UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE AGRONOMÍA ÁREA INTEGRADA

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1 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE AGRONOMÍA ÁREA INTEGRADA DIAGNÓSTICO PRELIMINAR DE ENFERMEDADES OCASIONADAS POR HONGOS EN EL CULTIVO DE PAPAYA (Carica papaya) EN LOS MUNICIPIOS DE LA LIBERTAD Y MELCHOR DE MENCOS Y SERVICIOS REALIZADOS EN EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO MAGA PETÉN. KELDER ALEXIS ORTIZ CARDONA GUATEMALA, ENERO 2010

2 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE AGRONOMÍA ÁREA INTEGRADA DIAGNÓSTICO PRELIMINAR DE ENFERMEDADES OCASIONADAS POR HONGOS EN EL CULTIVO DE PAPAYA (Carica papaya) EN LOS MUNICIPIOS DE LA LIBERTAD Y MELCHOR DE MENCOS Y SERVICIOS REALIZADOS EN EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO MAGA PETÉN. PRESENTADO A LA HONORABLE JUNTA DIRECTIVA DE LA FACULTAD DE AGRONOMÍA DE LA UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA POR KELDER ALEXIS ORTIZ CARDONA EN EL ACTO DE INVESTIDURA COMO INGENIERO AGRÓNOMO EN SISTEMAS DE PRODUCCIÓN AGRÍCOLA EN EL GRADO ACADÉMICO DE LICENCIADO GUATEMALA, ENERO 2010

3 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE AGRONOMÍA RECTOR LIC. CARLOS ESTUARDO GÁLVEZ BARRIOS JUNTA DIRECTIVA DE LA FACULTAD DE AGRONOMÍA DECANO VOCAL PRIMERO VOCAL SEGUNDO VOCAL TERCERO VOCAL CUARTO VOCAL QUINTO SECRETARIO MSc. Francisco Javier Vásquez y Vásquez Ing. Agr. Waldemar Nufio Reyes Ing. Agr. Walter Arnoldo Reyes Sanabria MSc. Danilo Ernesto Dardón Ávila P.Forestal Axel Esaú Cuma P.Contador Carlos Alberto Monterroso Gonzáles MSc. Edwin Enrique Cano Morales Guatemala, enero 2010

4 Guatemala, enero 2010 Honorable Junta directiva Honorable Tribunal Examinador Facultad de Agronomía Universidad de San Carlos de Guatemala Honorables miembros: De conformidad con las normas establecidas por la Ley Orgánica de la Universidad de San Carlos de Guatemala, tengo el honor de someter a vuestra consideración, el trabajo de Graduación titulado Diagóstico preliminar de enfermedades ocasionadas por hongos en el cultivo de papaya (Carica papaya) en los municipios de La Libertad y Melchor de Mencos y servicios realizados en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén, como requisito previo a optar al título de Ingeniero Agrónomo en Sistemas de Producción Agrícola, en el grado académico de Licenciado. Esperando que el mismo llene los requisitos necesarios para su aprobación, me es grato suscribirme, Atentamente, ID Y ENSEÑAD A TODOS Kelder Alexis Ortiz Cardona

5 A: ACTO QUE DEDICO DIOS Por acompañarme incondicionalmente en cada paso del camino recorrido. Sin Él no hubiese podido cumplir esta meta. Mis padres Luz Estela Cardona Nardeli y José Antonio Ortiz Gómez, por ser ejemplo de lucha y sacrificio, gracias por darme una de las herencias más importantes que una persona puede recibir en la vida: instrucción y buenos principios. Las palabras se quedan cortas para expresarles mi reconocimiento por todo su apoyo Mis abuelos María Luisa Nardeli, Estéfana Gómez, Sixto Cardona y Heleodoro Ortiz. Por ser la raíz de mi familia. Mis hermanos Edson Roger y Kelvin Josué, por cada uno de los momentos compartidos. Subárea de Ciencias Químicas Elizabeth Gutierrez, Gustavo Jacinto, Lic. Romeo Pérez, Ing. Agr. Pedro Armira, Lic. Enrique Flores, Lic Jorge Solis por contribuir a mi formación personal y profesionall. Mis profesores Licda. Silvia de Morales, Licda. Nora de Galindo, Lic. Arcadio Ruiz y Prof. David Pérez por contribuir a mi formación académica.

6 Mis Amigos María José Rodríguez, Alba Solares, Londy Mejía, Bessy García, Julia Camel, Nadia Ramírez, Sofía Torres, Teresa Guerra, Esperanza Guerra, Mayra Tubac, Delmi Canel, Eunice Caravantes, Thylma Chamorro, Deissy Rodríguez, Julio Vásquez, Marco García, Elmer Ovando, Sergio Sanchez, Carlos Sicán, Soren Ramírez, Mauricio Guzmán, Heberto Rodas, Edwin Orellana, Óscar Monterroso, Diego Méndez, Carlos Galindo, Gerson Urtecho, Christian Menéndez, Enrique Gálvez-Sobral, Douglas Rodas, Luis Monroy, Juan Carlos Ordoñez, Francisco Urizar. A todos ustedes gracias por estar en el momento justo y en el lugar indicado. Monseñor Oscar Vián, Eleuterio Carvajal, Freddy González, Clara Mendez, Alcira Morales y a la Ingeniera Marivel Girón, por su hospitalidad y apoyo. Gracias por brindarme un buen recuerdo de El Petén Los señores Marco Antonio Fausto y Henry Dardón del CEDIA por su ayuda a lo largo de toda la carrera. Todos los compañeros estudiantes de la Facultad de Agronomía con los cuales tuve la oportunidad de compartir un laboratorio de Química.

7 A: TRABAJO DE GRADUACIÓN QUE DEDICO Mi patria Guatemala El departamento de El Petén Universidad de San Carlos de Guatemala Facultad de Agronomía Subárea de Ciencias Químicas Colegio Guatemala de la Asunción Vicariato Apostólico de El Petén Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) Petén Mis docentes Mis compañeros Mis amigos

8 A las siguientes personas: AGREDECIMIENTOS Ing. Agr. Gustavo Álvarez por las valiosas contribuciones realizadas a este documento. Gracias por todo el tiempo dedicado a este trabajo. Ingenieros agrónomos Marvin Salguero, César García y Hermógenes Castillo por las observaciones pertinentes para la mejora de este documento. Inga. Agra. Marivel Girón por su apoyo en todas las actividades realizadas en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén. Gracias por compartir sus conocimientos sin ningún tipo de envidia, por confiar en mi capacidad y por brindarme la oportunidad de trabajar a su lado. Por todo infinitas gracias. Personal del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Km. 22 Bárcenas, Villa Nueva: ingenieros agrónomos Edil Rodríguez, Otto Lavagnino, Aníbal Pérez, Arturo García, analista, Nelson García, técnico laboratorista Osman Valdés y encargada de procesamientos de datos, Diana Gutiérrez, por la colaboración brindada. Personal del Programa de Manejo Integrado de Plagas: Ingenieros Agrónomos Manuel Cano, José Dubón, Luis Guillén, Lic. Anacleto Constancia y técnicos de campo, por todo el apoyo que dieron durante la colecta de material vegetal en la fase de campo. Gracias también por haberme dado la oportunidad de conocer Petén. Médico Veterinario Guillermo Fernández por su colaboración durante la realización del Ejercicio Profesional Supervisado. Personal del Viceministerio de Agricultura Ganadería y Alimentación para asuntos específicos de El Petén.

9 i ÍNDICE GENERAL CONTENIDO PÁGINA CAPÍTULO I. ANÁLISIS DE LAS CONDICIONES DEL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN DEL MINISTERIO DE AGRICULTURA, GANADERÍA Y ALIMENTACIÓN, SANTA ELENA DE LA CRUZ FLORES, PETÉN, UN AÑO DESPUÉS DE SU ESTABLECIMIENTO Presentación Marco referencial Descripción geográfica del departamento de El Petén Producción agrícola del departamento de El Petén Petén como Área Libre de la Mosca de la Fruta Ceratitis capitata Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA) Petén Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) en El Petén Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario (LDF) Petén Objetivos Metodología Fuentes primarias de información Otras fuentes de información Análisis de la información Resultados Localización Unidad reguladora Servicios que presta el laboratorio y horarios de atención Costo por servicios Infraestructura Equipo básico Cristalería, materiales y reactivos Recursos humanos Protocolos Estadísticas de las muestras procesadas durante el año

10 ii Identificación de problemas Conclusiones y recomendaciones Bibliografía ANEXOS CAPÍTULO II. DIAGNÓSTICO PRELIMINAR DE ENFERMEDADES OCASIONADAS POR HONGOS EN EL CULTIVO DE PAPAYA (Carica papaya) EN 6 FINCAS LOCALIZADAS EN LOS MUNICIPIOS DE LA LIBERTAD Y MELCHOR DE MENCOS DEL DEPARTAMENTO DE EL PETÉN Presentación Marco conceptual Taxonomía de la papaya Descripción botánica y diversidad genética Enfermedades Enfermedades ocasionadas por hongos y oomicetos Marco referencial Producción de papaya en Guatemala Producción de papaya en El Petén Aspectos importantes de las fincas estudiadas en la presente investigación Investigaciones publicadas acerca de enfermedades que afectan el cultivo de papaya (C. papaya) en El Petén Objetivos Metodología Fase de Campo Fase de Laboratorio Resultados y discusión Aspectos a considerar en esta investigación Descripción de las enfermedades ocasionadas por hongos Conclusiones y recomendaciones Bibliografía

11 iii CAPÍTULO III. SERVICIOS EFECTUADOS EN EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN Presentación Identificación de áreas con problemas potenciales de fitopatógenos Objetivos Metodología Resultados Evaluación Diagnóstico fitopatológico de las muestras ingresadas al laboratorio Objetivos Metodología Resultados Evaluación Documentación de las enfermedades diagnosticadas en LDF Petén ocasionadas por hongos en cultivos propios del departamento Objetivos Metodología Resultados Evaluación Manual de procedimientos para análisis fitopatológicos del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Objetivos: Metodología Resultados Evaluación Exposiciones de temas fitopatológicos Objetivos Metodología Resultados

