyby z rodzaju Fusarium stanowiły ponad 3%, a B. cinerea ponad<br />

4% ogółu kolonii. Grzyby z rodzaju Penicillium zasiedlały przeważnie liście tataraku<br />

we wrześniu i październiku i stanowiły prawie 11% całości zbiorowiska<br />

grzybów. Sporadycznie na początku okresu wegetacji izolowano Mortierella alpina,<br />

M. isabellina, M. parvispora i Nowakowskiella elegans.<br />

Wiele z tych grzybów, między innymi: A. alternata, F. sporotrichoides,<br />

P. verrucosum v. cyclopium, P. verrucosum v. verrucosum i P. verucosum v. corymbiferum<br />

należy do toksynotwórczych i przyczynia się w znacznym stopniu<br />

do szybko postępującej destrukcji tkanek roślin.<br />

Na tataraku zwyczajnym w 2006 r w oczku wodnym w Wieliczce zdiagnozowano<br />

plamistości powodowane przez Ascochyta acori. Grzyb ten określany<br />

jako monofagiczny, wyspecjalizowany patogen jest rzadko notowany w zbiorowiskach<br />

szuwarowych na terenie Polski.<br />

Pośród grzybów bytujących w fyllosferze tataraku zwyczajnego stwierdzono<br />

gatunki polifagiczne, zasiedlające fyllosferę wielu roślin w oczkach wodnych.<br />

Były to: A. alternata, E. purpurascens, B. cinerea, Ch. globosum, P. farinosus,<br />

Penicillium expansum, P. verrucosum v. verrucosum, P. verrucosum v. cyclopium<br />

i S. fimicola. Z liści i łodyg tataraku zwyczajnego nie wyodrębniono<br />

grzybów z rodzaju Cladosporium. Na ten fakt mogła mieć wpływ zawartość<br />

w tkankach tataraku olejków eterycznych, alkaloidów, garbników i fitoncydów.<br />

283


284<br />

Stan zdrowotny tataraku zwyczajnego w badanych oczkach wodnych był<br />

bardzo dobry, względnie dobry, co nie zmienia faktu, że grzyby chorobotwórcze<br />

towarzyszące roślinom tataraku w okresie wegetacji są zagrożeniem dla innych<br />

roślin. Różnorakie plamistości i nekrozy na liściach roślin nie polepszają<br />

walorów estetycznych oczka wodnego, a wręcz przeciwnie w znacznym stopniu<br />

je obniżają.<br />

Summary<br />

FUNGI ASSOCIATED WITH PLANTS CALAMUS ACORUS CALAMUS<br />

L. DURING THE VEGETATION SEASON<br />

The therapy garden pond fulfills an important role, is a unique place, attracting<br />

the attention of children, the elderly and disabled. The water gardens<br />

are planted various species of aquatic plants and coastal areas. The most<br />

common are, in addition to calamus, water lilies, cattails, rushes, marigolds,<br />

ferns, yellow iris, yellow water lily, water hyacinth, branched bur-reed, fine-<br />

-leaved dropwort, floating moss.<br />

Calamus (drug sweet flag) Acorus calamus L. is a perennial, fast growing<br />

plant. Reddish, flattened stem, lineal sword shape, yellow-green leaves and<br />

cylindrical, later light brown butt are visible elements of the pond, and the<br />

intense smell lures insects.<br />

In the environment of the pond threat from mycobiota is increased, hence<br />

the purpose of the study was to determine the health status of calamus Acorus<br />

calamus L. and identification of fungi occurring in the phyllosphere.<br />

The health status of calamus were carried out in the years 2006 and<br />

2008-2010, in twenty ponds located in house gardens on the Malopolska and<br />

Podkarpackie area. Annually five observations were carried out from April<br />

to October. For mycological tests of tissues collected 600 pieces of calamus,<br />

showing symptoms of the disease in the form of spots and necrosis. Isolation<br />

and cultivation of fungi was carried out according to standard methods used<br />

in phytopathology, and fungi were determined to species on the basis of mycological<br />

keys.<br />

In the four growing seasons, in most ponds on the leaves of calamus were<br />

visible mostly large sized spotted measuring 15-20 x 5-8 mm. Yellowish spots<br />

in May and June were located in the upper parts of the leaves, during late<br />

summertime assume a brown color and were located over the entire surface of<br />

the leaves. Tissue around the spots changed color from yellow through reddish<br />

to light brown. In some ponds were observed spots in narrow, fusiform, brown<br />

streaks. Along the veins were visible smaller, measuring 5-8 x 4-6 mm, yellowish<br />

discoloration of the brown, round spots of red and ruddy halo. Tissue site<br />

underwent necrotic spots. The greatest necrosis were noted in October.<br />

As a result of mycological tests of infected tissues 565 isolates of the genera<br />

of fungi: Alternaria, Ascochyta, Aspergillus, Botrytis, Chaetomium, Epi-


coccum, Fusarium, Humicola, Mortierella, Nigrospora, Nowakowskiella, Paecilomyces,<br />

Penicillium, Phialophora, Phoma, Rhizopus and Sordaria were<br />

obtained. Calamus plants were inhabited by 28 species of parasitic fungi, but<br />

only as three species: Alternaria alternata, Epicoccum purpurascens and Penicillium<br />

verrucosum v. cyclopium associated calamus grow in the four growing<br />

seasons. Facultative parasites of A. alternata and E. purpurascens necrosis<br />

calamus tissue in all ponds, were found to be dominant in calamus phyllosphere,<br />

constituted 49.03% and 5.84% of the total isolated fungi colonies. For<br />

the dominants were also included Paecilomyces farinosus, isolated in the two<br />

years of research, but which constitude 7.0% of total isolated colonies. On necrosis<br />

tissues inhabited Chaetomium globusom, Ch. olivaceum, Nigrospora<br />

sphaerica, Rhizopus oryzae, R. stolonifer and Sordaria fimicola. Fungi of the<br />

genus Chaetomium constituted more than 4% of isolated colonies from calamus<br />

phyllosphere. From tissues with symptoms of spots Fusarium culmorum,<br />

F. poae and F. sporotrichoides (in May and June) and Botrytis cinerea (September<br />

and October) were isolated. Fungi of the genus Fusarium constituted<br />

more than 3%, and B. cinerea more than 4% of all colonies. Fungi of the genus<br />

Penicillium inhabited mostly calamus leaves in September and October, and<br />

constituted for nearly 11% of the total fungal community. Occasionally at the<br />

beginning of the growing season Mortierella alpina, M. isabellina, M. parvispora<br />

and Nowakowskiella elegans were isolated.<br />

Many of these fungi, for example: A. alternata, F. sporotrichoides, P. verrucosum<br />

v. cyclopium, P. verrucosum v. verrucosum and P. verucosum v. corymbiferum<br />

is a toxin and contributes significantly to the rapid destruction<br />

tissues of plants.<br />

On calamus in a pond in Wieliczka, in 2006, diagnosed spots causing by<br />

Ascochyta acori. This fungus is known as monofagous, specialized pathogen is<br />

rarely quoted in the rush communities on Polish territory.<br />

Among the fungi inhabiting phyllosphere calamus polifagous species were<br />

noted, inhabiting phyllosphere many plants in the ponds. They were: A. alternata<br />

and E. purpurascens, B. cinerea, Ch. globosum, P. farinosus, Penicillium<br />

expansum, P. verrucosum v. verrucosum, P. verrucosum v. cyclopium and S.<br />

fimicola. From leaves and stems of calamus fungus from the genus Cladosporium<br />

was not isolated. For this fact could affect the content in the tissues of<br />

calamus essential oils, alkaloids, tannins and phytoncides.<br />

The health status of calamus in testing ponds was very good, relatively<br />

good, which does not change the fact that plant pathogenic fungi associated<br />

with calamus plants in the growing season are a threat to other plants. Various<br />

spots and necrosis on the leaves of plants does not improve the aesthetic<br />

qualities of the pond, on the contrary significantly reduce them.<br />

285


286<br />

PODATNOŚĆ WYBRANYCH ODMIAN CEBULI<br />

(ALLIUM CEPA L.) NA PORAŻENIE<br />

PRZEZ BAKTERIE PATOGENICZNE<br />

Beata Kowalska i Urszula Smolińska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3,<br />

96-100 Skierniewice<br />

beata.kowalska@iwarz.pl<br />

Od kilku lat w Polsce notuje się znaczny wzrost liczby chorób bakteryjnych<br />

na roślinach warzywnych, w tym także na cebuli. Poważne straty zauważalne<br />

są w uprawach polowych, w transporcie oraz szczególnie podczas<br />

przechowywania. Przyczyną nasilenia chorób bakteryjnych są między innymi<br />

warunki atmosferyczne – wysoka temperatura w okresie wegetacji warzyw,<br />

duże ilości opadów, gradobicia, silne wiatry, okresowe podtopienia pól. Ponadto,<br />

ze względu na brak wystarczająco skutecznych środków ochrony istnieją<br />

ogromne trudności w zapobieganiu tym chorobom. Jedną ze skutecznych<br />

metod ochrony roślin przed chorobami jest uprawa odmian roślin odpornych.<br />

Odporność roślin warzywnych na bakteriozy stanowi istotną informację charakteryzującą<br />

daną odmianę. Jednakże w obecnym wykazie zarejestrowanych<br />

odmian cebuli brak jest takich informacji.<br />

Celem pracy była ocena podatności wybranych odmian cebuli (Allium cepa<br />

L.) na porażenie przez bakterie Burkholderia cepacia, Burkholderia gladioli<br />

pv. alliicola i Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum.<br />

Doświadczenie prowadzono w warunkach laboratoryjnych. Materiałem do<br />

badań były cebule różnych odmian uzyskane ze Stacji Doświadczalnej w Lućmierzu<br />

COBORU (Bonus F 1 , Cymes, Cyklop, Dakota F 1 , Fireball F 1 , Golden<br />

Spike F 1 , Ławica, Majka, Otylia, Polanowska, Redmate, REO 550 F 1 , Scarlet,<br />

Sherpa F 1 , Takstar F 1 , Tęcza, Wenta, Zeta, Zorza), z Rolniczej Spółdzielni Produkcyjnej<br />

w Hopkie (Alonso F 1 , Armstrong F 1 , Drago F 1 , Hyline F 1 , Narvito<br />

F 1 , Vision F 1 ) oraz z Pola Doświadczalnego Instytutu Warzywnictwa (Canto<br />

F 1 , Durco F 1 , Hybelle F 1 , Hyfort F 1 , Napoleon F 1 , Red Baron, Sprinter F 1 , Wellington<br />

F 1 ).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 286-288<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Doświadczenie prowadzono na łuskach cebuli w warunkach laboratoryjnych.<br />

Analizowano podatność wymienionych odmian na porażenie przez następujące<br />

szczepy wzorcowe: P. carotovorum subsp. carotovorum, B. cepacia<br />

oraz B. gladioli pv. alliicola.<br />

Odmiany uzyskane z COBORU oraz z Pola Doświadczalnego IW nie różniły<br />

się podatnością na porażenie przez B. cepacia. Zarówno w pierwszej serii<br />

doświadczenia, kiedy stężenie inokulum wynosiło 1,0-2,5 x 10 8 jtk/ml, jak<br />

również w drugiej serii doświadczenia przy stężeniu zmniejszonym do 2,0-4,0<br />

x 10 6 jtk/ml, uzyskano wysoki stopień porażenia cebul, wynoszący dla wszystkich<br />

badanych odmian wartość zbliżoną do maksymalnej. Odmiany uzyskane<br />

ze Spółdzielni Produkcyjnej w Hopkie wykazywały większe zróżnicowanie<br />

w podatności na porażenie przez tę bakterię. Najodporniejsze były odmiany<br />

Alonso F 1 i Vision F 1 .<br />

Większe zróżnicowanie w podatności odmian cebuli wykazano dla bakterii<br />

B. gladioli pv. alliicola oraz P. carotovorum subsp. carotovorum. Żadna z badanych<br />

odmian z COBORU nie była całkowicie odporna na testowane bakterie.<br />

Odmiany Scarlet, Otylia i Fireball F 1 wykazały najmniejszą podatność na porażenie<br />

przez B. gladioli pv. alliicola. Średnica uzyskiwanych gnilnych plam<br />

na cebulach tych odmian wynosiła odpowiednio 15,8 mm, 22,0 mm i 22,3 mm.<br />

Podczas gdy dla odmiany najbardziej podatnej np. Bonus F 1 – 56,2 mm.<br />

Zmiany chorobowe na cebulach odmian uzyskanych z COBORU, wywołane<br />

przez P. carotovorum subsp. carotovorum były znacznie mniejsze niż te<br />

powodowane przez szczepy Burkholderia. Najmniejszą podatność na porażenie<br />

przez P. carotovorum subsp. carotovorum wykazały odmiany: Polanowska,<br />

Cymes, Dakota, Majka, Tęcza, Wenta.<br />

Podsumowując można stwierdzić, że niemal wszystkie badane odmiany<br />

cebuli (Allium cepa L.) wykazywały wysoką podatność na porażenie przez<br />

B. cepacia. oraz żadna z 33 badanych odmian cebuli nie była całkowicie odporna<br />

na wszystkie testowane bakterie: B. cepacia, B. gladioli pv. alliicola i P. carotovorum<br />

subsp. carotovorum. Najmniejszą podatność na porażenie wykazała<br />

odmiana Alonso F 1 .<br />

Summary<br />

ONION VARIETIES SUSCEPTIBILITY TO INFECTION<br />

BY BACTERIAL PATHOGENS<br />

Bacterial diseases cause serious problems in cultivation of onion (Allium<br />

cepa L.) in Poland and abroad. One of some protection methods is cultivation<br />

of bacterial resistant cultivars. However, there is no information about the<br />

resistance of onion cultivars registered in Poland to bacterial diseases.<br />

Therefore, in presented work, 33 varieties of onion were examined for their<br />

287


288<br />

susceptibility to infection by Burkholderia cepacia, Burkholderia gladioli pv.<br />

alliicola, Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. It was found that<br />

almost all studied cultivars were sensitive to infection by B. cepacia. In the<br />

case of P. carotovorum subsp. carotovorum and B. gladioli pv. alliicola the<br />

susceptibility of studied varieties was more variable. Among all tested cultivars<br />

Alonso F 1 showed the highest resistance to bacterial infection.


WPŁYW SPOSOBU INOKULACJI I WARUNKÓW HODOWLI<br />

NA OBJAWY CHORÓB BAKTERYJNYCH KUKURYDZY<br />

Krzysztof Krawczyk, Agnieszka Zwolińska, Joanna Kamasa<br />

i Anna Maćkowiak – Sochacka<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

K.Krawczyk@iorpib.poznan.pl<br />

Kukurydza (Zea mays) jest jedną z najważniejszych upraw w polskim rolnictwie.<br />

Jest ona uprawiana w naszym kraju między innymi do produkcji żywności,<br />

paszy dla zwierząt oraz na potrzeby sektora energetycznego.<br />

W międzynarodowej literaturze naukowej wymienia się kilkanaście gatunków<br />

bakterii powodujących choroby kukurydzy. W Polsce stan wiedzy na<br />

ten temat jest wciąż niezadowalający. Dotychczas w polskiej literaturze naukowej<br />

istnieją tylko dwie publikacje dotyczące bakteryjnych chorób kukurydzy.<br />

Z tychże powodów w Zakładzie Wirusologii i Bakteriologii IOR-PIB w Poznaniu<br />

podjęto temat występowania chorób bakteryjnych kukurydzy w Polsce.<br />

W mikrobiologii, aby móc uznać, że badany przez nas izolat bakteryjny jest<br />

czynnikiem wywołującym daną chorobę, niezbędne jest przeprowadzenie testu<br />

biologicznego na roślinie żywicielskiej (inokulacji). Pozytywny wynik tego testu<br />

oznacza spełnienie trzeciego postulatu Kocha, co uprawnia nas do stwierdzenia<br />

że mamy do czynienia z właściwym czynnikiem chorobotwórczym.<br />

W naszym doświadczeniu porównano pięć opisanych w literaturze metod<br />

przeprowadzania testów biologicznych w różnych warunkach hodowlanych.<br />

Metody te polegały na (i) wstrzykiwaniu bądź wlewaniu zawiesiny bakteryjnej<br />

w pseudostem młodej <strong>rośliny</strong>, (ii) wstrzykiwaniu zawiesiny bakteryjnej<br />

w liście kukurydzy przy pomocy strzykawki nie zaopatrzonej w igłę, (iii) spryskiwaniu<br />

(pod normalnym lub pod zwiększonym ciśnieniem) powierzchni liści<br />

zawiesiną bakteryjną po uprzednim delikatnym uszkodzeniu ich epidermy<br />

przy pomocy np. karborundu, (iv) spryskiwaniu powierzchni roślin zawiesiną<br />

bakteryjną, bez wcześniejszego, mechanicznego uszkadzania ich epidermy,<br />

oraz (v) bezpośrednim nanoszeniu badanych kolonii bakteryjnych na roślinę<br />

w miejsce w którym uprzednio mechanicznie uszkodzono epidermę.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 289-290<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

289


290<br />

Celem przeprowadzonych badań było określenie wpływu sposobu inokulacji<br />

i warunków hodowli na wytwarzane objawów chorobowych przez referencyjne<br />

izolaty bakteryjne oraz te izolowane z roślin kukurydzy w Polsce.<br />

Summary<br />

THE INFLUENCE OF AN INOCULATION METHODS AND GROWTH<br />

CONDITIONS ON DEVELOPING THE BACTERIAL DISEASE<br />

SYMPTOMS ON MAIZE PLANTS<br />

Maize (Zea mays) is one of the most important crops in Poland. It is grown<br />

for many purposes including food and fodder production and for the needs of<br />

energetic industry. Worlds scientific literature mentions a several bacterial<br />

species causing the diseases of maize plants. In Polish scientific literature<br />

there is still only a few information concerning this subject. That is why in the<br />

Department of Virology and Bacteriology in Poznań we started to investigate<br />

bacterial diseases of maize in Poland.<br />

In microbiology, to be able to say that investigated bacterial isolate is the<br />

real causal agent of the disease, it is necessary to perform a biological test on a<br />

healthy plant (inoculation). A positive result of such test means the fulfilling of<br />

the third Koch`s postulate, which allows us to claim that investigated bacterial<br />

isolate is a real causal agent of the disease.<br />

In our investigation we compared five different inoculation methods,<br />

described in a literature, in a different growth conditions. The tested<br />

inoculation methods involved (i) injection or pouring a bacterial suspension into<br />

a pseudostem of a young maize plants, (ii) injection of a bacterial suspension<br />

into maize leaves using a syringe without a needle, (iii) spraying (under normal<br />

or increased pressure) a surface of the leaves with a bacterial suspension after<br />

a gentle damaging of an epidermic with a carborundum, (iv) spraying of the<br />

surface of the leaves with a bacterial suspension without previous damaging<br />

of the epidermic and (v) direct placing of the colonies of the tested bacterial<br />

isolates on the plants in places with previously damaged epidermic.<br />

The purpose of performed investigation was describing an influence of a<br />

different inoculation methods and different growth conditions on developing a<br />

diseases symptoms on inoculated maize plants.


ZBIOROWISKA GRZYBÓW ZASIEDLAJĄCYCH<br />

ZIARNIAKI PSZENICY OZIMEJ UPRAWIANEJ PO<br />

ROŚLINACH KAPUSTOWATYCH NAWOŻONYCH SIARKĄ<br />

Tomasz P. Kurowski, Barbara Majchrzak, Edyta Jaźwińska<br />

i Elżbieta Kowalska<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-721 Olsztyn<br />

kurowski@uwm.edu.pl<br />

W warunkach upraszczania płodozmianów i wysiewania niewielkiej liczby<br />

gatunków roślin o zbliżonej technologii uprawy, dużego znaczenia, jako<br />

przedplony zbóż, nabierają <strong>rośliny</strong> kapustowate. Wykazują one pozytywny<br />

wpływ na zdrowotność i plonowanie roślin następczych, głównie poprzez wytwarzanie<br />

glulozynolanów, związków o charakterze bakterio- i grzybobójczym,<br />

w skład których wchodzi siarka. Dlatego też <strong>rośliny</strong> kapustowate charakteryzują<br />

się dużym zapotrzebowaniem na siarkę, która wywiera korzystny wpływ<br />

na wydajność i jakość produkowanych z ich nasion olejów. Wyższe nawożenie<br />

siarką zwiększa również koncentrację glukozynolanów w roślinach. Pozostają<br />

one w resztkach roślin kapustowatych na polu i hamują rozwój patogenów<br />

atakujących z gleby <strong>rośliny</strong> uprawiane następczo.<br />

W latach 2007-2009 w Zakładzie Produkcyjno-Doświadczalnym w Bałcynach<br />

przeprowadzono doświadczenie poletkowe nad wpływem nawożenia siarką<br />

uprawianych jako przedplony roślin kapustowatych (rzepak ozimy, rzepak<br />

jary, gorczyca biała, gorczyca sarepska) na zdrowotność wysiewanej po nich<br />

pszenicy ozimej i zasiedlenie jej organów przez grzyby. Celem niniejszych badań<br />

było określenie wpływu nawożonych siarką roślin przedplonowych z rodziny<br />

kapustowatych na skład gatunkowy i liczebność grzybów zasiedlających<br />

ziarniaki uprawianej po nich pszenicy ozimej.<br />

Z ziarniaków pszenicy ozimej wyizolowano ogółem 11508 kolonii, w tym<br />

w 2007 roku 3944, w 2008 roku 3642, a w 2009 roku 3922 kolonie. Najwięcej<br />

kultur grzybów uzyskano z ziarna pszenicy uprawianej po gorczycy sarepskiej<br />

i rzepaku jarym (odpowiednio 2376 i 2374 kolonie), a najmniej po rzepaku<br />

ozimym i gorczycy białej (2230 i 2235 kolonii). Nawożenie siarką przedplonów<br />

kapustowatych wpłynęło nieznacznie na większą liczebność uzyskiwanych<br />

kultur, natomiast odkażanie zdecydowanie ją zmniejszało.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 291-293<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

291


292<br />

Wśród izolatów uzyskanych z ziarna pszenicy ozimej dominował gatunek<br />

Alternaria alternata, który stanowił 45,3% wszystkich wyosobnień. Zdecydowanie<br />

najwięcej kolonii pochodziło z ziarna pszenicy uprawianej po gorczycy<br />

białej, a najmniej z ziarna uprawianej po gorczycy sarepskiej. A. alternata<br />

był częściej otrzymywany z ziarniaków odkażonych. Nawożenie siarką roślin<br />

przedplonowych wpływało na wzrost liczebności tego gatunku.<br />

Bardzo licznie występowało Epicoccum nigrum, które stanowiło 16,6%<br />

wszystkich izolatów. Zdecydowanie najwięcej izolatów pochodziło z pszenicy<br />

uprawianej po rzepaku ozimym, a najmniej z uprawianej po gorczycy białej.<br />

Zarówno nawożenie siarką przedplonów, jak i odkażanie ziarna pszenicy nie<br />

wpłynęło na liczebność E. nigrum.<br />

Grzyby rodzaju Fusarium stanowiły aż 25,6% wszystkich wyosobnień.<br />

Dominował wśród nich gatunek F. poae – 8,8% wszystkich izolatów. Zdecydowanie<br />

najliczniej otrzymywano go z ziarna pszenicy ozimej uprawianej po<br />

gorczycy sarepskiej, a najmniej licznie z uprawianej po gorczycy białej. Uzyskano<br />

również 557 kolonii F. avenaceum, co stanowiło 4,8% wszystkich izolatów.<br />

Gatunek ten wystąpił w dużym nasileniu w ostatnim roku badań. Najwięcej<br />

kultur F. avenaceum uzyskano z ziarna pszenicy ozimej uprawianej po<br />

rzepaku jarym, a najmniej z uprawianej po rzepaku ozimym. Zdecydowanie<br />

więcej kolonii grzybów rodzaju Fusarium pochodziło z ziarna nieodkażanego<br />

niż z odkażanego. F. poae częściej izolowano z ziarna pszenicy pochodzącego<br />

z poletek, na których przedplon nawożono siarką, natomiast pozostałe grzyby<br />

rodzaju Fusarium liczniej występowały na poletkach nie nawożonych siarką.<br />

Grzybem o uzdolnieniach patogenicznych w stosunku do zbóż, często izolowanym<br />

z ziarna pszenicy, było Bipolaris sorokiniana, które stanowiło 3,3%<br />

wszystkich wyosobnień. Zdecydowanie najliczniej gatunek ten występował na<br />

ziarnie pszenicy ozimej, uprawianej, po pszenicy ozimej, jako kombinacji kontrolnej<br />

(1,8% wszystkich wyizolowanych kultur). Większą liczebność kultur<br />

stwierdzono na poletkach, na których przedplon nawożono siarką. Z ziarna<br />

odkażanego uzyskano więcej kolonii grzybów niż z ziarna nieodkażanego.<br />

Microdochium nivale wystąpiło jedynie w ostatnim roku badań i stanowiło<br />

1,8% wszystkich izolatów. Zdecydowanie najliczniej występowało na ziarnie<br />

pszenicy ozimej, uprawianej, po pszenicy ozimej, a najmniej licznie na<br />

ziarnie pochodzącym z uprawy rzepaku jarego, jako przedplonu. Nieco więcej<br />

kultur wyizolowano z ziarna, w którym przedplonu nie nawożono siarką niż<br />

z nawożonego. Po powierzchniowym odkażeniu ziarna liczebność patogena<br />

była zdecydowanie większa niż wśród izolatów pochodzących z materiału nie<br />

odkażanego.<br />

Podsumowując można stwierdzić, że zarówno gatunek uprawianej, jako<br />

przedplon pod pszenicę ozimą, <strong>rośliny</strong> z rodziny Brassicaceae, jak i nawożenie<br />

siarką, miały wpływ na skład gatunkowy i liczebność izolowanych z ziarna<br />

pszenicy grzybów.


Summary<br />

FUNGI COLONIZING THE KERNELS OF WINTER WHEAT GROWN<br />

AFTER SULFUR-FERTILIZED PLANTS<br />

OF THE FAMILY BRASSICACEAE<br />

The objective of a field experiment carried out in 2007 – 2009 at the<br />

Production and Experimental Station in Bałcyny was to determine the effect<br />

of sulfur fertilization of cruciferous (winter rapeseed, spring rapeseed, white<br />

mustard, Chinese mustard) grown as previous crop on the species composition<br />

and abundance of fungi colonizing the kernels of winter wheat grown as the<br />

aftercrop.<br />

The highest number of fungal cultures were isolated from the grain of winter<br />

wheat grown after Chinese mustard and spring rapeseed. Sulfur fertilization<br />

of plants of the family Brassicaceae grown as previous crop contributed to an<br />

insignificantly higher abundance of fungi, whereas disinfection considerably<br />

reduced the population size of fungal pathogens.<br />

The predominant fungal species was Alternaria alternata. The highest and<br />

lowest number of isolates were obtained from the grain of winter wheat grown<br />

after white mustard and Chinese mustard, respectively. Epicoccum nigrum<br />

was present in great abundance. The highest and lowest number of isolates<br />

were obtained from the grain of winter wheat grown after winter rapeseed<br />

and white mustard, respectively. F. poae dominated among fungi of the genus<br />

Fusarium. The highest and lowest number of isolates were obtained from<br />

the grain of winter wheat grown after Chinese mustard and white mustard,<br />

respectively. The highest and the lowest number of F. avenaceum cultures<br />

were isolated from the grain of winter wheat grown after spring rapeseed and<br />

winter rapeseed, respectively.<br />

The results of this study show that the species composition and abundance<br />

of fungi isolated from winter wheat grain were affected by both the species of<br />

Brassicaceae plants grown as previous crop and sulfur fertilization.<br />

293


294<br />

GRZYBY ZASIEDLAJĄCE ZIARNIAKI PSZENICY JAREJ<br />

UPRAWIANEJ W SYSTEMIE KONWENCJONALNYM<br />

I EKOLOGICZNYM<br />

Tomasz P. Kurowski, Urszula Wysocka i Marta Damszel<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-721 Olsztyn<br />

marta.damszel@uwm.edu.pl<br />

Podstawowym zadaniem rolnictwa jest produkcja żywności gwarantującej<br />

konsumentom wysoką jakość i bezpieczeństwo żywnościowe. Postępujący proces<br />

intensyfikacji produkcji rolniczej spowodował ograniczenie asortymentu<br />

uprawianych roślin w gospodarstwie do dwóch, trzech gatunków technologicznie<br />

podobnych sprawiając, że udział zbóż w strukturze zasiewów przekracza<br />

70%. Konsekwencją ubożenia gatunkowego upraw jest szereg ekologicznie niekorzystnych<br />

procesów w siedlisku roślin. Dochodzi do zmian proporcji komponentów<br />

ziarna, ich właściwości fizykochemicznych, a także liczebności i składu<br />

gatunkowego mikroorganizmów zasiedlających ziarniaki. Często prowadzi to<br />

do kompensacji grzybów chorobotwórczych względem roślin uprawnych oraz<br />

ubożenia lub selekcji naturalnych populacji drobnoustrojów, chroniących <strong>rośliny</strong><br />

przed grzybami patogenicznymi. Naruszenie dynamicznej równowagi<br />

skutkuje także występowaniem nowych patogenów i zmniejszeniem populacji<br />

naturalnych wrogów. Opisywane zjawiska przyczyniają się do zwiększonego<br />

występowania chorób powodowanych przez grzyby, które nie tylko ograniczają<br />

plonowanie roślin, ale także obniżają jakość i zdrowotność płodów rolnych.<br />

W intensywnym rolnictwie konwencjonalnym negatywne skutki ograniczonej<br />

roli naturalnych procesów biologicznych w redukcji czynników chorobotwórczych<br />

są kompensowane poprzez stosowane środki ochrony roślin. Metody<br />

chemicznej ochrony roślin mają jednak w ostatnich latach coraz więcej przeciwników<br />

i jest to związane ze wzrostem świadomości ekologicznej. Stosowane<br />

na szeroką skalę chemiczne środki ochrony roślin uważane są za czynnik<br />

istotnie wpływający na degradację środowiska naturalnego oraz niekorzystnie<br />

oddziałujący na <strong>zdrowi</strong>e ludzi w formie pozostałości w płodach rolnych. Skutkuje<br />

to wzrostem zainteresowania żywnością produkowaną metodami ekologicznymi,<br />

w których, poprzez wprowadzenie biologicznych sposobów ograniczania<br />

czynników chorobotwórczych, przeciwdziała się negatywnym skutkom<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 294-296<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


nadmiernej chemizacji. Za ważne w zwalczaniu chorób uznaje się interakcje<br />

między mikroorganizmami. Dobry stan fitosanitarny roślin uzyskuje się tworząc<br />

warunki sprzyjające wzrostowi i rozwojowi grzybów saprotrofitycznych,<br />

które poprzez konkurencję lub właściwości nadpasożytnicze mogą ograniczać<br />

liczebność patogenów. Szczególnie ważne jest monitorowanie i diagnozowanie<br />

stanu sanitarnego ziarna, które stanowi bezpośrednie ogniwo w łańcuchu troficznym<br />

ludzi i zwierząt.<br />

Celem podjętych badań było określenie liczebności i składu gatunkowego<br />

grzybów zasiedlających ziarno dwóch odmian pszenicy jarej uprawianej w systemie<br />

konwencjonalnym i ekologicznym.<br />

W latach 2004-2006 prowadzono doświadczenie łanowe mające na celu porównanie<br />

zdrowotności pszenicy jarej uprawianej w systemie konwencjonalnym<br />

i ekologicznym. Ze względów metodycznych do badań wytypowano dwa<br />

gospodarstwa ekologiczne (w Budziszewie i Zgniłobłotach) posiadające atest<br />

Ekolandu i dwa gospodarstwa konwencjonalne (w Jabłonowie i Łasinie). We<br />

wszystkich gospodarstwach uprawiano dwie odmiany: Koksa i Torka, jednak<br />

ze względów organizacyjnych w pierwszym roku badań (2004) na polach prowadzonych<br />

w systemie konwencjonalnym uprawiano jedynie odmianę Koksa.<br />

Przed zbiorem ziarna z pól doświadczalnych pobierano losowo kłosy do badań<br />

biometrycznych. Uzyskane z nich ziarniaki użyto w doświadczeniu. Analizę fitopatologiczną<br />

ziarna pszenicy jarej zebranego z pól produkcyjnych wykonano<br />

metodą opisaną przez NARKIEWICZ-JOdKO (1986). Z pól prowadzonych w systemie<br />

konwencjonalnym pobrano losowo, łącznie 2000, a z pól z uprawą ekologiczną<br />

2400 ziarniaków.<br />

Z ziarna pszenicy jarej wyosobniono ogółem 4491 kolonii grzybów, w tym:<br />

2450 kolonii z 2400 ziarniaków pochodzących z upraw ekologicznych, a 2041<br />

kolonii z 2000 ziarniaków pochodzących z systemu konwencjonalnego. W obu<br />

systemach uprawy najwięcej grzybów izolowano w drugim roku badań. W latach<br />

2005 i 2006 stwierdzono wyższą frekwencję grzybów zasiedlających ziarniaki<br />

odmiany Koksa niż ziarniaki odmiany Torka. Ziarno pszenicy jarej pochodzące<br />

z uprawy metodami ekologicznymi zasiedlały grzyby należące do 35<br />

taksonów i kolonie niezarodnikujące, a z systemu konwencjonalnego 37 taksonów<br />

i kolonie niezarodnikujące. Wśród wyosobnionych kultur, niezależnie<br />

od systemu gospodarowania, dominował gatunek Alternaria alternata (47,1%<br />

wyosobnień z systemu ekologicznego i 48,2% z konwencjonalnego). Bardzo często<br />

izolowano także gatunek Epicoccum nigrum – zdecydowanie więcej z systemu<br />

ekologicznego (20,8%) niż z konwencjonalnego (14,0 %).<br />

Spośród grzybów zawierających gatunki patogeniczne w stosunku do zbóż<br />

najczęściej izolowano rodzaj Fusarium. W systemie produkcji metodami ekologicznymi<br />

stanowił on 10,4% wszystkich uzyskanych wyosobnień, natomiast<br />

w systemie produkcji metodami konwencjonalnymi, aż 17,4%. Większą różnorodność<br />

gatunkową Fusarium odnotowano w gospodarstwach konwencjonalnych<br />

niż gospodarstwach ekologicznych. Najliczniej reprezentowane były:<br />

295


296<br />

F. poae, F. culmorum, F. avenaceum i F. oxysporum. W obu systemach uprawy<br />

grzyby rodzaju Fusarium częściej wyosobniano z ziarna z objawami chorobowymi<br />

niż ze <strong>zdrowe</strong>go. Ziarniaki pszenicy jarej odmiany Koksa były częściej<br />

zasiedlane przez Fusarium spp. niż ziarniaki odmiany Torka. W gospodarstwach<br />

konwencjonalnych, mimo intensywnej ochrony chemicznej, stwierdzono<br />

również ponad pięciokrotnie wyższą liczebność Aureobasidium pullulans<br />

i ponad trzykrotnie wyższą Bipolaris sorokiniana w porównaniu do izolatów<br />

uzyskanych z ziarna pochodzącego z upraw ekologicznych. Spośród saprotrofów<br />

występowały również grzyby rodzaju Penicillium (1,8% w systemie<br />

ekologicznym i 1,6% w konwencjonalnym). Na ziarnie pszenicy pochodzącej<br />

z ekologicznego systemu gospodarowania odnotowano także występowanie<br />

naturalnego antagonisty wielu patogenów Trichoderma harzianum (0,6%).<br />

Do grzybów licznie wyosobnianych z ziarna pszenicy jarej należały również<br />

grzyby rodzaju Chaetomium (5,0% i 6,5%), Rhizopus (3,5% i 2,3%) i grzybnie<br />

niezarodnikujące (2,4% i 5,4%). Grzyby rodzaju Rhizopus częściej izolowano<br />

z ziarna nieodkażonego niż poddanego odkażaniu.<br />

Wyniki badań wskazują, że na efektywne redukowanie liczebności mikroorganizmów<br />

chorobotwórczych zasiedlających ziarniaki pszenicy jarej w dużej<br />

mierze wpływa utrzymanie dynamicznej równowagi w agroekosystemach z wykorzystaniem<br />

naturalnych oddziaływań między mikroorganizmami.<br />

Summary<br />

FUNGI COLONIZING THE GRAIN OF SPRING WHEAT GROWN IN<br />

THE CONVENTIONAL AND ORGANIC SYSTEMS<br />

Recent years have witnessed an increasing interest in organic farming<br />

systems where the good phytosanitary status of plants is maintained by<br />

creating a supportive environment for the growth of saprotrophic fungi.<br />

However, natural biological processes play a limited role in pathogen control,<br />

and they often have to be combined with conventional crop protection<br />

chemicals. In view of the above, the communities of fungi colonizing spring<br />

wheat grain produced in both farming systems were compared in the study.<br />

The aim of the experiment conducted in 2004-2006 was to determine the<br />

abundance and species composition of fungi colonizing the grain of spring<br />

wheat cv. Koksa and Torka, grown in the conventional and organic farming<br />

systems. A phytopathological analysis of spring wheat grain was performed by<br />

the method described by NARKIEWICZ-JOdKO (1986).<br />

More colonies of Alternaria alternata, Aureobasidium pullulans, Bipolaris<br />

sorokiniana and Fusarium spp. were isolated from wheat grain obtained from<br />

conventional farms. Intensive use of chemical control measures did not reduce<br />

the abundance and species diversity of Fusarium spp. A considerably higher<br />

number of Epicoccum nigrum colonies were isolated in the organic farming<br />

system, compared with the conventional system.


WYKORZYSTANIE NIEKTÓRYCH PREPARATÓW<br />

BIOTECHNICZNYCH W OCHRONIE NACI ZIEMNIAKA<br />

PRZED PHYTOPHTHORA INFESTANS (MONT.) DE BARY<br />

Halina Kurzawińska i Stanisław Mazur<br />

Uniwersytet Rolniczy, Katedra Ochrony Roślin, Al. 29 Listopada,<br />

31-425 Kraków<br />

h.kurzawinska@ogr.ur.krakow.pl<br />

Istnieją duże możliwości stosowania naturalnych środków w ochronie<br />

roślin (również ziemniaka) przed chorobami. Stosowanie preparatów biotechnicznych<br />

umożliwia zmniejszenie środków chemicznej ochrony, polepszenie jakości<br />

surowca do produkcji żywności ekologicznej, ochronę środowiska naturalnego<br />

przez słabsze oddziaływanie tych środków i łatwiejszą biodegradację<br />

w środowisku.<br />

Celem przeprowadzonych w latach 2009-2010 badań było określenie<br />

wpływu kilkakrotnego opryskiwania roślin ziemniaka odmiany Vineta wybranymi<br />

preparatami biotechnicznymi (Biochikol 020 PC - oparty na chitozanie,<br />

Grevit 200 SL - wyciąg z grejpfruta, Prev-AM 060 SL olej z pomarańczy)<br />

na porażenie naci oraz bulw przez Phytophthora infestans. Standardowym<br />

preparatem chemicznym był Acrobat MZ 69 WG (9% dimetomorfu + 60% mankozebu).<br />

Doświadczenia polowe zlokalizowane były na polach doświadczalnych<br />

Stacji Doświadczalno-Badawczej UR Kraków-Mydlniki.<br />

Uzyskane wyniki z poszczególnych lat badań nie były jednoznaczne.<br />

W pierwszym roku doświadczenia polowego (2009) badane preparaty statystycznie<br />

istotnie obniżyły stopień porażenia naci ziemniaków oraz procentowe<br />

porażenie bulw przez Phytophthora infestans. Natomiast w drugim roku<br />

(2010) tylko stosowanie fungicydu Acrobat MZ 69 WG istotnie hamowało rozwój<br />

zarazy na naci ziemniaka badanej odmiany. Procentowe porażenie bulw<br />

przez Phytophthora infestans pochodzących z kombinacji z zastosowaniem badanych<br />

środków było niższe niż w kontroli.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 297-298<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

297


298<br />

Summary<br />

THE USE OF SOME BIOTECHNICAL PREPARATIONS IN<br />

PROTECTION OF POTATO LEAVES AGAINST PHYTOPHTHORA<br />

INFESTANS (MONT.) DE BARY<br />

There are big possibilities of using natural substances in the protection<br />

of plants (including potatoes) against diseases. Application of biotechnical<br />

preparations can reduce chemical means of protection, improving the<br />

quality of raw material to produce organic food, protect the environment by<br />

the weaker impact of these substances and more easily degradable in the<br />

environment.<br />

The aim of the study in 2009-2010 was to determine the effect of several<br />

spraying of potato varieties Vineta selected biotechnical preparations (Biochikol<br />

020 PC - based on chitosan, Grevit 200 SL - grapefruit extract, Prev-AM 060 SL<br />

- oil of orange) on the infestation of leaves and tubers by Phytophthora infestans.<br />

Standard chemical preparation was Acrobat MZ WG 69 (9% dimethomorph +<br />

60% mancozeb). Field experiments were located on the fields of Experimental -<br />

Research Station Agricultural University of the Krakow-Mydlniki.<br />

The results of individual years of study were not unequivocal. In the first<br />

year of field experiment (2009) tested preparations significantly reduced the<br />

degree of infestation of potato leaves and percentage potato tuber infection<br />

by Phytophthora infestans. However, in the second year (2010) only apply<br />

fungicide Acrobat MZ 69 WG significantly inhibited the development of blight<br />

on tested variety of potato leaves. Percent infection of tubers by Phytophthora<br />

infestans, derived from combinations of application tested preparations was<br />

lower than in controls.


REDUKCJA FUZARIOZY KŁOSÓW<br />

(FUSARIUM CULMORUM – CHEMOTYPY DON I NIV)<br />

I MIKOTOKSYN W PSZENICY OZIMEJ PRZY<br />

WCZESNYM STOSOWANIU FUNGICYDÓW<br />

Grzegorz Lemańczyk 1 , Jerzy Zdunek 2 , Dariusz Pańka 1 ,<br />

Leszek Lenc 1 i Czesław Sadowski 1<br />

1 Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii<br />

Molekularnej, ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

2 Bayer sp. z o.o., Al. Jerozolimskie 158, 02-326 Warszawa<br />

Grzegorz.Lemanczyk@utp.edu.pl<br />

Dużym zagrożeniem dla pszenicy ozimej mogą być grzyby z rodzaju Fusarium<br />

występujące na kłosach. Obniżają one nie tylko plon ziarna, ale również<br />

jego jakość. Występowanie Fusarium spp. na ziarniakach ma szczególne znaczenie<br />

z uwagi na potencjalną zdolność tworzenia przez nie mikotoksyn. W celu<br />

zmniejszenia ryzyka wystąpienia fuzariozy kłosów i skażenia mikotoksynami<br />

zaleca się wykonanie zabiegu fungicydowego w fazie kwitnienia (59 do 69<br />

wg skali BBCH). Często jednak przy wielkotowarowej produkcji ogranicza się<br />

ochronę fungicydową do dwóch zabiegów. Niejednokrotnie zastosowanie fungicydów<br />

w fazie kwitnienia jest zbyt późne, aby skutecznie chronić liście przed<br />

patogenami. Celem przeprowadzonych badań było sprawdzenie czy standardowa<br />

ochrona pszenicy ozimej, chroniąca skutecznie liście, może przyczynić<br />

sie również do spadku występowania fuzariozy kłosów i zawartości toksyn w zebranym<br />

ziarnie.<br />

Badanie przeprowadzono w 2010 r. w Stacji Doświadczalnej Oceny Odmian<br />

w Radostowie, Punkt Doświadczalny w Lisewie koło Tczewa. Lokalizację na<br />

Żuławach wybrano z uwagi na częściej występujące sprzyjające warunki pogodowe<br />

dla rozwoju chorób grzybowych. Doświadczenie założono na pszenicy<br />

ozimej ‘Legenda’. Zastosowano 8 zróżnicowanych programów fungicydowych.<br />

Fungicydy stosowano dwukrotnie, w fazie BBCH 31 i 55. W okresie kwitnienia<br />

roślin (BBCH 65) wykonano inokulację wodną zawiesiną zarodników izolatu<br />

Fusarium culmorum, posiadającego zdolność do tworzenia deoxynivalenolu<br />

(DON), i F. culmorum posiadającego zdolność tworzenia nivalenolu (NIV), co<br />

stwierdzono wcześniej techniką PCR. Kombinację kontrolną stanowiły poletka<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 299-302<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

299


300<br />

z pszenicą inokulowaną F. culmorum ale nie traktowaną fungicydami. Celem<br />

zapewnienia optymalnych warunków do zajścia infekcji grzyba, po uprzednim<br />

obfitym deszczowaniu poletek, wieczorem wykonano sztuczną inokulację, po<br />

czym wszystkie poletka na okres 4 dób okryto włókniną. Aby utrzymać wysoką<br />

wilgotność powietrza, włókninę zraszano w miarę potrzeb.<br />

W okresie dojrzałości pełnej (BBCH 77) oceniano występowanie fuzariozy<br />

kłosów, określając procent porażonych kłosów i stopień nasilenia choroby wg<br />

skali 0–5, a następnie obliczano indeks chorobowy (DI). Po zbiorach określano<br />

zasiedlenie ziarna przez grzyby, wykładając na pożywkę PDA odkażane wcześniej<br />

w 1% NaOCl ziarniaki. Uzyskane kolonie grzybów oznaczano mikroskopowo<br />

wg kluczy, a poprawność oznaczenia gatunków Fusarium sprawdzano<br />

losowo techniką PCR przy użyciu specyficznych gatunkowo starterów typu<br />

SCAR. Ponadto określano zawartość DON i NIV w zebranym ziarnie.<br />

W fazie dojrzałości pełnej stwierdzono bardzo silne objawy fuzariozy kłosów.<br />

Na poletkach kontrolnych 92,5% kłosów wykazywało objawy chorobowe,<br />

a DI wynosił 60,5%. Na kłosach obserwowano liczne braki ziarniaków, lub<br />

ziarniaki małe, pomarszczone.<br />

Wszystkie zastosowane programy ochrony pszenicy zmniejszyły nasilenie<br />

fuzariozy kłosów. Najmniej kłosów z objawami choroby (54,2%) oraz najniższy<br />

średni indeks chorobowy (DI=23,0%) zaobserwowano na roślinach gdzie<br />

w pierwszym zabiegu zastosowano 1,0 l/ha produktu zawierającego protiokonazol<br />

(160 g/l) + spiroksaminę (300 g/l), a w drugim 1,0 l/ha produktu zawierającego<br />

tebukonazol (125 g/l) + protiokonazol (125 g/l). Zważywszy na ogromną<br />

ilość inokulum grzyba w okresie kwitnienia i stworzone bardzo korzystne warunki<br />

do infekcji, skuteczność zastosowanej ochrony fungicydowej w tej kombinacji,<br />

wynoszącą 62,0%, należy uznać za bardzo wysoką, tym bardziej, iż<br />

zabieg nie był wykonany w terminie powszechnie uznawanym za optymalny.<br />

W przypadku pozostałych programów ochrony procent porażonych kłosów wahał<br />

się w granicach 65,8-80,0, a wartość DI - 30,2-43,2%. Należy podkreślić, że<br />

zastosowane programy przewidywały ochronę pszenicy przed głównymi patogenami<br />

grzybowymi, a nie tylko pod kątem zwalczania Fusarium spp.<br />

Ziarniaki pochodzące z poletek bez ochrony fungicydami były w 91,0% zasiedlone<br />

przez grzyby rodzaju Fusarium, natomiast z poletek chronionych<br />

zasiedlenie było na tym samym poziomie (86,3-93,0%). Z ziarna izolowano<br />

głównie F. culmorum, a inne gatunki Fusarium (F. poae, F. sporotrichioides)<br />

stanowiły maksymalnie 3,0%. Z innych grzybów na ziarnie licznie stwierdzano<br />

Epicoccum purpurascens (5-15%) oraz Alternaria alternata (2-8%). Nie zaobserwowano<br />

zależności ich występowania od zastosowanych kombinacji doświadczalnych.<br />

W ziarnie pochodzącym z poletek kontrolnych zawartość DON wynosiła<br />

12,821 mg/kg, a zawartość NIV - 2,875 mg/kg ziarna. Stosowanie fungicydów<br />

w fazie BBCH 55 wyraźnie obniżyło poziom mikotoksyn w zebranym ziarnie.


