Česká zemědělská univerzita v Praze. Fakultu agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů. Katedra ochrany rostlin

Transkript

1 Česká zemědělská univerzita v Praze Fakultu agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů Katedra ochrany rostlin XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin Sborník abstraktů září 2015 Praha, Česká republika

2 Pořadatelé konference: Katedra ochrany rostlin FAPPZ ČZU v Praze Zemědělská společnost při ČZU v Praze Vědecký výbor konference: Prof. Ing. Pavel Ryšánek, CSc., FAPPZ ČZU v Praze Prof. Ing. Ľudovít Cagáň, CSc., FAPZ SPU Nitra Doc. Ing. Kamil Hudec, Ph.D., FAPZ SPU Nitra Doc. Ing. Gabriela Juhásová, CSc., ÚEL SAV Nitra Ing. Jiban Kumar, Ph.D., VÚRV Praha Prof. Ing. Aleš Lebeda, DrSc., PřF UPOL Olomouc RNDr. Jan Nedělník, Ph.D., VÚP Troubsko Prof. Ing. Radovan Pokorný, Ph.D., AF MENDELU Brno Doc. Ing. Tibor Roháčik, CSc., Selekt Bučany Prof. Ing. Josef Soukup, CSc., FAPPZ ČZU v Praze Prof. Ing. Josef Špak, DrSc., ÚMBR BC AV ČR České Budějovice Organizační výbor konference: Prof. Ing. Pavel Ryšánek, CSc. Ing. Lenka Grimová, Ph.D. Ing. Zdeněk Jindra, Ph.D. RNDr. Jan Kabíček, CSc. Ing. Jan Kazda, CSc. Ing. Jana Mazáková, Ph.D. Doc. Ing. Evženie Prokinová, CSc. Ing. Miloslav Zouhar, Ph.D. Místo konání: Česká zemědělská univerzita v Praze Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů Katedra ochrany rostlin Kamýcká Praha 6 - Suchdol Datum konání: Za jazykovou a věcnou správnost abstraktů odpovídají jednotliví autoři.

3 Pořadatelé konference děkují za finanční podporu všem níže uvedeným sponzorům. Partner konference: Mediální partner konference:

4 Obsah Plenární zasedání... 4 Sekce Virologie a Bakteriologie Sekce Mykologie Sekce Živočišní škůdci Sekce Herbologie Rejstřík autorů abstraktů

5 Plenární zasedání Plenární zasedání XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

6 Plenární zasedání Fungicide resistance: facing the challenge Hollomon Derek W. Orchard House, Bristol road, Chew Stoke, Bristol, BS40 8UB, UK, Abstract Fungicide resistance continues to generate disease control problems in many crops. I will illustrate the resistance problem with three current issues facing arable farmers in the UK. The importance of diversity in modes of action in confronting resistance will be set against concerns that the number of modes of action available to control many diseases has become dangerously small. Three challenges face crop protection in its search for durable disease control systems. The first involves the search for novel modes of action, and will consider two recent advances underpinned greater understanding of fungal biochemistry. The second challenge facing manufacturers involves early assessment of resistance risk using a few isolates of target pathogens. The third challenge involving the combined efforts of researchers, manufacturers and growers requires translating this resistance risk into effective and durable disease control strategies in actual crops. At the core of this challenge is using resistance risk evidence obtained in laboratory and glasshouse studies to evaluate the fitness cost of resistance in pathogen populations in field crops. Increasingly, management of resistance is viewed as the integration of fungicides with non-chemical disease control methods. Ultimately, success of any Integrated Disease Management (IDM) strategy depends on the ability of growers to adapt resistance management strategies and maintain production and profitability. XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

7 Plenární zasedání Nové strategie v ochraně proti škůdcům New strategies in pest management Kocourek František Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, kocourek@vurv.cz Bude podán přehled nových strategií ochrany proti škůdcům, které se v současnosti začínají využívat v praxi, nebo které byly vyvinuty v rámci výzkumu a jejich využití je možné nebo perspektivní. Společným cílem nových strategií ochrany je omezit používání klasických pesticidů a snížit jejich rizika pro životní prostředí a zdraví člověka, při současném zachování ekonomické efektivity ochrany. Uváděné strategie ochrany jsou využitelné jako součást systému integrované ochrany. Všechny strategie jsou využitelné v konvenčním zemědělství a integrované produkci vybraných plodin, některé z nich i v ekologickém zemědělství. Omezení v ekologickém zemědělství se týká strategií využívajících konvenční pesticidy a geneticky modifikované organismy. V ekologickém zemědělství se přednostně využívají biologické metody ochrany, včetně feromonů v přímé ochraně. Tyto metody a prostředky ochrany se v konvenčním zemědělství uplatňují v současnosti zejména v systémech integrované produkce ovoce, zeleniny a révy vinné a při bezreziduální produkci ovoce a zeleniny. V prezentaci bude charakterizována strategie integrované ochrany rostlin a strategie biologické ochrany. Pro níže uvedené strategie ochrany budou uvedeny jejich principy a příklady využívání, doplněné o výsledky výzkumu pracoviště z autora příspěvku. Strategie: 1. antirezistentní, 2. podpora přirozených nepřátel škůdců a opylovačů, 3. expertní systémy pro modelování ekonomických prahů škodlivosti, 4. biopreparáty a bioagens místo pesticidů, 5. botanické pesticidy a prostředky podporující obranyschopnost rostlin místo pesticidů, 6. feromony místo pesticidů, 7. geneticky modifikované organismy místo pesticidů, 7. nízkorezduální a bezrezidální produkce ovoce a zeleniny. Zpracováno za podpory z prostředků na rozvoj MZe RO0415. Klíčová slova: pesticidy, feromony, biologické prostředky ochrany, přirození nepřátelé škůdců, nízkoreziduální produkce, bezreziduální produkce, geneticky modifikované organismy, ekonomické prahy škodlivosti, expertní systém XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

8 Plenární zasedání Recent developments and challenges in chemical disease control Leadbeater Andy Syngenta Crop Protection AG., Schwarzwaldallee 215, CH-4058 Basel, CH, Abstract The use of chemical fungicides to control plant diseases is an integral component of crop management. Although fungicides have been used to good effect in agriculture since the 1940s, the introduction of new fungicides is an essential element to provide sustained control of major crop diseases. The need for new and innovative fungicides is driven by resistance management, regulatory hurdles and increasing customer expectations amongst others. New fungicides can be discovered either within established mode of action groups, ideally with low resistance risk (robust modes of action), or in areas with completely novel modes of action. Compounds having a novel mode of action are of course of special interest, since they play a key role in resistance management strategies, but equally important are new fungicides with enhanced characteristics such as systemicity, curativity and longevity of disease control. With the background of increasing registration hurdles, increasing costs and increasing market needs, the current market position of major crop protection fungicides is important to review, along with consideration of current and future market needs. An analysis of the situation regarding new fungicidal compounds in late development or recently introduced to the market suggests that considerable innovation continues to be delivered in the chemical fungicide area. New modes of action are quite rare in some segments (major new fungicides are mainly SDHIs), but seem to be more frequently discovered for the control of Oomycetes. Potential reasons for this are discussed. Key words: fungicides, research and development, fungicide resistance, strobilurins, triazoles, carboximides XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

9 Plenární zasedání Fifty-year anniversary of Plant Protection Science Padesát let časopisu Plant Protection Science Lebeda Aleš 1, Kroftová Věra 2, Kůdela Václav 3, Braunová Marcela 4 1 Department of Botany, Faculty of Science, Palacký University, Šlechtitelů 27, Olomouc- Holice, CZ, ales.lebeda@upol.cz 2 Agrotest Fyto, Ltd., Havlíčkova 2787, Kroměříž, CZ 3 Division of Crop Protection and Plant Health, Crop Research Institute, Drnovská 507/73, Prague 6 Ruzyně, CZ 4 Czech Academy of Agricultural Sciences, Slezská 7, Praha 2, CZ Abstract In 2014, the journal Plant Protection Science (PPS) completed 50 years of publication ( ). However, its roots extend back to the year Today, it is an international scientific journal focused on all aspects of plant protection science, fully published in English. This occasion offers a fitting opportunity to describe some of the most important historical stages of the journal s development. In our brief historical overview, we summarize the changes in journal title, chief-editors and editorial policy during the last fifty years, and with an examination of its importance, scope and readership. We present analyses of the journal s development, some for the entire period of , while others are limited to more recent decades. The journal s present place among the world s scientific journals is documented by analyses in the international citation databases, BIOSIS CI, SCOPUS, and WOS. An analysis of three particular citation databases were made in October 2013, while the overall period was conducted from All Databases/Thomson Reuters in March PPS is also included in other, important technical-literature databases, including Czech Agricultural and Food Bibliography, AGRIS/FAO database, AGRICOLA, CAB Abstracts, Current Contents and Zoological Abstracts. Information about all of them is available in Ulrich`s WEB database. In the final part of this paper, we summarize some recent achievements of the journal, and discuss some key topics related to its future development. After three years survey ( ) in WOS (Web of Science), in the year 2015 the journal Plant Protection Science received the first Impact Factor. Acknowledged is support of the project IGA_PrF_2015_001 (Palacký University in Olomouc). Key words: history, international scientific journal, plant protection, scientometrics, editors, editorial policy, citation databases, journal scope, scientific impact, impact factor, future prospects XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

10 Plenární zasedání Aktuality na poli karantény News in plant quarantine Růžička Tomáš Sekce rostlinolékařské péče, Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský, Ztracená 1099/10, Praha 6, CZ, tomas.ruzicka@ukzuz.cz K průběžnému nárůstu zavlékání nepůvodních druhů škodlivých organismů a jejich usídlování v nových územích přispívá významnou měrou neustálý rozvoj dopravy, mezinárodního obchodu, cestovního ruchu a změna klimatu. Současné fytosanitární postupy EU nebrání dostatečně zavlékání nových nepůvodních škodlivých organismů, proto se v EU připravuje změna fytosanitárního režimu. Nicméně některé druhy nepůvodních škodlivých organismů nelze úspěšně regulovat pomocí fytosanitárních postupů, jako např. makadlovku Tuta absoluta, octomilku Drosophila suzukii nebo houbový patogen Hymenoscyphus fraxineus (Chalara fraxinea). U některých karanténních škodlivých organismů fytosanitární regulace postupně ztratila smysl, jako např. u žlabatky Dryocosmus kuriphilus, u Potato spindle tuber viroid na okrasných rostlinách rodu Brugmansia a druhu Solanum jasminoides či u bázlivce kukuřičného (Diabrotica virgifera virgifera). Nejvýznamnější fytosanitární problémy v EU v současné době působí háďátko borovicové (Bursaphelenchus xylophilus), bakterie Xylella fastidiosa a kozlíčci Anoplophora glabripennis a A. chinensis. Klíčová slova: karanténa rostlin, změny fytosanitárního režimu EU, Bursaphelenchus xylophilus, Xylella fastidiosa, Anoplophora glabripennis, A. chinensis Abstract The increase of transportation, international trade and tourism, and the climatic change significantly contribute to introduction and establishment of alien pests in new areas. As present phytosanitary procedures of the EU do not adequately protect the EU territory against new alien pests, changes of the EU phytosanitary regime are being prepared. Nevertheless, some of alien pests cannot be successfully regulated by means of phytosanitary procedures, for example Tuta absoluta, Drosophila suzukii or Hymenoscyphus fraxineus (Chalara fraxinea). In some of quarantine pests the reason for phytosanitary regulation no longer exists, for example Dryocosmus kuriphilus, Potato spindle tuber viroid in ornamental plants of genus Brugmansia and species Solanum jasminoides, Diabrotica virgifera virgifera. On the other side, Bursaphelenchus xylophilus, Xylella fastidiosa, Anoplophora glabripennis and A. chinensis represent currently the most important phytosanitary problems and challenge for the EU. Key words: plant quarantine, changes of EU phytosanitary regime, Bursaphelenchus xylophilus, Xylella fastidiosa, Anoplophora glabripennis, A. chinensis XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

11 sekce Virologie a Bakteriologie Sekce Virologie a Bakteriologie XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

12 sekce Virologie a Bakteriologie Comparison of different inoculation methods of cereals by Wheat dwarf virus Cejnar Pavel 1,2, Kumar Jiban 1 1 Plant Virus and Vector Interactions, Crop Research Institute, Drnovská 507/73, Prague Ruzyně, CZ, cejnar@vurv.cz 2 Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamýcká 129, Prague 6 Suchdol, CZ Abstract Wheat dwarf virus (WDV) is one of the two most important cereal virus pathogens in the Czech Republic. WDV is transmitted only by the insect vector Psammotettix alienus and is not mechanically transmissible in nature. The virus infects both the spring and the winter crops during its two peak year cycle. The testing for resistance of different cereal crop varieties requires large scale field trials. We have optimized several general inoculation methods for cereals including: - the biolistic inoculation method - the agroinoculation method of different plant parts or in different development stages - the mechanical inoculation by carborundum powder abrasion or needle sticking - the microinjection of highly concentrated DNA solution - the mechanical inoculation by purified virus particles We compared these methods together with the natural insect inoculation method and tested their efficiencies with the Wheat Dwarf Virus or with our developed infectious clone of WDV on several samples and at least two times for each method. We compared the results using qpcr and ELISA. Our results show, that the natural inoculation has still the highest efficiency for infecting the plants, however if the insect vector is not present, the agroinoculation of immature embryos or the agroinoculation with enhanced replication factors is also generally applicable. Key words: Wheat dwarf virus, inoculation methods, cereal crops XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

13 sekce Virologie a Bakteriologie Epidemie viru Y bramboru (PVY) v souvislosti s výskytem jeho nových kmenů a variant Potato virus Y (PVY) outbreak in connection with the occurrence of new strains and variants Dědič Petr, Kmoch Martin Výzkumný ústav bramborářský Havlíčkův, Brod s. r. o., Dobrovského 2366, Havlíčkův Brod, CZ, dedic@vubhb.cz Původní kmeny viru Y bramboru (PVYO, PVY N a PVY C ) byly v Evropě již od 80. letech minulého století doplňovány o nové varianty tohoto viru. Silné a opakované výskyty PVY i v posledních letech tato pozorování plně potvrzovaly. Diferenciace izolátů PVY byla prováděna v silně infekčním roce 2008 a 2009 kombinací ELISA s kmenově specifickými protilátkami (Bioreba a Adgen) a následnou inokulací tabáků Nicotiana tabacum cv. Samsun, případně inokulací indikátorových odrůd bramboru. V posklizňových zkouškách sadby bylo hodnoceno 1157 a 623 pozitivních vzorků ze 154 a 126 odrůd bramboru s výskytem PVY. Bylo prokázáno, že ve většině odrůd se vyskytovaly oba sérotypy, tj. PVY-N i PVY-O/C a převaha izolátů sérotypu PVY-N byla po infekci citlivých indikátorů schopna vyvolávat na hlízách příznaky PTNRD (povrchové nekrózy) indikujících jejich zařazení do varianty PVY NTN. Rovněž konfirmační Multiplex RT-PCR (Lorenzen et al., 2006) dávala elektroforetické produkty velikosti 452 a 181 bp prokazující též přítomnost izolátů varianty PVY NTN. U izolátů sérotypu PVY-O/C, byla oproti původnímu kmenu PVY O, prokázána jednoznačná převahou variant PVY N-Wi. Obdobné výsledky byly získány v obou ročnících zkoušení. Lze vyvozovat, že v množitelských materiálech sadby bramboru s výskytem PVY jednoznačně převládají nové a rekombinantní izoláty, tj. varianty PVY NTN a PVY N-Wi. Tyto podrobné kmenové charakteristiky izolátů a výskytu jednotlivých variant PVY jsou z praktického hlediska významné zvláště ve vztahu ke spolehlivosti a specifičnosti jejich diagnózy (slabé, snadno přehlédnutelné vizuální příznaky onemocnění na rostlinách, případně bezpříznakové infekce nových a rekombinantních variant PVY), specifické náchylnosti/rezistenci a citlivosti odrůd bramboru k jednotlivým kmenům/variantám PVY. V sadbových porostech tak byl prokázán silný výskyt PVY v šesti posledních ročnících ve kterých v posklizňových skleníkových zkouškách, s navazujícím testem ELISA, nebylo každý rok uznáno vice nežli 20% plochy porostů. Nízká spolehlivost vizuálního rozpoznání onemocnění neumožňuje účinnou selekci nemocných rostlin při negativních výběrech, narůstají neodstraněné zdroje infekce v porostech a v infekčních ročnících dochází ke katastrofálnímu zhoršení zdravotního stavu u řady náchylných odrůd. Ve zkouškách rezistence u celkem 55 odrůd, které byly inokulovaných mechanicky a roubem novými izoláty PVY bylo prokázáno, že po inokulaci izoláty PVY NTN 27 odrůd vytvářelo na hlízách příznaky PTNRD, 12 bylo většinou bez příznaků nekrotické kroužkovitosti (PTNRD). Žádný z izolátů PVY N-Wi naopak žádné příznaky PRNRD u těchto 39 odrůd nevyvolával. Příznaky onemocnění na infikovaných rostlinách bramboru (převážně mozaiky) byly často obtížně detekovatelné, zvláště u odrůd infikovaných izoláty PVY N-Wi. U 16 odrůd českého původu byla současně prokázána též extrémní rezistence k PVY NTN, která však byla u některých odrůd izoláty PVY N-Wi prolomena. Klíčová slova: kmenové spektrum PVY, varianty PVY, reakce odrůd bramboru XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

14 sekce Virologie a Bakteriologie New rhabdoviruses infecting red clover Charakteristika nových rhabdovirů jetele lučního Fránová Jana 1, Koloniuk Igor 1, Jakešová Hana 2 1 Oddělení rostlinné virologie, Ústav molekulární biologie rostlin, Biologické centrum AV ČR, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, jana@umbr.cas.cz 2 Šlechtění jetelů a trav Dr. Hana Jakešová, Fulnecká 100, Hladké Životice, CZ Abstract Previously uncharacterized two different plant rhabdoviruses have been found in symptomatic red clover (Trifolium pratense L.) plants for which the name Red clover cytorhabdovirus 1 (RCC1) and Red clover cytorhabdovirus 2 (RCC2) is proposed. RCC1 caused severe mosaic, necrosis and leaf malformation on mechanically inoculated Physalis floridana Rybd. plants, while crude sap transmission of RCC2 to the range of herbaceous host plants failed. The distribution of the virions within the cytoplasm, its bullet-shaped morphology and size (in average 230 x 53 nm for RCC1 and 322 x 56 nm for RCC2) as well as comparison of nucleotide sequences obtained with newly designed degenerate primer pairs with data available in GenBank suggested that both virus isolates are putative members of the genus Cytorhabdovirus but differed from each other. The full-length nucleotide sequences of the genomic RNA confirmed that the viruses were related to members of Cytorhabdovirus genus. This work was supported by the Ministry of Agriculture of the Czech Republic, Project No. QH71145, and with Institutional support RVO Key words: Trifolium pratense, degenerate primers, next generation sequencing XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

15 sekce Virologie a Bakteriologie Multigene sequence analysis of aster yellows phytoplasma associated with primrose yellows Sekvenční analýza fytoplazmy žloutenky aster infikující zahradní petrklíč Fránová Jana, Přibylová Jaroslava, Koloniuk Igor, Podrábská Kateřina, Špak Josef Oddělení rostlinné virologie, Ústav molekulární biologie rostlin, Biologické centrum AV ČR, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, jana@umbr.cas.cz Abstract Primula acaulis (L.) Hill. plants showing stunting, leaf-yellowing, and virescence were first discovered in the Czech Republic. Transmission electron microscopy observations showed phytoplasmas in sieve cells of symptomatic plants but not in asymptomatic ones. Polymerase chain reactions using universal and group-specific phytoplasma primers with subsequent restriction fragment length polymorphism analyses of 16S rdna enabled classification of the detected phytoplasmas into the aster yellows group, ribosomal subgroup 16SrI-B. Identical analyses of the transcription factor tuf gene, the ribosomal protein rps19, rpl22 and rps3 genes, and the molecular chaperonin large subunit groel gene revealed affiliations of the phytoplasmas with the tufi-b, rpi-b and groelib-iii subgroups, respectively. Comparison of the secy gene sequence with those available in GenBank allowed classification of the phytoplasma into SecY-IB subgroup. Sequence analysis of several chromosomal regions, such as the 16S-23S ribosomal operon, ribosomal proteins, spc ribosomal protein operon, genes for elongation factor EF-Tu, molecular chaperonin large subunit GroEL, immunodominant membrane protein, ribosome recycling factor, urydilate kinase, ATP- and Zn 2+ -dependent proteases did not only confirm its affiliation with the Candidatus Phytoplasma asteris species but also enabled the detailed molecular characterization. Several SNPs were found in the amp, adk, and hflb genes. In addition, unique profiles were obtained after digestion of AY19p/m and BB88F1/R1 amplicons with both MseI and AluI endonucleases. The less researched regions of phytoplasma genome (amp, adk, hflb, pyrh-frr genes) could be valuable as possible additional markers for phytoplasma through differentiation especially within the 16SrI-B ribosomal subgroup. This work was supported by institutional support RVO: Keywords: Primula acaulis, electron microscopy, PCR/RFLP, sequencing XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

16 sekce Virologie a Bakteriologie Detection and molecular characterisation of Grapevine Pinot gris virus and Grapevine Syrah virus-1 in Slovakia Detekcia a molekulárna charakterizácia Grapevine Pinot gris virus a Grapevine Syrah virus-1 na Slovensku Glasa Miroslav 1, Predajňa Lukáš 1, Nagyová Alžbeta 1, Olmos Antonio 2 1 Department of Plant Virology, Institute of Virology, Slovak Academy of Sciences, Dúbravská cesta 9, Bratislava, SK, miroslav.glasa@savba.sk 2 Department of Plant Pathology, Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias, Carretera Moncada a Náquera km 4.5, Moncada, Valencia, ES Abstract In the last few years, the global knowledge of viral pathogens of grapevine (the grapevine virome ) has significantly increased thanks to the application of next-generation sequencing technologies (NGS), bringing the possibility to perform unbiased metagenomic studies directly in field samples. Several NGS-based studies have resulted in the identification of several novel viruses of cultivated crops, including grapevine. The presence of two recently described and still poorly known viruses, Grapevine Pinot gris virus (GPGV) and Grapevine Syrah virus-1 (GSyV-1) was revealed by small-rna deep sequencing in a multiply-infected Slovak grapevine. However, the genomes of GPGV and GSyV-1 isolates could not be reconstructed completelely from the original deep-sequenced sirnas by mapping against reference isolates. Therefore, complete genome sequences of three GPGV and three GSyV-1 isolates were checked and determined by standard dideoxy sequencing. Although showing a typical Trichovirus and Marafivirus genome organization, respectively, the Slovak isolates revealed a substantial divergence from reference GPGV and GSyV-1 isolates. This molecular heterogeneity and distinct phylogenetic clustering was further confirmed by the partial genome analysis of additional natural field isolates. The developed RT-PCR assays have allowed the identification of GPGV and GSyV-1 in several grapevine samples from Slovakia, revealing relatively high incidence of these viruses in a range of tested white- and red-berried grapevine cultivars from different localities. However, no particular symptom could be attributed to the infections, as most of the grapevine plants analysed in this work were simultaneously infected by other viruses, as determined by specific RT-PCRs targeting ArMV, GFkV, GRSPaV, GLRaV-1, GLRaV-3 and/or GVA. Therefore, the real impact of GPGV and GSyV-1 on the grapevines remains yet to be studied. This work was supported by grant VEGA 2/0060/13 from the Scientific Grant Agency of the Ministry of Education and Slovak Academy of Sciences. Key words: Vitis vinifera, virus, next generation sequencing, sirna, genome, molecular diversity XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

17 sekce Virologie a Bakteriologie Průzkum chorob kmínku révy vinné na jižní Moravě Grapevine trunk diseases survey in South Moravia Holleinová Věra, Baránek Miroslav Mendeleum - ústav genetiky, Zahradnická fakulta, Mendelova univerzita v Brně, Valtická 337, Lednice, CZ, vera.holleinova@mendelu.cz Několikaletý průzkum byl v roce 2014 zaměřen na monitoring výskytu syndromu ESCA u odrůd Cabernet Sauvignon a Chardonnay ve vinicích vysazených před 15 až 27 lety ve třech lokalitách vinařské podoblasti znojemské, mikulovské a velkopavlovické. Zaznamenány byly výpadky rostlin před zahájením průzkumu a byl sledován další úhyn rostlin během vegetace. V porostech s minimálním počtem 500 rostoucích rostlin od jedné odrůdy byly vyhledávány typické příznaky ESCA na listech, odumírání ramen rostliny a kmínku. Ve všech lokalitách byly v horší kondici porosty odrůdy Cabernet Sauvignon než Chardonnay, a to jak v parametrech vitality rostlin, tak ve výpadku rostlin v porostu. V nejhorším stavu se nacházel porost Cabernet Sauvignon v extrémní poloze na svazích Pálavy nad obcí Perná. Z původní výsadby z roku 1998 zde zůstalo pouze 37,8 % rostoucích rostlin. Napadení ESCA zde však bylo dle vizuálního hodnocení nejnižší (5,5 %) ze tří sledovaných lokalit. Závažnější postižení porostů komplexem patogenů ESCA bylo na stanovišti Vrbovec, kde dosáhlo u odrůdy Cabernet Sauvignon až 12,3 %. Přesto byl ve Vrbovci výpadek rostlin Cabernet Sauvignon cca 36 % zatímco v Perné činil 62 %. V Kobylí byl výpadek rostlin odrůdy Cabernet Sauvignon cca 12 %, přičemž příznaky ESCA se projevily u cca 6 % živých rostlin. U odrůdy Chardonnay se symptomy ESCA objevily u 3-5 % rostlin na stanovištích Perná a Vrbovec. V Kobylí nebyla nalezena v porostu ani jedna rostlina s příznaky ESCA. Výpadek rostlin na původní osázené ploše byl opět nejvyšší v Perné - téměř 43 %, zatím co ve Vrbovci byl 14 % a v Kobylí 7 %. Úhyn rostlin během vegetačního období 2014 se pohyboval v daných lokalitách u Chardonnay od 0 do 0,6 %, u Cabernet Sauvignon od 0,8 do 1,8 %. Klíčová slova: ESCA syndrom, listové symptomy, odumírání kmínku XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

18 sekce Virologie a Bakteriologie Hypovirulence in phytopathogenic fungi - a handy tool without manual Hypovirulence u fytopatogenních hub - užitečný nástroj bez manuálu Hrabáková Lenka 1, 2, Koloniuk Igor 2, Petrzik Karel 2 1 Department of Genetics, Faculty of Science, University of South Bohemia in České Budějovice, Branišovská 31a, České Budějovice, CZ 2 Department of Plant Virology, Institute of Plant Molecular Biology, Biology Centre of Academy of Science of the Czech Republic, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, lenka.hrabakova@gmail.com Abstract Hypovirulence, the ability of mycovirus to decrease fungal virulence, can be caused either 1) by some ss- and ds- RNA mycoviruses from families Narnaviridae, Hypoviridae, Chrysoviridae, Totiviridae and Reoviridae, or 2) by defective mitochondria in virus-free cultures phenomena called mitochondrial hypovirulence which is extremely rare, however (Nuss, 2005). The viral ability to alter fungal virulence has stimulated intensive research of using mycoviruses for biological control of fungal disease. However, till now, the molecular mechanism behind the virus influence on its fungal host still remains to be described. The model example of hypovirulence is Cryphonectria parasitica and its virus Cryphonectria parasitica hypovirus 1 (CHV1). CHV1 was used as a biocontrol of chestnut blight diseases caused by C. parasitica in last century. Nowadays, we are doing a research on the hypovirulent culture of phytopathogenic fungus Phomopsis longicolla infected by new Phomopsis longicolla hypovirus 1 and with Phomopsis longicolla RNA virus 1 a putative new member of family Narnaviridae (article in preparation). Both of the viruses were sequenced and their role on the hypovirulence of the fungal culture is going to be studied. Acknowledgment: The research is supported by following grants: institutional support RVO: ; project LH Kontakt II Mycovirus-host interactions in disease isolates of phyto- and entomopathogenic micromycetes from ministry of educations, youth and sports of the Czech Republic; Postdok_BIOGLOBE (CZ.1.07/2.3.00/ ), co-financed by the European Social Fund and the State Budget of the Czech Republic and GAJU 143/2013/P. Nuss, D. L. (2005). Hypovirulence: mycoviruses at the fungal plant interface. Nature Reviews Microbiology, 3 (8), Key words: hypovirulence, phytopathogenic fungi, Phomopsis longicolla, Cryphonectria parasitica, biocontrol XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

19 sekce Virologie a Bakteriologie Reakce původce bakteriální kroužkovitosti bramboru, bakterie Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus na přítomnost antibiotik v živném médiu The reaction of the causal agent of bacterial ring rot of potato, the bacterium Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus in the presence of antibiotics in nutrient media Chytráčková Jitka, Pánková Iveta, Krejzar Václav Výzkumný ústav rostlinné výroby, Drnovská 507/73, Praha 6 - Ruzyně, CZ, chytrackova@vurv.cz Rezistence k antibiotikům gentamicin, rifampicin, cefotaximin a ampicilin byla zjišťována v podmínkách in vitro u původce bakteriální kroužkovitosti bramboru, gram pozitivní bakterie Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms). Účinnost antibiotik k potlačení růstu Cms byla testována na sbírkových kmenech a virulentních izolátech získaných z rostlin a hlíz bramboru. Kmeny byly opakovaně pasážovány na komerčních živných médiích s doporučeným obsahem antibiotik (10-20 µg/ml živného média). Účinnost antibiotik byla posuzována podle redukce nárůstu bakterie v porovnání s kontrolními živnými plotnami. Koncentrace antibiotik doporučené v návodech pro přípravu živných růstových médií se ukázaly u většiny kmenů jako nedostatečné a vedly k vzniku rezistence. Testovaná antibiotika pouze zpomalovala a redukovala nárůst bakterie. Při opakovaném pasážování (3-4) nebyl u více jak 90 % kmenů patrný rozdíl mezi médiem s antibiotiky a kontrolními plotnami. Následné zvýšení koncentrace antibiotik v médiu ( µg/ml živného média) již bylo neúčinné. Příspěvek byl zpracován s finanční podporou Ministerstva zemědělství ČR, projektu NAZV č. QJ a institucionálního projektu RO0415. Klíčová slova: bakteriální kroužkovitost bramboru, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, rezistence, antibiotika, živné médium XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