12 iv Evaluación Servicios no planificados Bibliografía ANEXOS

13 v ÍNDICE DE FIGURAS FIGURA PÁGINA Figura 1. Mapa del departamento de El Petén y sus municipios... 4 Figura 2. Vista exterior del Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación Petén. Santa Elena, Flores. Marzo Figura 3. Vista interna del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Figura 4. Croquis del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Figura 5. Procedencia de las muestras recibidas por el LDF Maga Petén en el año Figura 6. Árbol de causas y efectos para el problema detectado en el LDF Petén a principios del año Figura 7. Árbol de medios y fines para el objetivo buscado Figura 8. Árbol de acciones para conseguir los medios necesarios y cumplir el objetivo buscado Figura 9A. Boleta fitosanitaria utilizada por el LDF Petén Figura 10. Localización de puntos de colecta de material vegetal para la investigación Figura 11. Vista de cada finca estudiada en la presente investigación Figura 12. Fase de campo de la investigación Figura 13. Escala diagramática utilizada para determinar severidad de enfermedades foliares en papaya Figura 14.Escala diagramática utilizada para la determinación de severidad de enfermedades en fruto de papaya Figura 15. Vista interna y externa del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén, año Figura 16. Picnidios y conidias de Botryodiplodia Figura 17. Sintomatología ocasionada por Botryodiplodia en fruto de papaya híbrido Tainung Figura 18. Conidióforos y conidias de Cercospora Figura 19. Lesiones foliares en su etapa inicial ocasionadas por Cercospora en hojas de la variedad Maradol Figura 20. Deserrollo de los síntomas de Cercospora en hojas del híbrido Tainung

14 vi Figura 21. Etapas avanzadas de Cercospora sp Figura 22. Síntomas iniciales de Cercospora sp. en frutos del híbrido Tainung Figura 23. Síntomas de Cercospora sp. en diferentes etapas Figura 24. Conidióforos y conidas de Cladosporium Figura 25. Síntomas ocasionados por Cladosporium en frutos del híbrido Tainung Figura 26. Corte transversal y vista externa de un fruto del híbrido Tainung con síntomas de pudrición ocasionada por Cladosporium Figura 27. Comparación entre una semilla de un fruto sano y una de un fruto afectado por Cladosporium Figura 28. Micelio y conidias de Fusarium encontrados en un 80% de frutos Tainung afectados por Cladosporium Figura 29. Problema fisiológico del híbrido Tainung Figura 30. Ácaros encontrados en frutos de Tainung afectados por Cladosporium Figura 31. Acérvulo y conidias de Colletotrichum Figura 32. Síntomas de Colletotrichum sp. en frutos Figura 33. Masas conidiales de Colletotrichum sp. en frutos Figura 34. Etapas avanzadas de antracnosis en frutos de Tainung Figura 35. Colletotrichum sp en frutos con síntomas avanzados de la enfermedad Figura 36. Conidias de Corynespora Figura 37. Conidióforos de Corynespora observados en lesiones foliares Figura 38. Síntomas iniciales de Corynespora en frutos de Tainung Figura 39. Corte transversal de un fruto de la variedad Taninung con síntomas ocasionados por Corynespora Figura 40. Corte transversal de un peritecio de Mycosphaerella Figura 41. Peritecios de Mycosphaerella Figura 42. Ascas y ascosporas de Mycosphaerella Figura 43. Síntomas foliares ocasionados por Mycosphaerella Figura 44. Lesiones foliares donde se observa los peritecios de Mycosphaerella Figura 45. Conidióforos de Cercospora y peritecios de Mycosphaerella en la misma lesión foliar Figura 46. Picnidios de Phoma sp

15 vii Figura 47. Necrosis foliar ocasionada por Phoma sp Figura 48. Estación experimental El Remate, Flores, Petén Figura 49. Hacienda Las Espuelas, Melchor de Mencos, Petén Figura 50. Cultivo de piña, Barrio Cobán, Dolores, Petén Figura 51. Cultivo de pepitoria, comunidad Mario Méndez, Sayaxché, Petén Figura 52. Cultivo de limón persa, cooperativa Olazar, Sacpuy, San Andrés, Petén Figura 53. Cultivo de Mango, Finca La Estancia, La Libertad, Petén Figura 54. Gráfico del número de muestras procesadas para análisis fitopatólogicos por mes durante el año 2007 en el LDF MAGA Petén Figura 55. Acumulado porcentual de muestras procesadas para análisis fitopatológico en el LDF MAGA Petén Figura 56. Ingreso de manterial vegetal para análisis fitopatológico al laboratorio durante el año Figura 57. Fotografías de síntomas y agentes causales de enfermedades diagnosticadass en el LDF Petén ocasionadas por hongos en hospederos propios de la región Figura 58. Condiciones del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén durante los trabajos de remodelación, marzo de Figura 59. Equipo del laboratorio almacenado, marzo Figura 60. Actividades de reordenamiento de equipo y cristalería, abril Figura 61. Área del laboratorio antes y después de la habilitación del LDF Petén, año Figura 62. Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén después de actividades de reordenamiento, año Figura 63. Puesto de cuarenta SEPA OIRSA localizado en la frontera de Guatemala con Belice, Melchor de Mencos, Petén Figura 64A. Diagnóstico de Bunchy Top efectuado por la Universidad del Valle de Guatemala Figura.65A. Muestras colectadas para análisis de Bunchy top

16 viii ÍNDICE DE CUADROS CUADRO PÁGINA Cuadro 1. Producción agrícola del departamento de El Petén, año agrícola Cuadro 2. Personal entrevistado para la obtención de información primaria, MAGA Petén, año Cuadro 3. Listado de cristalería y equipo Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA, año Cuadro 4. Listado de reactivos, Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén, año Cuadro 5. Procedencia de muestras por municipio y por departamento recibidas por el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén durante el año Cuadro 6. Planificación de acciones realizadas como parte del EPS Cuadro 7. Cultivares e híbridos de papaya y países que los cultivan Cuadro 8. Enfermedades ocasionadas por hongos y oomicetos en papaya (C. papaya) Cuadro 9. Taxonomía de los hongos y oomicetes fitopatógenos para la papaya (C. papaya) Cuadro 10. Cultivo de papaya (Carica papaya L.) en Petén, año agrícola Cuadro 11. Fincas productoras de papaya con mayor actividad comercial en los municipios de La Libertad y Melchor de Mencos, año Cuadro 12. Ubicación de los lugares donde se colectó material vegetal para la investigación Cuadro 13. Información de los lugares donde se colectó material vegetal para la investigación Cuadro 14. Resultados de los análisis químicos de suelo de 3 fincas de papaya, Petén, Cuadro 15. Resultados del diagnóstico de enfermedades ocasionadas por hongos en el cultivo de papaya (C. papaya) en seis fincas de El Petén durante los meses de enero a diciembre del año

17 ix Cuadro 16. Lugares donde se colectó material vegetal para la elaboración de diagnósticos fitopatológicos durante los meses de marzo a diciembre del Cuadro 17. Distribución de las muestras según el análisis para el cual fueron ingresadas. Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén. Año Cuadro 18. Número de muestras procesadas para análisis fitopatológico por mes en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén, durante el año Cuadro 19. Procedencia de las muestras procesadas para análisis fitopatológico Cuadro 20. Géneros de hongos determinados en muestras de cultivos en el departamento de El Petén, año Cuadro 21. Descripción de las sintomatologías de enfermedades ocasionadas por hongos en cultivos de El Petén diagnosticadas en el LDF de este departamento durante el año Cuadro 22. Exposiciones efectuadas a personal de campo del PROMIP, año Cuadro 23. Lugares visitados y actividades realizadas como apoyo a personal de campo de brigadas del PROMIP, año

18 x RESUMEN La Unidad de Normas y Regulaciones (UNR) del Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA) con el propósito de identificar los principales problemas fitosanitarios que afectan la producción, procesamiento y comercio de productos agrícolas cuenta con tres laboratorios de diagnóstico fitosanitario a nivel nacional, uno en el Km. 22 del departamento de Guatemala; otro en el departamento de Quetzaltenango y el tercero en el departamento de El Petén. El presente trabajo de graduación es resultado del Ejercicio Profesional Supervisado (EPS) efectuado en el año 2007 en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén, localizado en la calle a las Cuevas Actun Kan, aldea Santa Elena de la Cruz, en el municipio de Flores. Debido a la necesidad de conocer la situación del laboratorio a un año de su establecimiento, se elaboró un diagnóstico de esta entidad cuyos resultados incluyen estadísticas y datos de las condiciones del laboratorio hasta incios del año Como conclusión del diagnóstico se determinó que es necesario que el laboratorio cuente con un área de diagnóstico fitopatológico para poder ofrecer este tipo de servicio a los usuarios. Una parte de las acciones planteadas en este diagnóstico y que constituyó la línea base de la investigación y los servcios realizados, se orientó principalmente hacia el objetivo de proporcionar evidencia documentada de la existencia de enfermedades en cultivos de El Petén y demostrar así la necesidad de este tipo de diagnósticos. La investigación consistió en la determinación de los géneros de hongos fitopatógenos asociados al cultivo comercial de papaya (Carica papaya) y la cuantificación del nivel de incidencia y severidad in situ en 6 fincas ubicadas en el área central del departamento de El Petén. La papaya (C. papaya) es uno de los frutales con mayor potencial de producción en el departamento., principalmente por la adaptación a las condiciones del lugar así como del hecho de cultivarse en una zona declarada libre de la mosca del mediterráneo Ceratitis capitata, lo que le permite la posibilidad de exportarse a Estados Unidos sin

19 xi restricciones cuarentenarias. El resultado de esta investigación fue la identificación efectuada en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén de los 7 géneros de hongos fitopatógenos siguientes: Botryodiplodia sp., Cercospora sp., Cladosporium sp., Colletotrichum sp., Corynespora sp., Mycosphaerella sp. y Phoma sp. En esta investigación se hace la recomendación de identificar especies de los géneros de hongos determinados, principalmente de Colletotrichum sp. debido a que presentó altos valores de incidencia y severidad con lo cual se redujo el valor comercial de la fruta. Además se recomienda hacer estudios acerca del control de las enfermedades diagnosticadas principalmente en el uso de variedades resistentes de papaya (C. papaya). Es necesario también efectuar el análisis económico de las pérdidas ocasionadas por estas enfermedades. Los servicios consistieron principalmente en las siguientes actividades: colectar material vegetal enfermo para su posterior análisis, identificar lugares con problemas potenciales de enfermedades en cultivos, procesar y efectuar los diagnósticos fitopatológicos de muestras ingresadas al laboratorio, elaborar un documento con la descripción y fotografías de los diagnósticos efectuados, compilar un manual de procedimientos para ingreso de muestras y diagnóstico de enfermedades ocasionadas por fitopatógenos. Además se efectuaron exposiciones acerca de la metodología para colectar y transportar muestras para análisis fitopatológicos el cual fue dirigido al personal de campo del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) Petén. Como resultado de estos servicios se presenta la documentación descriptiva y fotográfica de estas actividades lo cual constituye también evidencia de la necesidad de los diagnósticos fitopatológicos en la región.