W próbach z kombinacji chronionych fungicydami zawartość DON wynosiła<br />

od 6,487 do 10,107 mg/kg. Najmniej DON (6,487mg/kg,) stwierdzono w ziarnie<br />

pochodzącym z kombinacji, gdzie w pierwszym zabiegu zastosowano 1,0 l/ha<br />

produktu zawierającego biksafen (75 g/l) + protiokonazol (150 g/l), a w drugim<br />

zabiegu 1,0 l/ha produktu zawierającego tebukonazol (125 g/l) + protiokonazol<br />

(125 g/l). Również najniższa zawartość NIV (0,381 mg/kg) była w ziarnie<br />

z kombinacji, w której w drugim zabiegu zastosowano 1,0 l/ha produktu zawierającego<br />

tebukonazol (125 g/l) + protiokonazol (125 g/l) ale do pierwszego<br />

zabiegu zastosowano 1,5 l/ha produktu zawierającego biksafen (50 g/l) +<br />

protiokonazol (100 g/l) + spiroxaminę (250 g/l). Analizując nasilenie fuzariozy<br />

kłosów i zawartość DON i NIV w ziarnie można zauważyć, że nie zawsze występuje<br />

wyraźna zależność miedzy nasileniem objawów chorobowych, a zawartością<br />

tych toksyn.<br />

Summary<br />

REDUCTION OF FUSARIUM HEAD BLIGHT (FUSARIUM<br />

CULMORUM – DON AND NIV CHEMOTYPES) AND MICOTOXINS<br />

IN WINTER WHEAT WITH EARLY FUNGICIDE APPLICATION<br />

Beneficial effect of fungicides applied at flowering (BBCH 59-69) on the<br />

reduction of Fusarium Head Blight (FHB) and a reduction of deoxynivalenol<br />

(DON), and nivalenol (NIV) toxins in harvested wheat grain is widely<br />

reported. However, literature data dealing with an influence of early fungicide<br />

applications on FHB occurrence and toxins content in wheat grain are scarce.<br />

Thus, the research on FHB disease severity for winter wheat and mycotoxins<br />

(DON and NIV) content in grains when protected with twice applied fungicides<br />

were conducted. Eight different fungicidal protection programs were tested.<br />

Fungicides were applied at two timings: BBCH 31 and 55. Inoculation of<br />

winter wheat ‘Legenda’ ears with suspension of conidia of Fusarium culmorum<br />

representing DON and NIV chemotype, confirmed with PCR assay, was<br />

conducted during anthesis, at BBCH 65. Plots were assessed for FHB at BBCH<br />

77 and harvested grain were analyzed for infection by Fusarium spp., DON<br />

and NIV. Occurrence and intensity of FHB symptoms was high; 92,5% of ears<br />

were infected in control combination and mean disease index (DI) reached<br />

60,5%. All fungicides significantly reduced FHB intensity. The lowest number<br />

of infected ears (54,2%) was noted in combination with protioconazole (160 g/l)<br />

+ spiroxamine (300 g/l) applied in dose of 1,0 l/ha at first timing tebuconazole<br />

(125 g/l) + protioconazole (125 g/l) applied in dose of 1,0 l/ha at second timing.<br />

Mean DI in this combination was also the lowest (23,0%) and fungicides efficacy<br />

reached 62%. Number of infected ears and mean DI for other combinations<br />

ranged from 65.8 to 80.0, and from 30.2 to 43.2%, respectively. Wheat grain<br />

301


302<br />

were infected mainly by Fusarium spp. with F. culmorum as a dominant. Grain<br />

from control plots and plots treated with fungicides were infected on a similar<br />

level: 91.0%, and 86.3-93.0%, respectively. Grain from control combination<br />

contained 12.821 mg/kg DON and 2,875 mg/kg NIV. Plants spraying with<br />

fungicides at second timing decreased level of grain contamination with<br />

mycotoxins. The lowest DON content (6.487 mg/kg,) was noted in combination<br />

with bixafen (75 g/l) + protioconazole (150 g/l) applied in dose of 1,0 l/ha at first<br />

timing and tebuconazole (125 g/l) + protioconazole (125 g/l) applied in dose of<br />

1,0 l/ha at second timing. The lowest NIV content (0.381 mg/kg,) was noted<br />

in combination with bixafen (50 g/l) + protioconazole (100 g/l) + spiroxamine<br />

(250 g/l) applied in dose of 1,5 l/ha at first timing and tebuconazole (125 g/l) +<br />

protioconazole (125 g/l) applied in dose of 1,0 l/ha at second timing.


ZBIOROWISKA GRZYBÓW FYLLOSFERY BURAKA<br />

CUKROWEGO (BETA VULGARIS L. SUBSP. VULGARIS)<br />

UPRAWIANEGO W RÓŻNYCH SYSTEMACH UPRAWY<br />

PRZY ZRÓŻNICOWANEJ DAWCE NAWOŻENIA AZOTEM<br />

Maciej Łobczowski, Wojciech Pusz i Elżbieta Pląskowska<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Ochrony Roślin - Zakład Fitopatologii<br />

i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

maciej.lobczowski@gmail.com<br />

Doświadczenie zostało założone w Rolniczym Zakładzie Doświadczalnym<br />

Swojec koło Wrocławia w latach 2006-2010. Cel badań stanowiło określenie<br />

zbiorowisk mikobiota zasiedlających fyllosferę buraka cukrowego w zależności<br />

od sposobu uprawy roli oraz zastosowanej dawki nawożenia azotem. Doświadczenie<br />

ścisłe, dwuczynnikowe zostało założone metodą split-plot, w 3 powtórzeniach.<br />

Czynnikiem pierwszego rzędu były różne sposoby uprawy: obiekt<br />

1 (kontrola) uprawa konserwująca – międzyplon ścierniskowy w postaci gorczycy<br />

białej pozostawiony do wiosny, obiekt 2 słoma po przedplonie przykryta<br />

kultywatorem podorywkowym, obiekt 3 mulcz pozostawiony do wiosny – wyka<br />

ozima, obiekt 4 mulcz pozostawiony do wiosny – żyto ozime, obiekt 5 słoma<br />

po przedplonie bez przykrycia. Czynnikiem drugiego rzędu były dwa poziomy<br />

nawożenia azotem optymalne 120 kgN . ha -1 (40 kg . ha -1 saletry wapniowej<br />

– przed wegetacją i 80 kg . ha -1 mocznika do fazy 6-tego liścia), obniżone 80 kgN .<br />

ha -1 (26 kg . ha -1 saletry wapniowej – przed wegetacją i 54 kg . ha -1 mocznika do<br />

fazy 6-tego liścia). We wszystkich trzech latach badań najliczniej izolowanymi<br />

gatunkami były Cladosporium spp., Alternaria alternata, Fusarium spp., Epicocum<br />

nigrum Grzyby z rodzaju Cladosporium stanowiły w latach 2008 i 2010<br />

ponad 34% ogółu wyizolowanych kolonii. W roku 2009 Epicocum nigrum był<br />

najliczniej izolowany i stanowił prawie 28% ogółu uzyskanych kolonii, jego wysoka<br />

liczebność ograniczała występowanie gatunków z rodzaju Cladosporium<br />

których procentowy udział wyniósł 13,5%. Gatunki Fusarium spp. najliczniej<br />

izolowano w latach 2008 i 2010 na obiektach nr 2 z obniżoną dawką nawożenia<br />

azotem, natomiast w roku 2009 były wyosabniane najliczniej na obiekcie 1 i 3<br />

ale również przy obniżonej dawce nawożenia azotem. Wśród pozyskanych izolatów<br />

Fusarium spp. dominował Fusarium oxysporum, natomiast Fusarium<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 303-304<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

303


304<br />

culmorum i Fusarium avenaceum, Fusarium equiseti i Fusarium poae były<br />

izolowane mniej licznie lub jako pojedyncze kolonie. Dość wysoki udział grzybów<br />

z rodzaju Fusarium mógł być spowodowany niskim, nieprzekraczającym<br />

3% we wszystkich latach badań, udziałem grzybów z rodzaju Trichoderma<br />

znanych powszechnie jako gatunki antagonistyczne względem wielu patogenów<br />

roślin.<br />

Sumary<br />

FUNGAL ASSEMBLAGES OF THE PHYLLOSPHERE OF SUGAR<br />

BEET (BETA VULGARIS L. SUBSP. VULGARIS) CULTIVATED<br />

IN DIFFERENT CULTIVATION SYSTEMS WITH VARYING DOSES<br />

OF NITROGEN FERTILIZATION<br />

The experiment was established in the years 2007-2010 in the Agricultural<br />

Experimental Station in Swojec near Wroclaw. Aim of study was to analyze<br />

the composition of sugar beet phyllosphere micobiota depending on cultivation<br />

system and applied nitrogen fertilization. Experiment was established by<br />

split-plot method with two factors in three replications. The first factor were<br />

different cultivation systems: object 1 (control), conservation tillage - stubble<br />

intercrop in the form of white mustard left until spring, object2 straw after<br />

forecrop covered with cultivator, object 3 mulch left by the spring - winter<br />

vetch, object 4 mulch left until spring - winter rye, object 5 straw after forecrop<br />

uncovered. Second factor were two levels of nitrogen fertilization: optimal 120<br />

kgN . ha -1 (40 kg.ha-1 calcium nitrate – pre vegetation and 80 kg.ha-1 of urea<br />

to the phase of the 6th leaf), reduced 80 kgN . ha -1 ( 26 kg.ha-1 calcium nitrate -<br />

pre vegetation and 54 kg∙ha -1 of urea to the phase of the 6th leaf). In all three<br />

years of research, the most frequently isolated species were Cladosporium<br />

spp, Alternaria alternata, Fusarium spp., Epicocum nigrum. Fungi of the genus<br />

Cladosporium constitiute, over 34% of the total isolated colonies in 2008<br />

and 2010. In 2009, the most numerous isolated species was Epicocum nigrum<br />

which constitue almost 28% of the total number of isolated colonies and limited<br />

presence of Cladosporium species fungi which proportion was 13.5%<br />

of the total isolated colonies. Fusarium spp was most frequently isolated in<br />

the years 2008 and 2010 from second object with a reduced dose of nitrogen<br />

fertilization, while in 2009 those fungi were most frequently isolated on first<br />

and third object but also with reduced dose of nitrogen fertilization. Among<br />

obtained isolates from Fusarium spp. Fusarium oxysporum was predominant,<br />

while Fusarium culmorum, Fusarium avenaceum, Fusarium equiseti and Fusarium<br />

poae were isolated less frequently or as single colonies. Fairly high<br />

percentage of Fusarium fungi can be caused by a low, not exceeding 3% in all<br />

years of studies, presence of fungi from the genus Trichoderma, which species<br />

are commonly known as an antagonist of many plant pathogens.


PRZEŻYWALNOŚĆ BAKTERII<br />

CLAVIBACTER MICHIGANENSIS SSP. SEPEDONICUS<br />

W RÓŻNYCH WARUNKACH OTOCZENIA<br />

W KONTEKŚCIE UTYLIZACJI BULW ZIEMNIAKÓW<br />

PORAŻONYCH BAKTERIOZĄ PIERŚCIENIOWĄ<br />

Anna Maćkowiak- Sochacka i Agnieszka Zwolińska<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

a.sochacka@iorpib.poznan.pl<br />

Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus (Cms) sprawca bakteriozy pierścieniowej<br />

ziemniaka, jest organizmem podlegającym obowiązkowi zwalczania<br />

na terenie całej Wspólnoty Europejskiej. Porażone bulwy muszą zostać<br />

zutylizowane (nadzór na utylizacją sprawuje PIORiN), celem uniknięcia rozprzestrzeniania<br />

się choroby. Ponieważ zakres metod unieszkodliwiania bulw<br />

jest ograniczony rozporządzeniem Ministra i Rozwoju Wsi, a ich praktyczne<br />

zastosowanie napotyka na wiele trudności (m. in. organizacyjnych), istnieje<br />

potrzeba szukania nowych, zatwierdzonych urzędowo metod utylizacji. Jedną<br />

z potencjalnych metod dekontaminacji bulw porażonych bakteriozą pierścieniową<br />

może być kompostowanie (nie brane do tej pory w Polsce pod uwagę jako<br />

sposób eliminacji Cms).<br />

Wstępem do opracowania nowych metod utylizacji jest zbadanie przeżywalności<br />

bakterii w różnych warunkach otoczenia, w określonych odstępach<br />

czasowych. Badania prowadzone w różnych ośrodkach naukowych w przeszłości<br />

dotyczyły przede wszystkim przeżywalności C. michiganensis ssp. sepedonicus<br />

w warunkach środowiska naturalnego, na resztach pożniwnych, porażonym<br />

sprzęcie, pomieszczeniach i opakowaniach.<br />

Celem naszych doświadczeń jest zbadanie przeżywalności Cms w warunkach<br />

ekstremalnych (przede wszystkim podwyższona temperatura, zmienione<br />

pH) występujących podczas procesu utylizacji (np. kompostowania).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 305-306<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

305


306<br />

Summary<br />

SURVIVAL OF CLAVIBACTER MICHIGANENSIS SSP.<br />

SEPEDONICUS IN DIFFERENT ENVIRONMENTAL CONDITIONS<br />

IN RELATION TO DISPOSAL OF POTATO TUBERS INFECTED<br />

WITH RING ROT.<br />

Control of Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus is listed as a<br />

quarantine pest within Europe. Potato bulbs affected with bacterial ring rot<br />

must be disposed under official control in order to avoid risk of dissemination<br />

of the disease. The range of methods of decontamination is limited, thus new<br />

methods of disposal (such as composting) are required.<br />

Previous studies involved survival of C. michiganensis ssp. sepedonicus<br />

in natural environment, in crop residues, contaminated equipment, storage<br />

rooms and packages.<br />

The aim of our studies is examination of survival of Cms in extreme<br />

conditions (the increased temperature, changed pH) occurring during process<br />

of utilization.<br />

Literatura<br />

Nelson G.A., 1980: Long term survival of Corynebacterium sepedonicum on<br />

contaminated surfaces and in infected potato stems. Am. Potato Jour. 57:<br />

595–600.<br />

Rozporządzenie Ministra i rozwoju Wsi z dnia 6. kwietnia 2007 w sprawie<br />

szczegółowych sposobów postępowania przy zwalczaniu i zapobieganiu rozprzestrzenianiu<br />

się bakterii Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus.<br />

Dz. Ust 70, poz. 472.<br />

Steinmoeller S., Mueller p., Buetner C., 2007: Effect of composting and pasteurization<br />

on two important quarantine pests of potato. Commun. Agric.<br />

Appl. Biol. Sci. 72: 341–351.


ŚRODKI OCHRONY ROŚLIN ZAWIERAJĄCE SUBSTANCJE<br />

AKTYWNE POCHODZENIA NATURALNEGO<br />

Ewa Matyjaszczyk i Joanna Sobczak<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20; 60-318 Poznań<br />

E.Matyjaszczyk@iorpib.poznan.pl<br />

Na mocy Rozporządzenia 1107/2009/WE od 1 stycznia 2014 w Polsce, podobnie<br />

jak we wszystkich innych państwach członkowskich Unii Europejskiej,<br />

obowiązkowe będzie stosowanie integrowanej ochrony roślin. Integrowana<br />

ochrona roślin kładzie nacisk na uzyskanie zdrowych plonów przy minimalnych<br />

zakłóceniach funkcjonowania ekosystemu rolniczego i zachęca do stosowania<br />

naturalnych sposobów zwalczania szkodników.<br />

W obliczu rychłego wprowadzenia obowiązku stosowania integrowanej<br />

ochrony roślin warto przedstawić środki ochrony roślin pochodzenia naturalnego<br />

którymi dysponuje polskie rolnictwo. W wykazie w oparciu o podział Tomalaka<br />

(2007) uwzględniono:<br />

- mikroorganizmy (bakterie i grzyby) i wirusy,<br />

- semiozwiązki (feromony oraz inne atraktanty i repelenty),<br />

- naturalne produkty roślinne oraz mineralne.<br />

Pewne wątpliwości budziła możliwość zaliczenie miedzi i jej związków do<br />

trzeciej grupy: produktów naturalnych pochodzenia mineralnego. Decyzję o zaliczeniu<br />

jednak podjęto, biorąc pod uwagę fakt, że na podstawie Rozporządzenia<br />

Komisji nr 889/2008 związki miedzi można stosować w rolnictwie ekologicznym,<br />

a środki ochrony roślin zawierające związki miedzi są zakwalifikowane<br />

do stosowania w rolnictwie ekologicznym w Polsce (Matyjaszczyk 2010).<br />

Tabela 1 przedstawia wszystkie środki pochodzenia naturalnego dopuszczone<br />

do stosowania w Polsce w czasie przeprowadzania analizy, w marcu<br />

2011. Nie uwzględniono w niej preparatów które były w obrocie, ale dla których<br />

decyzje o wycofaniu ze stosowania już zapadły. Czterdzieści dwa preparaty<br />

handlowe przedstawione w tabeli 1 stanowiły łącznie około 5% wszystkich<br />

zarejestrowanych w Polsce środków ochrony roślin. Ponad połowa z nich – 24<br />

należała do grupy naturalnych produktów roślinnych i mineralnych i zdecydowanie<br />

przeważały w niej środki zawierające miedź, których było 14. W kolejnej<br />

pod względem liczebności grupie środków zawierających mikroorganizmy i ich<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 307-310<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

307


308<br />

produkty dostępnych było 10 preparatów. Środków z grupy semiozwiązków z<br />

zestawieniu jest 8. Ponad połowa wszystkich środków pochodzenia naturalnego<br />

zarejestrowanych w Polsce – 22 to fungicydy, a ¼ - 12 to insektycydy.<br />

Pozostałych 8 preparatów to atraktanty i repelenty.<br />

Tabela 1. Wykaz środków ochrony roślin zawierających substancje aktywne pochodzenia naturalnego<br />

posiadających ważne zezwolenia na dzień 25.03.2011<br />

L.p. Nazwa środka Substancja aktywna Rodzaj środka Grupa<br />

1. Biochikol-K AL chitozan fungicyd, bakteriocyd P<br />

2. Biospin 120 SC spinosad insektycyd M<br />

3.<br />

Cydia pomonella Granulosis<br />

Carpovirusine Super SC<br />

Virus<br />

insektycyd M<br />

4. Catane 800 EC olej parafinowy insektycyd P<br />

5. Cervacol Extra PA piasek kwarcowy repelent S<br />

6. Champion 50 WP miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

7. Contans XX Coniothyrium minitans fungicyd M<br />

8. Cuproflow 375C miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

9. Cuproxat 345 SC miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

10. Dipel WG<br />

Bacillus thuringiensis var.<br />

Kurstaki<br />

insektycyd M<br />

11. Ecodian – CP VP<br />

(E,E)-8,10-dodecadieno-<br />

1-ol<br />

atraktant S<br />

12. Emol BTX LA sól kwasu benzoesowego repelent S<br />

13. Emol Plus BTX LA sól kwasu benzoesowego repelent S<br />

14. Flowbrix 380 SC miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

15. Foray 76 B SC<br />

Bacillus thuringiensis var.<br />

Kurstaki<br />

insektycyd M<br />

16. Funguran Easy 50 WP miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

17. Funguran OH 50 WP miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

18. Kocide 101 WP miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

19. Kocide 2000 35 WG miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

20. Madex SC<br />

Cydia pomonella Granulosis<br />

Virus<br />

insektycyd M<br />

21. Mag 50 WP miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

22. Miedzian 50 WG miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

23. Miedzian 50 WP miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

24. Miedzian Extra 350 SC miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

25. Neoram 37,5 WG miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

26. Nordox 75 WG miedź fungicyd, bakteriocyd P<br />

27. Novodor SC<br />

Bacillus thuringiensis var.<br />

Kurstaki<br />

insektycyd M<br />

28. Polyversum WP Pythium oligandrum fungicyd M<br />

29. Promanal 012 AL olej parafinowy insektycyd P<br />

30. Promanal 60 EC olej parafinowy insektycyd P


31. Preferal<br />

Paecilomyces<br />

flumosoroseus<br />

insektycyd M<br />

32. Repentol 6 Bis PA żwirek filtracyjny repelent S<br />

33. Repentol 6 PA piasek kwarcowy repelent S<br />

34. Siarkol 80 WG siarka fungicyd P<br />

35. Siarkol 80 WP siarka fungicyd P<br />

36. Siarkol 800 SC siarka fungicyd P<br />

37. Siarkol Extra 80 WP siarka fungicyd P<br />

38. SpinTor 240 SC spinosad insektycyd M<br />

39. Stop Z EC olej rybi repelent S<br />

40. Timorex Gold 24 EC<br />

wyciąg z krzewu<br />

herbacianego<br />

fungicyd P<br />

41. Treol 770 EC olej parafinowy insektycyd P<br />

42. Wam Extra PA piasek kwarcowy repelent S<br />

M – mikroorganizmy i ich produkty; S – semiozwiązki ; P – produkty naturalne pochodzenia roślinnego i mineralnego<br />

Dwadzieścia dwa ze środków przedstawionych w Tabeli 1 jest zakwalifikowanych<br />

do stosowania w rolnictwie ekologicznym. Warto podkreślić, że<br />

w ostatnich latach wycofano ze stosowania w Polsce wiele środków ochrony<br />

roślin pochodzenia naturalnego, w tym 14 zakwalifikowanych do stosowania<br />

w rolnictwie ekologicznym. Było to związane z wysokimi kosztami badań koniecznych<br />

dla udowodnienia że są one bezpieczne dla ludzi i środowiska i brakiem<br />

firmy której opłacałoby się te badania przeprowadzić.<br />

Analizując listę preparatów pochodzenia naturalnego dostępnych w Polsce<br />

można stwierdzić, że jest ich niewiele – stanowią tylko 5% ogółu środków<br />

dopuszczonych do obrotu i rejestracja kolejnych byłaby niezwykle przydatna.<br />

Potrzeba rejestracji kolejnych środków pochodzenia naturalnego nabiera<br />

szczególnego znaczenia w obliczu wprowadzenia obowiązku stosowania integrowanej<br />

ochrony roślin za niecałe 3 lata.<br />

Summary<br />

PLANT PROTECTION PRODUCT CONTAINING ACTIVE<br />

SUBSTANCES OF NATURAL ORIGIN<br />

The list of 42 plant protection products of natural origin currently registered<br />

in Poland is presented and discussed. Their availability is very important<br />

because of the obligation of the Integrated Pest Management implementation<br />

from the 01.01. 2014.<br />

309


310<br />

Literatura<br />

Tomalak M., 2007: Rejestracja biologicznych środków ochrony roślin w Europie.<br />

Nowe Perspektywy. Progress In Plant Prost/ Post. Ochr. Roś. 47 (4):<br />

233–240.<br />

Matyjaszczyk E., 2010: Aktualne możliwości ochrony roślin w produkcji ekologicznej.<br />

IOR PIB Poznań: 103 ss.


ORGANIZMY WPŁYWAJĄCE NA ZDROWOTNOŚĆ<br />

TYPHA SPP. W LITORALU JEZIOR DRAWIEŃSKIEGO<br />

PARKU NARODOWEGO (NW POLAND)<br />

Kinga Mazurkiewicz - Zapałowicz, Dorota Ładczuk<br />

i Maria Wolska<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny w Szczecinie,<br />

Pracownia Hydrobiologii, ul. Kazimierza Królewicza 4, 71-550 Szczecin<br />

kmazurkiewicz@zut.edu.pl<br />

Pałka wąskolistna (Typha angustifolia L.) i szerokolistna (T. latifolia<br />

L.) są gatunkami, które tworzą zbiorowiska szuwarów właściwych. Szuwary<br />

pałkowe przyczyniają się do przyspieszania tempa sukcesji i lądowacenia<br />

zbiorników a także istotnie wzbogacają różnorodność biologiczną, co wiąże się<br />

z tworzeniem dogodnych siedlisk rozrodu dla wielu gatunków ryb, mięczaków,<br />

skorupiaków i owadów. W zespołach szuwarowych najmniej poznanym<br />

elementem są ciągle grzyby mikroskopowe towarzyszące wegetacji oraz destrukcji<br />

roślin. Słabe rozpoznanie tych mikroorganizmów nie tylko w Polsce,<br />

ale i na świecie, w konfrontacji z ich znaczeniem ekologicznym w utrzymaniu<br />

równowagi ekosystemów wodnych, uzasadnia celowość podjętych badań fitopatologiczno-mikologicznych.<br />

Badania te przeprowadzono w dwóch sezonach wegetacyjnych w latach<br />

2009 – 2010 na pałce wąskolistnej (Typha angustifolia -TA) i pałce szerokolistnej<br />

(T. latifolia- TL), w strefie litoralu wokół linii brzegowej trzech jezior<br />

Drawieńskiego Parku Narodowego: Czarne, Płociczno i Zdroje (= j. Wydrowe).<br />

W części terenowej badań materiał pobierano 3- krotnie, każdego roku, zawsze<br />

w tych samych punktach badawczych. Do laboratoryjnych badań fitopatologicznych<br />

wykorzystano fragmenty liści i łodyg, z symptomami chorobowymi.<br />

Izolacje grzybów mikroskopowych i ich identyfikację taksonomiczną przeprowadzono<br />

zgodnie ze standardami przyjętymi w fitopatologii. Wyniki zinterpretowano<br />

na podstawie współczynnika Jaccarda w modyfikacji Sörensena oraz<br />

w oparciu o współczynnik frekwencji i wyznaczone na jego podstawie klasy<br />

dominacji gatunków grzybów mikroskopowych.<br />

Z dwóch gatunków pałek (Typha angustifolia i Typha latifolia) w litoralu<br />

trzech jezior: Czarne, Płociczno, Zdroje w Drawieńskim Parku Narodowym<br />

pozyskano łącznie blisko 350 izolatów grzybów mikroskopowych, reprezentu-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 311-313<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

311


312<br />

jących 30 taksonów, z czego 28 taksonów związanych było z T. angustifolia<br />

a 10 z Typha latifolia. Ogólna różnorodność mikologiczna charakteryzująca te<br />

makrofity była zbliżona w obu latach badań i wynosiła 20 i 21 taksonów, odpowiednio<br />

w roku 2009 i 2010. Godnym pokreślenia wydaje się znaczne wzbogacenie<br />

listy gatunków mikobiota związanych z TA i TL, w zestawieniu z danymi<br />

podawanymi z terenów Polski, gdzie wcześniej potwierdzono obecność tylko<br />

1 gatunku (Phyllosticta typhina) związanego z TL w Słowińskim PN i 2 gatunków<br />

na TA (Phoma typharum i Phyllosticta typhina) na Pojezierzu Mazurskim.<br />

Wśród wyizolowanych grzybów mikroskopowych w badaniach własnych,<br />

w latach 2009–2010 na dwóch gatunkach pałek dominowały taksony należące<br />

do Hyphomycetes (15 taksonów) oraz Coelomycetes (8 taksonów), co stanowiło<br />

odpowiednio 50% i 27% ogólnej różnorodności gatunkowej. Udział Ascomycota<br />

(6 taksonów) i Basidiomycota (1 gatunek), był mniejszy i stanowił odpowiednio<br />

20% i 3,33%. W badaniach wykazano, że współczynnik podobieństwa gatunkowego<br />

Jaccarda-Sörensena grzybów mikroskopowych dla obu gatunków Typha<br />

wynosi 42,10%, a taksonami wspólnymi dla tych roślin są: Alternaria alternata<br />

(Fr.) Keissl., Cephalosporium sp., Cladosporium herbarum (Pers.) Link,<br />

Hymenopsis typhae (Fuckel) Sacc., Phaeosphaeria typharum (Desm.) L.Holm,<br />

Phoma typharum Sacc., Phoma typhicola Oudem i Stagonospora typhoidearum<br />

(Desm.) Sacc. Zdecydowanie wyższy jest natomiast współczynnik podobieństwa<br />

gatunkowego grzybów charakteryzujących T. angustifolia w porównywanych<br />

zbiornikach. Wynosi on 53,8%, 57,9% oraz 56,2%, odpowiednio dla jezior: Zdroje-Płociczno,<br />

Zdroje-Czarne oraz Czarne-Płociczno. Gatunkami izolowanymi<br />

z Typha angustifolia we wszystkich trzech jeziorach okazały się: A. alternata,<br />

Chaetomium globusom Kunze, Hymenopsis typhae, Phoma typharum, P. typhicola,<br />

Scolecosporiella typhae (Oudem.) Petr. i Volutella arundinis Desm.<br />

Obliczenia współczynników ekologicznych dla zidentyfikowanych gatunków<br />

grzybów wykazały, że we wszystkich jeziorach największą frekwencją<br />

wyróżniały się: Hymenopsis typhae (75%) i A. alternata (58,3%). Frekwencja<br />

powyżej 30% charakteryzowała ponadto: Cephalosporium sp., Gibberella intricans<br />

Wollenw., Phoma typharum, P. typhicola, Scolecosporella typhae i Stagonospora<br />

sp. Uzyskane wyniki upoważniają do stwierdzenia, że liczba gatunków<br />

grzybów w poszczególnych klasach dominacji jest wyraźne zróżnicowana<br />

dla T. angustifolia i T. latifolia. Stwierdzono bowiem, że na T. angustifolia eudominantem<br />

jest jedynie H. typhae, a dominantami są 4 gatunki: A. alternata,<br />

Gibberella intricans, Phoma typharum i Scolecosporiella typahe. Na tym żywicielu<br />

stwierdzono najwięcej subdominantów (13 gatunków) i recedentów (10<br />

gatunków). Natomiast na T. latifolia najliczniejszą grupę stanowią dominanty<br />

(8 gatunków) a 2 taksony (A. alternata i Cephalosporium sp.) to eudominanci.<br />

Pozostałych klas dominacji na TL nie wyodrębniono.<br />

W DPN, ale także w Polsce, gatunkami po raz pierwszy stwierdzanymi<br />

na chlorotyczno-nekrotycznych liściach Typha okazały się: Phaeosphaeria ty-


phae, P. typharum, Pyrenophora typhicola i Scolecosporiella typhae. Stwierdzono<br />

również, że Stagonospora spp. wywołuje na liściach TA drobne okrągłe<br />

plamistości na (2-5 mm średnicy), natomiast brunatne, podłużne plamy<br />

o długości 5-35 mm i szerokości 3-8 mm, o postrzępionych nieostrych brzegach<br />

kontaktujących się z tkanką zdrową związane są z obecnością Didymella proximella<br />

(P. Karst.) Sacc., Phaeosphaeria typharum i Phoma typhae, P. typaharum,<br />

Pyrenophora typhicola oraz Phyllosticta sp. Stwierdzono, że na TL<br />

plamistości te są wywołane jedynie przez Phoma typhicola i Phoma typhae.<br />

Uzyskane wyniki pozwoliły nie tylko na wykazanie związku między kompleksami<br />

etiologicznymi grzybów a właściwymi im symptomami chorobowymi,<br />

ale także sugerują udział owadów-wektorów w patogenezie. Podstawą tego<br />

przypuszczenia są obserwacje terenowe, potwierdzające powszechną obecność<br />

i skutki żerowania Donacia crassipes na TA. Biologia tych owadów sprzyja<br />

przenoszeniu różnych patogenów grzybowych, ponieważ samice, występujących<br />

w Polsce 19-tu gatunków Donacia, składają jaja przez dziurki wygryzane<br />

uprzednio w blaszce liściowej. Takie uszkodzenia mechaniczne stwierdzano<br />

w badaniach bardzo często i towarzyszyły one nekrotycznym plamistością na<br />

TA. W kolejnym etapie larwy tych amfibiotycznych chrząszczy penetrują do<br />

kłączy, po czym migrują ponownie do liści nadwodnych, gdzie żerują w postaci<br />

imago. W badaniach udowodniono, że Phyllosticta typhina, Phoma typharum<br />

i C. cladosporioides rozwijają się z larw wydobytych z wnętrza liści, co potwierdza<br />

uczestnictwo tych wektorów w patogenezie.<br />

Otrzymane wyniki wskazują na konieczność kontynuowania interdyscyplinarnych<br />

badań organizmów różnych grup systematycznych wpływających na<br />

kondycję zdrowotną roślin.<br />

Summary<br />

ORGANISMS WHICH AFFECT THE HEALTH OF TYPHA SPP.<br />

IN LITTORAL ZONE OF LAKES IN THE DRAWA NATIONAL PARK<br />

IN POLAND<br />

In 2009–2010 the field and laboratory mycological studies were carried<br />

out on lesser bulrush (Typha angustifolia) and common bulrush (T. latifolia)<br />

forming the Typhaetum angustifoliae and T. latifoliae associations in littoral<br />

zone of three lakes (Czarne, Płociczno and Zdroje) in the Drawa National<br />

Park. It was showed that fungi (30 taxons: 28 on T. angustifolia and 10 on<br />

T. latifolia) and the beetle (Donacia crassipes) may affect the health of Typha<br />

plants. Phaeosphaeria typhae, P. typharum, Pyrenophora typhicola and<br />

Scolecosporiella typhae were isolated from the necrotic leaf tissues of Typha<br />

plants. This is their first record on Typha plants in Poland. It was showed that<br />

that larvae of D. crassipes are vectors of Cladosporium cladosporioides, Phoma<br />

typharum and Phyllosticta typhina in Typha plants.<br />

313


314<br />

GATUNKI Z RODZAJU FUSARIUM ZAGRAŻAJĄCE<br />

UPRAWIE OWSA (AVENA SATIVA L.)<br />

Elżbieta Mielniczuk, Irena Kiecana, Małgorzata Cegiełko<br />

i Alina Pastucha<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20 - 069 Lublin<br />

elzbieta.mielniczuk@up.lublin.pl<br />

Celem pracy było określenie udziału grzybów z rodzaju Fusarium w porażaniu<br />

owsa w różnych fazach jego wzrostu.<br />

Badania przeprowadzono w 2010 roku na polach Hodowli Roślin Strzelce<br />

Sp. z o. o., Grupa IHAR, woj. łódzkie. Objęto nimi 15 genotypów owsa wskazanych<br />

przez Specjalistów Hodowli Roślin: Danko, Małopolska i Strzelce: CHD<br />

1193/04, CHD 1368/05, CHD 2316/03, CHD 3047/03, Arden, POB 648/06, POB<br />

1316/08, POB 1813/08, POB 2053/06, POB 4703-99/08, Bingo, Haker, Maczo,<br />

STH 8608 i STH 8809.<br />

W okresie wegetacji dwukrotnie określano zdrowotność roślin: w fazie 6-tygodniowych<br />

siewek dla każdego genotypu określono udział roślin z objawami<br />

nekrozy korzeni oraz pochew liściowych, natomiast w fazie dojrzałości wczesno-woskowej<br />

ziarna (83 w skali Tottmana 1987) określono udział źdźbeł z nekrozą<br />

korzeni oraz nekrotycznych smug na dolnych międzywęźlach. Ponadto<br />

oceniono stopień porażenia siewek oraz źdźbeł, a następnie obliczono wskaźniki<br />

chorobowe. Uzyskane wyniki opracowano statystycznie z wykorzystaniem<br />

półprzedziałów ufności T-Tukey’a (Żuk 1989).<br />

Odsetek siewek z objawami chorobowymi wynosił od 6,5% (POB 648/06) do<br />

25,0% (CHD 2316/03), zaś udział porażonych źdźbeł wahał się od 10,0 (Arden)<br />

do 51,0 (Maczo).<br />

Wartości wskaźników chorobowych siewek oraz źdźbeł u większości genotypów<br />

owsa różniły się istotnie, przy czym w przypadku siewek istotnie najwyższą<br />

wartość wskaźnika chorobowego zanotowano dla rodu hodowlanego<br />

CHD 2316/03 – 5,7, zaś istotnie najniższą wartość wskaźnika chorobowego<br />

stwierdzono u genotypu POB 648/06 – 1,4. Natomiast najwyższe wartości<br />

wskaźników chorobowych dla źdźbeł zanotowano w przypadku odmiany Maczo<br />

– 22,1 oraz rodu hodowlanego STH 8608 – 22,0, najniższe zaś w przypadku<br />

rodu hodowlanego CHD 1368/05 – 6,3 i odmiany Arden – 6,6.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 314-316<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Siewki oraz <strong>rośliny</strong> w fazie dojrzałości wczesno - woskowej ziarna, wykazujące<br />

objawy chorobowe poddano analizie mikologicznej, która została przeprowadzona<br />

metodą szalkową według ogólnie przyjętych w fitopatologii zasad.<br />

Liczba analizowanych fragmentów roślin oraz sposób oznaczania grzybów<br />

były takie jak w pracy (Kiecana i in. 2003).<br />

W wyniku analizy mikologicznej siewek uzyskano 542 izolaty grzybów<br />

(245 z korzeni i 297 z pochew liściowych), należących do 20 gatunków. Wśród<br />

wyosobnionych kolonii grzybów 44,6% stanowiły kolonie rodzaju Fusarium.<br />

Szczególny udział w porażaniu siewek miały F. equiseti, F. avenaceum, F. culmorum<br />

oraz F. sporotrichioides.<br />

Natomiast analiza mikologiczna korzeni i podstawy źdźbła dostarczyła<br />

1421 izolatów grzybów, w tym 679 z korzeni i 742 z dolnych międzywęźli, należących<br />

do 12 gatunków oraz form niezarodnikujących. Najliczniej wyosabniane<br />

były grzyby z rodzaju Fusarium i stanowiły one 93,7% wszystkich uzyskanych<br />

kolonii.<br />

Przeprowadzone badania wykazały, że główną przyczyną uszkodzenia korzeni<br />

i podstawy źdźbła owsa był gatunek Fusarium culmorum. Wyniki analizy<br />

mikologicznej porażonych organów roślin wskazują na udział w powodowaniu<br />

chorób podsuszkowych owsa również gatunków F. avenaceum, F. equiseti<br />

i F. solani.<br />

Ponadto w fazie dojrzałości pełnej ziarna (93 w skali Tottmana 1987) określono<br />

procentowy udział wiech z objawami fuzariozy, który wahał się od 0,5%<br />

(CHD 1368/05, CHD 3047/03, Arden, POB 1316/08, POB 1813/08, STH 8608)<br />

do 6% (POB 2053/06, Maczo).<br />

Przeprowadzono także analizę mikologiczną ziarniaków i plew badanych 15<br />

genotypów owsa, która wykazała, że główną przyczyną fuzariozy wiech owsa<br />

wzrastającego w warunkach Centralnej Polski były: F. poae, F. culmorum,<br />

F. avenaceum i F. sporotrichioides. Spośród gatunków z rodzaju Fusarium<br />

z porażonych wiech wyosobniono także F. equiseti, F. oxysporum i F. solani.<br />

Summary<br />

SPECIES FROM GENUS FUSARIUM THREATENING<br />

THE CULTIVATION OF OAT (AVENA SATIVA L.)<br />

Investigations were carried out in 2010 year on the field of Plant Breeding<br />

Strzelce IHAR Ltd., Co., Group Plant Breeding and Acclimatization. Disease<br />

symptoms were recorded twice - in the 6 – weeks seedling stage and early<br />

dough stage (83 in the Tottman’s scale) of oat. The percentage of diseased<br />

seedlings with root and sheath necrosis ranged from 6,5% (POB 648/06) to<br />

25,0% (CHD 2316/03), and percentage of stems showed symptoms of necrosis<br />

roots and necrotic stripes on lower internodes ranged from 10,0 (Arden) to 51,0<br />

315


316<br />

(Maczo). Mean values of the disease index for the seedlings of analyzed oat<br />

genotypes oscillated from 1.4 (POB 648/06 ) to 5.7 (CHD 2316/03) and values<br />

of the disease index for stem bases and roots ranged from 6.3 (CHD 1368/05)<br />

to 22.0 (Maczo, STH 8608). Results of mycological analysis showed that the<br />

main casual agents of seedlings were F. equiseti, F. avenaceum, F. culmorum<br />

and F. sporotrichioides where as F. culmorum was main cause of root and<br />

stem bases infection in the case of elder plants.<br />

Investigations on Fusarium panicle blight of oat were carried out in the<br />

phase of full maturity of kernels (92 in Tottman’s scale)<br />

The percentage of panicles with fusariosis symptoms ranged from 0,5%<br />

(CHD 1368/05, CHD 3047/03, Arden, POB 1316/08, POB 1813/08, STH 8608)<br />

to 6% (POB 2053/06, Maczo). The mycological analysis of kernels and chaffs<br />

obtained from panicles with the fusarium blight (scab) symptoms showed,<br />

that the largest threat to panicles of this cereal were F. poae, F. culmorum,<br />

F. avenaceum and F. sporotrichioides.


MOŻLIWOŚCI WYKORZYSTANIA WYBRANYCH<br />

FUNGICYDÓW I ZWIĄZKÓW POCHODZENIA<br />

NATURALNEGO W OCHRONIE ROŚLIN<br />

SADOWNICZYCH PRZED BAKTERIOZAMI<br />

Artur Mikiciński, Piotr Sobiczewski i Stanisław Berczyński<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

amikic@insad.pl<br />

Walka z bakteriozami jest jednym trudniejszych do rozwiązania problemów<br />

produkcji sadowniczej. Wiąże się to z biologią sprawców tych chorób,<br />

a także brakiem skutecznych środków, zarówno zapobiegawczych, jak i interwencyjnych.<br />

Do ochrony przed bakteriozami zarejestrowane są wyłącznie<br />

preparaty na bazie związków miedzi. Istotne znaczenie ma wykorzystanie<br />

innych metod, zwłaszcza agrotechnicznej i fizycznej. Integracja tych metod<br />

daje pewne możliwości ochrony, ale nie zawsze jest wystarczająco efektywna.<br />

Prowadzone badania są ukierunkowane na poszukiwanie nowych środków<br />

i opracowanie efektywnych strategii. Do najbardziej szkodliwych chorób bakteryjnych<br />

drzew owocowych należą zaraza ogniowa (Erwinia amylovora) i rak<br />

bakteryjny (Pseudomonas syringae). W ostatnich latach notowano zwiększone<br />

nasilenie bakteryjnej zgorzeli orzecha włoskiego (Xanthomonas arboricola pv.<br />

juglandis), a niedawno wykryto po raz pierwszy w Polsce bakteryjną zgorzel<br />

leszczyny (Xanthomonas arboricola pv. corylina). W uprawach szkółkarskich<br />

straty o znaczeniu gospodarczym wyrządza guzowatość korzeni powodowana<br />

przez tumorogenne agrobakteria (Agrobacterium biowar 1). Szkodliwość chorób<br />

bakteryjnych jest zmienna zarówno w poszczególnych latach, jak i rejonach<br />

uprawy roślin sadowniczych.<br />

W ramach przeprowadzonych badań oceniono antybakteryjną aktywność<br />

fungicydów: Miedzian 50 WG, Ridomil MZ Gold 68 WG, Euparen Multi 50<br />

WG, Captan 80 WG i Dithane Neotec 75 WG oraz olejków eterycznych: lawendowego,<br />

szałwiowego, melisowego, goździkowego i preparatu BioZell na bazie<br />

olejku tymiankowego. Do badań wybrano szczepy bakterii powodujące wymienione<br />

choroby (Ea 659, E. amylovora; RIPF-X13, X. arboricola pv. corylina;<br />

X04, X. arboricola pv. juglandis; PS110, P. syringae pv. syringae; Ps25, P. syringae<br />

pv. morsprunorum rasa 1; At4, Agrobacterium biowar 1). Do studzienek<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 317-319<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

317


318<br />

w pożywce King B, na której wcześniej posiano bakterie, wprowadzano 150<br />

µl zawiesiny lub roztworu odpowiedniego preparatu o koncentracji 1000 ppm<br />

substancji aktywnej, a w przypadku Miedzianu 50 WG także 1500 ppm. Po 48<br />

godz. inkubacji w temp. 24 o C mierzono strefy zahamowania wzrostu bakterii.<br />

Najsilniejsze działanie ograniczające wzrost wszystkich bakterii wykazały<br />

preparaty Dithane Neotec 75 WG, Ridomil MZ Gold 68 WG, Miedzian 50 WG<br />

(at 1500 ppm s. a.), BioZell oraz olejek szałwiowy i goździkowy.<br />

Zdolności ochronne w/w fungicydów przeciwko zarazie ogniowej oceniano<br />

na kwiatach jabłoni odm. Jonagold i zawiązkach owoców gruszy odm. Konferencja,<br />

przeciwko rakowi bakteryjnemu – na zawiązkach owoców czereśni<br />

odm. Napoleon, a guzowatości korzeni – na siewkach słonecznika, jako roślinie<br />

testowej. Odcięte gałęzie jabłoni w pełni kwitnienia opryskiwano zawiesiną<br />

odpowiedniego preparatu i po 24 h inokulowano szczepem Ea 659. Efektywność<br />

preparatów określono po 5 i 7 dniach. Sztucznie zranione zawiązki<br />

opryskiwano zawiesiną badanego preparatu i po 6 godz. inokulowano wodną<br />

zawiesiną odpowiedniego patogena (grusze – Ea 659, czereśnie – Ps110). Ocenę<br />

nasilenia zarazy ogniowej wykonano po 5, a raka bakteryjnego po 4 dniach<br />

inkubacji w temp. 24 o C i wilgotności względnej 100%. Występowanie guzów<br />

na korzeniach słonecznika oceniano po 30 dniach od ich traktowania w/w fungicydami<br />

i posadzeniu do gleby skontaminowanej bakteriami tumorogennymi.<br />

Wszystkie fungicydy zastosowano w takich samych stężeniach, jak w badaniach<br />

in vitro. Stwierdzono, że tylko Miedzian 50 WG wykazał aktywność<br />

ochronną przeciwko badanym chorobom, co wskazuje, że właściwości antybakteryjne<br />

innych fungicydów nie korelowały z ich działaniem zapobiegawczym<br />

na użytych organach roślin.<br />

Summary<br />

POSSIBILITIES TO USE SELECTED FUNGICIDES AND<br />

COMPOUNDS OF NATURAL ORIGIN FOR THE PROTECTION OF<br />

FRUIT TREES AGAINST BACTERIAL DISEASES<br />

The control of bacterial diseases is one of the most difficult problems of fruit<br />

production. This is due to the biology of disease causal agents and to the lack<br />

of effective preparations, both preventive and curative. For plant protection,<br />

currently only preparations based on copper compounds are registered.<br />

However, it is important to use also other methods, especially agrotechnical<br />

and physical: their integration gives some results, but when used alone they<br />

are not always sufficiently effective. The studies carried out are focused on<br />

searching for new preparations and developing effective control strategies.<br />

The most harmful bacterial diseases of fruit trees are fire blight (Erwinia<br />

amylovora) and bacterial canker (Pseudomonas syringae). During the past<br />

few years, an increased severity of bacterial blight of walnut (Xanthomonas


arboricola pv. juglandis) is observed. Moreover, recently for the first time in<br />

Poland the bacterial blight of hazelnut (Xanthomonas arboricola pv. corylina)<br />

was detected. Losses of economic importance are caused in the nurseries<br />

by crown gall induced by tumorogenic Agrobacterium bv. 1. The severity of<br />

bacterial diseases is variable from year to year, as well as in different regions<br />

of fruit trees cultivation.<br />

In the framework of studies dealing with this subject, the antibacterial<br />

activity of the following fungicides was evaluated: Miedzian 50 WG, Ridomil MZ<br />

Gold 68 WG, Euparen Multi 50 WG, Captan 80 WG and Dithane Neotec 75 WG.<br />

The evaluation concerned also some essential oils: lavender, sage, melissinic,<br />

clove, and a preparation based on thyme oil (BioZell). Each preparation and<br />

compound was tested against the following bacterial strains causing the<br />

above mentioned diseases: Ea 659, E. amylovora; RIPF-X13, X. arboricola pv.<br />

corylina; X04, X. arboricola pv. juglandis; PS110, P. syringae pv. syringae;<br />