20 sekce Virologie a Bakteriologie Porovnanie real-time PCR protokolov na báze hydrolyzačných sond a interkalačných farbív pri detekcii a kvantifikácii fytoplaziem skupiny 16SrX Comparison of real-time PCR protocols based on hydrolysis probes and intercalating dyes in detection and quantification of fruit tree 16SrX group phytoplasmas Kiss Tomáš, Nečas Tomáš, Nečasová Jana Ústav ovocnictví, Zahradnická fakulta v Lednici, Mendelova Univerzita v Brne, Valtická 337, Lednice, CZ, xkiss@mendelu.cz Real-time PCR predstavuje metódu pre rýchlu a citlivú detekciu s možnosťou kvantifikácie cieľovej časti DNA. V porovnaní s nested PCR klesá riziko zvýšeného rizika kontaminácie. V práci boli testované dva real-time PCR protokoly na báze interkalačných farbív a dva na báze hydrolyzačných sond. Ako testovací materiál boli použité poľné vzorky ovocných stromov infikovaných fytoplazmami zo skupiny 16SrX (AP, PD a ESFY). Špecifita a citlivosť protokolov tak ako aj efektivita amplifikácie boli hlavnými parametrami testovania. Výsledky real-time PCR protokolov boli porovnané s nested PCR. Všetky real-time PCR protokoly potvrdili svoju špecifitu detekcie. Všetky real-time PCR protokoly boli krát citlivejšie ako nested PCR. Real-time PCR protokoly na báze hydrolizačných sond boli 10 krát citlivejšie, schopné detekovať rádovo 10 0 až 10 1 cieľových kópií DNA, než protokoly na báze interkalačných farbív. Spomedzi protokolov na báze hydrolyzačných sond mal mierne lepšie detekčné vlastnosti protokol podľa Christensen et al. (2004). Kľúčové slová: AP, ESFY, PD, 16SrX skupina, Bryt Green, TaqMan, TaqMan MGB, qpcr XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

21 sekce Virologie a Bakteriologie Nové možnosti citlivé detekce viroidu vřetenovitosti hlíz bramboru (Potato spindle tuber viroid, PSTVd) New possibilities for sensitive detection of Potato spindle tuber viroid (PSTVd) Kmoch Martin, Dědič Petr Výzkumný ústav bramborářský Havlíčkův Brod, s.r.o., Dobrovského 2366, Havlíčkův Brod, CZ, kmoch.martin@gmail.com Pro detekci a diagnózu závažných patogenů řazených do kategorie regulovaných (karanténních) organismů, doporučuje EPPO (European and Mediterranean Plant Protection Organization) využívání vhodných diagnostických postupů. K nejcitlivějším jsou řazeny molekulární metody, zvláště PCR (Polymerase Chain Reaction). Cílem vlastní práce bylo ověření a aplikace inovovaných postupů qrt-pcr a Luminex-xTAG pro detekci izolátů PSTVd v bramboru (Solanum tuberosum) a některých okrasných rostlinách (Solanum jasminoides, Brugmansia sp.). Ve vlastním postupu qrt-pcr byla používána jednokroková varianta s nespecifickým fluorescenčním barvivem SYBR Green a specifická TaqMan sonda. Oběma metodami byly testované izoláty PSTVd spolehlivě detekovány. V postupu Luminex xtag, tvořící kombinaci amplifikace a TSPE (Target-Specific Primer Extension) vybraného úseku genomu s navazující hybridizací s paramagnetickými částicemi, byly zkoušené izoláty PSTVd rovněž specificky a spolehlivě detekovány. Metoda Luminex-xTAG představuje novou metodu vhodnou pro detekci patogenů na molekulární úrovni s citlivostí, která se přibližuje postupu qrt-pcr. Klíčová slova: viroidy, EPPO, qrt-pcr, TaqMan sondy, SYBR Green, Luminex-xTAG XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

22 sekce Virologie a Bakteriologie A novel circular ssdna virus isolated from Phomopsis longicolla Koloniuk Igor 1, Hrabáková Lenka 1, 2, Petrzik Karel 1 1 Department of Plant Virology, Institute of Plant Molecular Biology, Biology Centre of Academy of Science of the Czech Republic, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, koloniuk@umbr.cas.cz 2 Department of Genetics, Faculty of Science, University of South Bohemia in České Budějovice, Branišovská 31a, České Budějovice, CZ Abstract A field of fungal virology shows remarkable expansion. Many notorious plant pathogens were studied for the presence of viruses and their impact on the host. A soybean pathogen, ascomycete fungus Phomopsis longicolla, caught our interest. While performing NGS analyses of DNA from several fungal isolates, we identified sequences of geminivirus-like rep catalytic domain in one of control samples, anticipated to be virus-free. Afterwards, the presence of circular DNA genome of 3170 nt long was confirmed by a conventional inverse PCR. The virus was provisionally named Phomopsis longicolla circular virus 1 (PlCV1). PlCV1 shares mere 23 % of aa identity in replication protein with Sclerotinia sclerotiorum hypovirulence associated DNA virus 1, while having over 30 % of identity with begomoviruses (Geminiviridae family). RNAseq analysis of PlCV1 transcriptome showed presence of a small intron in a gene coding replication protein. Here, we present the results of its molecular and phylogenetic analyses. So far, this is the second known circular DNA virus isolated from a fungal host. This work was performed with institutional support RVO: , project LH Kontakt II- Mycovirus-host interactions in diseased isolates of phyto- and entomopathogenic micromycetes from the Ministry of Education, Youth and Sports of the Czech Republic and Postdok_BIOGLOBE (CZ.1.07/2.3.00/ ) project. Key words: Phomopsis longicolla fungus, circular ssdna virus, NGS, RNAseq XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

23 sekce Virologie a Bakteriologie První výsledky analýzy viromu révy vinné v ČR pomocí sekvenování nové generace First results of next generation sequencing of grapevine virome in the Czech Republic Komínek Petr 1, Komínková Marcela 1, Eichmeier Aleš 2 1 Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, kominek@vurv.cz 2 Mendeleum ústav genetiky, Zahradnická fakulta, Mendelova univerzita v Brně, Valtická 334, Lednice, CZ Metoda sekvenování nové generace (next generation sequencing - NGS) byla zvolena pro analýzu viromu révy vinné, tj. souboru veškerých virů a viroidů přítomných v pletivech. Ze souboru pěti rostlin révy vinné byly odebrány vzorky lýkových pletiv, z nichž byla izolována nízkomolekulární RNA precipitací polyetylenglykolem. Krátké RNA (small RNA, srna) pak byly separovány elektroforeticky. Knihovny populací srna byly sekvenovány přístrojem Illumina HiScanSQ (University of Aldo Moro, Bari, Itálie). Po odstranění adaptérů byla získaná čtení jednotlivých běhů složena programem Velvet a výsledné kontigy porovnány programem BLAST s databází virů a viroidů. Byla tak stanovena přítomnost hledaných patogenů. Kontigy byly dále mapovány na referenční sekvence a bylo stanoveno výsledné pokrytí (coverage). Viry a viroidy s pokrytím genomu více než 74 % byly definovány jako přítomné. Jejich přítomnost byla ověřena pomocí RT-PCR s primery navrženými na základě získaných sekvencí. Sekvenováním virové krátké RNA (viral small RNA, vsrna) za použití NGS byly v testovaném souboru pěti rostlin révy vinné identifikovány 4 viry a 2 viroidy, viz tabulka 1. Ve všech pěti testovaných rostlinách byla prokázána přítomnost dvou viroidů. Touto prací jsme poprvé prokázali výskyt viroidu Grapevine yellow speckle viroid-1 v ČR. Tabulka 1. Seznam testovaných rostlin révy vinné a detekovaných virů a viroidů Odrůda Viry Viroidy Kober 125AA GLRaV-1 GYSVd-1, HSV Rulandské modré GPGV, GRSPaV, GFkV GYSVd-1, HSV Laurot GPGV, GRSPaV GYSVd-1, HSV Müller Thurgau GLRaV-1 GYSVd-1, HSV Guzal Kara GRSPaV GYSVd-1, HSV Akronymy virů a viroidů: GLRaV-1 Grapevine leafroll-associated virus 1; GPGV Grapevine Pinot gris virus; GRSPaV Grapevine rupestris stem pitting-associated virus; GFkV Grapevine fleck virus; GYSVd-1 Grapevine yellow speckle viroid 1; HSV Hop stunt viroid Klíčová slova: vinná réva, virus, viroid, metoda sekvenování nové generace Abstract XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

24 sekce Virologie a Bakteriologie For the analysis of grapevine virome, NGS (Next Generation Sequencing) method was selected. Phloematic tissues were sampled from selected five grapevines. Low molecular weight RNA fraction was isolated by polyethylenglycol precipitation. Small RNAs were separated by electrophoresis. Libraries of small RNA populations were sequenced with an Illumina HiScanSQ (University of Aldo Moro, Bari, Italy). After trimming of adaptors, contigs of individual reads were assembled by Velvet programme and screened by BLAST for homology to viruses and viroids. After mapping on the reference sequences, the presence of studied pathogens in the grapevines was determined. Viruses and viroids, whose genomes coverage were at least 74 % were marked as present. Their presence was verified by RT-PCR with primers designed according to obtained sequences. By sequencing vsrna using NGS, 4 different viruses and 2 viroids were identified in a set of 5 grapevines (Table 1). Two viroids were detected in tissues from all plants. According to our knowledge, this is the first report of Grapevine yellow speckle viroid-1 in the Czech Republic. Table 1. A list of tested grapevines with detected viruses and viroids Cultivar Viruses Viroids Kober 125AA GLRaV-1 GYSVd-1, HSV Pinot Noir GPGV, GRSPaV, GFkV GYSVd-1, HSV Laurot GPGV, GRSPaV GYSVd-1, HSV Müller Thurgau GLRaV-1 GYSVd-1, HSV Guzal Kara GRSPaV GYSVd-1, HSV Virus and viroid abbreviations: GLRaV-1 Grapevine leafroll-associated virus 1; GPGV Grapevine Pinot gris virus; GRSPaV Grapevine rupestris stem pitting-associated virus; GFkV Grapevine fleck virus; GYSVd-1 Grapevine yellow speckle viroid 1; HSV Hop stunt viroid Key words: grapevine, virus, viroid, next generation sequencing XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

25 sekce Virologie a Bakteriologie Hostitelský okruh viru kroužkovitosti jeřábu a optimalizace diagnostických metod pro jeho detekci z rostlinného materiálu Host range of European mountain ash ringspot-associated virus and optimalization of diagnostic methods for its detection from plant material Konrady Michal, Grimová Lenka, Ryšánek Pavel Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, konrady.michal@gmail.com Přítomnost viru kroužkovitosti jeřábu ptačího (European mountain ash ringspot-associated virus, EMARaV) byla v minulosti potvrzena v mnohých evropských zemích. Jediným známým hostitelem byl do dnešní doby v literatuře uváděn pouze jeřáb ptačí. Způsob přirozeného přenosu patogena je zatím neznámý. Vertikální přenos semeny ani pylem nebyl prokázán. Hlavním podezřelým zůstává roztoč Eriophyes pyri Pagenstecher, syn. Phytoptus pyri. Během naší studie bylo v letech 2010 až 2014 naočkováno 36 různých rostlinných druhů a mezidruhových kříženců z podčeledi Maloideae, čeledi Rosaceae očky z EMARaV infikovaných jeřábů ptačích. Následující rok po inokulaci byly na řadě testovaných rostlin patrné typické příznaky pro virovou infekci patogenem. Přítomnost viru byla potvrzena pomocí RT-PCR. Tato studie tedy podává přímý důkaz o možnosti přenosu viru kroužkovitosti jeřábu ptačího pomocí vegetativního rozmnožování na doposud nepopsané hostitelské rostliny. Jelikož přítomnost EMARaV v některých případech na listech svých hostitelů nevyvolává žádné příznaky, je dostupnost dostatečně citlivých molekulárních diagnostických metod nezbytnou podmínkou pro spolehlivou detekci patogena v biologickém materiálu. Z tohoto důvodu byla další část studie zaměřena na optimalizace detekčních technik založených na RT-PCR. Protože je kvalita vyizolované RNA, spolu s jejím dostatečným množstvím pro úspěšnou detekci viru pomocí molekulárních technik zcela nezbytná, byla velká pozornost věnována zejména výběru spolehlivé izolační techniky a důraz byl kladen i na správné načasování odběru rostlinného materiálu. Klíčová slova: virus kroužkovitosti jeřábu, jeřáb ptačí, hostitelský okruh, přenos patogena, metody detekce XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

26 sekce Virologie a Bakteriologie Hodnocení hladiny náchylnosti (rezistence) genotypů jabloně vůči patogenu bakteriální spály růžovitých (Erwinia amylovora) Evaluation of susceptibility level of apple cultivars to fire blight (Erwinia amylovora) in field conditions Korba Josef, Šillerová Jana Výzkumná stanice Slaný, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Politických vězňů 1346, Slaný, Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, korba@vurv.cz U vybraného sortimentu odrůd jabloně byla v letech testována jejich hladina rezistence k bakterii Erwinia amylovora (Ea) vyvoláním umělé infekce. Umělá infekce byla provedena střihem nůžkami namočenými v bakteriální suspenzi izolátů Ea koncentrace 10 6 cfu/ml v období intenzivního prodlužovacího růstu výhonů za příznivých klimatických podmínek. Hodnocení bylo provedeno 40 dní po inokulaci porovnáním délky bakteriální léze k celkové délce inokulovaného výhonu vyjádřené v %. Z celkového počtu 14 testovaných genotypů jabloně byla nejvyšší hladina rezistence vůči patogenu bakteriální spály růžovitých (jabloňovitých) zjištěna u 2 odrůd zařazených do třídy velmi rezistentní (14,3% - odrůdy Selena a Remo). Dále byla vyhodnocena 1 odrůda jako středně rezistentní (7,1% - odrůda Rewena), 5 odrůd středně náchylných (35,7% - odrůdy Cumulus, Herald, Gold Bohemia, Jonagold a Sir Prize), 4 odrůdy náchylné (28,4% - odrůdy Bohemia, Clijo, Gold Delicious a Miodar) a 2 odrůdy velmi náchylné (14,3% - odrůdy Gala a Rubinstep). Výzkum byl proveden za podpory MZe financováním projektů RO 0415 a QJ Klíčová slova: bakterie Erwinia amylovora, bakteriální spála jabloňovitých, rezistence odrůd jabloně XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

27 sekce Virologie a Bakteriologie Výskyt přirozené infekce bakterie Pseudomonas syringae na hrušni v roce 2014 The incidence of natural infection of Pseudomonas syringae bacterium on pear-tree in 2014 Krejzar Václav, Pánková Iveta, Korba Josef Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, krejzar@vurv.cz V roce 2014 byli pracovníci řešitelského týmu Rostlinolékařské bakteriologie VÚRV, v.v.i. osloveni s cílem objasnit příčinu předčasného odumírání a opadu vyvíjejících se plodů hrušně po odkvětu v produkčním sadu na Mělnicku s následkem výrazné ztráty na výnosu. Byla provedena mikrobiologická analýza vzorků rostlinných pletiv odebraných z částí rostlin s příznaky choroby: letorost (zčernalý vrchol); list (zhnědlé nekrotické postranní žilky, listové skvrny s chlorotickým halo); plodonoš (zčernalé odumřelé plody); plod (zbytky květních orgánů na bázi vyvíjejícího se plodu - kališní a korunní plátky, hnědé vodnaté léze na povrchu plodu, okolí jádřince a vodivá pletiva plodu na podélném řezu). Jako příčinné agens byly izolovány a determinovány (Biolog GEN III, Sherlock) kmeny bakterie Pseudomonas syringae. Bakterie se nacházely v epifytní mikroflóře a za vhodných podmínek aktivně pronikly do rostlinných pletiv. Vysoký stupeň virulence a agresivity získaných bakterií byl ověřen v testech in vivo na indikátorových hostitelských rostlinách (tabák - Nicotiana tabacum, slunečnice - Helianthus annuus, pryšec zářivý - Euphorbia milii) a na testovacích rostlinách hrušně. Pektinolytické vlastnosti bakterie byly ověřeny na plodech hrušně. Získané virulentní kmeny bakterie druhu Pseudomonas syringae, z ovocných dřevin napadající převážně peckoviny, byly uloženy do Sbírky fytopatogenních bakterií a v následujících letech budou přednostně využívány jako standardy pro hodnocení hladiny rezistence genotypů ovocných dřevin. Práce vznikla za finanční podpory MZe ČR, Institucionální projekt č. RO0415. Klíčová slova: Pseudomonas syringae, přirozená infekce, hrušeň XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

28 sekce Virologie a Bakteriologie Sequence variability of viruses infecting sweet and sour cherries Sekvenční variabilita virů infikujících třešně a višně Lenz Ondřej, Fránová Jana, Koloniuk Igor, Přibylová Jaroslava, Špak Josef, Špaková Vlastimila Oddělení rostlinné virologie, Ústav molekulární biologie rostlin, Biologické centrum AV ČR, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, lenz@umbr.cas.cz Abstract Four trees were selected from more than 140 screened by RT-PCR, containing mixed infection of several viruses. Using Next-generation sequencing (NGS), major part of viral genomes presented in the samples was obtained including the viruses not yet detected in the Czech Republic (see contribution of Špak et.al, Cherry and sour cherry virome analysis by next generation sequencing ). The genomes were/are being completed by classical Sanger sequencing and compared to the sequences from GenBank. While Cherry leaf roll virus (CLRV), Cherry virus A (CVA), Prunus necrotic ring spot virus (PNRSV), and Prune dwarf virus (PDV) are similar to already known viruses, Cherry green ring mottle virus (CGRMV) and Little cherry virus 2 (LChV2) differ from those in GenBank. Two isolates of CGRMV obtained clustered together and share only 83% of nucleotide similarity with isolates from China, France and USA published so far. Nucleotide sequence of LChV2 is more than 21% divergent from the sequences of LChV2 in GenBank and this isolate probably represents a new species. Both specific and universal primers were designed, distinguishing the Czech isolates only and the all sequence variants, respectively. The research is supported by the grant No. LD of the Ministry of Education, Youth and Sports, the COST action FA1104, and the grant No. RVO of the ASCR. Key words: virus variability, cherry, sour cherry, next generation sequencing XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

29 sekce Virologie a Bakteriologie GoldenBraid 2.0 new tool for modifying of plant glycosylation GoldenBraid 2.0 nová metodika pro modifikaci glykosylace v rostlinách Moravec Tomaš 1, Vaculík Petr 1, 2, Plchová Helena 1, Čeřovská Noemi 1 1 Institute of Experimental Botany, Academy of Sciences of the Czech Republic, v. v. i., Rozvojova 313, Prague 6, CZ, moravec@ueb.cas.cz 2 Faculty of Science, Charles University in Prague, Albertov 6, Prague 2, CZ Abstract Plants represent highly attractive expression system in terms of cost-effectivness, presence of glycosylation and lack of animal pathogens. Mostly in the wake of small economic burden on plant growth, an idea of plant-produced therapeutic proteins with affordable prices, especially for developing countries, has been formed. Besides the cost-effectivness, N-glycosylation is another important attribute of plant expression systems. Despite the fact that plant N-glycosylation is similar to mammalian one, there are some differences that should be taken account. The most striking difference is missing of sialic acids in plants, following by the presence of plant specific core β1,2-xylose and core α1,3- fucose. While missing of sialic acids can negatively influence pharmacokinetic properties of therapeutic proteins, the presence of core β1,2-xylose and α1,3-fucose can be connected with an allergic potential in humans. In the light of above, we decided to exploit a cloning system GoldenBraid 2.0 for the preparation of transgenic plants Glycine max, Pisum sativum, Nicotiana benthamiana and Arabidopsis thaliana each carrying eight genes for human sialylation, two genes for RNAi knock-out of plant β1,2-xylosyltransferase (XylRNAi) and α1,3-fucosyltransferase (FucRNAi) and two genes for light and heavy chain of humanized monoclonal antibody against Rabies virus (Mab-57). Here we present a cloning strategy for the preparation of two constructs. The first one carrying eight genes for human sialylation, all under chemically inducible promoter, and the second one carrying two genes for XylRNAi and FucRNAi under seed-specific oleosin promoter plus two genes for light and heavy chain of Mab-57 under seed-specific glycinin and conglycinin promoter, respectively. The main purpose of this project is to assess the impact of modified glycosylation on seed filling, protein trafficing, seed storage protein deposition and their mobilisation during germination. Furthermore, glycosylation profile of Mab-57 will be determined. Key words: GoldenBraid 2.0, plant glycosylation, human sialylation, β1,2-xylosyltransferase, α1,3-fucosyltransferase, Mab-57, transgenic plant XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

30 sekce Virologie a Bakteriologie Detekce původce bakteriální kroužkovitosti bramboru, karanténní bakterie Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, v třístupňovém procesu kontroly sadbového materiálu bramboru Detection of causal agent of bacterial ring rot of potato, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus bacterium, in three-step inspection process in breeding material Pánková Iveta, Krejzar Václav Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, pankovai@vurv.cz S cílem zabránit šíření původce bakteriální kroužkovitosti bramboru, karanténní bakterie Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Cms), v procesu šlechtění a množení konzumních a průmyslových genotypů bramboru prostřednictvím bezpříznakových hlíz s podprahovou koncentrací patogenu, byl s ohledem na pracovní a finanční náročnost navržen třístupňový proces kontroly výchozích materiálů. Vzhledem k pomalému růstu patogenu, jeho přežívání v nízkých koncentracích a malému množství výchozího rostlinného materiálu je detekce patogenu obtížná a časově náročná. V první fázi je přítomnost Cms v cévních svazcích vybraných vzhledově perfektních hlíz hodnocena pouze vizuálně. V druhé fázi se determinuje přítomnost patogenu ELISA testem a real-time PCR metodou v cévních svazcích rostlin a dceřiných hlíz dopěstovaných z matečných hlíz negativních v první fázi kontroly. Posledním krokem je testování rostlin in vitro získaných převodem z negativních dceřiných hlíz metodou ELISA a real-time PCR. Příspěvek byl zpracován s finanční podporou Ministerstva zemědělství ČR, projektu NAZV č. QJ a institucionálního projektu RO0415. Klíčová slova: bakteriální kroužkovitost bramboru, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, ELISA, real-time PCR, determinace, vstupní genetický materiál XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

31 sekce Virologie a Bakteriologie Virus-fungus-oribatid mite system Petrzik Karel 1, Starý Josef 2, Sarkisova Tatiana 1, Koloniuk Igor 1, Hrabáková Lenka 1, 3 1 Department of Plant Virology, Institute of Plant Molecular Biology, Biology Centre of Academy of Sciences of the Czech Republic, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, petrzik@umbr.cas.cz 2 Institute of Soil Biology, Biology Centre of Academy of Sciences of the Czech Republic, v. v. i., Na Sádkách 7, České Budějovice, CZ 3 Department of Genetics, Faculty of Science, University of South Bohemia in České Budějovice, Branišovská 31a, České Budějovice, CZ Abstract Thelephora terrestris (Ehrh.) - (earthfan fungus) (family Thelephoraceae Chevall.) is a pioneer mycobiont which occurs on a wide variety of soils. Pinus sp. is the most frequent host of T. terrestris, but the fungus can form mycorrhizas with range of plant genera including alder (Alnus), birch (Betula), chestnut (Castanea), beech (Fagus), poplar (Populus), oak (Quercus), willows (Salix), and others. A novel dsrna virus has been identified in T. terrestris and sequenced. This virus named Thelephora terrestris virus 1 (TtV1) has nonpolyadenylated dsrna genome of about 10 kbp and contains two open reading frames in different frames with a possibility of a fusion ORF1:ORF2 polyprotein expression after ribosomal -1 frameshifting. Picornavirus 2A proteinase, NUDIX hydrolase, S7 phytoreovirus and RdRp domains were found in unique arrangement on the polyprotein but no capsid protein-like domain was identified there. TtV1 was related to yet unclassified Phlebiopsis gigantea virus 1 (PgV1) and Lentinula edodes virus (LeV) with 53 % and 24 % aa sequence identity in RdRp, respectively. A new genus with the name Phlegivirus containing TtV1, PgV1 and LeV was proposed, therefore. Twenty species of oribatid mites have been identified in soil material in the vicinity of T. terrestris. TtV1 was detected in high amount in Steganacarus (Tropacarus) carinatus (C. L. Koch, 1841) and in much smaller amount in Nothrus silvestris (Nicolet, 1855). In FISH hybridization the viral signal was distributed in all body content of S. (T). carinatus but not in the other species. This is the first description of mycovirus presence in oribatid mite. This work was performed with institutional support RVO: , AS CR Research Plant No.AV0Z , project LH Kontakt II, and Postdok_BIOGLOBE (CZ.1.07/2.3.00/ ) project. Key words: complete virus sequence, Earthfan fungus, Phlegivirus, soil mites, Acari, Oribatida, FISH XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

32 sekce Virologie a Bakteriologie Zásadní obrat v ochraně proti viru šarky švestky: jednotlivé stromy i celé nové výsadby švestky zůstanou po celou dobu životnosti šarky prosté Principal change in the protection against Plum pox virus: individual trees and new orchards of plum remain free of sharka for the whole time of life Polák Jaroslav Rostlinolékařská virologie a fytoplasmatologie, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, polak@vurv.cz Virus šarky švestky, Plum pox virus (PPV) je karantenní patogen, který způsobuje obrovské ztráty, především na švestkách. Problém PPV na švestkách nebyl dosud tradičním šlechtěním vyřešen. Efektivní rezistenci je možno získat pomocím genetického inženýrství. V USA byl získán transgenní klon švestky C5 k PPV vysoce rezistentní, na který je PPV nepřenosný mšicemi. Transgenní švestka Prunus domestica L., klon C5 byla v USA deregulována jako odrůda HoneySweet v roce V České republice je od roku 2002 provozován a hodnocen polní pokus švestky HoneySweet. Byla potvrzena nepřenosnost PPV na tuto švestku přirozenou infekcí mšicemi. Pro zajištění nepřenosnosti PPV na stromy švestky HoneySweet prostřednictvím infikované podnože byl prováděn výzkum rezistence podnoží k tomuto viru. Byla nalezena podnož, myrobalán BN4Kr, na kterou je PPV rovněž mšicemi nepřenosný. Pro klon PK tohoto myrobalánu byl vypracován metodický postup množení in vitro. Stromy a sady GM švestky HoneySweet rostoucí na podnoži myrobalán PK zůstanou po celou dobu životnosti šarky prosté. Nepřenosnost PPV mšicemi je podmíněna jedním dominantním genem. Bude proto možno upravit velmi kvalitní, ale k PPV silně náchylné odrůdy švestky a přenést do nich z GM švestky HoneySweet nepřenosnost viru šarky švestky mšicemi. Klíčová slova: šarka švestky, rezistence, přenos mšicemi, GM švestka, rezistentní podnož XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

33 sekce Virologie a Bakteriologie Výskyt virů ve volně rostoucích peckovinách a v jabloních z různých typů porostů Occurrence of viruses in wild stone fruit trees and in apples from various types of growth Ryšánek Pavel, Grimová Lenka, Winkowska Lucie, Šuková Petra, Konvalinová Monika Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, rysanek@af.czu.cz Byly testovány peckoviny volně rostoucí v oblasti Tichého údolí na SV okraji Prahy. Vzorky listů byly odebírány v jarním období ze stromů s příznaky i bez příznaků. Celkem bylo odebráno 159 vzorků (42 třešní, 77 střemch, 15 švestek, 13 trnek, 10 myrobalánů a 2 blumy), které byly pomocí RT-PCR testovány na přítomnost viru šarky švestky (PPV), viru zakrslosti slivoně (PDV), viru nekrotické kroužkovitosti slivoně (PNRSV), A viru třešně (CVA), viru svinutky třešně (CLRV), viru chlorotické skvrnitosti jabloně (ACLSV), viru mozaiky jabloně (ApMV), viru zelenokroužkovité strakatosti třešně (CGRMV) a viru nekrotické rzivé strakatosti třešně (CNRMV). 28,3 % rostlin bylo infikováno alespoň jedním virem a 5 stromů (3,1 %) mělo směsnou infekci. Největší podíl stromů byl infikován PPV (13,2 %) a PDV (11,3 %). Naproti tomu ACLSV, ApMV, CGRMV a CNRMV nebyly zjištěny v žádné rostlině. Dále byly testovány jabloně z různých typů porostů na výskyt čtyř nejdůležitějších virů - viru mozaiky jabloně, viru chlorotické skvrnitosti jabloně, viru vrásčitosti kmene jabloně (ASPV) a viru žlábkovitosti kmene jabloně (ASGV). Největší podíl vzorků (384) pocházel z alejí podél cest a silnic, dále byly testovány stromy volně rostoucí v Tichém údolí (37 vzorků), ve starém sadu v Tichém údolí (8 vzorků) a dále ve dvou soukromých zahradách s různou historií (25 a 8 vzorků). Nejnižší podíl infikovaných stromů byl překvapivě zjištěn v alejích (5,2 %), poněkud vyšší byl ve volně rostoucích stromech (13,7 %), ve staré zahradě bylo infikováno 50 % stromů a ve starém sadu 100 % stromů. Ve všech těchto případech se jednalo o jednoduché nebo maximálně dvojité infekce. Naopak v zahradě se stromy pocházejícími většinou ze sedmdesátých let minulého století a navíc přeroubovanými koncem osmdesátých let byla větší část stromů (72 %) infikována nejméně třemi viry a téměř polovina (44 %) stromů dokonce všemi čtyřmi viry. Bez výskytu virů zde byl pouze jeden stromek, vysazený asi před 10 roky. Ve starších výsadbách a ve volně rostoucích stromech dominoval výskyt ASGV (95 % infekcí) s trochu nižším podílem ASPV (85 %). ACLSV a ApMV zde byly přítomny v mnohem menším měřítku (shodně 30 %), v alejích ACLSV dokonce chyběl úplně. V novější zahradě ACLSV naopak převládal (96 %) v těsném závěsu s ASPV (92 %). V příspěvku budou diskutovány možné příčiny zjištěného zdravotního stavu testovaných stromů. Klíčová slova: peckoviny, jabloně, virové choroby XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

34 sekce Virologie a Bakteriologie New mycoviruses from basidiomycetous fungi Sarkisova Tatiana, Petrzik Karel, Lenz Ondřej Department of Plant Virology, Institute of Plant Molecular Biology, Biology Centre of Academy of Sciences of the Czech Republic,v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, sarkisova@umbr.cas.cz Abstract Over 80 mycovirus species were found in fungi belonging to different taxonomic groups. The presence of dsrna elements in basidiomycetes have been reported since long time with describing impact on commercially produced mushrooms such as Agaricus bisporus, Lentinula edodes (shiitake) and Flammulina velutipes (enokitake) as well as in plant pathogenic basidiomycetes as Rhizoctonia solani and in number of Heterobasidion annosum isolates. Here we firstly describe occurrence of viruses in two basidiomycetous fungus: Polyporus badius (choroš smolonohý) - which is one of the best known tree destroying fungi, and Otidea leporina (ouško zaječí). Double stranded RNA was isolated from fruiting bodies and RT-PCR with random primers was performed. The partial nucleotide sequences of the RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) and capsid protein (CP) genes were obtained and the Blast search showed 36% and 30-46% similarity to putative RdRp and CP of partitiviruses, respectively. Based on the Blast search results, the Ustilaginoidea virens partitivirus 2, Dillcryptic virus 2, Rosellinia necatrix partitivirus 1-W8 and Heterobasidion partitivirus 8, Fusarium poae virus 1, Primula malacoides virus China/Mar2007, Dill cryptic virus 2, White clover cryptic virus 2 and Sclerotinia sclerotiorum partitivirus 1 were shown more closely related to our viruses. The amino acid identities less than 50 %, which is the species demarcation border for Partitiviridae let us to identify these viruses as new species. This work was performed with institutional support RVO: , and project LH Kontakt II. Key words: basidiomycetous fungi, dsrna, partitiviruses XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