20 1 CAPÍTULO I ANÁLISIS DE LAS CONDICIONES DEL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN DEL MINISTERIO DE AGRICULTURA, GANADERÍA Y ALIMENTACIÓN, SANTA ELENA DE LA CRUZ, FLORES, PETÉN, UN AÑO DESPUÉS DE SU ESTABLECIMIENTO CAPÍTULO 1 ANÁLISIS DE LAS CONDICIONES DEL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN DEL MINISTERIO DE AGRICULTURA, GANADERÍA Y ALIMENTACIÓN, SANTA ELENA DE LA CRUZ FLORES, PETÉN, UN AÑO DESPUÉS DE SU ESTABLECIMIENTO

21 2 1.1 Presentación El siguiente diagnóstico busca analizar la capacidad, las potencialidades y los aspectos a fortalecer del laboratorio de diagnóstico fitosanitario MAGA Petén, todo en función de los requerimientos básicos que un laboratorio de diagnóstico fitosanitario debe tener. Se debe tomar en cuenta que al momento de efectuar este diagnóstico a principios del año 2007 el laboratorio contaba con un año de haber sido establecido. Los datos que a continuación se presentan fueron compilados tomando como referencia fuentes de información primaria y revisión de literatura. El documento inicia con una parte referencial en la cual se realiza una descripción geográfica del departamento de El Petén, incluida además información de cultivos de importancia y la situación respecto a plagas. Luego se continúa con una presentación de los antecedentes que llevaron al establecimiento del laboratorio. En el acápite de resultados se da a conocer información referente a servicios que presta y los recursos con que cuenta el laboratorio para realizar tales actividades. Se enfatiza en aspectos de ubicación, servicios, horario de atención, infraestructura, mobiliario y equipo, cristalería, reactivos y recursos humanos. Posteriormente se explica el funcionamiento del laboratorio describiendo cada uno de los protocolos desde el ingreso, registro, procesamiento hasta la emisión de resultados de muestras. También se presentan estadísticas de muestras recibidas durante el Para compilar los datos presentados se tomó como referencia fuentes de información primaria y revisión de literatura. En la parte del análisis se describen los apectos detectados en el laboratorio que pueden convertirse en potenciales problemas. Se discutió principalmente el hecho que para el año 2007 el laboratorio no cuente con un área fitopatológica formalmente establecida.

22 3 1.2 Marco referencial Descripción geográfica del departamento de El Petén El departamento de El Petén se encuentra situado en la Región VIII, colinda al Norte con México, al Este con Belice, al Sur con los departamentos de Izabal y Alta Verapaz y al Oeste con México; tiene una extensión territorial de 35,854 Kms 2, equivalentes al 33 por ciento del territorio nacional. Se ubica en la latitud 16º y longitud 89º (SEGEPLAN 2003). Desde el punto de vista geológico, el departamento comprende varias cuencas marinas sedimentales, dentro de las cuales se depositaron desde fines de la era Paleozoica, hace 200 millones de años, grandes espesores de rocas sedimentarias que hoy día componen el subsuelo de dicha región (SEGEPLAN 2003). Este departamento está irrigado por varios ríos, aguadas, lagunas y lagunetas; los ríos más importantes son: Salinas, Santa Isabel, Mopán, Machaquilá, La Pasión, Usumacinta, Escondido, San Pedro, Azul, Chiquibul, Paxte, San Juan; las lagunas y lagos siguientes: El tigre, El Repasto, Petén Itzá, Oquevix, Taxjá, La Gloria y San Diego. El clima de Petén es de tipo tropical cálido y húmedo, típico de tierras bajas en estas latitudes. Se caracteriza como tropical variable húmedo con época larga de lluvia y con época seca desarrollada pero de duración variable entre diciembre y mayo (SEGEPLAN 2003). Este departamento por el tipo de topografía existente en su terreno, cuenta únicamente con dos tipos de zona de vida vegetal, según la clasificación de Holdridge: a) Bosque muy húmedo subtropical y b) Bosque húmedo subtropical (SEGEPLAN 2003). Petén tiene 12 municipios: Dolores (3050 Km 2 ), Flores (4336 Km 2 ), La Libertad (7047 Km 2 ), Melchor de Mencos (823 Km 2 ), Poptún (1129 Km 2 ), San Andrés (8874 Km 2 ), San Benito (112 Km 2 ), San Francisco (320 Km 2 ), San José (2252 Km 2 ), San Luis (3000 Km 2 ), Santa Ana (1008 Km 2 ) y Sayaxché (3904 Km 2 ) (SEGEPLAN 2003).

23 4 La población total del departamento, según el censo del 2002, es de 366,735, representando el 3.27 por ciento del total nacional (SEGEPLAN 2003). Figura 1. Mapa del departamento de El Petén y sus municipios Fuente: Producción agrícola del departamento de El Petén Para el año 2003 la superficie dedicada a cultivos anuales o temporales (excepto pastos) en el departamento de El Petén ascendió a hectáreas, representando un 11.8% de su extensión territorial mientras que la extensión dedicada a cultivos permanentes y

24 5 semipermanentes fue de hectáreas, un 11.6% de su territorio. En total este departamento tiene cerca del 25% de su territorio cubierto con cultivos (INE 2004). El siguiente cuadro hace referencia a los principales productos agrícolas del departamento. Cuadro 1. Producción agrícola del departamento de El Petén, año agrícola Cultivo Superficie cosechada (Há) Producción (1X10 3 Kg) (ton) Acelga (Beta vulgaris) 4.55 Ajonjolí (Sensamun indicum) Achiote (Bixa Orellana) Aguacate (Persea americana) Arroz (en granza) (Oriza sativa) Anona (Annona Ayote (Cucúrbita pepo) Banano (Musa sapientum) Berenjena (Solanum melongena) Cacao (Theobroma cacao) Cultivo Frijol de otros colores (Phaseolus vulgaris) Frijol negro (Phaseolus vulgaris) Garbanzo (Cicer arietinum) Lechuga (Lactuca sativa) Superficie cosechada (Há) Producción (1X10 3 Kg) (ton) Limón (Citrus limon) Café (Coffea arabica) Camote (Ipomea batatas) Caña de Azúcar (Saccharum officinarum) Cebolla (Allium cepa) Chile picante (Capsicum frutescens) Chile pimiento (Capsicum annum) Coco (Cocos nucifera) Culantro (Eryngium foetidum) Ejote (Phaseolus vulgaris) Flores y plantas ornamentales Maicillo (para ensilaje) (Sorghum vulgare) Maíz amarillo (Zea mays) Maíz blanco (Zea mays) Maíz para ensilaje (Zea mays) Mango (Mangifera indica) Maní (Arachis hypogaea) Melón (Cucumis melo) Miltomate (Physalis philadelphica) Naranja (Citrus sinensis) Okra (Hibiscus esculentus) Papaya (Carica papaya) Pepino (Cucumis sativus) Pepitoria (Cucurbita pepo) Perejil (Petroselinum crispum) Piña (Ananas comosus)

25 6 Continuación cuadro 1 Cultivo Plátano (Musa paradisiaca) Rábano (Raphanus sativus) Remolacha (Beta vulgaris) Repollo (Brassica oleraceae var. Capitata) Rosa de Jamaica (Hibiscus spp.) Sandía (Citrillus lanatus) Superficie cosechada (Há) Producción (1X10 3 Kg) (ton) Cultivo Superficie cosechada (Há) Producción (1X10 3 Kg) (ton) Soya (Glycine max) Tabaco (en rama) (Nicotiana tabacum) Tomate (Lycopersicon esculentum) Yuca (Manihot esculenta) Fuente: IV Censo Nacional Agropecuario Zanahoria (Daucus carota) Uno de los cultivos que desde el año 2006 y principios del 2007 ha adquirido importancia para el departamento es la papaya (Carica papaya). Aunque según el cuadro anterior, la producción de este frutal reportada por el Censo Agrícola para el año fue modesta (720 toneladas comparadas con el total nacional para ese mismo año que fue de toneladas), la situación comenzó a cambiar drásticamente en los años siguientes a la publicación de este censo. Para el año 2005 se sembraron en todo el departamento de El Petén aproximadamente 75 hectáreas con papaya (Cigarroa 2006), llegando en el 2007 a cultivarse más de 200 hectáreas con esta fruta. Esto se traduce en un crecimiento de más del 500% en relación al año 2003 cuando se contabilizaban tan solo 39.2 hectáreas. Para el año 2007 han identificado 6 fincas con la mayor actividad comercial de papaya (C. papaya), siendo éstas: La Estancia, Misión Técnica Agrícola de Taiwán, Tikal Papaya 1, Tikal Papaya 2, Empresa Campesina Asociativa (ECA) El Porvenir y Cooperativa La Blanca. Las cinco primeras se encuentran localizadas en el municipio de La Libertad y la última en el municipio de Melchor de Mencos. Los materiales producidos son la variedad Maradol y el híbrido Tainung.