Ps25, P. syringae pv. morsprunorum race 1; At4, tumorogenic Agrobacterium<br />

bv. 1. An aliquote (150 µl) of water suspension or of solution of each tested<br />

preparation or compound was introduced into wells made on King B medium<br />

in Petri dishes previously surface inoculated with a bacteria of a given strain.<br />

Each preparation and compound was tested at a concentration of 1000 ppm of<br />

active ingredient; Miedzian 50 WG was also tested at a concentration of 1500<br />

ppm. After incubation for 48 h at 24 o C, the zones of growth inhibition were<br />

measured. The highest activity in limiting growth of all bacteria was showed<br />

by Dithane Neotec 75 WG, Ridomil MZ Gold 68 WG, Miedzian 50 WG (at 1500<br />

ppm s. a.), BioZell, and sage and clove oils.<br />

The protective activity of above mentioned fungicides was also evaluated<br />

in vivo. They were assessed against fire blight on apple blossoms of the cv.<br />

Jonagold and pear fruitlets of the cv. Conference, against bacterial canker<br />

on sweet cherry fruitlets cv. Napoleon, and against crown gall on sunflower<br />

seedlings (test plant). Detached branches of apple at full bloom were sprayed<br />

with suspension of each preparation and after 24 h inoculated with the strain<br />

Ea 659. The effectiveness of the preparations was assessed after 5 and 7 days.<br />

Artificially injured pear and cherry fruitlets were sprayed with suspension of a<br />

given preparation and after 6 h inoculated with a suspension of the respective<br />

pathogen strain (pears – Ea 659, cherry – Ps110). Evaluation of symptoms<br />

severity of fire blight was performed after incubation at 24 o C for 5 days and<br />

of bacterial canker after 4 days. The presence of galls on sunflower roots was<br />

assessed after 30 days from their treatment with fungicides and planting into<br />

soil contaminated with tumorigenic bacteria. All fungicides were applied at<br />

the same concentrations as in in vitro tests. It was found that only Miedzian<br />

50 WG showed protective activity against the studied diseases, which indicates<br />

that the antibacterial properties of the other fungicides did not correlate with<br />

their activity on the plant organs used in the in vivo experiment.<br />

319


320<br />

NASTĘPCZE ODDZIAŁYWANIE OSADÓW ŚCIEKOWYCH<br />

NA ZBIOROWISKA GRZYBÓW GLEBOWYCH<br />

I ZDROWOTNOŚĆ ROŚLIN UPRAWNYCH<br />

Ewa B. Moliszewska 1 i Izabella Pisarek 2<br />

1 Uniwersytet Opolski, Samodzielna Katedra Biotechnologii i Biologii Molekularnej,<br />

ul Kard. B. Kominka 6A, 45-035 Opole<br />

2 Uniwersytet Opolski, Samodzielna Katedra Ochrony Powierzchni Ziemi,<br />

ul. Oleska 22, 45-052 Opole<br />

ewamoli@uni.opole.pl<br />

Celem prezentowanych badań jest wskazanie wpływu zróżnicowanych dawek<br />

kompostowanych osadów ściekowych na zbiorowiska grzybów glebowych<br />

oraz zdrowotność siewek buraka cukrowego. Osady ściekowe składowane na<br />

lagunach pochodziły z Opolskiej Oczyszczalni Ścieków, kontrolę stanowiła<br />

gleba nawożona obornikiem bydlęcym oraz gleba bez nawożenia organicznego.<br />

W doświadczeniach laboratoryjnych badano także właściwości ekstraktów<br />

uzyskanych z gleb nawożonych osadami ściekowymi, a zawierającymi<br />

odpowiednio kwasy huminowe, kwasy fulwowe lub mieszaninę tych kwasów,<br />

a także wodnego wyciągu uzyskanego z kompostowanych osadów ściekowych.<br />

W warunkach laboratoryjnych zbadano wpływ powyższych ekstraktów na<br />

wzrost oraz wzajemne oddziaływania wybranych patogenów glebowych oraz<br />

grzybów saprotroficznych, a także na zdolność kiełkowania zarodników niektórych<br />

gatunków. Jako gatunki pasożytnicze badano: Rhizoctonia solani, Fusarium<br />

oxysporum, Aphanomyces cochlioides, Phoma betae, Cylindrocarpon<br />

heteronema. Gatunki saprotroficzne użyte w badaniach to: Gonatorrhodiella<br />

highlei, Chaetomium globosum, Gliocladium roseum, Mortierella parvispora,<br />

Paecilomyces marquandii, Humicola grisea, H. fuscoatra, Cladosporium herbarum,<br />

Trichoderma hamatum, Penicillium expansum. Zdolność kiełkowania<br />

zarodników grzybów w środowisku zawierającym badane ekstrakty oceniono<br />

w przypadku: F. oxysporum, C. heteronema, G. roseum oraz T. hamatum.<br />

W badaniach laboratoryjnych oceniono wartości indywidualnych efektów<br />

biotycznych, współczynnik zahamowania wzrostu oraz indeks kiełkowania<br />

zarodników. Zdrowotność siewek buraka cukrowego badano w warunkach laboratoryjnych<br />

w doświadczeniu wazonowym założonym w drugim (wiosna i jesień)<br />

i trzecim (wiosna) roku po zastosowaniu osadów ściekowych. Wazony ob-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 320-322<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


siewano nieotoczkowanymi i podkiełkowanymi zdrowymi nasionami buraka<br />

cukrowego odm. Janus. Obserwowano tempo wschodów, zdrowotność siewek<br />

oraz identyfikowano organizmy wyodrębnione z porażonych siewek buraka.<br />

Brak wschodów traktowano jako zgorzele przedwschodowe, natomiast pozostałe<br />

uszkodzenia siewek jako zgorzele powschodowe.<br />

W doświadczeniu wazonowym uzyskiwano lepsze wschody w wazonach<br />

z glebą nawożoną osadami ściekowymi na poziomie 30 i 80 t/ha w porównaniu<br />

do gleby nawożonej dawką 50t/ha lub nienawożonej bądź nawożonej obornikiem.<br />

Stwierdzono także, iż w miarę upływu czasu od nawożenia wzrastała<br />

liczba grzybów izolowanych z pojedynczej siewki. Siewki buraka były porażane<br />

głównie przez: Rhizoctonia solani, Pythium spp., Fusarium oxysporum,<br />

F. solani. Izolowano z nich także inne gatunki grzybów. Najsilniejsze właściwości<br />

antagonistyczne w stosunku do patogenów wykazywały T. hamatum<br />

oraz P. expansum. Kwasy huminowe oraz ich mieszanina z kwasami fulwowymi<br />

wykazywały zdolność do ograniczania rozwoju gatunków patogenicznych.<br />

Natomiast wodne ekstrakty z osadów ściekowych oraz roztwory zawierające<br />

kwasy huminowe wykazywały zdolność do ograniczania kiełkowania niektórych<br />

gatunków grzybów. Jeden z głównych patogenów buraka cukrowego<br />

A. cochlioides okazał się być wrażliwym na wszystkie badane ekstrakty, jednak<br />

w doświadczeniu wazonowym nie izolowano go z porażonych siewek buraków.<br />

Summary<br />

THE SEQUENT EFFECT OF SEWAGE SLUDGE ON THE SOIL<br />

FUNGAL COMMUNITY AND PLANT SALUBRITY<br />

The goal of this study was to compare the influence of various doses of sewage<br />

sludge and cattle manure on the changes of the soil fungi communities as well<br />

as the sugar beet seedlings salubrity. Sewage sludge was composted for twelve<br />

years in Opolska Oczyszcalnia sciekow. We used respectively 30, 50 and 80 t/ha of<br />

sewage sludge dosed to completely randomized blocks (0.5 ha), as control served<br />

two combinations: first fertilized with 30 t/ha of cattle manure, second with<br />

no organic fertilization. The laboratory experiments were conducted in second<br />

(apring and autumn) and third (spring) year after fertilization of the soil with<br />

sewage sludge. In laboratory experiments some properties of humic substances<br />

(extract of humic acids, extract of fulvic acids, mixture of them and extract of<br />

sewage sludge) were determined. We observed the effect of above extracts on<br />

the growth and developement of some pthtopathogenic and saprobic fungi as<br />

well as Oomycetes. As pathogenic organisms were tested: Rhizoctonia solani,<br />

Fusarium oxysporum, Aphanomyces cochlioides, Phoma betae, Cylindrocarpon<br />

heteronema. Saprobic species used in experiments were: Gonatorrhodiella<br />

highlei, Chaetomium globosum, Gliocladium roseum, Mortierella parvispora,<br />

321


322<br />

Paecilomyces marquandii, Humicola grisea, H. fuscoatra, Cladosporium<br />

herbarum, Trichoderma hamatum, Penicillium expansum. For four species:<br />

F. oxysporum, C. heteronema, G. roseum and T. hamatum the effect of tested<br />

extracts on the germination of spores was determined. The individual biotic<br />

effects, the impact of growth inhibition, and the impact of spores germination<br />

were calculated for tested fungi.<br />

In the laboratory pot test the soil samples were sown with non-coated, preemergenced<br />

and healthy sugar beet seeds (cv. Janus). During the experiment<br />

seedlings were counted and their health condition was controlled. Plants<br />

which did not sprout were treated as the pre-emergence damping-off. Plants<br />

with visible dark spots on the hypocotyl or dead plants were treated as the<br />

post-emergence damping-off. Fungi existed in damaged tissues were isolated<br />

from diseased seedlings, and than determined to the species names. The main<br />

fungal phytopathogens caused sugar beet damping-off were Rhizoctonia solani,<br />

Pythium spp., Fusarium oxysporum, F. solani. The other fungal species were<br />

also isolated from the disesaed seedlings. We observed the increased sugar beet<br />

emergence in pots filled with soil fertilized with sewage sludge in doses 30 and<br />

80 t/ha compared to other combinations of the test. We obtained the increased<br />

number of fungi per seedling during the experiment. The most active fungal<br />

antagonists against phytopathogens were T. hamatum and P. expansum.<br />

Pathogenic organisms were inhibited by extract of humic acids and by the<br />

mixture of humic and fulvic acids, while extract of sewage sludge as well as<br />

extract of humic acids could inhibit germination of spores of some fungi. The<br />

one of the most important sugar beet pathogen A. cochlioides was sensitive<br />

to the all tested extracts although it was not fund in the diseased sugar beet<br />

seedlings.


ZBIOROWISKA GRZYBÓW FYLLOSFERY JEŻÓWKI<br />

PURPUROWEJ (ECHINACEA PURPUREA (L.) MOENCH.)<br />

NAWOŻONEJ MOCZNIKIEM I SALETRĄ AMONOWĄ<br />

Ewa Moszczyńska 1 , Krzysztof Matkowski 1 , Elżbieta Pląskowska 1<br />

i Anita Biesiada 2<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Ochrony Roślin - Zakład Fitopatologii<br />

i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

2 Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Ogrodnictwa 2 , pl. Grunwaldzki 24A,<br />

50-363 Wrocław<br />

ewa.moszczynska@up.wroc.pl<br />

Doświadczenie założono w latach 2007-2009 w Psarach pod Wrocławiem. Celem<br />

podjętych badań była analiza składu mikobiota fyllosfery jeżówki w zależności<br />

od dawki nawożenia mocznikiem i saletrą amonową. Zastosowano dwie<br />

dawki i formy nawożenia azotem: 50 kgN . ha -1 (mocznik – przed wegetacją)<br />

oraz 200 kgN . ha -1 (100 kg . ha -1 mocznika – przed wegetacją i 100 kg . ha -1 saletry<br />

amonowej – w fazie rozety). Z powierzchni liści jeżówki purpurowej, najliczniej<br />

wyizolowano: Cladosporium spp., Alternaria alternata, kolonie drożdżoidalne,<br />

Fusarium spp. i Epicoccum nigrum. Grzyby te stanowiły ponad 90%<br />

wyizolowanych kolonii, w przypadku nawożenia niższą dawką mocznika (50<br />

kgN . ha -1 ). Natomiast kiedy zastosowano wyższe nawożenie azotem (200 kgN .<br />

ha -1 ) procentowy udział tych grzybów nie przekraczał 83%. Dominantami były<br />

C. herbarum, A. alternata i C. cladosporioides. Dawki nawożenia mocznikiem<br />

i saletrą amonową miały wpływ na liczebność Cladosporium spp. W czasie<br />

trzyletnich badań grzyby te były najliczniej izolowane z roślin nawożonych<br />

mocznikiem w dawce 50 kgN . ha -1 . W obrębie rodzaju Fusarium dominującym<br />

gatunkiem był F. equiseti. Skład zbiorowisk grzybów fyllosfery jeżówki był<br />

zmienny i zależał od warunków pogody. W 2007 roku, w którym wystąpiły<br />

największe opady, Fusarium spp. były izolowane najliczniej, natomiast Trichoderma<br />

spp. wyosobniano sporadycznie.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 323-324<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

323


324<br />

Summary<br />

FUNGI ASSEMBLAGES OF THE PHYLLOSPHERE OF EASTERN<br />

PURPLE CONEFLOWER (ECHINACEA PURPUREA (L.) MOENCH.)<br />

FERTILIZED WITH UREA AND AMMONIUM SULPHATE<br />

The experiment was established in 2007-2009 in Psary near Wroclaw. The<br />

aim of this study was to analyze the composition of Echinacea phyllosphere<br />

micobiota depending on the level of nitrogen fertilization with urea and<br />

ammonium nitrate. Two doses and forms of nitrogen fertilizer were used: 50<br />

kgN.ha-1 (urea - pre vegetation) and 200 kgN.ha-1 (100 kg.ha-1 urea - pre<br />

vegetation and 100 kg.ha-1 ammonium nitrate - in rosette phase). The most<br />

common fungi isolated from surface of the coneflower leaf were: Cladosporium<br />

spp, Alternaria alternata Yeast colonies, Fusarium, and Epicoccum nigrum.<br />

These fungi constitute more than 90% of the isolated colonies in variant with<br />

lower dose of urea fertilizer (50 kgN.ha-1)and did not exceed 83% in variant with<br />

higher doses of nitrogen fertilization (200 kgN.ha-1) where most frequently<br />

isolated were C. herbarum, A. alternata and C. cladosporioides. Dose of urea<br />

fertilizer and ammonium different level of infestation by Cladosporium spp..<br />

During the three-year study fungi were most frequently isolated from plants<br />

fertilized with urea at a dose of 50 kgN.ha-1.<br />

F. equiseti was dominant species from genera Fusarium. Composition of<br />

Echinacea fungal fyllosfery was variable and depended on weather conditions.<br />

In 2007, in which occured the largest rainfall, Fusarium spp were isolated most<br />

frequently, while antagonistic Trichoderma spp. were isolated occasionally.


WPŁYW UPRAWY RODÓW GORCZYCY BIAŁEJ<br />

NA POPULACJĘ MĄTWIKA BURAKOWEGO W GLEBIE<br />

Mirosław Nowakowski 1 , Paweł Skonieczek 1 i Teresa Piętka 2<br />

1 Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin - PIB, Zakład Technologii Produkcji<br />

Roślin Okopowych, Al. Powstańców Wielkopolskich 10, 85-090 Bydgoszcz<br />

2 Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin - PIB, Zakład Genetyki i Hodowli<br />

Roślin Oleistych, ul. Strzeszyńska 36, 60-479 Poznań<br />

m.nowakowski@ihar.bydgoszcz.pl<br />

Celem pracy była ocena i selekcja wybranych rodów gorczycy białej, pochodzących<br />

z krajowej hodowli, pod względem wykorzystania ich do biologicznego<br />

zwalczania mątwika burakowego (Heterodera schachtii Schmidt), który stanowi<br />

bardzo poważny problem w płodozmianach z dużym udziałem buraka<br />

cukrowego i rzepaku. Do badań w 2008 roku wytypowano 15 rodów gorczycy<br />

białej oraz odmiany kontrolne – Nakielską, Metex i Bamberkę.<br />

Zbadano oddziaływanie rodów i odmian gorczycy białej na populację mątwika<br />

burakowego, poprzez wysiew roślin w międzyplonie ścierniskowym<br />

w specjalnych kesonach (1m 2 ) wypełnionych do głębokości 60 cm czarną ziemią<br />

kujawską, silnie zasiedloną mątwikiem. Pobrano próby z warstwy gleby<br />

0-20 cm, przed siewem gorczyc (08.08.2008 r.) oraz w momencie ich zbioru<br />

(21.10.2008 r.). Z prób (2 x po 100 g z każdego kesonu) wypłukano cysty mątwika<br />

burakowego, a następnie liczono pod mikroskopem zawarte w nich żywe<br />

jaja i larwy. Stwierdzono zróżnicowany wpływ badanych gorczyc na liczebność<br />

mątwika w glebie (rys. 1). Najskuteczniejszym działaniem antymątwikowym,<br />

przewyższającym odmiany wzorcowe Metex i Bamberka, odznaczały się rody:<br />

PN-1/07 (zmniejszenie populacji szkodnika o 47,0%), PN-5/07 (43,1%), PN-15/07<br />

(37,3%), PN-3/07 (29,8%), PN-6/07 (28,2%) i PN-14/07 (26,9%). Znaczne namnożenie<br />

szkodnika zanotowano po uprawie odmiany Nakielskiej i rodu<br />

PN-2/07 (wzrost populacji odpowiednio o 81,8% i 56,2%). W kesonie z czarnym<br />

ugorem, bez obsiewu, nastąpił niewielki przyrost liczebności mątwika (4,6%).<br />

Największe plony świeżej i suchej masy części nadziemnej gorczyc uzyskano<br />

z rodów: PN-12/07 (odpowiednio: 38,3 i 5,21 t ha -1 ), PN-13/07 (34,8 i 4,63 t<br />

ha -1 ), PN-5/07 (33,8 i 4,49 t ha -1 ), PN-4/07 (33,0 i 4,65 t ha -1 ) i PN-11/07 (33 i 4,45<br />

t ha -1 ). Z kolei najwyższe plony świeżej i suchej masy korzeni zebrano po uprawie<br />

z rodów: PN-13/07 (odpowiednio: 2,38 i 0,59 t ha -1 ), PN-5/07 (2,33 i 0,58 t<br />

ha -1 ) i PN-12/07 (2,30 i 0,57 t ha -1 ).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 325-327<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

325


326<br />

Odmiany i rody gorczycy białej - Cultivars and breeding lines of white mustard:<br />

N – Nakielska ( Rogowska HR ) 1 – PN-1/07 6 – PN-6/07 11 – PN-11/07 czu – czarny ugór - fallow<br />

M – Metex ( Saaten Union ) 2 – PN-2/07 7 – PN-7/07 12 – PN-12/07<br />

B – Bamberka ( IHAR-PIB ) 3 – PN-3/07 8 – PN-8/07 13 – PN-13/07<br />

4 – PN-4/07 9 – PN-9/07 14 – PN-14/07<br />

5 – PN-5/07 10 – PN-10/07 15 – PN-15/07<br />

Rys. 1. Wpływ odmian i rodów gorczycy białej na liczebność populacji mątwika burakowego<br />

Fig. 1. Influence of cultivars and breeding lines of white mustard on population density of beet cyst-nematode


Uzyskane plony ogólne z rodów gorczyc odpowiadają ilością masie organicznej<br />

wprowadzanej do gleby ze średnią dawką obornika pod buraki cukrowe.<br />

W kesonach przed wysiewem międzyplonu zastosowano dawki nawozów<br />

odpowiadające 50 kg N ha -1 (saletra amonowa) oraz 66 kg K ha -1 (sól potasowa).<br />

Summary<br />

INFLUENCE OF WHITE MUSTARD LINES CULTIVATION ON<br />

POPULATION DENSITY OF BEET CYST-NEMATODE IN SOIL<br />

In 2008 a field experiment was carried out in Bydgoszcz on black earth to<br />

assess the growth dynamics, yields and antinematode effects of fifteen breeding<br />

lines and three varietes of white mustard (Nakielska, Metex and Bamberka),<br />

cultivated as a catch crop. The highest fresh and dry matter yield of<br />

shoots was found for: PN-12/07 (38,3 and 5,21 t ha -1 respectively), PN-13/07<br />

(34,8 and 4,63 t ha -1 ), PN-5/07 (33,8 and 4,49 t ha -1 ), PN-4/07 (33,0 and 4,65<br />

t ha -1 ) and PN-11/07 (33 and 4,45 t ha -1 ). However the highest fresh and dry<br />

matter yield of roots was obtained for: PN-13/07 ( 2,38 end 0,59 t ha -1 respectively),<br />

PN-5/07 (2,33 and 0,58 t ha -1 ) and PN-12/07 (2,30 and 0,57 t ha -1 ).<br />

In the group of white mustard breeding lines the best antinematode effect<br />

was recorded after cultivation of PN-1/07 (reduction of beet cyst-nematode population<br />

about 47,0%), PN-5/07 (43,1%), PN-15/07 (37,3%), PN-3/07 (29,8%),<br />

PN-6/07 (28,2%) and PN-14/07 (26,9%) (fig. 1).<br />

327


328<br />

PORÓWNANIE PORAŻENIA PRZEZ FUSARIUM<br />

I ZAWARTOŚCI MIKOTOKSYN W ZIARNIE KUKURYDZY<br />

KONWENCJONALNEJ I MODYFIKOWANEJ GENETYCZNIE<br />

Piotr Ochodzki 1 , Tomasz Góral 1 , Roman Warzecha 2 ,<br />

Monika Żurek 2 i Kamil Nawrot 3<br />

1 Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Fitopatologii, Radzików, 05-870, Błonie<br />

2 Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Genetyki i Hodowli Roślin, Radzików, 05-870 Błonie<br />

3 I Liceum Ogólnokształcące im Wł. Broniewskiego, ul. Okrzei 3, 05-870 Błonie<br />

p.ochodzki@ihar.edu.pl<br />

Uszkodzone ziarniaki kukurydzy są podatne na infekcje grzybowe i zanieczyszczenie<br />

mikotoksynami. Kukurydza modyfikowana genetycznie (GM) uprawiana<br />

w Unii Europejskiej zawiera modyfikację Bt, która chroni roślinę przed<br />

omacnicą prosowianką (ECB, Ostrinia nubilalis). Zmniejszenie zawartości mikotoksyn<br />

w ziarnie GM w pewnych sytuacjach może być wystarczająco wysokie,<br />

żeby wpływać na efekt ekonomiczny uprawy. Kukurydza GM może również<br />

wpływać w ten sposób na stan zdrowotny zwierząt gospodarskich i człowieka.<br />

Celem badań było porównanie nasilenia fuzariozy kolb oraz zawartości mikotoksyn<br />

fuzaryjnych w ziarnie kukurydzy konwencjonalnej i modyfikowanej genetycznie,<br />

uprawianych w różnych rejonach Polski.<br />

Doświadczenie przeprowadzono w latach 2008-2010 w dwóch lokalizacjach<br />

w Polsce Południowo-Zachodniej (A) i Wschodniej (B). W każdym doświadczeniu<br />

wysiano odmianę GM DKC 3421YG i mieszańcową DKC 3420, którą chroniono<br />

chemicznie przed omacnicą prosowianką. Kontrolę stanowiła odmiana DKC<br />

3420 bez ochrony. Po zbiorze oceniano stopień porażenia kolb i porażenie ziarna<br />

przez Fusarium. Ziarno badano na obecność 10 gatunków: F. avenaceum, F. culmorum,<br />

F. equiseti, F. graminearum, F. subglutinans, F. verticillioides, F. langsethiae,<br />

F. poae, F. sporotrichioides and F. tricinctum. Ilość DNA poszczególnych<br />

gatunków określono techniką real-time PCR z użyciem SYBR green (Nicolaisen<br />

et al. 2009). Zawartość mikotoksyn: deoksyniwalenolu (DON) i fumonizyn (FB 1 ,<br />

FB 2 , FB 3 ) oznaczono po ekstrakcji odpowiednim solwentem ( acetonitryl:woda<br />

84:16 lub metanol) i oczyszczeniu na dedykowanych kolumienkach SPE. Rozdziały<br />

chromatograficzne przeprowadzono na zestawie HPLC wyposażonym<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 328-331<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


w kolumnę RP C18 i detektory UV/VIS (DON) i fluorescencyjny (FUM). Zawartość<br />

ergosterolu (ERG) jako substancji pokazującej ilość grzybni oznaczono<br />

metodą HPLC po hydrolizie i ekstrakcji n-pentanem.<br />

W roku 2008 w obu miejscowościach ocena fuzariozy kolb i plon ziarna były<br />

podobne. Plon ziarna odmian DKC 3421YG i DKC 3420 chronionej chemicznie<br />

były wyższe niż kontroli, lecz tylko w lokalizacji A różnice były statystycznie<br />

istotne. Średni plon w lokalizacji A był istotnie niższy (72,3 g/kolbę) niż<br />

w B (112,9 g/kolbę). Również porażenie kolb było istotnie wyższe kontroli niż<br />

w odmianie chronionej i GM. Analiza PCR wykazałą obecność 7 gatunków Fusarium,<br />

głównie F. graminearum, F. subglutinans i F. culmorum.We wszystkich<br />

latach w obu lokalizacjach odmiana GM była odporna na omacnicę. Ochrona<br />

chemiczna była również bardzo skuteczna. Analiza zawartości mikotoksyn wykazała<br />

obecność DON i brak fumonizyn. W lokalizacji A zawartość DON nie<br />

przekraczała ustalonego dopuszczalnego stężenia (1,75 mg/kg) we wszystkich<br />

badanych próbach. W lokalizacji B dopuszczalne stężenie zostało przekroczone<br />

w kontroli we wszystkich trzech latach badań, w DKC 3420 chronionej chemicznie<br />

w latach 2009 i 2010, a w odmianie GM w roku 2010. W roku 2010<br />

w lokalizacji B dopuszczalne stężenie DON zostało przekroczone we wszystkich<br />

badanych próbach. Stwierdzono wysoką korelację między zawartością DON<br />

a zawartością ergosterolu i DNA F. graminearum.<br />

Potwierdzono w warunkach Polski, że zanieczyszczenie ziarna kukurydzy<br />

modyfikowanej genetycznie jest na podobnym poziomie jak kukurydzy konwencjonalnej,<br />

chronionej chemicznie, i dużo mniej zanieczyszczone w porównaniu<br />

z ziarnem kukurydzy konwencjonalnej nie chronionej. Pokazano że oba czynniki:<br />

odporność na omacnicę prosowiankę (w postaci modyfikacji genetycznej<br />

jak i ochrona chemiczna) oraz warunki pogodowe są istotne w zanieczyszczeniu<br />

ziarna kukurydzy mikotoksynami fuzaryjnymi. Odmiany modyfikowane genetycznie<br />

mogą być dobrą alternatywą dla chemicznej ochrony kukurydzy przed<br />

omacnicą.<br />

Projekt finansowany w ramach grantu PBZ MNiSW 06/I/2007/2 i stypendium–<br />

Regionalny program stypendialny dla uczniów szczególnie uzdolnionych<br />

w Województwie Mazowieckim w roku szkolnym 2011/2012<br />

329


330<br />

Summary<br />

COMPARISON OF FUSARIUM INFESTATION AND MYCOTOXINS<br />

CONTENT IN CONVENTIONAL AND GENETICALLY MODIFIED MAIZE<br />

Wounded maize kernels are susceptible to fungal infection and predisposed<br />

to mycotoxin contamination. The genetically modified (GM) maize grown in<br />

European Union contains Bt modification, protecting plants against European<br />

cornborer (ECB) (Ostrinia nubilalis). The reduction of mycotoxins in GM maize<br />

in some circumstances can be high enough to influence the economical results<br />

of cultivation. GM maize may also improve both human and animal health.<br />

The aim of this studies is comparison of incidence and severity of Fusarium<br />

ear rot in both Bt and non-Bt maize varieties and comparison of mycotoxins<br />

concentration in kernels of maize grown is different locations in Poland.<br />

Experiments were conducted in 2008-2010 in two locations in South-Western<br />

(A) and Eastern Poland (B). In each experiment hybrid variety DKC 3420<br />

chemically protected against O. nubilalis, and without protection, and GM variety<br />

DKC 3421YG were sown. After harvest ear rot severity and grain infestation<br />

with Fusarium were evaluated. Maize grain was analyzed for the presence of<br />

ten Fusarium species: F. avenaceum, F. culmorum, F. equiseti, F. graminearum,<br />

F. subglutinans, F. verticillioides, F. langsethiae, F. poae, F. sporotrichioides and<br />

F. tricinctum. DNA concentration of species was measured using quantitative<br />

real-time PCR assays with SYBR green according to Nicolaisen et al. (2009).<br />

Content of mycotoxins: deoxynivalenol (DON) and fumonisins (FB1, FB2,<br />

FB3) was determined after extraction with proper solvent ( acetonitrile:water<br />

(84:16) or methanol) and purification on SPE columns. Analyses were conducted<br />

on HPLC system equipped with RP C18 HPLC column and UV/VIS (DON) or<br />

fluorescence detector (fumonisins). The content of ergosterol as a marker of<br />

presence of mycelia was analyzed on HPLC after microwave-assisted hydrolysis<br />

and extraction with n-pentane.<br />

Evaluation of ear rot severity and yield of grain in 2008 showed similar<br />

results in both locations. Yield of grain of DKC 3421YG and chemically<br />

protected DKC 3420 was higher than in not protected DKC 3420 (control), but<br />

only in location A the difference was statistically significant. Mean grain yield<br />

in location A was significantly lower (72,3 g/cob) than in location B (112,9 g/<br />

cob). Fusarium ear rot severity was also significantly higher in control field<br />

without protection compared to chemically protected or GM variety. Realtime<br />

PCR DNA analyses revealed presence of 7 Fusarium species, mainly<br />

F. graminearum, F. subglutinans and F. culmorum. In all years in both locations<br />

GM variety was resistant to ECB. Chemical protection was also very effective.<br />

Mycotoxin analysis revealed presence of deoxynivalenol and lack of fumonisins.<br />

In location A DON concentration doesn’t exceeded limit (1,75 mg/kg grain) in


DKC 3421YG, in chemically protected or not protected DKC 3420. The acceptable<br />

level of DON was exceeded in control sample from location B in Eastern Poland<br />

in all of 3 years of experiment, in chemically protected DKC 3420 in 2009 and<br />

2010, and in DKC 3421YG in 2010. In 2010 year in location B acceptable DON<br />

level was exceeded in all samples. Ergosterol and F. graminearum DNA content<br />

correlated with mycotoxin content, especially at higher DON concentrations.<br />

It was proved in Polish conditions, that mycotoxin contamination of grain<br />

of GM maize is similar to conventional maize with chemical protection, and<br />

much less contaminated than non-protected conventional maize. Is shows<br />

that both factors: resistance to ECB (GM or chemical protection) and weather<br />

conditions are important in contamination of maize with Fusarium mycotoxins.<br />

Genetically modified maize varieties resistant to ECB can be a good alternative<br />

to chemical agents in plant protection.<br />

331


332<br />

EPICOCCUM NIGRUM JAKO CZYNNIK BIOLOGICZNEJ<br />

KONTROLI IN VITRO PATOGENÓW ROŚLINNYCH<br />

Rafał Ogórek 1 i Elżbieta Pląskowska 1<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Katedra Ochrony Roślin, Zakład<br />

Fitopatologii i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

rafal.ogorek@up.wroc.pl<br />

Celem badań było określenie wpływu in vitro szczepów Epicoccum nigrum<br />

na wzrost Fusarium avenaceum, F. graminearum, F. oxysporum i Botrytis cinerea.<br />

W doświadczeniu zastosowano metodę szeregów biotycznych, w której<br />

podłożem była pożywka PDA (Potato Dextrose Agar) firmy Biocorp. Określano<br />

indywidualne efekty biotyczne (IBE - Individual Biotic Effect) pięciu szczepów<br />

grzyba testowanego (E. nigrum) na różne grzyba patogeniczne (testowane).<br />

Uzyskane wyniki IBE zostały poddane analizie wariancji (ANOVA), przy użyciu<br />

standardowych metod statystycznych (pakiet ,,Statistica 9.0”). Średnie porównano<br />

za pomocą testu Fishera na poziomie istotności LSDα 0,01.<br />

Otrzymane wyniki pokazują, że oddziaływania izolatów E. nigrum na<br />

wzrost patogenów roślin były zróżnicowane. Szczepy E. nigrum nie ograniczały<br />

wzrostu Botrytis cinerea, ale hamowały wzrost wszystkich izolatów grzybów<br />

z rodzaju Fusarium. Najbardziej limitowany był wzrost jednego z izolatów<br />

F. oxysporum przez E. nigrum.<br />

Summary<br />

EPICOCCUM NIGRUM FOR BIOCONTROL AGENTS IN VITRO<br />

OF PLANT FUNGAL PATHOGENS<br />

Epicoccum nigrum strains were evaluated in vitro as potential biological<br />

agents for control of the growth of Fusarium avenaceum, F. graminearum,<br />

F. oxysporum and Botrytis cinerea. Individual biotic effects of five strains of<br />

E. nigrum (test fungi) on the various fungi (tested fungi) were determined<br />

using the biotic series method elaborated for fungi, on potato dextrose agar<br />

(PDA - Biocorp) medium. The results of IBE (individual biotic effect) were<br />

analyzed by ANOVA, using Statistica 9.0 package. Means were compared<br />

using Fisher’s least significant difference (LSD) test at α ≤ 0.01.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 332-333<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


The results show that, the impact isolates of E. nigrum on the growth of<br />

plant pathogens were varied. E. nigrum strains limited the growth of all isolates<br />

of Fusarium spp., but neither of Botrytis cinerea. The most inhibited<br />

growth by E. nigrym was one of the isolates of F. oxysporum.<br />

333


334<br />

WPŁYW BIOSTYMULATORA ASAHI SL NA WZROST<br />

WYBRANYCH GRZYBÓW Z RODZAJU FUSARIUM<br />

NA RÓŻNYCH PODŁOŻACH HODOWALNYCH<br />

Rafał Ogórek 1 , Elżbieta Pląskowska 1 i Andrzej Skrobiszewski 2<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Katedra Ochrony Roślin, Zakład<br />

Fitopatologii i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

2 Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu Katedra Chemii, Zakład Syntezy<br />

Organicznej, ul. C.K. Norwida 25/27, 50-375 Wrocław<br />

rafal.ogorek@up.wroc.pl<br />

Celem przeprowadzonego doświadczenia było określenie wpływu biostymulatora<br />

Asahi SL na wzrost wybranych gatunków grzybów na różnych podłożach<br />

hodowlanych.<br />

Do badań wykorzystano po jednym izolacie Fusarium avenaceum, F. culmorum,<br />

F. oxysporum i F. graminearum. Gatunki użyte w doświadczeniu zostały<br />

wyizolowane z porażonych tkanek zbóż jarych i pochodziły z kolekcji Zakładu<br />

Fitopatologii i Mikologii Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu.<br />

Doświadczenie właściwe przeprowadzono w warunkach temperatury pokojowej<br />

(22 o C), w sześciu powtórzeniach oraz następujących wariantach stężeniowych<br />

biostymulatora: 0,4 l·ha -1 (0,133g preparatu na 100ml pożywki), 0,6 l·ha -1<br />

(0,2g preparatu na 100 ml pożywki - dawka zalecana dla Asahi SL), 1,0 l·ha -1<br />

(0,33g preparatu na 100 ml pożywki) oraz kontrola 0,0 l·ha -1 . W doświadczeniu<br />

wykorzystano jako medium hodowlane podłoże firmy Biocorp: PDA, maltozowe<br />

(Malt Extract), Czapek-Dox Agar (1,2% agaru) oraz podłoże zbożowe wg<br />

Roshida i Schlössera. Uzyskane wyniki poddano analizie wariancji (ANOVA),<br />

przy użyciu standardowych metod statystycznych (pakiet ,,Statistica 9.0”).<br />

Średnie porównano za pomocą testu Fishera na poziomie istotności LSDα 0,01.<br />

Na podstawie analizy wyników z przeprowadzonego doświadczenia stwierdzono,<br />

że grzyby użyte w badaniach wykazują różne tępo wzrostu, jak i w różny<br />

sposób reagują na poszczególne stężenia biostymulatora na różnych mediach<br />

hodowlanych. Najlepsze hamowanie wzrostu grzybów rosnące proporcjonalnie<br />

do stężenia preparatu, odnotowano dla podłoża PDA, a najsłabsze dla podłoża<br />

zbożowego.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 334-335<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

THE EFFECT OF ASAHI SL BIOSTYMUSLATOR ON SELECTED<br />

SPECIES OF FUSARIUM GROWN ON DIFFERENT MEDIA<br />

The aim of the experiment was to determine the effect of biostimulator Asahi<br />

SL on the growth of some species of fungi in different culture media.<br />

Isolates of Fusarium avenaceum, F. culmorum, F. oxysporum and<br />

F. graminearum were used in the study. The species used in the studies were<br />

isolated from infected tissues of spring cereals and they came from the collections<br />

of the Department of Plant Pathology and Mycology of the University of Life<br />

Sciences in Wroclaw. The experiment was conducted at 22 ° C, in six replications<br />

and three doses of biostimulator: 0,4 l·ha -1 , 0,6 l·ha -1 (dose recommended for<br />

Asahi SL), 1,0 l·ha -1 and control 0,0 l·ha -1 . Petri dishes were placed on the<br />

medium containing 7-days-grown mycelium with a diameter of 4 mm.<br />

Observations and measurements of the diameter of the mycelium were<br />

performed after 7 and 14 days of incubation. In the studies were used culture<br />

medium, provided by Biocorp PDA (Potato Dextrose Agar), malt (Malt Extract),<br />

Czapek-Dox Agar (1.2% agar) and another common culture medium, such as<br />

culture grain by Roshida i Schlössera. The obtained results were subject to<br />

analysis of variance (ANOVA) using standard statistical methods. Means were<br />

compared using Fisher’s least significant difference (LSD) test at α ≤ 0.01.<br />

The results of the experiment show that the fungi used in the study were<br />

varied in their growth rate, and respond differently to different concentrations<br />

of the biostimulator in the different medium. The best inhibition growth of fungi<br />

was observed for the medium PDA, and the weakest for the medium grain in<br />

proportion to the concentration of the preparation.<br />

335


336<br />

BADANIA MIKROSKOPOWE PRZY UŻYCIU<br />

SKANINGOWEGO MIKROSKOPU ELEKTRONOWEGO<br />

ZIARNIAKÓW DAWNYCH PSZENIC PORAŻONYCH<br />

PRZEZ FUSARIUM CULMORUM<br />

Danuta Packa 1 , Tomasz Kulik 2 i Michał Hościk 1<br />

1 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Hodowli Roślin i Nasiennictwa,<br />

Pl. Łódzki 3, 10-724 Olsztyn<br />

2 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Diagnostyki i Patofizjologii<br />

Roślin, Pl. Łódzki 5, 10-724 Olsztyn<br />

packa@uwm.edu.pl<br />

Infekcja i kolonizacja roślin żywicielskich przez patogeny nekrotroficzne<br />

z rodzaju Fusarium jest możliwa dzięki zdolności wytwarzania zewnątrzkomórkowych<br />

enzymów hydrolitycznych i związków o działaniu fitotoksycznym.<br />

Fusarium culmorum – jeden ze sprawców fuzariozy kłosów w Polsce północno-<br />

-wschodniej – wykazuje zdolność wytwarzania w porażonym ziarnie zbóż<br />

celulaz, ksylanaz, pektynaz – degradujących składniki ściany komórkowej<br />

oraz proteaz i amylaz rozkładających związki zapasowe zgromadzone w bielmie.<br />

Efektem działalności enzymatycznej są uszkodzenia bielma, które można<br />

obserwować przy użyciu skaningowego mikroskopu elektronowego. Materiał<br />

roślinny stanowiły trzy gatunki jarych pszenic oplewionych: Triticum monococcum<br />

L. (2n=14), Triticum dicoccon Schrank (2n=28), Triticum spelta L.<br />

(2n=42) oraz dwa gatunki jarych pszenic wymłacalnych Triticum polonicum<br />

L. (2n=28) i Triticum turanicum (2n=28) na tle pszenicy zwyczajnej Triticum<br />

aestivum (2n=42) reprezentowanej przez dwie odmiany: Parabola (grupa A)<br />

i Frontana (wzorzec odporności na fuzariozę kłosa). Pszenice oplewione T. monococcum<br />

(einkorn), T. dicoccon (emmer), T. spelta (spelt, dinkel) oraz wymłacalna<br />

T. polonicum (pszenica polska) reprezentowane były przez trzy akcesje<br />

każda. T. turanicum reprezentowała jedna odmiana Kamut ® (pszenica faraonów).<br />

Ziarniaki do badań pochodziły z doświadczenia polowego zlokalizowanego<br />

w Stacji Doświadczalnej UWM w Bałcynach koło Ostródy (53 0 36’N,<br />

19 0 51’E), w którym zastosowano inokulację łanową kwitnących kłosów pszenicy<br />

(65 BBCH) wodną zawiesiną zarodników Fusarium culmorum. Kontrolę<br />

stanowiły <strong>rośliny</strong> nie inokulowane. Przedstawione wyniki stanowią fragment<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 336-338<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


adań realizowanych w Katedrze Hodowli Roślin i Nasiennictwa UWM pod<br />

kierunkiem prof. dr hab. Mariana Wiwarta w ramach programu „Badanie<br />

zmienności materiałów kolekcyjnych T. spelta, T. dicocccum T. monococcum<br />

w zakresie jakości ziarna i odporności na patogeny z rodzaju Fusarium sp.<br />

oraz przydatności do hodowli odmian przystosowanych do zrównoważonego<br />

systemu uprawy”.<br />

Dawne formy pszenicy stanowią cenny materiał hodowlany ze względu na<br />

bardzo dobre cechy jakościowe jak i odpornościowe. W warunkach naturalnej<br />

infekcji są w mniejszym stopniu porażane przez patogeny rodzaju Fusarium<br />

i kumulują w ziarnie mniejsze ilości toksyn niż pszenica zwyczajna. W warunkach<br />

sztucznej inokulacji obserwuje się na kłoskach i ziarniakach objawy<br />

porażenia charakterystyczne dla patogenów rodzaju Fusarium. Obecność Fusarium<br />

culmorum w porażonych ziarniakach została potwierdzona za pomocą<br />

specyficznych markerów molekularnych. Ziarniaki porażone przez Fusarium<br />

culmorum kwalifikowane jako FDK (Fusarium damaged kernels) były mniejsze,<br />

drobniejsze, pomarszczone, jaśniejszej barwy niż ziarniaki <strong>zdrowe</strong>, zwykle<br />

z uszkodzoną okrywą owocowo-nasienną i białą lub biało-różową grzybnią<br />

na powierzchni. Miejscami najczęstszej lokalizacji grzybni F. culmorum<br />

w ziarniakach badanych pszenic były: bruzda wraz z jej zakończeniem, okrywa<br />

owocowo-nasienna, obszar pomiędzy okrywą nasienną a warstwą aleuronową<br />

oraz warstwa aleuronowa. Poszczególne ziarniaki w obrębie frakcji FDK<br />

wykazywały zróżnicowany stopień inwazji grzybowej, od zasiedlenia okrywy<br />

owocowo-nasiennej do zasiedlenia komórek bielma. W komórkach bielma obserwowano<br />

również charakterystyczne zmiany strukturalne jak: luźny układ<br />

ziaren skrobiowych, częściowy lub całkowity brak białkowej matrix spajającej<br />

ziarna skrobi, zanik małych ziaren skrobi oraz uszkodzenia dużych ziaren<br />

skrobi. Najmniejsze uszkodzenia obserwowano w ziarniakach pszenicy płaskurki<br />

(emmer) i orkiszu (spelt, dinkel).<br />

Summary<br />

SCANNING ELECTRON MICROSCOPY OF FUSARIUM CULMORUM-<br />

INFECTED KERNELS OF ANCIENT WHEAT SPECIES<br />

The infection and colonization of host plants by necrotrophic pathogens of<br />

the genus Fusarium involves the production of extracellular hydrolytic enzymes<br />

and phytotoxic compounds. Fusarium culmorum, one of the causal agents of<br />

Fusarium head blight in north-eastern Poland, is capable of producing cell wall<br />

degrading enzymes - cellulases, xylanases and pectinases, as well as proteases<br />

and amylases that break down storage compounds in the endosperm of infected<br />

wheat kernels. The consequent damage to the endosperm may be observed<br />

using a scanning electron microscope. The experimental plant materials<br />

337


338<br />

comprised three spring hulled wheat species: Triticum monococcum L. (2n=14),<br />

Triticum dicoccon Schrank (2n=28) and Triticum spelta L. (2n=42), and two<br />

spring threshable wheat species: Triticum polonicum L. (2n=28) and Triticum<br />

turanicum (2n=28), compared with the common wheat Triticum aestivum<br />

(2n=42) represented by two varieties: Parabola (A, quality wheat) and Frontana<br />

(source of Fusarium head blight resistance). The hulled wheats T. monococcum<br />

(einkorn), T. dicoccon (emmer), T. spelta (spelt) and the threshable wheat<br />

T. polonicum (Polish wheat species) were represented by three accessions<br />

each. T. turanicum was represented by one variety, Kamut ® (“King Tut’s<br />

wheat”). Kernel samples were collected from a field experiment conducted at<br />

the Experimental Station of the University of Warmia and Mazury in Bałcyny<br />

near Ostróda (53 0 36’N, 19 0 51’E). Pure stands of wheat were inoculated at the<br />

full flowering stage (65 BBCH) with an aqueous spore suspension of Fusarium<br />

culmorum. Non-inoculated plants served as control. The present results were<br />

obtained as part of a research project carried out at the Department of Plant<br />

Breeding and Seed Production, University of Warmia and Mazury in Olsztyn,<br />

led by Professor Marian Wiwart, within the frameworks of the program:<br />

“A Study of Variation in Grain Quality and Resistance to Fusarium sp. Pathogens<br />

in T. spelta, T. dicocccum and T. monococcum Collections and the Breeding<br />

Suitability of Wheat Varieties Adapted to the Sustainable Farming System”.<br />

The ancient forms of wheat provide valuable breeding material due to their<br />

high quality and resistance traits. Under natural infection conditions, they<br />

are infected by Fusarium pathogens to a lower degree, and smaller amounts of<br />

toxins accumulate in their grain than Triticum aestivum. Following artificial<br />

inoculation, symptoms typical of Fusarium infection can be observed on<br />

spikelets and kernels. The presence of Fusarium culmorum in infected kernels<br />

was confirmed with the use of species-specific molecular markers. Fusarium<br />

culmorum-infected kernels classified as FDKs (Fusarium damaged kernels)<br />

were smaller, shrunken, wrinkled and lighter in color than healthy kernels.<br />

The seed coats of the former were usually damaged, and white or pinkish-white<br />

mycelium formed on their surface. The Fusarium culmorum hyphae was most<br />

frequently found at the end and along the crease, in the seed coat, between the<br />

seed coat and the aleurone layer an in the aleurone layer. FDKs showed different<br />

fungal infection levels, from the colonization of the seed coat to the invasion of<br />

endosperm cells. Characteristic structural changes were noted in endosperm<br />

cells, including loosely arranged starch granules, a partial or even complete<br />

absence of the protein matrix enveloping starch granules, the disappearance of<br />

small starch granules and the presence of damaged large starch granules. The<br />

lowest degree of damage was observed in emmer (Triticum dicoccon) and spelt<br />

(Triticum spelta) kernels.