35 sekce Virologie a Bakteriologie Evaluation of factors determining distribution, impact, detection and characterization of fruit tree phytoplasmoses: outcomes of the project APOPHYT Vyhodnocení faktorů majících vliv na distribuci, dopad, detekci a charakteristiku fytoplazem ovocných dřevin: výstupy projektu APOPHYT Suchá Jana 1, Chroboková Eva 1, Skalský Michal 1, Valentová Lucie 1, Lauterer Pavel 2, Nečas Tomáš 3, Bohunická Markéta 1, Christen Danilo 4, Bünter Markus 4, Schaerer Santiago 4, Camps Zo 4, Genini Mauro 5, Reisenzein Helga 6, Lethmayer Christa 6, Jelkmann Wilhelm 7, Schneider Bernd 7, Pasquini Graziella 8, Ferretti Luca 8, Brurberg May Bente 9, Steyer Stéphan 10, De Jonghe Kris 11 1 Research and Breeding Institute of Pomology Holovousy Ltd., Holovousy 1, Hořice, CZ, jana.sucha@vsuo.cz 2 Moravian Museum Brno, Department of Entomology, Brno, CZ 3 Faculty of Horticulture, Mendel University in Brno, CZ 4 Agroscope Research Station, CH 5 Servicede l'agriculture, Valais, CH 6 Austrian Agency for Health and Food Safety, AT 7 Julius Kuehn-Institute, Federal Research Centre for Cultivated Plants, DE 8 Centro di Ricercaper la Patologia Vegetale, IT 9 Norwegian Institute for Agricultural and Environmental Research, Plant Health and Plant Protection Division, NO 10 Walloon Agricultural Research Centre, BE 11 Institute for Agricultural and Fisheries Research, BE Abstract An international research project entitled Evaluation of factors determining distribution, impact, detection and characterization of fruit tree phytoplasmoses (APOPHYT) was conducted from 2012 to 2014 with a support of EUPHRESCO (European Phytosanitary Research Coordination) and Ministry of Agriculture of the Czech Republic. Studied were three main phytoplasmas infecting important commercially grown pome and stone fruit trees in Europe: Candidatus Phytoplasma mali causing Apple proliferation (AP), Ca. P. pyri causing pear decline (PD), and Ca. P. prunorum causing European stone fruit yellows (ESFY). The main goal of the project was to examine and describe in detail the patterns of distribution of phytoplasmas as well as to improve the understanding of the multitrophic interactions between plants, phytoplasmas and their vectors in order to develop disease management strategies and finally to reduce the impact of phytoplasma diseases in Europe. Latent infections, which were not detected by visual inspection for symptoms were found in certified propagation stock for scions and nurseries in Europe (especially in pears). It was concluded that effective control of sanitary status of certified propagation stock for scions and nurseries has to be determined by molecular methods. The best results can be obtained by the tissue sampling conducted in winter time and using root material (not midribs). A novel method of a LAMP PCR (loop-mediated isothermal amplification of DNA) was tested and optimized for detection of AP, PD and ESFY. The method is reliable, fast and sensitive and can be used on-site, therefore its implementation for routine controls in near future is desirable. In apple trees, a mixture of AP strains differing genetically with different virulence have been detected. The strength of the symptoms was related rather to the particular strain than to the climatic conditions, however an observation period up to 10 growing seasons was recommended prior the final conclusion. Concerning the phytoplasma insect vectors (plum, pear or apple Cacopsylla sp.), it was found that they occur at all examined locations in Europe XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

36 sekce Virologie a Bakteriologie and the percentage of their infestation with phytoplasma is very high in some countries. To avoid the disease spread, the protection of fruit trees against the psyllids should be implemented in an effective and sustainable way. Observed preferences to certain cultivars based on the volatile compounds (especially in apricots) can be used in the protection. The results of the project provide a solid basis for harmonization of the control measures of the phytoplasmoses spread by trade activities in EU (e.g. phytosanitary passport inspection and/or certification schemes). Key words: AP, Cacopsylla, ESFY, LAMP PCR, PD, Phytoplasma XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

37 sekce Virologie a Bakteriologie The occurrence of HLVd in the collection of hop varieties Svoboda Petr 1, Patzak Josef 1, Matoušek Jaroslav 2, Nesvadba Vladimír 1, Malířová Ivana 1 1 Hop Research Institute, Co., Ltd., Kadaňská 2525, Žatec, CZ, svoboda@chizatec.cz 2 Department of Molecular Genetics, Institute of Plant Molecular Biology, Biology Centre of Academy of Sciences of the Czech Republic, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ Abstract The hop plant, Humulus lupulus L., is a dioecious perennial species, and only female cones are used for beer brewing. Hops are used to impart bitterness, flavour and preservation properties to modern beers. Hop as a perennial and vegetative-propagated crop is endangered by viruses and viroids. Hop latent viroid (HLVd) from the group Pospiviroid is the most frequent viroid found out in hops. Viroids belong to the pathogens causing important economic losses of quality and quantity of hop cones. HLVd is worldwide distributed in hops, usually without visual symptom manifestation of infection. Hop cones yield was reduced by 5-8 % and alpha acids by %. Original varieties and old hop gardens of Czech hops were completely infected HLVd. HLVd dissemination in hop gardens is very fast. HLVd not transmited by pollen and thus for new hybrid varieties of hops should be a low incidence. Foreign hop varieties from different places of the world may have a different level of infection and thus be a potential source of resistance. Evaluated were 110 hop varieties belonging to the collection of gene resources keeping in Hop Research Institute, Co., Ltd. in Zatec (Czech Republic). HLVd was not found only in 8 varieties of hop: Tutsham (England), Brjanskij (Russia), Institutskij (Ukraine), Talisman, Nugget, Columbus and Glacier (USA). Acknowledgement Ministry of Agriculture of CR institutional support for the development of research organization RO and Czech Ministry of Education (LH14255). Key words: hop, Humulus lupulus L., collection of hop varieties, HLVd XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

38 sekce Virologie a Bakteriologie Ověření účinnosti biopreparátů a antagonistických izolátů rodu Bacillus, Pseudomonas a Pantoea sp. proti virulentním kmenům bakterie Erwinia amylovora v podmínkách in vitro Verification of the biological products and antagonistic isolates (Bacillus, Pseudomonas and Pantoea sp.) effectiveness against fire blight (Erwinia amylovora) in in vitro condition Šillerová Jana, Korba Josef Výzkumná stanice Slaný, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Politických vězňů 1346, Slaný, Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, siller.vsslany@seznam.cz V pokuse bylo provedeno vyhodnocení účinnosti biopreparátů MicoSin (koncentrace 0,5% a 1%) a Serenade (koncentrace 0,5%, 1% a 2%) a ověřených antagonistických izolátů rodu Bacillus, Pseudomonas a Pantoea sp. vůči bakterii Erwinia amylovora (Ea) v porovnání se Streptomycinem (0,3%) a Championem (0,3%) na květech 2 odrůd jabloně a 2 odrůd hrušně v podmínkách in vitro. Do pokusu byly zařazeny květy odrůd hrušně Alexander Lucas a Jubilendar a květy odrůd jabloně Idared a Šampion v období rozkvětu 80% květů (od do ). Květy byly umístěny do skleníčků do jednotlivých jamek a ošetřeny v jednotlivých skleníčcích (postřikem ručním postřikovačem) sledovanými biopreparáty, chemikáliemi nebo bakteriálními izoláty a po 48 byla aplikována suspenze bakterie (Ea) izolátu 8/95 v koncentraci 10 6 cfu/ml. Vyhodnocení jednotlivých odrůd bylo provedeno po 7 dnech. Z výsledků vyplývá, že účinnost biopreparátů i antagonistických bakterií je vyšší u odrůd jabloně než u odrůd hrušně téměř ve všech variantách, a to o 20%. U odrůd hrušně byl jako nejúčinnější vyhodnocen Mycosin 1% s účinností 58% (Streptomycin účinnost 94%). U odrůd jabloně byla účinnost biopreparátů MicoSin (1%) a Serenade (0,5% a 1%) srovnatelná s účinností Streptomycinu v koncentraci 0,3% (95%). Účinnost antagonistických bakterií byla o něco nižší 78 86%. U kontrolní varianty ošetřené pouze suspenzí Ea bylo napadeno 79 až 96% květů. Dosažené výsledky je potřebné ověřit v testech in vivo. Výzkum byl proveden za podpory MZe financováním projektů RO 0415 a QJ Klíčová slova: bakterie Erwinia amylovora, bakteriální spála jabloňovitých, MycoSin, Serenade, antagonistické bakterie XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

39 sekce Virologie a Bakteriologie Viry infikující třešně a višně v České republice Viruses infecting cherry and sour cherry in the Czech Republic Špak Josef 1, Přibylová Jaroslava 1, Fránová Jana 1, Lenz Ondřej 1, Koloniuk Igor 1, Navrátil Milan 2, Šafářová Dana 2, Paprštein František 3 1 Oddělení rostlinné virologie, Ústav molekulární biologie rostlin, Biologické centrum AV ČR, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, pribyl@umbr.cas.cz 2 Katedra buněčné biologie a genetiky, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Palackého, Šlechtitelů 27, Olomouc-Holice, CZ 3 Výzkumný a šlechtitelský ústav ovocnářský Holovousy, s. r. o., Holovousy 1, Hořice, CZ První rozsáhlý průzkum virů infikujících třešně a višně byl proveden v České republice v období Přednostně byly odebrány vzorky listů s příznaky ze 140 stromů v ovocných sadech, genofondu a rovněž z volně rostoucích stromů. Vzorky byly testovány pomocí RT-PCR na 22 známých virů, které infikují třešně a višně po celém světě. Byly zjištěny infekce následujícími viry: Prunus necrotic ring spot virus (PNRSV), Prune dwarf virus (PDV), Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV), Little cherry virus 1 (LChV1), Cherry virus A (CVA) a Cherry leaf roll virus (CLRV). V třešňových sadech bylo nalezeno nejvíce stromů infikovaných PDV a PNRSV, zatímco CVA byl detekován pouze v 1 stromě. Ve volně rostoucích třešních byly detekovány pouze PDV a LChV1. PNRSV a CLRV byly úspěšně přeneseny na bylinné indikátorové rostliny. Infekce viry PDV, PNRSV a CVA byly nejčastější ve sbírkách genofondu, často ve směsných infekcích, zatímco CLRV byl zjištěn ve 2, LChV1 ve 3 a ACLSV ve 2 stromech třešní. Směsné infekce dvěma až pěti viry současně byly zjištěny v 21 vzorku. Čtyři vybrané vzorky třešní obsahující směsné infekce několika viry byly podrobeny analýze Next Generation Sequencing (NGS) na Illumina HiSeq 2500 po izolaci celkové RNA a/nebo dsrna. Průkazné části genomové sekvence byly získány pro CLRV, PNRSV, PDV, CVA a ACLSV spolu s dílčími sekvencemi virů, které dosud nebyly zjištěny na třešních a višních v České republice, a rovněž sekvencemi zřejmě nového viru, které jsou v současné době kompletovány a ověřovány pomocí RT-PCR. Tento výzkum byl podpořen grantem LD a programem CZ.1.05/2.1.00/ Ministerstva školství, mládeže a tělovýchovy České republiky. Klíčová slova: double-stranded RNA, mechanical transmission, mixed infection XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

40 sekce Virologie a Bakteriologie Analýza viromu třešní a višní sekvenováním nové generace Cherry and sour cherry virome analysis by next generation sequencing Špak Josef, Přibylová Jaroslava, Fránová Jana, Lenz Ondřej, Koloniuk Igor, Špaková Vlastimila Oddělení rostlinné virologie, Ústav molekulární biologie rostlin, Biologické centrum AV ČR, v. v. i., Branišovská 1160/31, České Budějovice, CZ, spak@umbr.cas.cz V letech jsme provedli v České republice monitoring výskytu známých virů třešní a višní v produkčních výsadbách, genofondu i na planě rostoucích stromech. Přednostně jsme vybírali stromy s příznaky virové infekce. Molekulárně-biologickým testem polymerázové řetězové reakce (RT-PCR) jsme prokázali výskyt Prunus necrotic ring spot virus (PNRSV), Prune dwarf virus (PDV), Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV), Little cherry virus 1 (LChV1), Cherry virus A (CVA), Cherry leaf roll virus (CLRV) a Apple mosaic virus (ApMV) a získali i částečné sekvence těchto virů. Výsledky ukázaly zásadní rozdíly ve výskytu virů ve výsadbách, v planých stromech a v genofondu. Ve výsadbách jsou četné zejména infekce PNRSV a PDV, v genofondu je počet druhů virů vyšší. Směsné infekce 2-5 virů jsme zaznamenali ve 21 stromech. Druhým cílem naší studie bylo ověření možností využití sekvenování nové generace (Next Generation Sequencing -NGS) pro diagnostiku virů a zavedení metody na naše pracoviště. Ze čtyř vybraných stromů, které obsahovaly směsné infekce několika virů, jsme izolovali celkovou nebo dsrna. Po přípravě knihoven bylo provedeno sekvenování na platformě Illumina HiSeq Získaná data byla zpracována pomocí programu CLC Genomics. Získali jsme velké úseky genomových sekvencí CLRV, PNRSV, PDV, CVA a ACLSV, společně se sekvencemi virů, které dosud nebyly v ČR zjištěny (Cherry necrotic rusty mottle virus - CNRMV, Cherry green ring mottle virus - CGRMV a Little cherry virus 2 LChV2). Přítomnost těchto virů ve zkoumaných stromech byla zpětně ověřena pomocí RT-PCR. Z NGS byly získány i sekvence potenciálně nových virů, které v současnosti kompletujeme a ověřujeme. Výzkum je podporován grantem LD MŠMT, akcí COST FA1104 a RVO AV ČR. Klíčová slova: virus, cherry, sour cherry, next generation sequencing XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

41 sekce Virologie a Bakteriologie Attempts to express and purify the Plum pox virus P1 protein from E. coli in soluble form Vozárová Zuzana, Šubr Zdeno Department of Plant Virology, Institute of Virology, Slovak Academy of Sciences, Dúbravská cesta 9, Bratislava, SK, viruzuvo@savba.sk Abstract Plum pox virus (PPV) belongs to the genus Potyvirus with polyprotein strategy of genome expression. Most of polyprotein-derived polypeptides are multifunctial, participating in various parts of virus multiplication and spread (RNA replication, polyprotein processing, PTGS inhibition, cell-to-cell and vascular movement, encapsidation, vector-based transmission). P1 (the first protein) is belived to be involved in suppression of host defense and/or in virus replication, however, its detailed function and mechanism of action during infection cycle remain still mysterious. We tried to produce the PPV P1 using a procaryotic expression system (pet28 in E. coli) for the purpose of downstream pull-down experiments to reveal its eventual interactions with host plant proteins. Fair expression level was reached under standard conditions and sufficient purity was obtained by IMAC. However, P1 tended to build insoluble inclusions and could be maintained in the solution only in presence of 8M urea, which was improper for our experiments. Therefore we applied several procedures to obtain native P1, including modifications of cell growth conditions, further cell treatment and renaturation from urea-solubilized fraction. Efficiency of particular protocols will be showed and discussed in the contribution. Key words: P1 protein, procaryotic expression system, insoluble inclusion bodies, renaturation XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

42 sekce Virologie a Bakteriologie Comparative transcriptome analysis of healthy and plum pox virus-infected plants Vozárová Zuzana, Žilová Monika, Šubr Zdeno Department of Plant Virology, Institute of Virology, Slovak Academy of Sciences, Dúbravská cesta 9, Bratislava, SK, virusubr@savba.sk Abstract As viruses are intracellular parasites exploiting material and energy sources of their hosts, each viral infection has an unavoidable impact on the host metabolism. The virus not only uses the disposable compounds, but controls and redirects their production in order to make its own replication more efficient. On the other hand, the infected organism tends to defend against the pathogen and eliminate it as much as possible. This molecular battle is manifested on all levels of gene expression regulation (transcriptional, posttranscriptional, translational, posttranslational), which study may enhance our knowledge about virus-host interactions and eventually help to evolve new antiviral strategies. In our work we applied a simple subtractive cloning technique to compare the transcriptomes of healthy and plum pox virus (PPV)-infected Nicotiana benthamiana plants. Several genes were detected to be induced or repressed by the PPV infection. The induced genes were found mostly related with general stress response or with photosynthesis, several repressed genes were connected with growth defects evoked by the infection. Regulation of particular gene expression during PPV infection is discussed more in detail in the contribution. The research was supported by the grant 2/0001/15 from the Scientific Grant Agency of Ministry of Education and Slovak Academy of Sciences (VEGA). Key words: virus-host interaction, gene expression, subtractive hybridization XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

43 sekce Virologie a Bakteriologie Detekce významných virů jabloní metodou real-time RT-PCR Detection and quantification of several apple viruses by real-time RT-PCR Winkowska Lucie, Grimová Lenka, Ryšánek Pavel Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, winkowskal@gmail.com Virus mozaiky jabloně (Apple mosaic virus, ApMV), virus žlábkovitosti kmene jabloně (Apple stem grooving virus, ASGV), virus vrásčitosti kmene jabloně (Apple stem pitting virus, ASPV) a virus chlorotické skvrnitosti listů jabloně (Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV) patří mezi celosvětově nejvýznamnější viry jabloní. Každý z výše uvedených virů může být původcem výnosových ztrát, které jsou patrné zejména při směsné virové infekci. Jedinou efektivní ochranou proti těmto virům přenosným vegetativním množením je prevence formou certifikace rostlinného materiálu. Základní součástí tohoto procesu je dostupnost spolehlivých a dostatečně citlivých detekčních metod. Sérologické metody, ani konvenční metody založené na RT-PCR často neposkytují spolehlivé výsledky při detekci virů v dřevinách, a často nastává i problém při jejich detekci během celého vegetačního období, což je často způsobeno nízkým obsahem samotných virů v hostiteli a/nebo přítomností chemických inhibitorů přítomných v testovaném rostlinném materiálu. Z tohoto důvodu byla pro detekci ApMV, ASGV, ASPV a ACLSV v rámci naší studie navržena nová, velmi citlivá a spolehlivá diagnostická metoda založená na real-time RT-PCR. Touto metodou bylo možné vybrané viry detekovat ve všech rostlinných orgánech (lýko, pupeny, listy, květy) v různých fázích vegetace. Zároveň bylo určeno přibližné množství virového titru v rostlině, které odhalilo, že všechny sledované viry jsou v jabloních relativně stabilní v průběhu celé vegetace, a to i v různých rostlinných orgánech. Klíčová slova: viry jabloní, qrt-pcr, detekce XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

44 sekce Mykologie Sekce Mykologie XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

45 sekce Mykologie Leaf spot on different taxonomic origin chestnut trees Listová škvrnitosť na gaštanoch rôzneho taxonomického pôvodu Adamčíková Katarína, Bolvanský Milan Institute of Forest Ecology SAS Zvolen, Branch for Woody Plants Biology Nitra, Akademická 2, Nitra, SK, Abstract Prior to the first occurrence of chestnut blight in 1976, it was the leaf spot caused by Cylindrosporium castaneae (Lév) Krenner, basionym Septoria castaneae Lév, that belonged to the most important diseases of European chestnut in Slovakia. Until 1990 the occurrence of this fungus was observed in all chestnut cultivation area of Slovakia. Morphological observations with descriptions of this fungal species and the disease symptoms were described and discussed. In 2011 an extensive damage of leaves by leaf spot was recorded in young chestnut trees in an experimental chestnut orchard in Pribelce, Slovakia.15-year-old seedlings and 13-year old grafts of different taxonomic origin (C. sativa, C. crenata, C. sativa C. crenata) exhibited visible differences in extent of leaf spot. In order to test significance of these differences 18 chestnut accessions of different taxonomic and propagation origin were randomly selected to collect leaf samples. In each tree 30 leaves were collected from different parts of the crown. Digital images of particular leaves were evaluated by software Quick Micro Photo (version 2.1). Ratio of infected leaf area (of brown colour) in each leaf was calculated and the number of spots per leaf was counted. Obtained data were statistically evaluated by nested design ANOVA, using GLM procedure of software STATISTICA 8. Taxonomic origin of studied trees showed significant effect on the ratio of spot area and number of spots per leaf. The lowest spot area and lowest number of spots were in C. crenata seedlings (0.16% and 9.46), higher in seedlings and grafts of C. sativa C. crenata origin (2.92% and ) and highest in seedlings and grafts of C. sativa origin (6.2% and ). Significantly higher damage by leaf spot was observed in the seedlings derived from open pollination C. sativa C. crenata and C. sativa than in C. sativa C. crenata and C. sativa grafts. At the time of leaf spot investigation 12 trees out of 18 observed were damaged to different degree by chestnut blight. However no correlation was found out between degree of chestnut blight damage and leaf spot damage. Even 3 out of 4 the most damaged trees by leaf spot were without chestnut blight. The differences among the reaction of the observed chestnut accessions illustrate that the response to the fungus attacks has a strong genetic determinism, with resistance being clearly influenced by taxonomic origin. Key words: leaf spot, Cylindrosporium castaneae, chestnut XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

46 sekce Mykologie Výsledky využití PRI prostředku Alginure v technologii pěstování řepky Results of the PRI product Alginure used in oil seed rape growing technology Bagar Martin BIOCONT LABORATORY, spol. s r. o., Mayerova 784, Brno-Modřice, CZ, bagar@biocont.cz : Řepka olejná (Brassica napus L.) patří k významným plodinám našeho zemědělství a proto je jí věnována značná pozornost i z pohledu ochrany rostlin. V našich pokusech jsme sledovali efekt prostředku Alginure na zlepšení stavu a výnosu řepky. Alginure je produkt sestávající z výtažků z mořských řas, fosforečných a fosforitých solí a rostlinných aminokyselin. Řadíme jej do skupiny PRI (plant resistence improver) produtů, protože po aplikaci na rostlinu způsobuje navození obranných reakcí rostliny a tím zvýšení odolnosti vůči patogenům. V rámci dvouletého sledování v maloparcelkových a poloprovozních pokusech jsme hodnotili vliv prostředku Alginure, přidávaného v tank-mixu k chemickým fungicidům. Ve všech případech bylo zaznamenáno zvýšení výnosu a zlepšení dalších parametrů. Klíčová slova: řepka, indukovaná rezistence, houbové choroby, Alginure, algináty, fosfonáty XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

47 sekce Mykologie Occurrence of Phoma macdonaldii in sunflower fields in Slovakia Výskyt Phoma macdonaldii v porastoch slnečnice ročnej na Slovensku Bokor Peter, Hlavinová Adriana, Cagáň Ľudovít Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology and Food Resources, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. Andreja Hlinku 2, Nitra, SK, peter.bokor@uniag.sk Abstract The aim of the research was to evaluate the occurrence and epidemiology of Phoma black stem caused by Phoma macdonaldii on sunflower in Slovakia. Stem canker diseases epidemiology was studied in sunflower fields at localities of the Southwest Slovakia (Nitra and Trnava region) and the Southeast Slovakia (Košice region) during seven years. Plants were evaluated after flowering during July and August. During seven years the number of plants infected by P. macdonaldii varied depending on weather factors. The occurrence of pathogen P. macdonaldii was higher in the Southwest Slovakia in compare with Southeast Slovakia. Level of infection 100 % was recorded at all localities in Trnava region during , except of one locality in High levels of infection ( %) were also observed at more than 80 % localities in Nitra region. During 2013 and 2014, the number of infected sunflower plants by P. macdonaldii was relative low and achieved 1-50 % at most localities in the southwest of Slovakia. In these years, a very low sum of precipitation was recorded during the flowering of sunflower. Levels of infection rarely exceeded 60 % at localities in Košice region. It was found that number of infected plants caused by P. mcdonaldii significantly depended on the locality and year. It was concluded that the level of plant infection caused by P. mcdonaldii was influenced by rainfall during summer period. Keywords: Phoma macdonaldii, Phoma black stem, sunflower XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

48 sekce Mykologie Vliv integrovaného a ekologického způsobu ochrany různých odrůd jabloní na následné napadení jablek skládkovými chorobami Influence of integrated and organic protection method of different apple-tree varieties on resulting incidence of strorage diseases Brožová Jana Odbor ochrany plodin a zdraví rostlin, Ekologie a diagnostika houbových patogenů, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, brozova@vurv.cz Jabloně jsou nejvýznamnější ovocnou dřevinou pěstovanou v České republice. V letech bylo v 5 sadech v režimu integrovaného a ekologického pěstování v průběhu celéhog vegetačního období opakovaně hodnoceno napadení listů a plodů dvěma nejvýznamnějšími druhy fytopatogenních hub Venturia inaequalis (listy a plody) a Podosphaera leucotricha (listy). Celkem bylo hodnoceno 21 porostů v integrovaném a 18 porostů v ekologického režimu ošetření. Z těchto porostů byly před sklizní odebrány vzorky jablek bez vizuálních příznaků poškození a tyto plody byly uloženy do chladicího boxu a v pravidelných intervalech byl u nich hodnocen výskyt skládkových chorob. Při hodnocení četnosti výskytu V. inaequalis ve zkoumaných sadech nebyly zjištěny výsledky, které by se daly vysvětlit pouze na základě jednoho sledovaného faktoru: odrůda (rezistentní x nerezistentní), režim pěstování (integrované x ekologické), vliv lokality (může mít několik příčin). Jako původci hnilob jablek byly nejčastěji zjištěny taxony Neofabraea spp., Alternaria spp., Fusarium spp., Colletrotrichum spp. a Penicillium spp. Podpořeno projektem QJ (MZe ČR). XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

49 sekce Mykologie Manipulace obranným systémem hostitelské rostliny efektory patogenu na příkladu interakce Leptosphaeria maculans s řepkou olejkou Manipulation of host plant defence system by pathogen effectors, an example of Leptosphaeria maculans interaction with oilseed rape Burketová Lenka 1, Nováková Miroslava 1,2, Šašek Vladimír 1, Trdá Lucie 1, Balesdent Marie-Hélène 3, Rouxel Thierry 3 1 Ústav experimentální botaniky AV ČR, v. v. i., Rozvojová 263, Praha, CZ, e-mal: burketova@ueb.cas.cz 2 Ústav biochemie a mikrobiologie, Vysoká škola chemicko-technologická v Praze, Technická 3, Praha, CZ 3 INRA, 3UMR INRA-AgroParisTech 1290 Bioger, Avenue Lucien Brétignières, BP 01, Thiverval-Grignon, FR Patogeny produkují efektory s cílem překonat obranné mechanismy rostlin, které jsou aktivovány po jejich rozpoznání na základě molekulových vzorů (MAMP) přítomných na jejich povrchu. Tyto efektory mohou být jak proteinové, tak hormonální. Na příkladu interakce původce fómového černání stonků řepky, hemibiotrofní askomycety Leptosphaeria maculans, s hostitelskou rostlinou řepkou olejkou (Brassica napus) demonstrujeme manipulaci obranných reakcí řepky proteinovým efektorem AvrLm4-7 sekretovaným tímto patogenem. Pomocí dvou izogenních izolátů L. maculans (AvrLm4-7 a avrlm4-7) jsme prokázali, že tento efektor u susceptibilního hostitele potlačuje hormonální signalizaci kyseliny salicylové a etylénu, která je nezbytná pro spuštění obranných reakcí účinných proti L. maculans. AvrLm4-7 dále také mění dynamiku produkce reaktivních forem kyslíku v napadeném pletivu, což usnadňuje patogenu kolonizaci. Tato práce jako první dokládá manipulaci obranným systémem řepky efektorem L. maculans. Klíčová slova: Brassica napus, fómové černání stonků řepky, obranné reakce XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

50 sekce Mykologie Vliv fyzikálního a biologického ošetření na klíčivost osiva Influence of physical and biological treatment on seed germination Čurn Vladislav 1, Bohatá Andrea 1, Strejčková Monika 1, Bartoš Petr 2,3, Olšan Pavel 2,3, Havelka Zbyněk 2, Kříž Pavel 3, Špatenka Petr 3,4 1 Department of Special Plant Production, Faculty of Agriculture, University of South Bohemia, Studentská 13, České Budějovice, CZ, strejckovamonika@seznam.cz 2 Department of Agricultural Machinery and Services, Faculty of Agriculture, University of South Bohemia, Studentská 13, České Budějovice, CZ 3 Department of Applied Physics and Technology, Faculty of Education, University of South Bohemia, Studentská 13, České Budějovice, CZ 4 Department of Materials Engineering, Faculty of Mechanical Engineering, Czech Technical University in Prague, Karlovo náměstí 1, Praha 2, CZ Cílem prezentovaných výsledků je ukázat u sladovnického ječmene jarního (Francin) vliv ošetření semen nízkoteplotním plazmatem (GlidArc). Pracovní plyn vzduch. Doba ošetření 4 minuty. Osivo bylo dále ošetřeno biologicky kulturou mykoparazitické houby Trichoderma virens a kulturou entomopatogenní houby Metarhizium anisopliae. Sledován byl vliv ošetření na klíčivost (definování indexových stupnic vývoje kořínku a koleoptile) den, zdravotní stav 3. den, 7. den. Nízkoteplotní plazma v kombinaci s biologickými houbami i samotné plazma výrazně ukazuje pozitivní vliv na vývoj kořínku, koleoptile a zvyšuje energii klíčivosti semen. Klíčová slova: nízkoteplotní plazma, ječmen jarní, Trichoderma virens, Metarhizium anisopliae XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

51 sekce Mykologie Hodnocení odrůd pšenice na odolnost k stéblolamu Evaluation of wheat varieties for resistance to eyespot Hanzalová Alena, Palicová Jana, Dumalasová Veronika Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i, Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, dumalasova@vurv.cz Reakce vybraných odrůd ozimé pšenice k umělé infekci Oculimacula yallundae a Oculimacula acuformis (původci stéblolamu) byla testována v maloparcelovém pokusu v Praze-Ruzyni. Odrůdy byly sledovány z hlediska napadení chorobami pat stébel také v polních podmínkách v přirozené infekci na šlechtitelské stanici v Úhřeticích (okres Chrudim). Všechny testované odrůdy jsou v ČR. registrované. Odrůdy Annie, Hermann a Princeps, které jsou nositelem genu rezistence ke stéblolamu Pch1, vykazovaly vysokou úroveň rezistence na obou sledovaných lokalitách. Nejnáchylnější na uměle infikovaném pozemku v Praze-Ruzyni i v polních podmínkách v Úhřeticích byly odrůdy Turandot a Cubus. Byly prokázány statisticky významné rozdíly v reakci testovaných odrůd. Údaje o úrovni rezistence vybraných odrůd využitelné ve šlechtění pšenice i pěstitelské praxi byly potvrzeny molekulárními analýzami. Přítomnost účinného genu rezistence k stéblolamu Pch1 byla prokázána pomocí markeru Xorw1 v odrůdách Annie, Beduin, Clarus, Hermann, Iridium, Manager a Princeps. Klíčová slova: pšenice, stéblolam, odolnost, molekulární markery, gen Pch1 XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