26 Petén como Área Libre de la Mosca de la Fruta Ceratitis capitata Todo el departamento de Petén, es reconocido por los gobiernos de Guatemala, México y Estados Unidos como un Área Libre de Ceratitis capitata (Mosca del Mediterráneo, por su nombre común). Gracias a ello, ciertas frutas cultivadas en esta área, puede exportarse sin ningún tratamiento cuarentenario a Estados Unidos (Cigarroa 2006). Las gestiones para lograr este reconocimiento se iniciaron en el año 1995 y no fue sino hasta en agosto del 2001 cuando MOSCAMED declaró la erradicación de Ceratitis capitata en este departamento (La Prensa 2001, Cigarroa 2006). En septiembre de ese mismo año Estados Unidos entrega el certificado por medio del cual se ratifica el estatus de Petén como Área Libre de la mosca del mediterráneo Ceratitis capitata (LaPrensa 2001). Para mantener este estatus se desarrollan actividades de cuarentena interna, cuarentena en puestos fronterizos, monitoreos, inspección de vehículos, control mecánico, aspersión terrestre, liberación de insecto estéril, entre otras. Las actividades son llevadas a cabo por diferentes instituciones como el Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA), el programa MOSCAMED, el Servicio de Protección Agropecuaria (SEPA), el Organismo Internacional Regional de Sanidad Agropecuaria (OIRSA), cuyo objetivo es el de evitar que la plaga de la mosca del Mediterráneo ingrese al área libre o a la barrera de contención Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA) Petén En 1994 se crea el Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación con sede y jurisdicción en el departamento de Petén según acuerdo gubernativo No de fecha 20 de junio de ese año, ubicándose en el lugar en donde a finales de 1989 se encontraban los laboratorios del Programa de Salud Animal (PRODESA) de Petén en la calle a las cuevas Actun Kan, Santa Elena de la Cruz, Flores (MAGA 2007). Esta entidad representa al Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA) en el departamento de Petén y sus funciones están orientadas a plantear y analizar opciones de solución a los problemas técnicos inherentes a las actividades de producción agrícola,

27 8 producción pecuaria y de alimentos, así como de coordinar la puesta en marcha de las acciones necesarias planteadas en la Agenda para el desarrollo sostenible de la agricultura y recursos naturales de esta región (MAGA 2007). A inicios del año 2007 el Viceministerio se integraba de la siguiente manera: oficinas administrativas, un módulo o bloque integrado por los laboratorios Zoosanitario y de Diagnóstico Fitosanitario y un área experimental perteneciente al Programa de Mejoramiento Genético de ganado vacuno. En diciembre del 2007 esta última área fue trasladada al nuevo Centro de Mejoramiento Genético en el municipio de la Libertad. También funciona dentro de las instalaciones del Viceministerio una oficina del Ministerio de Economía Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) en El Petén En el 2000 se establece el Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP Petén), como un órgano de ejecución del Viceministerio. Este programa fue creado en su momento para vigilar el comportamiento de las plagas agrícolas en la región y darle seguimiento a lo dispuesto en los Acuerdos Gubernativos , y Acuerdo Ministerial , referente al control de poblaciones de ratas de campo (Sigmodon hispidus) y langostas voladoras (Schistocerca piceifrons) surgidas a finales de la década de los 90 (MAGA 2007). Más adelante el Programa extendió sus monitoreos a plagas endémicas (Según la ley de sanidad vegetal y animal una plaga endémica es aquella que se encuentra en el país, sus efectos pueden ser moderados o graves, sobrevive en forma natural y ha sido reconocida oficialmente) como: mosca de la fruta (Anastrepha sp), chinche salivosa (Aeneolamia sp y Prosapia sp.) y gusano cogollero (Spodoptera frugiperda), langosta forestal (Tropridracris dux) y el gorgojo de los pinos (Dendroctonus sp.). También participa en la vigilancia de plagas exóticas (aquella plaga que no se encuentra en el país o que encontrándose no ha sido reconocida oficialmente, la cual al momento de ser detectada debe ser objeto de cuarentena) con monitoreos regulares principalmente en áreas limítrofes con México y Belice para la detección temprana de cochinilla rosada (Maconellicoccus hirsutus); Thrips

28 9 del melón (Thrips palmi); Pulgón negro de los cítricos (Toxoptera citricida), vector del virus de la tristeza de los cítricos; Myndus crudus, vector del fitoplasma del Amarillamiento Letal del Cocotero (UNR MAGA 2007). El Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) tiene como objetivo principal el proteger la producción agrícola de las plagas y enfermedades que la amenazan, contribuyendo a la reducción de las pérdidas de las cosechas al menor costo posible y con el mínimo riesgo de daño a la salud del hombre, sus animales y del medio ambiente que lo conforma (MAGA 2007). Desde el reconocimiento de Petén como área libre de la mosca del Mediterráneo (Ceratitis capitata), el PROMIP ha complementado las acciones del Programa de la Mosca del Mediterráneo (MOSCAMED) en zonas de producción de frutales monitoreando otras moscas de la fruta (como por ejemplo las del género Anastrepha) contempladas en el plan de trabajo para la exportación de papaya (Carica papaya) (MAGA 2007). Además el PROMIP ofrece capacitaciones y transferencia de tecnología relacionadas al manejo integrado de plagas a productores organizados en las diferentes zonas hortofrutícolas de la región (MAGA 2007). Para cumplir con su objetivo el PROMIP mantiene cobertura de todo el departamento por medio de cinco brigadas distribuidas de la siguiente forma: Brigada de campo Área Central: monitorea los municipios de Flores, San Benito, Santa Ana, San Francisco, San Andrés, San José y Melchor de Mencos; esta brigada aunque es la que atiende más municipios, su área es equivalente a la de las otras brigadas de campo debido a que los municipios de San Andrés, San José, Flores y Melchor de Mencos, tienen la mayor parte de su territorio bajo la vigilancia del Consejo Nacional de Áreas Protegidas (CONAP). Brigada Poptún: atendiendo a los municipios de Poptún y Dolores; Brigada de Campo San Luis: monitoreando el municipio de San Luis; Brigada de Campo Sayaxché: atiende al municipio de Sayaxché y

29 10 Brigada de Campo La Libertad: monitoreando el municipio del mismo nombre. Cada Brigada está conformada por un coordinador y un técnico. Las brigadas PROMIP monitorean de lunes a jueves y el día viernes lo dedican a planificar sus actividades para la semana siguiente. También se consideran como parte del PROMIP a las Brigadas Zoosanitarias, encargadas de vigilar el comportamiento de las enfermedades pecuarias en el departamento. El PROMIP es coordinado por un Ingeniero Agrónomo, responsable de mantener relación con otras entidades del MAGA como la Unidad de Normas y Regulaciones (UNR), El Programa de la Mosca del Mediterráneo (MOSCAMED), PROFRUTA, así como con líderes Comunitarios y otras instituciones afines tanto nacionales como internacionales con presencia en Petén con el fin de organizar actividades tendientes a evitar, retardar o erradicar plagas de importancia económica en el área. (MAGA 2007) Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario (LDF) Petén Uno de los principales problemas que enfrentó el PROMIP desde el inicio de sus actividades fue el hecho de no contar con un laboratorio en donde se realizaran los diagnósticos de las muestras colectadas. No fue sino hasta en el año 2006 cuando la Unidad de Normas y Regulaciones (UNR) del MAGA decide establecer un Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario en Petén con el propósito de realizar los diagnósticos de las muestras colectadas por las cinco brigadas fitosanitarias del PROMIP así como también el de prestar este servicio a particulares y empresas privadas que así lo soliciten. Este laboratorio se estableció en las instalaciones del Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación en Santa Elena y se convirtió desde ese momento en el tercero de los laboratorios de diagnóstico con que cuenta la Unidad de Normas y Regulaciones a nivel nacional. A finales del 2006 y principios del 2007 se realizaron remodelaciones y cambios en la infraestructura del laboratorio con el fin de mejorar las instalaciones y de este modo prestar un mejor servicio. Las nuevas instalaciones del laboratorio fueron entregadas el día 13 de abril del 2007.

30 Objetivos Objetivo general Establecer la situación actual del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén en función de los requerimientos básicos que un laboratorio debe tener. Objetivos específicos Definir las áreas de trabajo, recursos humanos y físicos con que cuenta el laboratorio. Describir los procesos de ingreso y análisis de muestras. Identificar los puntos críticos que pueden ocasionar problemas en el funcionamiento del laboratorio. Plantear las acciones necesarias para la resolución de los puntos críticos que afectan al laboratorio.

31 Metodología El diagnóstico del Laboratorio Fitosanitario MAGA Petén, ubicado éste en la sede del Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación, Calle a las Cuevas Actun Kan, Santa Elena, Flores, fue realizado como parte del Ejercicio Profesional Supervisado de la Facultad de Agronomía (EPSA) efectuado en los meses de marzo a diciembre del Fuentes primarias de información La obtención de información primaria se realizó por medio de entrevistas informales, guiadas éstas mediante un temario previamente elaborado, el cual abordó tópicos importantes según la ocupación de la persona entrevistada. Las entrevistas fueron dirigidas al personal relacionado de alguna manera con el funcionamiento del laboratorio: Cuadro 2. Personal entrevistado para la obtención de información primaria, MAGA Petén, año Personal entrevistado Coordinador del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) Coordinadores de Brigadas PROMIP Técnicos Brigadas PROMIP Secretaria Recepcionista Jefe de Laboratorio MAGA PETÉN y encargado de Laboratorio Zoosanitario Fuente: Ortiz Cardona, KA. Atribuciones Organizar y dirigir las actividades del programa Monitoreo y muestreo de plagas y enfermedades Monitoreo y muestreo de plagas y enfermedades Recepción de muestras para diagnóstico zoo y fitosanitarios. Ingresar las muestras al laboratorio y llevar registro de número correlativo Realizar diagnóstico zoosanitarios Temas de entrevista El siguiente temario fue utilizado como guía para la formulación de las preguntas de las entrevistas:

32 13 Monitoreo y muestreo: a. Frecuencia de muestreos b. Lugares que monitorean c. Criterios que utilizan para decidir el lugar que van a muestrear d. Cultivos Ingreso de muestras al laboratorio: a. Horario de atención b. Usuarios c. Servicios d. Protocolo de ingreso de muestras (boletas, datos de ingreso) e. Costos por servicios Elaboración de diagnósticos: a. Protocolo (procedimientos) b. Ubicación y dimensiones del laboratorio c. Equipo d. Cristalería e. Reactivos f. Inmobiliario Procesamiento de datos de laboratorio y estadísticas: a. Formato de informes de ingreso de muestras b. Formato de informe de emisión de resultados c. Estadísticas de ingresos de muestras para diagnósticos fitosanitarios Otras fuentes de información Se realizaron varios recorridos por las instalaciones del viceministerio para complementar la información obtenida a través de las entrevistas. También se tomaron fotografías de las instalaciones, el equipo, la cristalería y de las diversas actividades realizadas durante la elaboración del presente diagnóstico, muchas de las cuales constituyen material del presente documento.