WPŁYW GATUNKU GLEBY NA PRZEŻYWALNOŚĆ<br />

BAKTERII CLAVIBACTER MICHIGANENSIS SUBSP.<br />

SEPEDONICUS<br />

Teresa Pastuszewska i Grzegorz Gryń<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Oddział Bydgoszcz, Al. Powstańców Wielkopolskich 10, 85-090 Bydgoszcz<br />

t.pastuszewska@ihar.bydgoszcz.pl<br />

Gatunek bakterii Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms) jest<br />

organizmem kwarantannowym i sprawcą groźnej choroby ziemniaków – bakteriozy<br />

pierścieniowej.<br />

Głównym źródłem rozprzestrzeniania patogenu są porażone sadzeniaki.<br />

Podczas obrotu bakteria bardzo łatwo może przenosić się z chorych bulw na<br />

<strong>zdrowe</strong> przez uszkodzenia tkanki. Bardzo ważnym ogniwem w szerzeniu choroby<br />

są skażone powierzchnie materiałów do pakowania, maszyn do sadzenia,<br />

zbioru i uprawy, sortowania. Rola środowiska glebowego w epidemiologii bakteriozy<br />

pierścieniowej nie jest jednoznacznie określona, ale zwykle uważa się<br />

ją za niską.<br />

Celem badań było określenie czasu przeżycia Clavibacter michiganensis<br />

subsp. sepedonicus w glebie i ustalenie ewentualnego ryzyka rozprzestrzeniania<br />

się bakterii za pośrednictwem środowiska glebowego. Materiałem badawczym<br />

były próbki gleby o różnym składzie mechanicznym: piasek słabogliniasty,<br />

piasek gliniasty lekki, glina lekka. Próbki zostały pobrane w IHAR-PIB<br />

Oddział w Jadwisinie z mikropoletek z różnymi profilami glebowymi. Naważki<br />

gleb zainfekowano zawiesiną szczepu Cms odpornego na antybiotyk NCPPB<br />

3898 rifampicin resistant, umieszczono w odpowiednich pojemnikach i przetrzymywano<br />

w różnych temperaturach: -5 o C, +4 o C, +21 o C. Dodatkowo badano<br />

wpływ wilgotności gleb na przeżywalność Cms. W odstępach dwóch tygodni<br />

pobierano próby i wykonywano posiewy na podłoże NCP 88 z dodatkiem ryfampicyny.<br />

Płytki inkubowano w temperaturze 21ºC dokonując obserwacji i liczenia<br />

kolonii w 3, 5, 7, 10 i 14 dniu od momentu wykonania posiewu.<br />

Do identyfikacji uzyskanych czystych kultur bakterii wykorzystano metodę<br />

immunofluorescencyjną (test IF).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 339-340<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

339


340<br />

Summary<br />

INFLUENCE OF COMPOSITION OF MINERALS SOIL ON<br />

CLAVIBACTER MICHIGANENSIS SUBSP. SEPEDONICUS<br />

SURVIVAL<br />

The bacterium Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms) is a<br />

quarantine organism and casual agent of bacterial ring rot of potato. Infected<br />

seeds potatoes are the main source of Cms disseminations. Pathogen can<br />

be easily transmit by direct contact between infected and healthy tubers,<br />

via damaged tissues. Very important ways are: contamination surfaces of<br />

materials for packing, planting, harvesting, conveyors and graders machinery.<br />

An soil environmental in bacterial ring rot epidemiology is not completely<br />

known although seems low risk.<br />

The survival period of Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus in the<br />

soil environmental and the risk of dissemination was assessed. Three different<br />

soils: weekly loamy sand, light sandy loam, light clay were sampled from<br />

microplots with different soils profil in IHAR-PIB, Research Division Jadwisin.<br />

Samples of soils were inoculated with pure culture of antibiotic resistant Cms<br />

mutant and stored at -5 o C, +4 o C and +21 o C. Strain NCPPB 3898rif, a rifampicin<br />

resistant mutant was used. Influence of humidity on bacterium survival in<br />

different soils was tested additionally. For isolation of the bacteria once in<br />

every two weeks samples were plated onto the semi selective NCP-88 medium<br />

with rifampicin. Incubated plates in +21 o C were observed and colony counted<br />

after 3, 5, 7, 10 and 14 days. Immunofluorescence test (IF) was used for pure<br />

bacterium culture identification.


CHARAKTERYSTYKA MOLEKULARNA POLSKICH<br />

I SZKOCKICH IZOLATÓW PLASMODIOPHORA<br />

BRASSICAE (KIŁA KAPUSTY)<br />

Agnieszka Perek, Ewa Jajor, Katarzyna Pieczul,<br />

Ilona Świerczyńska i Marek Korbas<br />

Instytut Ochrony Roślin- Państwowy Instytut Badawczy, Zakład Mikologii,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

agnieszka.perek@wp.pl<br />

Kiła kapusty, powodowana przez pierwotniaka Plasmodiophora brassicae<br />

jest groźną chorobą roślin kapustowatych w strefie klimatu umiarkowanego.<br />

W ostatnich latach obserwowany jest wzrost częstości jej występowania na<br />

plantacjach rzepaku ozimego w Polsce. Długi okres przeżywalności zarodników<br />

patogena w glebie oraz możliwość infekowania chwastów z rodziny kapustowatych<br />

- stanowiących rezerwuar inokulum patogena, utrudnia skuteczne<br />

ograniczanie choroby. Badania wykazują że izolaty P. brassicae charakteryzują<br />

się zróżnicowaną patogenicznością oraz dużą zmiennością genetyczną.<br />

Celem pracy była ocena zróżnicowania genetycznego izolatów P. brassicae<br />

pochodzących z Polski (60 izolatów zbieranych na terenie województw: zachodnio-pomorskiego,<br />

warmińsko-mazurskiego, dolnośląskiego, pomorskiego,<br />

kujawsko-pomorskiego, podkarpackiego, lubuskiego, opolskiego i wielkopolskiego)<br />

oraz pochodzących z południa Szkocji (11 izolatów). Izolację DNA wykonano<br />

z pojedynczych narośli korzeniowych zestawem „DNeasy Plant Mini<br />

Kit”. Sekwencjonowaniu poddano fragment DNA o wielkości około 900 pz, kodujący<br />

konserwatywne podjednostki rybosomalne oraz zmienne regiony ITS.<br />

Analiza wyników przedstawiona w formie drzewa filogenetycznego pozwoliła<br />

na wyodrębnienie grup izolatów charakteryzujących się wyższym stopniem<br />

podobieństwa. Podział na poszczególne grupy genetyczne nie był związany<br />

z miejscem pochodzenia izolatów oraz rokiem ich izolacji.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 341-342<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

341


342<br />

Summary<br />

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF POLISH AND SCOTTISH<br />

ISOLATES OF PLASMODIOPHORA BRASSICAE (CLUBROOT)<br />

Clubroot, caused by the protozoa Plasmodiophora brassicae, is a serious<br />

disease of the Brassicaceae family plants of the temperate climate zone.<br />

For the last few years an increase in its prevalence on winter rape fields in<br />

Poland has been observed. A long time of survival of the pathogen spores in<br />

soil and the possibility of infection of weeds from the Brassicaceae family – a<br />

reservoir of pathogen inoculum, hinder effective limitation of the disease. It<br />

has been shown that P. brassicae isolates exhibit various pathogenicity and<br />

considerable genetic variability. The aim of the present study was to assess<br />

the genetic diversity of P. brassicae isolates from Poland (60 isolates collected<br />

in the provinces: Zachodnio-pomorskie, Warmińsko-mazurskie, Dolnośląskie,<br />

Pomorskie, Kujawsko-pomorskie, Podkarpackie, Lubuskie, Opolskie and<br />

Wielkopolskie province) and from southern Scotland (11 isolates). DNA isolation<br />

was performed from single root galls with the use of the DNeasy Plant Mini<br />

Kit. Then a 900-bp long DNA fragment was sequenced, coding conservative<br />

ribosomal subunits and variable ITS regions. The analysis of results presented<br />

as a dendrogram enabled to distinguish groups of isolates characterized by<br />

a greater degree of similarity. The division into separate genetic groups was<br />

not related to the place of origin of the isolates and year of their isolation.


IDENTYFIKACJA CHEMOTYPÓW DON I NIV U IZOLATÓW<br />

FUSARIUM CULMORUM I FUSARIUM GRAMINEARUM<br />

Katarzyna Pieczul, Joanna Horoszkiewicz-Janka<br />

i Jakub Danielewicz<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Zakład Mikologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

J.Danielewicz@iorpib.poznan.pl<br />

Do najważniejszych gospodarczo patogenów zbóż zalicza się grzyby rodzaju<br />

Fusarium m.in. F. culmorum, F. graminearum, F. avenaceum i F. poae. Patogeny<br />

te posiadają zdolność wytwarzania toksycznych metabolitów – mikotoksyn,<br />

które stanowią zagrożenie dla <strong>zdrowi</strong>a ludzi i zwierząt. Jedną z grup<br />

mikotoksyn syntetyzowanych przez grzyby rodzaju Fusarium są trichoteceny.<br />

Wśród nich ważną grupę stanowią trichoteceny grupy B, do których zalicza<br />

się deoksyniwalenol (DON) i niwalenol (NIV). Celem badań było oznaczenie<br />

rodzaju chemotypu u 100 izolatów F. culmorum i F. graminearum pochodzących<br />

z terenu Polski, porażających pszenicę oraz pszenżyto. Izolację DNA<br />

przeprowadzono z użyciem zestawu „DNeasy Plant Mini Kit” ze świeżej grzybni,<br />

rosnącej na podłożu PDA. Reakcję PCR przeprowadzono z zastosowaniem<br />

specyficznych starterów. Produkty PCR obserwowano w żelu agarozowym<br />

z bromkiem etydyny w świetle UV. Na podstawie uzyskanych wyników u badanych<br />

izolatów oznaczono chemotyp DON lub NIV oraz formę acetylacji DON<br />

(3Ac-DON lub 15Ac-DON). Wyniki wskazują na znaczną przewagę izolatów<br />

syntetyzujących DON na terenie Polski<br />

Summary<br />

IDENTIFICATION OF DON AND NIV PRODUCING CHEMOTYPES<br />

OF FUSARIUM CULMORUM AND FUSARIUM GRAMINEARUM<br />

Many Fusarium species, including F. culmorum, F. graminearum,<br />

F. avenaceum and F. poae are the most important pathogens of cereals. The<br />

pathogens can produce phytotoxic metabolites – mycotoxins, which are<br />

harmful for people and animals. The most common fusarium mycotoxins are<br />

deoxynivalenol (DON) and nivalenol (NIV) from a trichothecene B group. The<br />

aim of the study was to establish the chemotypes of 100 isolates of F. culmorum<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 343-344<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

343


344<br />

and F. graminearum cereals collected from whole territory of Poland. DNA<br />

isolations were performed with the use of the DNeasy Plant Mini Kit from fresh<br />

mycelium growing on PDA medium. Primers specific for the chemotypes were<br />

used for PCR. The PCR products were electrophoresed in 2% agarose gel and<br />

visualised with ethidium bromide, using UV light. Based on the PCR results<br />

DON (3Ac-DON or 15Ac-DON) and NIV chemotypes were identified. The most<br />

of the tested isolates from Poland were classified as DON producing strains.


ANALIZA ZMIENNOŚCI GENETYCZNEJ GENU CYP51<br />

U IZOLATÓW CERCOSPORA BETICOLA SPRAWCY<br />

CHWOŚCIKA BURAKA<br />

Katarzyna Pieczul 1 i Jacek Piszczek 2<br />

1 Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Zakład Mikologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

2 Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Terenowa Stacja<br />

Doświadczalna, ul. Pigwowa 16, 87-100 Toruń<br />

j.piszczek@iorpib.poznan.pl<br />

Grzyb Cercospora beticola jest sprawcą chwościka buraka – najgroźniejszej<br />

choroby liści buraka cukrowego w Polsce. Porażenie roślin wpływa na<br />

obniżenie jakości i wielkości plonu korzeni. Patogen charakteryzuje się bardzo<br />

dużym zakresem zmienności morfologicznej, fizjologicznej i genetycznej.<br />

Celem badań było określenie zróżnicowania genetycznego izolatów<br />

C. beticola występujących na terenie Polski w oparciu o analizę sekwencji genu<br />

CYP51, kodującego C-14 alfa-dimetylazę sterolu. C-14 alfa-dimetylaza sterolu<br />

jest jednym z ważniejszych enzymów biorących udział w szlaku syntezy steroli<br />

u grzybów, a pojawienie się w tym genie mutacji jest związane z nabywaniem<br />

przez chwościka odporności na fungicydy z grupy triazoli. Do badań wybrano<br />

40 izolatów C. beticola należących do grup kojarzeniowych MAT 1-1 i MAT<br />

1-2, zbieranych w różnych lokalizacjach w latach 2007-2010. Izolaty charakteryzowały<br />

się także różną wrażliwością na związki chemiczne z grupy triazoli.<br />

Izolację DNA przeprowadzono przy użyciu zestawu „DNeasy Plant Mini Kit”.<br />

Do analizy sekwencyjnej wybrano fragment DNA o wielkości około 1200 pz.<br />

Analizę wyników sekwencjonowania przeprowadzono przy użyciu programu<br />

MEGA. Analiza uzyskanych wyników umożliwiła ocenę zróżnicowania genetycznego<br />

oraz klasyfikację badanych izolatów.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 345-346<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

345


346<br />

Summary<br />

ANALYSIS OF GENETIC DIVERSITY OF CYP51 GENE<br />

OF CERCOSPORA BETICOLA – THE AGENT OF LEAF SPOT<br />

OF SUGAR BEET<br />

Cercospora leaf spot caused by Cercospora beticola is the most serious foliar<br />

disease of sugar beet in Poland. The plants infestation have negative impact on<br />

the yield and quality of crops. The pathogen has a wide range of morphological,<br />

physiological and genetic diversity. The aim of the study was to asses the<br />

genetic diversity of CYP51 gene, coding C-14 sterol demethylase of C. beticola<br />

isolates. The C-14 sterol demethylase is a one of the components of fungal sterol<br />

biosynthesis pathway. Mutations observed in the gene are usually connected<br />

with C. beticola triazole resistance. Forty isolates of mating types MAT 1-1 and<br />

MAT 1-2, collected at different locations during years 2007-2010 were chosen<br />

for the analysis. The isolates had variable triazole resistance level. The DNA<br />

isolation was performed by DNeasy Plant Mini Kit. For the sequence analysis<br />

1200 bp fragments of DNA were amplified by PCR, the analysis was performed<br />

by MEGA software. The results of the analysis enabled to asses the genetic<br />

diversity and classification of tested isolates.


WPŁYW UPROSZCZEŃ UPRAWOWYCH<br />

NA ZASIEDLENIE ZIARNA ŻYTA PRZEZ FUSARIUM SPP.<br />

Elżbieta Pląskowska 1 i Hanna Gołębiowska 2<br />

1 Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Katedra Ochrony Roślin, Zakład<br />

Fitopatologii i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

2 Instytut Uprawy Nawożenia i Gleboznawstwa – PIB w Puławach, Zakład<br />

Herbologii i Technik Uprawy Roli we Wrocławiu, ul. Orzechowa 60,<br />

50-540 Wrocław<br />

elzbieta.plaskowska@up.wroc.pl<br />

Badania wpływu sposobu uprawy roli na stopień zasiedlenia ziarna żyta<br />

ozimego przez Fusarium spp. przeprowadzono w latach 2008-2010 w Jelczu-<br />

-Laskowicach. Roślina ta uprawiana była w wieloletniej monokulturze. Doświadczenie<br />

zostało założone metodą pasów prostopadłych, w 4 powtórzeniach.<br />

Przedmiotem badań było ziarno żyta, odmian Dańkowskie Złote i Picasso.<br />

Żyto uprawiane było tradycyjnie i w sposób uproszczony. Analizę zdrowotności<br />

ziarna przeprowadzono zgodnie z metodą de Tempe [1970]. Z każdego<br />

wariantu doświadczenia analizowano po 200 ziaren pobranych losowo z prób<br />

zbiorczych, z których 100 wykładano bezpośrednio na szalki Petriego z 2%<br />

pożywką maltozową. Pozostałe 100 ziaren przed wyłożeniem na tą samą pożywkę<br />

odkażano przez 10 minut w 1% roztworem podchlorynu sodu. Wszystkie<br />

wyosobnione z ziarna grzyby identyfikowano do gatunku.<br />

Rodzaj zastosowanej uprawy roli miał duży wpływ na liczebność wyizolowanych<br />

grzybów. W mniejszym stopniu zróżnicował ich skład gatunkowy. Wśród<br />

wyizolowanych z ziarna grzybów, niezależnie od odmiany i sposobu uprawy<br />

roli dominował Alternaria alternata. Grzyby z rodzaju Fusarium wyosabniane<br />

były dość licznie, zarówno z powierzchni, jak i jego wnętrza. Liczebność tych<br />

grzybów w poszczególnych latach badań kształtowała się bardzo różnie. Najwięcej<br />

izolatów Fusarium spp. uzyskano w 2009 r. z ziarna nieodkażonego,<br />

a najmniej w 2008 r.<br />

Najczęściej występującym gatunkiem z rodzaju Fusarium był F. avenaceum.<br />

Dominował on zarówno w ziarnie nieodkażonym, jak i odkażonm.<br />

Częściej izolowano go z powierzchni ziarna , niż jego wewnętrznych tkanek.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 347-348<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

347


348<br />

Bardziej podatna na infekcję przez tego grzyba była odmiana Picasso, niż Dańkowskie<br />

Złote. Drugim gatunkiem dość licznie wyosobnionym z ziarna żyta był<br />

F. culmorum.. Poza wyżej wymienionymi gatunkami, mniej licznie wyizolowywano<br />

F. equseti, F. oxysporum, F. sporotrichoides.<br />

Summary<br />

EFFECT OF SIMPLIFIED CULTIVATION ON THE COLONIZATION<br />

OF RYE GRAIN BY FUSARIUM SPP.<br />

Research was conducted in Jelcz-Laskowice in 2008-2010. The aim of study<br />

was to determine influence of cultivation on the degree of colonization of winter<br />

rye grain by Fusarium spp. Tested plants were cultivated in many years of<br />

monoculture. Experience was established in perpendicular lanes method,<br />

with 4 replications. Examined cereal was rye, variety Dańkowskie Złote and<br />

Picasso. Rye was cultivated traditionally in reduced tillage. Analysis of the<br />

health status of grain was carried out according to the method de Tempe [1970].<br />

From each variant of experiments 200 grains were taken in random for<br />

further analyses, 100 were directly placed on Petri dishes with 2% malt<br />

medium. The remaining 100 grains were disinfected for 10 minutes in 1%<br />

sodium hypochlorite solution before placing on the same medium . All fungi<br />

isolated from seeds were identified to species.<br />

Method of cultivation had a major impact on the number of isolated fungi.<br />

To a lesser extent, diversified their species composition. Among isolated fungi,<br />

regardless to variety and tillage system Alternaria alternata was the most<br />

common. Fusarium species fungi were often isolated both from the surface<br />

and inner tissues but on different level during three years of the experiment.<br />

Fusarium fungi were most frequently isolated in 2009 from non-disinfected<br />

grain and the least in 2008.<br />

F. avenaceum was most common isolated species of Fusarium spp. and<br />

dominated both in disinfected and non-disinfected grain. Surface of grains was<br />

more colonized by Fusarium than inner tissues. Picasso variety characterized<br />

higher level of colonization by F. avenaceum than Dankowskie Złote. Fusarium<br />

culmorum was second most common isolated fungi from this genera in rye<br />

grains. Less common isolated species of Fusarium spp. were F. oxysporum and<br />

F. sportrichoides


ZANIECZYSZCZENIE MIKOTOKSYNAMI ZIARNA ŻYTA<br />

I PSZENŻYTA OZIMEGO<br />

Eliza Potocka, Ewa Solarska i Adam Kuzdraliński<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Biotechnologii, Żywienia Człowieka<br />

i Towaroznawstwa Żywności, ul. Skromna 8, 20-704 Lublin<br />

eliza.potocka@up.lublin.pl, ewa.solarska@up.lublin.pl<br />

Ocena jakości żyta i i pszenżyta w aspekcie zawartości mikotoksyn jest bardzo<br />

ważna ze względu na <strong>zdrowi</strong>e konsumentów. Mikotoksyny produkowane<br />

przez grzyby są jednymi z najbardziej niebezpiecznych związków zanieczyszczających<br />

zboża. Najczęściej występującymi mikotoksynami w zbożach są trichoteceny<br />

produkowane przez Fusarium spp. oraz aflatoksyny i ochratoksyny<br />

produkowane przez grzyby z rodzajów Aspergillus i Penicillium.<br />

Celem badań było porównanie odmian żyta i pszenżyta pod względem zanieczyszczenia<br />

przez mikotoksyny z wykorzystaniem metody immunoenzymatycznej<br />

ELISA.<br />

Materiał biologiczny do badań stanowiły próbki zbóż uprawianych w konwencjonalnym<br />

systemie produkcji pochodzące ze Stacji Oceny Odmian w Ciciborze<br />

ze zbiorów w 2008 roku. Badaniami objęto 23 odmiany żyta ozimego<br />

oraz 13 odmian pszenżyta ozimego.<br />

Zanieczyszczenie odmian żyta i pszenżyta przez mikotoksyny różniło się.<br />

Odmiany pszenżyta ozimego były bardziej zanieczyszczone przez toksynę T-2,<br />

a odmiany żyta ozimego przez deoksyniwalenol. W kilku odmianach żyta zawartość<br />

deoksyniwalenolu znacznie przekroczyła maksymalne dopuszczalne<br />

zawartości ustalone dla tego związku w ziarnie zbóż przez UE.<br />

W ziarnie badanych odmian nie stwierdzono obecności aflatoksyn i ochratoksyny<br />

A.<br />

Stwierdzono duże zróżnicowanie odmian pod względem zdolności do akumulacji<br />

mikotoksyn, co stwarza możliwość doboru odmian wolnych od mikotoksyn<br />

lub o najmniejszej zdolności do ich gromadzenia w celu zalecenia ich<br />

uprawy w praktyce.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 349-350<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

349


350<br />

Summary<br />

THE COMPARISON OF WINTER RYE AND WINTER TRITICALE<br />

MYCOTOXIN CONTAMINATION<br />

Quality estimation of winter rye and winter triticale yield in aspect of<br />

mycotoxins content is very important regarding consumer health. Mycotoxins<br />

produced by fungi are the one of the most dangerous compounds which<br />

contaminate cereal products. Most frequent mycotoxins occurring in cereals are<br />

trichothecenes produced by Fusarium spp. but also aflatoxins and ochratoxins<br />

produced by fungi from genera Penicilium and Aspergillus.<br />

The aim of this study was determination of mycotoxins content in different<br />

cultivars of winter rye and winter triticale by use of the Enzyme-Linked<br />

ImmunoSorbent Assay (ELISA) method.<br />

The mycotoxin contamination of winter rye and triticale cultivars was<br />

different. Triticale cultivars were more contaminated by toxin T-2, cultivars of<br />

winter rye by deoxynivalenol. In several cultivars of winter rye deoxynivalenol<br />

content far exceeded the maximum permissible levels established for this<br />

compound in cereal grains by the EU. Aflatoxins and ochratoxins were not<br />

found in grain of tested cultivars.<br />

Amongst tested cultivars of both cereal species were mycotoxins free, and<br />

only such cultivars should be recommended to practice because they permit on<br />

significant reduction of mycotoxins content in cereals.


REAKCJE ODMIAN OZIMEJ PSZENICY I OZIMEGO<br />

PSZENŻYTA W STADIUM SIEWKI I PO WYKŁOSZENIU<br />

W POLU NA STAGONOSPORA NODORUM<br />

Wioletta Poznań, Małgorzata Ziemichód i Edward Arseniuk<br />

Zakład Fitopatologii, Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin w Radzikowie<br />

– Państwowy Instytut Badawczy, Radzików, 05-870 Błonie<br />

w.poznan@ihar.edu.pl, m.ziemichod@ihar.edu.pl<br />

Stagonospora nodorum jest grzybem wywołującym septoriozę plew pszenicy.<br />

Porażenie zbóż przez nekrotroficzne grzyby z rodzajów Stagonospora nodorum<br />

i Stagonospora spp. notowane jest w Polsce corocznie z różnym nasileniem<br />

modyfikowanym przez warunki pogodowe.<br />

Szerokie rozprzestrzenienie oraz epidemiologiczny potencjał Stagonospora<br />

nodorum kwalifikują septoriozę jako jedną z najważniejszych chorób pszenicy<br />

i pszenżyta w skali światowej. Wczesne porażenie powoduje znaczne straty<br />

w plonie wynikające głównie z obniżenia masy tysiąca ziarniaków.<br />

Celem przeprowadzonego doświadczenia było porównanie reakcji odmian<br />

ozimej pszenicy i ozimego pszenżyta w stadium siewki i po wykłoszeniu w polu<br />

na Stagonospora nodorum. Rośliny poddano fenotypowej ocenie, biorąc pod<br />

uwagę stopień porażenia liści.<br />

Pierwszym etapem doświadczenia było zbadanie w warunkach kontrolowanego<br />

środowiska stopnia porażenia siewek przez Stagonospora nodorum<br />

w stadium drugiego liścia 13 odmian pszenżyta ozimego i 29 odmian pszenicy<br />

ozimej. Siewki inokulowano wodną zawiesiną mieszaniny zarodników piknidialnych<br />

15 izolatów S. nodorum o koncentracji 12 mln/ml. Po dwóch tygodniach<br />

od inokulacji wykonano ocenę stopnia porażenia siewek przez S. nodorum<br />

w skali 9 stopniowej (1º – odporny, 9º – podatny). Zakres reakcji siewek<br />

mieścił się w przedziale, odpowiednio dla odmian pszenicy od 4.0 do 5.9 zaś dla<br />

pszenżyta od 4.0 do 6,6 według wyżej opisanej 9 o skali. Wśród odmian pszenżyta<br />

w stadium siewki najpodatniejszym okazało się Algoso, a wśród odmian<br />

pszenicy Mulan i Smaragd.<br />

Drugim etapem doświadczenia było zbadanie w warunkach polowych stopnia<br />

porażenia liści przez S. nodorum dojrzałych już odmian pszenicy ozimej<br />

i odmian pszenżyta ozimego (tych samych, które badano w pierwszym etapie<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 351-354<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

351


352<br />

doświadczenia). W trakcie sezonu wegetacyjnego w 2010 roku wykonano ocenę<br />

stopnia porażenia liści i kłosów tych odmian. Doświadczenie było założone<br />

w dwóch powtórzeniach w układzie losowanych bloków. Rośliny na poletkach<br />

inokulowano trzykrotnie wodną zawiesiną o koncentracji zarodników S. nodorum<br />

o koncentracji 6 mln/ml. Pierwsza inokulacja przeprowadzona była w fazie<br />

wczesnej butonizacji (GS 45 wg dziesiętnej skali Zadoksa). Drugą inokulację<br />

wykonano w fazie kłoszenia, natomiast trzecią w początkowej fazie kwitnienia<br />

(GS 59). Poletka kontrolne chroniono Tiltem 250 EC (0,1% s.a. – propikonazol).<br />

Parametrem ocenianym w doświadczeniu była intensywność porażenia liści<br />

i kłosów wyrażona w skali od 1 do 9 (gdzie 1 oznacza <strong>rośliny</strong> podatne, a 9 odporne).<br />

Dla potrzeb niniejszej pracy porównywane jest tylko porażenie liści siewek<br />

i roślin w polu. Zakres reakcji liści dojrzałych roślin obserwowanych w warunkach<br />

polowych mieścił się w przedziale, odpowiednio, dla odmian pszenżyta od<br />

3.9 (Algoso) do 5,7 (Borwo) i pszenicy od 4.6 (Bagou) do 6.3 (Jengi) w 9º skali.<br />

Stwierdzono istotne różnice między testowanymi odmianami w kontrolowanych<br />

warunkach środowiska u odmian obu gatunków ozimych zbóż pod<br />

względem odporności na S. nodorum. Wyliczone dla porównywanych faz rozwojowych<br />

pszenżyta wynosiły, odpowiednio, współczynnik korelacji Spearmana<br />

r Spearman = 0.214 i współczynnik determinacji R 2 = 0.0456. Oznacza to, że<br />

odporność liści roślin badanej grupy odmian pszenżyta była determinowana<br />

zaledwie w 4.6% przez odporność siewki w fazie drugiego liścia. W rankingu<br />

badanych odmian pod względem odporności liści na S. nodorum jedynie odmiana<br />

Algoso zajmowała identyczne 13 miejsce i charakteryzowała się najwyższą<br />

podatnością w każdej z badanych faz rozwojowych.<br />

Z kolei, współczynniki wyliczone dla porównywanych faz rozwojowych pszenicy<br />

wynosiły, odpowiednio, współczynnik korelacji Spearmana r Spearman = 0.417<br />

i współczynnik determinacji R 2 = 0.174. Oznacza to, że odporność liści roślin<br />

badanej grupy odmian pszenicy była determinowana w 17.4% przez odporność<br />

siewki w fazie drugiego liścia. W rankingu badanych odmian pszenicy<br />

pod względem odporności liści na S. nodorum jedynie odmiany Jenga, Kranich<br />

i Askalon zajmowały niemal identyczne uszeregowanie i w obydwu badanych<br />

fazach były najodporniejsze na badanego patogena.<br />

Summary<br />

THE REACTIONS OF VARIETIES OF WINTER WHEAT AND WINTER<br />

TRITICALE TO STAGONOSPORA NODORUM BLOTCH (SNB) AT<br />

SEEDLING AND ADULT PLANT STAGES<br />

Stagonospora nodorum is a necrotrophic fungus that causes glume and leaf<br />

blotch of cereals and grasses worldwide. It occurs on wheat and triticale in<br />

Poland each year with varying intensity modified by weather conditions. Foster<br />

the development of moderate temperatures and high humidity are conducive<br />

for occurrence of SNB.


Wide distribution and pathogenic potential of Stagonospora nodorum qualify<br />

as one of the most serious diseases of wheat and triticale in the world. Under<br />

severe infections considerable losses in yield are due mainly to a reduction of<br />

thousand grain weight.<br />

The aim of conducted experiments was to compare the reaction to S. nodorum<br />

of varieties of winter triticale and winter wheat at second leaf seedling and<br />

adult plant growth stages. Plants were subjected to phenotypic evaluation,<br />

taking into account the degree of infection of leaves.<br />

The first step was to examine the experiment conducted inder a controlled<br />

environment for severity of the second leaf of seedlings of 13 varieties of triticale<br />

and 29 varieties of winter wheat. Seedlings were inoculated with an aqueous<br />

suspension of pycnidiospores of 15 S. nodorum isolates at a concentration<br />

of 12 million spores per ml. Two weeks after inoculation an evaluation was<br />

performed to assess the extent of second seedling leaf infection by S. nodorum<br />

in a gradual scale of 9 (1º - resistant, 9º - susceptible). Disease symptoms ranged,<br />

respectively for wheat cultivars from 4.0 to 9.0 and for triticale cultivars from<br />

4.0 to 6.6 on the 9 digit scale. Among triticale cultivars the most susceptible<br />

appeared to be Algoso and among wheat ones Mulan and Smagard.<br />

The second step was to examine the experiment in the field of SNB severity<br />

on the mature leaves of winter triticale and winter wheat varieties (the same<br />

that were used in the first stage of the experiment) by S. nodorum. During<br />

the growing season in 2010 the degree of infection of leaves and ears of<br />

those varieties was assessed. The experiment was performed in duplicate in<br />

a randomized block layout. Plants on plots were inoculated for three times<br />

with an aqueous suspension of S. nodorum pycnidiospores at a concentration<br />

of 6 million spores per ml. The first inoculation was carried out in the early<br />

boot stage (GS 45 according to the scale of Zadoks), a second inoculation is<br />

performed in the stage of heading, and a third at the early flowering stage<br />

(GS 59). Control plots were protected with Tilt 250 EC (0.1% sa - propiconazole).<br />

Parameter evaluated in the experiment were symptoms of disease severity, also<br />

on 9 digit scale, from 1 to 9 (where 1 means leaf susceptibility, 9 – resistance).<br />

Both experiments were elaborated statistically to highlight the most and least<br />

susceptible cereal cultivars.<br />

Reaction ranges fpr adult plant leaves were following: for triticale from 3.9<br />

(Algoso) to 5,7 (Borwo) and wheat from 4.6 (Bagou) to 6.3 (Jengi) on 9º scale.<br />

Significant differences in resistance to S. nodorum were found among tested<br />

cultivars of both cereal species. Coefficients calculated for both stages of cereal<br />

cultivars were as follows: for triticale Spearman correlation r Spearman = 0.214 and<br />

determination coefficient R 2 = 0.0456. This could be interpreted, that seedling<br />

leaf resistance determined the adult plant one solely in 4.6%. On the other<br />

hand only cultivar Algoso was ranked identically at 13 position at both growth<br />

stages<br />

353


354<br />

Coefficients of correlation for compared growth stages for wheat cultivars<br />

were: Spearman rank coefficient r Spearman = 0.417 and determination coefficient<br />

R 2 = 0.174.<br />

It means, that leaf resistance of adult plants of wheat cultivars was<br />

determined in 17.4% by second seedling leaf resistance. among the cultivars<br />

tested solely three of them, i.e. Jenga, Kranich and Askalon showed quite<br />

consistent ranking at both compared stages. These appeared also the most<br />

resistant on leaves to SNB.


ZMIENNOŚĆ W OBRĘBIE IZOLATÓW<br />

PHYTOPHTHORA CAMBIVORA Z RÓŻNYCH ROŚLIN<br />

ŻYWICIELSKICH ORAZ WODY<br />

Magdalena Ptaszek, Aleksandra Trzewik, Leszek Orlikowski<br />

i Teresa Orlikowska<br />

Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

magdalena.ptaszek@insad.pl<br />

Gatunek Phytophthora cambivora znany od 1917 roku jako Blepharospora<br />

cambivora, a w 1927 zaklasyfikowany przez Buismana jako P. cambivora, jest<br />

w Europie główną przyczyną zamierania kasztanowca i kasztana jadalnego<br />

oraz drzew owocowych (Erwin i Ribeiro 1996). Dotychczas w Polsce stanowił<br />

on zagrożenie dla roślin w lasach, a w ostatnich latach wykrywano go również<br />

w szkółkach roślin ozdobnych.<br />

Celem przeprowadzonych badań było określenie chorobotwórczości oraz<br />

zróżnicowania genomowego izolatów P. cambivora za pomocą techniki PCR<br />

– ISSR i PCR – RAPD. Do badań wybrano P. cambivora z 6 roślin żywicielskich,<br />

3 zbiorników wodnych zlokalizowanych na terenie szkółek ozdobnych<br />

i z 3 rzek. Taksonomiczną przynależność badanych izolatów tego gatunku<br />

potwierdzono stosując metodę PCR ze starterami gatunkowo - specyficznymi<br />

(Boersma i in. 2000). Testy patogeniczności przeprowadzono w warunkach<br />

laboratoryjnych inokulując liście, ogonki liściowe, pędy i korzenie cyprysika<br />

Lawsona, kasztanowca i klonu cukrowego.<br />

Otrzymane wyniki wskazują na zróżnicowanie genomowe izolatów P. cambivora.<br />

Pokrewieństwo analizowanych kultur P. cambivora określone w dendrogramie<br />

UPGMA kształtowało się na poziomie 32 – 100%. Najwyższe wskaźniki<br />

pokrewieństwa zaobserwowano dla izolatów otrzymanych z klonu, irgi<br />

oraz kasztana jadalnego a najniższe dla izolatów uzyskanych z wody. Wszystkie<br />

badane kultury, niezależnie od źródła pochodzenia, kolonizowały tkanki<br />

testowanych roślin. Kultury P. cambivora użyte do inokulacji zasiedlały liście,<br />

ogonki liściowe oraz pędy kasztanowca, przy czym nekroza rozwijała się najszybciej<br />

na blaszkach liściowych zainokulowanych izolatem z rzeki Skierniewki,<br />

przepływającej przez tereny rolnicze, wsie i miasta. W doświadczeniach<br />

z klonem stwierdzono zróżnicowaną reakcję roślin na izolaty P. cambivora<br />

wzależności od organu użytego do inokulacji. Nekroza rozwijała się najszybciej<br />

na korzeniach, a najwolniej na pędach. Na blaszkach liściowych nekroza<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 355-356<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

355


356<br />

rozwijała się najszybciej, gdy do zakażenia użyto izolat z rzeki Skierniewki,<br />

a najwolniej w przypadku izolatu z rzeki Rawki, przepływającej przez tereny<br />

leśne. Na korzeniach najbardziej patogenicznym okazał się izolat z <strong>rośliny</strong> gospodarza,<br />

a najmniej ze stawu w szkółce i rzeki Rawki. W doświadczeniach z<br />

cyprysem nie stwierdzono znaczących różnic w tempie kolonizacji tkanek po 7<br />

dniach inkubacji.<br />

Summary<br />

DIVERSITY OF PHYTOPHTHORA CAMBIVORA ISOLATES<br />

FROM DIFFERENT HOST PLANTS AND WATER<br />

Phytophthora cambivora known from 1917 as Blepharospora cambivora,<br />

was classified by Buisman (1927) as P. cambivora. It is known in Europe as a<br />

casual agent of Aesculus hippocastanum and Castanea sativa diseases as well<br />

as fruit tress (Erwin and Ribeiro 1996). In Poland the species was noticed on<br />

forest plants, but in the last few years P. cambivora was isolated also from<br />

ornamental nurseries.<br />

The aim of this studies was to establish the pathogenicity and genomic<br />

diversity of P. cambivora isolates using PCR-ISSR and PCR-RAPD methods.<br />

P. cambivora from 6 host plants, 3 water ponds localized in ornamental<br />

nurseries and 3 rivers were chosen for this studies. PCR with species – specific<br />

primers (Boersma i in. 2000) was used to confirm taxonomy of tested isolates.<br />

Pathogenicity trials were conducted in laboratory conditions. Leaf blades, leaf<br />

petioles, stems and roots of Aesculus hippocastanum, Acer saccharum and<br />

Chamaecyparis lawsoniana were inoculted, by tested isolates.<br />

Obtained results showed genomic diversity of P. cambivora isolates. The<br />

level of genetic similarity between these isolates varied from 32 to 100%. The<br />

highest genetic similarity coefficients was observed for isolates from Acer,<br />

Cotoneaster and Castanea sativa whereas the lowest for all isolates obtained<br />

from water. All isolates, indepenendently from their sources of isolation,<br />

colonized tissues of tested plants. In laboratory trials, P. cambivora cultures<br />

used for Aesculus inoculation, colonized leaves, leaf petioles and stems. The<br />

quickest spread of necrosis was observed on leaf blades inoculated with isolate<br />

from Skierniewka river, flowing through agricultural area, villages and towns.<br />

In studies with maple differentiated reaction of plants in relation to inoculated<br />

organs on P. cambivora isolates was observed. Necrosis spread the most quickly<br />

on roots and the slowest on stems. On leaf blades the fastest development of<br />

necrosis was also observed when isolates from Skierniewka river was used, and<br />

the slowest with P. cambivora from Rawka river flowing through forests area.<br />

For roots the isolate from host plant was the most pathogenic, and the least<br />

cultures from nursery water pond and from Rawka river. In case of Lawson<br />

cypress lack of significant differences in the rate of plant colonisation after<br />

7 days incubation were noticed.


WPŁYW ZASTOSOWANIA BIOSTYMULATORÓW<br />

HERGIT I SUNAGREEN NA ZASIEDLENIE ŁODYG<br />

I NASION RZEPAKU OZIMEGO PRZEZ GRZYBY<br />

Wojciech Pusz i Maciej Łobczowski<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Katedra Ochrony Roślin - Zakład<br />

Fitopatologii i Mikologii, pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

agrostrona@gmail.com<br />

Celem pracy było określenie wpływu stosowania biostymulatorów Hergit<br />

i Sunagreen i ich mieszanki na zdrowotność rzepaku ozimego odmiany Nelson.<br />

Doświadczenie przeprowadzono w Rolniczym Zakładzie Doświadczalnym<br />

w Pawłowicach, należącym do Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu, w<br />

latach 2008-2010. Badanym czynnikiem było zastosowanie dwóch biostymulatorów<br />

Sungreen i Hergit oraz ich mieszaniny. W fazie dojrzałości pełnej nasion,<br />

na trzy dni przed zbiorem, pobrano losowo po 10 roślin z każdego poletka.<br />

Do badań laboratoryjnych pobrano również nasiona, po 200 z każdego poletka.<br />

Z porażonych łodyg rzepaku ozimego uzyskano 21 gatunków grzybów oraz<br />

kolonie drożdżoidalne. Najmniej izolatów grzybów uzyskano z łodyg rzepaku,<br />

pobranych z poletek gdzie była zastosowana mieszanina Hergit oraz Sunagreen.<br />

Natomiast najwięcej w przypadku zastosowania samego Hergit. Uzyskane<br />

kolonie grzybów, nie różniły się pod względem składu gatunkowego, natomiast<br />

wyróżniała je liczebność poszczególnych gatunków. Jednym z dominujących<br />

gatunków był Alternaria alternata, Równie wysoki procentowy udział w ogólnej<br />

liczbie grzybów wyosobnionych z łodyg posiadał Botrytis cinerea. Spośród<br />

pozostałych wyizolowanych gatunków. Sclerotinia sclerotiorum a także grzyby<br />

z rodzaju Fusarium były izolowane dość licznie.<br />

Z nasion rzepaku wyizolowano W przypadku 21 gatunków grzybów. Największą<br />

liczbę izolatów uzyskano z powierzchni nasion pochodzących z poletek<br />

kontrolnych. Natomiast najmniejszą z nasion zebranych z poletek gdzie<br />

został zastosowany preparat Sunagreen. Spośród wyizolowanych gatunków<br />

dominującym był A. alternata.<br />

W przeprowadzonym doświadczeniu, zastosowanie biostymulatorów nie<br />

miało wpływu na liczebność i skład gatunkowy grzybów wyizolowanych z porażonych<br />

tkanek rzepaku.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 357-358<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

357


358<br />

Summary<br />

EFFECT OF SUNAGREEN AND HERGIT BIOSTIMULATORS ON<br />

COLONIZATION OF STEMS AND SEEDS OF WINTER OILSEED<br />

RAPE BY FUNGI<br />

The aim of this study was to determine the effect of biostimulators Hergit and<br />

Sunagreen and their mixtures on the health status of winter oilseed rape variety<br />

Nelson. The experiment was established at University of Life Sciences in Wrocław<br />

Agricultural Experimental Station in Pawłowice in 2008-2010. Tested factors<br />

were two biostimulators: Sungreen and Hergit and mixtures thereof. In the phase<br />

of full ripe of seeds, three days before harvest, 10 plants per plot were randomly<br />

collected, also 200 seeds from each plot were collected for further analyse.<br />

Twenty one fungi species and Yeast colonies were isolated from infected stems<br />

of winter oilseed rape. The lowest level of fungal isolation was obtained from<br />

stems collected from plots where mixture of Hergit and Sunagreen was used.<br />

However the highest level of isolations was on plots with only Hergit. Obtained<br />

fungi colonies did not differ in terms of species composition, but they were differ<br />

in number of colonies. One of the dominant species was Alternaria alternata,<br />

equally high percentage of the total number of fungi isolated from the stems had<br />

Botrytis cinerea. Among remaining isolated species, Sclerotinia sclerotiorum and<br />

fungi from the genus Fusarium were isolated quite frequently.<br />

Twenty one fungi species were isolated from oilseed rape seeds. The highest<br />

number of isolates was obtained from the surface of seeds collected from control<br />

plots and the lowest from plots where Sunagreen was used. Among isolated<br />

species A. alternata was dominant. The experiment, using biostimulators did<br />

not affect the abundance and species composition of fungi isolated from infected<br />

tissues of rape.


METODY KRIOPREZERWACJI BAKTERII I GRZYBÓW<br />

STOSOWANE W BANKU PATOGENÓW ROŚLIN<br />

I BADANIA ICH BIORÓŻNORODNOŚCI<br />

Katarzyna Sadowska, Anna Pukacka, Natalia Łukaszewska-<br />

-Skrzypniak i Maria Rataj-Guranowska<br />

Instytut Ochrony Roślin-Państwowy Instytut Badawczy, Bank Patogenów<br />

Roślin i Badania ich Bioróżnorodności, ul. Władysława Węgorka 20,<br />

60-318 Poznań<br />

K.Sadowska@iorpib.poznan.pl<br />

Do najważniejszych zadań każdej kolekcji należy dobór skutecznych metod<br />

przechowywania drobnoustrojów w warunkach laboratoryjnych oraz<br />

zapewnienie referencyjnych szczepów dla celów edukacyjnych, badawczych<br />

i porównawczych. Każda metoda konserwacji powinna zapewnić przeżywalność<br />

mikroorganizmów, stabilność ich cech fizjologicznych, biochemicznych<br />

i genetycznych, chronić przed spontanicznymi mutacjami i ograniczać przypadkowe<br />

zanieczyszczenia. Wybór metody przechowywania zależy od rodzaju<br />

drobnoustrojów oraz możliwości badawczych laboratorium i związanych z tym<br />

nakładów finansowych. Nie ma jednak uniwersalnej metody przechowywania<br />

odpowiedniej dla wszystkich mikroorganizmów.<br />

W Banku Patogenów Roślin i Badania ich Bioróżnorodności IOR-PIB od<br />

1996 roku prowadzona jest kolekcja mikroorganizmów patogenicznych dla<br />

roślin. Aktualnie przechowywanych jest tutaj 1503 kultur grzybów oraz 146<br />

szczepów bakterii. Kolekcja Patogenów Roślin zrzeszona jest w Światowej<br />

Federacji Kolekcji Kultur (WFCC – Word Federation of Culture Collections).<br />

Kolekcja ograniczona jest głównie do patogenów roślin uprawnych z terenu<br />

Polski i posiada szczepy, które mogą być genetycznie odmienne od tych zdeponowanych<br />

w kolekcjach Europy Zachodniej.<br />

Każdy patogen zakonserwowany jest co najmniej dwiema uzupełniającymi<br />

się metodami: metodą liofilizacji (od 1999 roku), mrożenia w 10% roztworze<br />

glicerolu (w -80°C) oraz- mrożenia kultur w ciekłym azocie (od 2005 roku).<br />

Poza tym, wszystkie grzyby patogeniczne przechowywane są w temperaturze<br />

16°C pod warstwą oleju mineralnego - metoda stosowana od początku istnienia<br />

kolekcji, natomiast wszystkie bakterie są zakonserwowane z zastosowaniem<br />

probówek Bacto-Protect (od 1997 roku).<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 359-360<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

359


360<br />

Niewątpliwie najnowszą i najlepszą metodą do przechowywania większości<br />

gatunków bakterii i grzybów z zachowaniem ich patogeniczności jest zamrażanie<br />

kultur w ciekłym azocie (-196°C). Wadą tej metody jest wysoki koszt<br />

aparatury i niebezpieczeństwo pracy z ciekłym azotem.<br />

Summary<br />

PRESERVATION METHODS OF BACTERIA AND FUNGI USED<br />

IN COLLECTION OF PLANT PATHOGENS<br />

One of tasks of the collection is the elaboration of the effective preservation<br />

methods of microorganisms under the laboratory conditions. Such a preservation<br />

method should, first of all, allow high cell survival, stability of physiological<br />

and genetic features, and reduce spontaneous mutation, and accidental<br />

contamination. Choice of the preservation method depends on microorganisms<br />

species and laboratory research opportunities and together with financial costs.<br />

There is no universal method of storage that is appropriate for all microorganisms.<br />

The Collection of Plant Pathogens and Biodiversity Studies of the Plant<br />

Protection Institute run a collection of microorganisms started in 1996.<br />

Currently, 1503 cultures of fungi and 146 strains of bacteria is held in the<br />

collection. Collection of Plant Pathogens is included in the World Federation<br />

of Culture Collections. The Collection is restricted mainly to crop pathogens<br />

from Polish territory and contains strains that may be genetically different from<br />

those deposited in the collections of Western Europe. Each pathogen is preserved<br />

by means of at least two complementary methods: freeze-drying method (since<br />

1999), freezing in 10% glycerol (at -80°C) and freezing of cultures in liquid<br />

nitrogen (since 2005). Besides, all the pathogenic fungi are maintained at 16°C<br />

under a layer of mineral oil - a method used since the beginning of the collection,<br />

and all the bacteria are preserved in the vials of Bacto-Protect (since 1997).<br />

The latest and the best way to keep most species of bacteria and fungi is<br />

freezing in liquid nitrogen (-196°C). The disadvantage of this method is the high<br />

cost of equipment and the danger of working with liquid nitrogen.