52 sekce Mykologie Neobvyklá abiotická a biotická poškození u máku The unusual abiotic and biotic damages of poppy (Papaver somniferum) Havel Jiří OSEVA vývoj a výzkum, s. r. o., provozovna Opava, Purkyňova 10, Opava, CZ, havel@oseva.cz V příspěvku jsou popsána jen ta poškození, se kterými se autor osobně setkal. Z abiotických vlivů se nejčastěji vyskytuje poškození herbicidy, nepříznivými půdními podmínkami, nepříznivým průběhem počasí a kombinací těchto faktorů. Poškození herbicidy se projevují jako nekrózy, chlorózy i růstové deformace, k neobvyklým poškozením patří např. spirálové stočení stonků. Je možné i poškození nevhodným sledem registrovaných herbicidů. Mimo běžných projevů utužení nebo zamokření půdy (nevzejití, vymočení porostu) byly pozorovány deformace kořenů vlivem masívního utužení půdy, od ztloustnutí kořenového krčku až po řepovité zduření kořenů. Pro mák velmi specifické poškození je bezsemennost makovic, její příčinou je kombinace poškození herbicidy a (nebo) půdními podmínkami s nepříznivým průběhem počasí v době květu. K méně obvyklým biotickým poškozením patří fuzariózy, hlízenka, bakteriózy a další choroby. Sporadicky se vyskytují rostliny s vizuálními příznaky napadení (oranžové zbarvené části rostlin), bylo zjištěno napadení Fusarium avenaceum. Vzhledem k běžným detekcím velmi nízkých obsahů fusariotoxinů ve vzorcích máku lze spekulovat o možnosti latentního výskytu fuzarióz. Hlízenka obecná (Sclerotinia sclerotiorum) se u máku vyskytuje poměrně málo, napadá jak stonky, tak i makovice. V počáteční fázi se příznaky napadení podobají virózám. Bakteriózy při slabší intenzitě napadení způsobují zčernání kořenů a spodní části stonku, podobné příznaky má i Verticilium sp. Není vyloučeno ani kombinované napadení oběma chorobami. Specifické je i poškození zvěří, kdy v období prodlužovacího růstu máku dochází k vykusování nerozvitých poupat. XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

53 sekce Mykologie Zdravotný stav borovíc poškodených hubami rodu Dothistroma na západnom Slovensku Health state of pine trees attacked by Dothistroma needle blight in west Slovakia Hečková Zuzana, Ondrušková Emília, Adamčíková Katarína Institute of Forest Ecology SAS Zvolen, Branch for Woody Plants Biology Nitra, Akademická 2, Nitra, SK, Abstract Sypavky patria k pomerne častým ochorenia borovíc. Dva druhy rodu Dothistroma D. septosporum a D. pini spôsobujú ochorenie Dothistroma needle blight, červenú sypavku. Hlavným hostiteľom týchto druhov sypaviek je rod Pinus, v Európe predovšetkým borovica čierna - P. nigra, borovica kosodrevina - P. mugo a borovica lesná P. sylvestris. Okrem rodu Pinus parazitujú aj na druhoch z rodu Picea, Larix, Pseudotsuga a Abies. Typický príznakom ochorenia, od ktorého je odvodený aj slovenský názov, sú červené až tehlovočervené, priečne pásiky na ihliciach. Na Slovensku bolo ochorenie prvýkrát zaznamenané v roku 1996 v Modrom Kameni. Okrem monitoringu jeho rozšírenia sa podrobnejší výskum na Slovensku nerealizoval. Cieľom práce bolo zhodnotiť zdravotný stav a intenzitu poškodenia porastov borovíc spôsobených hubami z rodu Dothistroma. Hodnotenie sa uskutočnilo v 3 porastoch lokalizovaných na južnom (Jahodná), severnom (Kálnica) a východnom (Litava) okraji západného Slovenska. Vek stromov je v rozpätí rokov. Hodnotenie sa uskutočnilo jedenkrát do roka v rovnakom obodbí v rokoch 2014 a Na každej lokalite sa hodnotilo 35 stromov a na každom strome sme realizovali dve hodnotenia. Hodnotil sa strom ako celok a na hodnotenom strome náhodne v spodnej časti stromu sa hodnotil samostane jeden konár. Na hodnotenie intezity poškodenia stromu sme použili 6 bodovú stupnicu, v ktorej intenzita poškodenia bola vyjadrená určitým percentuálnym rozpätím. Pri hodnotení poškodenia konára sme použili rovnako 6 bodovú stupnicu, v ktorej sme hodnotili aj prítomnosť jednotlivých príznakov ochorenia a ich intenzitu. Na experimtálnych plochách boli umiestnené 2 meteostanice, jedna do stredu a jedna na okraj porastu. Tieto pravidelne zaznamenávajú údaje o teplote a vlhkosti vzduchu. Merania sú plánované na štvorročné obdobie, v súčasnosti sú v druhom roku riešenia a čiastočné výsledky sú v štádiu štatistického vyhodnocovania. Príspevok vznikol vďaka finančnej podpore projektu Vega 2/0069/14. Kľúčové slová: Pinus, Dothistroma, zdravotný stav, intenzita poškodenia XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

54 sekce Mykologie Hodnocení účinnosti různých fungicidních přípravků proti Hymenoscyphus fraxineus v in vitro a in planta testech Evaluation of different fungicides for control of Hymenoscyphus fraxineus in vitro and in planta experiments Hrabětová Markéta, Havrdová Ludmila, Černý Karel Výzkumný ústav Silva Taroucy pro krajinu a okrasné zahradnictví, v. v. i., Květnové nám. 391, Průhonice, CZ, marketa.hrabetova@vukoz.cz Hymenoscyphus fraxineus je významným patogenem, který způsobuje chřadnutí a odumírání jasanů (zejména Fraxinus excelsior) v mnoha oblastech Evropy včetně České republiky. Tato vřeckovýtrusá houba je kromě jiného zodpovědná za výrazný úbytek v produkci jasanů v lesních školkách. Napadené semenáčky a mladé stromky mohou uhynout v průběhu jediné sezóny. Nalezení a používání účinných fungicidů by mohlo zajistit produkci zdravého pěstebního materiálu. Celkem 26 fungicidních přípravků bylo testováno in vitro a zjištován jejich vliv na rychlost růstu mycelia. Pro experiment byly vybrány tři izoláty patogena z různých lokalit v ČR. Testováno bylo 6 koncentrací od 0.01 do 1000 µg účinné látky (a.i.) na mililitr média. Kolonie byly měřeny po 10 a 20 dnech od inokulace. Míra účinnosti byla stanovena podle hodnot EC 50, EC 90 a MIC (koncentrace účinné látky v μg a.i./ml inhibující růst mycelia z 50%, 90% nebo zcela) - 10 přípravků bylo vysoce účinných a pouze 3 zcela neúčinné. Dalším způsobem vyhodnocení byla metoda mnohonásobného porovnání, která odhalila 7-8 nejúčinnějších přípravků. V sezóně 2013/2014 byly založeny první pokusy na rostlinách v lesních školkách. Na základě výsledků in vitro testů bylo pro tyto pokusy vybráno pět přípravků. Discus (kresoximmethyl), Horizon 250 EW (tebuconazole), Ortiva (azoxystrobin), Zato 50 WG (trifloxystrobin) a Score 250 EC (difenoconazole). Fungicidy byly testovány na minimálně dvouletých stromcích ve třech lesních školkách, které opakovaně zaznamenaly výskyt infekce. Všechny stromky byly před pokusem pečlivě zkontrolovány, zda nejeví jakékoliv symptomy onemocnění. Stromky byly ošetřeny dvakrát v průběhu července. Účinnost byla hodnocena na jaře 2014 na základě procentuálního zastoupení napadených stromků. Výsledky ve dvou lesních školkách nebyly uspokojivé z důvodu slabé infekce. Nejlepších výsledků bylo dosaženo s použitím přípravku Horizon 250 EW. V následující sezóně 2014/2015 byly pokusy založeny pouze v jediné lesní školce, ale s větším počtem stromků. Testováno bylo šest přípravků Discus, Horizon 250 EW, Zato 50 WG, Dithane DG Neotec (mancozeb), Mythos 30 SC (pyrimethanil) a Talent (myclobutanil). Celkem bylo založeno 42 pokusných ploch o velikosti 120x150 cm, 6 ploch pro každý fungicid a kontrolu. Každá pokusná plocha obsahovala přibližně 180 zdravých prostokořenných stromků větších než 20 cm. Stromky byly poprvé ošetřeny 24. června 2014, aplikace byla opakována přibližně každých 14 dní, poslední aplikace byla 4. září Pokus byl vyhodnocen v březnu Byla pozorována vyšší míra infekce než v předešlém roce, v kontrolních plochách bylo infikováno % stromků. Nejúčinnější byl opět přípravek Horizon 250 EW. Průkazná účinnost (p < 0.05) byla kromě přípravku Horizon také u přípravků Zato 50 WG, Discus a Dithane DG Neotec. Přesto, že je použití fungicidů proti H. fraxineus omezeno v podstatě pouze na lesní školky, případně jednotlivé mladé stromy, může být součástí komplexní strategie proti této chorobě. Klíčová slova: Hymenoscyphus fraxineus, odumírání jasanů, fungicidy XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

55 sekce Mykologie Fusarium head blight in Slovakia - occurrence, species spectrum, and mycotoxins Fuzarióza klasov na Slovensku výskyt, druhové spektrum, mykotoxíny Hudec Kamil 1, Kičinová Jana 2, Roháčik Tibor 3 1 Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology and Food Resources, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. Andreja Hlinku 2, Nitra, SK, kamil.hudec@uniag.sk 2 SEMPOL a. s. Trnava, Trnava, SK 3 SELEKT Výskumný a šľachtiteľský ústav a.s. Bučany, Bučany, SK Abstract The work presented results of the incidence of Fusarium head blight (FHB) of winter wheat and spring barley in Slovakia in recent years. Incidence of FHB were monitored at several localities throughout Slovakia to detect the presence of Fusarium species spectrum associated with FHB and occurrence of their mycotoxins (DON, ZEA and T-2 toxin) in the kernels. Classical Fusarium head blight in wheats and brown spikelet form of Fusarium infection in barleys dominated during each observed year. In overall, the high visual infection by Fusarium head blight on wheat has been found in many localities. Relationship between rainfall in May and visual appearance of FHB in each location was statistically significant. In symptomatic chaffs of wheat heads nine species of Fusarium and Microdochium genera were isolated: F. poae, F. avenaceum, M. nivale, F. sporotrichioides, F. graminearum, F. equiseti, F. tricinctum, F. culmorum, F. langsethiae. The highest frequency of occurrence reached F. graminearum. The highest frequency in symptomatic spikes of barley was observed for the species F. poae, F. langsethiae was absent. In the infected barley leaves (with Fusarium leaf blight symptoms) six Fusarium species were found: F. poae, M. nivale, F. sporotrichioides, F. graminearum, F. equiseti, F. tricinctum. The highest frequency of occurrence was reached by F. poae. In asymptomatic wheat grains eight species of Fusarium and Microdochium genera were determined: F. poae, F. equiseti, F. avenaceum, F. tricinctum, F. graminearum, F. culmorum, F. sporotrichioides, M. nivale. F. poae reached the highest frequency of occurrence. In addition to the spectrum of species occurred in asymptomatic grains of wheat, F. langsethiae was detected in barley only. Increased occurrence of individual Fusarium species significantly increased mycotoxin content in the following cases: F. graminearum - DON and ZEA in wheat grains; F. graminearum - ZEA in grains of barley; F. poae - T-2 toxin in grains of wheat. DON was the most commonly occurred mycotoxin in grains of wheat and barley. The maximum allowed limit for the content of DON in grains of wheat and barley was exceeded only once - in the year Amount of DON exceeded allowed limit in wheat grains in 2013 in each location. The highest content of DON in wheat grains was found in the locality Jacovce (2013) in samples from the harvest μg.kg -1, and in Soblahov (2013) μg.kg -1 in barley grains. Excess of the maximum allowable content for ZEA and T-2 toxin was not detected in any sample. The highest incidence of DON was detected in the growth stage BBCH 82 and it was followed by stage BBCH 84. The lowest incidence of DON was observed in the growth stage BBCH 84 and it was followed by the growth stages 78, 79, 82, 85 with the same level of concentration. The mycotoxin ZEA reached the highest content in the growth stages BBCH and lowest in BBCH The highest incidence of T-2 toxin was the mostly detected in samples from the harvest and the lowest in growth stages BBCH Key words: cereals, Fusarium head blight, occurrence, species, mycotoxins XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

56 sekce Mykologie Využití odrůd rezistentních k nádorovitosti kořenů brukvovitých (původce Plasmodiophora brassicae) při pěstování řepky na zamořených pozemcích v podmínkách České republiky The use of cultivars resistant to clubroot (pathogen Plasmodiophora brassicae) in oilseed rape cultivation on infested field in the Czech Republic Kazda Jan 1, Řičařová Veronika 1, Baranyk Petr 2 1 Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, rikipes@seznam.cz 2 Katedra rostlinné výroby, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ Nádorovitost kořenů brukvovitých je choroba způsobena půdním patogenem Plasmodiophora brassicae Wor., který napadá rostliny z čeledi brukvovité (Brassicaceae). Choroba je rozšířena globálně. V České republice se po roce 2010 začíná poměrně rychle šířit na pozemky, kde se pěstuje ozimá řepka. Zatím největší rozšíření je na severní Moravě a ve Slezsku, severních a jižních Čechách. Zatím jedinou možností ochrany v polních podmínkách je použití odrůd rezistentních proti Plasmodiophora brassicae. Odrůdy ozimé řepky rezistentní k nádorovitosti však mají patotypově (rasově) specifickou rezistenci. Rezistence tedy nezahrnuje všechny evropské patotypy, ale jen ty nejčastější. Důležité je také si uvědomit, že rezistence je kódována pouze jedním genem rezistence, který může být patogenem poměrně jednoduše překonán. Cílem projektu bylo ověřit, zda rezistentní odrůdy ozimé řepky, obchodované v ČR na základě Společného katalogu odrůd, si udržují svoji odolnost i v podmínkách ČR. Patogen Plasmodiophora. brassicae se totiž vyskytuje v půdách ČR v několika desítkách patotypech. Ve spolupráci KOR ČZU, SPZO Praha a Agro Chomutice (hospodářství Hrádek nad Nisou) proběhly v pěstitelském roce 2013/2014 a 2014/2015 poloprovozní pokusy s rezistentními odrůdami ozimé řepky k Plasmodiophora brassicae. Pokusy probíhaly na pozemku v Hrádku nad Nisou, místní části Donín, který je silně přirozeně zamořený pozemek nádorovitostí. V obou ročnících bylo napadení kořenů několikrát ročně hodnoceno mezinárodně používaným indexem napadení (ID) a pokusy byly vyhodnoceny výnosově. Tato práce vznikla za finanční podpory NAZV (MZE ČR), projektu č. QJ Odrůda ID celoroční Odrůda ID podzim ID jaro Distributor 2013/ /2015 SY Alister 9 SY Alister 3 3 Syngenta CWH CWH Monsanto náchylná K1 78 náchylná K Andromeda 5 Andromeda 1 1 Limagrain Mentor 8 Mentor 3 0 Rapool náchylná K2 80 náchylná K Mendelson 7 Mendelson 2 1 Rapool Mendel 14 Mendel 3 0 Rapool PT235 5 PT Pioneer PT Pioneer náchylná K3 83 náchylná K Klíčová slova: ozimá řepka, Plasmodiophora brassicae, rezistentní odrůdy XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

57 sekce Mykologie Reakcia Lycopersicon esculentum L. k Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici Reaction of Lycopersicon esculentum to Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici Korbelová Erika 1, Kúdela Otakar 2, Roháčik Tibor 3 1 Zelseed s.r.o. Horná Potôň, Horná Potôň 1269, Horná Potôň, SK 2 Oddelenie rastlinnej virológie, Virologický ústav SAV Bratislava, Dúbravská cesta 9, Bratislava, SK 3 SELEKT Výskumný a šľachtiteľský ústav, a.s. Bučany, Bučany č. 591, Bučany, SK, rohacik.t@stonline.sk Podľa požiadaviek CPVO a UPOV je súčasťou popisu odrôd stupeň ich odolnosti, resp. náchylnosti k vybraným patogénom. V práci sme sledovali reakciu rajčina jedlého k dvom rasám 0 a 1 Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol 0, Fol 1). Mladé rastliny rajčiaka boli pred vysadením inokulované namáčaním v roztoku inokula po dobu 5 minút. Testovanie prebiehalo v klimatizovaných boxoch pri teplote C, fotoperióde 16 h. Relatívna vzdušná vlhkosť bola 70 %, inokulum bolo adjustované na koncentráciu spór. ml -1 Fol. Inkubácia infikovaných rastlín trvala 28 dní. Hodnotili sme celkový vzhľad rastliny a príznaky na rastlinách podľa stupnice: 0-zdravé rastliny bez príznakov nekrózy cievnych zväzkov, 1-zdravý vonkajší vzhľad rastliny (bez redukcie rastu) s hnedými cievnymi zväzkami, ktoré ostávajú pod úrovňou klíčnych listov, 2-redukcia rastu a výraznejšie hnednutie cievnych zväzkov okolo klíčnych listov, 3-uhynutá rastlina. Za rezistentné sme považovali rastliny s reakciou 0-1, za náchylné s reakciou 2-3. Z deklarovaných citlivých odrôd Marmande a Monalbo lepšie vyhovovala pre testovanie odroda Monalbo. Z deklarovaných rezistentných odrôd Marsol a Walter lepšie vyhovovala pre testovanie odroda Walter. Testované odrody Ambros, Jerguš, Niki mali vyrovnanú rezistentnú reakciu k Fol 0 aj Fol 1. Odroda Žofka mala rezistentnú treakciu k Fol 0, citlivú k Fol 1. Z testovaných novošľachtení sme rezistentnú reakciu k rase Fol 0 zistili pri 43 genotypoch, nevyrovnanú reakciu v odolnosti pri 3 genotypoch, náchylných k infekcii bolo 10 genotypov. Z novošľachtení testovaných na reakciu k rase Fol 1 bolo rezistentných 49 genotypov, nevyrovnanú reakciu v odolnosti malo 30 genotypov, náchylných na infekciu bolo 31 genotypov. Ukázalo sa, že existujú rozdiely v reakcii odrôd a novošľachtení na rasy Fol 0, Fol 1. Na základe testovania je možné selektovať novošľachtenia rajčiaka na odolnosť proti Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. Pre potreby CPVO a UPOV je možné charakterizovať registrované odrody z hľadiska reakcie k Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. Klúčové slová: Lycopersicon esculentum, Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici, rasa 0, rasa 1 Abstract According to the requirements of CPVO and UPOV the part of the varietes description is the level of the resistance and/or sensitivity to selected parhogen. In this work we tested the reaction of tomato to two race 0 and 1 of Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici ( Fol 0 and Fol 1). The young tomato plants were infected by submerging of the plant root system in solution ( 5 x10 6 conidia/ml) of pathogen. The infected and control plants were cultivated at C, photoperiod 16h, humidity was 70%. After 28 days we evaluated the morphological characteristics of plants and the symptoms according to the following scale: 0- healthy plants without vein necrosis, 1-without growth retardation and with brown veins under sprout leaves, 2-growth reduction, browning of the conductive tissues, 3- total wilting. The plants with XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

58 sekce Mykologie reaction 0-1 we have considered as resistant and the plants with reaction 2-3 were sensitive. As the sensitive control variety were used Marmande and Monalbo. The better reaction demonstrated Monalbo. The varietes Marsal and Walter were used as resistant control. More appropriate was the variety Walter. The tested varietes Ambros, Jerguš and Niki showed balanced resistant reaction to Fol 0 and Fol 1. The variety Žofka was resistant only to Fol 0. From the collection of breeding material the resistance to Fol 0 was identified in 49 genotypes, unbalanced reation exhibited 3 genotypes and sensitive were 10 genotypes. In the case of reaction to Fol 1 30 genotypes were resistant and 31 genotypes were sensitive. The tests demonstrated the reaction differences to races Fol 0 and Fol 1as in varietes so in breeding material. The tests enable to select the breeding material on the resistance again Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. For the purposes of CPVO and UPOV is possible to characterize the registrated varietes from the aspect of their reaction to Fusarium icysporum f. sp. lycopersici. This study was supported by the project Operational Programme for Research and Development: Transfer of effective processes for selection and identification plants to breeding (ITMS: ), from European Regional Development Fund. Key words: Lycopersicon esculentum, Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici, race 0, race 1 XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

59 sekce Mykologie Výskyt druhu rodu Penicillium spp. na okvětních plátcích ozimé řepky The incidence of Penicillium species on winter rape petals Krčmářová Jana, Šafránková Ivana, Pokorný Radovan, Holková Ludmila Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, krcmijan@seznam.cz Na lokalitě v Žabčicích (Jihomoravský kraj, Česká republika, GPS - Loc: 49 1'18.658"N, 16 36'56.003"E) byly v roce 2014 vedeny porosty dvou odrůd řepky ozimé (odrůda klasického vzrůstu řepky Sherpa a trpasličí odrůda PX 104). V těchto porostech probíhá měření mikroklimatu a pozorování napadení patogeny během celého vývoje rostlin. Při odběru okvětních lístků řepky na test výskytu houby Sclerotinia sclerotiorum (tzv. petal test), který je určen k predikci výskytu tohoto patogena na ozimé řepce (Pokorný et al. 2015), byl na odrůdě PX 104 nalezen patogen z rodu Penicillium, který byl izolován a následně determinován. Bylo provedeno hodnocení charakteru kultur a měření velikosti kolonií na živných médiích (PDA, CSA a CREA). Mikroskopií byla měřena velikost konidioforů a konidií. Pomoci Ehrlichova testu byl druh určen jako Penicillium clavigerum, tuto determinaci dále potvrdila PCR reakce provedena dle Dombrink-Kurtzman a Mc Govern (2007). Detekovaný druh Penicillium clavigerum z České republiky byl porovnán v PCR reakci s izolátem získaným z genové banky CBS-KNAW Fungal Biodiverzity Center z Nizozemí. Práce byla prováděna v rámci projektu finacovaném Ministerstvem zemědělství České republiky No. QJ Klíčová slova: řepka, mikroklima, patogeni XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

60 sekce Mykologie Long-lasting study of fungicide efficacy against cucurbit downy mildews in the Czech Republic Lebeda Aleš, Sedláková Božena, Doudová Tereza, Pavelková Jana, Urban Jiří Katedra botaniky, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Palackého v Olomouci, Šlechtitelů 27, Olomouc-Holice, CZ, bozena.sedlakova@upol.cz Abstract A total of 142 Czech P. cubensis isolates (from ) were used for fungicide resistance/moderate resistance screening. Six commonly used and registered fungicides (except Ridomil Plus 48 WP that served as control) were screened for efficiency against P. cubensis. Fungicide sensitivity was determined by a floating leaf disc bioassay with five concentrations. Fosetyl-Al (Aliette 80 W) and propamocarb (Previcur 607 SL) were the most effective fungicides. All tested isolates were sensitive on all tested concentrations of fosetyl- Al. However, some isolates expressed resistance or moderate resistance to lower and/or even to recommended concentrations of propamocarb in the years 2006 and Metalaxyl (Ridomil Plus 48 WP) and metalaxyl-m (Ridomil Gold MZ 68 WP) were ineffective. Isolates collected in 2008 and 2009 showed greater variation in moderate resistance or resistance at higher dosages of fungicide. While cymoxanil (Curzate K) was ineffective in the years and in 2010, there was 68% of isolates controlled at the recommended concentration in Between the years , efficacy of four new commonly used and registered fungicides (Acrobat MZ WG, Ridomil Gold MZ Pepite, Infinito, Ortiva) were screened. As well as there has been continued monitoring of Curzate K efficacy. Altogether 33 Czech P. cubensis isolates were screened using a floating leaf disc bioassay with three concentrations. Efficacy of fungicides against Czech cucurbit downy mildew populations varied between the years and also from previous years (in the case of metalaxyl-m and propamocarb). Cymoxanil (Curzate K) was ineffective, all isolates were resistant against lower tested concentrations. By contrast moderately resistant reaction prevailed on the highest screened concentration.these results corresponded with the situation in Czech P. cubensis population in the years and in 2010 (Pavelková et al., 2014). Dimethomorph (Acrobat MZ WG) was 100% effective against all tested P. cubensis isolates in both two years. Efficacy of metalaxyl-m (Ridomil Gold MZ Pepite) was high but varied between the years. Whereas in 2012 this fungicide was 100% effective, in 2013, there was observed occurrence of moderately resistant, resp. resistant strains on the lower tested concentrations, even though the most isolates were sensitive to all screened concentrations. This fact didnʹt reflect the situation in Czech P. cubensis population till the year Fluopicolide and propamocarb-hydrochloride (Infinito) was 100% effective to all P. cubensis isolates in both two years of study. This phenomenon in the case of propamocarb corresponds with our previous results (Urban and Lebeda, 2007). Azoxystrobin (Ortiva) showed very low efficacy in years , when the majority of isolates were resistant to all screened concentrations. However, there were noted differences in frequency of occurrence of moderately resistant (only on the highest screened concentration in 2013) and sensitive strains against screened concentrations. The research was supported by the following projects: QH71229, MSM , PrF_2013_003, IGA_PrF_ and IGA_PrF_2015_001. Key words: Pseudoperonospora cubensis, resistance, moderate resistance, sensitivity, fungicide, fosetyl-al, propamocarb, metalaxyl, metalaxyl-m, cymoxanil, dimethomorph, Fluopicolide and propamocarb-hydrochloride XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

61 sekce Mykologie Long-lasting study of fungicide efficacy against cucurbit powdery mildews in the Czech Republic Lebeda Aleš, Sedláková Božena, Jeřábková Hana, Paulík Roman, Šrajbr Martin Katedra botaniky, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Palackého v Olomouci, Šlechtitelů 27, Olomouc-Holice, CZ, ales.lebeda@upol.cz Abstract A total of 150 cucurbit powdery mildew (CPM) isolates (78 Golovinomyces orontii s.l. /Go/, 72 Podosphaera xanthii /Px/) from the Czech Republic from 2007 to 2011, were screened for moderate resistance and/or resistance to the four frequently used fungicides (fenarimol /formulated as Rubigan 12 EC/, dinocap /Karathane LC/, thiophanate-methyl /Topsin M 70 WP/, azoxystrobin /Ortiva/) and a control fungicide (benomyl /Fundazol 50 WP/). Majority of screened CPM isolates (135) originated from infected leaves of Cucurbita pepo and C. maxima. Fungicide efficacy was determined by a modified leaf-disc bioassay with five concentrations. Highly susceptible Cucumis sativus Stela F 1 was used for preparation of leaf discs. Efficacy of the tested fungicides towards screened CPM isolates varied significantly during the studied period and corresponded with the early published results (Lebeda and Sedláková, 2008; Lebeda et al., 2010). In the case of azoxystrobin, there has been available no reports about resistance/moderate resistance in Czech CPM populations since the year There were found differences in frequency of resistant/moderately resistant response of CPM strains against dinocap and azoxystrobin. Fenarimol was nearly 100% effective. Dinocap expressed the high level of effectiveness. Nevertheless, the strains of both CPM species with moderate resistance to the lowest tested dinocap-concentration, eventually concentration 1 higher, were found during the all studied period. In 2011, there were noted resistance to the lowest dinocap-concentration or moderate resistance to the recommended dinocap-concentration among Px strains. Benomyl and thiophanate-methyl were totally ineffective. Azoxystrobin showed decreased efficacy from 2007 to In 2010, frequency of CPM strains with resistance to all azoxystrobin-concentrations increased in both CPM species. In 2011, these strains even prevailed substantially. In the year 2012, efficacy of four new commonly used and registered fungicides (quinoxyfen /formulated as Atlas 500 SC/, propiconazole /Bumper 25 EC/, fenpropimorph /Corbel/, penconazole /Topas/) were screened. As well as there has been continued monitoring of dinocap /Karathane LC/ and azoxystrobin /Ortiva/ efficacy. Altogether 24 CPM Czech isolates (11 Go, 13 Px) were tested using a modified leaf-disc bioassay with three concentrations. Efficacy of the tested fungicides towards screened CPM isolates varied significantly and corresponded with the early published results (in the case of dinocap and azoxystrobin). Propiconazole, fenpropimorph and penconazole were 100% effective. Fenpropimorph showed phytotoxicity to C. sativus Stela F 1 leaf discs. Dinocap expressed highly efficacy but there were noted moderate resistance on all tested concentrations that verified our previous results. Quinoxyfen showed decreased efficacy and there were noted differences in reaction between both CPM species. Azoxystrobin showed decreased efficacy that reflected situation in Czech CPM populations in % of screened isolates were controlled by all azoxystrobin concentrations. In contrast with 46% that were resistant to all concentration. 22% isolates showed moderately resistant reaction, resp. resistant reaction to screened concentration. This research was supported by the following grants: MSM , QH 71229, PrF_2013_003, IGA_Prf_ , IGA_PrF_2015_001. Key words: Golovinomyces orontii, Podosphaera xanthii, powdery mildew, resistance, moderate resistance, sensitivity, fenarimol, dinocap, thiophanate-methyl, azoxystrobin, benomyl, quinoxyfen, propiconazole, fenpropimorph, penconazole XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

62 sekce Mykologie Antifungal effect of essential oil from Thymus vulgaris against pathogenic fungi of cereals Matušinsky Pavel 1, Zouhar Miloslav 2, Pavela Roman 3, Nový Pavel 4,5 1 Agrotest fyto, Ltd., Havlickova 2787, Kromeriz, CZ, matusinsky@vukrom.cz 2 Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamycka 129, Prague 6 Suchdol, CZ 3 Crop Research Institute, Drnovska 507, Prague 6 Ruzyne, CZ 4 Department of Quality of Agricultural Products, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamycka 129, Prague 6 Suchdol, CZ 5 Department of Crop Production, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamycka 129, Prague 6 Suchdol, CZ Abstract Essential oils from five species of medicinal and food plants were tested as mycelial growth inhibitors against five important pathogenic fungal species that cause stem, leaf and ear diseases of cereals. An agar dilution method was used to determine the inhibitory effect and effective dose of essential oils extracted from Pimpinella anisum, Thymus vulgaris, Pelargonium odoratissimum, Rosmarinus officinalis and Foeniculum vulgare on the fungi Oculimacula yallundae, Microdochium nivale, Zymoseptoria tritici, Pyrenophora teres and Fusarium culmorum. All essential oils used in our experiment affected the growth of these fungi. Ultimately, the best antifungal activity (on the basis of inhibitory effect) was demonstrated by Thymus vulgaris. The essential oil from T. vulgaris inhibited the growth of almost all tested isolates by 100% at the 1 µl.ml 1 concentration. The most prevalent compounds of T. vulgaris were thymol (44.60%), p-cymene (21.94%) and γ-terpinene (7.80%). This work was supported by projects QJ , RO0211, CZ.1.07/2.3.00/ and 17AMB14SK198. Key words: biological control, botanical pesticides, cereal diseases XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