33 14 Otra fuente de donde se obtuvieron datos importantes fue la revisión de literatura, la cual consistió básicamente en consulta de documentos como La Ley de Sanidad Vegetal y Animal y su reglamento, el documento de La Secretaría General de Planificación (SEGEPLAN) titulado Estrategia de reducción de la pobreza departamental, Petén. Oficinal Departamental de planificación. Región VIII Petén y el IV Censo Nacional Agropecuario, entre otros. También se consultaron fuentes electrónicas como el portal del Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA) Análisis de la información La información obtenida fue sintetizada en la sección de resultados de este documento, detallándose datos respecto a generalidades del laboratorio, los servicios que presta y los recursos con que cuenta éste para realizar tales actividades. Se enfatiza en aspectos de ubicación, servicios, horario de atención, infraestructura, mobiliario y equipo, cristalería, reactivos y recursos humanos. Se explica además el funcionamiento del laboratorio describiendo cada uno de los protocolos desde el ingreso, registro y procesamiento hasta la emisión de resultados de muestras. También se presentan algunas estadísticas de muestras recibidas durante el Posteriormente se analizaron los resultados, destacando algunos problemas que de una u otra forma pueden en un futuro afectar el funcionamiento del laboratorio. Para este análisis se partió del hecho que el laboratorio MAGA Petén es un laboratorio de diagnóstico fitosanitario y que por lo tanto debe dedicarse tanto a la determinación de plagas como de enfermedades que afectan principalmente a cultivos propios del área norte de Guatemala. También se consideró en este análisis que el laboratorio MAGA Petén tiene poco tiempo de haber sido establecido. Se eligió como problema principal del laboratorio la ausencia de un área de fitopatología. La metodología utilizada para el estudio de este problema fue la de Marco lógico mediante el uso de diagramas, el primero conocido como árbol del problema en donde se señalan las posibles causas que han ocasionado que aún no se cuente oficialmente con esta área. También en ese mismo diagrama se muestran los posibles efectos que se podrían tener en caso de seguir en la situación actual. También se utilizó un diagrama de objetivos en donde se citan además algunas acciones que podrían ayudar a resolver el problema.

34 Resultados A continuación se describe la información obtenida del diagnóstico del Laboratorio Fitosanitario MAGA Petén Localización El Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén se encuentra localizado en la calle a las Cuevas Actun Kan, Santa Elena de la Cruz, en el municipio de Flores, departamento de Petén. (MAGA 2007). Figura 2. Vista exterior del Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación Petén. Santa Elena, Flores. Marzo Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Unidad reguladora El Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA PETÉN se rige, al igual que el Laboratorio del Km. 22 y el de Quetzaltenango, bajo los estatutos de la Unidad de Normas y Regulaciones (UNR) de este Ministerio, quedando sujeto a las disposiciones que emita esta Unidad. (UNR2 2004). La UNR es la entidad oficial que mediante la prestación de servicios y tecnología, se encarga de aplicar normas claras y estables que contribuyan con la protección y desarrollo del patrimonio agropecuario (UNR 2004).

35 Servicios que presta el laboratorio y horarios de atención El laboratorio ha priorizado desde sus inicios por el servicio de diagnostico entomológico debido a la posición del departamento de Petén, considerado como zona frágil de ingreso potencial de plagas de importancia cuarentenaria. Durante el 2006 cuando fueron solicitados análisis fitopatológicos las muestras fueron enviadas al Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario del Km22. Otras fueron procesadas en el Laboratorio de Petén con base únicamente a observación de sintomatologías. El horario de atención al público es de 8 de la mañana a 5 de la tarde de lunes a viernes Costo por servicios El costo por servicio de diagnóstico es de US$ El usuario puede realizar su pago haciendo el depósito en Quetzales, según el cambio del día, en el Banco de Desarrollo Rural S.A (BANRURAL) a la cuenta a nombre de la Unidad de Normas y Regulaciones MAGA Infraestructura El Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario se encuentra dentro de las instalaciones del Viceministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación. Éste laboratorio junto con el Zoosanitario forman parte de un mismo módulo, pero cada uno tiene un área independiente para sus análisis. El módulo se divide en una oficina de ingreso de muestras donde se lleva el control de su número correlativo y se recibe además la boleta de pago de usuario (este último documento se solicita cuando se trata de personas o entidades privadas). Esta oficina le da ingreso también a las muestras del Laboratorio Zoosanitario y cumple las mismas funciones para éste. Después de esta oficina se encuentran dos Laboratorios de diagnóstico Zoosanitario, seguido de una bodega perteneciente a este laboratorio y por último el área del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario. El laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario tiene las siguientes dimensiones: 6 metros de largo por 5 metros de ancho. El área fue recientemente remodelada a finales del 2006, concluyéndose en abril del 2007 y aquí es donde se encuentra el equipo (estereoscopios, microscopios, computadoras, mesas de trabajo), cristalería, reactivos y demás materiales para la realización de los diagnósticos. Además el laboratorio cuenta con servicio de agua, electricidad, teléfono e Internet.

36 17 Figura 3. Vista interna del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Fotografía: Ortiz Cardona, KA Figura 4. Croquis del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Fuente: LDF Petén.

37 Equipo básico El laboratorio cuenta para realizar sus diagnósticos con el equipo básico siguiente: 1 microscopio marca Motic, 1 estereoscopio marca Wild, 1 estereoscopio marca Motic, 3 equipos de cómputo (CPU y monitor) dos de los cuales cuentan con software para toma de fotografías con estereoscopio y el microscopio Motic Cristalería, materiales y reactivos El laboratorio cuenta con un stock de cristalería y equipo que aparecen descritos en el siguiente cuadro: Cuadro 3. Listado de cristalería y equipo Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA, año 2007 DESCRIPCIÒN CANTIDAD DESCRIPCIÒN CANTIDAD Balanza contrapeso 1 unidad Mechero Bunsen 5 unidades Balanza monoplato 1 unidad Morteros 18 unidades Balón aforado 200 ml 4 unidades Papel filtro 293 mm 5 cajas de 25 unidades c/u Balón aforado 250 ml 14 unidades Papel filtro 265 mm 1 caja de 100 unidades Balón aforado 500 ml 11 unidades Papel filtro milipore 1 frasco de 100 unidades Beaker 10 ml 9 unidades Papel filtro No.1 (185 mm) 3 cajas Beaker 100 ml 1 unidad Papel Filtro No.2 (100 mm) 1 caja de 100 unidades Beaker 250 ml 2 unidades Pipeta Mhor 25 ml 7 unidades Beaker 4000 ml 1 unidad Pipeta Pasteur de vidrio 1 bolsa Beakers 100 ml 23 unidades Pipeta Pasteur de vidrio 744 unidades Beakers 1000 ml 2 unidades Pipeta Pasteur plástica 1 bolsa Beakers 250 ml 23 unidades Pipetas volumétricas 1 ml 21 unidades Beakers 30 ml 7 unidades Pipetas volumétricas 10 ml 24 unidades Beakers 50 ml 21 unidades Pipetas volumétricas 2 ml 22 unidades Bureta 250 ml 2 unidades Pipetas volumétricas 5 ml 30 unidades Cajas de Petri Pizetas 2 unidades Cubreobjetos 85 cajas Potenciómetros 2 kits 22 X 22 mm Embudos de vidrio 6 unidades Probeta 1000 ml 1 unidad Erlenmeyer 1000 ml 4 unidades Probeta 500 ml 5 unidades Erlenmeyer 1000 ml 15 unidades Probetas 10 ml 11 unidades Erlenmeyer 1000 ml 2 unidades Probetas 100 ml 5 unidades (con tapón de rosca) Erlenmeyer 125 ml (con tapón) 21unidades Probetas 25 ml 5 unidades Erlenmeyer 250 ml 19 unidades Probetas 50 ml 14 unidades Erlenmeyer 50 ml 21 unidades Tamiz No. 100 (150 micras) 1 unidad