REAKCJA IZOLATÓW BOTRYTIS CINEREA<br />

POCHODZĄCYCH Z ROŚLIN OZDOBNYCH<br />

NA WYBRANE FUNGICYDY<br />

Małgorzata Schollenberger, Ewelina Wysocka<br />

i Tatiana Dolińska<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-787 Warszawa<br />

malgorzata_schollenberger@sggw.pl<br />

Celem pracy było sprawdzenie działaniu niektórych fungicydów na 10 izolatów<br />

Botrytis cinerea pochodzących z roślin ozdobnych. Izolaty sprawcy szarej<br />

pleśni uzyskano w większości przypadków z rozsady produkowanej w szklarniach<br />

Hodowlano Rolniczej Spółdzielni w Dawidach. Do badań wytypowano<br />

8 fungicydów zawierających pojedynczą substancję aktywną lub ich mieszanki.<br />

Aby określić skuteczność grzybobójczą badanych środków wykonano testy<br />

fungicydowe, które pozwoliły na wyznaczenie krzywej toksyczności oraz kolejnych<br />

wartości ED (effective dose) tj. ED 100 , ED 50 i ED 0 . Na pojedynczy test<br />

składało się 5 powtórzeń z badanym stężeniem poszczególnego fungicydu oraz<br />

kombinacja kontrolna. Testy wykonywane były w dwóch etapach: pierwszym,<br />

gdy stężenie substancji aktywnej w pożywce wynosiła 1, 100 i 1000 ppm i drugim,<br />

gdy stężenia fungicydów były dobierane indywidualnie dla każdego izolatu.<br />

Już w pierwszym etapie okazało się, że wszystkie badane izolaty grzyba są<br />

odporne na tiofanat metylowy (Topsin M 500 SC).<br />

Na podstawie uzyskanych wyników stwierdzono występowanie różnice<br />

w reakcjach izolatów B. cinerea na 7 fungicydów. Preparaty jednoskładnikowe<br />

takie jak Horizon 250 EW (tebukonazol) wykazały silniejsze działanie grzybobójcze<br />

niż większość wieloskładnikowych. Wśród fungicydów o złożonym składzie<br />

najskuteczniejsze okazały się Switch 62,5 WG (cyprodynil i fludioksonil)<br />

oraz Signum 33 WG (piraklostrobin i boksalid). Preparatem o najsłabszym<br />

grzybobójczym działaniu okazał się Fandango 200 EC (protiokonazol i fluaksostrobina),<br />

który jako jedyny w stosunku do 7, spośród 10 badanych izolatów,<br />

wykazał średnią aktywność grzybobójczą.<br />

Na podstawie uzyskanych sekwencji DNA izolatów Botrytis cinerea wyosobnionych<br />

z roślin ozdobnych wykonano schemat ich pokrewieństwa.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 361-362<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

361


362<br />

Summary<br />

THE REACTION OF BOTRYTIS CINEREA ISOLATES<br />

FROM ORNAMENTAL PLANTS ON SELECTED FUNGICIDES<br />

The purpose of this study was to show the difference effect of fungicides on<br />

ten Botrytis cinerea isolates obtained from ornamental plants. The tests were<br />

conducted with 8 fungicides consisting of single active substances or combination<br />

of two – three active ingrendients. To determine the effectiveness of fungicides,<br />

the fungal tests were done, which let to designate toxicity curve and ED 100 , ED 50 ,<br />

ED 0 . All isolates were resistant to benzimidazoles (Topsin M 500 SC).<br />

After comparing, the differences were found in the reactions of B.<br />

cinerea isolates to 7 fungicides. Monocomponent fungicide - Horizon 250<br />

EW (tebuconazole) - showed a stronger fungicidal activity than most of the<br />

multicomponent. Among the multicomponent fungicides the best effectiveness<br />

was proved for Switch 62.5 WG (cyprodinil + fludioxonil) and Signum 33 WG<br />

(pyraclostrobine + boscalid) and the lesst Fandango 200 EC (prothioconazole +<br />

fluoxastrobin).<br />

Relationship between tested isolates of Botrytis cinerea was defined on the<br />

basis of isolated fungi DNA.


POZOSTAŁOŚCI ŚRODKÓW OCHRONY ROŚLIN<br />

W OWOCACH Z TERENU POŁUDNIOWO-WSCHODNIEJ<br />

POLSKI<br />

Magdalena Słowik-Borowiec, Ewa Szpyrka i Anna Kurdziel<br />

Instytut Ochrony Roślin - Państwowy Instytut Badawczy, Terenowa Stacja<br />

Doświadczalna, ul. Langiewicza 28, 35-101 Rzeszów<br />

m.borowiec@iorpib.poznan.pl<br />

Wstęp<br />

Owoce stanowią jeden z kluczowych składników diety każdego człowieka.<br />

Troska o <strong>zdrowi</strong>e konsumentów wymaga by owoce zarówno świeże jak<br />

i ich przetworzone produkty były wolne od wszelkich substancji toksycznych,<br />

w tym również od pestycydów. Zminimalizowaniu ryzyka dla konsumentów,<br />

związanego ze stosowaniem środków ochrony roślin (ś.o.r.) w rolnictwie, służą<br />

ostre wymagania związane z rejestracją ś.o.r. jak również późniejszą, systematyczną<br />

kontrolą ich pozostałości w żywności.<br />

Laboratorium Badania Pozostałości Środków Ochrony Roślin w Rzeszowie<br />

prowadzi badania pozostałości ś.o.r. stosowanych w ochronie owoców i warzyw.<br />

Analizy wykonywane są w ramach monitoringowych badań zlecanych<br />

przez Ministerstwo Rolnictwa i Rozwoju Wsi przy współudziale Wojewódzkiego<br />

Inspektoratu Ochrony Roślin i Nasiennictwa (WIORiN).<br />

Materiał i metody<br />

W 2010 roku wykonano analizy 149 próbek świeżych owoców. Program badań<br />

obejmował oznaczenie 137 substancji aktywnych ś.o.r., wraz z metabolitami<br />

oraz produktami ich rozkładu. Do analizy stosowano zwalidowane metody<br />

analityczne: chromatograficzne (GC/ECD/NPD) umożliwiające jednoczesne<br />

wykrycie wielu związków oraz spektrofotometryczne (pozostałości ditiokarbaminianów).<br />

Uzyskane wyniki porównywano z najwyższymi dopuszczalnymi poziomami<br />

pozostałości (NDP) obowiązującymi w Polsce (Rozporządzenie 2005).<br />

Wyniki i ich omówienie<br />

Pozostałości substancji aktywnych środków ochrony roślin wykryto w 76<br />

próbkach (51%), przy czym w 7 próbkach (5%) przekroczyły one poziom NDP.<br />

Przekroczenia te dotyczyły przede wszystkim pestycydów z grupy insektycy-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 363-365<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

363


364<br />

dów pyretroidowych tj.: cypermetryny (w czarnej porzeczce) i esfenwaleratu<br />

(w malinie) oraz fungicydów: propikonazolu oraz difenokonazolu (w agreście).<br />

W badanych próbkach jabłek oraz malin stwierdzono obecność pozostałości wielokrotnych,<br />

w 4 próbkach pozostałości 5 związków, a w 6 próbkach pozostałości<br />

4 związków, natomiast w 9 próbkach pozostałości 3 różnych związków, 19 próbek<br />

zawierało 2 związki, zaś w 38 próbkach stwierdzono 1 substancję aktywną.<br />

W trakcie badań najwięcej pozostałości ś.o.r. stwierdzono w malinie (67% wszystkich<br />

próbek maliny), jabłku (66%), porzeczce czarnej (48%) oraz w truskawce<br />

(36%). W 4 analizowanych próbkach wykryto pozostałości substancji aktywnych<br />

ś.o.r. niezalecanych do ochrony danej uprawy a były to z grupy fungicydów:<br />

kaptan obecny w malinie, propikonazol w agreście oraz iprodion w porzeczce<br />

czarnej. Szczegółowe dane zamieszczono na rysunku i w tabeli. Wykonane analizy<br />

próbek ujawniły również obecność substancji, których stosowanie w ochronie<br />

roślin zostało zabronione. Stwierdzono 3 przypadki wykrycia, w próbkach<br />

jabłek substancji tj.: fenitrotion i procymidon oraz fenarymol.<br />

W przypadku pozostałości przekraczających NDP oraz pozostałości preparatów<br />

niedozwolonych, wysyłano powiadomienia informacyjne w ramach systemu<br />

wczesnego ostrzegania o niebezpiecznych produktach żywnościowych<br />

i paszach RASFF (Rapid Alert System for Food and Feed).<br />

Wnioski<br />

Analiza wyników urzędowych badań monitoringowych przeprowadzonych<br />

w 2010 roku wskazuje, iż w ponad połowie badanych próbek stwierdzono pozostałości<br />

ś.o.r. Jest to związane z ochroną owoców przed uciążliwymi chorobami<br />

przede wszystkim grzybowymi, z którymi boryka się rolnik. Najczęstsze choroby<br />

to parch jabłoni (Venturia inaequalis), gorzka zgnilizna (Pezicula spp.) oraz<br />

szara pleśń (Botrytis cinerea Pers.). Rok 2010 szczególnie sprzyjał rozwojowi<br />

tych chorób, ze względu na duże ilości opadów, zwłaszcza w okresie letnim.<br />

Wykryte pozostałości ś.o.r. tylko w 5% przekraczały dopuszczalny poziom,<br />

świadczy to o rosnącej świadomości producentów, a także o skutecznym nadzorze<br />

WIORiN. Przypadki wykrycia preparatów niezalecanych w danej uprawie,<br />

bądź wycofanych z obrotu, można uznać za przypadki incydentalne.<br />

Tabela 1. Uprawy, w których stwierdzono przekroczenia NDP*<br />

Uprawa Substancja aktywna<br />

Pozostałości ś.o.r.<br />

[mg/kg]<br />

NDP*<br />

[mg/kg]<br />

Agrest<br />

difenokonazol<br />

propikonazol<br />

0,31<br />

0,08<br />

0,1<br />

0,05<br />

Jabłko fenitrotion 0,02 0,1<br />

Malina esfenwalerat 0,04 0,02<br />

Porzeczka czarna cypermetryna 0,3; 0,12; 0,10 0,05<br />

*NDP – najwyższe dopuszczalne poziomy pozostałości


Rys. 1. Pozostałości środków ochrony roślin w owocach (2010)<br />

Summary<br />

PESTICIDE RESIDUES IN FRUIT FROM SOUTH EASTERN<br />

REGION OF POLAND<br />

In 2010, we performed the analysis of 149 samples of fresh fruit from the<br />

south-eastern region of Poland. Research program included the determination<br />

of 137 active substances. The results were compared with maximum residue<br />

levels (MRLs) in force in Poland. Residues of active substances of plant protection<br />

products were detected in 76 samples (51%), while in 7 (5%) exceeded<br />

a level of MRL. Violations of MRLs were mainly concerned with the group of<br />

insecticides : cypermethrin (in black currant) and esfenwalerate (in raspberry)<br />

and fungicides: propiconazole, and difenoconazole (in gooseberries).<br />

Literatura<br />

Rozporządzenie (WE) nr 396/2005 Parlamentu Europejskiego i Rady z dnia<br />

23 lutego 2005 r. zmieniające dyrektywę Rady 91/414/EWG w sprawie najwyższych<br />

dopuszczalnych poziomów pozostałości pestycydów w żywności i<br />

paszy pochodzenia roślinnego i zwierzęcego oraz na ich powierzchni (Dz.<br />

Urz. UE, L 70/1, z dnia 16.03.2005 r., z późn. zm.).<br />

365


366<br />

WYKORZYSTANIE MATERIAŁÓW ODPADOWYCH<br />

DO NAMNAŻANIA ANTAGONISTYCZNYCH<br />

GRZYBÓW TRICHODERMA<br />

Urszula Smolińska, Beata Kowalska, Magdalena Szczech<br />

i Waldemar Kowalczyk<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3,<br />

96-100 Skierniewice<br />

Urszula.Smolinska@iwarz.pl<br />

Celem badań było opracowanie metod umożliwiających wykorzystanie organicznych<br />

materiałów odpadowych do produkcji biomasy wyselekcjonowanych<br />

izolatów grzybów z rodzaju Trichoderma. Pierwszym etapem był wybór<br />

materiałów do produkcji podłoży. Analizowane były materiały odpadowe o następujących<br />

cechach: substancja stała, możliwie jednorodna, o określonych parametrach<br />

fizyko-chemicznych, możliwa do uzyskania w dużych ilościach, stanowiąca<br />

źródło niezbędnych składników odżywczych dla grzyba Trichoderma.<br />

W badaniach stosowano następujące odpady: słomy zbóż, odpady z przemysłu<br />

przetwórstwa owocowo- warzywnego, odpady z przemysłu papierniczego, podłoża<br />

popieczarkowe i inne. Dodatkowo, jako źródło składników mineralnych wykorzystywano<br />

odpad pożywki z upraw bezglebowych, stanowiący bogate źródło<br />

substancji mineralnych dla grzybów.<br />

Materiały odpadowe używane do przygotowania podłoży stosowano zarówno<br />

w postaci rozdrobnionych mieszanin jak i granulatów. Granulaty zapewniają<br />

równomierną zawartość wszystkich składników w każdej objętości materiału.<br />

Są proste w aplikacji i łatwo tworzą zawiesinę w wodzie.<br />

Prowadzono także prace, których celem było opracowanie prostej i taniej<br />

technologii przygotowania podłoży, która umożliwiałaby zachowanie wszystkich<br />

składników odżywczych komponentów, niezbędnych do wzrostu grzyba<br />

Trichoderma.<br />

Doświadczenia wykonywano w woreczkach foliowych o wymiarach 10x15<br />

cm, z otworami umożliwiającymi dopływ powietrza. Podłoża zaszczepiano zawiesiną<br />

zarodników wyselekcjonowanych izolatów Trichoderma, inkubowano w<br />

temperaturze 20-24 o C. Oceniano wzrost i zarodnikowanie grzybów w skali 0-5,<br />

gdzie: 0-brak zarodnikowania, 5-zarodnikowanie na całej powierzchni podłoża.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 366-367<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Stwierdzono, że najlepszy wzrost i zarodnikowanie izolatów Trichoderma<br />

obserwowano na podłożach zawierających w swoim składzie słomę pszenną<br />

z dodatkiem odpadów z przetwórstwa owocowo-warzywnego. Szczepy Trichoderma<br />

dobrze zarodnikowały także na zwilżonych granulatach. Najwolniejszy<br />

wzrost i najsłabsze zarodnikowanie grzybów Trichoderma obserwowano<br />

na podłożach z dodatkiem odpadów z roślin kapustowatych. Wzrost grzybni<br />

różnych izolatów Trichoderma nie zawsze był skorelowany z intensywnością<br />

zarodnikowania. Obserwowano zróżnicowanie intensywności zarodnikowania<br />

w zależności od izolatu grzyba.<br />

Wykonano analizy chemiczne (makroskładniki – formy łatwo rozpuszczalne,<br />

zawartości ogólne, oraz właściwości fizyczne) wszystkich badanych podłoży<br />

oraz składników organicznych dodawanych do podłoży.<br />

Summary<br />

APPLICATION OF WASTE MATERIALS FOR REPLICATION<br />

OF ANTAGONISTIC TRICHODERMA FUNGI<br />

The aim of study was to elaborate the application of organic waste materials<br />

for production of selected Trichoderma fungi isolates. The following properties<br />

of waste materials were analyzed: solid, possibly uniform substance with<br />

required physical and chemical properties, produced in large quantities, being<br />

a source of nutritional substances for Trichoderma fungus. The following waste<br />

materials were investigated: cereals straw, wastes from mushroom farms,<br />

wastes from vegetable and fruit processing.<br />

Praca finansowana w ramach projektu badawczego współfinansowanego<br />

przez Unię Europejską z Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego<br />

w ramach Działania 1.3 Programu Operacyjnego Innowacyjna Gospodarka,<br />

Poddziałanie 1.3.1<br />

Nr projektu UDA-POIG 01.03.01-00-129/09-03<br />

367


368<br />

REJESTRACJA FUNGICYDÓW W POLSCE – STAN OBECNY<br />

Joanna Sobczak, Wiesława Kawczyńska, Katarzyna<br />

Radziemska-Bonowicz, Barbara Śliwa i Ewa Wiercińska<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20; 60-318 Poznań<br />

J.Sobczak@iorpib.poznan.pl, W.kawczynska@iorpib.poznan.pl<br />

Środki grzybobójcze są drugą, po herbicydach, najliczniejszą grupą zarejestrowanych<br />

w Polsce środków ochrony roślin. W chwili obecnej (stan na początek<br />

kwietnia 2011) zarejestrowanych jest 271 fungicydów, zawierających 82<br />

substancje aktywne, należące do ponad 40 różnych grup chemicznych. Dominującą<br />

grupę stanowią fungicydy zawierające substancje aktywne należące do<br />

grupy triazoli (ponad 100 środków zawiera substancje z tej grupy). Mniejszą,<br />

choć również ważną grupą są ditiokarbaminiany (43 środki). Kolejne ważne<br />

grupy to strobiluryny (27 środków), benzimidazole (23 środki), imidazole (22<br />

środki), nieorganiczne (21 środków). W odniesieniu do ryzyka zagrożenia odpornością,<br />

w nawiązaniu do klasyfikacji podanej przez FRAC (Fungicide Resistance<br />

Action Committee), wśród obecnie zarejestrowanych substancji grzybobójczych<br />

ok. 62% stanowią substancje o niskim (13 s.a.), niskim do średniego<br />

(13 s.a.) lub średnim (25 s.a.) ryzyku zagrożeniu odpornością, ok. 26% stanowią<br />

substancje o wysokim (16 s.a.) lub średnim do wysokiego (5 s.a.) ryzyku<br />

powstania odporności, a ok. 12% stanowią substancje o nie znanym ryzyku<br />

zagrożenia odpornością (10 s.a.).<br />

Zmiany, jakie nastąpiły w rejestrze środków w 2010 i pierwszym kwartale<br />

2011 roku są następujące: ogółem zarejestrowano 54 fungicydy, w tym wydano:<br />

19 zezwoleń na zasadzie importu równoległego, 15 ponownych zezwoleń<br />

tzw. wznowienia rejestracji, 20 zezwoleń dla nowych środków, z których tylko<br />

3 zawierają nowe substancje aktywne – cyflufenamid (2 środki), wyciąg z krzewu<br />

herbacianego (1 środek). Spośród nowych środków najwięcej ma zastosowanie<br />

w ochronie zbóż (Acanto Prima 38 WG, Alert 375 SE, Alert Solo 250<br />

EW, Credo 600 SC, Kendo 50 EW, Merces 50 EW, Nuprid Max 222 FS, Proline<br />

Max 460 EC, Soligor 425 EC, Talius 200 EC). Nowe fungicydy są przeznaczone<br />

również do ochrony pomidora (Amistar Opti 480 SC, Ekonom MM 72 WP,<br />

Rywal 72 WP, Timorex Gold 24 EC), ogórka (Ekonom MM 72 WP, Rywal 72<br />

WP, Timorex Gold 24 EC), cebuli (Amistar Opti 480 SC, Ekonom MM 72 WP,<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 368-371<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Rywal 72 WP), kapustowatych (Ekonom MM 72 WP, Rovral Aquaflo 500 SC,<br />

Rywal 72 WP), ziemniaka (Drum 45 WG, Ekonom MM 72 WP, Rywal 72 WP),<br />

rzepaku ozimego (Alert 375 SE, Alert Solo 250 EW, Caryx 240 SL), jabłoni<br />

(Chorus 50 WG, Siarkol 800 SC), buraka cukrowego (Alert Solo 250 EW), sałaty<br />

(Timorex Gold 24 EC), fasoli, grochu (Amistar Opti 480 SC), maliny (Rovral<br />

Aquaflo 500 SC), modrzewia (Kasir Lasy 250 EW).<br />

Tabela. Wykaz fungicydów, dla których wydano zezwolenia w Polsce w 2010 i pierwszym kwartale<br />

2011 roku.<br />

L.P. Nazwa środka Substancja aktywna Grupa chemiczna<br />

Ważność zezwolenia/<br />

obrót<br />

1. Acanto Prima 38 WG<br />

cyprodynil,<br />

pikoksystrobina<br />

anilinopirymidyny,<br />

strobiluryny<br />

21.03.2021<br />

2. Alert 375 SE karbendazym, flusilazol benzimidazole, triazole 14.12.2020<br />

3. Alert Solo 250 EW flusilazol triazole 26.01.2011/26.07.2012<br />

4. Amistar Opti 480 SC<br />

azoksystrobina,<br />

chlorotalonil<br />

strobiluryny, ftalany 06.03.2021<br />

5. Arastar 250 SC azoksystrobina strobiluryny 31.12.2011<br />

6 Arjo-Kaptan 80 WG kaptan ftalimidy 30.09.2011<br />

7 *Atlas 500 SC chinoksyfen fenoksychinony 03.02.2021<br />

8 Azzox Gold 250 SC azoksystrobina strobiluryny 31.12.2011<br />

9<br />

*Baytan Universal<br />

094 FS<br />

triadimenol, imazalil,<br />

fuberidazol<br />

triazole, imidazole,<br />

benzimidazole<br />

28.02.2014<br />

10 *Caramba 60 SL metkonazol triazole 01.06.2020<br />

11. Caryx 240 SL metkonazol triazole 01.02.2021<br />

12. Chorus 50 WG cyprodynil anilinopirymidyny 12.01.2020<br />

13. Credo 600 SC<br />

pikoksystrobina,<br />

chlorotalonil<br />

strobiluryny, ftalany 04.01.2021<br />

14. *Discus 500 WG krezoksym metylowy strobiluryny 01.05.2020<br />

15. Drum 45 WG cymoksanil iminoacetylomoczniki 28.02.2014<br />

16. Ekonom MM 72 WP mankozeb, metalaksyl<br />

ditiokarbaminiany,<br />

fenyloamidy<br />

30.06.2014<br />

17. *Fandango 200 EC<br />

fluoksastrobina,<br />

protiokonazol<br />

strobiluryny, triazole 26.01.2021<br />

18. Golden Azzox 250 SC azoksystrobina strobiluryny 31.12.2011<br />

19.<br />

Golden Prochloraz<br />

450 EC<br />

prochloraz imidazole 31.12.2011<br />

20. Golden Teb 250 EW tebukonazol triazole 31.12.2012<br />

21. *Gwarant 500 SC chlorotalonil ftalany 09.03.2021<br />

22. Intizam SC<br />

tiofanat metylowy,<br />

epoksykonazol<br />

benzimidazole, triazole 28.02.2016<br />

23. Jetzone 250 EW propikonazol triazole 21.05.2011<br />

24. Kasir Lasy 250 EW tebukonazol triazole 28.02.2014<br />

25. Kendo 50 EW cyflufenamid fenyloacetamidy 14.12.2020<br />

26. Lord 250 EW tebukonazol triazole 31.12.2012<br />

369


370<br />

27.<br />

Mac-Mankozeb 75%<br />

WG<br />

mankozeb ditiokarbaminiany 25.10.2011<br />

28.<br />

Mac-Prochloraz Plus<br />

490 EC<br />

prochloraz,<br />

propikonazol<br />

imidazole, triazole 31.12.2010/31.12.2011<br />

29.<br />

Mac-Propamokarb<br />

722 SL<br />

propamokarb<br />

pochodne kwasu<br />

karbaminowego<br />

30.09.2011<br />

30. Magnat 750 EC fenpropidyna morfoliny 31.12.2012<br />

31. Merces 50 EW cyflufenamid fenyloacetamidy 14.12.2020<br />

32. Mohican 73 WP mankozeb, benalaksyl<br />

ditiokarbaminiany,<br />

acyloalaniny<br />

01.07.2011<br />

33. Motto 25 FS fludioksonil fenylopirole 31.12.2012<br />

34. Nuprid Max 222 FS tebukonazol triazole 28.02.2014<br />

35. *Pictor 400 SC<br />

boskalid,<br />

dimoksystrobina<br />

anilidy, strobiluryny 01.10.2020<br />

36. Pomarsol F 80 WG tiuram ditiokarbaminiany 21.05.2010/21.11.2011<br />

37.<br />

*Pomarsol Forte 80<br />

WG<br />

tiuram ditiokarbaminiany 18.05.2020<br />

38. Proline Max 460 EC<br />

spiroksamina,<br />

protiokonazol<br />

ketoaminy, triazole 12.08.2010/12.02.2012<br />

39. *Raxil Gel 206 GF tiuram, tebukonazol<br />

ditiokarbaminiany,<br />

triazole<br />

28.02.2014<br />

40. Real Super 080 FS tritikonazol, prochloraz triazole, imidazole 31.12.2010/ 31.12.2011<br />

41.<br />

Rovral Aquaflo 500<br />

SC<br />

iprodion dikarboksymidy 17.02.2020<br />

42. Rywal 72 WP metalaksyl, mankozeb<br />

fenyloamidy,<br />

ditiokarbaminiany<br />

30.06.2014<br />

43. *Sarfun 500 SC karbendazym benzimidazole 02.03.2020<br />

44. *Sarfun T 450 FS karbendazym, tiuram<br />

benzimidazole,<br />

ditiokarbaminiany<br />

18.10.2020<br />

45. *Sarfun T 65 DS karbendazym, tiuram<br />

benzimidazole,<br />

ditiokarbaminiany<br />

18.10.2018<br />

46. Siarkol 800 SC siarka nieorganiczne 30.06.2014<br />

47. *Signum 33 WG<br />

boskalid,<br />

piraklostrobina<br />

spiroksamina,<br />

aniliny, strobiluryny 19.04.2020<br />

48. Soligor 425 EC protiokonazol,<br />

tebukonazol<br />

ketoaminy, triazole 28.02.2014<br />

49. Strobi 250 SC azoksystrobina strobiluryny 31.12.2011<br />

50. Suplo 250 EC difenokonazol triazole 31.12.2010/31.07.2012<br />

51. Talius 200 EC proquinazid quinozoliny 20.01.2013<br />

52.<br />

*Thiram Granuflo 80<br />

WG<br />

tiuram ditiokarbaminiany 18.05.2020<br />

53. Timorex Gold 24 EC<br />

wyciąg z krzewu<br />

herbacianego<br />

naturalne 31.08.2015<br />

54. *Traper 250 EC<br />

protiokonazol,<br />

tebukonazol<br />

triazole 28.02.2014<br />

*Środki, które uzyskały ponowną rejestrację<br />

■ (kolor) Środki zarejestrowane na zasadzie importu równoległego


W chwili obecnej środki ochrony roślin wciąż są rejestrowane zgodnie z unijną<br />

Dyrektywą Rady 91/414/EWG. W czerwcu 2011 roku, w życie wchodzi nowe<br />

Rozporządzenie Rady 1107/2009/WE, które zastąpi wspomnianą Dyrektywę<br />

91/414.<br />

Summary<br />

FUNGICIDES REGISTRATION IN POLAND – CURRENT STATE<br />

Fungicides, behind herbicides are one of the largest group of plant protection<br />

products in Poland. In April 2011, 271 preparation against fungi diseases were<br />

on the list of PPP registered in Poland (triazoles, dithiocarbamates, strobilurins,<br />

benzimidazoles, imidazoles, inorganic were in dominance). In recent times 54<br />

PPP were registered, among them 20 new fungicides on the Polish market.<br />

371


372<br />

ODPORNOŚĆ NA METALAKSYL IZOLATÓW<br />

PHYTOPHTHORA INFESTANS WYSTĘPUJĄCYCH<br />

NA TERENIE POLSKI W LATACH 2006-2010<br />

Sylwester Sobkowiak, Jadwiga Śliwka, Marcin Chmielarz,<br />

Renata Lebecka i Ewa Zimnoch-Guzowska<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Oddział w Młochowie<br />

s.sobkowiak@ihar.edu.pl<br />

Wprowadzenie<br />

Izolaty Phytophthora infestans, sprawcy zarazy ziemniaka, różnią się pod<br />

względem odporności na fenyloamidy (Goodwin i wsp. 1996). Ocena odporności<br />

na metalaksyl izolatów P. infestans zebranych w Polsce w latach 1995-<br />

2005, znajdujących się w kolekcji IHAR-PIB Młochów zaprezentowana została<br />

na konferencji IHAR w Kołobrzegu w roku 2006 (Sobkowiak i Lebecka 2006).<br />

W opracowaniu tym określono fluktuację odporności izolatów w zależności od<br />

stosowania fenyloamidów na danym polu. Według Goodwina i in. (1996) oraz<br />

Kapsy (2001) przyczyną pojawiania się odpornego patogenu na polach niechronionych<br />

jest jego migracja z pól chronionych.<br />

W niniejszej pracy przedstawiono wyniki badania odporności na metalaksyl<br />

izolatów P. infestans zebranych z 15 województw Polski w latach 2006-<br />

2010.<br />

Materiał i metody<br />

W latach 2006-2010 zebrano 517 izolatów z 15 województw Polski i oceniono<br />

pod względem odporności na metalaksyl według metody opisanej przez Bakonyi’ego<br />

i in. (2002). Pożywki żytnio-agarowe z dodatkiem metalaksylu o stężeniach<br />

5 i 100 μ l/l przygotowano na szalkach Petriego o średnicy 85 mm.<br />

Kontrolę stanowiły szalki z pożywką agarowo-żytnią bez metalaksylu. Pomiary<br />

wzrostu średnicy kolonii badanych izolatów przeprowadzono w momencie<br />

właściwej reakcji izolatów wzorcowych na metalaksyl. W każdym roku badań<br />

zastosowano następujące izolaty wzorcowe: dwa izolaty wrażliwe US-1<br />

74001 (Holandia) i US-1 28/05 (Wielka Brytania), dwa izolaty pośrednie 3/1/02<br />

i 13/04/02 (Węgry) oraz izolat odporny US-8 (Stany Zjednoczone Ameryki Pół-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 372-376<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


nocnej). Na środku szalek z pożywką wykładano 9-milimetrowe krążki wycięte<br />

ze świeżej wyrośniętej grzybni. Inkubacja P. infestans przebiegała w ciemności<br />

ze stałą temperaturą 16°C. Na podstawie pomiarów średnicy kolonii<br />

patogena na poszczególnych pożywkach z metalaksylem w stosunku do wzrostu<br />

na szalkach kontrolnych obliczono względny wzrost kolonii wyrażony<br />

w procentach. Ocenione izolaty przyporządkowano do poszczególnych kategorii<br />

odporności na metalaksyl na podstawie następującej skali:<br />

1) Izolaty wrażliwe: względny wzrost kolonii < 40% na pożywkach zawierających<br />

5 i 100 μ l/l metalaksylu,<br />

2) Izolaty pośrednie: względny wzrost kolonii ≥ 40% na pożywkach zawierających<br />

5μ l/l metalaksylu i względny wzrost kolonii < 40% na pożywkach<br />

zawierających 100 μ l/l metalaksylu,<br />

3) Izolaty odporne: względny wzrost kolonii ≥ 40% na pożywkach z metalaksylem<br />

w obydwóch stężeniach.<br />

Wyniki i dyskusja<br />

Większość ocenianych izolatów P. infestans charakteryzowała się wrażliwością<br />

na metalaksyl (71,5%) – tabela 1. Najwięcej izolatów wrażliwych na<br />

metalaksyl (powyżej 80%) zanotowano w Polsce latach 2008 i 2010, a najmniej<br />

w roku 2006 (57,4%). We wcześniejszych badaniach w latach 1995-2005 większość<br />

testowanych izolatów była także wrażliwa na metalaksyl (85,3% z 204 ocenianych)<br />

(Sobkowiak i Lebecka 2006). Znacznie mniej izolatów wrażliwych na<br />

metalaksyl (od 27,6 do 53,9% w 602 testowanych) stwierdziła w Polsce Kapsa<br />

(2001) w latach 1995-1999. Podobną frekwencję osiągnęły izolaty wrażliwe na<br />

metalaksyl w krajach Unii Europejskiej (UE) przedstawione w Europejskiej<br />

Bazie Danych „Eucablight” w latach 2006-2009 - od 23 do 49% wśród ogółem<br />

ocenianych 1682 izolatów (www.eucablight.org). W sąsiednich Czechach w latach<br />

2005-2006 oceniono 257 izolatów P. infestans i wszystkie były wrażliwe<br />

na metalaksyl (www.eucablight.org).<br />

W prezentowanych badaniach występowanie izolatów odpornych na metalaksyl<br />

w Polsce było największe w 2006 (33%) i 2007 roku (20%), a najmniejsze<br />

w 2008 (6,4%) i 2010 roku (3,3%). W badaniach przeprowadzonych w Polsce<br />

w latach 1995-2005 izolatów odpornych było 23 tj. 11,2% (Sobkowiak i Lebecka<br />

2006). W porównaniu z wynikami niniejszej pracy, wyższy procent izolatów<br />

odpornych na metalaksyl na polach chronionych przed P. infestans w Polsce<br />

zanotowała w latach 1995-1999 Kapsa (2001) - od 27,6 do 53,9%. Wyższą frekwencję<br />

izolatów odpornych odnotowano także w krajach UE. W latach 2006-<br />

2009 stanowiły one od 32 do 75% (www.eucablight.org).<br />

We wszystkich latach badań udział izolatów pośrednich był wyrównany<br />

i zarazem najmniej liczny wśród grup odporności i kształtował się od 9,6%<br />

w roku 2006 do 16,7% w roku 2007. Z kolei badania przeprowadzone w latach<br />

373


374<br />

1995-2005 wykazały, że frekwencja izolatów pośrednich w Polsce była niższa<br />

(3,5%) w porównaniu z wynikami zaprezentowanymi w tej pracy (Sobkowiak<br />

i Lebecka 2006). W innych badaniach zakres występowania izolatów charakteryzujących<br />

się pośrednim fenotypem w latach 1995-1999 w Polsce był szeroki<br />

i kształtował się od 4,8 do 32,4% (Kapsa 2001). W latach 2006-2009 w krajach<br />

UE występowanie izolatów pośrednich wahało się w granicach od 1 do 21%<br />

(www.eucablight.org).<br />

We Francji w latach 2006-2009 przebadano 811 izolatów P. infestans, wśród<br />

których odpornych na metalaksyl było od 40 do 78%, pośrednich od 1 do 31%,<br />

a wrażliwych od 19 do 29% (www.eucablight.org).<br />

Genetyczne podłoże odporności na metalaksyl pozostaje ciągle nie do końca<br />

zdefiniowane. Prawdopodobnie cechę tę kontroluje jeden gen dominujący (Lee<br />

i in. 1999) lub gen o niepełnej dominacji (Fabritius i in. 1997).<br />

Według Cooke i Lees (2004) odporność ta może być determinowana przez<br />

wiele loci.<br />

W ciągu pięciu lat badań najwięcej izolatów P. infestans pod względem odporności<br />

na metalaksyl przetestowano w województwach podkarpackim (130<br />

izolatów, w tym 107 było wrażliwych, 19 pośrednich i tylko 4 odporne), mazowieckim<br />

(116 izolatów: 96 wrażliwych, 12 pośrednich i 8 odpornych) i małopolskim<br />

(53 izolaty: 39 wrażliwych, 6 pośrednich i 8 odpornych).<br />

Tabela 1. Odporność na metalaksyl izolatów Phytophthora infestans zebranych z terenu Polski<br />

w latach 2006-2010<br />

Rok<br />

oceny<br />

odporne<br />

Izolaty P. infestans<br />

pośrednie wrażliwe<br />

liczba % liczba % liczba %<br />

Razem<br />

liczba<br />

2006 31 33,0 9 9,6 54 57,4 94<br />

2007 6 20,0 5 16,7 19 63,3 30<br />

2008 5 6,4 9 11,5 64 82,1 78<br />

2009 28 12,4 34 15,1 163 72,4 225<br />

2010 3 3,3 13 14,4 74 82,2 90<br />

Razem 2006-2010 73 15,0 70 13,5 374 71,5 517<br />

Wnioski<br />

1. W latach 2006-2010 na terenie Polski najliczniej występowały izolaty P. infestans<br />

wrażliwe na metalaksyl. W mniejszym nasileniu pojawiały się izolaty<br />

odporne i pośrednie. W badaniach przeprowadzonych w poprzednich<br />

latach, 1995-2005 (Sobkowiak i Lebecka 2006) frekwencja izolatów odpornych<br />

oraz wrażliwych na metalaksyl występowała na zbliżonym poziomie<br />

w porównaniu z wynikami omawianej pracy, natomiast rzadziej występowały<br />

izolaty pośrednie.


2. Występowanie izolatów P. infestans odpornych na metalaksyl wskazuje, że<br />

fungicydy z grupy fenyloamidów mogą nie być w pełni skuteczne w zwalczaniu<br />

zarazy ziemniaka.<br />

Praca finansowana w ramach tematów:<br />

• PW 3-1-06-0-01 „Gromadzenie, charakterystyka w zakresie biologii oraz<br />

przechowywanie ras i patotypów najważniejszych patogenów ziemniaka”,<br />

• PW 3-6-00-0-01 „Monitorowanie i ocena zmian w populacjach gospodarczo<br />

ważnych patogenów pochodzenia wirusowego, bakteryjnego i grzybowego<br />

oraz szkodliwych owadów na plantacjach ziemniaka”.<br />

Summary<br />

RESISTANCE ON METALAXYL OF PHYTOPHTHORA INFESTANS<br />

ISOLATES OCCURRING IN POLAND IN 2006-2010<br />

In total 517 Phytophthora infestans isolates were assessed for resistance<br />

to metalaxyl. They were collected from 15 regions of Poland in 2006-2010.<br />

The most of isolates were assessed in provinces: podkarpackie (130 isolates:<br />

107 sensitive, 19 intermediate and 4 resistant), mazowieckie (116 isolates: 96<br />

sensitive, 12 intermediate and 8 resistant) and małopolskie (53 isolates: 39<br />

sensitive, 6 intermediate and 8 resistant). The majority of evaluated isolates<br />

was sensitive to metalaxyl (71.5%). In presented research the frequency of<br />

isolates resistant to metalaxyl was the greatest in 2006 (33%) and 2007 (20%)<br />

and the lowest in 2008 (6.4%) and 2010 (3.3%). The intermediate isolates<br />

ranged from 9.6% in 2006 to 16.7% in 2007. The occurrence of resistant to<br />

metalaxyl P. infestans isolates, indicates that this chemical may not always be<br />

effective against late blight.<br />

Literatura<br />

Bakonyi J., Láday M., Dula T., Érsek T., 2002: Characterisation of isolates of<br />

Phytophthora infestans from Hungary. European Journal of Plant Pathology<br />

108 (8): 139-146.<br />

Cooke D.E.L., Lees A.K., 2004: Markers, old and new, for examining Phytophthora<br />

infestans diversity. Plant Pathology 53: 692-704.<br />

Eucablight. http://www.eucablight.org<br />

Fabritius A.-L., Shattock R.C., Judelson H.S., 1997: Genetic analysis of metalaxyl<br />

insensintivity loci in Phytophtora infestans using linked DNA markers.<br />

<strong>Phytopathology</strong> 87 (10): 1034-1040.<br />

Goodwin S.B., Sujkowski L.S., Fry W.E., 1996: Widespread distribution and<br />

probable origin of resistance to metalaxyl in clonal genotypes of Phytophthora<br />

infestans in the United States and western Canada. <strong>Phytopathology</strong><br />

86:793-800.<br />

375


376<br />

Kapsa J., 2001: Incidence of late blight (Phytophthora infestans) in potato<br />

crops and its control in Poland in 1995-1999. pp 119-216 in: Westerdijk<br />

K., Schepers H. T. A. M. (eds), Proceedings of the European network for<br />

development of an Integrated Control Strategy of potato late blight, 6-7<br />

September 2000, Munich, Germany, PAV-Special Report no. 7. Applied Research<br />

for Arable Farming and Field Production of Vegetables, Lelystad,<br />

Netherlands.<br />

Lee T.Y., Mizubuti E., Fry W.E., 1999: Genetics of metalaxyl resistance in<br />

Phytophthora infestans. Fungal Genetics and Biology 26 (2): 118-130.<br />

Sobkowiak S., Lebecka R., 2006: Charakterystyka izolatów Phytophthora<br />

infestans pod względem odporności na metalaksyl. Nasiennictwo i ochrona<br />

ziemniaka. Mat. z konf. Naukowo-szkoleniowej w Kołobrzegu 30-<br />

31.03.2006: 107-109.


BADANIA IN VIVO I IN VITRO ZMIAN PH<br />

ZACHODZĄCYCH POD WPŁYWEM MIKOTOKSYNY<br />

GRZYBA SCLEROTINIA SCLEROTIORUM (LIB.) DE BARY<br />

Elżbieta Starzycka i Michał Starzycki<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin - Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Oddział w Poznaniu, ul. Strzeszyńska 36, 60-479 Poznań<br />

michals@nico.ihar.poznan.pl<br />

Zgnilizna twardzikowa powodowana przez grzyb Sclerotinia sclerotiorum<br />

(Lib.) de Bary jest jednym z najgroźniejszych patogenów roślin z plemienia<br />

Brassiceae oraz innych bardzo odległych systematycznie grup roślin dwuliściennych.<br />

Corocznie z różnym nasileniem atakuje <strong>rośliny</strong> rzepaku ozimego<br />

Brassica napus L. najważniejszej polskiej <strong>rośliny</strong> oleistej. Główną mikotoksyną<br />

patogena S. sclerotiorum jest kwas szczawiowy (dikarboksylowy HOOC-<br />

-COOH) blokujący prawidłowe przemiany wapnia Ca ++ oraz magnezu Mg ++ .<br />

Liście rzepaku, których ogonki (liściowe) zanurzono w rozcieńczonym roztworze<br />

kw. szczawiowego w warunkach in vitro bardzo szybko więdną, tracą<br />

turgor i przebarwiają się na brązowo. Brązowe plamy uszkodzonych liści po<br />

24h zasychają. Przeprowadzone wcześniej badania in vivo w IHAR PIB jednoznacznie<br />

wskazały, że tylko młodsze tkanki B. napus, zarówno liście oraz łodygi<br />

są chętniej i szybciej opanowywane przez patogena S. sclerotiorum. Podjęte<br />

badania in vitro z indykatorem kwasowości, zielenią bromokrezolową oraz in<br />

vivo z czerwienią Kongo pozwoliły na stwierdzenie występowania kwasu dikarboksylowego<br />

HOOC-COOH w łodygach B. napus. Materiałem do badań in<br />

vitro były fragmenty odnowionej grzybni S. sclerotiorum, które umieszczano<br />

na płytki Petriego z pożywką maltozową, z indykatorem. Agresywne patotypy<br />

grzyba posiadały zdolność do całkowitego odbarwiania pożywki już po 3 dobach.<br />

Na tych samych płytkach po okresie ok. 4 tygodni następowała ponowna<br />

zmiana zabarwienia na kolor pierwotny (niebieski) świadczący o zobojętnieniu<br />

odczynu kwaśnego. W warunkach in vivo, wycięto fragmenty (paski ok. 5 cm)<br />

na łodygach kwitnących roślin rzepaku zabezpieczając je szczelnie uformowanym<br />

parafilmem. Parafilm ten tworzył bańkę, którą napełniono roztworem<br />

czerwieni Kongo. Po 7 dniach skaleczone miejsce (biało zielone) przyjmowa-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 377-379<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

377


378<br />

ło charakterystyczną czerwoną barwę. Po tym okresie indykator usuwano<br />

i przeprowadzano inokulację pojedynczej <strong>rośliny</strong> w skaleczonym i przebarwionym<br />

miejscu. Po zakażeniu rzepaku patogenicznym grzybem S. sclerotiorum<br />

obserwowano wyraźną zmianę zabarwienia indykatora na kolor brunatny,<br />

świadczącą o zmianie pH z obojętnego na odczyn kwaśny. Po dalszym okresie<br />

hodowli porażonych roślin rzepaku, ok. 4 tygodni brunatne zabarwienie zanikało<br />

i pojawiała się barwa charakterystyczna - czerwona. Reakcja zabarwienia<br />

pożywki w warunkach in vitro i in vivo była bardzo podobna, niezróżnicowana.<br />

Summary<br />

IN VIVO AND IN VITRO INVESTIGATIONS OF PH CHANGES<br />

CAUSED BY MYCOTOXINS OF THE SCLEROTINIA<br />

SCLEROTIORUM (LIB.) DE BARY FUNGUS<br />

Sclerotinia rot caused by the Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary fungus<br />

is one of the most dangerous pathogens of plants from the Brassiceae tribe<br />

as well as from other systematically very distant groups of dicotyledonous<br />

plants. Every year it attacks, with varying intensity, plants of winter rapeseed<br />

Brassica napus L., the most important Polish oil plant. The main mycotoxin of<br />

the S. sclerotiorum pathogen is oxalic acid (dicarboxylic HOOC-COOH) which<br />

blocks the appropriate calcium Ca ++ and magnesium Mg ++ transformations.<br />

Rapeseed leaf stalks dipped in a diluted solution of oxalic acid in in vitro<br />

conditions wilt very quickly, lose their turgor pressure and turn their colour<br />

to brown. Brown spots of damaged leaves become dry after 24 hour. In vivo<br />

experiments carried out earlier in IHAR PIB revealed unequivocally that only<br />

younger B. napus tissues of both leaves and stems were infested more readily<br />

and quickly by the S. sclerotiorum pathogen. The performed investigations<br />

with the assistance of bromocresol green in vitro and Congo red in vivo made<br />

it possible to confirm the occurrence of dicarboxylic acid HOOC-COOH in<br />

the stems of B. napus. The material used in in vitro experiments comprised<br />

fragments of regenerated S. sclerotiorum mycelium which were placed on Petri<br />

dishes containing maltose medium with the indicator. Aggressive pathotypes<br />

of the fungus were capable to decolourise the medium completely already after<br />

72 hours. On the same dishes, after the period of about 4 weeks, the original<br />

colour was restored indicating neutralisation of the acid reaction. In in vivo<br />

conditions, fragments (straps approximately 5 cm long) were cut out on the<br />

stems of flowering rapeseed plants protecting them with airtight Parafilm. The<br />

Parafilm formed a bubble which was filled with a solution of Congo red. After<br />

7 days, the injured place (white-greenish) assumed a characteristic red colour.<br />

After this period, the indicator was removed and inoculation of a single plant<br />

was performed in the injured and discoloured place. Following the infestation


of the rapeseed plant with the pathogenic S. sclerotiorum fungus, a clear<br />

change of indicator colour into brown was observed confirming the change of pH<br />

from neutral to acid reaction. After further period of culturing of the infested<br />

rapeseed plants lasting approximately 4 weeks, the brown colour disappeared<br />

and a characteristic red colour appeared. The medium colouring reaction in in<br />

vitro and in vivo conditions was very similar, uniform.<br />

379


380<br />

GRZYBY PATOGENICZNE CHWASTÓW –<br />

POTENCJALNE ZAGROŻENIE ROŚLIN UPRAWNYCH<br />

Sylwia Stępniewska-Jarosz 1 i Henryk Ratajkiewicz 2<br />

1 Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Bank Patogenów<br />

Roślin i Badania Ich Bioróżnorodności, ul. Władysława Węgorka 20,<br />

60-318 Poznań<br />

2 Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Wydział Ogrodnictwa i Architektury<br />