63 sekce Mykologie Development of lettuce powdery mildew (Golovinomyces cichoracearum) on differential set of Lactuca spp. Mieslerová Barbora, Lebeda Aleš, Filová Daniela Department of Botany, Faculty of Science, Palacký University in Olomouc, Šlechtitelů 27, Olomouc- Holice, , CZ, Abstract Lettuce powdery mildew (Golovinomyces cichoracearum s. str.) is an obligate biotrophic plant parasitic fungus with worldwide distribution, which infects mainly plant species of family Asteraceae and could be dangerous on cultivated chicory and lettuce crops. G. cichoracearum attacks leaves and stems of mature stage primarily. The infection develops in dry and warm weather from early summer to early autumn (Lebeda and Mieslerová, 2011). A differential set of 13 accessions of four Lactuca spp. was developed in to differentiate G. cichoracearum races. The establishment of a basic differential set has made possible more detailed studies of spatiotemporal variation in virulence in G. cichoracearum populations in the area of the Czech Republic. During early decade of research there was clearly demonstrated the existence of race-specific interactions in the wild pathosystem Lactuca spp. - G. cichoracearum s. str. (Lebeda et al., 2012a, b). In our recent study was used the differential set of 13 Lactuca genotypes (2 L. serriola, 6 L. sativa, 1 hybrid L. sativa L. serriola, 2 L. saligna and 2 L. virosa) and one isolate of G. cichoracearum GC 1/11 (originating from L. serriola). Microscopic study of pathogen development in intervals 11, 24, 48, 72 and168 hpi was realized. There were found substantial differences in germination, germ tubes development and sporulation on selected Lactuca spp. genotypes. In previous experiments L. saligna (09-H ) and L. virosa (09-H58-998) showed the most differentiated responses to various G. cichoracearum isolates. In our study the development of G. cichoracearum on these two genotypes was limited, however not restricted. Also the highest intensity of hypersensitive (necrotic) response was observed on genotype L. virosa (09-H58-998). On the other hand on genotypes of L. serriola and L. sativa (mainly L. sativa cv. Sabine and line UCDM2) was recorded the highest intensity of sporulation. Further study was focused on the comparison of development of G. cichoracearum on highly susceptible genotype L. serriola (LSE/57/15) in various phenological stages (4, 8 and 12 weeks). The fastest growth of germ tubes was recorded on plants 8 weeks old. Also the highest intensity of sporulation 168 hpi was found on genotypes 8 and 12 weeks old. The development of G. cichoracearum was slightly limited on the youngest plants of genotype L. serriola (LSE/57/15). The research was supported by the following projects: MSM , PrF_2013_003, IGA_PrF_ and IGA_PrF_2015_001. Lebeda, A., Mieslerová, B. (2011): Taxonomy, distribution and biology of lettuce powdery mildew (Golovinomyces cichoracearum sensu stricto). Plant Pathology 60/3: Lebeda, A., Mieslerová, B., Petrželová, I., Korbelová, P. (2012a): Host specificity and virulence variation in populations of lettuce powdery mildew pathogen (Golovinomyces cichoracearum s. str.) from prickly lettuce (Lactuca serriola). Mycological Progress 12/3: Lebeda, A., Mieslerová, B., Petrželová, I., Korbelová, P., Česneková, E. (2012b): Patterns of virulence variation in the interaction between Lactuca spp. and lettuce powdery mildew (Golovinomyces cichoracearum). Fungal Ecology 5/6: Key words: lettuce powdery mildew, Lactuca spp., differential set, microscopic observation, germ tube development, sporulation, necrotic response XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

64 sekce Mykologie Česká sbírka fytopatogenních oomycetů The Czech collection of phytopathogenic Oomycetes Mrázková Marcela, Hejná Markéta Odbor biologických rizik, Výzkumný ústav Silva Taroucy pro krajinu a okrasné zahradnictví, v. v. i., Květnové nám. 391, Průhonice, CZ, mrazkova@vukoz.cz Fytopatogenní oomycety (např. mnohé druhy r. Phytophthora) patří mezí nejvíce invazní a škodlivé organismy světa. Invazím těchto organismů je samozřejmě vystaveno i území ČR, kde tyto druhy způsobují dlouhodobě významné ekonomické a ekologické škody (např. Phytophthora alni nebo P. plurivora). Intenzivní studium těchto organismů bylo započato po r. 2000, kdy byly identifikovány první významné škody způsobené P. alni v ekosystémech břehových porostů. Na základě výzkumných prací, jejichž hlavním cílem bylo vůbec popsání diverzity těchto organismů, začala od r vznikat první kolekce fytopatogenních invazních oomycetů. Počet uložených izolátů rychle rostl a už během dvou let přesáhl dvě stovky. Zároveň se rychle rozšiřoval záběr výzkumu a byly získávány izoláty dalších a dalších druhů z nejrůznějších ekosystémů. Vzhledem k významu těchto patogenů byla na základě souboru nejvýznamnějších a nejcennějších izolátů založena oficiální Sbírka fytopatogenních organismů, které byla v r přijata do Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin, zvířat a mikroorganismů významných pro výživu a zemědělství. V současné době sbírka zahrnuje více než 300 izolátů 29 druhů patogenů, přičemž jsou v ní uloženy izoláty např. takových patogenů jako Phytophthora x alni (způsobující zásadní škody v porostech olšin v Evropě), P. cinnamomi (patří mezi nejvíce invazní organismy světa), P. plurivora (významný patogen v řadě systémů a rychle se šířící v lužních lesích), P. ramorum (karanténní organismus) a mnohých dalších (P. cactorum, P. citrophthora, P. cambivora, P. cryptogea atd.). V pracovní části sbírky je pak uloženo dalších téměř třicet taxonů patřících do r. Phytophthora a Pythium a celkový počet izolátů se pak blíží číslu 750. Česká sbírka fytopatogenních organismů spolupracuje s řadou výzkumných pracovišť v Evropě např. ze Švýcarska, Německa, Finska, Irska, Litvy, Nizozemí či Polska a vzájemná roční výměna izolátů se pohybuje mezi jedním a dvěma sty položek. Tímto způsobem je sbírka i významně obohacována o další materiál. Svým významem sbírka daleko přesahuje hranice ČR a lze ji považovat za nejkompletnější kolekci těchto organismů v rámci celé postkomunistické Evropy. Klíčová slova: Oomycota, Phytophthora, biologické invaze, nepůvodní patogeny, uchovávání, biodiverzita XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

65 sekce Mykologie Mykotoxiny v kukuřici Mycotoxins in maize Nedělník Jan, Konečná Klára Výzkumný ústav pícninářský, spol. s r. o., Zemědělský výzkum, spol. s r. o. Troubsko, Zahradní 1, Troubsko, CZ, nedelnik@vupt.cz Kukuřice je z fytopatologického hlediska poměrně jednoduchá plodina. V půdněklimatických podmínkách ČR se v průběhu vegetace setkáváme se symptomy vyvolanými pouze několika patogenními organismy. Běžný je každoroční výskyt snětivých rostlin, často se objevují příznaky rzí a potom především klasy napadené houbami rodu Fusarium. V souvislosti s chorobami vždy hovoříme také o jejich hospodářském významu. Z výše uvedených lze jako hospodářsky nejvýznamnější klasifikovat napadení fusárií. Významnost spočívá nejen ve vlastním poškození rostlinných pletiv, ale především ve snížení kvality díky produkci mykotoxinů. Relativně nižší význam houbových patogenů pro kukuřici je také příčinou absence registrovaného fungicidu pro foliární aplikace. Rostlinolékařská opatření se zaměřují více na živočišné škůdce. Když pomineme rostoucí význam bázlivce kukuřičného, tak hlavní rostlinolékařské zásahy jsou vedeny proti zavíječi kukuřičnému. Kromě primárního poškození ve formě polámaných stébel je důležitý také sekundární efekt. Larvy tohoto škůdce svým požerem vytváří tzv. brány infekce, kterými vnikají houbové organismy do pletiva; začíná proces fytopatologický. Proto je velká pozornost věnována právě signalizaci výskytu zavíječe a možnostem jeho eliminace. Při diskuzi o vzniku a průběhu choroby vždy uvádíme tři základní faktory, jejichž kombinace má na výsledný patologický projev vliv. Kromě hostitele a patogena jsou to podmínky prostředí. V roce 2014 v období června až srpna byla ve většině pěstitelských regionů kukuřice nejen v ČR, ale i v dalších evropských zemích období s nadlimitními srážkami při relativně vysokých teplotách. Zvýšená vzdušná vlhkost měla za následek masivní průběh infekce houbami rodu Fusarium a abnormálně vysoký záchyt mykotoxinů v zrnu. Zároveň je nutné podotknout, že poškození zavíječem bylo v roce 2014 velmi nízké. Mykotoxikologická laboratoř VÚP Troubsko obdržela po sklizni 2014 řádově desítky vzorků kukuřice. Průměrné hodnoty deoxynivalenolu (DON) se pohybovaly kolem µg/kg, maxima bylo dokonce µg/kg. Záchyty tohoto toxinu se zvyšovaly tím víc, čím později se kukuřice sklízela. U sklizně zelené hmoty se obsah DON pohyboval v průměru 1,4 ppm. V mléčné zralosti to bylo kolem 2 ppm a v plné zralosti 10 ppm. Tyto výsledky korespondují s daty ÚKZÚZ, jejichž průměrné hodnoty DON byly 773 µg/kg a maxima 1870 µg/kg. Vyšší záchyty se objevovaly s dalšími přijatými vzorky. Rakouská agentura pro zdraví a bezpečnou výživu (AGES) má podobné výsledky, kdy se hodnoty DON pohybovaly kolem µg/kg. Organizace Swiss granum (CH) evidovala průměrné hodnoty DON na 1690 µg/kg, maxima potom na 9900 µg/kg. Problémem s maximálními limity v potravinách a krmivech se zabývá permanentně Evropská komise, EFSA navrhovala derogace pro kukuřičné zrno ze sklizně 2014, ke které zatím ale nedošlo. Ty komodity, které mají ale stanovené nadlimitní obsahy mykotoxinů, by měly být z dalšího zpracování vyloučeny. Samotná eliminace mykotoxinů po jejich zjištění v komoditě je totiž prakticky nemožná, mykotoxiny odolávají chemické, fyzikální i termické deaktivaci. Úplné vyloučení z potravinového řetězce se týká hlavně komodit určených přímo pro potravinářský a krmivářský průmysl. Klíčová slova: Fusarium, mykotoxiny, maximální limity, příčiny napadení XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

66 sekce Mykologie Mykologická a mykotoxikologická kvalita objemných krmiv Mycological and mycotoxicological quality of forage Nedělník Jan 1, Strejčková Miroslava 1, Konečná Klára 1, Sabolová Tereza 1, Both Zdeněk 2, Hortová Bronislava 3, Palicová Jana 3 1 Zemědělský výzkum, spol. s r. o. Troubsko, Zahradní 1, Troubsko, CZ, konecna@vupt.cz 2 OSEVA výzkum a vývoj, s. r. o., Zubří, Hamerská 698, Zubří, CZ 3 Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ Cílem tříletých experimentů bylo navrhnout opatření vedoucí k omezení vzniku a rozvoje fuzarióz při senáží či výrobě zavadlé píce pro produkční účely. Experimentální schéma bylo založeno na dvou lokalitách s odlišným typem trvalého travního porostu. Z první seče byly vyrobeny balíky, které byly uskladněny ve dvou režimech - kontrolní varianta bez povrchového poškození obalové fólie, druhá varianta s poškozením povrchové vrstvy pro simulaci špatného skladování. Jak v zelené hmotě, tak v konzervované píci byl sledován obsah CFU ( colony forming units jednotky, které jsou schopné vytvořit kolonii) druhu rodu Fusarium a byl analyzován obsah 5 mykotoxinů. Při studiu zelené hmoty bylo zjištěno větší množství CFU rodu Fusarium při druhém odběru na obou sledovaných lokalitách. Rozdíl mezi jednotlivými odběry v květnu a září byl statisticky průkazný (p=0,04), vliv lokality na výskyt uvedených hub zjištěn nebyl (p=0,18). Při studiu vzorků senáže byly houby rodu Fusarium zachyceny pouze z balíků, které byly uměle poškozené a to pouze z vrchní odebrané vrstvy. Největší množství CFU tohoto rodu bylo zachyceno ve vzorcích pocházejících z lokality Závišice (2391 CFU/g sušiny), v Zubří bylo množství CFU nižší (111 CFU/g sušiny). Ve vzorcích kvalitní senáže nebyly houby rodu Fusarium zachyceny. Ve všech modelových příkladech, kdy byla integrita obalu senážního balíku mechanicky narušena, došlo k výraznému snížení kvality senáže až na úroveň nezkrmitelné hmoty. Jakmile byly navozeny aerobní podmínky, tak i ve srovnání se stavem při sklizni, došlo k dramatickým nárůstům houbové mikroflóry včetně druhů rodu Fusarium a nárůstu obsahu mykotoxinů. Naopak, pokud senážní balíky zůstaly nepoškozeny, hladiny sledovaných mykotoxinů v senážích zůstaly na hodnotách srovnatelných s obsahy detekovaných v primární zelené hmotě a samotná fusaria nebyla v těchto senážích téměř detekovaná, přestože byla v primární zelené hmotě přítomna. Z celkově detekovaných pěti mykotoxinů vždy v 16 vzorcích pouze u sumy aflatoxinů nebyl zaznamenán záchyt. Zelená hmota z první a druhé seče byla kontaminována na nízkých úrovních u všech sledovaných mykotoxinů. Svědčí to na jedné straně o incidenci porostu producenty těchto látek, ale na straně druhé také o stabilitě systému a o relativní zdravotní nezávadnosti z pohledu mykotoxinů u zelené píce. Analýzy ale také prokázaly, že starší porosty (druhá seč) jsou mykotoxiny kontaminovány více. Proces konzervování, pokud není dobře veden, může hladiny mykotoxinů výrazně zvýšit. Patogenní organismy jsou i na konzervované píci přítomny, a pokud není rychle zahájen fermentační proces v anaerobních podmínkách, produkce mykotoxinů pokračuje. Zatímco obsah deoxynivalenolu (DON) ve vzorcích z dobře uzavřených balíků byl na nízké úrovni srovnatelné se zelenou hmotou, tak u vzorků z poškozených balíků byl obsah vyšší a takové krmivo může být pro zvířata zdravotně závadné. Zajímavé jsou záchyty T-2 toxinu, který vykazuje vyšší toxickou aktivitu než DON, tedy i záchyty ve stovkách ppb jsou varovné. V současné době probíhá také na úrovni EK debata o nastavení hygienických limitů pro tento toxin. Maximální obsah mykotoxinů by neměl překročit limity stanovené ve Směrnici 2002/32/EC pro aflatoxin B1 a v doporučení 2006/576/ES pro DON, zearalenon, ochratoxin A a fumonisiny B1+B2. Pro mykotoxiny bez stanoveného limitu v EU (např.: T-2 a HT-2) by hladina neměla překročit úroveň negativního vlivu na cílové zvíře. U DONu je např. směrná hodnota uváděná v mg na kg krmiva pro vedlejší produkty kukuřice 12 ppm, u zearalenonu 3 ppm, u sumy fumonisinů 60 ppm. Pro objemná krmiva typu travních senáží nejsou zatím limity stanoveny. Klíčová slova: Fusarium, mykotoxiny, maximální limity, objemná píce XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

67 sekce Mykologie Trichoderma - škodlivý organismus při pěstování hlívy ústřičné Trichoderma harmful organism of oyster mushroom Novotný David 1, Jablonský Ivan 2 1 Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, novotny@vurv.cz 2 Ovenecká, 47/370, Praha 7, CZ V České republice se komerčně pěstuje pouze několik druhů jedlých hub, a to Agaricus bisporus, Pleurotus ostreatus, P. pulmonarius, P. eryngii a Lentinula edodes. Při pěstování poškozují tyto houby jednak bezobratlí, ale bakterie a jiné druhy hub. Z parazitických hub jsou nejvýznamnější druhy Verticillium fungicola a Mycogone perniciosa, které poškozují A. bisporus). Velké ztráty na výnosu způsobují také kompetitivní druhy hub, z nichž největší problémy pěstitelům způsobují z rodu Trichoderma. Při pěstování A. bisporus největší ztráty (nejn v ČR, ale i dalších zemích světa) způsobuje druh Trichoderma aggressivum. Druh druhy T. pleurotum je spolu druhem T. pleuroticola příčinou velkých ztráty při pěstování Pleurotus ostreatus a P. pulmonarius. Výskyt hub rodu Trichoderma je velmi ovlivněn způsobem přípravy pěstebního substrátu. V současnosti je substrát připravován v několika různých typech zařízení, přičemž nejčastěji je připravován v propařovacím tunelu, kdy je materiál pro pěstování vystaven teplotě okolo C. Při takovém to zpracování dochází pouze k jeho pasterizaci substrátu. Při vyšších teplotách využívaných při jiných způsobech výroby dochází ničení spor druhů Trichoderma spp., ale takto připravený substrát je náchylnější na nežádoucí kolonizaci různými druhy škodlivých hub. Finančně podpořeno projektem TAČR TA Klíčová slova: Trichoderma, Pleurotus, pěstování XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

68 sekce Mykologie Vlastnosti entomopatogenních hub a jejich využití proti škůdcům Properties of entomopathogenic fungi and their efficacy for the control of pests Ondráčková Eliška, Seidenglanz Marek, Ondřej Michal AGRITEC, výzkum šlechtění a služby, s. r. o., Zemědělská 2520/16, Šumperk, CZ, ondrackova@agritec.cz Entomopatogenní houby rodu Beauveria, Lecanicillium a Isaria se nejčastěji využívají v biologické kontrole proti škůdcům. Méně známa je mykoparazitická aktivita některých entomopatogenních hub. U hub rodu Lecanicillium, Isaria, Beauveria a Purpureocillium byla v laboratorních podmínkách testována účinnost proti mšici makové a proti zrnokazu fazolovému. Houby rodu Lecanicillium byly testovány na mykoparazitickou účinnost proti 13 druhům fytopatogenních hub. U testovaných entomopatogenních hub byla zjišťována citlivost na vybrané fungicidní a insekticidní přípravky. Proti larvám i dospělcům mšice makové byly v laboratorních podmínkách 5. den nejúčinnější houby rodu Lecanicillium. Mortalita dospělců zrnokaza hrachového dosahovala 16. den %. V testech mykoparazitické aktivity byla nejlepší účinnost u všech testovaných izolátů hub rodu Lecanicillium zjištěna proti fytopatogenním houbám Sclerotinia sclerotiorum a Drechslera teres, jejichž růst byl ze směsi zcela eliminován. Testované fungicidní přípravky Acrobat a Ridomil Gold významně redukovaly růst všech entomopatogenních hub v průměru o %. V přítomnosti insekticidních přípravků (Pirimor a Spintor) nebyl růst entomopatogenních hub výrazně redukován. Klíčová slova: entomopatogenní houby, biologická kontrola, mykoparazitická účinnost, citlivost na fungicidní a insekticidní látky XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

69 sekce Mykologie Choroby léčivých, aromatických a kořeninových rostlin Diseases of medicinal, aromatic and culinary plants Petrželová Irena Sekce aplikovaného výzkumu zelenin a speciálních plodin VÚRV, v. v. i., Centrum regionu Haná pro biotechnologický a zemědělský výzkum, Šlechtitelů 29, Olomouc-Holice, CZ, petrzelova@genobanka.cz V průběhu vegetačních sezón let byl sledován výskyt houbových chorob v polních kolekcích genetických zdrojů léčivých, aromatických a kořeninových rostlin (LAKR) udržovaných na pracovišti Sekce aplikovaného výzkumu zelenin a speciálních plodin VÚRV, v. v. i. v Olomouci. Cílem bylo získat přehled o spektru druhů fytopatogenních hub a Oomycet napadajících v České republice rostoucí a/nebo pěstované druhy LAKR a vyhodnotit škodlivost chorob jimi způsobených. U druhů pěstovaných volně na poli byly jako nejškodlivější vyhodnoceny rzivosti, oomycetózy a padlí. Z druhů způsobujících rzivosti byly nalezeny následující: Coleosporium campanulae (na zvonku řepkovitém), Coleosporium inulae (na omanu pravém a o. mečolistém), Phragmidium potentillae (na mochně přímé a m. stříbrné), Phragmidium sanguisorbae (na krvavci menším), Puccinia absinthii (na pelyňku pravém), Puccinia arenariae (na koukolu polním), Puccinia balsamitae (na mařím listu balšámovém), Puccinia bornmuelleri (na libečku lékařském), Puccinia jaceae (na chrpě žlutokvěté), Puccinia lagenophorae (na měsíčku lékařském), Puccinia malvacearum (na proskurníku lékařském, slézu lesním a s. pižmovém, topolovce růžové), Puccinia menthae (na mátě dlouholisté, m. huňaté, m. kadeřavé, m. klasnaté, m. peprné, m. rolní a m. vodní), Puccinia nigrescens (na šalvěji přeslenité), Pucciniastrum agrimoniae (na řepíku lékařském), Trachyspora intrusa (na kontryhelu obecném) a Uromyces verbasci (na divizně velkokvěté). Oomycetózy byly v rámci LAKR zaznamenány na bazalce pravé (Peronospora belbahrii), borytu barvířském (Hyaloperonospora parasitica), komonici bílé (Peronospora meliloti), pohance obecné (Peronospora ducometi), pupalce (Peronospora arthuri), řepíku lékařském (Peronospora agrimoniae), šalvěji lékařské (Peronospora salviae-officinalis) a vratiči obecném (Paraperonospora tanaceti). Na křenu selském bylo pozorováno silné napadení bílou puchýřnatostí brukvovitých (Albugo candida). Silné napadení padlím bylo zjištěno u divizny velkokvěté, kontryhele obecného, krvavce totenu, měsíčku lékařského, ostropestřce mariánského, šalvěje přeslenité, zavinutky podvojné a některých genotypů řepíku lékařského. Z druhů způsobujících padlí byly zastoupeny: Erysiphe biocellata (na šalvěji lékařské a š. přeslenité, zavinutce podvojné), Erysiphe cruciferarum (na křenu selském), Erysiphe heraclei (na kmínu kořenném), Erysiphe verbasci (na divizně velkokvěté), Golovinomyces cichoracearum (na ostropestřci mariánském), Sphaerotheca aphanis (na kontryhelu obecném, mochně přímé a m. stříbrné, řepíku lékařském), Sphaerotheca ferruginea (na krvavci menším), Sphaerotheca fusca (na měsíčku lékařském) a Sphaerotheca spiraeae (na tužebníku jilmovém). Časté byly u LAKR také houbové skvrnitosti listů, jako vysoce škodlivé však byly vyhodnoceny pouze u následujících druhů: bazalka pravá (ze skvrn byl vyizolován druh Botrytis cinerea), boryt barvířský (Alternaria brassicae), bukvice lékařská (Ovularia sp., Phoma sp., Phyllosticta sp., Septoria sp.), dobromysl obecná (Septoria sp.), fenykl obecný (Cercosporidium punctum), jestřabina lékařská (Ramularia sp.), jirnice modrá (Phoma sp.), kmín kořenný (Septoria carvi), kontryhel obecný (Ovularia sp.), lékořice lysá (Phyllosticta glycyrrhizae), levandule lékařská (Septoria lavandulae), libeček lékařský (Alternaria sp., Ramularia levistici), meduňka lékařská (Septoria melissae), mochna přímá a m. stříbrná XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

70 sekce Mykologie (Ascochyta sp., Phoma sp., Phyllosticta sp., Septoria sp.), mydlice lékařská (Alternaria sp.), náprstník žlutý (Aristatoma sp., Phoma sp., Septoria sp.), zlatobýl obecný (Septoria sp.). Práce vznikla s podporou projektu č. LO1204 Udržitelný rozvoj výzkumu Centrum regionu Haná z Národního programu udržitelnosti I, MŠMT a Národního programu konzervace a využití genetických zdrojů pěstovaných rostlin a agrobiodiverzity (206553/ ), MZe ČR. Klíčová slova: LAKR, rzivosti, oomycetózy, padlí, skvrnitosti listů, škodlivost Abstract In occurrence of diseases was monitored in field collections of medicinal, aromatic and culinary plants (MAPs) germplasm maintained at the Section of Applied Research of Vegetables and Special Crops of the Crop Research Institute in Olomouc. The goal was to get information about the species spectra of fungal and oomycete pathogens attacking MAPs growing and/or cultivated in the Czech Republic, including their harmfulness. Rusts, downy and powdery mildews were found as the most harmful for MAPs. Among the species causing rust diseases of MAPs were the following: Coleosporium campanulae (recorded on rampion bellflower), Coleosporium inulae (on elecampane and swordleaf inula), Phragmidium potentillae (on sulphur and silver cinquefoil), Phragmidium sanguisorbae (on salad burnet), Puccinia absinthii (on absinthe wormwood), Puccinia arenariae (on corncockle), Puccinia balsamitae (on costmary), Puccinia bornmuelleri (on lovage), Puccinia jaceae (on bighead knapweed), Puccinia lagenophorae (on pot marigold), Puccinia malvacearum (on marshmallow, common mallow, musk mallow and hollyhock), Puccinia menthae (on horsemint, foxtail mint, curly mint, spearmint, peppermint, corn mint and water mint), Puccinia nigrescens (on lilac sage), Pucciniastrum agrimoniae (on agrimony), Trachyspora intrusa (on lady s mantle), and Uromyces verbasci (on dense-flowered mullein). Downy midews were recorded on sweet basil (Peronospora belbahrii), dyer's woad (Hyaloperonospora parasitica), white sweet clover (Peronospora meliloti), buckwheat (Peronospora ducometi), evening primrose (Peronospora arthuri), agrimony (Peronospora agrimoniae), common sage (Peronospora salviae-officinalis), and common tansy (Paraperonospora tanaceti). Severe infection by white rust (Albugo candida) was observed on horseradish. Strong powdery mildew infection was recorded on dense-flowered mullein, lady s mantle, great burnet, pot marigold, milk thistle, lilac sage, bee balm, and some genotypes of agrimony. Powdery mildews were represented by the following species: Erysiphe biocellata (on common and lilac sage, and bee balm), Erysiphe cruciferarum (on horseradish), Erysiphe heraclei (on caraway), Erysiphe verbasci (on dense-flowered mullein), Golovinomyces cichoracearum (on milk thistle), Sphaerotheca aphanis (on lady s mantle, on sulphur and silver cinquefoil, and agrimony), Sphaerotheca ferruginea (on salad burnet), Sphaerotheca fusca (on pot marigold) and Sphaerotheca spiraeae (on meadowsweet). Leaf spots of MAPs were also quite frequent, however they were found as harmful only for the following species: sweet basil (from the spots we isolated species Botrytis cinerea), dyer s wood (Alternaria brassicae), betony (Ovularia sp., Phoma sp., Phyllosticta sp., Septoria sp.), oregano (Septoria sp.), fennel (Cercosporidium punctum), goat s rue (Ramularia sp.), Jacob s ladder (Phoma sp.), caraway (Septoria carvi), lady s mantle (Ovularia sp.), licorice (Phyllosticta glycyrrhizae), lavender (Septoria lavandulae), lovage (Alternaria sp., Ramularia levistici), lemon balm (Septoria melissae), sulphur and silver cinquefoil (Ascochyta sp., Phoma sp., Phyllosticta sp., Septoria sp.), common soapwort (Alternaria sp.), straw foxglove (Aristatoma sp., Phoma sp., Septoria sp.), and European goldenrod (Septoria sp.). The research was supported by the grant No. LO1204 (Sustainable development of research in the Centre of the Region Haná) from the National Program of Sustainability I, MEYS, and The XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

71 sekce Mykologie Czech National Programme on Conservation and Utilization of Plant Genetic Resources and Agro-biodiversity (206553/ , MA CR). Keywords: MAPs, rusts, downy mildews, powdery mildews, leaf spots, harmfulness XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

72 sekce Mykologie Signalizace fungicidního ošetření řepky olejky proti houbovým chorobám Plachká Eva 1, Poslušná Jana 2 1 OSEVA PRO s. r. o., o. z. Výzkumný ústav olejnin Opava, Purkyňova 10, Opava, CZ, plachka@oseva.cz 2 Agritec Plant Research, s. r. o., Zemědělská 2520/16, Šumperk, CZ, poslusna@agritec.cz Dlouhodobá pozorování na Opavsku a Šumpersku ukázaly, že signalizaci fungicidního ošetření proti významným patogenům řepky olejky ozimé Leptosphaeria maculans, L. biglobosa a S. sclerotiroum lze s vysokou úspěšností provádět na základě znalosti osevního sledu, průběhu počasí a detekce zdroje infekce. Ta byla prováděna hodnocením letu askospor patogenů v ovzduší a kontaminací rostlin v kritických vývojových fázích řepky pro infekci. Nálet askospor patogenů L. maculans, L. biglobosa byl hodnocen pomocí lapače spor AMET, který pracuje na obdobném principu jako Burkardův lapač spor. Nálety byly hodnoceny od vzcházení řepky do listopadu. Výsledky byly porovnány s výsledky prognostického modelu firmy ProPlant. Ten pracuje s údaji o průběhu počasí. Kontaminace květních plátků řepky askosporami S. sclerotiorum byla hodnocena v průběhu kvetení. Byl potvrzen velký vliv teploty a relativní vlhkosti na vývoj patogenů a infekci rostlin. Získání výsledků bylo spolufinancováno MZe NAZV projekty QH81127 a QJ XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

73 sekce Mykologie Vztah mezi mikroklimatem a napadením řepky patogenem Sclerotinia sclerotiorum The relationship between microclimate and rape infection by Sclerotinia sclerotiorum Pokorný Radovan, Středa Tomáš, Krčmářová Jana Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, pokorny0@node.mendelu.cz Houba Sclerotinia sclerotiorum je důležitým patogenem řepky na které způsobuje chorobu bílá hniloba řepky. Rostliny infikuje buď přímo myceliem rozrůstajícím se ze sklerócii, nebo akospórami, které jsou vytvářeny patogenem v apotheciích. Ta vyrůstají ze sklerócii přibližně v období kvetení řepky. Askospory jsou vystřelovány směrem vzhůru a uchycují se především na opadlých okvětních plátcích v úžlabí řapíků listů. Proto se k predikci výskytu patogena a načasování následného ošetření porostu využívá tzv. petal test, při kterém se na živném médiu (PDA) určuje napadení okvětních plátků patogenem. V našich testech na odrůdě Sherpa na lokalitě Žabčice (Jihomoravský kraj, Česká republika, GPS - Loc: 49 1'18.658"N, 16 36'56.003"E) v letech 2014 a 2015 jsme prováděli tyto testy a následně před sklizní bylo hodnoceno celkové napadení patogenem. V roce 2014 bylo ve fázi kvetení zjištěno napadení u 65 až 87% okvětních plátků, v roce %. Napadení stonků před sklizní bylo v roce 11%, v roce %. Z uvedeného je zřejmé, že predikce pouze podle tzv. petal testu je nepřesná. Rozdíly mohly být způsobeny jednak délkou fáze kvetení, která v roce 2014 činila 17 dní a v roce dní, ale především délkou ovlhčení listů a stonků řepky. V roce 2014 bylo zjištěno ovlhčení během této fáze 80 hodin (tj. průměrně 4,70 za den), naopak v roce hodin (tj. průměrně 9,9 za den). Proto je pro správnou predikci nutné využívat kombinace dat z petal testů a z mikroklimatu porostu. Práce byla provedena v rámci projektu financovaném Ministerstvem zemědělství České republiky No. QJ Klíčová slova: řepka, Sclerotinia sclerotiorum, petal test, ovlhčení XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