38 19 Continuación cuadro 4 DESCRIPCIÓN CANTIDAD DESCRIPCIÓN CANTIDAD Erlenmeyer 500 ml 28 unidades Tamiz No. 20 (850 micras) 2 unidades Erlenmeyer 500 ml 1 unidad Tamiz No. 200 (75 micras) 2 unidades Espátulas 8 unidades Tamiz No. 400 (38 micras) 2 unidades Esterilizador para hazas 1 unidad Tamiz No. 500 (25 micras) 2 unidades Estufa con agitador magnético 1 unidad Termómetro 0-230ºF (-20 a 110ºC) 1 unidad Frascos de polietileno 21 unidades Termómetro 0-260ºC 1 unidad Frascos de vidrico color ámbar 67 unidades Tubos de ensayo de 100 X 16 mm 1 caja Frascos de vidrio con tapón de rosca Gradillas de metal Láminas portaobjetos Lentes bifocales de aumento Fuente: Ortiz Cardona, KA. 211 unidades Vernier 8 unidades 3 unidades 10 cajas de 50 unidades/caja 23 unidades Vidrio de reloj de 100 mm de diámetro Vidrio de reloj de 125 mm de diámetro Vidrios de reloj de 80 mm de diámetro 1 caja de 13 unidades 1 caja 1 caja de 15 unidades El cuadro siguiente enumera los reactivos con que cuenta el Laboratorio. Cuadro 4. Listado de reactivos, Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA REACTIVO Petén, año 2007 NÙMERO DE ENVASES CANTIDAD POR ENVASE REACTIVO NÙMERO DE ENVASES CANTIDAD POR ENVASE 1,4-diclorobenceno 1 1 kg Fosfato ácido de sodio anhídro g Aceite de inmersión ml Fucsina g Acetato de etilo 1 1 L Gelatina para microbiología g Acetona ml Glicerol (87%) ml Ácido acético glacial L Goma arábiga 5 bolsas Ácido nicotínico g Goma arábiga 1 1 kg Agar EMB g Hidróxido de potasio g Agar noble g Hidróxido de potasio 1 1 Kg Agar nutritivo 2 500g Hidróxido de sodio 1 1 Kg Agar-Agar 1 1 kg Hidróxido de sodio g Agua desmineralizada 1 1 galón Lugol ml Alcohol Isopropílico 8 1 galón Nitrato de plata 1 25 g Alcohol Isopropílico (99%) 8 1L Nitrato de potasio g Benzoato de sodio 1 1 galón Nitrato de sodio g Caldo lactosa g Peptona de caseína 1 1kg Carbonato de calcio g Solución concentrada alcalina 1 4 L

39 20...Continuación cuadro 4 REACTIVO NÙMERO DE ENVASES CANTIDAD POR ENVASE REACTIVO NÙMERO DE ENVASES CANTIDAD POR ENVASE Cloruro de calcio dihidratado g Solución de yodo 1 1 galón Cloruro de cobalto (II) Solución fijadora para No g 3 hexahidratado láminas citología especificada Cloruro de sodio g Sulfato de magnesio heptahidratado g D(-)-manita g Sulfato de streptomycina g D(+)-glucosa 1 1kg Verde de malaquita (oxalato) 1 25 g Etanol ml Xileno 1 4 L Etilenglicol 1 1 L Yodo g Formaldehído en solución (37%) Fuente: Ortiz Cardona, KA L Yoduro de potasio g Recursos humanos En el módulo conformado por los Laboratorios Fito y Zoosanitario desempeñan sus funciones un total de cinco personas (dos de las cuales comparten sus funciones en ambos laboratorios) con los siguientes cargos: Secretaria recepcionista (Laboratorio Fito y Zoosanitario) Secretaria administrativa (Laboratorio Fito y Zoosanitario) Técnico (Laboratorio Zoosanitario) Jefe general del Laboratorio MAGA Petén y encargado del Laboratorio Zoosanitario Encargada del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario. Las atribuciones del personal perteneciente al Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario aparecen descritas a continuación: Secretaria recepcionista Tiene bajo su cargo las siguientes funciones: Recibir las muestras tanto de las brigadas del PROMIP como de empresas privadas o personas individuales. Llevar el orden correlativo de las muestras que están ingresando al laboratorio Entregar los resultados de los diagnósticos a los interesados. Llevar control de cristalería entregada a las brigadas del PROMIP.

40 21 Realiza su trabajo en la oficina de recepción de muestras y por lo tanto recibe también las muestras del laboratorio Zoosanitario. Secretaria administrativa Se encarga de llevar el control financiero por concepto de ingreso de muestras al laboratorio. Realiza su trabajo en la oficina de recepción de muestras. Se encarga también de llevar el mismo control para el laboratorio Zoosanitario. Personal técnico y de diagnóstico El laboratorio cuenta con una profesional encargada del área entomológica que al mismo tiempo es la encargada del laboratorio. Sus atribuciones son las siguientes: Procesar las muestras previo al diagnóstico Realizar los diagnósticos Emitir los resultados. Lleva el control de las estadísticas de las muestras procesadas. Oficialmente no se presta el servicio de análisis fitopatológico debido a que no hay un profesional encargado específicamente de esta área Protocolos Ingreso de muestras Cada muestra procesada en el laboratorio pasa primero por la oficina de ingreso. Aquí es recibida por la secretaria junto a un protocolo de ingreso, el cual consiste en una boleta de información con los principales datos de la muestra, la cual se llena previamente, y en donde se solicita información como finca, nombre del propietario, localización, cultivo, extensión, sintomatología, datos del tiempo atmosférico en el momento de muestreo, entre otros. Si la muestra pertenece a una persona particular o una empresa privada entonces se le pide además la boleta de pago por el servicio solicitado. Registro de la muestra Al momento de ser ingresada una muestra ésta es registrada con un código, según pertenezca a las brigadas del PROMIP o a particulares. En el primer caso se utiliza un código consistente en las iniciales SVP (Servicio de Vigilancia Petén) seguido del correlativo de la muestra (001, 002) y por último el año separado por un guión, por ejemplo SVP Para el caso de muestras de particulares, éstas llevan únicamente el correlativo y año, sin las iniciales SVP, anotándose en un registro diferente.

41 22 Este código se anota en el protocolo o boleta de ingreso de la muestra (registro físico) y también se lleva un registro electrónico de las mismas. Procesamiento de las muestras Después de ingresada la muestra el procedimiento a seguir depende del tipo análisis requerido. En el caso de análisis entomológicos existe un protocolo ya establecido en donde las muestras deben conservarse en alcohol etílico o isopropílico al 70%. Para cochinillas, áfidos, ácaros y trhips el procedimiento consiste en observación al estereoscopio, elaboración de montajes con diversos reactivos (Hoyer, Fucsina ácida, aceite de clavo, etc.) y observación al microscopio. Para moscas de la fruta y demás insectos únicamente se observan al estereoscopio y en algunos casos se hacen disecciones y montajes de la genitalia de la hembra. Para casos fitopatológicos, como no es un servicio que se preste oficialmente, sólo se realizaban observaciones y diagnósticos en base a sintomatologías típicas. Emisión de resultados Los resultados de los análisis son emitidos por el laboratorio en forma escrita, en hoja membretada con firma de la encargada del laboratorio, y por el coordinador del PROMIP. Los resultados son referidos únicamente a las muestras analizadas en el laboratorio. En esta hoja también se adjuntan datos como cultivo, extensión, localización, finca, el resultado y en ciertos casos se dan recomendaciones. Estos resultados también se registran en forma electrónica y en forma física Estadísticas de las muestras procesadas durante el año 2006 Durante su primer año de funcionamiento del laboratorio se ingresaron 330 muestras, de las cuales el 98% correspondieron a diagnósticos entomólógicos y acarológicos. El ingreso y procesamiento de muestras durante ese año estuvo marcado en parte por muestreos intensivos enfocados a monitorear poblaciones de trips en el departamento. Muestras colectadas por las Brigadas del PROMIP En el 2006 se ingresaron y procesaron 330 muestras. De éstas el 85.7% fueron colectadas por las cinco brigadas del PROMIP y el restante 14.3% pertenecen a particulares, empresas privadas o a instituciones gubernamentales.

42 Dolores Flores La Libertad Melchor Poptún Santa Ana San Andrés San Benito San Francisco San José San Luis Sayaxché Fray Bartolomé Cobán Chisec Playa Grande Ixcán 23 Tipo de análisis realizados En el 2006 solo un 2.4% de las muestras ingresaron para análisis fitopatológico mientras que el restante 97.6% lo hizo para análisis entomológicos o acarológicos. Procedencia de las muestras El laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén tiene cobertura, no solo en este departamento, sino también en la zona norte del país. Así lo demuestran las estadísticas del año 2006 en donde se efectuaron análisis de muestras procedentes de Quiché y Alta Verapaz. Un total de 278 muestras de las 330 procesadas durante el año 2006 pertenecieron a municipios del departamento de Petén, esto equivale a un 84.2%. El restante porcentaje se distribuyen en municipios del departamento de Alta Verapaz (13.6%) y Quiché (2.1%). La distribución completa de estas muestras aparece descrita en la siguiente gráfica y su respectiva tabla. PORCENTAJE DE MUESTRAS INGRESADAS AL LABORATORIO SEGÚN MUNICIPIO DE PROCEDENCIA DURANTE EL AÑO 2006 % MUNICIPIOS Figura 5. Procedencia de las muestras recibidas por el LDF Maga Petén en el año 2006 En la gráfica aparecen en color amarillo los municipios del departamento de Petén, en naranja los municipios del departamento de Alta Verapaz y en púrpura los pertenecientes al departamento de Quiché. Fuente: Ortiz Cardona, KA. con base en los datos del LDF Petén.