Krajobrazu, Katedra Metod Ochrony Roślin, ul. Zgorzelecka 4,<br />

60-198 Poznań<br />

sylstep@poczta.onet.pl<br />

Niektóre chwasty są żywicielami groźnych dla roślin uprawnych bakterii,<br />

grzybów, wirusów czy szkodników. Zainfekowane chwasty pomagają rozprzestrzeniać<br />

się patogenom (i zwiększać nasilenie choroby) poprzez produkcję dodatkowego<br />

inokulum infekcyjnego. Ponadto są rezerwuarami grzybów patogenicznych<br />

dla roślin uprawnych w okresie ich nieobecności na polu. Pojawienie<br />

się na chwastach niektórych niebezpiecznych dla upraw grzybów nie zawsze<br />

powiązane jest z wystąpieniem objawów chorobowych.<br />

Badania prowadzono na terenie Poznania i okolic jesienią 2010 roku. Zebrano<br />

następujące gatunki chwastów z objawami chorobowymi: mlecz kolczasty<br />

(Sonchus asper (L.) Hill), ostrożeń polny (Cirsium arvense (L.) Scop.), rdest<br />

ptasi (Polygonum aviculare L.), tasznik pospolity (Capsella bursa-pastoris (L.)<br />

Medik.), skrzyp polny (Equisetum arvense L.), komosa biała (Chenopodium<br />

album L.) oraz bylica pospolita (Artemisia vulgaris L.). Materiał do izolacji<br />

pochodził z terenu upraw takich jak: kapusta biała, kapusta pekińska, brukselka,<br />

brokuł, kalafior, jarmuż, burak ćwikłowy, marchew, pietruszka i por.<br />

Z zainfekowanych części chwastów wyizolowano ponad 300 kultur grzybów<br />

– większość z nich została zidentyfikowana jako reprezentanci rodzajów Alternaria<br />

i Fusarium. Ponadto stwierdzono występowanie m.in. Botrytis cinerea<br />

Pers, Phoma spp. i Trichoderma spp. Grzyby te są dobrze znane jako patogeny<br />

wielu roślin uprawnych.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 380-381<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

PATHOGENIC FUNGI OF WEEDS – POTENTIAL DANGER FOR<br />

CULTIVATED PLANTS<br />

Some of weeds are hosts of dangerous for crops bacteria, fungi, viruses<br />

and pests. Infected weeds help spread of pathogens (and disease increase) by<br />

additional inoculum production. Moreover they are reservoirs of pathogenic<br />

fungi, which can survive during crops absence in a field. An emergence of<br />

dangerous for crop plants fungi on weeds are not connected with disease<br />

symptoms always.<br />

The research was carried out in Poznań region during autumn 2010.<br />

Fallowing weeds species with disease symptoms were collected: Sonchus<br />

asper (L.) Hill, Cirsium arvense (L.) Scop., Polygonum aviculare L., Capsella<br />

bursa-pastoris (L.) Medik, Equisetum arvense L., Chenopodium album L. and<br />

Artemisia vulgaris L. Plants for isolation were originated from crop plants<br />

such as cabbage, Chinese cabbage, Brussels sprout, broccoli, cauliflower, kale,<br />

beetroot, carrot, parsley and leek.<br />

From infected parts of weeds more than 300 fungi cultures were isolated –<br />

most of them were identified as Fusarium spp. and Alternaria spp. They are<br />

well known as many crops pathogens.<br />

381


382<br />

AKTYWNOŚĆ CELULOLITYCZNA GRZYBÓW Z RODZAJU<br />

TRICHODERMA I GATUNKU PHLEBIOPSIS GIGANTEA<br />

Judyta Strakowska, Lidia Błaszczyk i Jerzy Chełkowski<br />

Instytut Genetyki Roślin PAN, ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

jstr@igr.poznan.pl<br />

Celulazy wchodzą w skład kompleksu enzymów litycznych degradujących<br />

ścianę komórkową – CWDEs (Cell Wall Degrading Enzymes). Wraz z chitynazami,<br />

glukanazami, proteazami i innymi enzymami umożliwiają grzybom<br />

saprofitycznym z rodzaju Trichoderma oraz z gatunku Phlebiopsis gigantea<br />

działanie nadpasożytnicze wobec patogenów roślin.<br />

Grzyby z rodzaju Trichoderma są antagonistami względem wielu gatunków<br />

patogenów roślin, w tym z rodzaju Fusarium. Rozbudowany aparat działających<br />

synergistycznie enzymów celulolitycznych sprawia, iż Trichoderma wydajnie<br />

przeprowadza konwersję biomasy celulozowej do glukozy. Przemysłowo<br />

wykorzystywane są mutanty T. reesei QM 6a o zwiększonej produktywności<br />

celulaz, a także T. harzianum, T. koningii i T. viride. Obiecujące wydaje się wyselekcjonowanie<br />

naturalnie występującego izolatu o aktywności celulolitycznej<br />

porównywalnej ze szczepami uzyskanymi w procesie mutagenizacji T. reesei.<br />

Z kolei Phlebiopsis gigantea wykazuje właściwości nadpasożytnicze względem<br />

Heterobasidion annosum, będącego patogenem drzew iglastych, w szczególności<br />

sosny zwyczajnej. Zdolności te zostały wykorzystane w komercyjnych<br />

biopreparatach ochronnych przeciwko temu patogenowi. P. gigantea wnikając<br />

w tkanki drzewa, w tym w strefie korzeniowej, chroni je przed H. annosum.<br />

Przenosząc się przez korzenie na sąsiednie drzewa, również działa na nie protekcyjnie.<br />

Dodatkowo dzięki rozbudowanemu aparatowi celulaz, P. gigantea<br />

znajduje również zastosowanie do rozkładu pni drzew, co znacznie obniża koszty<br />

wycinki poprzez eliminację konieczności karczowania. Grzyb ten jest stosowany<br />

także do kompostowania kory. Po potraktowaniu pnia preparatem tego<br />

grzyba, powoduje on jego rozkład w czasie od pół roku do dwóch lat. Zasiedlone<br />

przez P. gigantea pniaki są ponadto niekorzystnym środowiskiem do rozmnażania<br />

Hylobius abietis, owadów również pasożytujących na drzewach iglastych.<br />

Materiał do badań stanowiło 191 izolatów różnych gatunków z rodzaju Trichoderma<br />

oraz 9 izolatów Phlebiopsis gigantea. Wszystkie izolaty pozyskano<br />

z próchniejącego drewna.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 382-384<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Do oznaczenia aktywności celulolitycznej wykorzystano metodę tzw. testu<br />

bibuły filtracyjnej (Filter Paper Assay). Spektrofotometrycznie oznaczono<br />

przy długości fali λ = 530 nm ilość cukru redukującego - w przeliczeniu na<br />

glukozę, powstałą na skutek hydrolizy enzymatycznej celulozy. Ostatecznie<br />

aktywność celulolityczną wyrażono w jednostkach FPU (Filter Paper Units).<br />

1 FPU = 1 μmol/ml×h.<br />

Aktywność celulolityczna dla poszczególnych izolatów Trichoderma była zróżnicowana<br />

i wynosiła od 4,56 FPU do 23,81 FPU. Izolaty o najwyższej aktywności<br />

celulolitycznej należały do gatunków: T. cremeum, T. harzianum, T. citrinoviride,<br />

T. gamsii, T. aggressivum, T. viride, T. viridescens, T. longibrachiatum,<br />

T. atroviride, T. koningii, T. virens oraz T. pseudokoningii. Natomiast w przypadku<br />

izolatów z gatunku Phlebiopsis gigantea od 10,16 FPU (izolat nr 1) do<br />

20,29 FPU (izolat nr 8).<br />

Summary<br />

CELLULOLYTIC ACTIVITY OF THE FUNGI FROM THE GENUS<br />

TRICHODERMA AND THE SPECIES PHLEBIOPSIS GIGANTEA<br />

Cellulases are part of lytic enzyme complex which degrade the cell wall -<br />

CWDEs (Cell Wall Degrading Enzymes). Along with chitinases, glucanases,<br />

proteases and other enzymes allow the saprofitic fungi from the genus<br />

Trichoderma and the species Phlebiopsis gigantea to act as an parasite towards<br />

plant pathogens.<br />

Fungi of Trichoderma species are antagonists of the many species of plant<br />

pathogens, including Fusarium spp. Extensively developed enzymatic apparatus<br />

of synergistically acting cellulolytic enzymes allows Trichoderma to efficiently<br />

carry out conversion of cellulosic biomass to glucose. Industrially used are<br />

mutants of T. reesei QM 6a that exhibit an enhanced cellulases productivity,<br />

and also isolates of T. harzianum, T. koningii and T. viride. It seems promising<br />

to select an naturally occurring cellulolytic isolates with activity comparable to<br />

strains obtained in the process of mutagenesis of T. reesei.<br />

Phlebiopsis gigantea has the property of an parasite toward the<br />

Heterobasidion annosum, which is a pathogen of conifers, especially Scots pine<br />

(Pinus sylvestris). These capabilities have been used in commercial protecting<br />

agents against this pathogen. P. gigantea by penetrating into the tree tissues<br />

in the root zone protects against H. annosum. Transmitted thru the roots of<br />

neighboring trees, also acts on them as biocontrol agent. Additionally, thanks<br />

to the enhanced cellulases apparatus, P. gigantea is also applicable to the<br />

disintegration of tree trunks, which reduces costs by eliminating the needs to<br />

forest clearing and for composting bark. After treatment of the tree stump with<br />

fungus inoculum, it is decomposed during the period of six months to two years.<br />

383


384<br />

Occupied by P. gigantea tree stumps are also unfavorable environment for the<br />

propagation of Hylobius abietis, also an parasite insect of coniferous trees.<br />

The study material consisted of 191 isolates of different species of the genus<br />

Trichoderma and 9 isolates Phlebiopsis gigantea. All isolates were obtained<br />

from decaying wood. For the determination of cellulolytic activity of the Filter<br />

Paper Assay was used. The amount of reducing sugar - glucose, resulting from<br />

enzymatic hydrolysis of cellulose was determined spectrophotometrically at<br />

a wavelength λ = 530 nm. Finally, cellulolytic activity was expressed in units of<br />

FPU (Filter Paper Units). 1 FPU = 1 μmol / ml × h.<br />

Cellulolytic activity of Trichoderma isolates for each was variable and ranged<br />

from 4.56 to 23.81 FPU. Isolates with the highest cellulolytic activity belonged to<br />

the species: T. cremeum, T. harzianum, T. citrinoviride, T. gamsii, T. aggressivum,<br />

T. viride, T. viridescens, T. longibrachiatum, T. atroviride, T. koningii, T. virens<br />

and T. pseudokoningii. However, for isolates of the species Phlebiopsis gigantea<br />

from 10.16 FPU (isolate No. 1) up to 20.29 (FPU isolate No. 8).


PRZEŻYWALNOŚĆ MIKROORGANIZMÓW<br />

W MIKROGRANULACH ALGINIANOWYCH<br />

Z DODATKIEM MATERIAŁÓW WSPOMAGAJĄCYCH<br />

Magdalena Szczech i Michał Oskiera<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3,<br />

96-100 Skierniewice<br />

magdalena.szczech@iwarz.pl<br />

W ostatnich latach w Pracowni Mikrobiologii Instytutu Ogrodnictwa wyselekcjonowano<br />

szereg szczepów bakterii oraz grzybów, które działają korzystnie<br />

na wzrost i zdrowotność roślin warzywnych. Działanie to polega na: produkcji<br />

antybiotyków hamujących rozwój grzybów patogenicznych, stymulacji<br />

wzrostu roślin oraz indukcji odporności w roślinach poprzez zwiększenie m.in.<br />

reakcji nadwrażliwości oraz lignifikacji korzeni.<br />

Pomimo pozytywnych rezultatów uzyskanych w wielu doświadczeniach<br />

z inokulowanymi roślinami wyniki nie są w pełni zadowalające z punktu widzenia<br />

potencjalnego odbiorcy, czyli producenta warzyw. Powodem tego jest<br />

fakt, że w dotychczas prowadzonych badaniach do inokulacji roślin lub gleby<br />

stosowano zawiesiny komórek bakterii lub zarodników grzybów. Jest to typowa<br />

metoda inokulacji prowadzona w pracach badawczych, w celu wyłonienia<br />

organizmów o potencjalnych właściwościach korzystnych dla wzrostu roślin.<br />

Jednak tej formy aplikacji nie można użyć w praktyce. Dla komercjalizacji<br />

produktu, a także aby wspomóc działanie wprowadzanych do środowiska<br />

organizmów, powinny być stosowane nośniki oraz właściwa formulacja tych<br />

nośników z mikroorganizmami. Zadaniem formulacji jest osłona i poprawa<br />

przeżywalności organizmów w środowisku glebowym, a także umożliwienie<br />

ich dłuższego przechowywania.<br />

Alginian sodu jest jednym z bardziej popularnych polimerów stosowanych<br />

do kapsułkowania mikroorganizmów. Ważną cechą tego polimeru jest zdolność<br />

do tworzenia żelowych kapsuł (granul), które ulegają degradacji w środowisku<br />

glebowym. W granulach można „uwięzić” liczne komórki mikroorganizmów,<br />

które zachowują aktywność metaboliczną w trakcie długotrwałego<br />

przechowywania. W glebie są stopniowo uwalniane w miarę biodegradacji<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 385-387<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

385


386<br />

żelu. Kapsułkowane bakterie, wprowadzane do nie sterylnej gleby przeżywają<br />

lepiej i intensywniej kolonizują korzenie niż bakterie zastosowane w formie<br />

wodnej zawiesiny.<br />

Stwierdzono, że najbardziej przydatne do inokulacji są mikrokapsuły alginianowe<br />

o średnicy 100-200 μm. Przeżywalność mikroorganizmów w tych<br />

kapsułach jest wyższa niż w większych granulach ze względu na dostęp tlenu.<br />

Celem badań jest opracowanie prostej i wydajnej metody formulacji aktywnych<br />

mikroorganizmów za pomocą mikrokapsuł alginianowych, która zapewni<br />

ich żywotność oraz stabilizację w trakcie przechowywania, a także wpłynie<br />

korzystnie na działanie tych mikroorganizmów po ich zastosowaniu w uprawach<br />

roślin. Prowadzone są również badania nad optymalizacją produkcji mikrokapsuł<br />

za pomocą dodatku różnych substancji wspomagających.<br />

Dla wytwarzania mikrokapsuł zmodyfikowano metodę produkcji w zawiesinie<br />

dyspersyjnej. Zastosowano następujące substancje wspomagające: odtłuszczone<br />

mleko, otręby pszenne, torf i chitozan. Oceniano wpływ proporcji<br />

oraz czasu mieszania tych składników na formowanie mikrogranul. Po wytworzeniu<br />

granul określano ich masę całkowitą, mierzono średnicę oraz badano<br />

liczebność mikrooragnizmów w zależności od dodatku materiału wspomagającego<br />

oraz zastosowanego izolatu. Część wytworzonych mikrogranul<br />

poddano procesowi „ponownego namnażania”. Następnie po odfiltrowaniu<br />

ponownie oceniano liczebność zasiedlających je mikroorganizmów. Najwięcej<br />

granul uzyskiwano w wariancie z dodatkiem torfu. Z kolei dodatek otrąb<br />

i chitozanu zwiększał średnicę pozyskiwanych granul. Stwierdzono różnice<br />

pomiędzy zastosowanymi izolatami bakterii w stopniu zasiedlania granul. Po<br />

„namnażaniu” liczebność mikroorganizmów w granulach zwiększała się ok.<br />

dziesięciokrotnie. Granule przechowywano w temperaturze 4 o C. W trakcie<br />

przechowywania sukcesywnie pobierano próby dla oceny przeżywalności mikroorganizmów<br />

oraz stopnia skażenia granul.<br />

Badania finansowane przez Ministerstwo Nauki i Szkolnictwa Wyższego,<br />

grant nr NN310119037.<br />

Summary<br />

VIABILITY OF MICROORGANISMS IN ALGINATE MICROBEADS<br />

SUPPLEMENTED WITH CARRIER MATERIALS<br />

The aim of the work was to develop the method of formulation of selected<br />

biocontrol agents, to enhance their survival during soil application and storage.<br />

The technique of alginate microbeads production was modified to obtain high<br />

yield of entrapped microorganisms. To increase viability of cells in the process<br />

of granules production, and then during long storage, carrier materials were


added to the beads. For this purpose different concentrations of peat, chitosan,<br />

wheat bran or skim milk were used. After granulation the yield, size and the<br />

number of cells entrapped in alginate microbeads were measured, according<br />

to the microorgamisms and carrier type used in the experiment. The highest<br />

yield of microbeads was obtained when sodium alginate was amended with<br />

peat. Application of chitosan and wheat bran increased size of the granules.<br />

The microbeads containing bacterial cells were cultured in nutrient broth for 24<br />

hours to increase the number of bacteria inhabiting the granules. It was found,<br />

that this additional treatment about ten-folds enhanced the number of cells<br />

in the granules. The microbeads were stored wet at 4 o C and microorganisms<br />

viability and beads contamination were estimated.<br />

387


388<br />

OCENA ZDROWOTNOŚCI DĘBU NA PODSTAWIE<br />

STOPNIA UBYTKU APARATU ASYMILACYJNEGO<br />

WYBRANYCH DRZEWOSTANÓW DĘBOWYCH<br />

NADLEŚNICTWA SMOLARZ<br />

Wojciech Szewczyk i Marlena Baranowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

wszew@up.poznan.pl<br />

Dąb bezszypułkowy i dąb szypułkowy ma ogromne znaczenie w gospodarce<br />

leśnej kraju. Drewno charakteryzuje się dużą wartością użytkową, a co za tym<br />

idzie ekonomiczną. Nie należy także pomniejszać roli jaką dęby odgrywają<br />

w ekologii lasu oraz w tworzeniu siedlisk leśnych. Celem pracy była ocena<br />

stanu zdrowotności wykonana na podstawie stopnia defoliacji drzewostanów<br />

dębowych w Nadleśnictwie Smolarz. Ocenę stopnia ubytku aparatu asymilacyjnego<br />

przeprowadzono w 10 oddziałach Leśnictwa Górzyska i w jednym<br />

oddziale należącym do Leśnictwa Czarny Las. Drzewostany, na których przeprowadzono<br />

obserwacje należą do VI klasy wieku (od 113 do 167 lat), których<br />

wiek rębności wynosi 180 lat. Większość oddziałów stanowi wyłączone<br />

drzewostany nasienne regionu matecznego 104 dębu bezszypułkowego. Ocena<br />

stopnia ubytku aparatu asymilacyjnego stanowi integralną część monitoringu<br />

fitopatologicznego przyjętego powszechnie w Europie. Analiza stanu zdrowotnego<br />

dębów przeprowadzona w Nadleśnictwie Smolarz wykazała, że drzewa<br />

były uszkodzone głównie w stopniu średnim – 40%, 28% w lekkim, 27% nie<br />

wykazało uszkodzeń. Przeciętny stopień defoliacji w Nadleśnictwie to stopień:<br />

2, czyli drzewa uszkodzone w stopniu średnim. Według danych Głównego<br />

Urzędu Statystycznego z 2010 roku 14,4% dęba w Polsce nie wykazało uszkodzeń,<br />

57,4% charakteryzowało się słabymi uszkodzeniami, 27,2% średnimi,<br />

a 0,9% silnymi. Obserwacje przeprowadzone w Nadleśnictwie Wołów w 2005<br />

i w 2010 roku wykazały, że sytuacja dębów na tym terenie jest zła. Drzewostany<br />

Pomorza Zachodniego są najbardziej uszkodzonymi drzewostanami w Polsce,<br />

których sytuacja pogarsza się gwałtownie z roku na rok. Obserwuje się co<br />

raz to większy odsetek drzew martwych.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 388-389<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

ASSESSMENT OF THE HEALTH CONDITION OF OAK<br />

ON THE BASIS OF THE DEGREE OF ASSIMILATION APPARATUS<br />

LOSSES IN OAK STAND OF THE SMOLARZ FOREST DISTRICT<br />

Sessile oak trees and common oak trees have a colossal importance In the<br />

forest economy. Their wood is characterized by a high use value and thereby a<br />

significant economic value. The oak trees play also an import ant role In forest<br />

economy and In the creation of forest habitats. The objective of the presented<br />

report also includes an estimation of the tree health condition which has been<br />

carried out on the basis of the defoliation degree of oak stands in the Forest<br />

District Smolarz.An estimation of the losses in the assimilation apparatus has<br />

been carried out in two division of the Górzyska and in one division belonging<br />

to Czarny Las. These stands belong to the age classes ranging from 113 to<br />

167 years and their felling maturity reaches 180 years. The majority of the<br />

compartments consist of separated seed crop stands of the parent tree region<br />

including 104-year old sessile oaks. The estimation of losses in the assimilation<br />

apparatus constitutes an integral part of a phytopathological monitoring<br />

commonly accepted in Europe. An analysis of the health condition of oak trees<br />

carried out in Forest District Smolarz has shown that the trees are mainly<br />

damaged in a medium degree (40%), 28 % of trees show slight degree damages<br />

and 27% did not show any damages. The average degree of defoliation in<br />

the Forest District showed the second degree damage, i.e. medium damage.<br />

According to data of Central Bureau for Statistics, in the year 2010, 14.4% of<br />

oak trees in Poland did not show any damages, 57.4% showed slight damages,<br />

27.2% were characterized by medium damages and only 0.9% were significantly<br />

damaged. Observations carried out in the Forest Division Wołów, in the years<br />

2005 and 2010 showed that the situation of oaks on that area was bad. The tree<br />

stands in West Pomerania represented the most damaged stands in Poland<br />

and their situation is deteriorating rapidly from year to year. The number of<br />

dead trees shows a progressing increase every year.<br />

389


390<br />

KIEŁKOWANIE, WIGOR I ZDROWOTNOŚĆ<br />

NASION KOPRU (ANETHUM GRAVEOLENS L.)<br />

PRODUKOWANYCH W POLSCE<br />

Dorota Szopińska, Krystyna Tylkowska, Magdalena Jarosz,<br />

Chunhui Song i Stefan Kopacz<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, Katedra Nasiennictwa Ogrodniczego,<br />

ul. Szamotulska 28, Baranowo, 62-081 Przeźmierowo<br />

dorota.szopinska@up.poznan.pl<br />

Koper ogrodowy jest jednoroczną rośliną przyprawową i leczniczą, pochodzącą<br />

z regionu Morza Śródziemnego, powszechnie uprawianą w Polsce. Należy<br />

do rodziny Apiaceae, a jego owocem jest rozłupnia złożona z dwóch rozłupek<br />

(nazywanych nasionami), charakteryzujących się wysoką zawartością olejku<br />

eterycznego. Stanowią one zarówno materiał siewny, jak i surowiec wykorzystywany<br />

w ziołolecznictwie i przemyśle spożywczym. Szerokie zastosowanie<br />

wpływa na wysokie wymagania co do ich jakości. Szczególnie istotna jest znajomość<br />

mikroorganizmów grzybowych, ponieważ niektóre z nich mogą mieć<br />

zdolność tworzenia toksyn, szkodliwych zarówno dla roślin, jak i ludzi. Celem<br />

pracy było określenie zdolności kiełkowania, wigoru i zdrowotności nasion kopru<br />

produkowanych w Polsce oraz ustalenie najlepszej metody wykrywania<br />

i identyfikacji grzybów w nasionach tego gatunku.<br />

Testowano 12 prób nasion kopru wyprodukowanych w latach 2008 i 2009<br />

(odm. Amat – 3 próby, odm. Ambrozja – 3 próby, odm. Krezus – 2 próby, odm.<br />

Skaner – 4 próby).<br />

Określano zdolność kiełkowania, liczbę kiełków anormalnych chorych i nasion<br />

martwych. Wigor nasion badano określając szybkość i równomierność<br />

kiełkowania. Zastosowano 7 metod oceny zdrowotności nasion: test bibułowy<br />

z przemrażaniem nasion, test bibułowy z mannitolem, test bibułowy z glikolem<br />

polietylenowym, test agarowy na pożywce dekstrozowo-ziemniaczanej (PDA)<br />

z odkażaniem nasion i bez ich odkażania oraz test agarowy ze zmniejszonym<br />

udziałem pożywki PDA z odkażaniem nasion i bez ich odkażania. Nasiona<br />

inkubowano 10 i 14 dni.<br />

Nasiona testowanych prób charakteryzowały się na ogół niską zdolnością<br />

kiełkowania (21,0-71,0%; średnio 45,3%), związaną z dużym udziałem siewek<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 390-392<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


anormalnych chorych (8,0-72,0%; średnio 23,3%) oraz nasion martwych (2,0-<br />

56,0%; średnio 21,0%). Próby różniły się znacząco szybkością i równomiernością<br />

kiełkowania. Czas potrzebny do wykiełkowania 1% nasion z ogólnej liczby<br />

nasion kiełkujących (T 1 ) wahał się u poszczególnych prób od 0,67 dnia do 2,06<br />

dni (średnio 1,58 dni), średni czas kiełkowania jednego nasienia (MGT) wynosił<br />

od 2,59 do 6,58 dni (średnio 3,64 dni), a czas potrzebny do wykiełkowania<br />

od 25 do 75% nasion z ogólnej liczby nasion kiełkujących (U 75-25 ) wynosił od<br />

0,52 dnia do 7,23 dni (średnio 1,76 dni).<br />

Wykryto 30 gatunków/rodzajów grzybów zasiedlających nasiona. Spośród<br />

nich najczęściej występowały: Alternaria alternata (Fr.) Keissler, Cladosporium<br />

spp., Epicoccum nigrum Link., Fusarium spp., Gonatobotrys simplex<br />

Corda, Penicillium spp., Rhizopus spp., Stemphylium spp. i Ulocladium spp.<br />

Wydłużenie okresu inkubacji nie miało wpływu na wykrywalność większości<br />

grzybów, za wyjątkiem Fusarium spp., Gonatobotrys simplex, Penicillium spp.<br />

i Rhizopus spp. Na podstawie otrzymanych wyników stwierdzono, że do dalszych<br />

badań nad oceną zdrowotności nasion kopru można zarekomendować<br />

test bibułowy z przemrażaniem nasion, test bibułowy z mannitolem i test bibułowy<br />

z glikolem polietylenowym.<br />

Summary<br />

GERMINATION, VIGOUR AND HEALTH OF DIIL<br />

(ANETHUM GRAVEOLENS L.) SEEDS PRODUCED IN POLAND<br />

Dill is an annual spice and medicinal plant originated from Mediterranean<br />

Region, commonly grown in Poland. The plant belongs to the Apiaceae<br />

family and its fruit is schizocarp composed of two mericarps (termed seeds),<br />

characterized by high content of essential oil. They are used for sowing<br />

purposes as well as in medicine and food industry. This broad usage requires<br />

high quality. Knowledge on the presence of fungal microorganisms is especially<br />

important because some of them could produce toxins harmful for plant and<br />

humans. The aims of the experiment was to determined germination capacity,<br />

vigour and health of dill seeds produced in Poland and finding the best method<br />

for detection and identification of fungi in the seeds of the species.<br />

Twelve dill seed samples (cv. Amat – 3 samples, cv. Ambrozja – 3 samples,<br />

cv. Krezus – 2 samples, cv. Skaner – 4 samples) produced in the years 2008 and<br />

2009 were tested.<br />

Germination capacity, number of abnormal diseased seedlings and dead<br />

seeds were determined. Speed and uniformity of germination characterized<br />

seed vigour. Seven methods for seed health testing were applied: deep freezeblotter<br />

test, blotter test with polyethylene glycol, blotter test with mannitol,<br />

agar test on potato dextrose agar (PDA) after seed disinfection, agar test on<br />

391


392<br />

PDA without seed disinfection, agar test on reduced PDA after seed disinfection<br />

and agar test on reduced PDA without seed disinfection. Seeds were incubated<br />

10 and 14 days.<br />

Generally the seeds were characterized by low germination capacity (21.0-<br />

71.0%; 45.3% on average), which was in conjunction with high number of<br />

abnormal diseased seedlings (8.0-72.0%; 23.3% on average) and dead seeds<br />

(2.0-56.0%; 21.0% on average). The samples differed significantly in speed and<br />

uniformity of germination. Time to 1% of a total number of germinating seeds<br />

(T 1 ) ranged from 0.67 to 2.06 days (1.58 days on average), mean germination<br />

time (MGT) – from 2.59 to 6.58 days (3.64 days on average) and time from 25<br />

to 75% of a total number of germinating seeds (U 75-25 ) ranged from 0.52 to 7.23<br />

days (1.76 days on average).<br />

Thirty fungal species/genera infesting the seeds were identified. Alternaria<br />

alternata (Fr.) Keissler, Cladosporium spp., Epicoccum nigrum Link.,<br />

Fusarium spp., Gonatobotrys simplex Corda, Penicillium spp., Rhizopus spp.,<br />

Stemphylium spp. and Ulocladium spp. occurred in the highest frequency.<br />

Prolonging incubation period had no influence on the detection of most fungi<br />

observed, except Fusarium spp., Gonatobotrys simplex, Penicillium spp. and<br />

Rhizopus spp. It was found, on the base of obtain results, that the deep freezeblotter<br />

test, blotter test with mannitol and blotter test with polyethylene glycol<br />

could be recommended for the further study on dill seeds health testing.


POZOSTAŁOŚCI ŚRODKÓW OCHRONY ROŚLIN<br />

W WARZYWACH KAPUSTNYCH<br />

Ewa Szpyrka, Magdalena Słowik-Borowiec i Anna Kurdziel<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Terenowa Stacja<br />

Doświadczalna, ul. Langiewicza 28, 35-101 Rzeszów<br />

e.szpyrka@iorpib.poznan.pl<br />

Wstęp<br />

Laboratorium Badania Pozostałości Środków Ochrony Roślin Instytutu<br />

Ochrony Roślin-Państwowego Instytutu Badawczego w Rzeszowie prowadzi<br />

badania pozostałości środków ochrony roślin (ś.o.r.) w materiale pochodzenia<br />

roślinnego, w glebie i wodzie. Badania te prowadzone są w ramach urzędowej<br />

kontroli realizowanej we współpracy z Państwową Inspekcją Ochrony Roślin<br />

i Nasiennictwa, a także na zlecenie firm zajmujących się produkcją oraz przetwórstwem<br />

owoców i warzyw.<br />

Materiał i metody<br />

W 2010 roku kontroli poddano 5 upraw należących do grupy kapustnych:<br />

brokułu, kalafiora, kapusty głowiastej białej, kapusty brukselskiej oraz kapusty<br />

pekińskiej. Program obejmował oznaczenie 133 substancji aktywnych ś.o.r.,<br />

wraz z metabolitami oraz produktami ich rozkładu. Do analizy stosowano zwalidowane<br />

metody chromatograficzne (GC/ECD/NPD) umożliwiające jednoczesne<br />

wykrycie wielu związków. Uzyskane wyniki porównywano z najwyższymi dopuszczalnymi<br />

poziomami pozostałości (NDP) obowiązującymi w Polsce (Rozporządzenie<br />

2005).<br />

W 2010 roku laboratorium uczestniczyło w międzynarodowych badaniach<br />

biegłości organizowanych przez Unię Europejską oraz w krajowych porównaniach<br />

międzylaboratoryjnych uzyskując poprawne wyniki i potwierdzając tym<br />

samym swoje kompetencje w zakresie prowadzonych badań.<br />

Wyniki i ich omówienie<br />

Wykonano analizy 87 próbek warzyw z grupy kapustnych. Pozostałości ś.o.r.<br />

stwierdzono w 28 próbkach (32%), przy czym w 7 próbkach (8%) przekroczyły<br />

one poziom NDP. Przekroczenia te wystąpiły w 1 próbce brokułu (pozostałość<br />

chloropiryfosu) i w 5 próbkach kapusty pekińskiej (pozostałości chlorotaloni-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 393-395<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

393


394<br />

lu, chloropiryfosu, dimetoatu, i trifloksystrobiny). Najwięcej pozostałości ś.o.r.<br />

stwierdzono w kapuście pekińskiej (66%) i kapuście brukselskiej (40%), natomiast<br />

najmniej w kalafiorze (4%).<br />

Najczęściej wykrywanymi substancjami były insektycydy: chloropiryfos oraz<br />

cypermetryna. W 2 próbkach kapusty pekińskiej wykryto pozostałości pirymetanilu<br />

– substancji aktywnej wchodzącej w skład ś.o.r. niezalecanych do ochrony<br />

tej uprawy.<br />

Uzyskane wyniki badań korelują z wynikami monitoringu pozostałości ś.o.r.<br />

prowadzonego na terenie całego kraju w roku 2009 (Nowacka i in. 2010). Szczegółowe<br />

dane o poziomach pozostałości ś.o.r. zamieszczone zostały w tabeli 1.<br />

Zgodnie z polskimi przepisami, informacje o przekroczeniach NDP stwierdzonych<br />

w uprawach oraz o zastosowaniu niedozwolonych preparatów zostały<br />

przekazane do Krajowego Punktu Kontaktowego w ramach systemu wczesnego<br />

ostrzegania o niebezpiecznych produktach żywnościowych i środkach żywienia<br />

zwierząt RASFF.<br />

Tabela 1. Występowanie pozostałości ś.o.r. w owocach i warzywach<br />

Uprawa<br />

Liczba<br />

badanych<br />

próbek<br />

Substancja aktywna<br />

Liczba próbek z<br />

pozostałościami<br />

Zakres wykrywanych<br />

pozostałości<br />

min max<br />

[mg/kg] [mg/kg]<br />

NDP*<br />

[mg/kg]<br />

Brokuł 15<br />

chloropiryfos<br />

cypermetryna<br />

3<br />

1<br />

0,02<br />

0,04<br />

0,082 —<br />

0,05<br />

0,5<br />

Kalafior 27 pirimikarb 1 0,01 — 2<br />

Kapusta<br />

chloropiryfos<br />

1<br />

0,01<br />

— 1<br />

głowiasta 11<br />

iprodion<br />

1<br />

0,11<br />

— 5<br />

biała<br />

pirimikarb<br />

1<br />

0,01<br />

— 1<br />

Kapusta<br />

brukselska<br />

5<br />

boskalid<br />

chloropiryfos<br />

trifloksystrobina<br />

1<br />

1<br />

1<br />

0,03<br />

0,02<br />

0,01<br />

—<br />

—<br />

—<br />

2<br />

0,05<br />

0,5<br />

azoksystrobina<br />

2<br />

0,03<br />

boskalid<br />

2<br />

0,30<br />

chloropiryfos<br />

8<br />

0,01<br />

chlorotalonil<br />

lambda-<br />

1<br />

0,05<br />

Kapusta<br />

pekińska<br />

29<br />

cyhalotryna<br />

cypermetryna<br />

1<br />

7<br />

deltametryna<br />

1<br />

dimetoat<br />

3<br />

iprodion<br />

3<br />

pyrimetanil<br />

2<br />

trifloksystrobina<br />

1<br />

2<br />

0,01<br />

0,01<br />

0,13<br />

0,032 0,06<br />

0,031 0,092 —<br />

0,36<br />

0,722 —<br />

—<br />

0,29<br />

—<br />

0,052 1,28<br />

0,041 5<br />

10<br />

0,5<br />

0,01<br />

1<br />

1<br />

0,5<br />

0,02<br />

5<br />

0,05<br />

— 0,02<br />

*NDP – najwyższe dopuszczalne poziomy pozostałości<br />

1 – substancja, której stosowanie nie jest zalecane w danej uprawie<br />

2 – substancja, której pozostałość przekroczyła najwyższy dopuszczalny poziom (NDP)


Wnioski<br />

Uzyskane wyniki badań wskazują na problemy rolników z ochroną upraw<br />

z grupy kapustnych, w szczególności kapusty pekińskiej, przed szkodnikami<br />

i chorobami, a także na potrzebę objęcia dalszą kontrolą stosowania ś.o.r.<br />

w tych uprawach.<br />

Summary<br />

PESTICIDE RESIDUES IN BRASSICA VEGETABLES<br />

In 2010 87 samples of brassica vegetables were surveyed. Pesticide residues<br />

were found in 28 (32%) of them. The most often insecticides were found:<br />

chlorpyrifos and cypermethrin. In 2 samples of Chinese cabbage pyrimethanil<br />

residues were found, which is not recommended for protection of that kind of<br />

crop. Violations of Maximum Residue Limits were found in 7 (8%) of analysed<br />

samples.<br />

Literatura<br />

Rozporządzenie (WE) nr 396/2005 Parlamentu Europejskiego i Rady z dnia<br />

23 lutego 2005 r. zmieniające dyrektywę Rady 91/414/EWG w sprawie najwyższych<br />

dopuszczalnych poziomów pozostałości pestycydów w żywności<br />

i paszy pochodzenia roślinnego i zwierzęcego oraz na ich powierzchni (Dz.<br />

Urz. UE, L 70/1, z dnia 16.03.2005 r., z późn. zm.).<br />

Nowacka A., Gnusowski B., Walorczyk S., Drożdżyński D., Wójcik A., Raczkowski,<br />

Hołodyńska A., Barylska E., Ziółkowski A., Chmielewska E., Rzeszutko<br />

U., Giza I., Jurys J., Łozowicka B., Kaczyński P., Rutkowska E.,<br />

Jankowska M., Szpyrka E., Rupar J., Rogozińska K., Kurdziel A., Słowik-<br />

-Borowiec M., Kuźmenko A., Szala J., Sadło S., 2010: Pozostałości środków<br />

ochrony roślin w płodach rolnych (rok 2009). Progress in Plant Protection/<br />

Postępy w Ochronie Roślin 50 (4): 1947-1962.<br />

395


396<br />

MIKOTOKSYNY W WARZYWACH EKOLOGICZNYCH<br />

Justyna Szwejda-Grzybowska, Ryszard Kosson, Magdalena<br />

Tuszyńska i Magdalena Szczech<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa, Pracownia Przetwórstwa<br />

i Oceny Jakości Warzyw, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

justyna.grzybowska@iwarz.pl<br />

Rolnictwo ekologiczne staje się coraz bardziej popularne, ponieważ rośnie<br />

popyt na świeże i wysokiej jakości warzywa i owoce. Produkty ekologiczne, ze<br />

względu na wykluczenie z systemu uprawy pestycydów i nawozów przetworzonych<br />

przemysłowo są uznawane za zdrowsze niż produkty z gospodarstw<br />

konwencjonalnych, które mogą zawierać pozostałości zastosowanych środków<br />

chemicznych. Z drugiej jednak strony, w uprawach gdzie nie używa się tych<br />

środków istnieje niebezpieczeństwo intensywnego rozwoju szkodliwych mikroorganizmów,<br />

w tym grzybów produkujących mikotoksyny. Związki te są toksycznymi<br />

metabolitami wtórnymi grzybów strzępkowych, tzw. pleśni, które<br />

wytwarzają je jako produkt uboczny lub w celach obronnych. Mikotoksyny kumulując<br />

się w organizmie mogą mieć silne działanie toksyczne, mutagenne lub<br />

teratogenne (Chełkowski 2010, Pitet 2005). Ze względu na różnorodne efekty<br />

toksyczne i wysoką odporność na działanie temperatury, obecność mikotoksyn<br />

w żywności stanowi potencjalne zagrożenie dla <strong>zdrowi</strong>a ludzi i zwierząt.<br />

Obecnie poznanych jest około czterystu metabolitów grzybów i ich pochodnych,<br />

które zaklasyfikowano do mikotoksyn (Chełkowski 2010). Podzielono je<br />

na sześć grup różniących się sposobem oddziaływania na organizmy wyższe:<br />

aflatoksyny, ochratoksyna A, patulina, fumonizyny, deoksyniwalenol (trichoteceny)<br />

i zearalenon (Chełkowski 2010, Pitet 2005). Związki te są syntetyzowane<br />

przez niektóre szczepy grzybów należących do rodzajów bardzo często<br />

spotykanych na roślinach warzywnych lub w produktach spożywczych pochodzenia<br />

roślinnego. Na przykład grzyby z rodzaju Aspergillus i Penicillium<br />

mają zdolność do wytwarzania aflatoksyn, ochratoksyny A i patuliny. Z kolei<br />

powszechne w uprawach grzyby Fusarium produkują fumonizyny, deoksyniwalenol<br />

i zearalenon. Zanieczyszczenie produktów rolnych mikotoksynami<br />

może nastąpić już podczas wegetacji roślin na polu. Ogromne zagrożenie stanowi<br />

jednak również rozwój grzybów toksynotwórczych na artykułach rolnych<br />

po zbiorze oraz podczas ich przechowywania w nieodpowiednich warunkach<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 396-398<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


(Moss 1989). Rozwój tych grzybów nie zawsze jest widoczny. Czasem produkty<br />

bez wyraźnych objawów pleśnienia mogą zawierać mikotoksyny (Pitet 2005).<br />

Dlatego tak ważna jest kontrola jakości żywności, w tym produktów pochodzących<br />

z gospodarstw ekologicznych, które mogą być bardziej podatne na skażenie<br />

mikotoksynami.<br />

Jak dotąd przeprowadzono niewiele badań dotyczących obecności mikotoksyn<br />

w warzywach. Nie ma też wyraźnych dowodów na to, że warzywa ekologiczne<br />

mogą zawierać więcej lub mniej mikotoksyn niż warzywa konwencjonalne.<br />

Z tego względu podjęto badania, których celem była ocena stopnia<br />

skażenia mikotoksynami warzyw produkowanych w gospodarstwach ekologicznych<br />

na terenie Polski.<br />

W pracy przedstawiono jednoroczne badania prób warzyw ekologicznych<br />

pobieranych w 12 gospodarstwach ekologicznych oraz 6 gospodarstw konwencjonalnych<br />

położonych w na terenie województw: łódzkiego, mazowieckiego<br />

i lubelskiego. Zawartość mikotoksyn badano w korzeniach marchwi i buraka<br />

ćwikłowego bezpośrednio po zbiorach oraz po przechowywaniu w chłodni,<br />

w temperaturze 3 o C przez 6 miesięcy. Analizowano obecność aflatoksyn ogółem,<br />

zearalenonu i ochratoksyny A. Zawartości mikotoksyn oznaczano za<br />

pomocą metody immunoenzymatycznej ELISA z wykorzystaniem testów Radiascreen<br />

firmy R-Biopharm AG na obecność wybranych mikotoksyn (Radiascreen®<br />

Aflatoxin Total, Radiascreen® Zearalenon, Radiascreen® Ochratoxin<br />

A). Testy wykonywano na czytniku Stat Fax 3200. Do ewaluacji wyników użyto<br />

oprogramowanie Rida Soft Win. Granica wykrywalności dla oznaczanych<br />

mikotoksyn wynosiła ok. 0,05 µg/kg (ppb). Korzenie marchwi i buraków wybierano<br />

losowo z prób 10 kg. Do badań pobierano 10 – 15 korzeni, które homogenizowano<br />

z 70% metanolem. Homogenizaty filtrowano za pomocą bibuły<br />

filtracyjnej, a filtrat wykorzystywano do wykonania testów Radiascreen<br />

W korzeniach warzyw, analizowanych bezpośrednio po zbiorach, stwierdzono<br />

głównie obecność aflatoksyn. Największe zawartości wykryto w marchwi,<br />

przy czym wyższy poziom tej mikotoksyny stwierdzano zawsze w próbach<br />

z gospodarstw ekologicznych. Zearalenon był obecny w niewielkich ilościach<br />

w korzeniach marchwi, ale nie obserwowano różnic między uprawą ekologiczną<br />

i konwencjonalną. Wykrywalność ochratoksyny A była bardzo niska we<br />

wszystkich badanych próbach.<br />

Po półrocznym przechowywaniu zawartość mikotoksyn w próbach warzyw<br />

wyraźnie wzrosła. W przypadku aflatoksyn wzrost ten obserwowano szczególnie<br />

w korzeniach marchwi i buraków z gospodarstw konwencjonalnych.<br />

We wszystkich próbach znacząco wzrosły zawartości zearalenonu i ochratoksyny<br />

A. Więcej zearalenonu wykrywano w korzeniach buraka. Nie stwierdzono<br />

różnic między materiałem roślinnym z gospodarstw ekologicznych ikonwencjonalnych.<br />

W przypadku ochratoksyny A największe zawartości wykrywano<br />

w korzeniach buraków ekologicznych.<br />

397


398<br />

Badania będą kontynuowane w kolejnych latach w gospodarstwach ekologicznych<br />

i konwencjonalnych położonych również w innych rejonach Polski.<br />

Summary<br />

MYCOTOXINS IN ORGANIC VEGETABLES<br />

Mycotoxins are toxic metabolites produced by filamentous fungi belonging<br />

mostly to genera Aspergillus, Penicillum and Fusarium. They may be present in<br />

various plant products causing immunological effects, specific organ damage or<br />

cancer in human or animals. Organic products, not treated with pesticides, are<br />

supposed to be especially exposed to mycotoxic contamination. The aim of the<br />

work was to control the quality of organic vegetables on the base of mycotoxins<br />

concentration. The presence of aflatoxins, zearalenon and ochratoxin A in carrot<br />

and beetroot was studied. When the fresh collected roots were examined only<br />

aflatoxins were detected. The concentration of this mycotoxin was about two<br />

times higher in the plant material collected from organic farms compared to<br />

conventional culture. After six month of storage in 3 o C the content of mycotoxins<br />

increased, especially in the vegetables from conventional farms. The highest<br />

concentrations were for aflatoxins and ochratoxin A. Generally there were no<br />

differences between the samples from organic and conventional farms.<br />

Literatura<br />

Chełkowski J., 2010: Mikotoksyny, grzyby toksyno twórcze i miko toksykozy.<br />

Wersja on-line: www.cropnet.pl/mycotoxin<br />

Pitet A., 2005: Naturalne występowanie mikotoksyn w żywności i paszach –<br />

nowe dane. Wyd. Natura 12, 1. 2. Grochowalski A.: Sample pretreatment<br />

methods for the determination of mycotoxins and other hazardous substances<br />

(dioxin). In food and feeding material using gas chromatography and<br />

double fragmentation mass spectrometry GC-MS/MS. IV Międzynarodowa<br />

Konferencja Naukowa, Olsztyn 2004, s. 45.<br />

Moss M. O., 1989: Mycotoxins of Aspergillus and other filamentous fungi.<br />

Journal of Applied Bacteriology. Symposium Supplement: 695.