74 sekce Mykologie Testování citlivosti patogenů Leptosphaeria spp. a Sclerotinia sclerotiorum vůči vybraným fungicidům Testing the susceptibility of Leptosphaeria spp. and Sclerotinia sclerotiorum pathogens against selected fungicides Poslušná Jana 1, Plachká Eva 2 1 Agritec Plant Research, s. r. o., Zemědělská 2520/16, Šumperk, CZ, poslusna@agritec.cz 2 OSEVA PRO s. r. o., o. z. Výzkumný ústav olejnin Opava, Purkyňova 10, Opava, CZ, plachka@oseva.cz V letech 2013 až 2015 byla testována citlivost patogenů Leptosphaeria maculans, L. biglobosa a Sclerotinia sclerotiorum k fungicidům Horizon 250 EW (tebuconazol), Efilor (boscalid, metconazol), Pictor (boscalid, dimoxystrobin) a Symetra (isopyrazam, azyxystrobin). Testy citlivosti probíhaly na dvou pracovištích v Šumperku a Opavě. Izoláty patogenů byly získány sběrem napadených pletiv ozimé řepky na provozních plochách osetých řepkou i z fungicidně neošetřených pokusných parcel. Následnou kultivací na živných půdách (Czepek-Dox, PDA) byly získány jejich čisté kultury. Při testování bylo mycelium patogenů umístěno na otrávené plotny s různými koncentracemi účinných látek fungicidů. Výchozí koncentrace byla stanovena na základě dávky přípravku na 1 ha a množství postřikové jíchy. Nejvíce testů citlivosti bylo provedeno s přípravkem Horizon 250 EW, pracovali jsme s koncentracemi přípravku 0,2; 0,4; 0,8 a 1,6 %, což odpovídá 0,05; 0,1; 0,2 a 0,4% koncentraci tebukonazolu v živné půdě. Testováno bylo cca 50 izolátů patogenu Leptosphaeria spp. a 30 izolátů patogenu Sclerotinia sclerotiorum. Klíčová slova: citlivost, Leptosphaeria spp., Sclerotinia sclerotiorum, fungicidy, ozimá řepka Abstract In years the susceptibility of Leptosphaeria spp. and Sclerotinia sclerotiorum pathogens was tested against selected fungicides as Horizon 250 EW (a.i. tebuconazole), Efilor (a.i. boscalid, metconazole), Pictor (a.i. boscalid, dimoxystrobin) and Symetra (isopyrazam, azoxystrobin). Tests of susceptibility were carried out at two workplaces in Šumperk and Opava. The isolates of fungal pathogens were collected from infected tissues of winter oilseed rape at commonly treated fields and from fungicidal untreated experimental plots with oilseed rape. Pure cultures of pathogens were obtained by following cultivation on solid defined medium (Czapek-Dox, PDA). Small parts of pathogen s mycelium were placed on poisoned plates with different concentrations of active ingredients of fungicides. The initial concentration was determined based on the dose of 1 ha and the amount of spray mixture. The most tested fungicide was Horizon 250 EW, used concentration scale was 0,2; 0,4; 0,8 and 1,6 % solution of fungicide, which corresponded to 0,05; 0,1; 0,2 and 0,4% solution of tebuconazole in solid medium. Since 2013 there were tested about 50 isolates of Leptosphaeria spp. And about 30 isolates of Sclerotinia sclerotiorum. Keywords: susceptibility, Leptosphaeria spp., Sclerotinia sclerotiorum, fungicides, winter oilseed rape XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

75 sekce Mykologie Plasmopara halstedii patogenní variabilita a výskyt Plasmopara halstedii viru na území České republiky Pospíchalová Romana, Sedlářová Michaela, Trojanová Zuzana, Bartůšek Tomáš, Lebeda Aleš Katedra botaniky, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Palackého v Olomouci, Šlechtitelů 11, Olomouc-Holice, CZ, romana.pospichalova@upol.cz Plasmopara halstedii (Farl.) Berl. & De Toni je původcem plísňovitosti slunečnice, karanténní choroby, která je rozšířena ve všech zemích pěstujících slunečnici. V České republice je její výskyt, který je zatím považován spíše za vzácný, každoročně kontrolován Ústředním kontrolním a zkušebním ústavem zemědělským. Důvody, proč tento biotrofní patogen představuje hrozbu, jsou patogenní variabilita, vznik izolátů rezistentních vůči fungicidům a dlouhodobé přežívání oospor v půdě. Do roku 2006 bylo po celém světě zaznamenáno nejméně 36 ras P. halstedii a tato variabilita dále narůstá. Celosvětově dominantními jsou rasy 700, 710, 730 a 770. V současnosti se v Evropě začíná šířit rasa 704, z Maďarska potvrzena i rasa 714 s potenciálem dalšího šíření. Na území ČR dominuje rasa 710, dále byly potvrzeny rasy 700, 704 a 714. U množství izolátů P. halstedii, bez ohledu na jejich geografický původ, fyziologickou rasu a odolnost vůči metalaxylu, byl popsán výskyt Plasmopara halstedii viru. V morfologii a biochemii viru nebyl u odlišných izolátů PhV pozorován rozdíl. Od roku 2011 je známa kompletní sekvence genomu PhV, virus však zatím nebyl taxonomicky zařazen. Srovnání sekvencí různých izolátů PhV ukázalo velmi nízkou sekvenční variabilitu. Zajímavou vlastností tohoto mykoviru je, že uděluje plísni slunečnice hypovirulentní fenotyp. Následkem virové infekce P. halstedii dochází ke snížení intenzity sporulace a výskytu systémových infekcí i k prodloužení doby nepohlavního cyklu ve srovnání s izogenními kmeny bez viru. Tento účinek PhV na jeho hostitele se zdá být potenciálně využitelný k biologické kontrole plísňovitosti slunečnice. PhV byl prozatím detekován téměř ve všech testovaných oblastech světa, včetně ČR, kde byl potvrzen na 4 lokalitách, především na jižní Moravě. Klíčová slova: plíseň slunečnice, fyziologická rasa, patogenní variabilita, mykovirus, hypovirulence XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

76 sekce Mykologie Infekční biologie Hymenoscyphus fraxineus a faktory ovlivňující fruktifikaci teleomorfy, jakožto zdroje infekce nekrózy jasanu Infectious biology of Hymenoscyphus fraxineus and factors affecting fructification of teleomorph as a source of ash dieback infection Rozsypálek Jiří, Jankovský Libor Ústav ochrany lesů a myslivosti, Lesnická a dřevařská fakulta, Mendelova univerzita v Brně, Zemědělská 3, Brno, CZ, jirkarozsypalek@seznam.cz Patogenní houba Hymenoscyphus fraxineus (T. Kowalski) Baral, Queloz, Hosoya se stává vážným problémem pro většinu evropských, ale i mimo evropských druhů jasanu. Odumírání jasanů způsobené touto houbou se v Evropě poprvé objevilo v devadesátých letech minulého století. Od té doby se tento patogenní organismus rozšířil téměř do všech států evropy a odumírání jasanu se v současné době vyskytuje prakticky v celém areálu rozšíření Fraxinus excelsior L.. Velký podíl na takto rychlém šíření má především mohutná produkce askospor v apothéciích, která se vytváří v hojném počtu na infikovaných jasanových řapících ležících na povrchu země. Askospory jsou uvolňovány a přenášeny větrem na velkou vzdálenost, díky čemuž se tato patogenní houba velmi rychle šíří a je velmi obtížné jakákoli tomuto šíření zabránit. Z tohoto důvodu se naše práce zaměřila na zjištění co nejvíce faktorů, které mohou významě ovlivňovat fruktifikaci apothécií. Detailní průzkoumání této fáze životního cyklu by mohlo vést k objevu nových metod obrany vůči této infekci. Havrdová (2014), uvádí, že intenzita infekce je silně závislá na vlhkosti prostředí, v němž se vhodný hostitel nachází. Cílem naší práce bylo ověřit, zda má vlhkost prostředí vliv na fruktifikaci H. fraxineus. Předpokládáme, že při snížení vlhkosti prostředí (například redukcí bylinného patra, nebo snížením zapojení porostu) klesne také intenzita a délka fruktifikace H. fraxineus. Sledování fruktifikace probíhalo na lokalitě Vranovický les (N ', E ') v monokultuře F. excelsior. Na této ploše byly vytyčeny tři plošky o rozměrech 50 x 50 cm. Dvě plošky se nalézaly v 18 let starém porostu F. excelsior, přičemž u jedné byla prováděna pravidelná redukce bylinného patra sekáním a na druhé se nechávalo bylinné patro přirozenému vývoji. Třetí ploška byla v osmiletém porostu a i zde bylo bylinné patro ponecháno bez zásahu. Sledování probíhá od roku 2013 v týdenním intervalu od do Na pokusných ploškách jsou spočítány veškeré infikované (černá barva) řapíky a je vyhodnoceno procento řapíků s přítomností apothecií H. fraxineus. Pro jednodušší vyhodnocení získaných dat byla vytvořena pětistupňová škála, do níž byla získaná hodnota zařazena. Předpokládáme, že největší hustota apothecií a nejdelší období fruktifikace bude pozorováno v osmiletém porostu bez úpravy bylinného patra. Vzhledem k největší hustotě vegetace, vlivem které se v porostu udrží vysoké procento vzdušné i přirozené vlhkosti tohoto prostředí. Nejhorší podmínky pro úspěšnou fruktifikaci by pak měly být v osmnáctiletém porostu s periodicky odstraňovaným bylinným patrem. Poděkování: Tato práce byla podpořena z projektů: COST LD IGA LDF MENDELU 30/2013, IGA AF MENDELU IP 40/2015 Klíčová slova: Hymenoscyphus fraxineus, Ash dieback, fruktifikace, Fraxinus excelsior L. XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

77 sekce Mykologie Endofytické houby jehlic Pinus sylvestris v České republice a jejich intrakce s Dothistroma septosporum Endophytic fungi in needles of Pinus sylvestris in the Czech Republic and their interactions with Dothistroma septosporum Řezáčová Veronika 1, Zyková Kamila 1, Novotný David 1, Salava Jaroslav 1, Brožová Jana 1, Jankovský Libor 2 1 Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, novotny@vurv.cz 2 Ústav ochrany lesů a myslivosti, Lesnická a dřevařská fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 3, Brno, CZ Dothistroma septosporum a Dothistroma pini jsou fytopatogenní houby způsobující červenou sypavku borovic, což je jedno z nejvýznamnějších onemocnění borovic. Cílem práce bylo endofytickou mykobiotu zdravých jehlic a jehlic postižených červenou sypavkou Pinus sylvestris jižních Čechách na Soběslavsku v roce 2014, zhodnotit vliv sezóny na společenstvo endofytických hub a zhodnotit vztah D. septosporum a nejčastěji se vyskytujících endofytických hub. Houby byly identifikovány na základě morfologických znaků a sekvence vybraných úseků DNA. Bylo zjištěno, že jehlic hostí mnoho druhů endofytických hub. Získaných 1107 izolátů bylo do sekvenčně shodných taxonů, přičemž taxony z řádů Rhytismatales and Helotiales byly dominantní. Cadophora sp., Desmazierella acicola, Lophodermium pinastri, Lophodermium seditiosum, Naemacyclus minor, Trametes versicolor, Leotiales sp. 2 a Sordariomycetes sp. byly zjištěny jako nejčastěji se vyskytující se druhy. Byl zjištěn vliv výskytu postižení červenou sypavku borovic a ročního období. Výsledky ukázaly průkazně vyšší druhovou diverzitu endofytických hub v jehlicích s příznaky červené sypavky borovic a zvýšený počet druhů endofytických hub a jejich v těchto jehlicích v porovnání s jehlicemi bez příznaků při odběrech v měsících září a listopadu. Změny v počtu a četnosti druhů endofytických hub byly zjištěny vlivem doby odběru byly zjištěny podobně. V jehlicích bez příznaků počet druhů a četnost výskytu klesal od května do listopadu, zatímco u stromů s příznaky nejprve byl zjištěn nárůst v obou parametrech a v listopadu se snížil. U některých druhů byla zjištěna spojitost jejich výskytu s napadením červenou sypavku borovic, nicméně pouze Sordariomycetes sp. vykazoval antagonistický výskyt k napadení D. septosporum v září. Prezentovaný výzkum rozšířil znalosti o druhové diverzitě a změnách v endofytické mykobiotě jehlic P. sylvestris vlivem ročního období a ukázal změny v endofytické mykobiotě jehlic po jejich infekci D. septosporum. Podpořeno projektem MŠMT LD Klíčová slova: Pinus sylvestris, Dothistroma septosporum, endofyty, jehlice, endofytické houby XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

78 sekce Mykologie Určení patotypů patogenu Plasmodiophora brassicae (původce nádorovitosti kořenů brukvovitých) na zamořených pozemcích v České republice, kde se pěstuje ozimá řepka Designation of pathotype of Plasmodiophora brassicae (clubroot) on infested oilseed rape fields in the Czech Republic Řičařová Veronika 1, Kazda Jan 1, Baranyk Petr 2 1 Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, vercaricarova@seznam.cz 2 Katedra rostlinné výroby, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ Rezistence odrůd ozimé řepky k patogenu Plasmodiophora brassicae je patotypově (rasově) specifická a nezahrnuje komplexně všechny patotypy. Populace Plasmodiophora brassicae je obvykle směsí několika patotypů patogena. Více patotypů může dokonce obsahovat i jeden nádor. Patotypy rozlišujeme jednak molekulárně a pak také biologicky, pomocí klasifikačních systémů např. European Clubroot Differencial Set (ECD). Rozšíření patotypů ve světě je velmi variabilní. Podle ECD metody byly v Německu zjištěny 3 patotypy - ECD 16/14/31, 23/31/31, 21/31/28,v USA byly určeny 4 patotypy, v Kanadě 2 patotypy, v Japonsku dokonce 46 ECD patotypů (ze 48 možných) a nejčastější byl 16/14/15. V bývalém Československu bylo v minulosti ( ) zjištěno na plochách s brukvovitou zeleninou 35 ECD patotypů, avšak 22 z nich pouze jednou. Nejběžnější byl patotyp 16/15/13 (28 % případů), dále pak ECD 16/02/28 a 16/14/31 (9 % případů). Determinace patotypů Plasmodiophora brassicae ze 17 lokalit z České republiky probíhala ve sklenících University of Alberta. Pro klasifikaci patotypů byly použity tři diagnostické klasifikační systémy Williamsův systém, ECD systém a Somé et. al. systém. Tato práce vznikla za finanční podpory NAZV (MZE ČR), projektu č. QJ Patotypy P. brassicae identifikované v České republice na půdách, kde se pěstuje ozimá řepka Isolate Lokalita Williams Somé ECD 1 Modlibohov 7 P3 16/14/31 2 Holany 7 P3 16/14/15 3 Bily Kostel 2 P3 16/14/13 4 Horka u Bakova 7 P3 16/14/15 5 Trebnouseves 7 P3 16/14/31 6 Miletin 2 P3 16/14/15 7 Kbelnice 6 P3 16/2/14 8 Zirovnice 3 P3 16/2/14 9 Horusice 5 P4 16/18/15 10 Hrdejovice Ves 6 P3 16/14/12 12 Pohledy 9 P1 16/31/8 13 Kozmice 7 P3 16/14/15 14 Klokocov 7 P3 16/2/15 15 Hrádek 6 P4 16/10/4 16 Terezin 7 P3 16/14/13 17 Redice 2 P3 16/14/13 Klíčová slova: ozimá řepka, patotypy Plasmodiophora brassicae v ČR XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

79 sekce Mykologie Vliv systému pěstování jabloní na složení jejich endofytické mykobioty The effect of apple tree growing system on the composition of their endophytic mycobiota Salava Jaroslav, Novotný David, Brožová Jana Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, salava@vurv.cz Ovocné druhy se v současné době pěstují v České republice na více než hektarech a z toho zhruba polovinu této výměry zaujímají jabloně. Velké problémy pěstitelům nejen v České republice způsobují skládkové choroby jablek, které vyvolávají houby rodů Monilia, Neofabraea, Botrytis a Fusarium. Endofytické houby se vyskytují uvnitř všech známých rostlin rostoucích v rozmanitých ekosystémech, a proto hrají v přírodním prostředí významnou roli. Endofytické houby jsou adaptování na svého hostitele a mohou být antagonisty jeho patogenů, a tak mohou redukovat, potlačovat nebo indukovat rezistenci rostlin vůči nim. V roce 2014 byly odebírány vzorky listů, větví a plodů odrůdy jabloní Rubín v šesti sadech s integrovaným (3) a ekologickým (2) režimem ochrany proti škodlivým činitelům a bez ošetření přípravky na ochranu rostlin (1). Sady se nacházely ve čtyřech různých lokalitách (Holovousy, Praha-Ruzyně, Voletice a Brtev). Složení a diverzita společenstev endofytických hub byla zjišťována kultivačními technikami. Přesná identifikace endofytů byla provedena pomocí extrakce DNA následované PCR analýzou oblastí ITS1 a ITS2 rdna a porovnáním sekvence DNA s databází NCBI. Bylo izolováno a morfologicky charakterizováno více než 200 kmenů endofytických hub. Mezi izolovanými houbami převládaly zástupci rodů Cladosporium a Alternaria. Bude diskutováno složení endofytických hub v různých orgánech jabloní se zvláštním zřetelem na režim ochrany proti škodlivým činitelům. Výzkum je financován MŠMT České republiky v rámci řešení projektu LD Klíčová slova: Malus x domestica, endofytické houby, integrovaná ochrana, ekologická ochrana, izolace, identifikace, kultivace, sekvenování DNA XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

80 sekce Mykologie Aplikace esenciálních olejů v polních podmínkách a jejich vliv na výskyt houbových chorob v porostech obilnin Application of essential oils in the field conditions and its influence on the appearance of fungal disseases in grain crops Sedlák Petr, Zouhar Miloslav, Zusková Eva Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, psedlak@af.czu.cz Výtažky z rostlin pomáhaly zemědělcům již před staletími v boji proti chorobám a škůdcům. My jsme se zaměřili na houbové choroby braničnatku pšeničnou (Mycosphaerella graminicola), padlí travní (Blumeria graminis), hnědou skvrnitost ječmene (Pyrenophora teres) a rez travní (Puccinia graminis) a sledovali jsme vliv esenciálních olejů na jejich výskyt. Na základě předchozích pokusů v in vitro podmínkách byly vybrány výtažky z rostlin vavřín kubébový (Litsea cubeba), pelargonie vonná (Pelargonium graveolens), bedrník anýz (Pimpinella anisum) a fenykl obecný (Foeniculum vulgaris). Tyto výtažky byly ve 2 % koncentracích aplikovány na porosty pšenice ozimé (Triticum aestivum) a ječmenu jarního (Hordeum vulgare) pravidelně jednou za 14 dní. Pokusy probíhaly na produkčních pozemcích v okrese Nymburk a výsledky byly podrobeny statistickým analýzám. Klíčová slova: esenciální oleje, Blumeria graminis, Mycosphaerella graminicola, Pyrenophora teres, Puccinia graminis XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

81 sekce Mykologie Mining and annotating putative immunophilins (IMMs) genes in clubroot causing pathogen Plasmodiophora brassicae Singh Khushwant, Mazáková Jana, Zouhar Miloslav, Ryšánek Pavel Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology, Food, and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamycka 129, , Prague 6 Suchdol, CZ, sandhu_singh@af.czu.cz Abstract Clubroot caused by Plasmodiophora brassicae is an economically important disease of Brassicaceae family, resulting in a 10% 15% yield reduction on a global scale (Dixon, 2009). P. brassicae is an obligate biotrophic protist belonging to the class Phytomyxea (plasmodiophorids) within the eukaryote supergroup Rhizaria and thus distinct from other plant pathogens, such as fungi or oomycetes (Neuhauser et al., 2011; Schwelm et al., 2015). There has been a strong effort to characterize the virulence of P. brassicae, so as to develop novel sources of resistance and other control measures. Due to lack of sequence information, only few genes have been reported to be expressed during pathogenesis. Therefore, in the present study we have annotated and classified an important gene family IMMs (CYPs and FKBPs) in the genome of single spore isolate e3 of P. brassicae, which has been sequenced recently. Eleven CYPs and seven FKBPs were determined in total. Domain architecture analysis revealed the presence of a conserved cyclophilin-like domain (CLD) in the case of CYPs and FKBP_C in the case of FKBPs. Interestingly, IMMs in P. brassicae also sub grouped into single domain (SD) and multidomain (MD) proteins. Sequence alignment and phylogenetic analyses with other known CYPs and FKBPs from some phytopathogenic fungi revealed presence of conserved motifs and evolutionary status. In conclusion, the presence of IMMs and consequently in multiple copies in P. brassicae resting spores demonstrated their crucial role in pathogenesis as well as in germination of spores. Taken together, our studies for the first time shed light on an important gene family in one of the most agronomically important pathogens on B. napus. This work was supported by Ministry of Agriculture of the Czech Republic, Project No. QJ XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

82 sekce Mykologie Differentiating the species complex Leptosphaeria maculans and L. biglobosa causing blackleg in Brassica napus: a cyclophilin perspective Singh Khushwant 1,2, Wenzlová Jana 1, Mazáková Jana 1, Winter Mark 2, Koopmann Birger 2, von Tiedemann Andreas 2, Zouhar Miloslav 1, Ryšánek Pavel 1 1 Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology, Food, and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamycka 129, , Prague 6 Suchdol, CZ, sandhu_singh@af.czu.cz 2 Department of Crop Sciences, Faculty of Agricultural Sciences, Georg-August University Göttingen, Grisebachstr. 6, D , Göttingen, DE Abstract Brassica napus is the third most important source of edible oil and has been challenged by a number of fungal pathogens. One of the most economical important diseases is Blackleg caused by the fungal species complex Leptosphaeria maculans and L. biglobosa. However, several studies have had shown distinguished the species complex based on molecular analyses, toxicity, morphology of pseudothecia and host-pathogen interactions (Shock and Hoppe, 1999; Shoemaker and Brun, 2001). However, it is still unclear which main factors underlie these huge differences of aggressiveness. Similarly, it has been shown that cyclophilins may contribute to the virulence of certain fungal pathogens (Viaud et al., 2002). Through comprehensive whole genome analyses of L. maculans and L. biglobosa, we identified seventeen and fifteen genes respectively encoding cyclophilin in these fungi respectively (Singh et al, 2014). Further to gain more insight, in silico analysis followed by cloning of Cyp4 (sequencing) showed the compelling differences among two species at sequence level as well. In addition, expression levels of the cyclophilin gene (Cyp4) found to be relatively high in L. maculans as compared to L. biglobosa. However, the expression analyses not only demonstrated a significant difference among species but also significant intraspecific variation. Taken together our finding for the first time shed light onto the significant differences among the two species which further support our hypothesis that cyclophilins acts as a key determinant in explaining the difference in virulence in L. maculans and L. biglobosa. This work was supported by Ministry of Agriculture of the Czech Republic, Project No. QJ XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

83 sekce Mykologie Pot marigold, a new host of Puccinia lagenophorae in the Czech Republic Víchová Jana, Šafránková Ivana Department of Crop Science, Breeding and Plant Medicine, Faculty of Agronomy, Mendel University in Brno, Zemědělská 1, Brno, CZ, safran@mendelu.cz Abstract In 2014 were found plants of Calendula officinalis with leaf spot. Based on the macroscopic symptoms on leaves of pot marigold and morphological characteristics of pathogen was identified as Puccinia lagenophorae. This rust has been found in the Czech Republic so far only on the species Senecio sp. Key words: Calendula officinalis, rust, medicinal plants There are 15 species of Calendula genus with C. officinalis being the most popular. Pot marigold (Calendula officinalis L.) is native to Mediterranean countries but now is grown as an ornamental, medical, culinary, decorative and cosmetic annual herb worldwide. The Calendula plant is comprised of carotenoids, flavonoids and essential oils. This gentle and nourishing botanical possesses powerful healing and anti-inflammatory properties. Calendulas are susceptible to powdery mildew (Golovinomyces orontii, Podosphaera fuliginea) in the landscape. Leaf spot (Cercospora calendulae, Alternaria or Colletotrichum spp.), root rot (Phytophthora or Pythium spp.), gray mold (Botrytis cinerea), viruses (Tomato spotted wilt virus, Cucumber mosaic virus), aster yellow (Aster yellow phytoplasma), stem rot (Sclerotinia sclerotiorum), charcoal root rot (Macrophomina phaseolina) and verticillum wilt (Verticillium dahliae) were also noticed. Calendulas are commonly attacked by aphids, whiteflies and slugs. In our conditions, calendula is grown as an ornamental and medicinal plant, on which occurs powdery mildew most often. In July 2014, rust-infected leaves were sampled from 20 plants of C. officinalis in a garden in Lednice in Southern Moravia. Description Light green spots were visible on infected leaves, later with sporadic pustules in the middle, on the abaxial surface (Figure 1). The abaxial surface of the infected leaves was covered with powdery golden yellow to orange yellow pustules ( mm diam.) often arranged in circles, mostly in irregular groups. Sori were round to elongate with white peridium (Figure 2). Aeciospores were subglobose to oval, orange, wall hyaline, finely verrucose, round to obovate, µm in diameter (17 18 µm average made from 100 aeciospores), arranged in chains (Figure 3). Heavily infected leaves wilted and died. Production of teliospores was not noted. Identification of the pathogen was based on morphological characters, host plant symptoms and the host genus Calendula. This rust pathogen was identified as Puccinia lagenophorae Cooke 1884 (Pucciniales, Pucciniaceae). The original source of inoculum for these infections is unknown. P. lagenophorae is an autoecious species forming only repeating aecia (stage I) and telia (stage III). The pathogen is native to Australia and New Zealand, and subsequently reported in most continents on numerous species and genera of the Asteraceae family, approximately 60 host species are known (SCHOLLER 1997). It appeared in Europe in the early 1960s (MAYOR 1962, WILSON & WALSHAW 1963, VIENNOT-BOURGIN 1964, WILSON et al. 1963) and rapidly spread on common groundsel (Senecio vulgaris). Recently, it was reported in Egypt on Senecio glaucus (BAKA 1996) and on common groundsel in California (SCHOLLER & KOIKE 2001) and Canada (BRUCKHART et al. 2007). XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

84 sekce Mykologie In the Czech Republic the rust P. lagenophorae was found to occur naturally on the weed, Senecio vulgaris (URBAN & MARKOVÁ 2009). In Europe the spermogonia were not observed, the aecia are born on systemic mycelium. Aeciospores P. lagenophorae need high humidity to germinate, and dry period will reduce epidemic development (KOLNAAR & VAN DEN BOSCH, 2001). The rust is strongly spread by wind-disseminated aeciospores (WILSON & HENDERSON 1966, SCHOLLER 1997). Teliospores are produced only occasionally, e.g. PETRŽELOVÁ et al. (2015). The significance of the telial stage in the life cycle is not well understood. Teliospores do not readily germinate and do not infect host plants (MÜLLER-SCHÄRER & RIEGER 1998). The rust in Europe overwinters primarily as mycelium in living overwintering host plants (MÜLLER 1995) and produces aeciospores in the spring and from early summer to autumn. KOLNAAR & VAN DEN BOSCH (2001) observed the effect of temperature (in a range from 10 to 22 C) on latent period and aeciospore production of P. lagenophorae on Senecio vulgaris. Both total aeciospore production and net reproductive number increased lineary with increasing temperature. According to our knowledge, the occurences of Puccinia lagenophorae on Calendula officinalis was observed in the Czech Republic on the two localities in Olomouc (PETRŽELOVÁ et al. 2015) and in Lednice in References BAKA Z.A.M. (1996): Occurence and morphology of Puccinia lagenophorae on Senecio glaucus in Egypt. Microbiol. Research 151: BRUCKART W. L., DETRICK FT., MCCLAY A. S., HAMBLETON S., TROPIANO R. (2007): First Report of Puccinia lagenophorae on Common Groundsel (Senecio vulgaris) in Canada. Plant Diseases Notes, 91(8): KOLNAAR R.W., VAN DEN BOSH F. (2001): Effect of temperature on epidemiological parameters of Puccinia lagenophorae. Plant Pathology, 50: MAYOR E. (1962): A propos d un Peronospora sur Maygrum perfoliatum L. et d un Puccinia sur senecio vulgaris L. berichte Schwerzerische Botanische Gesellschaft. 72: MÜLLER J. (1995): Australischer Rostpilz Puccinia lagenophorae auch in der Tschechischen und Slowakischen Republik und in Ungarn. Czech Mycol. 48: MÜLLER-SCHÄRER H., RIEGER S. (1998): Epidemic spread of the fungus Puccinia lagenophorae and its impact on the competitive ability of Senecio vulgaris in celeriac during early development. Biocontrol Science and Technology, 8: PETRŽELOVÁ I., JEMELKOVA M., KITNER M., DOLEZALOVA I. (2015): First report of rust disease caused by Puccinia lagenophorae on pot marigold (Calendula officinalis) in the Czech Republic. Plant Disease 99: 418. SCHOLLER M. (1997): Rust fubgi on Bellis perennis in Central Europe: delimitation and distribution. Sydowia, 49: SCHOLLER M., KOIKE S. T. (2001): First occurence of Puccinia lagenophorae causing rust disease in common groundsel in North America. Plant Disease, 85: 335. URBAN Z., MARKOVÁ J. (2009): Cataloque of rust fungi of the Czech and Slovak republics. Karolinum Praha, 365 p. VIENNOT-BOURGIN G. (1964): La rouille australienne se Sénecon. Revue de Mycolodie, 29: WILSON L.M., HENDERSON D.M. (1966): British Rust Fungi. Cambridge. Cambridge University Press, UK, 384 p. WILSON L.M., WALSHAW D.F. (1963): A new rust disease on groundsel. Nature, 200: 383. WILSON L.M., WALSHAW D.F., WALKER, J. (1965): The new groundsel rust in Britain and relationship to certain Australasian rusts. Translations british Mycological Society 46: XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

85 sekce Živočišní škůdci Sekce Živočišní škůdci XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