43 24 Cuadro 5. Procedencia de muestras por municipio y por departamento recibidas por el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén durante el año 2006 No. muestras Municipio por municipio % Departamento 1 Dolores Flores La Libertad Melchor Poptún Santa Ana San Andrés San Benito San Francisco San José San Luis Sayaxché Fray Bartolomé Cobán Chisec No. muestras por departamento Petén Alta Verapaz Playa Grande Quiché Ixcán Total Total Fuente: Registros del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén del año % Identificación de problemas Una de las principales razones por las cuales el número de muestras ingresadas directamente por particulares es bajo (14.3% en el 2006) es la poca divulgación que hasta el momento ha tenido el laboratorio y que ha ocasionado desconocimiento por parte de los agricultores del departamento de El Petén de la existencia de un laboratorio de diagnóstico fitosanitario. Esto podría deberse a que el laboratorio es de reciente establecimiento y aún no está a un 100% de su capacidad. El laboratorio presenta deficiencias en cuanto a literatura especializada en el área entomológica (claves para determinación de géneros y especies de insectos por ejemplo), reactivos, no contar con un área fitopatológica. Para el análisis de los resultados del diagnóstico se tuvieron en cuenta dos aspectos fundamentales:

44 25 Árbol del problema: causas y efectos Se identificó como problema central la situación que el laboratorio no realice diagnósticos fitopatológicos. En base a esta problemática se construyó un árbol de causas y efectos, el cual se puede observar en la figura 6. En este esquema se identificaron en la parte de abajo, al igual que las raíces de un árbol, las principales causas del porqué el laboratorio no realiza análisis fitopatológicos. Estas causas se pueden resumir en: La poca divulgación del laboratorio a usuarios potenciales: lo cual es un factor que incide en que no hayan ingresos de muestras para estos análisis. Falta más información de temas fitopatológicos a personal de campo del PROMIP para que se colecten muestras con síntomas de enfermedades. Aspecto que también influye en la falta de muestras para análisis fitopatológicos. La falta de reactivos para estos análisis: No se cuenta con reactivos como lactofenol azul, blanco y rojo No se cuenta todavía con literatura fitopatológica especializada. Faltan claves para identificación de hongos anamórficos, ascomicetos, basidiomicetes, literatura de bacterias y nemátodos. Tampoco se cuenta con manuales de procedimiento que se puedan utilizar como guía de referencia. No se cuenta con documentación descriptiva ni fotográfica de enfermedades en cultivos de Petén que demuestren la necesidad de este servicio. Esta falta de evidencia escrita o fotográfica crea desconocimiento de la situación de las enfermedades en la región y puede hacer pensar en que no es necesario que el laboratorio preste el servicio de diagnóstico fitopatológico. Falta personal de laboratorio: Al momento de realizar este diagnóstico, el laboratorio cuenta con una sola persona (el encargado de laboratorio) quien prepara, procesa y diagnostica las muestras que ingresan al laboratorio. Además lleva el registro de las estadísticas de los resultados de las muestras. Esto ha hecho que se priorice más por el área entomológica debido a que una sola persona no puede encargarse de todos los análisis del laboratorio tanto los entomológicos como los fitopatológicos. Poco espacio. El espacio asignado al laboratorio es reducido lo que provoca que se realice un solo tipo de diagnóstico (entomológico). Esto debido a que no es

45 26 recomendado realizar análisis fitopatológicos de hongos, bacterias y nemátodos en la misma área en donde se efectúan los análisis entomológicos. En la parte de arriba del árbol se identificaron los efectos que se podrían esperar de seguir con la situación de no prestar el servicio de diagnóstico fitosanitario. Algunos de estos escenarios son imaginarios pero tienen probabilidad de ocurrir. Dentro de estos efectos se pueden incluir los siguientes: Las muestras para diagnósticos fitopatológicos se analizarían en otros laboratorios fuera del departamento de El Petén. Esto a su vez ocasionaría aumento en los costos de producción para el agricultor que necesita el análisis debido al transporte de la muestra desde El Petén hacia el laboratorio. También con esta situación el laboratorio se vería afectado, pues dejaría de recibir los ingresos de esos análisis no realizados. El laboratorio podría perder credibilidad. Esto debido a que el LDF Petén es un laboratorio fitosanitario que se encuentra en un departamento limítrofe donde el conocimiento de plagas y enfermedades de importancia cuarentenaria es primordial. Por lo tanto debe tener la capacidad de identificar plagas insectiles y fitopatógenos. Para los agricultores que no podrían enviar las muestras a otros laboratorios, desconocerían los verdaderos patógenos que afectan sus cultivos, lo que ocasionaría la aplicación de inadecuados planes de manejo o en otros casos se tendrían altas tasas de enfermedades. En ambas situaciones se tendría reducción de rendimiento y pérdidas económicas. Árbol de objetivos: medios y fines Tomando como base el árbol de causas y efectos (figura 6) se cambiaron los factores negativos por positivos y se obtuvo el árbol de objetivos (figura 7). Ahora el objetivo buscado es que el laboratorio realice diagnósticos de enfermedades ocasionadas por hongos, bacterias y/o nemátodos Para lograr este objetivo es necesario que el laboratorio pueda contar los siguientes medios: Existe una divulgación del laboratorio a usuarios potenciales. Esto es necesario para que se ingresen muestras para análisis fitopatológicos

46 27 El personal de campo del PROMIP tiene sólidos conocimientos de temas fitopatológicos. También es necesario para un mayor ingreso de muestras para análisis fitopatológicos Se cuenta con literatura fitopatológica especializada. Se tienen manuales de procedimiento para diagnóstico de fitopatógenos. Se tiene la documentación que justifique la necesidad del servicio de diagnóstico fitosanitario. Se cuenta por lo menos con un analista exclusivamente para análisis fitopatológicos y otro para diagnósticos entomológicos. Se cuenta con mayor espacio en el laboratorio para poder asignar un área para cada tipo de diagnóstico: entomológicos y fitopatológicos. Al alcanzar el objetivo buscado se pretende alcanzar los siguientes fines: Las muestras para diagnósticos fitopatológicos se analizarían en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén. Con esto no aumentarían los costos de producción para el agricultor que necesita de este tipo de diagnóstico pues no debe enviar las muestras a otros laboratorios fuera del departamento. El laboratorio se beneficiaría también porque recibe más ingresos por concepto de análisis fitopatológicos. El laboratorio ganaría más credibilidad. Esto debido a tiene la capacidad de identificar plagas insectiles y fitopatógenos de importancia para el departamento. Los agricultores podrían conocer mejor los verdaderos patógenos que afectan sus cultivos, podrían mejorar la aplicación de planes de manejo y reducir las tasas de enfermedades. Se mejoraría el rendimiento de sus cosechas y aumentaría sus beneficios económicos.

47 28 Los cuadros en tonos lila representan los efectos potenciales que podrían esperarse si el laboratorio continúa en la situación de no realizar diagnósticos fitopatológicos Los cuadros en tonos amarillos representan las posibles causas por las cuales el laboratorio no ofrece el servicio de diagnóstico fitopatológico El Problema Figura 6. Árbol de causas y efectos para el problema detectado en el LDF Petén a principios del año Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. con información obtenida del diagnóstico.

48 29 Los cuadros en tono celeste representan los fines que se esperan conseguir cuando se cumpla el objetivo, en este caso que el laboratorio efectúe diagnósticos fitosanitarios Los cuadros en tonos naranja representan los medios necesarios para lograr el objetivo buscado Figura 7. Árbol de medios y fines para el objetivo buscado. Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA.

49 30 Figura 8. Árbol de acciones para conseguir los medios necesarios y cumplir el objetivo buscado Fuente: Ortiz Cardona, KA. Al analizar la figura anterior se observan que existen varias acciones que pueden ayudar a solucionar el problema. De éstas se seleccionaron 5 como parte de los servicios e investigación del Ejercicio Profesional Supervisado de la Facultad de Agronomía. Estas acciones aparecen descritas en el cuadro 6. Las acciones que quedan directamente a disposición de las autoridades del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario son: Adquirir reactivos necesarios para realizar diagnósticos fitosanitarios, adquirir literatura especializada principalmente claves de identificación, contratar permanentemente personal para preparación de muestras y especialistas para diagnósticos, y aumentar el espacio disponible para el laboratorio.

50 31 Cuadro 6. Planificación de acciones realizadas como parte del EPS Acción Tipo de Actividad dentro del programa de EPS Medio que busca alcanzar Diagnóstico de enfermedades ocasionadas por hongos en un cultivo de importancia económica para Petén. En este caso el cultivo seleccionado fue la papaya (Carica papaya) por tratarse de un cultivo de exportación cuya área sembrada ha aumentado de 39.2 en el año 2003 (INE 2004) a más de 200 hectáreas en 2007 (según muestreos de reconocimiento). Investigación Proporcionar al laboratorio de documentación de enfermedades en cultivos de El Petén que justifiquen la necesidad del servicio de diagnóstico fitopatológico Ubicación de lugares con problemas potenciales de enfermedades en cultivos y colecta de material vegetal enfermo Procesamiento de muestras ingresadas al laboratorio Documentación descriptiva y fotográfica de enfermedades ocasionadas por hongos en cultivos de El Petén Compilación de un manual de procedimientos para ingreso de muestras y diagnóstico de enfermedades ocasionadas por fitopatógenos Presentación de temas fitopatológicos a personal de campo Fuente: Ortiz Cardona, KA. Servicio Servicio Servicio Servicio Servicio Proporcionar al laboratorio evidencias de problemas en cultivos de la región Ingresar muestras para análisis fitopatológicos al laboratorio. Proporcionar provisionalmente apoyo técnico para el diagnóstico fitopatológico Evidenciar la necesidad de realizar diagnósticos fitopatológicos Proporcionar una guía que pueda ser utilizada al efectuar diagnósticos fitopatológicos Aumentar los conocimientos fitopatológico del personal de campo Aumentar el número y la calidad de muestras que ingresan para análisis fitopatológicos

51 Conclusiones y recomendaciones El laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén ha priorizado por los análisis entomológicos y acarológicos. Se debe destacar como situación potencial de problema el hecho que el Laboratorio no cuente con un servicio de diagnóstico fitopatológico. Dentro de las acciones para ayudar a resolver el problema se tienen las siguientes: Realizar investigación acerca de enfermedades en cultivos de importancia económica para Petén; ubicación de áreas con potencialidad de problemas fitopatológicos en la región, inicio a pequeña escala de diagnósticos fitopatológicos, elaboración de un manual de procedimiento para ingreso y procesamiento de material vegetal para diagnóstico de fitopatógenos, Realizar documentación descriptiva y fotográfica de enfermedades para referencia Realizar presentaciones para brigadas sobre temas de fitopatología, Se hace necesario que el LDF MAGA Petén cuente con un área de fitopatología como complemento del área entomológica y acarológica. Las evidencias de esta conclusión se presentan a lo largo de este documento Se recomienda a las autoridades encargadas del LDF Petén se tome en cuenta las siguientes medidas para establecer de manera oficial el área de diagnósticos fitopatológicos: Proporcionar reactivos necesarios para realizar diagnósticos fitosanitarios, proporcionar literatura especializada principalmente claves de identificación, contratar permanentemente personal para preparación de muestras y especialistas para diagnósticos, y aumentar el espacio disponible para el laboratorio.