WYSTĘPOWANIE I SZKODLIWOŚĆ WAŻNYCH<br />

GOSPODARCZO CHORÓB ZBÓŻ I KUKURYDZY<br />

W POLSCE W LATACH 2006-2010<br />

Anna Tratwal i Felicyta Walczak<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

A.Tratwal@iorpib.poznan.pl<br />

Gromadzenie informacji o szkodliwości agrofagów jest ściśle związane z potrzebami<br />

rolnictwa, ma ważne znaczenie w planowaniu ochrony roślin. Podstawowym<br />

działaniem, dzięki któremu uzyskuje się wiedzę o występowaniu<br />

i szkodliwości agrofagów są powszechne systematyczne obserwacje prowadzone<br />

na polach, w sadach, warzywnikach i innych miejscach produkcji roślinnej<br />

i jej przechowywania, tzw. monitoring agrofagów. Na terenie Polski monitorowanie<br />

agrofagów prowadzone jest przez pracowników Państwowej Inspekcji<br />

Ochrony Roślin i Nasiennictwa (PIORiN) według metodyk opracowanych<br />

przez pracowników naukowych Instytutu Ochrony Roślin – Państwowego Instytutu<br />

Badawczego (IOR – PIB) w Poznaniu i opublikowanych w Instrukcjach<br />

oraz aneksach do instrukcji i poradnikach, dotyczących sygnalizacji, prognozowania<br />

i rejestracji chorób i szkodników roślin rolniczych.<br />

Jednym z celów monitorowania agrofagów jest ocena ich szkodliwości, która<br />

wyrażana jest procentem porażonych roślin, liści, źdźbeł, kłosów, kolb itp. w<br />

zależności od obserwowanego agrofaga. Zgodnie z opracowanymi metodykami<br />

przeprowadzana jest jeden raz w roku w terminie ściśle określonym, indywidualnie<br />

dla każdego agrofaga. Wyniki obserwacji uzyskane w latach 2006-<br />

2010, podobnie jak w innych latach, przekazywane były przez pracowników<br />

PIORiN do Zakładu Metod Prognozowania Agrofagów i Ekonomiki Ochrony<br />

Roślin IOR – PIB w Poznaniu. Uzyskiwane każdego roku dane, dotyczące<br />

szkodliwości ważnych gospodarczo agrofagów, stanowią podstawowe źródło<br />

informacji o stanie fitosanitarnym roślin uprawnych w odniesieniu do obszaru<br />

całego kraju, a gromadzone na przestrzeni lat umożliwiają analizę wahań<br />

zmian liczbowych i rejonizacji występowania agrofagów.<br />

W latach 2006–2010 monitorowanymi, ważnymi gospodarczo chorobami<br />

zbóż były: mączniak prawdziwy zbóż –Blumeria graminis DC., rdza brunatna<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 399-401<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

399


400<br />

pszenicy – Puccinia recondita Rob. ex Desm. f. sp. tritici (Erikss.) C.O. Johnson,<br />

septorioza plew pszenicy – Phaeosphaeria nodorum (Müller) Hedjaroude, łamliwość<br />

źdźbła zbóż – Molisia yallundae Wollwork et Spooner, zgorzel podstawy<br />

źdźbła – Gaeumannomyces graminis (Sacc.) Arx et Olivier. Występowanie wymienionych<br />

chorób odnotowywane było powszechnie na terenie całego lub niemal<br />

całego kraju. Od roku 2008 oceniano ponadto nasilenie występowania fuzarioz<br />

kłosów zbóż i kolb kukurydzy – Fusarium spp., które z powodu zwiększenia<br />

się ich nasilenia występowania zostały uznane za agrofagi ważne gospodarczo.<br />

Na podstawie analizy pięcioletnich wyników ogólnokrajowej oceny szkodliwości<br />

agrofagów stwierdzono chociaż nieznacznie ale systematyczne zwiększanie<br />

się już od roku 2006 nasilenia występowania łamliwości źdźbła zbóż<br />

(z 3,8% porażonych źdźbeł do 4,8% w roku 2010) i zgorzeli podstawy źdźbła<br />

(z 3,2% porażonych roślin do 3,6% w roku 2010). W przypadku septoriozy plew<br />

pszenicy jej szkodliwość zwiększała się w latach 2006-2009 (z 6,5% do 12,4%),<br />

a w roku 2010 stwierdzono mniejsze średnie w skali kraju nasilenie występowania<br />

odnotowując 9,8% porażonych kłosów. Natomiast zwiększanie się średniego<br />

dla Polski procentu porażonych źdźbeł pszenicy ozimej przez mączniak<br />

prawdziwy zbóż następowało od roku 2008 (z 11,7% do 14,0% w roku 2009<br />

i 17,2 % w roku 2010), podobnie przez rdzę brunatną pszenicy (w roku 2008<br />

obserwowano 6,8%, w 2009 – 8,5% a w 2010 – 12,2% i była to ponadto wartość<br />

wyższa od średniej wieloletniej).<br />

W przypadku fuzarioz monitorowanie oceny szkodliwości na pszenicy ozimej<br />

rozpoczęto w roku 2008, odnotowując średnio dla Polski 2,2% porażonych<br />

kłosów, 5,4% w 2009 i 3,5% w 2010. Natomiast fuzariozy występujące na kukurydzy<br />

w roku 2008 i 2009 spowodowały porażenie średnio w kraju 2,1%<br />

kolb, a w roku 2010 znaczne zwiększenie się szkodliwości do 4,1%.<br />

Analizując rejonizację występowania monitorowanych chorób zbóż można<br />

stwierdzić, że stałymi rejonami, w których odnotowywano największą ich<br />

szkodliwość w latach 2006-2010 były rejony województw: położonych na północy<br />

i częściowo w południowo-wschodniej i południowo-zachodniej Polsce.<br />

W przypadku fuzarioz kolb kukurydzy najwięcej porażonych kolb odnotowywano<br />

w południowo-wschodniej i zachodniej części kraju.<br />

Uzyskana wiedza, dotycząca znaczenia gospodarczego poszczególnych<br />

agrofagów, rejonizacji ich występowania, zmian w nasileniu szkodliwości jest<br />

wykorzystywana przy prognozowaniu długoterminowym i podejmowaniu decyzji<br />

o zwalczaniu agrofagów.


Summary<br />

OCCURENCE AND HARMFULNESS OF IMPORTANT CEREALS’<br />

AND MAY’S DISEASES IN POLAND IN 2006-2010<br />

Collecting information concerning agrophages harmfulness is strictly<br />

connected with agriculture needs and have important meaning in the area of<br />

chemical control planning. Thanks to agrophages monitoring understood as a<br />

common and systematic observations provided at fields, orchards, vegetable<br />

gardens and other places where agriculture production and storage is provided,<br />

knowledge about occurrence and diseases harmfulness is possible.<br />

In Poland every year Plant Protection and Seed Health Inspection Service<br />

provide detailed field observations in order to get the information about<br />

phytosanitary state of agricultural plants. Obtained results from pests/diseases<br />

monitoring in connection with observations provide at the Plant Protection<br />

Institute at the Department of Forecasting and Registration Pest and Diseases,<br />

are the base of “Phytosanitary state of agricultural plants in Poland with<br />

prognosis to the next year” which is issued every year.<br />

In 2006-2010, in Poland more important diseases observed on cereals and mays<br />

were: powdery mildew – Blumeria graminis, brown rust – Puccinia recondita,<br />

septoria leaf spot – Septoria nodorum, take-all diseases - Pseudocercosporella<br />

herpotrichoides and Gaeumannomyces graminis (on winter wheat) and fusarium<br />

diseases on winter wheat ears and mays.<br />

Cereal’s diseases were observed in higher intensity at 2006-2010 at<br />

voivodeships located at north and partly south-west and south-east parts of<br />

Poland.<br />

Fusarium diseases on mays where observed in higher intensity at south-east<br />

and west part of Poland.<br />

Obtained results concerned agrophages economic value, regionalization,<br />

changes in harmfulness intensity is very useful for long-term prognosis and<br />

taking a decision about chemical control.<br />

401


402<br />

ZRÓŻNICOWANIE GENOMOWE I PATOGENICZNOŚĆ<br />

IZOLATÓW PHYTOPHTHORA PLURIVORA<br />

Z RÓŻNYCH ŹRÓDEŁ WODY<br />

Aleksandra Trzewik, Magdalena Ptaszek, Leszek B. Orlikowski<br />

i Teresa Orlikowska<br />

Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

Aleksandra.Trzewik@insad.pl<br />

Phytophthora plurivora Jung & Burgess to glebowy patogen charakteryzujący<br />

się szerokim spektrum roślin żywicielskich. Obok materiału roślinnego<br />

oraz skażonej gleby lub podłoża istotnym jego źródłem w środowisku uprawowym<br />

jak i naturalnym jest woda. Zdaniem Honga i Moormana (2005) zakażona<br />

woda jest głównym jeśli nie jedynym źródłem chorób powodowanych przez<br />

Phytophthora spp. w szkółkach, sadach i warzywnikach. Stosowanie do podlewania<br />

roślin w szkółkach wody pobieranej z rzek, strumieni czy też lokalnych<br />

zbiorników wodnych, skażonej zarodnikami Phytophthora spp., może stanowić<br />

realne zagrożenie upraw i doprowadzić do znacznych strat w produkcji.<br />

Celem przeprowadzonych doświadczeń było zbadanie zmienności genomowej<br />

95 izolatów P. plurivora uzyskanych z rzek przepływających obok gospodarstw<br />

szkółkarskich i szklarniowych oraz ze zbiorników wodnych i kanałów,<br />

zlokalizowanych na terenie szkółek lub w ich pobliżu, przy pomocy markerów<br />

molekularnych uzyskanych techniką PCR-ISSR. Do analizy wytypowano<br />

8 rzek, 5 stawów i 2 kanały. Badano również zróżnicowanie chorobotwórczości<br />

izolatów względem różaneczników odm. ‘Nova Zembla’. Blaszki liściowe testowych<br />

roślin inokulowano fragmentami pożywki przerośniętej P. plurivora, po<br />

4 i 6 dniach inkubacji mierzono średnicę nekrozy.<br />

Uzyskane wyniki wskazują na dużą zmienność genomową badanych kultur.<br />

Dendrogram wygenerowany na podstawie analizy produktów reakcji PCR<br />

dzieli w/w izolaty na 2 główne grupy, wśród których można wyróżnić kilka<br />

podgrup. W jednej głównej grupie znalazły się izolaty uzyskane w miesiącach<br />

wczesno-wiosennych i późno-jesiennych. Izolaty o najsilniejszej i najsłabszej<br />

zdolności kolonizacji liści skupiły się w oddzielnych podgrupach drugiej grupy.<br />

Najbardziej chorobotwórczymi okazały się kultury uzyskane z kanałów odprowadzających<br />

nadmiar wody z kontenerowni na terenie szkółek ozdobnych.<br />

Kolonizowały one tkanki różaneczników istotnie szybciej aniżeli izolaty z rzek.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 402-403<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

GENOMIC POLYMORPHISM AND PATHOGENICITY OF ISOLATES<br />

PHYTOPHTHORA PLURIVORA FROM DIFFERENT WATER SOURCES<br />

Phytophthora plurivora is the soil-borne pathogen with a wide range of host<br />

plants. Diseased plant material, contaminated soil and water are the sources<br />

of Phytophthora species in natural as well as cultivated environmental. In the<br />

opinion Hong and Moorman (2005) contaminated water, used for irrigation, is a<br />

primary, if not a sole, source of inoculum for Phytophthora disease of numerous<br />

nursery, fruit and vegetable crops. Used of water from rivers, streams or<br />

local reservoirs, contaminated with Phytophthora spp. for plant irrigation in<br />

nurseries, may cause high losses in the plant production.<br />

Genomic polymorphism and pathogenicity of P. plurivora was the purpose<br />

of this study. 95 isolates of P. plurivora were obtained from 8 rivers which are<br />

running near hardy ornamental nursery stocks and from 5 ponds and 2 canals,<br />

which are situated nearly or in nurseries. All isolates were used for inoculation<br />

of rhododendron leaf blades cv. ‘Nova Zembla’ by transferred of inocula on the<br />

middle point of leaves. After 4 and 6 days of incubation diameter of necrosis<br />

were measured.<br />

Obtained results indicated on high genomic diversity within this species.<br />

Dendrogram generated on the basis of an analysis of products of the PCR<br />

reaction is dividing isolates of P. plurivora into 2 major groups, amongst which<br />

a few subgroups are distinguish. In one major group were isolates obtained in<br />

early-spring and late-autumn months. Isolates with the strongest and weakest<br />

ability of the colonization of rhododendron tissues focussed in the separate<br />

subgroups. Isolates from canals colonized rhododendron leaves significantly<br />

faster than other cultures.<br />

403


404<br />

MIKROORGANIZMY ZASIEDLAJĄCE ZIARNO<br />

PSZENICY ORKISZ (TRITICUM SPELTA) UPRAWIANEJ<br />

W SYSTEMIE KONWENCJONALNYM I EKOLOGICZNYM<br />

Urszula Wachowska 1 , Bogumił Rychcik 2 , Wioletta Mikołajczyk 1<br />

i Katarzyna Kurek 1<br />

1 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-722 Olsztyn<br />

2 Uniwersytet Warmińsko-Mazurski, Katedra Systemów Rolniczych,<br />

pl. Łódzki 3, Olsztyn<br />

urszula.wachowska@uwm.edu.pl<br />

Wstęp<br />

Pszenica orkisz (Triticum spelta) posiada niewielkie wymagania pielęgnacyjno-ochronne.<br />

W porównaniu do innych gatunków pszenic charakteryzuje<br />

się lepszą wartością odżywczą oraz mniejszą podatnością na niektóre choroby.<br />

Cechy te predysponują ją do uprawy w rolnictwie ekologicznym. Pomimo braku<br />

chemicznej ochrony w tym systemie, czasami obserwuje się mały stopień<br />

zasiedlenie ziarna przez grzyby z rodzaju Fusarium, co ogranicza ryzyko jego<br />

zanieczyszczenia mikotoksynami. Wpływ ekologicznego systemu uprawy na<br />

równowagę między innymi grupami epifitów zasiedlających ziarno pszenicy<br />

orkisz jest słabo poznany. Wcześniejsze badania dowodzą, że ziarno licznie<br />

zasiedlone przez saprotroficzne bakterie i grzyby lepiej się przechowuje, stanowi<br />

także dobry materiał siewny do uprawy w rolnictwie ekologicznym. Celem<br />

badań była analiza liczebności zbiorowisk epifitycznych bakterii rodzaju<br />

Pseudomonas i Azotobacter oraz grzybów drożdżopodobnych i strzępkowych<br />

zasiedlających ziarniaki pszenicy orkisz uprawianej w systemie ekologicznym<br />

i konwencjonalnym.<br />

Materiały i metody<br />

Doświadczenie poletkowe zlokalizowano w Bałcynach w północno-wschodnim<br />

rejonie Polski. Przedmiotem badań była pszenica orkisz odmiany Schwabenkorn.<br />

Czynnikami doświadczenia były cztery płodozmiany 6-polowe (po<br />

dwa w systemie ekologicznym A i B oraz konwencjonalnym C i D) i obiekty<br />

z biopreparatem EM-A. Eksperyment założono metodą losowanych bloków<br />

w trzech powtórzeniach. W systemie konwencjonalnym oznaczonym symbolem<br />

C <strong>rośliny</strong> chroniono fungicydem Alert 375 SC zastosowanym w fazie pierwsze-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 404-406<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


go kolanka (BBCH 31) oraz preparatem Fandango 200 EC w okresie kłoszenia<br />

(BBCH 55). W płodozmianie D (konwencjonalnym intensywnym) w późniejszych<br />

fazach rozwojowych pszenicy orkisz dodatkowo wykonano zabieg preparatem<br />

Opera Max 147,5 SE (BBCH 75). W płodozmianie ekologicznym (B)<br />

oraz konwencjonalnym (D) na poletkach wprowadzono komercyjny biopreparat<br />

Efektywne Mikroorganizmy EM-A (Greenland Technologia EM Sp. z o.o.). Biopreparat<br />

aplikowano trzykrotnie zgodnie z zaleceniami producenta: doglebowo<br />

przed siewem oraz nalistnie wiosną (BBCH 22) i w okresie kłoszenia pszenicy<br />

ozimej (BBCH 55) w dawce po 20 l/ha.<br />

Ziarno do analiz mikrobiologicznych przeznaczono bezpośrednio po jego<br />

wymłóceniu. Zastosowano dwie techniki izolacji drobnoustrojów. Metoda posiewu<br />

zawiesin drobnoustrojów zmytych z powierzchni ziarniaków posłużyła<br />

do oceny liczebności bakterii rodzaju Pseudomonas i Azotobacter oraz grzybów<br />

drożdżoidalnych i strzępkowych. W celu uzyskania zawiesin drobnoustrojów<br />

10 gramowe próby ziarna wprowadzono do 250 ml kolb wypełnionych 90 ml<br />

sterylnej wody. Kolby wytrząsano, a następnie uzyskane zawiesiny wysiewano<br />

wgłębnie na odpowiednie podłoża. Do analizy struktury zbiorowisk grzybów<br />

strzępkowych zastosowano technikę wykładania ziarniaków na płytki Petriego<br />

wypełnione podłożem glukozowo-ziemniaczanym. Do przeprowadzenia analizy<br />

wariancji zastosowano program Statistica 9.0 (ANOVA). Do oceny istotności<br />

różnic między średnimi zastosowano test Newmana-Keulsa (P=0,01).<br />

Wyniki<br />

W latach 2008–2010 z ziarniaków pszenicy orkisz uprawianej w płodozmianach<br />

konwencjonalnych wyosobniono przeciętnie liczniejsze zbiorowiska analizowanych<br />

mikroorganizmów (bakterii rodzaju Azotobacter i Pseudomonas<br />

oraz grzybów drożdżoidalnych i strzępkowych) niż z ziarniaków roślin rosnących<br />

w płodozmianach ekologicznych. W zbiorowiskach drobnoustrojów pochodzących<br />

z płodozmianów ekologicznych bakterie rodzaju Azotobacter stanowiły<br />

od 57 do 60%. ogółu uzyskanych kolonii. Obecność znacznej liczby diazotrofów<br />

na powierzchni ziarniaków w okresie wschodów roślin sprzyja ich rozwojowi<br />

i podnosi wartość siewną ziarna. Liczebność zbiorowisk grzybów drożdżoidalnych<br />

i strzępkowych zmytych z powierzchni ziarniaków roślin uprawianych<br />

w ekologicznych była zróżnicowana, zdecydowanie większa na poletkach, na<br />

których pszenicę orkisz uprawiano po koniczynie z lucerną. Zbiorowiska grzybów<br />

strzępkowych pochodzących z tych płodozmianów były bardzo urozmaicone.<br />

Dominowały w nim kolonie saprotroficzne, patogeny rodzaju Fusarium<br />

izolowano rzadziej lub częściej niż z płodozmianów konwencjonalnych, w zależności<br />

od przedplonu. We wcześniejszych badaniach udowodniono, że w zależności<br />

od rejonu uprawy patogeny te rozwijają się gorzej lub lepiej na ziarnie<br />

zbóż uprawianych w systemie ekologicznym.<br />

Z ziarniaków pszenicy orkisz uprawianej po koniczynie czerwonej w płodozmianie<br />

konwencjonalnym C średnio z trzech lat badań uzyskano najliczniej-<br />

405


406<br />

sze zbiorowisko analizowanych diazotrofów. Grzyby strzępkowe pojawiały się<br />

tu dość często, gatunki rodzaju Fusarium stanowiły nawet 31,1 % wyosobnień.<br />

Zbiorowisko drobnoustrojów uzyskane z ziarniaków roślin rosnących w płodozmianie<br />

C po ziemniaku wyróżniło się najmniejszą liczebnością grzybów<br />

drożdżopodobnych.<br />

Intensywne zabiegi ochronne zastosowane w płodozmianie D wpływały<br />

znacząco na zachwianie homeostazy między drobnoustrojami. W zbiorowiskach<br />

tych dominowały bakterie rodzaju Pseudomonas, stanowiące od 49,7%<br />

do 64,1% ogółu kolonii epifitów ziarniaków w zależności od przedplonu. Dodatkowo<br />

z ziarniaków pszenicy orkisz uprawianej po ziemniaku traktowanej<br />

biopreparatem EM-A uzyskano najmniej liczne zbiorowisko analizowanych<br />

diazotrofów. Należy przypuszczać, że zmiany te obniżały mikrobiologiczną<br />

wartość siewną ziarna. W systemie tym na pozyskanym ziarnie roślin odnotowano<br />

także znaczny odsetek grzybów rodzaju Fusarium.<br />

Reasumując należy podkreślić, że w płodozmianach ekologicznych, na ziarnie<br />

orkiszu ozimego, zbiorowiska bakterii rodzaju Azotobacter stanowiły większy<br />

odsetek ogółu mikroorganizmów niż w płodozmianach konwencjonalnych.<br />

W systemie ekologicznym liczebność zbiorowisk grzybów strzępkowych oraz<br />

odsetek kolonii patogenów rodzaju Fusarium uzależnione były od przedplonu<br />

i aplikacji preparatu EM-A. Intensyfikacja uprawy w płodozmianach konwencjonalnych<br />

prowadziła do zwiększenia liczebności zbiorowisk bakterii rodzaju<br />

Pseudomonas na ziarniakach i ograniczenia liczby epifitycznych diazotrofów.<br />

Intensywne zabiegi ochronne nie eliminowały występowania grzybów rodzaju<br />

Fusarium.<br />

Summary<br />

MICROORGANISMS COLONIZING THE KERNELS OF SPELT<br />

(TRITICUM SPELTA) GROWN IN THE CONVENTIONAL<br />

AND ORGANIC FARMING SYSTEMS<br />

The effects of organic and conventional farming systems, forecrops and<br />

the Effective Microorganisms (EM-A) biofertilizer on the composition of<br />

microbial communities colonizing the kernels of spelt cv. Schwabenkorn were<br />

determined in a field experiment conducted in 2008 – 2010. Bacteria of the<br />

genus Azotobacter had a higher share of the microbial community in the organic<br />

system than in the conventional system. In the organic system, the abundance<br />

of filamentous fungi was affected by the forecrop and EM-A application. The<br />

occurrence frequency of Fusarium pathogens was also determined by the above<br />

factors. Intensive farming systems contributed to an increase in the population<br />

size of Pseudomonas bacteria isolated from spelt kernels, and to a decrease in<br />

the number of epiphytic diazotrophs. The applied protective treatment did not<br />

eliminate fungi of the genus Fusarium.


REAKCJA EPIFITÓW I ENDOFITÓW ZIARNA PSZENICY<br />

OZIMEJ NA ZABIEGI BIOLOGICZNE I CHEMICZNE<br />

Urszula Wachowska, Anna Daria Stasiulewicz-Paluch,<br />

Katarzyna Kurek i Wioletta Mikołajczyk<br />

Uniwersytet - Warmińsko Mazurski , Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-722 Olsztyn<br />

urszula.wachowska@uwm.edu.pl<br />

Wstęp<br />

W uprawie pszenicy ozimej zastosowanie chemicznych środków ochrony<br />

roślin jest nieodzownym elementem uprawy, który ogranicza występowanie<br />

agrofagów i pozwala uzyskać jego zadowalającą jakość. W systemie integrowanym<br />

dąży się do ograniczania stosowania chemicznych środków ochrony<br />

roślin, między innymi poprzez wprowadzanie zabiegów biologicznych. Stosowane<br />

są również substancje skracające źdźbło zbóż poprzez hamowanie biosyntezy<br />

gibereliny (GA), preparaty stymulujące rozwój roślin lub stymulatory<br />

odporności roślin. Oddziaływanie tych preparatów na mikroorganizmy<br />

związane z rośliną uprawną jest słabo poznane. Niekorzystne zmiany w ich<br />

strukturze mogą prowadzić do pogorszenia mikrobiologicznej wartości siewnej<br />

ziarna lub nagromadzenia toksynotwórczych grzybów rodzaju Fusarium.<br />

Celem badań była analiza liczebności zbiorowisk epifitycznych i endofitycznych<br />

bakterii rodzaju Azotobacter i Pseudomonas oraz grzybów strzępkowych<br />

i drożdżoidalnych zasiedlających ziarniaki pszenicy ozimej traktowanej fungicydami,<br />

regulatorem wzrostu, stymulatorem wzrostu, induktorem odporności<br />

roślin oraz zawiesiną bakterii rodzaju Pseudomonas.<br />

Materiały i metody<br />

Ziarno do badań mikrobiologicznych pobierano z kłosów pszenicy ozimej<br />

odmiany Bogatka rosnącej w hali wegetacyjnej. Doświadczenie wazonowe założono<br />

w trzech powtórzeniach. Do wazonów wypełnionych ziemią wprowadzono<br />

powierzchniowo odkażone ziarniaki, lub ziarniaki pokryte zawiesiną<br />

bakterii rodzaju Pseudomonas w kombinacji z ochroną biologiczną. W okresie<br />

wegetacji w każdej kombinacji zastosowano dwa zabiegi, w fazie strzelania<br />

w źdźbło (BBCH 31) i kłoszenia (BBCH 53). Zastosowano następujące zesta-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 407-410<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

407


408<br />

wienia preparatów: Corbel 750 EC (fenpropimorf) i Opera Max 147,5 SE (piraklostrobina,<br />

epoksykonazol), Moddus 250 EC (trineksapak etylu) i Amistar<br />

250 SC (azoksystrobina) oraz Asahi SL (orto-nitrofenol, para-nitrofenol, 5-nitroguajakol)<br />

i Biochikol 020 PC (chitozan). Wszystkie preparaty zastosowano<br />

w dawkach zalecanych przez producentów. W ochronie biologicznej dwukrotnie<br />

zastosowano zawiesinę komórek bakterii rodzaju Pseudomonas w koncentracji<br />

10 8 ml -1 . Kontrolę stanowiły <strong>rośliny</strong> dwukrotnie opryskiwane wodą.<br />

W okresie kwitnienia kłosy roślin z kombinacji kontrolnej oznaczonej symbolem<br />

F oraz we wszystkich kombinacjach z ochroną chemiczną i biologiczną<br />

inokulowano zawiesiną komórek patogenu Fusarium culmorum. Analizy<br />

mikrobiologiczne ziarna przeprowadzono bezpośrednio po jego zbiorze. Epifity<br />

zmywano z 10 gramowych prób ziarna sterylną wodą poprzez wytrząsanie ziarniaków<br />

w kolbach. Endofity pochodziły z roztartych, odkażonych powierzchniowo<br />

ziarniaków. Liczebność mikroorganizmów analizowano na płytkach<br />

Petriego wypełnionych selektywnymi podłożami. Ich liczbę określono według<br />

wzoru zawartego w normie PN-ISO 7954. Analizę wariancji przeprowadzono<br />

z wykorzystaniem programu Statistica 9.0, istotność różnic określono testem<br />

Newmana-Keulsa (p=0,01).<br />

Wyniki<br />

Liczebność epifitycznych grzybów strzępkowych i drożdżoidalnych oraz<br />

bakterii rodzaju Pseudomonas była na ogół większa niż liczebność analizowanych<br />

organizmów endofitycznych. Jedynie z roślin traktowanych dwukrotnie<br />

zawiesiną bakterii rodzaju Pseudomonas liczebność kolonii epifitów należących<br />

do tego rodzaju wzrosła ponad 30-krotnie w porównaniu z kontrolą i była<br />

większa niż liczebność endofitycznych bakterii rodzaju Pseudomonas. Zabiegi<br />

biologiczne jako jedyne przyczyniły się do ograniczanie liczebności zbiorowiska<br />

grzybów strzępkowych. Wykazywały także tendencję do ograniczania rozwoju<br />

epifitycznego zbiorowiska bakterii rodzaju Azotobacter.<br />

Duża siła antagonistycznego i konkurencyjnego oddziaływania bakterii rodzaju<br />

Pseudomonas jest często opisywana w literaturze. Wydaje się, że podobny<br />

mechanizm oddziaływania wykazywał patogen F. culmorum. Naniesienie<br />

zawiesiny jego zarodników na <strong>rośliny</strong> w okresie ich kwitnienia przyczyniło<br />

się do istotnego wzrostu liczebności epifitycznych grzybów strzępkowych. Pozostałe<br />

analizowane zbiorowiska drobnoustrojów uzyskane z tej kombinacji<br />

okazały się dwu a nawet 28-krotnie mniej liczne niż zbiorowiska pochodzące<br />

z kombinacji kontrolnej.<br />

Z ziarniaków pszenicy ozimej opryskiwanej preparatami Moddus 250 SC<br />

i Amistar 250 SC uzyskano istotnie większe zbiorowiska epifitycznych grzybów<br />

drożdżoidalnych, strzępkowych oraz bakterii rodzaju Pseudomonas.<br />

Wśród grzybów strzępkowych dominowały grzyby rodzaju Fusarium. W kom-


inacji tej odnotowano także istotny, w porównaniu z kontrolą, wzrost liczebności<br />

zbiorowiska endofitycznych bakterii rodzaju Pseudomonas. Zastosowane<br />

preparaty wykazywały dużą siłę oddziaływania na fizjologię roślin, co prawdopodobnie<br />

skutkowało znaczącym wzrostem liczebności większości analizowanych<br />

mikroorganizmów.<br />

Z ziarna pszenicy ozimej chronionej fungicydami Corbel 750 EC i Opera<br />

Max 147,5 SE uzyskano prawie pięciokrotnie liczniejsze zbiorowisko endofitycznych<br />

bakterii rodzaju Pseudomonas i ponad trzykrotnie liczniejsze<br />

zbiorowisko endofitycznych grzybów drożdżoidalnych niż z ziarna roślin<br />

niechronionych. Zabiegi te nie ograniczały liczebności zbiorowiska grzybów<br />

strzępkowych. Zastosowanie biostymulatora Asahi SL oraz stymulatora odporności<br />

roślin Biochikol prowadziło do istotnego wzrostu liczebności endofitycznych<br />

bakterii rodzaju Azotobacter w porównaniu z kombinacją kontrolną.<br />

Reasumując należy odnotować, że z ziarna pszenicy ozimej traktowanej zawiesiną<br />

bakterii rodzaju Pseudomonas otrzymano najliczniejsze zbiorowisko<br />

epifitycznych bakterii tego rodzaju, które wykazywały inhibicyjne oddziaływanie<br />

w stosunku do pozostałych grup mikroorganizmów. Inokulacja kłosów<br />

patogenem F. culmorum przyczyniła się do redukcji liczebności wszystkich<br />

analizowanych endofitów oraz epifitycznych bakterii. Zastosowanie preparatów<br />

Moddus 250 EC i Amistar 250 SC spowodowało wzrost liczebności większości<br />

analizowanych mikroorganizmów. Siła oddziaływania tych preparatów<br />

na epifity była większa niż na endofity. Fungicydy wykazywały oddziaływanie<br />

stymulujące szczególnie w stosunku do endofitycznych bakterii rodzaju Pseudomonas<br />

i grzybów drożdżopodobnych. Biostymulator i stymulator odporności<br />

roślin stymulowały rozwój endofitycznych bakterii rodzaju Azotobacter.<br />

Summary<br />

THE RESPONSE OF EPIPHYTIC AND ENDOPHYTIC MICROBIAL<br />

COMMUNITIES COLONIZING WINTER WHEAT GRAIN<br />

TO BIOLOGICAL AND CHEMICAL CONTROL<br />

The aim of this study was to determine the response of endophytic and<br />

epiphytic bacteria of the genera Azotobacter and Pseudomonas, and filamentous<br />

and yeast-like fungi colonizing the kernels of winter wheat cv. Bogatka<br />

to the application of Corbel 750 EC (fenpropimorph), Opera Max 147.5 SE<br />

(pyraclostrobin, epoxiconazole), Amistar 250 SC (azoxystrobin), Moddus 250<br />

EC (trinexapac-ethyl), Asahi SL (ortho-nitrophenol, para-nitrophenol, 5-nitroguaiacol),<br />

Biochicol 020 PC (chitosan), and a cell suspension of Pseudomonas<br />

bacteria. The experiment was carried out in a greenhouse. The most<br />

abundant community of epiphytic Pseudomonas bacteria was isolated from<br />

the grain of winter wheat treated with the cell suspension of Pseudomonas.<br />

409


410<br />

The above bacteria had an inhibitory effect on the other microbial groups. The<br />

application of Moddus 250 EC and Amistar 250 SC led to an increase in the<br />

population size of the majority of microorganisms. Those fungicides exerted a<br />

stronger effect on epiphytes than on endophytes The most abundant community<br />

of endophytic Azotobacter bacteria was isolated from the grain of wheat<br />

plants spayed with the biostimulator and the plant defense activator.


WPŁYW WYBRANYCH ZAPRAW NA ZDROWOTNOŚĆ<br />

NASION ZINNIA ELEGANS L. I TAGETES ERECTA L.<br />

Anna Wagner i Ewelina Wrona<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Ochrony i Kwarantanny Roślin,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

wagnerania@gmail.com<br />

Nasiona Zinnia elegans i Tagetes erecta zaprawiano preparatami Bioczos,<br />

Grevit, Rovral Flo, Oxafun T oraz poddano działaniu olejku tymiankowego<br />

i ciepłej wody. Kontrolę stanowiły nasiona płukane w sterylnej wodzie destylowanej.<br />

Nasiona wykładano na pożywkę mineralną w płytkach Petriego.<br />

Po 7 dniach wyrosłe kolonie odszczepiano na skosy PDA. W zbiorowiskach<br />

grzybów zasiedlających nasiona cynii dominowały Fusarium avenaceum, Fusarium<br />

sporotrichioides i Alternaria alternata, natomiast z nasion aksamitki<br />

uzyskano najwięcej kolonii Botrytis cinerea, Fusarium oxysporum i Fusarium<br />

avenaceum. Najskuteczniejszymi zaprawami okazały się Oxafun T i olejek tymiankowy.<br />

Stosując Oxafun T uzyskano stuprocentową ochronę nasion cynii,<br />

a z nasion aksamitki otrzymano tylko 10 kolonii. Z nasion cynii zaprawianych<br />

olejkiem tymiankowym wyizolowano tylko 23 kolonii, natomiast z nasion aksamitki<br />

nie otrzymano żadnych grzybów. W pozostałych kombinacjach uzyskano<br />

liczne kolonie grzybów uznawanych za patogeniczne, przy czym zbiorowiska<br />

grzybów różniły się składem gatunkowym.<br />

Summary<br />

EFFECT OF SELECTED SEED DRESSINGS ON HEALTH STATUS<br />

OF ZINNIA ELEGANS L. AND TAGETES ERECTA L. SEEDS<br />

The seeds of Zinnia elegans and Tagetes erecta were treated with Bioczos,<br />

Grevit, Rovral Flo, Oxafun T, thyme oil and warm water. In the control<br />

combinations the deeds were only rinsed with sterilized distilled water. The<br />

seeds were placed on mineral medium in Petri dishes. After 7 days the fungal<br />

colonies were transplanted into PDA slants. Fusarium avenaceum, Fusarium<br />

sporotrichioides and Alternaria alternata predominated in the fungal<br />

communities colonizing the seeds of zinnia, while from the seeds of marigold<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 411-412<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

411


412<br />

Botrytis cinerea, Fusarium oxysporum and Fusarium avenaceum were isolated<br />

most frequently. Oxafun T and thyme oil proved to be the most effective.<br />

Oxafun T protected fully the seeds of zinnia and from the seeds of marigold<br />

only 10 colonies were isolated. From the seeds of zinnia treated with thyme oil<br />

only 23 colonies were obtained and from the seeds of marigold no colonies were<br />

isolated. Numerous colonies of fungi regarded as pathogenic were obtained in<br />

the other combinations, at the same time the fungal communities differed in<br />

the composition of species.


WYKORZYSTANIE TECHNIKI PODWOJONYCH<br />

HAPLOIDÓW DO PODNIESIENIA ODPORNOŚCI PSZENICY<br />

ORAZ PSZENŻYTA NA STAGONOSPORA NODORUM<br />

Jakub Walczewski i Edward Arseniak<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Fitopatologii Radzików, 05-870 Błonie<br />

j.walczewski@ihar.edu.pl<br />

W hodowli zbóż duży wpływ na skrócenie czasu oraz ułatwienie oceny cech<br />

agronomicznych ma praca nad materiałem homozygotycznym. Linie podwojonych<br />

haploidów pozwalają na ocenę fenotypu bez wpływu alleli recesywnych<br />

bądź niepełnej dominacji, co jest niezwykle przydatne podczas hodowli w celu<br />

uzyskania odmian o określonych cechach w tym również odporności na patogeny.<br />

W celu szybkiego wytworzenia homozygot można wykorzystać proces<br />

androgenezy poprzedzający spontaniczne lub indukowane podwojenie haploidalnego<br />

genomu.<br />

Celem doświadczeń było określenie stopnia odporności plew kłosów i liści<br />

otrzymanych linii DH oraz porównanie ich na tle obecnie uprawianych odmian<br />

pszenicy i pszenżyta.<br />

Zgodnie z założonym celem ziarniaki F1, pszenicy oraz pszenżyta wysiewano<br />

do podłoża w komorach fitotronowych. Kłosy zbierano w środkowej fazie<br />

jednojądrowego stadium mikrospor i przechowywano przez 7 do 10 dni w<br />

chłodni. Pylniki wykładano na pożywkę CLM bądź A i przenoszono do inkubatora<br />

do temp. 26 °C. Po około 6 tygodniach rozpoczynano sukcesywne przekładanie<br />

wytworzonego z mikrospor kalusa na pożywkę R1. Następnie, wytworzone<br />

z kalusa <strong>rośliny</strong> przenoszono do kolbek na pożywkę ukorzeniającą R4.<br />

Zregenerowane <strong>rośliny</strong> po ukorzenieniu poddawano wernalizacji, przesadzano<br />

do pojemników z ziemią. i pozostawiano do wytworzenia ziarniaków.<br />

Z uzyskanych linii DH jak i użytkowanych w Polsce odmian pszenicy i pszenżyta<br />

zostało założone doświadczenie polowe. Poletka 1m 2 o losowej kolejności<br />

w trzech powtórzeniach inokulowano mieszaniną zarodników pyknidialnych<br />

trzykrotnie w ciągu sezonu: w fazie wczesnej butonizacji GS 45 w fazie kłoszenia<br />

GS 59 oraz w fazie kwitnienia GS 65.<br />

Poletka kontrolne chroniono Tiltem 250 EC (0,1% propikonazol). Ocenę<br />

stopnia porażenia roślin prowadzono w równych odstępach czasu od chwili<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 413-415<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8<br />

413


414<br />

pojawienia się objawów do naturalnego zamierania roślin. W doświadczeniu<br />

mierzono: wysokość (cm), wczesność (liczba dni od 01.01 do kłoszenia), porażenie<br />

liści i plew kłosów (1 podatne - 9 odporne).<br />

Uzyskane wyniki pozwalają stwierdzić, że technika podwojonych haploidów<br />

ułatwia poszukiwania linii cechujących się wysoką odpornością, a niektóre<br />

z uzyskanych linii mogą być wykorzystywane jako źródła odporności na<br />

Stagonospora nodorum.<br />

Summary<br />

UTILIZATION OF DOUBLED HAPLOID TECHNIQUE TO ENHANCE<br />

STAGONOSPORA NODORUM BLOTCH RESISTANCE<br />

IN WINTER WHEAT AND TRITICALE<br />

In breeding of cereals an important factor is to shorten breeding cycle and<br />

simplify evaluation of agronomic traits. This currently is being achieved by<br />

working with homozygotic plant material. Doubled haploid lines allow for<br />

phenotyping without recessive alleles and co-domination influence. This is<br />

important in breeding oriented to specific trait like better pathogen resistance<br />

acquire. A homozygotic state it is possible to generate by androgenesis process,<br />

subsequently followed by spontaneous or induced doubling of haploid genome.<br />

The purpose of the present study was to develop DH lines of wheat and<br />

triticale and to compare their resistance to Stagonospora nodorum blotch with<br />

conventionally developed varieties of both crops under field conditions.<br />

In order to fulfill assumed purpose F1 kernels of winter wheat and winter<br />

triticale were sown to pots filled up with soil in a chamber with control environment<br />

conditions, such temperature, light, soil and air humidity.<br />

Spikes were collected in mid-uninucleate stage of microspores, and preserved<br />

for 7 to 10 days in a fridge. Cold treated anthers were placed on CLM or<br />

A medium, and incubated at 26 °C.<br />

After about 6 weeks emerged calluses were transferred on R1 medium.<br />

Callus derived plants were transferred to R4 rooting medium. The regenerated<br />

plants were vernalized, then transferred to a soil and left until grain<br />

production. Then the seed was harvested and used to establish a field trial to<br />

test newly developed DH lines for their resistance to Stagonospora nodorum.<br />

Concurrently with DH lines wheat and triticale varieties were tested for resistance<br />

to the pathogen. Random 1m 2 plots triplicate for etch variety, were<br />

inoculated three times with a water suspension mix of pycnidiospores.<br />

Inoculations of plants were done at decimal growth stages: GS 45, 59,<br />

65 (Zadoks 1974). The control plots were sprayed with Tilt 250 EC (0,1 %<br />

propikonazol). Scoring of plants on the plots was done at one week intervals<br />

from time of appearance of first symptoms to plant death. In addition to scor-


ing the disease symptoms developed on leaves and spikes (1 susceptible, 9<br />

resistant) also such parameters like height (cm), earliness (days from 01.01 to<br />

heading) in field trials were evaluated.<br />

The results of our field trials prove that doubled haploid technique make<br />

easier to gain resistant lines. Several of our DH lines can be used as resistant<br />

donor for breading.<br />

415


416<br />

OCENA PATOGENICZNOŚCI IZOLATÓW ASCOCHYTA<br />

FABAE SPEG. WOBEC BOBIKU (VICIA FABA L.)<br />

METODĄ ODCIĘTYCH LIŚCI<br />

Dorota Walentyn-Góral i Tomasz Góral<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Fitopatologii, Radzików, 05-870 Błonie<br />

t.goral@ihar.edu.pl<br />

Badano patogeniczność izolatów A. fabae wobec bobiku. Izolaty pochodziły<br />

ze zgromadzonej w latach 2008-2010 kolekcji. Zostały wyizolowane z porażonych<br />

liści bobiku. Jeden izolat pochodził z populacji stosowanej w badaniach<br />

nad odpornością bobiku na askochytozę w IHAR Radzików prowadzonych<br />

przed 2004r.<br />

Zastosowano metodę odciętych liści. Wysterylizowane powierzchniowo<br />

liście 7 odmian bobiku (Albus, Amulet Kasztelan, Leo, Granit, Olga, Titus)<br />

umieszczono na szalkach Petriego z bibułą zwilżoną sterylną wodą. Każdy liść<br />

inokulowano kroplą (50 mcl) zawiesiny zarodników A. fabae o stężeniu 1x 10 6<br />

zar/ml. Kroplę umieszczano na środku liścia w miejscu uszkodzonym igłą. Po<br />

pojawieniu się objawów wykonano pomiary wielkości plam nekrotycznych<br />

w 5 terminach.<br />

Najbardziej patogeniczny był izolat AF5 uzyskany z wieloletnich nasion<br />

pochodzących z badań nad odpornością bobiku na askochytozę przed rokiem<br />

2004. Izolaty z 2009r. nie różniły się istotnie. Najmniej patogeniczny był izolat<br />

AF3 z 2008 r. oraz izolat AF2-1 z 2009r. Na liściach inokulowanych wszystkimi<br />

izolatami z wyjątkiem AF2-1 zaobserwowano tworzenie się piknidiów<br />

A. fabae. Najmniej piknidiów tworzyło się na liściach inkulowanych izolatem<br />

AF2 z 2009r.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 416-417<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

EVALUATION OF PATHOGENICITY OF ASCOCHYTA FABAE SPEG.<br />

ISOLATES TO FABA BEAN (VICIA FABA L.)<br />

USING DETACHED-LEAF TECHNIQUE<br />

Pathogenicity of Ascochyta fabae isolates to faba bean was assessed. Isolates<br />

were collected in the years 2008-2010 from infected leaves of faba bean. One<br />

isolate was derived from population used in research on faba bean resistance<br />

to Ascochyta blight in Radzików before 2004.<br />

Detached-leaf technique was used. Surface sterilized leaves of 7 varieties<br />

of faba bean (‘Albus’, ‘Amulet’, ‘Kasztelan’, ‘Leo’, ‘Granit’, ‘Olga’, ‘Titus’) were<br />

placed on the Petri dishes with a filter paper moistened with sterile water.<br />

Each leaf was inoculated with a drop (50 mcl) of A. fabae spore suspension<br />

at concentration of 10 6 spores/ml. Drop was placed in the centre of the leaf in<br />

a place damaged with a needle. Size of necrotic spots was measurements 5 times.<br />

The most pathogenic was isolate AF5 from population used in research<br />

on faba bean resistance. Isolates from 2009 did not differ significantly. The<br />

less pathogenic was isolate AF3 from 2008 and isolate AF2-1 from 2009. All<br />

isolates produced A. fabae picnidia on the leaves with the exception of AF2-1<br />

isolate. Least picnidia were produced by on the leaves incularted with isolate<br />

AF2 from 2009.<br />

417


418<br />

ZALEŻNOŚĆ MIĘDZY OSPOWATOŚCIĄ SADZENIAKÓW<br />

I WYSTĘPOWANIEM RIZOKTONIOZY NA ZIEMNIAKU<br />

W OKRESIE WEGETACJI<br />

Zbigniew Weber<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii, ul. Dąbrowskiego 159,<br />

60-594 Poznań<br />

zweber@up.poznan.pl<br />

Rizoktonioza [Thanatephorus cucumeris (Frank) Donk.] jest chorobą powszechnie<br />

występującą na ziemniaku i na wielu innych gatunkach roślin.<br />

Celem pracy była ocena zależności między ospowatością sadzeniaków i występowaniem<br />

tej choroby na roślinach wyrastających z tych sadzeniaków.<br />

W ścisłym doświadczeniu polowym z trzema odmianami ziemniaka (Bila, Justa<br />

i Tajfun) oceniano występowanie zgnilizny kiełków, opilśni łodygowej oraz<br />

w czasie zbioru ospowatości plonu bulw. Uzyskane wyniki poddano ocenie<br />

statystycznej stosując jednoczynnikową analizę wariancji a dla porównania<br />

wartości średnich test t-Studenta.<br />

W warunkach prowadzonego doświadczenia występowanie zgnilizny kiełków,<br />

opilśni łodygowej i ospowatości plonu bulw zależało od ospowatości sadzeniaków,<br />

szybkości wschodów roślin i warunków pogodowych.<br />

Summary<br />

OCCURRENCE OF POTATO RHIZOCTONIOSIS IN DEPENDENCE<br />

ON SEED TUBER BLACK SCURF<br />

Rhizoctoniosis [Thanetephorus cucumeris (Frank) Donk.] is a common disease<br />

occurring on potato and many other plant species. Aim of the work was<br />

assessment of rhizoctoniosis occurrence during vegetation in dependence on<br />

seed tuber black scurf. In field plot experiment with three potato cultivars<br />

(Bila, Justa and Tahfun) occurrence of sprouts rot, pathogen teleomorph on<br />

stems and black scurf on tubers were evaluated. All results were subjected to<br />

analysis of variance. Test t Student was used for mean values comparison at<br />

the P ≤ 0.05 level.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 418-419<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


In conditions of the experiment occurrence of sprouts rot, pathogen teleomorph<br />

on stems and black scurf on potato tubers yield depended on seed<br />

tubers black scurf, rate of germination and the appearance of potato sprouts<br />

as well as weather conditions.<br />

419


420<br />

GENETYCZNE ZRÓŻNICOWANIE KASZTANOWCÓW ORAZ<br />

OCENA WYSTĘPOWANIA PATOGENÓW I SZKODNIKÓW<br />

Maria Werner, Lidia Irzykowska i Zbigniew Karolewski<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii, ul. Dąbrowskiego 159,<br />

60-594 Poznań<br />

irzyk@up.poznan.pl<br />

Kasztanowce białe (Aesculus hippocastanum L.) i czerwone (Aesculus<br />

×carnea Hayne) stanowią łącznie 10% drzewostanu Poznania. Docenianie<br />

znaczenia zieleni dla mieszkańców miasta skłania do zwiększonej dbałości o<br />

zachowanie istniejących już nasadzeń w jak najlepszej formie. W ostatnich<br />

latach głównym zagrożeniem fitopatologicznym stało się występowanie nowej<br />

choroby - mączniaka prawdziwego kasztanowca powodowanego przez Erysiphe<br />

flexuosa (Peck) U. Braun et S. Takamatsu. Choroba zwykle rozwija się<br />

szybko. Biały, delikatny nalot grzybni i zarodnikowania konidialnego pokrywa<br />

stopniowo najpierw górną, a następnie dolną powierzchnię blaszki liściowej.<br />

W zależności od przebiegu pogody, owocniki grzyba powstają na przełomie<br />

lipca i sierpnia, niekiedy nieco wcześniej. Wzrastająca z roku na rok liczba<br />

drzew opanowanych przez E. flexuosa wynika z dużej zdolności reprodukcyjnej<br />

patogena. Ponadto kasztanowce są powszechnie atakowane przez szkodnika<br />

z rodziny Gracillariidae - szrotówka kasztanowcowiaczka (Cameraria ohridella<br />

Deschka & Dymić), uszkadzającego organy asymilacyjne drzew. Po wydostaniu<br />

się z kokonów znajdujących się w opadłych liściach motyle pojawiają się<br />

wiosną, zwykle w końcu kwietnia, ale w jednym sezonie mogą rozwijać się nawet<br />