86 sekce Živočišní škůdci The influence of insecticides on the seasonal fluctuations of soil nematode communities in a maize field Vplyv insekticídov na sezónny výskyt populácií pôdnych nemátod v kukuričnom poli Čerevková Andrea 1, Renčo Marek 1, Cagáň Ľudovít 2 1 Institute of Parasitology SAS, Hlinkova 3, Košice, SK 2 Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology and Food Resources, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. Andreja Hlinku 2, Nitra, SK, ludovit.cagan@gmail.com Abstract Soil nematode communities were studied after application of insecticides in the maize field in Slovakia. The aim of this study was to examine the influence of insecticides on nematode communities in a maize fieldalmost soil nematode individuals were captured and 9 orders, 33 genera and 37 species were identified. The dominant species, accounting for 48 % of the total number of individuals were: Acrobeloides nanus, Cephalobus persegnis, Eucephalobus striatus and Basiria gracilis. Mean abundance and species diversity index were significantly lower for the variant 2 with granular application of clothianidin and the control. Bacterial feeders were the dominant trophic group for all 4 variants. Numbers of nematodes in particular trophic groups (i.e., bacterial feeders, fungal feeders and omnivores) were significantly different between variant 2 with granular application of clothianidin and the control. The Σ Maturity index, Maturity index and Plant parasitic index did not show significant differences among the variants (Table 2). The highest values of the Enrichment and Structure indices were observed in the first month of the investigation in all four variants. According to cluster analysis, nematode species population densities were strongly affected by the date of soil sample collection and by the variants used in the experiment. XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

87 sekce Živočišní škůdci Sledovanie výskytu vybraných škodlivých organizmov na lesných a ovocných drevinách - výskyt nových inváznych škodcov na Slovensku Monitoring of selected forest and fruit trees pests - appearance of new invading alien pests in Slovakia Darnadyová Kristína 1, Bartoš Rastislav 2, Slosiarová Viera 3 1 Department of General and Quarantine Diagnostics, The Central Controlling and Testing Institute in Agriculture in Bratislava (CCTIA), Letná 3, Košice, SK, kristina.darnadyova@uksup.sk 2 Department of General and Quarantine Diagnostics, The Central Controlling and Testing Institute in Agriculture in Bratislava, Hanulova 9/A, Bratislava, SK 3 Department of General and Quarantine Diagnostics, The Central Controlling and Testing Institute in Agriculture in Bratislava, J. Kráľa 2223, Zvolen, SK Škodlivé organizmy (ŠO) -regulované, tzv. karanténne ŠO ako aj škodlivé organizmy, ktoré stratili štatút regulované včítane nových potenciálne nebezpečných organizmov, vstupujúcich do regiónu EÚ predstavujú vážne nebezpečenstvo pre rôzne rastlinné druhy alebo rastlinné produkty. Z toho dôvodu riadiace orgány ES priebežne vydávajú smernice a rozhodnutia súvisiace s ochranou pred takýmito ŠO. Základnou smernicou je smernica Rady 2000/29/ ES o ochranných opatreniach proti zavlečeniu ŠO pre rastliny alebo rastlinné produkty do Spoločenstva a proti ich rozšíreniu v rámci Spoločenstva. V rámci plnenia ustanovení Rastlinolekárskeho zákona, Nariadenia vlády o ochranných opatreniach proti zavlečeniu a rozširovaniu ŠO pre rastliny alebo rastlinné produkty a odporúčaní Stáleho výboru pre zdravie rastlín a Európskej a stredozemskej organizácie o ochrane rastlín (EPPO) vykonáva ÚKSÚP detekčné prieskumy ŠO, ktoré sa na území SR nevyskytujú alebo sa vyskytujú len v malej miere na niektorých lokalitách. Detekčné prieskumy ŠO na lesných, okrasných a ovocných drevinách sa sledujú v ovocných a lesných škôlkach, sadoch a záhradníctvach ale aj vo verejnej zeleni. Niektoré ŠO sa v rámci monitorovania ich možného výskytu na území Slovenska sledujú už dlhšie obdobie (napr.: európska žltačka kôstkovín European stone fruit yellows phytoplasma, nebezpečná spála jadrovín Erwinia amylovora (Burrill) Winslow et al., na lesných a okrasných drevinách Phytophthora ramorum Werres, De Cock & Man in t Veld., sypavky Lecanosticta acicola (Thüm.) Syd., Dothistroma septosporum (Dorog.) M. Morelet, živicová rakovina borovice Gibberella circinata Nirenberg & O Donnell, háďatko borovicové Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Buhrer) Nickle a s ním súvisiace vektory, chrobáky z rodu Monochamus neeurópskeho pôvodu, a i.). Každoročný prienik nových potenciálnych ŠO spôsobuje proces začatia sledovania, monitorovania týchto nových ŠO napr.: fytoplazmové ochorenie zlaté žltnutie viniča - Grapevine flavescence doreé phytoplasma, bakteriálne ochorenie Xylella fastidiosa, z hubových patogénov Diplocarpon mali Y. Harada & Sawamura, hrdza Melampsora medusae (Thümen, zo živočíšnych škodcov:drozofila japonská Drosophila suzukii (Matsumura), hrčiarka gaštanová Dryocosmus kuriphilus (Yasumatsu), drvinárik Xylosandrus crassiusculus (Motschulsky). Niektoré škodlivé organizmy okrasných a lesných drevín sa monitorujú v spolupráci s Národným lesníckym centrom vo Zvolene. Z monitorovaných nových ŠO bol potvrdený na Slovensku pozitívny výskyt týchto živočíšnych škodcov: hrčiarky gaštanovej Dryocosmus kuriphilus v roku 2012 a drozofily japonskej Drosophila suzukii v roku Význam sledovania a zisťovania výskytu ŠO ako aj ich určovanie je dôležité pre stanovenie opatrení, zameraných na zabránenie ďalšieho XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

88 sekce Živočišní škůdci šírenia a eradikáciu ŠO. Popri sledovaniu regulovaných ŠO sa v diagnostických laboratóriách často stretávame aj s menej známymi neregulovanými škodlivými organizmami, ktorých pôsobenie na rastliny a rastlinné produkty v určitých obdobiach môže mať negatívny vplyv na zhoršenie zdravotného stavu drevín alebo kvalitu rastlinného produktu (dreva). Príkladom je: štítnička - Pseudaulaspis pentagona (Targioni), vijačka krušpánová Cydalima perspectalis (Walker), voška smreková Liosomaphis abietina (Walker), vošky medovnice Lachnidae, spála krušpánová Volutella buxi(crda), pyknidovka beľová Sphaeropsis sapinae (Fr.) Dyko et Sutton, fuzáriové odumieranie Fusarium spp.,fúzače Cerambycidae, a i. Kľúčové slová: Dryocosmus kuriphilus, Drosophila suzukii, škodlivý organizmus Abstract Harmuful organisms -regulated as well as non-originating non-regulated harmful organisms posing a significant risk for a different of plants or plant products. In accordance with the legal Code on Plant Health Care, Regulation of Government on protective measures against introduction and spread of harmful organisms to plants and plant products and recommendations of Standing Committee on Plant Health and also EPPO, CCTIA performs national surveys on harmful organisms, which do not occur on territory of SK or are present only in limited number in certain areas. The national surveys of harmful organisms of forest and fruit trees are performed in fruit, ornamental and forest nurseries and gardening and also in public green (parks, town green, botanical gardens, cementeries, other green) but it also. Certain quarantine pathogens are monitored for several seasons (for example: European stone fruit yellows phytoplasma, Erwinia amylovora, Phytophthora ramorum, Lecanosticta acicola Dothistroma septosporum,, Gibberella circinata, Bursaphelenchus xylophilus and its vectorswood-inhabiting longhorn beetles of the genus Monochamus, et al.),however each year, the number of pathogens involved in the survey increases (for example: Grapevine flavescence doreé phytoplasma, Xylella fastidiosa, Diplocarpon mali, Melampsora medusae, Drosophila suzukii, Dryocosmus kuriphilus, Xylosandrus crassiusculus. Selected quarantine pest are monitored in collaboration with The National Forest Centre in Zvolen. We confirmed two new harmful organisms listed above in Slovakia: Dryocosmus kuripilus in 2012 and Drosophila suzukii in However, the perfomance of surveys of harmful organisms is important due to the fact, that the accurate diagnostics is important for the issuing of protective measures in case of outbreak. The samples were infected also by other nonregulated harmful organisms like Pseudaulaspis pentagona, Cydalima perspectalis, Liosomaphis abietina, aphis-lachnidae, Volutella buxi, Sphaeropsis sapinae, Fusarium spp., etc. Key words: Drosophila suzukii, Dryocosmus kuripilus, harmful organisms XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

89 sekce Živočišní škůdci Nematocidní vlastnosti rostlin r. Thymus výsledky modelové studie s háďátkem Ditylenchus dipsaci Nematocidal properties of Thymus sp. plants results of the model study on Ditylenchus dipsaci Douda Ondřej 1, Zouhar Miloslav 2 1 Odbor ochrany plodin a zdraví rostlin, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, douda@vurv.cz 2 Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ Omezení možností používání pesticidů v posledních letech vyústilo v nedostatek chemikálií využitelných pro ochranu rostlin proti fytoparazitickým háďátkům. V případě háďátka zhoubného (Ditylenchus dipsaci) má klíčový význam zejména preventivní ošetření sadby. Momentálně je k dispozici pouze postup využívající ošetření teplou vodou, který ovšem sebou nese riziko poškození sadby a i jeho celková účinnost je problematická. Z výše uvedených důvodů byla provedena základní studie s cílem vyhodnotit v in vitro podmínkách účinky esenciálních olejů z rostlin druhů Thymus serpyllum, Thymus vulgaris a čistého thymolu na mortalitu háďátka Ditylenchus dipsaci. Nematocidní aktivita byla detekována u všech testovaných látek, nejvyšší aktivitu vykazoval esenciální olej z mateřídoušky (Thymus vulgaris). Další výzkum se zaměří zejména na možnosti formulace tohoto oleje pro praktické využití a detailní studium jeho případných fytotoxických vlastností. Výzkum byl financován prostředky Národní agentury pro zemědělský výzkum, číslo projektu QJ Klíčová slova: Ditylenchus dipsaci, ošetření sadby, Thymus sp., thymol XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

90 sekce Živočišní škůdci Population dynamic of Pseudoophonus rufipes in maize fields Populačná dynamika Pseudoophonus rufipes v porastoch kukurici siatej Hlavinová Adriana, Bokor Peter, Cagáň Ľudovít Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology and Food Resources, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. Andreja Hlinku 2, Nitra, SK, adriana.hlavinova@gmail.com Abstract Population dynamics of Pseudoophonus rufipes (Coleoptera, Carabidae) was studied at the locality Borovce, Slovakia (N 48º ', E 17º ') during and Insects were collected by pitfall traps. Together adults of the species were collected during 2008 and 2009 and adults were collected during 2012 and During 2008 the highest number of adults was found in late July and in early August. Similar pattern was found also in During 2012, maximum population of P. rufipes was found in late of August and in 2013 it was in the beginning of September. Population dynamics decreased at the end of maize growing season. Key word: Carabidae, Pseudoophonus rufipes, population dynamic, maize XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

91 sekce Živočišní škůdci Vliv prostorového rozmístění škůdců ve vztahu k růstu a vývoji řepky ozimé Spatial distribution of harmful organism in relation to growth and develop of winter oil seed rape Hlavjenka Vojtěch 1, Seidenglanz Marek 1, Dufek Aleš 2 1 Agritec Plant Research, s. r. o., Šumperk, Zemědělská 16, Šumperk, CZ, hlavjenka@agritec.cz, seidenglanz@agtitec.cz 2 Agrovýzkum Rapotín, s.r.o., Výzkumníků 267, Vikýřovice, CZ, ales.dufek@vuchs.cz Sledovat výskyt škodlivých organismů v porostech polních plodin je často velice obtížné. Je to dáno především jejich vysokou početností a malou velikostí (např. hmyz, spory hub, bakterie). Heterogenita v distribuci jedinců určitého druhu je podmíněna interakcemi mezi nimi navzájem (intra-druhovými faktory) a též interakcemi mezidruhovými. Každá populace se vyznačuje svou velikostí, rozmístěním jedinců v prostoru, sexuální strukturou, rychlosti rozmnožování, kolísání početnosti a jejím jedinečným genofondem. Znalost typů rozmístění a především jejich změn, může být velmi užitečná pro stanovení jednotlivých procesů, které v populaci i v celém ekosystému probíhají. Je nezbytně nutné si uvědomit, že populace hmyzu v agroekosystému jsou výrazně ovlivněny člověkem, a to jak populace škůdců, tj. z hlediska ochrany rostlin cílových druhů, tak i populace druhů užitečných a indiferentních. K hodnocení distribuce vybraných organismů byly jako modelové druhy vybrány tyto druhy: larvy květilky zelné (Delia platura), půdní mikroorganismus (Plasmodiophora brassicae), imaga krytonosce čtyřzubého (Ceutorhynchus pallidactylus) a blýskáčka řepkového (Meligethes aeneus). Sběr dat (odpočty jedinců v pastech, projevy poškození na rostlinách) probíhal vždy podle stejných zásad. Porost, často různé velikosti a tvaru, byl rozdělen pomyslnou pravoúhlou mřížkou typu 6 6 (36 míst) v roce 2012 a 2013 a 5 5 (25 míst) v roce Pro hodnocení míry poškození kořenového sytému larvami květilek a půdním patogenem Plasmodiophora brassicae se z každého odběrového místa odebíralo 10 rostlin, u nichž se hodnotily tyto znaky: šířka kořenového krčku (mm), délka hlavního kořene (cm), míra poškození larvami květilek (0 100 %) a přítomnost či nepřítomnost nádoru. Vypočítané průměrné hodnoty procentního poškození kořene larvami květilek a počet rostlin se zaznamenaným nádorem za každé odběrové místo (max. 10 rostlin), byly následně zpracovány programem SADIE (viz níže). Na základě počtu zachycených imag krytonosce čtyřzubého a blýskáčka řepkového ve žlutých Mörickeho miskách byly vypočítány indexy agregace I a a J a pomocí SADIE analýzy Spatial Analysis by Distance IndicEs, na základě kterých lze určit charakter jejich distribuce v porostu. Pokud je jejich rozložení nerovnoměrné, mohou vytvářet tzv. shluky místa s nenáhodně větším výskytem (patch clusters) a naopak místa s výskytem významně nižším (gap clusters). V tomto případě nabývá index I a hodnot vyšších jak 1 (pro p <0,05). Je-li hodnota druhého indexu J a (pro p<0,05) blízká nebo rovná 1 naznačuje, jestli jsou jedinci daného druhu v porostu agregováni do jednoho či více clusterů. To lze v určitých případech (ne vždy) interpretovat jako např. přítomnost dvou nebo více ohnisek (zdrojů) napadení resp. zdrojů šíření škodlivých organismů. Hodnoty I m (pro p<0,05) indukují vzájemnou prostorovou asociaci dvou sledovaných druhů. Pro výpočet SADIE byl využit software SADIEShell version 2,00, pro grafické vyjádření rozložení výskytů v porostech software Statistica version 12. Distribuce larev květilky zelné (přesněji řečeno distribuce poškozených rostlin) není v porostu rovnoměrná ani náhodná. Na pozemku se vyskytovala místa s nenáhodně vyšším výskytem, lišící se svou velikostí, počtem a prostorovou orientací. Těchto míst, bylo ve většině případů XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

92 sekce Živočišní škůdci méně, než oblastí se signifikantně nižším výskytem, zpočátku byly lokalizované při okrajích porostů, později (časové hledisko) zasahovaly i do jeho vnitřních částí. V roce 2012 projevily květilky výraznou tendenci vytvářet shluky (tedy se agregovat). V roce 2013 a 2014 byla distribuce symptomatických rostlin spíše rovnoměrná. Mezi poškozenou kořenovou plochou larvami květilek a šířkou kořenového krčku existoval lineární regresní vztah, při kterém se stoupající šířkou kořenového krčku rostla i míra poškození. Opačný trend byl zaznamenán v souvislosti s délkou hlavního kořene. Prostorová distribuce nádorovitých rostlin rovněž není v porostu rovnoměrná ani náhodná. Obdobně jako v případě hodnocení květilek se vyskytovala místa se signifikantně vyšším a nižším výskytem (patch a gap clusters). Nenapadené (nebo minimálně napadené) zóny na hodnocených pozemcích jednoznačně převládaly a zaujímaly zejména centrální části polí. Rozdíl mezi šířkou kořenového krčku rostlin bez vizuálního poškození patogenem Plasmodiophora brassicae, a tloušťkou krčku nádorovitých rostlin nebyl průkazný. Průměrná délka hlavního kořene nádorovitých rostlin byla signifikantně nižší než u rostlin bez vizuálních příznaků poškození. Míra poškození larvami květilek u rostlin bez nádoru, byla signifikantně vyšší než u rostlin se zaznamenaným nádorem. Na základě vypočítaných indexů I m nebyla zjištěna vzájemná agregační vazba (tedy prostorová asociace) mezi disperzí larev květilek a nádorovitostí. Největší tendenci vytvářet shluky měl blýskáček řepkový v roce V roce 2013 byly signifikantní hodnoty agregačních indexů zaznamenány pouze ve dvou termínech sledování. Vyšší počet zachycených jedinců i vyšší počet statisticky významných agregačních indexů krytonosce čtyřzubého (zejména samic) byl zjištěn v roce V roce 2014 byly počty zachycených jedinců obecně nízké, přesto v jednom termínu hodnocení projevily samice schopnost vytvářet shluky. Oba sledované organismy (blýskáček krytonosec) vytvářely patch a gap clustery orientované spíše na okrajích pozemku. Uvedené výsledky byly získány s využitím institucionální podpory č. RO1215 Ministerstva zemědělství ČR a projektů NAZV č. QH81218 a QJ Klíčová slova: prostorová distribuce, mezidruhová asociace, agregace jedinců, nádorovitost XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

93 sekce Živočišní škůdci Výsledky letecké aplikace parazitoidů rodu Trichogramma West. v ochraně kukuřice před zavíječem kukuřicným Ostrinia nubilalis (Hbn.) Efficacy of aerial application of Tricholet against European corn borer and the influence his repeated use on the population density of ECB Hluchý Milan BIOCONT LABORATORY, spol. s r. o., Mayerova 784, Brno-Modřice, CZ, m.hluchy@biocont.cz V roce 2012 byla v ČR poprvé po několika letech vývoje do praxe zavedena metoda letecky aplikovaného přípravku Tricholet na bázi speciálně pro letecké aplikace formulovaného bioagens Trichogramma evanescens. Hodnocením celkem 146 ošetřených porostů v průběhu tří let byly prokázány poměrně vysoké účinnosti této metody pohybující se v prvním roce aplikace na úrovni 74 % (69,5 76,6 %), v případě opakované aplikace ve druhém či třetím roce na úrovních standardně překračujících 90 % účinnost. Významnou předností letecké aplikace bioagens extrémně citlivých na aplikaci ve vhodném termínu je ve srovnání s dosavadními metodami ruční či traktorové aplikace možnost aplikovat v optimálním termínu bioagens na tisíce hektarů za den. Opakovaným monitoringem ploch ošetřených dva či tři roky po sobě byl prokázán zatím nepublikovaný efekt výrazného potlačení populace zavíječe kukuřičného, který je dán kombinací tlaku aplikovaného bioagens a tlaku přirozeně se namnoživších antagonistů cílového škůdce a mšic, jako jsou například dravé ploštice rodu Orius, slunéčka, Chrysopidae a další v porostech kukuřice. Klíčová slova: Trichogramma evanescens, Ostrinia nubilalis, zavíječ kukuřičný, biologická ochrana, antagonisté zavíječe kukuřičného, letecké aplikace Abstract In 2012 was in Czech republic introduced to the practice new method of aerial application of Tricholet based on Trichogramma evanescens egg parazitoid in special formulation for aerial application. Based on the bonitation of 146 treated plots within 3 years was monitored relatively high and standard efficacy 74 % (69,5 76,6 %). In case of repeated application in 2 or 3 years was observed efficacy higher than 90 %. Important advantage of the aerial application in comparison with hand or tractor application is the possibility to apply bioagens on thousands of hectares in proper time. By monitoring of plot treated repeatedly during 2 or 3 years was observed until now not published effect of deep suppression of population of the target pest European corn borer in corn fields. This effect is based on the combinated effect of applied bioagens and naturally in biological treated fields increasing population of antagonists such as predatory bugs of genus Orius, coccinellids, Chrysopids etc. Key words: Trichogramma evanescens, Ostrinia nubilalis, biological protection, O. nubilalis antagonists, aerial application XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

94 sekce Živočišní škůdci Monitorování výskytu dospělců kovaříků z rodu Agriotes pomocí feromonových lapáků Monitoring of Click Beetles from the genus Agriotes by pheromone traps Holý Kamil, Kocourek František Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i, Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, holy@vurv.cz Monitorování výskytu dospělců pěti druhů kovaříků (kovařík začoudlý (Agriotes ustulatus), kovařík locikový (A. sputator), kovařík malý (A. brevis), kovařík tmavý (A. obscurus) a kovařík obilní (A. lineatus)) probíhalo v letech na sedmi lokalitách: Hradec Králové (2 lokality), Semice (okr. Nymburk), Bošice (okr. Kolín), Litoměřice, Praha-Suchdol a Habry (okr. Havl. Brod). Byly použity feromonové lapáky a feromony firmy Csalomon. Pro odchyt kovaříka začoudlého byla použita směs druhově specifického feromonu a potravního atraktantu, na ostatní druhy byl použit pouze druhově specifický feromon. Na kovaříka tmavého a obilního byl použit směsný feromon pro oba druhy a na některých lokalitách porovnán s odchytem do specifických feromonů pro jednotlivé druhy. Nejpočetnějším druhem na většině lokalit byl kovařík locikový, který se chytal i do lapáků na jiné druhy. V roce 2012 byl na některých lokalitách nejpočetnější kovařík začoudlý. V roce 2013 byl u tohoto druhu testován místo feromonu potravní atraktant imitující vůni květu, ale přesto, že byli dospělci kovaříků pozorování 2 m od lapáku na květech miříkovitých rostlin, do lapáku se nechytali. Kovařík tmavý a obilní se vyskytovali ve větší míře dohromady pouze na lokalitě Habry (chladnější a vlhčí lokalita). Samotný kovařík tmavý byl početný na jedné z lokalit u Hradce Králové (na druhé vzdálené necelé 3 km se téměř nevyskytoval) a kovařík obilní se ve vysokém počtu objevil v roce 2014 v Litoměřicích, což mohlo souviset s povodněmi v předchozím roce. Výskyt kovaříka malého byl na všech lokalitách nízký. Účinnost testovaných feromonů byla s vyjímkou kovaříka začoudlého dostatečná pro monitoring letové aktivity sledovaných druhů a feromonové lapáky lze doporučit pro praktické využití v polních plodinách. Práce byla podpořena grantem NAZV QJ Klíčová slova: kovaříci, Agriotes, feromonové lapáky, monitoring XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

95 sekce Živočišní škůdci Citlivost vybraných hmyzích škůdců k insekticidům The susceptibility of insect pests to insecticides Hrudová Eva 1, Tóth Pavel 1, Seidenglanz Marek 2, Kolařík Pavel 3, Rotrekl Jiří 3, Havel Jiří 4, Poslušná Jana 2, Plachká Eva 4 1 Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, drumi@atlas.cz 2 Agritec Plant Research, s. r. o., Zemědělská 2520/16, Šumperk, CZ 3 Zemědělský výzkum, spol. s r. o. Troubsko, Zahradní 1, Troubsko, CZ 4 OSEVA vývoj a výzkum, s. r. o., provozovna Opava, Purkyňova 10, Opava, CZ Od roku 2009 je prováděn výzkum citlivosti jedinců blýskáčků (Brassicogethes spp. syn. Meligethes spp.) k účinným látkám insekticidů používaných v praxi. V roce 2012 byl tento výzkum rozšířen o testování citlivosti krytonosce šešulového (Ceutorhynchus obstrictus), případně dalších významněji škodících druhů v olejninách. V experimentech byly použity účinné látky ze skupiny pyretroidů (Lambda-cyhalotrin, etofenprox, cypermetrin a Tau-fluvalinát), neonikotinoidů (tiakloprid) a organofosfátů (chlorpyrifos). Jedinci výše zmíněných druhů byli odebíráni z porostů řepky olejky, hořčice seté a máku setého v oblastech severní, střední a jižní Moravy a Českomoravské vrchoviny. Postup testování vycházel z metodických pokynů organizace IRAC (Insecticide Resistance Action Committee) č. 011, 021 a 025. V průběhu několika let testování citlivosti blýskáčka řepkového k insekticidům došlo k selekci rezistentních sub-populací a výraznému poklesu účinnosti registrovaných polních dávek zkoušených účinných látek ze skupiny pyretroidů a také neonikotinoidů. Účinná látka ze skupiny organofosfátů dosahovala při použití polní dávky na jedince blýskáčků účinnost 100 %. Citlivost krytonosce šešulového k použitým účinným látkám byla ve všech případech vysoká a účinnosti registrovaných polních dávek jednotlivých přípravků dosahovaly 100 %. Citlivost dřepčíků byla při použití účinných látek ze skupiny pyretroidů a organofosfátů vysoká a účinnost dosahovala ve všech případech 100 %. Citlivost dřepčíků k účinným látkám ze skupiny neonikotinoidů se vyznačovala značným kolísáním v počtu jedinců schopných aktivně v porostu škodit, resp. výrazně nižší účinností použitého přípravku. Příspěvek vznikl za podpory projektu NAZV QJ Klíčová slova: insekticidy, rezistence, IRAC, blýskáčci, krytonosci, dřepčíc XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

96 sekce Živočišní škůdci Suppression of root knot nematode Meloidogyne incognita by entomopathogenic fungus Lecanicillium muscarium Hussain Manzoor, Zouhar Miloslav, Ryšánek Pavel Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamýcká 129, Prague 6 Suchdol, CZ, hussain@af.czu.cz Abstract The entomopathogenic fungus, Lecanicillium muscarium (Petch) (Zare and Gams 2001) is currently being developed as biocontrol agent against insect pests as well as some plant pathogenic fungi and bacteria. Data about its activity against nematodes exist, but are rather limited. That is why we investigated biocontrol efficiency of three isolates of L. muscarium (Lm1, Lm2, Lm3) against root knot nematodes, Meloidogyne incognita in vitro under laboratory conditions and as well as in vivo in green house. The isolate Lm1 was designated as the best biocontrol agent against nematodes eggs as well as juveniles (J2). It showed the highest colonization inside eggs and significantly decreased the level of egg hatching. The results from two other isolates Lm2 and Lm3 were also significant but less pronounced as compared to isolate Lm1. During our laboratory experiments, maximum number of eggs, J2, females and eggmasses were parasitized after exposure of 72 hour. Regarding plant growth factors, L. muscarium had significant positive effect on shoot root lengths and weights as compared to controls. Results suggested that either direct penetration of fungus into eggs and juveniles happened or it produced secondary metabolites or induced plant defense mechanism leading to systemic resistance. Our study proved that L. muscarium could be used as a potential biocontrol agent against root knot nematodes. Key words: Lecanicillium muscarium, biocontrol, Meloidogyne incognita, tomato, parasitism XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

97 sekce Živočišní škůdci Druhové spektrum mšic na jabloních na jižní Moravě Diversity of aphid species on apple trees in South Moravia Jégrová Kateřina Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, jegrovakaterina@ .cz V průběhu roku 2015 bylo na několika lokalitách na jižní Moravě sledováno druhové spektrum mšic na jabloních. Byla sledována také početnost populací mšic v závislosti na vnějších vlivech. Zjištěna byla mšice jabloňová (Aphis pomi), mšice jitrocelová (Dysaphis plantaginea), mšice broskvoňová (Myzus persicae) a v jednom případě zdobnatka lipová (Eucallipterus tiliae). Na tento průzkum navazuje ověření účinnosti běžně používaných insekticidů aplikovaných na mšici jabloňovou v laboratorních podmínkách. Klíčová slova: mšice jabloňová, regulace škůdců, insekticidy, jabloně XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

98 sekce Živočišní škůdci Druhová diverzita roztočů čeledi Phytoseiidae na listech Quercus cerris L. Species diversity of phytoseiid mites on leaves of Quercus cerris L. Kabíček Jan Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources, Czech University of Life Sciences Prague, Kamýcká 129, Praha 6, CZ, Ke snižování škod na rostlinách způsobených přítomností herbivorních druhů přispívají nemalou měrou jejich přirození nepřátelé. Mnozí zástupci roztočů čeledi Phytoseiidae obývající převážně listy rostlin jsou důležitými predátory drobných členovců. Dřeviny, které jsou součástí veřejné zeleně v intravilánech měst a obcí, nelze při napadení škodlivými druhy fytofágů běžně ošetřovat toxickými přípravky chemické ochrany a tak je přítomnost přirozených nepřátel škůdců žádoucí. Dub cer (Quercus cerris L.), nepůvodní druh dřeviny v Čechách, je zde na vhodných lokalitách příležitostně vysazován. Cílem studie bylo zjistit spektrum druhů roztočů čeledi Phytoseiidae a jejich zastoupení na listech dubů Q. cerris rostoucích v městském prostředí. V průběhu dvou let bylo odebráno z dvaceti stromů Q. cerris celkem jeden tisíc listů, na kterých bylo nalezeno 932 jedinců pěti druhů roztočů čeledi Phytoseiidae. Zastoupení eudominantních druhů Kampimodromus aberrans a Typhlodromus peculiaris bylo 51,9% a 36,1% z celkového počtu nalezených roztočů. Dominatní druh Typhlodromus pyri tvořil 5,4% z celkového počtu nalezených roztočů a zastoupení dvou zbývajících subdominantních druhů Euseius finlandicus a Typhlodromus triporus činilo 3,9% a 2,7%. Z hlediska stálosti druhového složení lze roztoče T. pyri, E. finlandicus a T. triporus hodnotit jako akcidentální a eudominantní roztoče K. aberrans a T. peculiaris jako akcesorické druhy na sledovaných stromech. Roztoči čeledi Phytoseiidae jsou schopni obývat duby cery i v méně příznivých podmínkách městského prostředí. Klíčová slova: Quercus cerris, Phytoseiidae, roztoči Abstract Natural enemies as environmentally friendly agents are effective means for pest control. Many phytoseiid mites are known as important predators of various small arthropods living on plants. It is usually impossible to control the phytophagous pest species on trees growing in urban area by toxic chemicals and so the presence of natural enemies on such trees is requested. Turkish oak (Quercus cerris L.) is not native to Bohemia but this tree species is occasionally planted at suitable sites. The aim of the present study was to investigate the occurrence and species diversity of phytoseiid mites on leaves of oaks Q. cerris growing in urban area. In total, 932 specimens of phytoseiids belonging to five species were detected on one thousand inspected leaves sampled from twenty trees within two years. While both Kampimodromus aberrans and Typhlodromus peculiaris were eudominant and accessory species, dominant Typhlodromus pyri and both subdominant Euseius finlandicus and Typhlodromus triporus were accidental species on examined trees. The phytoseiid mites are able to inhabit the Turkish oaks growing in environmentally unfriendly urban area. Key words: Quercus cerris, Phytoseiidae, mites XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