3-4 pokolenia. Żerowanie gąsienic szrotówka prowadzi do żółknięcia, brunatnienia<br />

a w końcu zasychania i w skrajnych przypadkach przedwczesnego<br />

opadania liści, na ogól już w czerwcu/lipcu. Biorąc pod uwagę, że kasztanowce<br />

mogą być mnożone z nasion należy liczyć się z produkcją siewek o niewyrównanych<br />

cechach także związanych z odpornością. Istnieje zatem potrzeba<br />

monitorowania takiego materiału służąca efektywnym nasadzeniom w zieleni<br />

miejskiej. Celem badań jest opracowanie nie inwazyjnych dla środowiska metod,<br />

służących monitorowaniu genotypów kasztanowców odznaczających się<br />

mniejszą podatnością na mączniaka prawdziwego oraz w mniejszym stopniu<br />

niszczonych przez szrotówka kasztanowcowiaczka. Potomstwo roślin matecz-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 420-421<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


nych o tak pożądanych cechach, wyodrębnione w toku badań, wprowadzone do<br />

zieleni miejskiej np. poprzez szczepienia lub produkcję zdrowych siewek z nasion<br />

umożliwiłyby uniknięcie lub ograniczenie problemów fitopatologicznych i<br />

entomologicznych w przyszłości. Na podstawie dokonanej oceny zdrowotności<br />

poznańskich kasztanowców wykazano, że występuje zróżnicowanie wrażliwości<br />

poszczególnych drzew zarówno kasztanowca białego jak i czerwonego<br />

na mączniaka prawdziwego i szrotówka kasztanowcowiaczka. Dla wniesienia<br />

wkładu w zachowanie bioróżnorodności i ochronę kasztanowców w drzewostanie<br />

Poznania celowym było też zbadanie poziomu zróżnicowania genetycznego<br />

kasztanowca białego i czerwonego oraz podjęcie próby znalezienia korelacji<br />

pomiędzy zmiennością obserwowaną na poziomie DNA a odpornością drzew<br />

na atak C. ohridella i E. flexuosa.<br />

Badania prowadzone są w ramach projektu Zdrowe kasztanowce wizytówką<br />

„zielonego” Poznania finansowanego przez Urząd Miasta.<br />

Summary<br />

GENETIC VARIABILITY OF HORSE CHESTNUT AND<br />

ASSESSEMENT OF PATHOGENS AND PESTS OCCURRENCE<br />

About 10% of stand in Poznan is composed of Aesculus hippocastanum<br />

L and Aesculus ×carnea Hayne. Recently, the occurrence of new disease -<br />

chestnut powdery mildew caused by Erysiphe flexuosa (Peck) U. Braun & S.<br />

Takamatsu has become the main phytopathological problem. Moreover trees<br />

from Aesculus genus are commonly attack by Cameraria ohridella Deschka<br />

& Dymić, a pest from Gracillariidae family damaging leaves. Considering<br />

vegetative propagation and generative reproduction mode the screening<br />

of reproduction material is necessary. The main goal of study is to develop<br />

non invasive methods for the environment of monitoring chestnut genotypes<br />

characterized less susceptibility to powdery mildew and damages caused by<br />

horse-chestnut leafminer. The progeny of maternal plants with such desirable<br />

features introduced into urban greenery by e.g. vaccination or production of<br />

healthy seedlings from seeds would enable to avoid or to limit phytopathological<br />

and entomological problems in the future. The assessment of horse chestnuts<br />

in Poznan indicated the diversity of trees sensitivity to powdery mildew and<br />

C. ohridella. To contribute to biodiversity preservation and chestnuts protection<br />

in Poznan stand the estimation of genetic variation of white- and red-flowering<br />

trees was carried out and hypothetic correlation between DNA polymorphism<br />

and trees resistance to C. ohridella i E. flexuosa was verified.<br />

421


422<br />

AKTYWNOŚĆ PREPARATU ANTIFUNG 20 SL WOBEC<br />

WYOSOBNIONYCH Z WYPUSTEK SZPARAGA<br />

LEKARSKIEGO GRZYBÓW RODZAJU FUSARIUM<br />

Maria Werner<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii, ul. Dąbrowskiego 159,<br />

60-594 Poznań<br />

mwerner@up.poznan.pl<br />

W badaniach in vitro, oceniano wpływ preparatu Antifung 20 SL (20% biohumusu)<br />

na wzrost grzybni wybranych izolatów rodzaju Fusarium: F. culmorum,<br />

F. equiseti, F. oxysporum, F. proliferatum, F. solani, F. verticilioides. Pożywkę<br />

PDA zawierającą odpowiednie stężenie badanego preparatu rozlewano do płytek<br />

Petriego, o średnicy 90 mm. Zastosowano stężenia 1, 10, 100, 1000, 10000<br />

ppm s.cz. W każdej płytce następnie umieszczano krążki, o średnicy 6 mm, przerośnięte<br />

odpowiednim izolatem grzyba. Przewidziano też kombinacje kontrolne<br />

dla każdego izolatu grzyba, w tym przypadku inokulum wykładano na pożywkę<br />

PDA bez dodatku środka biologicznego. Zastosowano po 4 powtórzenia w każdej<br />

kominacji. Płytki inkubowano w temperaturze 24°C. Ocenę wpływu Antifungu<br />

20 SL na wzrost patogenicznych wobec szparaga izolatów rodzaju Fusarium<br />

przeprowadzono po 3 i 6 dniach. Doświadczenie powtórzono dwukrotnie.<br />

W wyniku przeprowadzonych badań stwierdzono, że preparat Antifung 20<br />

SL zawierał propagule różnych mikroorganizmów, głównie grzybów. Stwierdzono,<br />

że w miarę wzrostu stężenia preparatu w pożywce liczba kolonii wyrastających<br />

z propagul grzybów różnych gatunków wzrastała, a na pożywce<br />

z najwyższym stężeniem Antifungu 20 SL wzrost patogena był silnie tłumiony.<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 422-423<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


Summary<br />

THE ACTIVITY OF ANTIFUNG 20SL ON FUSARIUM ISOLATED<br />

FROM ASPARAGUS SPEARS<br />

In the in vitro conditions the effect of Antifung 20SL on the growth of<br />

mycelium of selected pathogenic towards Asparagus officinalis isolates of<br />

Fusarium (F.culmorum, F. equiseti, F. oxysporum, F. proliferatum, F. solani,<br />

F. verticilioides). In the research concentrations of 1, 10, 100, 1000, 10000 ppm<br />

were used. The pathogens were incubated in 24°C. The colony diameter were<br />

measured at the 3 rd and 6 th day of the experiment. The results of study showed<br />

that Antifung 20 SL contained propagules od different microorganisms, mainly<br />

fungi. In the combination with the highest concentration of Antifung 20 SL<br />

pathogen growth was substantially suppressed<br />

423


424<br />

ZRÓŻNICOWANIE SZCZEPÓW BAKTERII CLAVIBACTER<br />

MICHIGANENSIS W OBRĘBIE PODGATUNKU<br />

SEPEDONICUS ZA POMOCĄ TESTÓW BIOCHEMICZNYCH<br />

I MOLEKULARNYCH – VNTR I MP-PCR<br />

Agnieszka Węgierek 1 , Joanna Puławska 2 i Edward Arseniuk 1<br />

1 Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Fitopatologii, Pracownia Organizmów Kwarantannowych, Radzików,<br />

05-870 Błonie<br />

2 Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa, ul. Pomologiczna 18,<br />

96-100 Skierniewice<br />

a.wegierek@ihar.edu.pl<br />

Clavibacter michigenensis subs. sepedonicus wywołuje groźną chorobę<br />

bakteryjną tzw. bakteriozę pierścieniową ziemniaka. Choroba ta ze względu<br />

na straty, które powoduje i łatwość rozprzestrzeniania się ma status choroby<br />

kwarantannowej w Unii Europejskiej, co oznacza zwalczanie jej z urzędu i zerową<br />

tolerancję dla czynnika chorobotwórczego. Bakteria ta stwarza ogromne<br />

zagrożenie dla produkcji i hodowli nasiennej oraz utrudnia obrót ziemniaka<br />

w UE i poza nią. Problem wyeliminowania tej bakterii wynika z braku dostatecznie<br />

czułych metod jej wykrywania i identyfikacji. Stosownie rutynowych<br />

metod detekcji takich jak test immunofluorescencji (IF) oraz testu pośredniej<br />

immunofluorescencji (IFAS) przy zastosowaniu przeciwciał poli i monoklonalnych<br />

nie jest dostatecznie czułe, dlatego w dalszym ciągu poszukiwane są skuteczne<br />

metody szybkiej detekcji i identyfikacji bakterii Cms. Informacje dotyczące<br />

struktury i różnorodności populacji Cms są niezbędne w opracowaniu<br />

najefektywniejszej metody wykrywania i zwalczania tego patogena. Jednak<br />

jak dotąd, niewiele wiadomo na temat zróżnicowania szczepów izolowanych<br />

w naszym kraju. Zdobycie wiedzy na ten temat pomogłoby zdefiniować ryzyko<br />

kwarantanny stwarzane przez poszczególne izolaty, a co więcej, stałoby się<br />

cennym źródłem informacji, które pomogłyby w tworzeniu efektywnych strategii<br />

zwalczania bakteriozy pierścieniowej ziemniaka.<br />

W celu określenia zróżnicowania 30-stu szczepów bakterii Cms wyizolowanych<br />

z różnych odmian ziemniaka w różnych rejonach geograficznych Polski<br />

w latach 2005- 2010 użyto zestawu testów biochemicznych i dwóch metod<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 424-427<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


genotypowania wykorzystujących techniki PCR: PCR MP oraz VNTR. Izolację<br />

bakteryjnego DNA przeprowadzono za pomocą zestawu Genomic Mini AX<br />

Bacteria (A&A Biotechnology), postępując zgodnie z zaleceniami producenta.<br />

Koncentracja i czystość uzyskanego DNA określono spektrofotometrycznie poprzez<br />

pomiar absorbancji przy 260 nm i 280 nm (Thermo Scientific NanoDrop<br />

1000 spektrofotometer). Uzyskane w ten sposób DNA stosowano w technikach<br />

PCR MP i VNTR.<br />

Technika PCR MP (ang. PCR Melting Profile) jest techniką opartą o metody<br />

ligacji adapterów LM PCR (ang. Ligation Mediated PCR). W trakcie przeprowadzonej<br />

analizy DNA genomowe poddawano reakcji trawienia przy zastosowaniu<br />

enzymu PstI. W dalszym etapie powstałe fragmenty restrykcyjne<br />

ligowane były z adapterem składającym się z dwóch nici PstI i PstII (Waugh<br />

i in. 1997). Powstała mieszanina ligacyjna zawierała fragmenty o różnej długości<br />

i zawartości par GC i stanowiła matrycę w reakcji PCR ze starterem Pst1.<br />

Różnicowanie szczepów bakteryjnych oparte jest na amplifikacji ograniczonej<br />

liczby fragmentów przy zastosowaniu obniżonej temperatury denaturacji<br />

w reakcji PCR. Analizę produktów uzyskano przeprowadzając elektroforezę<br />

w żelu agarozowym. Do detekcji wykorzystano bromek etydyny.<br />

Technika VNTR (variable number of tandem repeats) opiera się na analizie<br />

tandemowo powtarzających się sekwencjach par zasad o długości kilkunastu<br />

do kilkudziesięciu nukleotydów zwanych minisatelitarnym DNA. Amplifikacja<br />

tych regionów pozwala na uzyskanie specyficznych profili na podstawie<br />

których różnicuje się szczepy. Wyizolowane DNA bakteryjne amplifikowano<br />

przy zastosowaniu starterów VNTR I, VNTR II i VNTR III oraz kombinacji<br />

par starterów VNTR I+ VNTR II, VNTR I + VNTR III, VNTR II+ VNTR III.<br />

Uzyskane produkty rozdzielano w żelu agarozowym a ich liczbę i wielkość porównywano<br />

między badanymi szczepami Cms.<br />

Z analiz cech fenotypowych przeprowadzonych dla wykorzystanej w tych<br />

badaniach grupy szczepów Cms wynika, że stanowią one jednorodną grupę.<br />

Wszystkie analizowane szczepy Cms wykazują metabolizm typu oksydacyjnego<br />

oraz są katalazo i oksydazo pozytywne. Dla większości szczepów nie obserwowano<br />

również wzrostu w 7%NaCl i w 37 o C. Wybrane szczepy Cms hydrolizują<br />

również eskulinę i produkują kwas z mannozy, maltozy i mannitolu.<br />

Większość z nich nie hydrolizuje skrobi lub hydrolizuje ją w niewielkim stopniu.<br />

Nie obserwowano również wykorzystania L-mleczanu przez analizowane<br />

szczepy oraz aktywności ureazy. Również z badań innych autorów wynika, że<br />

wśród szczepów Cms obserwowano niewielkie zróżnicowanie (Leon i in. 2009).<br />

Nasze badania obejmujące analizę cech biochemicznych jak i genotypowych<br />

i potwierdzają wcześniejsze obserwacje.<br />

425


426<br />

Summary<br />

DIVERSITY OF CLAVIBACTER MICHIGANENSIS BACTERIAL<br />

STRAIN WITHIN SUBSPECIES SEPEDONICUS USING BIOCHEMICAL<br />

AND MOLECULAR TECHNIQUES – VNTR AND MP-PCR<br />

Clavibacter michiganensis subs. sepedonicus causes a dangerous bacterial<br />

disease called ring rot of potato. This disease is of quarantine status in the<br />

European Union as a result of losses it causes and easiness of its spread. It means,<br />

this disease is controlled by national regulations and there is zero tolerance for<br />

this pathogen in the potato crops. This bacterium generates a huge threat for<br />

seed material and breeding production and it hinders trading of potato in the<br />

EU and other countries. Lack of sufficiently sensitive methods of detection and<br />

identification is the reason for poor elimination of this pathogen. Up to now,<br />

the routine detection techniques, such as immunofluorescence test (IF) and<br />

immunofluorescence assay (IFAS) by using poly- and monoclonal antibodies<br />

are not enough sensitive. Therefore, still the rapid methods of detection and<br />

identification of Cms are searched. The information about diversity and<br />

structure of Cms populations are indispensable for the development of the most<br />

effective methods for detection and eradication of this pathogen. However, the<br />

present knowledge about the diversity of strains isolated in Poland is very<br />

poor. The differentiation of Cms strains would help to define the quarantine<br />

risk and devise effective methods for control of ring rot.<br />

For estimation of variability among 30 strains of Cms collected from different<br />

potato cultivars in different geographical regions of Poland in years 2005 –<br />

2010, analysis of biochemical tests and two genotyping methods based on PCR<br />

techniques: MP-PCR and VNTR were used. The isolation of bacterial DNA<br />

was done using Genomic Mini AX Bacteria (A & A Biotechnology) according<br />

to manufacturer’s recommendations. The concentration and purity of obtained<br />

DNA was determined spectrophotometrically by absorbance measurement at<br />

260 nm and 280 nm (Thermo Scientific NanoDrop 1000 spectrophotometer).<br />

Obtained DNA was used in the PCR MP techniques and VNTR.<br />

PCR MP (PCR Melting Profile) is a technique based on the method of LM<br />

adapter ligation PCR (called Ligation Mediated PCR). Total bacterial DNA was<br />

digested using PstI endonucleaze. In a further step, the resulting restriction<br />

fragments were ligated with the adapter consisted of two oligonucleotides PstI<br />

and PstII (Waugh et al. 1997). This mixture contained fragment of different<br />

length and GC pair content and constituted the template in the PCR reaction.<br />

Differentiation of bacterial strains was based on amplification of a limited<br />

number of fragments by using a reduced denaturation temperature in PCR<br />

reaction. Separation of products were obtained by carrying out electrophoresis<br />

on agarose gels. The ethidium bromide was used for detection VNTR technique


(variable number of tandem repeats) based on the analysis of tandem repeated<br />

sequences of base pairs in length of several nucleotides called DNA minisatelites.<br />

Amplification of these regions allows to use specific band profiles which allowed<br />

to differentiate the strains. Isolated bacterial DNA was amplified with primers<br />

VNTR I, VNTR II and VNTR III and the combination of primer pairs: VNTR<br />

I + VNTR II, VNTR I + VNTR III, VNTR II+ VNTR III. PCR products were<br />

separated on 1.5% agarose gel with TBE buffer and their number and size were<br />

compared between the investigated strains of Cms.<br />

The analysis of phenotypic traits of a selected group of Cms strains showed<br />

that they constitute a homogeneous group. All analyzed strains of Cms have<br />

oxidative type of metabolism and they are catalase and oxidase positive. Most<br />

strains are able to growth in 7% NaCl but not in the 37˚C. Some strains of<br />

Cms also hydrolyzed esculin and produced acid from mannose, maltose and<br />

mannitol. Most of them do not hydrolyzed starch or hydrolyzed it in a low<br />

amount. The utilization of L-lactate by the analyzed strains and the urease<br />

activity have been not observed. Also other authors show that among the<br />

strains of Cms small differences was observed (Leon et al. 2009). Our results<br />

which contain analysis of biochemical and genetic characteristics have also<br />

confirmed the earlier findings.<br />

Literatura<br />

de Leon L., Rodriguez A., Llop P., Lopez M.M., Siverio F., 2009: Comparative<br />

study of genetic diversity of Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis<br />

isolates from the Canary Islands by RAPD-PCR, BOX-PCR and AFLP.<br />

Plant Pathology 58: 862-871.<br />

Waugh R., Bonar N., Baird E., Thomas B., Graner A.,Hayes P., 1997: Homology<br />

of AFLP products in three mapping populations of barley. Molecular<br />

and General Genetics, 255: 311–321.<br />

427


428<br />

MIKROORGANIZMY ZASIEDLAJĄCE NASIONA<br />

KOSTRZEWY CZERWONEJ (FESTUCA RUBRA L.) I ICH<br />

WPŁYW NA ZDOLNOŚĆ KIEŁKOWANIA<br />

Barbara Wiewióra<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Radzików, 05-870 Błonie<br />

b.wiewiora@ihar.edu.pl<br />

Kostrzewa czerwona (Festuca rubra L.) jest gatunkiem wieloletnim, który<br />

może być wykorzystywany zarówno do celów pastewnych jak i trawnikowych.<br />

Posiada niskie wymagania glebowe i wodne, dlatego stosowany jest jako podstawowy<br />

komponent mieszanek na gleby słabsze oraz okresowo suche. Ma<br />

również szerokie zastosowanie jako trawa darniotwórczą, więc doskonale nadaje<br />

się do zadarniania skarp, poboczy dróg, czy autostrad.<br />

W uprawie trawnikowej kostrzewy czerwonej najbardziej niebezpiecznymi<br />

patogenami nasion są Drechslera spp., Bipolaris spp. i grzyby rodzaju Fusarium.<br />

(Musiał 1996, Wiewióra i Prończuk 2000, Weber i Urbański 2009).<br />

Czynniki chorobotwórcze przenoszone z nasionami negatywnie wpływają nie<br />

tylko na wschody polowe, ale również aspekt estetyczny trawnika. W literaturze<br />

nie ma wystarczających informacji na temat roli grzybów przenoszonych<br />

przez nasiona na proces kiełkowania. Celem niniejszej pracy było zidentyfikowanie<br />

grzybów zasiedlających materiał siewny kostrzewy czerwonej i ich<br />

wpływ na zdolność kiełkowania.<br />

Materiał do badań stanowiły nasiona 7 odmian gazonowych Festuca rubra:<br />

Leo, Nimba, Nil, Areta, Dorosa, Gross i Raisa ze zbioru w 2006, 2007 i 200,<br />

które otrzymano od hodowców lub z firm nasiennych zlokalizowanych w czterech<br />

miejscach w Polsce.<br />

Z materiału siewnego każdej odmiany pobierano próbki o masie 2 g, z których<br />

wybierano do analizy po 100 ziarniaków w trzech powtórzeniach. Ziarniaki<br />

odkażano powierzchniowo w 2 % podchlorynie sodu przez 1 minutę, a następnie<br />

trzykrotnie płukano w wodzie sterylnej. Odkażone ziarniaki wykładano na<br />

płytki Petriego z podłożem maltozowo-agarowym z dodatkiem streptomycyny.<br />

Inkubację przeprowadzano w termostacie o stałej temperaturze 18°C i oświetleniu<br />

NUV 360 12/12 godzin. Pojawiające się kolonie przenoszono na płyt-<br />

<strong>Fitopatologia</strong>: <strong>zdrowe</strong> <strong>rośliny</strong> - <strong>zdrowi</strong> <strong>ludzie</strong>: 428-431<br />

Polskie Towarzystwo Fitopatologiczne, Bydgoszcz 2011<br />

ISBN 978-83-60775-31-8


ki z podłożem maltozowo-agarowym. Po 15–20 dniach inkubacji, w podanych<br />

wyżej warunkach - stymulujących zarodnikowanie, wyosobnione grzyby identyfikowano<br />

do gatunku posługując się opisami zawartymi w opracowaniach:<br />

Chidambaram i in. (1974), Malone i Muskett (1997) oraz Kwaśna i in. (1991).<br />

Przeprowadzona analiza wykazała zasiedlenie badanego ziarna przez 10-<br />

18 gatunków grzybów, należących do 26 rodzajów. Najwięcej grzybów wyizolowano<br />

z nasion odmiany Gross otrzymanych z firmy Graminex (średnio 79,8<br />

kolonii/nasion), zaś najmniej oznaczono dla nasion odmiany Dorosa z firmy<br />

Rolnas (średnio 14,2 kolonii/nasion). Najliczniejszą grupę stanowiły grzyby<br />

znane jako saprotrofy lub pasożyty okolicznościowe: Alternaria alternata, Epicoccum<br />

nigrum i Penicillium spp. Gatunek Alternaria alternata obserwowany<br />

był średnio na około 42% nasion (średnio od 21,1% dla nasion z firmy Rolnas<br />

do 63,9% dla nasion otrzymanych z firmy Graminex). Spośród grzybów patogenicznych<br />

obserwowano gatunki należące do rodzaju Drechslera i Fusarium,<br />

jednak stanowiły one niewielki udział wszystkich wyizolowanych grzybów<br />

(średnio 0,12% dla Fusarium spp. i 1,5% dla Drechslera spp.).<br />

Odmiany istotnie różniły się zdolnością kiełkowania, a zakres tej cechy<br />

u badanych odmian kostrzewy czerwonej zawierał się w przedziale od 70,7%<br />

u odmiany Nil ze Stacji Hodowli Roślin w Nieznanicach do 92,9% dla odmiany<br />

Areta z firmy Agronas. Na ziarniakach zakwalifikowanych, w trakcie oceny<br />

zdolności kiełkowania, jako nienormalnie kiełkujące, <strong>zdrowe</strong> - niekiełkujące,<br />

bądź martwe stwierdzono od 7,5 do 25,6% grzybów, wśród których najczęściej<br />

występowały Alternaria alternata, Epicoccum nigrum oraz grzyby rodzaju<br />

Fusarium i Penicillium. Stwierdzono, że grzyby zasiedlające nasiona mają<br />

istotny wpływ na ich zdolność kiełkowania i mogą stanowić dodatkowe źródło<br />

infekcji roślin w polu. Współczynnik korelacji dla liczby kolonii grzybów<br />

przypadających na 100 nasion i zdolności kiełkowania u badanych odmian<br />

kostrzewy czerwonej wyniósł r= – 0,87**.<br />

Summary<br />

SEEDBORNE MICROORGANISMS OF RED FESCUE (FESTUCA<br />

RUBRA L.) AND THEIR EFFECT ON GERMINATION CAPACITY<br />

Red fescue (Festuca rubra L.), perennial and long-living grass species, can<br />

be used both for fodder and lawn. It has low water and soil requirements, and<br />

therefore is used as a basic component of mixtures for poor and periodically dry<br />

soil. It has also been widely used for turf and is suitable on slopes, roadsides<br />

and highways.<br />

The most dangerous seedborne pathogens of red fescue in turf maintenance<br />

are Drechslera spp., Bipolaris spp. and Fusarium spp. (Musiał 1996, Wiewióra<br />

and Prończuk 2000, Weber and Urbański 2009). All these pathogens may<br />

affect field emergence and have negative effects on turf performance. There<br />

429


430<br />

is no enough information in literature about the role of seedborne fungi in<br />

germination process. The purpose of this work was to investigate seedborne<br />

fungi infecting red fescue and their importance for germination capacity.<br />

The mycological assays were carried out on 100 seeds in three replications<br />

taken from sample of 2 g seed of each cultivar. Seeds were disinfected with 2%<br />

sodium hypochlorite for 1 minute and then washed with sterile water three<br />

times. Disinfected seeds were placed on malt-agar medium with streptomycin.<br />

Fungal colonies were grown at 18 ° C in alternating cycle of 12 h NUV radiation<br />

(360 μm) and 12 h darkness. Developed colonies were transferred to malt-agar<br />

plates and incubated in above-mentioned conditions to stimulate sporulation.<br />

Fungi were identified after 15-20 days of incubation according to the<br />

descriptions of Chidambaram et al. (1974), Malone and Muskett (1997) and<br />

Kwaśna et al. (1991).<br />

Analysis revealed that red fescue seeds were infested by numerous fungi: 10-<br />

18 fungal species belonging to 26 genera were identified. The highest number of<br />

colonies were isolated from seeds of variety Gross from the Graminex company<br />

(an average of 79.8 colonies/100 seeds), and the lowest for seed of variety<br />

Dorosa from the Rolnas company (an average of 14.2 colonies/100 seed). Species<br />

found the most often were saprophytes and weak parasites, such as: Alternaria<br />

alternata, Epicoccum nigrum and Penicillium spp. Alternaria alternata was<br />

observed on 42% of seeds with range from 21.1% (seeds from Rolnas company)<br />

to 63.9% (seeds from Graminex company). Among the pathogenic fungi<br />

species belonging to the genus Drechslera and Fusarium were observed, but<br />

they constituted a small proportion of all isolated fungal (average 0.12% for<br />

Fusarium spp and 1.5% for Drechslera spp.).<br />

Germination of all tested red fescue varieties were statistically different and<br />

ranged from 70.7% for Nil variety (breeding station Nieznanice) to 92.9% for<br />

Areta variety (Agronas company). On abnormal seedlings and ungerminated<br />

seeds, fungi (mostly Alternaria alternata, Epicoccum nigrum, Fusarium spp.<br />

and Penicillium spp.) were found with range from 7.5 to 25.6%. The statistical<br />

analysis revealed high, statistically significant negative correlation (r = - 0.87**)<br />

between germination capacity and number of fungi that colonized tested seeds.<br />

Literatura<br />

Chidambaram S.B., Matur S.B., Neergaard P., 1974: Handbook on seed health<br />

testing. The International. Seed Testing Association As - NLH. Norway:<br />

165-207.<br />

Kwaśna H., Chełkowski J., Zajkowski P., 1991: Flora Polska. T. XXII. Grzyby<br />

niedoskonałe. Strzępczakowe. Gruzełkowate. Sierpik (Fusarium). PAN<br />

Warsaw – Kraków: 1-145.<br />

Malone J.P., Muskett, A.E., 1997: Seed - borne fungi. Descriptions of 77 fun-


gus species. 3 rd Edition. Sheppard J.W. (ed.). ISTA, Zurych: 1-191.<br />

Musiał S., 1996: Niektóre choroby pochodzenia grzybowego na nasionach<br />

traw. Biuletyn IHAR 199: 149-155.<br />

Wiewióra B., Prończuk M., 2000: Mikroorganizmy zasiedlające nasiona traw<br />

i ich wpływ na występowanie chorób w uprawie trawnikowej. Biuletyn<br />

IHAR 214: 269-284.<br />

Weber Z., Urbański P. 2009. Fungi occurring on turfgrasses in Poznań. Phytopatologia<br />

51: 7-12.<br />

431


LISTA UCZESTNIKÓW


LISTA UCZESTNIKÓW<br />

Dariusz Abramowski<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fizjologii Roślin,<br />

ul.Wołyńska 35, 60-637 Poznań<br />

d.abram@up.poznan.pl<br />

Iwona Adamska<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny,<br />

Zakład Ochrony Roślin,<br />

ul. Słowackiego 17, 71-434 Szczecin<br />

iwonaadamska@interia.pl<br />

Roman Andrzejak<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60-594 Poznań<br />

romstand@up.poznan.pl<br />

Edward Arseniuk<br />

Zakład Fitopatologii, Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin<br />

– Państwowy Instytut Badawczy w Radzikowie, 05-870 Błonie<br />

e.arseniuk@ihar.edu.pl<br />

Anna Baturo-Cieśniewska<br />

Uniwersystet Technologiczno-Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

baturo-a@utp.edu.pl<br />

Jolanta Behnke-Borowczyk<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

jbehnke@up.poznan.pl<br />

Marta Bełka<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

marta.belka@up.poznan.pl<br />

Janusz Błaszkowski<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny,<br />

Zakład Ochrony Roślin,<br />

ul. Słowackiego 17, 71-434 Szczecin<br />

janusz.blaszkowski@zut.edu.pl<br />

435


436<br />

Natasza Borodynko<br />

Instytut Ochrony Roślin–Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Wł. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

nataszaborodynko@tlen.pl<br />

Mirosława Cieślińska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Zakład Ochrony Roślin Sadowniczych,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

miroslawa.cieslinska@insad.pl<br />

Bożena Cwalina-Ambroziak<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski,<br />

Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-720 Olsztyn,<br />

bambr@uwm.edu.pl<br />

Marta Damszel<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski,<br />

Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-721 Olsztyn<br />

marta.damszel@uwm.edu.pl<br />

Jakub Danielewicz<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Mikologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

J.Danielewicz@iorpib.poznan.pl<br />

Adam Dawidziuk<br />

Instytut Genetyki Roślin PAN,<br />

ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

adaw@igr.poznan.pl<br />

Joanna Dłużniewska<br />

Uniwersytet Rolniczy,<br />

Katedra Ochrony Środowiska Rolniczego,<br />

al. Mickiewicza 21, 31-120 Kraków<br />

rrdluzni@cyf-kr.edu.pl<br />

Tatiana M. Dolińska<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego,<br />

Wydział Ogrodnictwa i Architektury Krajobrazu, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

tatiana_dolinska@sggw.pl<br />

Katarzyna Gleń<br />

Uniwersytet Rolniczy im. Hugona Kołłątaja,<br />

Katedra Ochrony Środowiska Rolniczego,<br />

Al. Mickiewicza 21, 31-120 Kraków<br />

rrglen@cyf-kr.edu.pl


Małgorzata Golanowska<br />

Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii UG – GUMed,<br />

Katedra Biotechnologii, Zakład Ochrony i Biotechnologii Roślin,<br />

ul. Kładki 24, 80-822 Gdańsk<br />

m.golanowska@biotech.ug.gda.pl<br />

Katarzyna Golnik<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego w Warszawie,<br />

Wydział Ogrodnictwa i Architektury Krajobrazu, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

katarzyna_golnik@sggw.pl<br />

Tomasz Góral<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Zakład<br />

Fitopatologii, Radzików, 05-870 Błonie<br />

t.goral@ihar.edu.pl<br />

Jan Grajewski<br />

Uniwersytet Kazimierza Wielkiego, I<br />

nstytut Biologii Eksperymentalnej, Zakład Fizjologii i Toksykologii,<br />

ul. Chodkiewicza 30, 85-064 Bydgoszcz<br />

jangra@ukw.edu.pl<br />

Andrzej Grzywacz<br />

Wydział Leśny SGGW w Warszawie,<br />

Zakład Mikologii i Fitopatologii Leśnej<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

andrzej_grzywacz@sggw.pl<br />

Ewa Hanus-Fajerska<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie,<br />

Katedra Botaniki i Fizjologii Roślin,<br />

al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków<br />

e.hanus@ogr.ur.krakow.pl<br />

Beata Hasiów-Jaroszewska<br />

Instytut Ochrony Roślin-Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Wirusologii i Bakteriologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

B.Hasiow@iorpib.poznan.pl<br />

Lidia Irzykowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60-594 Poznań<br />

irzyk@up.poznan.pl<br />

437


438<br />

Anna Jakubowska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa,<br />

ul. Pomologiczna 18, Skierniewice<br />

anna.jakubowska@insad.pl<br />

Agnieszka Jamiołkowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie,<br />

Katedra Ochrony i Kwarantanny Roślin,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

aguto@wp.pl<br />

Regina Janas<br />

Instytut Ogrodnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

rjanas@insad.pl<br />

Robert Jankowiak<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie,<br />

Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

Al. 29 Listopada 46, 31-425 Kraków<br />

rljankow@cyf-kr.edu.pl<br />

Jolanta Jaroszuk-Ściseł<br />

Uniwersytet Marii Curie-Skłodowskiej,<br />

Zakład Mikrobiologii Środowiskowej,<br />

ul. Akademicka 19, 20-033 Lublin<br />

jolanta.jaroszuk-scisel@poczta.umcs.lublin.pl<br />

Małgorzata Jeske<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

jeske@utp.edu.pl<br />

Małgorzata Jędryczka<br />

Instytut Genetyki Roślin PAN,<br />

ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

wirz@igr.poznan.pl<br />

Joanna Kaczmarek<br />

Instytut Genetyki Roślin PAN,<br />

ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

jkac@igr.poznan.pl<br />

Elżbieta Kalinowska<br />

Szkoła główna Gospodarstwa Wiejskiego,<br />

Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

elzbieta_kalinowska@sggw.pl


Monika Kałużna<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa,<br />

ul. Pomologiczna 18, Skierniewice<br />

monika.kaluzna@insad.pl<br />

Joanna Kamasa<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Wirusologii i Bakteriologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

jkamasa08@gmail.com<br />

Maria Kamińska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Pracownia Wirusologii,<br />

Zakład Ochrony Roślin Sadowniczych, Oddział Sadownictwa<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-1000 Skierniewice<br />

maria.kaminska@insad.pl<br />

Zdzisław Kaniuczak<br />

Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Terenowa Stacja Doświadczalna,<br />

ul. Langiewicza 28, 35-101 Rzeszów<br />

z.kaniuczak@iorpib.poznan.pl<br />

Wiesława Kawczyńska<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20; 60-318 Poznań<br />

W.kawczynska@iorpib.poznan.pl<br />

Irena Kiecana<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

Irena.Kiecana@up.lublin.pl<br />

Barbara Kierpiec<br />

Uniwersytet Rolniczy,<br />

Katedra Ochrony Roślin,<br />

ul. Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków<br />

barbara.kierpiec@wp.pl<br />

Włodzimierz Kita<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

Katedra Ochrony Roślin, Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

wlodzimierz.kita@up.wroc.pl<br />

Katarzyna Koczwara<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

katarzyna.koczwara1987@gmail.com<br />

439


440<br />

Tomasz Kosiada<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fitopatatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60–594 Poznań<br />

kosiada@up.poznan.pl<br />

Maria Kowalik<br />

Uniwersytet Rolniczy,<br />

Katedra Ochrony Roślin,<br />

Al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków<br />

m.kowalik@ogr.ur.krakow.pl<br />

Beata Kowalska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

beata.kowalska@iwarz.pl<br />

Krzysztof Krawczyk<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

K.Krawczyk@iorpib.poznan.pl<br />

EwaKról<br />

University of Life Science, Department of <strong>Phytopathology</strong> and Mycology,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20- 069 Lublin<br />

zofia.machowicz@up.lublin.pl<br />

Dorota Krzyżanowska<br />

Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii UG-GUMed,<br />

Katedra Biotechnologii, Zakład Ochrony i Biotechnologii Roślin,<br />

ul. Kładki 24, 80-822 Gdańsk<br />

dorota.krzyzanowska@biotech.ug.gda.pl<br />

Tomasz P. Kurowski<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski,<br />

Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-721 Olsztyn<br />

kurowski@uwm.edu.pl<br />

Halina Kurzawińska<br />

Uniwersytet Rolniczy,<br />

Katedra Ochrony Roślin,<br />

Al. 29 Listopada, 31-425 Kraków<br />

h.kurzawinska@ogr.ur.krakow.pl<br />

Adam Kuzdraliński<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Biotechnologii, Żywienia Człowieka i Towaroznawstwa Żywności,<br />

ul. Skromna 8, 20-704 Lublin<br />

adamkuzdralinski@gmail.com


Hanna Kwaśna<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

kwasna@up.poznan.pl<br />

Grzegorz Lemańczyk<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

Grzegorz.Lemanczyk@utp.edu.pl<br />

Leszek Lenc<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy w Bydgoszczy,<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

lenc@utp.edu.pl<br />

Maciej Łobczowski<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Ochrony Roślin - Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

maciej.lobczowski@gmail.com<br />

Aleksander Łukanowski<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

luk-al@utp.edu.pl<br />

Anna Maćkowiak- Sochacka<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

a.sochacka@iorpib.poznan.pl<br />

Krzysztof Makowski<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

Katedra Ochrony Roślin, Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

kmatkowski@gmail.com.pl<br />

Małgorzata Mańka<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Wydział Leśny, Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

mmanka@au.poznan.pl<br />

Stefan Martyniuk<br />

IUNG-PIB, Zakład Mikrobiologii Rolniczej,<br />

ul. Czartoryskich 8, 24-100 Puławy<br />

sm@iung.pulawy.pl<br />

441


442<br />

Kinga Mazurkiewicz - Zapałowicz<br />

Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny w Szczecinie,<br />

Pracownia Hydrobiologii,<br />

ul. Kazimierza Królewicza 4, 71-550 Szczecin<br />

kmazurkiewicz@zut.edu.pl<br />

Beata Meszka<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa,<br />

ul. Pomologiczna 18, 96-100 Skierniewice<br />

bmeszka@insad.pl<br />

Monika Michalecka<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa,<br />

ul. Pomologiczna 18, 96-100 Skierniewice<br />

monika.michalecka@insad.pl<br />

Elżbieta Mielniczuk<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii i Mikologii,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20 - 069 Lublin<br />

elzbieta.mielniczuk@up.lublin.pl<br />

Artur Mikiciński<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa,<br />

ul. Pomologiczna 18, 96-100 Skierniewice<br />

amikic@insad.pl<br />

Ewa B. Moliszewska<br />

Uniwersytet Opolski,<br />

Samodzielna Katedra Biotechnologii i Biologii Molekularnej,<br />

ul Kard. B. Kominka 6A, 45-035 Opole<br />

ewamoli@uni.opole.pl<br />

Ewa Moszczyńska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Ochrony Roślin - Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

ewa.moszczynska@up.wroc.pl<br />

Mirosław Nowakowski<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin - PIB,<br />

Zakład Technologii Produkcji Roślin Okopowych,<br />

Al. Powstańców Wielkopolskich 10, 85-090 Bydgoszcz<br />

m.nowakowski@ihar.bydgoszcz.pl<br />

Katarzyna Oberc<br />

Uniwersytet Rolniczy w Krakowie,<br />

Katedra Sadownictwa i Pszczelnictwa,<br />

al. 29 Listopada 54, 31-425 Kraków<br />

kasia.oberc@gmail.com


Piotr Ochodzki<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Zakład<br />

Fitopatologii, Radzików, 05-870 Błonie<br />

p.ochodzki@ihar.edu.pl<br />

Rafał Ogórek<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

Katedra Ochrony Roślin, Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

rafal.ogorek@up.wroc.pl<br />

Danuta Packa<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski,<br />

Katedra Hodowli Roślin i Nasiennictwa,<br />

Pl. Łódzki 3, 10-724 Olsztyn<br />

packa@uwm.edu.pl<br />

Dariusz Pańka<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy<br />

Katedra Fitopatatologii i Mikologii Molekularnej<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

panka@utp.edu.pl<br />

Teresa Pastuszewska<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin<br />

Państwowy Instytut Badawczy, Oddział Bydgoszcz,<br />

Al. Powstańców Wielkopolskich 10, 85-090 Bydgoszcz<br />

t.pastuszewska@ihar.bydgoszcz.pl<br />

Agnieszka Perek<br />

Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy, Zakład Mikologii,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

a.perek@iorpib.poznan.pl<br />

Jacek Piszczek<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Terenowa Stacja Doświadczalna,<br />

ul. Pigwowa 16, 87-100 Toruń<br />

j.piszczek@iorpib.poznan.pl<br />

Elżbieta Pląskowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

Katedra Ochrony Roślin, Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 53-363 Wrocław<br />

elzbieta.plaskowska@up.wroc.pl<br />

Henryk Pospieszny<br />

Instytut Ochrony Roślin – PIB, Zakład Wirusologii i Bakteriologii,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

H.Pospieszny@iorpib.poznan.pl<br />

443


444<br />

Eliza Potocka<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Biotechnologii, Żywienia Człowieka i Towaroznawstwa Żywności,<br />

ul. Skromna 8, 20-704 Lublin<br />

eliza.potocka@up.lublin.pl<br />

Marta Potrykus<br />

Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii Uniwersytetu Gdańskiego<br />

i Gdańskiego Uniwersytetu Medycznego,<br />

Katedra Biotechnologii,<br />

ul. Kładki 24, 80-822 Gdańsk<br />

marta.potrykus@biotech.ug.gda.pl<br />

Wioletta Poznań<br />

Zakład Fitopatologii, Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin w Radzikowie<br />

– Państwowy Instytut Badawczy, Radzików, 05-870 Błonie<br />

w.poznan@ihar.edu.pl<br />

Magdalena Ptaszek<br />

Instytut Ogrodnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

magdalena.ptaszek@insad.pl<br />

Joanna Puławska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Sadownictwa,<br />

ul. Pomologiczna 18, 96-100 Skierniewice<br />

jpulaw@insad.pl<br />

Wojciech Pusz<br />

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu,<br />

Katedra Ochrony Roślin - Zakład Fitopatologii i Mikologii,<br />

pl. Grunwaldzki 24A, 50-363 Wrocław<br />

agrostrona@gmail.com<br />

Maria Rataj-Guranowska<br />

Instytut Ochrony Roślin- Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Bank Patogenów Roślin i Badania ich Bioróżnorodności,<br />

ul. W. Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

m.guranowska@iorpib.poznan.pl<br />

Czesław Sadowski<br />

Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy im. J.J. Śniadeckich,<br />

Wydział Rolnictwa i Biotechnologii, Katedra Fitopatologii i Mikologii Molekularnej,<br />

ul. Ks. A. Kordeckiego 20, 85-225 Bydgoszcz<br />

sadowski@utp.edu.pl


Katarzyna Sadowska<br />

Instytut Ochrony Roślin-Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Bank Patogenów Roślin i Badania ich Bioróżnorodności,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

K.Sadowska@iorpib.poznan.pl<br />

Małgorzata Schollenberger<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego,<br />

Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-787 Warszawa<br />

malgorzata_schollenberger@sggw.pl<br />

Magdalena Słowik-Borowiec<br />

Instytut Ochrony Roślin - Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Terenowa Stacja Doświadczalna,<br />

ul. Langiewicza 28, 35-101 Rzeszów<br />

m.borowiec@iorpib.poznan.pl<br />

Urszula Smolińska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

Urszula.Smolinska@iwarz.pl<br />

Joanna Sobczak<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20; 60-318 Poznań<br />

E.Matyjaszczyk@iorpib.poznan.pl<br />

Piotr Sobiczewski<br />

Instytut Ogrodnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

Piotr.Sobiczewski@insad.pl<br />

Sylwester Sobkowiak<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Oddział w<br />

Młochowie<br />

s.sobkowiak@ihar.edu.pl<br />

Ewa Solarska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Biotechnologii, Żywienia Człowieka i Towaroznawstwa Żywności,<br />

ul. Skromna 8, 20-704 Lublin<br />

ewa.solarska@up.lublin.pl<br />

Elżbieta Starzycka<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin - Państwowy Instytut Badawczy, Oddział w<br />

Poznaniu,<br />

ul. Strzeszyńska 36, 60-479 Poznań<br />

michals@nico.ihar.poznan.pl<br />

445


446<br />

Łukasz Stępień<br />

Instytut Genetyki Roślin, Pracownia Metabolomiki,<br />

ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

lste@igr.poznan.pl<br />

Hanna Stępniewska<br />

Uniwersytet Rolniczy,<br />

Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

al. 29 listopada 46, 31-425 Kraków<br />

rlstepni@cyf-kr.edu.pl<br />

Sylwia Stępniewska-Jarosz<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Bank Patogenów Roślin i Badania Ich Bioróżnorodności,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

sylstep@poczta.onet.pl<br />

Judyta Strakowska<br />

Instytut Genetyki Roślin PAN,<br />

ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

jstr@igr.poznan.pl<br />

Ewa Sucharzewska<br />

Uniwersytet Warmińsko Mazurski,<br />

Wydział Biologii, Katedra Mikologii,<br />

ul. Oczapowskiego 1A, 10-719 Olsztyn-Kortowo<br />

ewko@uwm.edu.pl<br />

Magdalena Szczech<br />

Instytut Ogrodnictwa,<br />

Oddział Warzywnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

magdalena.szczech@iwarz.pl<br />

Wojciech Szewczyk<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Fitopatologii Leśnej,<br />

ul. Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań<br />

wszew@up.poznan.pl<br />

Dorota Szopińska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu,<br />

Katedra Nasiennictwa Ogrodniczego,<br />

ul. Szamotulska 28, Baranowo, 62-081 Przeźmierowo<br />

dorota.szopinska@up.poznan.pl


Ewa Szpyrka<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Terenowa Stacja Doświadczalna,<br />

ul. Langiewicza 28, 35-101 Rzeszów<br />

e.szpyrka@iorpib.poznan.pl<br />

Justyna Szwejda-Grzybowska<br />

Instytut Ogrodnictwa, Oddział Warzywnictwa,<br />

Pracownia Przetwórstwa i Oceny Jakości Warzyw,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

justyna.grzybowska@iwarz.pl<br />

Jerzy Szymona<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Ekologii Rolniczej,<br />

ul. Akademicka 13, 20-950 Lublin<br />

jerzy.szymona@up.lublin.pl<br />

Anna Tratwal<br />

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

ul. Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań<br />

A.Tratwal@iorpib.poznan.pl<br />

Aleksandra Trzewik<br />

Instytut Ogrodnictwa,<br />

ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96-100 Skierniewice<br />

Aleksandra.Trzewik@insad.pl<br />

Urszula Wachowska<br />

Uniwersytet Warmińsko-Mazurski,<br />

Katedra Fitopatologii i Entomologii,<br />

ul. Prawocheńskiego 17, 10-722 Olsztyn<br />

urszula.wachowska@uwm.edu.pl<br />

Anna Wagner<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Ochrony i Kwarantanny Roślin,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

wagnerania@gmail.com<br />

Jakub Walczewski<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy,<br />

Zakład Fitopatologii Radzików, 05-870 Błonie<br />

j.walczewski@ihar.edu.pl<br />

Zbigniew Weber<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60-594 Poznań<br />

zweber@up.poznan.pl<br />

447


448<br />

Maria Werner<br />

Uniwersytet Przyrodniczy,<br />

Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Dąbrowskiego 159, 60-594 Poznań<br />

mwerner@up.poznan.pl<br />

Agnieszka Węgierek<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Zakład<br />

Fitopatologii, Pracownia Organizmów Kwarantannowych,<br />

Radzików, 05-870 Błonie<br />

a.wegierek@ihar.edu.pl<br />

Barbara Wiewióra<br />

Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Radzików,<br />

05-870 Błonie<br />

b.wiewiora@ihar.edu.pl<br />

Halina Wiśniewska<br />

Instytut Genetyki Roślin, Polska Akademia Nauk,<br />

ul. Strzeszyńska 34, 60-479 Poznań<br />

hwis@igr.poznan.pl<br />

Marcin Wit<br />

Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego,<br />

Katedra Fitopatologii,<br />

ul. Nowoursynowska 159, 02-776 Warszawa<br />

marcin_wit@sggw.pl<br />

Ewa Zalewska<br />

University of Life Sciences, Department of <strong>Phytopathology</strong> and Mycology,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20- 069 Lublin<br />

ewa.zalewska@up.lublin.pl<br />

Małgorzata Ziemichód<br />

Zakład Fitopatologii, Instytut Hodowli i Aklimatyzacji Roślin w Radzikowie – Państwowy<br />

Instytut Badawczy, Radzików, 05-870 Błonie<br />

m.ziemichod@ihar.edu.pl<br />

Beata Zimowska<br />

Uniwersytet Przyrodniczy, Katedra Fitopatologii i Mikologii,<br />

ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin<br />

beata.zimowska@up.lublin.pl

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!