99 sekce Živočišní škůdci Účinnost insekticidů na vybrané škůdce zeleniny Efficacy of insecticides against chosen pests of vegetables Kovaříková Kateřina Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, kovarikova@vurv.cz Cílem práce bylo zhodnotit účinnosti několika insekticidů a jejich účinných látek a zjistit případnou rezistenci zápředníčka polního (Plutella xylostella) a dřepčíků rodu Phyllotreta. Testované přípravky se lišily různým mechanismem účinku (pyrethroidy, neonikotinoidy, organofosfáty ). Při testování byly použity koncentrace podle doporučeného dávkování výrobce pro aplikace proti škůdcům zeleniny. U zápředníčků byly testovány 2 populace housenek. Dlouholetý laboratorní chov a chov založený nově z housenek sebraných na poli. Pro testování byl použit požerový test dle metodiky IRAC (007, 018). Dřepčíci pro testování byli odchytáváni na polích bez chemického ošetření, zejména na hořčici. Pro hodnocení účinnosti byl použit tarsální test (lavičkový test) dle metodiky IRAC (011, 021, 027). Nejnižší účinnost na zápředníčka polního byla pro obě populace zjištěna u syntetických pyrethroidů. Významná část populace vykazovala rezistenci k účinným látkám deltamethrinu a lambdacyhalothrinu. Naproti tomu testované účinné látky včetně pyrethroidů vykazovaly dobrou účinnost v případě dřepčíků rodu Phyllotreta. Práce byla podpořena grantem QJ Key words: efficacy, Plutella xylostella, Phyllotreta sp., pyrethroids, rezistance XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

100 sekce Živočišní škůdci Minující motýli (Lepidoptera) na ovocných růžovitých dřevinách Mining moths (Lepidoptera) on fruit rosaceous trees Laštůvka Zdeněk 1, Šefrová Hana 2 1 Ústav zoologie, rybářství, hydrobiologie a včelařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, last@mendelu.cz 2 Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, hana.sefrova@mendelu.cz Z území České republiky je známo asi 3440 druhů motýlů (Lepidoptera), z toho připadá asi 700 (20 %) na minující druhy. Mezi minujícími motýly převládají monofágové s vazbou k druhům jediného rostlinného rodu (51 %), následují oligofágové (39 %) a nejméně je polyfágů (7 %). U 3 % druhů není hostitelské spektrum dostatečně známé. Nejvíce druhů minuje na dvouděložných (82 %), následují jednoděložné (12 %), nahosemenné (4 %), polyfágové na jedno- i dvouděložných (1,4 %) a jediný druh minuje kapradiny. Nejčastěji napadané čeledi rostlin jsou Rosaceae (90 druhů), Compositae (65), Poaceae (53), Fagaceae (52) a Leguminosae (51). Z 90 druhů minujících Rosaceae se 68 vyvíjí na dřevinách (podčeleď Amygdaloideae). Na ovocných dřevinách včetně několika polyfágů je to 52 druhů, k nim navíc 5 druhů čeledi Yponomeutidae, jejichž housenky minují jen na začátku svého vývoje. Druhy minující dlouhou nebo celou dobu larválního vývoje patří do 6 čeledí, podle počtu druhů Gracillariidae (18), Nepticulidae (16), Coleophoridae (12), Lyonetiidae (3), Gelechiidae (2) a Tischeriidae (1). Pokud jde o šíři potravního spektra, převládají mezi nimi oligofágové s vazbou na skupinu blízkých rodů v rámci subtribu Malinae (19 druhů) nebo na široce pojatý rod Prunus (4 druhy), často ovšem s různě výraznou preferencí určitých rodů nebo druhů. Méně druhů se vyvíjí na širokém spektru druhů mnoha rodů růžovitých dřevin podčeledi Amygdaloideae (10 druhů) a ještě méně druhů svými nároky přesahuje čeleď Rosaceae (7 druhů). Stejně tak je poměrně málo úzkých specialistů s vazbou na druhy jediného rodu, nejvíce na jabloně Stigmella malella, S. incognitella, Bohemannia pulverosella, Callisto denticulella a Phyllonorycter gerasimowi, dále hrušně Stigmella pyri, S. minusculella, S. stettinensis, slivoně (Prunus s. str.) Coptotriche gaunacella, Parornix torquilella, Phyllonorycter spinicolella a další podrody rodu Prunus (Cerasus, Amygdalus) Phyllonorycter cerasicolella. Z 52 druhů minujících na ovocných růžovitých dřevinách může 21 příležitostně působit menší škody, zbývající druhy se vyskytují v nízkých populačních hustotách nebo se jejich housenky vyvíjejí až na podzim a škodit nemohou. Klíčová slova: Lepidoptera, minující druhy, ovocné stromy, Rosaceae XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

101 sekce Živočišní škůdci Testování účinnosti esenciálních olejů proti háďátku Bursaphelenchus xylophilus v in vitro podmínkách Testing the effectiveness of essential oils against to Bursaphelenchus xylophilus under in vitro conditions Maňasová Marie 1, Zouhar Miloslav 1, Douda Ondřej 2 1 Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, manasova@af.czu.cz 2 Odbor ochrany plodin a zdraví rostlin, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ Háďátko borovicové Bursaphelenchus xylophilus patří mezi karanténní organizmy a je na seznamu EPPO L2. Přes důslednou eradikaci v Portugalsku se toto háďátko rozšířilo na další lokality. Je proto nutné hledat nové způsoby ochrany. Chemické nematocidy mají veliký ekologický dopad, proto se hledají alternativy, které by nepoškozovaly životní prostředí. Jednou z nich je i použití esenciálních olejů a extraktů, které nezatěžují ekosystém a i jejich rezidua jsou neškodná. V této studii byla testována nematocidní aktivita 40 esenciálních olejů a 1 rostlinného extraktu. Jako výchozí koncentrace pro další testování byla zvolena 2.5% emulze esenciálního oleje, tweenu 20 a destilované vody a doba expozice 24 hodin. Při této koncentraci a době expozice bylo 100% účinných 18 esenciálních olejů a 1 extrakt: Mentha spicata, Pelargonium graveolens, Cymbopogon winterianus, Eucalyptus citriodora, Pimpinella anisum, Foeniculum vulgare, Eugenia caryophyllum, Thymus vulgaris, Litsea cubeba, Spearmint oil, Lemongrass oil, Eugenol, Geranium extract, Fennel oil, Thyme oil, Thyme oil white a red, Wintergreen oil a Cinnamon oil. Při nejnižší 0,5% koncentraci bylo účinných 13 esenciálních olejů: Pimpinella anisum, Eugenia caryophyllus, Thymus vulgaris, Litsea cubeba, Lemongrass oil, Anise oil, Eugenol, Fennel oil, Thyme oil, Thyme oil white i red, Wintergreen oil a Cinnamon oil a 1 esenciální olej při 1% koncentraci: Foeniculum vulgare. Klíčová slova: Bursaphelenchus xylophilus, esenciální oleje, rostlinné extrakty, in vitro testování XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

102 sekce Živočišní škůdci Mangan jako ovlivňující činitel kvality potravy fytofágního hmyzu Manganese as a factor affecting food quality of phytophagous insects Martinek Petr, Šťasta Michal, Kula Emanuel Ústav ochrany lesů a myslivosti, Lesnická a dřevařská fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 3, Brno, CZ, petr.martinek@mendelu.cz Mangan je chápán, pokud jde o fyziologický význam pro organismus, jako prvek nezbytný neboli esenciální. Stejně tak je označován jako prvek toxický s letálními účinky pro tkáně a pletiva živočichů i rostlin. Tento velký rozpor účinků manganu vychází z řazení tohoto prvku do skupiny mikrobiogenních prvků s vysokou katabolickou aktivitou s potenciálem vyvolat změnu ve struktuře a funkčnosti živočišných enzymatických systémů. Zmíněné reakce jsou velmi dobře popsány jak při intenzivní deficienci či nedostupnosti prvku, tak i při přesycenosti daného živného substrátu manganem. Mangan je u hmyzu součástí enzymů katabolizujících metabolismus sacharidů, bílkovin a tuků. Také je obsažen v enzymech napomáhajících detoxifikaci organismu. Mn je rovněž zásadní při procesu rozmnožování bezobratlých, uplatňuje se především při rozvoji pohlavních žláz, procesu vitelogeneze a na ni navázané plodnosti samic. Expozice vysokou hladinou jakéhokoliv negativně působícího polutantu, tedy i manganu, může u hmyzu vyvolat stresovou reakci, kterou lze kvantifikovat sledováním změn v početnosti a hustotě populací, úrovně mortality a odchylkek v průběhu vývoje. Cílem výzkumu bylo stanovení reakcí modelových fytofágů (listohlod stromový Phyllobius arborator (Herbst, 1797), světlokřídlec obecný Cabera pusaria (Linnaeus, 1758), mandelinka pětitečná Gonioctena quinquepunctata (Fabricius, 1787), bekyně velkohlavá Lymantria dispar (Linnaeus, 1758) atd.) na potravu ovlivněnou manganem, ověření existence a především účinnosti eliminačních opatření zabezpečujících transport přebytečného Mn z těl modelového hmyzu nebo do částí, kde nehrozí toxický účinek Mn. Reakce fytofágního organismu na Mn v potravě byla hodnocena dle spotřeby potravy, délky vývoje, mortality, přítomnosti vývojových odchylek a anomálií a potravní preference. Eliminační mechanismy byly stanoveny na základě chemických analýz (AAS) materiálů odebraných v laboratorních chovech (trus, exuvie, kuklové obaly, potrava atd.). Hypotéza experimentu: koncentrace manganu, která v potravě překračuje fyziologicky optimální úroveň, může negativně ovlivnit fytofágní konzumenty, pokud nebudou disponovat schopností eliminace nadstandardního příjmu manganu. Za takový efekt je předpokládána akumulace manganu v tělním integumentu larválních stádií s následným odvržením při procesu svlékání, vyloučení manganu v exkrementech atd. Poděkování: Tento příspěvek vznik jako součást výzkumu podpořeného z projektu INVID (Projekt Indikátory vitality dřevin, reg. č. CZ.1.07/2.3.00/ je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem ČR.) a IGA Lesnické a dřevařské fakulty Mendelovy univerzity v Brně (30/2013 a LDF_VP_ ). Klíčová slova: mangan, potrava, mortalita, fytofág XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

103 sekce Živočišní škůdci Analýza výskytu a škod způsobených Sus scrofa na polních plodinách Analyses of occurrence and damages cost by Sus scrofa on field crops Mikulka Jan, Štrobach Jan Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, mikulka@vurv.cz Černá zvěř na území České republiky je původním druhem, ale její početnost se v průběhu historie značně měnila. Odlov černé zvěře až do konce II. světové války byl pouze sporadický. Od konce II. světové války dochází nejen v České republice, ale i v celé Evropě ke zvyšování nejen stavů, ale i odlovů černé zvěře až do současnosti (např. v r byla v ČR překročena hranice odstřelu kusů). Příčin proč je černé zvěře tolik, existuje celá řada. Jedná se např. o vysokou reprodukční schopnost, porušování zásad chovu a lovu černé zvěře, vysoká přizpůsobivost současné zemědělské krajině (monokultury řepky a kukuřice), skvělá vitalita, aj. Podle šetření v terénu bylo zjištěno, že vysoké početní stavy černé zvěře způsobují téměř 90% škod zvěří na zemědělských plodinách. Druhé místo zaujímá ostatní spárkatá zvěř (především zvěř srnčí a dančí) se 7% a 3% způsobených škod připadají na zvěř drobnou. Zde se jedná především o ojedinělé škody způsobené na vzcházející slunečnici. Nízké procento škod vzniklých drobnou zvěří je zapříčiněno především mizivými stavy drobné zvěře v krajině a rozptýleností poškozených ploch v polních plodinách. Při srovnávání polních plodin, které jsou poškozovány černou zvěří, bylo zjištěno, že 66% škod bylo způsobeno na obilovinách. Z těchto škod připadá 18% na škody způsobené černou zvěří na ozimých obilovinách v době vegetačního klidu. Druhé místo s 20% zaujímá kukuřice, třetí místo s 10% zaujímají trvalé travní porosty, škody na řepce představují 3,9% a ostatní škody 0,1%. Vzhledem k největšímu zastoupení obilovin v osevech (především porosty bezosinatých odrůd pšenic) patří tato skupina k neohroženějším plodinám. I když v porostech kukuřice je % poškození nejvyšší vzhledem k nižší výměře osevů je se zastoupením škod řazena až na druhé místo. S nárůstem ploch kukuřice pěstované pro energetické účely narůstá i % poškozených porostů. Škody na řepce bývají často podceňovány, jelikož nepropustné porosty neumožňují hlubší kontrolu, která je možná až při desikacích nebo sklizni. Samotné ozimé obiloviny po vzejití nejsou pro černou zvěř příliš lákavé, ale riziko poškození spočívá právě v nedostatečném zapravení posklizňových zbytků předplodiny, které snadno černá zvěř nachází. Mezi nejrizikovější plodiny z pohledu posklizňových zbytků patří kukuřice na zrno, kukuřice na siláž, řepa cukrová a brambory. Vyrýváním černá zvěř narušuje půdní povrch a tím likviduje porosty ozimých plodin. Některé posklizňové zbytky, jako např. části bulev cukrovky nebo brambory, zůstávají v půdním profilu nepoškozené do jarních měsíců a tak se stávají rizikem pro výsev např. jarních obilovin, když jsou při předseťové přípravě půdy vyzdviženy na povrch nebo k povrchu půdy. Tato práce byla vytvořena za podpory projektů MZe QJ Klíčová slova: Sus scrofa, škody na plodinách XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

104 sekce Živočišní škůdci Collembolan populations captured in different types of traps Populácie chvostoskokov ulovené do rôznych typov lapačov Minarčíková Lenka, Cagáň Ľudovít Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology and Food Resources, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. Andreja Hlinku 2, Nitra, SK, Abstracts The impact of various types of straw litter-bag traps to epigeic collembolan communities was studied in maize field at localities Janíkovce and Borovce (Western Slovakia) during 2012 and Type of the trap influenced the numbers of trapped collembolans and these can be used in future experiments. The most efficient straw trap was the yeast litter-bag trap at locality Janíkovce in In 2013, the highest number of Collembola was collected by beer litter-bag traps. But yeast litter-bag traps collected significant more springtails in two dates of collection. Yeast litter-bag traps can collect significantly more collembolan numbers and also species compared to pitfall traps. At the locality Borovce, Slovakia, nine species of collembolans (Entomobrya handschini, Entomobrya marginata, Lepidocyrtus violaceus, Orchesella albofasciata, Orchesella cincta, Pseudosinella octopunctata, Xenylla welchi, species belonged to suborder Symphypleona and one not determined species) were collected by pitfall traps and 11 species of collembolans (E. handschini, E. marginata, species belonged to suborder Symphypleona, L. violaceus, O. albofasciata, O. cincta, P. octopunctata, X. welchi, P. imparipunctata, P. notabilis, and P. alba) were collected by yeast litter-bag traps. XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

105 sekce Živočišní škůdci Které odrůdy jabloní preferuje květopas jabloňový (Anthonomus pomorum)? Which apple varieties does the blossom weevil (Anthonomus pomorum) prefers? Psota Václav 1, Vaverková Jana 2, Vrabec Luboš 2 1 BIOCONT LABORATORY, spol. s r. o., Mayerova 784, Brno-Modřice, CZ, psota@biocont.cz 2 Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ Brouk květopas jabloňový (Anthonomus pomorum) bývá pravidelným a často klíčovým škůdcem v jabloňových sadech. Samice klade na jaře vajíčka do květních pupenů. Larva se vyvíjí v květním poupěti, kde se živí semeníkem, tyčinkami a okvětními lístky. Při zanedbání ochrany může poškození dosáhnout i několika desítek procent zničených květů. V rámci našeho sledování jsme prováděli v letech 2014 a 2015 hodnocení napadení květů různých odrůd jabloní v produkční výsadbě jabloní na lokalitě Brno. V celé výsadbě bylo provedeno insekticidní ošetření (Calypso 480 SC, thiacloprid) proti květopasu jabloňovému při zjištění výskytu brouků ve fázi rašení. Stáří výsadby bylo okolo 30 let. Hodnocení probíhalo v době dokvétání (květen), kdy již bylo jasně patrné, které květy byly zničeny květopasem jabloňovým. V každé odrůdě bylo vyhodnoceno plodů. Hodnocení bylo provedeno na odrůdách Idared, Gloster, Spartan, Golden Delicious, Champion a Jonagold. V roce 2014 bylo zjištěno následující napadení květů: Idarerd 8,8 %, Gloster 1,5 %, Spartan 1,3 %, Golden Delicious 4,5 %, Champion 30,5 %, Jonagold 76,3 %. V sezóně 2015 bylo napadení nižší: Idarerd 0 %, Gloster 0 %, Spartan 0,5 %, Golden Delicious 2,3 %, Champion 5,5 %, Jonagold 51,8 %. Tato práce byla podpořena projektem NAZV QJ Klíčová slova: květopas jabloňový, odrůdy, potravní preference, škodlivost XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

106 sekce Živočišní škůdci Štítenka zhoubná a možnosti biologické regulace Biological control of San Jose scale Rychlá Kateřina 1, Psota Václav 2 1 Ústav pěstování, šlechtění rostlin a rostlinolékařství, Agronomická fakulta, Mendelova Univerzita v Brně, Zemědělská 1, Brno, CZ, katerina.rychla@mendelu.cz 2 BIOCONT LABORATORY, spol. s r. o., Mayerova 784, Brno-Modřice, CZ Štítenka zhoubná je v České republice poměrně rozšířený škůdce. V posledních letech její škodlivost vzrůstá. V ekologickém pěstování jsou prozatím možnosti ochrany proti tomuto škůdci omezené na jarní aplikaci olejů. V letech 2013 a 2014 byly v ovocných sadech na jižní Moravě testovány přípravky Spintor, Naturalis, PREV-B2, RockEffect a Wetcit, které jsou potenciálně k použití v ekologickém i integrovaném systému ochrany proti štítence zhoubné (Diaspidiotus perniciosus). V roce 2013 bylo napadení hodnoceno na plodech jabloní a nejvyšší účinnosti zde dosáhl přípravek Naturalis. V roce 2014 probíhalo hodnocení na větvičkách hrušní, nejvyšší účinnost vykázal přípravek Spintor. V letošním roce 2015 právě probíhají další aplikace přípravků a hodnocení. Klíčová slova: štítenka zhoubná, biologická ochrana, jabloně, hrušně XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

107 sekce Živočišní škůdci Potrava kontaminovaná postřikem herbicidu na bázi glyfosátu neovlivňuje populační parametry slunéčka Harmonia axyridis Prey contaminated by glyphosate-based herbicide application does not influence population parameters of the ladybird Harmonia axyridis Saska Pavel 1, Skuhrovec Jiří 1, Lukáš Jan 1, Vlach Miroslav 1, Chi Hsin 2, Honěk Alois 1 1 Funkce biodiverzity bezobratlých a rostlin, Výzkumný ústav rostlinné výroby, v. v. i., Drnovská 507/73, Praha 6 Ruzyně, CZ, saska@vurv.cz 2 Laboratory of Theoretical and Applied Ecology, National Chung Hsing University, P.O. Box 17-25, Taichung, TW Herbicidy na bázi glyfosátu patří mezi nejpoužívanější neselektivní herbicidy současnosti, a nacházejí uplatnění ve všech systémech včetně zemědělské velko- a maloprodukce a při údržbě městské zeleně a veřejných prostor. Glyfosát je považován obecně za nepříliš toxický pro necílové organismy, jelikož se v půdě poměrně rychle rozkládá, byla však zjištěna značná toxicita komerčních produktů na bázi glyfosátu pro vodní organismy. Jak jsou tyto herbicidy toxické pro hmyzí predátory herbivorního hmyzu, nebylo dosud příliš studováno, pouhé krátkodobé živení se na potravě ošetřené herbicidem na bázi glyfosátu však rapidně zhoršilo populační parametry zlatoočky Chrysopa exigua. V této studii se zaměřuje na vliv příjmu potravy (mšice Metopolophium dirhodum) ošetřené různými koncentracemi herbicidu na bázi glyfosátu larvami slunéčka Harmonia axyridis na populační parametry tohoto druhu a predační potenciál s využitím demografické analýzy (age-stage two-sex life table). Zvolené koncentrace herbicidu RoundUp odrážely ředění doporučené výrobcem pro různé podmínky. Oproti jedinému dosud známému případu nebyl v naší studii zaznamenán významný efekt příjmu potravy ošetřené glyfosátem na populační parametry studovaného predátora. Rozdíly mezi studiemi mohou pramenit z odlišných fyziologických adaptací studovaných druhů nebo metodickými odlišnostmi zejména vzhledem k aplikaci herbicidu na potravu hmyzích predátorů. Podpořeno projektem GAČR J. Klíčová slova: RoundUp, life table, populační ekologie, potravní řetězec XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

108 sekce Živočišní škůdci Bývají porosty luskovin pěstované ve směskách s obilím vystavené menšímu napadení hmyzími škůdci? Are legumes intercropped with cereals less threatened with insect pests? Seidenglanz Marek, Huňady Igor Agritec Plant Research, s. r. o., Šumperk, Zemědělská 16, Šumperk, CZ, seidenglanz@agritec.cz Existuje celá řada polních studií, které dokazují, že pěstování kulturních plodin (luskoviny, obilniny, olejniny) v monokulturách vede k většímu nebezpečí jejich poškození škodlivými organismy (hmyzí škůdci, virové choroby, houbové choroby) než při jejich pěstování v diverzifikovanějším prostředí. Zvýšením rostlinné rozmanitosti (různé druhy směsek plodin) se naopak vytváří prostředí, ve kterém z různých důvodů dochází k nekontrolovanému populačnímu rozvoji škůdců a původců chorob s destruktivním vlivem na porosty méně často a na menších plochách. Při hodnocení polních pokusů (malopracelkové a poloprovozní pokusy) zakládaných na různých lokalitách v okolí Šumperka od roku 2010 se snažíme nalézat odpovědi na několik otázek s výše vytčeným tématem souvisejících: 1) Je luskovina (hrách setý, bob setý) pěstovaná ve směsi společně s obilninou (pšenice jarní, ječmen jarní, oves jarní) méně atraktivní pro hmyzí škůdce (mšice a žraví škůdci) než luskovina pěstovaná v monokultuře? 2) Rozvíjí se populace mšic (kyjatka hrachová, mšice maková) na hostitelských rostlinách odlišně, jsou-li tyto součástí směsky (dvou či tří komponentní) či jsou-li monokulturou? 3) Jsou populace škůdců luskovin vystaveni ve směskách intenzivnějšímu tlaku přirozených nepřátel (parazitoidi, predátoři) než ty samé populace v monokulturách? 4) Jsou pro luskovinu jako jednu z komponent v rostlinné směsi ostatní doprovodné druhy (obilovina, další luskovina) konkurentem v boji o životní prostor? 5) Je prostorová a časová disperze populací škůdců a jejich přirozených nepřátel odlišná ve směskách a v monokulturách? Kde je silnější prostorová a časová asociace mezi škůdci a jejich přirozenými nepřáteli? 6) Jakým způsobem se do odpovědí na výše zmíněné otázky promítne způsob vedení a hodnocení polních pokusů? Jsou výsledky z maloparcelkových pokusů odlišné v porovnání s těmi, které jsou získány z pokusů zakládaných na velkých plochách? 7) Jaké praktické poznatky vyplývající z pokusů lze uplatnit v současnosti na českých polích při zavádění principů IPM? Z pokusů vyplývá, že luskovina pěstovaná ve směsi s jednou či dvěma dalšími plodinami se nestává ani méně atraktivní ani lépe schovanou pro její škůdce. V některých letech dochází k výrazně časnějšímu úpadku kolonií mšic (dříve se zastaví jejich početní růst a přejdou do úpadku) na jejich hostitelských druzích, jsou-li součástí směsky. Toto však není vždy (někdy ano) způsobeno vyšší aktivitou predátorů a parazitoidů ve směskách ale také dřívějším nástupem senescence vrcholových pletiv. Luskoviny začínají ve směskách s některými druhy obilí signifikantně dříve stárnout, dříve se stávají méně atraktivní potravou pro mšice. Mšice je opouští. V letech s přirozeně nižší intenzitou výskytu mšic se na luskovinných komponentech směsí často projeví spíše tlumivý vliv jejich doprovodných obilných druhů. Luskoviny ve směskách mají výrazně nižší počet plodonosných nodů, lusků i semen v luscích. Na výsledky hodnocení má výrazný vliv design pokusů. V maloparcelkových pokusech jsou parcely monokulturní většinou součástí pokusu, ve kterém převažují celkově XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

109 sekce Živočišní škůdci plochy s různými druhy směsek. Monokulturní parcelky jsou tak vlastně součástí většího celku s vyšší rostlinnou diverzitou a působí tak na ně pozitivní vliv z toho plynoucí. Zároveň se jedná o plochy, kde luskovina nečelí konkurenci dalšího rostlinného druhu. Z hodnocení v maloparcelkových pokusech se pěstování monokultur jeví jako výrazně výhodnější než z hodnocení v pokusech poloprovozních. Při sestavování praktických doporučení by právě na design pokusů měl být brán zřetel. Příspěvek vznikl za podpory projektu LEGATO (LEGumes for the Agriculture of Tomorrow; KBBE : Legume breeding and management for sustainable agriculture as well as protein supply for food and feed). Klíčová slova: luskoviny, hrách, bob, hmyzí škůdci, přirození nepřátele škůdců, rostlinná biodiverzita XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

110 sekce Živočišní škůdci Kvetoucí pásy jako potravní zdroj pro opylovače a přirozené nepřátele škůdců Flowering strips as food resources for pollinators and natural enemies of pests Šrámková Anna Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, anna.sramek@gmail.com V evropské zemědělské krajině ubývá druhů užitečného hmyzu, mezi něž patří opylovači a přirození nepřátelé škůdců. Příčinami tohoto poklesu je vedle chemizace zemědělství nedostatek potravních zdrojů a nedostatek stanovišť či biokoridorů v krajině. Řada evropských zemí zavedla dotační tituly s cílem podpořit na orné půdě výskyt užitečných druhů hmyzu. Mezi takové tituly patří kvetoucí pásy, vytrvalé pestré směsky bylin vysévané nejčastěji podél polí. V České republice mohou zemědělci zakládat tzv. nektarodárné biopásy za finanční podpory počínaje letošním rokem. V poloprovozních podmínkách byl roku 2012 založen pokus s kvetoucími pásy, v rámci něhož je testováno několik směsí v různých režimech seče. Cílem pokusu je zjistit jaké složení směsi v kombinaci se kterým režimem seče zajišťuje optimální potravní zdroj pro blanokřídlé opylovače a vybrané přirozené nepřátele škůdců. Klíčová slova: včela, čmelák, predátor, seč, biodiverzita XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

111 sekce Živočišní škůdci The occurrence and damage of the weevils Ceutorhynchus napi and Ceutorhynchus pallidactilus in oilseed rape in south-western Slovakia Výskyt a škodlivosť stonkových krytonosov v porastoch repky olejnej v podmienkach juhozápadného Slovenska Tancik Ján, Bokor Peter Department of Plant Protection, Faculty of Agrobiology and Food Resources, Slovak University of Agriculture in Nitra, Tr. Andreja Hlinku 2, Nitra, SK, jan.tancik@uniag.sk Abstract Stem mining weevils, rape stem weevil (Ceutorhynchus napi Gyll. 1837) and cabbage stem weevil (Ceutorhynchus pallidactylus Marsh. 1802) have become more important oilseed rape pests. Biological and ecological characteristics of these two pests are similar, stem mining weevils are observed as pest complex. Differences in biology cause different approach in pest control. During at five locations near Nitra we have monitored occurrence of stem mining weevils using yellow sticky traps in the oilseed rape. In 2011 year at locality Dolné Lefantovce the occurrence of weevils were low (only 45 adults) and percentage of damaged plants was low too (3%). Their rate of occurrence were 1:1. In 2012 at locality Dolný Ohaj the occurrence of weevils were high (220 adults). Dominant species was Ceutorhynchus napi (85,2%). Percentage of damaged plants were high (95 %). In 2013 at locality Jarok the occurrence of weevils were low (only 87 adults) and percentage of damaged plants were high (84%). The highest numbers of imagoes were observed during period from to (60 imagoes on 6 yellow sticky traps). Predominate was species Ceutorhynchus napi (70.11 %). At locality Hul in 2014 the occurrence of weevils was high (225 adults). The highest numbers of imagoes were observed during period from to (62 imagoes on 6 yellow sticky traps per day). 52 % of the total number of captured imagoes representing Ceutorhynchus napi. Percentage of damaged plants were high (95%). In 2015 at same locality the occurrence of weevils were to high (191 adults), bud percentage of damaged plants were no high (33%). Key words: Ceutorhynchus napi, Ceutorhynchus pallidactylus, monitoring of fly, yellow sticky traps, damage XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září

112 sekce Živočišní škůdci Ovlivnění distribuce včel v porostech ozimé a jarní řepky aplikací pesticidů a výběrem odrůd The distribution of bees on winter and spring oilseed rape affected by pesticide application and variety selection Volková Martina 1, Kazda Jan 1, Baranyk Petr 2 1 Katedra ochrany rostlin, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ, martina120@seznam.cz 2 Katedra rostlinné výroby, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů, Česká zemědělská univerzita v Praze, Kamýcká 129, Praha 6 Suchdol, CZ V České republice je v současnosti řepka olejná (Brassica napus var. napus) nejvýznamnější olejninou pěstovanou na rozloze okolo čtyři sta tisíců hektarů. Do porostů řepky je aplikováno během roku při ochraně proti škodlivým organizmům největší množství pesticidů z polních plodin. Z části jsou tyto pesticidy aplikovány do květu řepky, čímž jsou zasaženy mnohé druhy hmyzu, zejména včela medonosná, čmeláci a samotářské včely, kteří v porostu sbírají nektar a pyl. V současnosti přibývá poškozených nebo uhynulých včelstev a mnozí včelaři to dávají za vinu právě používaným pesticidům v zemědělství. Vzhledem k tomu je nutné provádět veškerá dostupná opatření a dodržovat zákonné předpisy, aby se v maximální možné míře zabránilo nepříznivému vlivu pesticidů na tyto druhy necílových organizmů. Cílem projektu bylo ověřit, zdali na maloparcelkových odrůdových a pesticidních pokusech s ozimou i jarní řepkou existují rozdíly v distribuci včel v závislosti na pěstované odrůdě nebo intenzitě pesticidní ochrany a pokusit se zjistit příčiny těchto rozdílů stanovením množství a složení produkovaného nektaru. Ve spolupráci KOR ČZU, SPZO Praha a Výzkumného ústavu včelařského v Dole bylo prováděno v roce 2014 a 2015 pozorování včel na pokusu řepky ozimé a jarní, které probíhalo na zkušebních stanicích Uhříněves, Žatec a Chrastava. V obou ročnících byla sledována nejen návštěvnost včel na kvetoucí řepce, ale i množství a složení nektaru jednotlivých odrůd. Na základě těchto údajů mohla být vyhodnocena atraktivita či repelence odrůd řepky ozimé či jednotlivých pesticidů pro včely. Klíčová slova: odrůdy ozimé a jarní řepky, včely, opylení porostu, nektar XX. česká a slovenská konference o ochraně rostlin, Praha září