52 Bibliografía 1. Cigarroa, EP Misión técnica agrícola de la república de China, una oportunidad de desarrollo para Guatemala: proyecto de papaya en el Petén. Tesis Licda. Rel. Internac. Guatemala, USAC, Escuela de Ciencias Políticas. 62 p. 2. Guerra Sicán, T Informe final de diagnóstico, servicios e investigación desarrollados en el Centro de Diagnóstico Parasitológico de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Guatemala, USAC, Facultad de Agronomía, Instituto de Investigaciones Agronómicas. 193 p. 3. INE (Instituto Nacional de Estadística, GT) IV censo nacional agropecuario: número de fincas censales, superficie cosechada, producción obtenida de cultivos anuales o temporales y viveros. tomo 2. 1 CD. 4. La Prensa, PA Guatemala, libre de la mosca del mediterráneo (en línea). Panamá.Consultado 20 mayo 2007 Disponible 5. MAGA (Ministerio de Agricultura Ganadería y Alimentación, GT) Portal del Viceministerio de asuntos de Petén. Guatemala. Consultado 12 julio Disponible en: 6. Oficina de Planificación Municipal, Municipalidad de La Libertad, Petén, GT s.f. Sistema de información geográfica (SIG) como herramienta de planificación municipal. Guatemala. Consultado 20 mayo Disponible en: 7. RIC (Registro de Información Catastral, GT) Diagnóstico de propiedad del departamento de Petén: documentos jurídicos 7 (en línea). Guatemala. 103 p. Consultado 20 mayo Disponible en: 8. SEGEPLAN (Secretaria General de Planificación, Oficinal Departamental de Planificación, región VIII, GT) Estrategia de reducción de la pobreza departamental, Petén (en línea). Petén, Guatemala. Consultado 20 mayo Disponible en: 9. Unidad Técnica Municipal del Municipio de Melchor de Mencos, Petén, GT Caracterización del municipio de Melchor de Mencos, Petén (en línea). Guatemala. Consultado 20 mayo Disponible en:

53 ANEXOS 34

54 35 ANEXO 1. BOLETA FITOSANITARIA UTILIZADA EN EL INGRESO DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN Figura 9A. Boleta fitosanitaria utilizada por el LDF Petén Fuente: LDF Petén

55 36 ANEXO 2. LISTADO DE NOMBRES CIENTÍFICOS UTILIZADOS EN EL DOCUMENTO Nombre común Nombre científico Nombre común Nombre científico aceituna Olea europaea limón persa Citrus latifolia aguacate Persea americana maíz Zea mayz albaricoque Prunus armeniaca mamey Mammea americana almendro Prunus dulcis mandarina Citrus reticulata anona Annona muricata mango Mangifera indica ayote Cucurbita pepo mangostán Garcinia mangostana banano Musa sapientum mansanilla Matricanria recutita berenjena Solanum melongena manzana Malus sylvestiris brizantha Brachiaria brizantha manzana rosa Syzigium jabos cacao Theobroma cacao maracuyá Pasiflora edulis café Coffea arabica Marañón Anacardium occidentale caimito Crysophyllum cainito matasano Casimiroa edulis calomondín Citrofortunella mitis melocotón Prunus persica capulín Prunus serotina subsp. capuli melón Cucumis melo carambola Averrhoa spp membrillo Cydonia oblonga cereza Prunus avium mora Morus nigra cericote Cordia dodecandra nance Byrsononima crassifolia chicozapote Manilkara zapota naranja agria Citrus aurantium chile Capsicum annum naranja dulce Citrus sinensis chincuya Annona purpurea naranja trifoliada Citrus spp. Chipilín Crotallaria longirostrata níspero Eriobotrya japonica chirimoya Annona cherimola papauce Annona sp. ciruela Prunus domestica palma Dypsis lutescens coco Cocos nucifera papaya Carica papaya cuajilote Parmentiera aculeata pepino Cucumis sativus cushin Inga paterna pepitoria Cucurbita maxima durazno Prunus persica pera Pyrus communis frambuesa Rubus idaeus persimón Diospuros kaki fresa Fragaria vesca pino Pinus sp ftijol Phaseolus vulgaris piña Ananas comosus frijol abono Mucuna prunens pitahaya Hylocereus triangularis fruta de pan Artocarpus altilis pitanga Eugenia uniflora granada Punica granatum plátano Musa paradisiaca grumichama Eugenia brasilensis pomarrosa Syzigium jabos guanaba Annona muricata pomelo Citrus paradissi guaya Melicoccus bijugatus rambután Nephelium lappaceum guayaba Psidium guajaba sandía Citrullus sp. guinda Inga edulis sunza Lycania platypus higo Ficus carica tamarindo Tamarindus indica icaco Chrysobalanus icaco tomate Lycopersicon esculentum izote Yucca elephantipes toronja Citrus maxima jocote Spondias spp. tuna Opuntia ficus kiwi Actidinia chinesis uva Vitis vinifera lima Citrus aurantiifolia yuca Manihot esculentum limón Citrus limon zapote Pouteria sapota

56 37 ANEXO 3. LOS PUESTOS DE CUARENTENA EN PETÉN Son puestos de control ubicados en diferentes carreteras del departamento, donde la fruta de cuarentena total se decomisa y la fruta de cuarentena parcial se trata cuando se transporta en cantidades comerciales y se decomisa cuando se transporta en cantidades no comerciales. El objetivo de los Puestos de Cuarentena, es el evitar que la plaga de la mosca del Mediterráneo ingrese al área libre o a la barrera de contención. En el departamento de Petén se manejan dos tipos de Puestos, los de cuarentena interna y los de cuarentena externa. Los primeros, son puestos localizados para inspeccionar el transporte de fruta dentro del departamento. Estos son: El de Los Olivos en Sayaxché, el de Canchacán en Poptún y el de Poite en San Luis. El Puesto de Cuarentena Externa se encuentra a cargo del Servicio de Protección Agropecuaria (SEPA) y el Organismo Internacional Regional de Sanidad Agropecuaria (OIRSA) y se encuentra ubicado en el municipio de Melchor de Mencos, en la frontera con Belice. Dentro de los puestos de cuarentena se manejan tres categorías de clasificación para la fruta, en función de la cual se decide si la fruta debe ser decomisada o no. Esta clasificación es la siguiente: Fruta bajo cuarentena total: No se permite la entrada en ninguna cantidad ni bajo ninguna circunstancia por lo que es decomisada en los puestos de cuarenta. En esta categoría se encuentran: café en cereza (Coffea arabica), caimito (Crysophyllum cainito), guayaba (Psidium guajaba), pera (Pyrus communis) y naranja agria (Citrus aurantium). Fruta bajo cuarentena parcial: Lo cual quiere decir que en grandes cantidades es tratada y en pequeñas cantidades es decomisada. En esta categoría se encuentran: Marañón (Anacardium occidentale), anona (Annona muricata), chirimoya (Annona cherimola), chincuya (Annona purpurea), guanaba (Annona muricata), papauce (Annona sp.), fruta de pan (Artocarpus altilis), carambola (Averrhoa spp.), nance (Byrsononima crassifolia), matasano (Casimiroa edulis), icaco (Chrysobalanus icaco), calamondín (Citrofortunella mitis), lima (Citrus aurantiifolia), pomelo (Citrus paradissi), toronja (Citrus maxima), mandarina (Citrus reticulata), naranja dulce (Citrus sinensis), manzanilla (Matricanria recutita), persimón (Diospuros kaki), níspero (Eriobotrya

57 38 japonica), pitanga (Eugenia uniflora), grumichama (Eugenia brasilensis), manzana rosa (Syzigium javos), higo (Ficus carica), cuchin (Inga paterna), sunza (Lycania platypus), manzana (Malus sylvestiris), mamey (Mammea americana), mango (Mangifera indica), chicozapote (Manilkara zapota), tuna (Opuntia ficus), cuajilote (Parmentiera aculeata), naranja trifoliada (Citrus sp.), zapote (Pouteria sapota), albaricoque (Prunus armeniaca) melocotón ( Prunus pérsica), cereza (Prunus avium), capulin (Prunus serotina subsp. capulí), ciruela (Prunus domestica), durazno (Prunus pérsica), granada (Punica granatum), jocote (Spondias spp.), pomarrosa (Syzigium javos), guaya (Melicoccus bijugatus), almendro (Prunus dulcis), uva (Vitis vinifera). Frutas de libre circulación: Entrada libre sin ninguna restricción. En esta categoría se encuentran principalmente: aceituna (Olea europaea), aguacate (Persea americana), ayote (Cucurbita pepo), banano (Musa paradisiaca), plátano (Musa sapientum), berenjena (Solanum melongena), pepino (Cucumis sativus), tomate (Lycopersicon esculentum), coco (Cocos nucifera), chile (Capsicum annum), fresa (Fragaria vesca), frambuesa (Rubus idaeus), mora (Morus nigra), maracuyá (Pasiflora edulis), guinda (Inga edulis), kiwi (Actidinia chinesis), limón (Citrus limon), limón persa (Citrus latifolia), melón (Cucumis melo), mangostán (Garcinia mangostana), membrillo (Cydonia oblonga) papaya (Carica papaya), piña (Ananas comosus), pitahaya (Hylocereus triangularis), rambután (Nephelium lappaceum), sandía (Citrullus lanatus), tamarindo (Tamarindus indica).

58 39 CAPÍTULO II DIAGNÓSTICO PRELIMINAR DE ENFERMEDADES OCASIOANDAS POR HONGOS EN EL CULTIVO DE PAPAYA (Carica papaya) EN 6 FINCAS LOCALIZADAS EN LOS MUNICIPIOS DE LA LIBERTAD Y MELCHOR DE MENCOS DEL DEPARTAMENTO DE EL PETÉN AN EXPLORATIONS STUDY OF FUNGAL DISEASES ON PAPAYA (Carica papaya) IN 6 FARMS OF LA LIBERTAD AND MELCHOR DE MENCOS, EL PETÉN CAPÍTULO 2 DIAGNÓSTICO PRELIMINAR DE ENFERMEDADES OCASIONADAS POR HONGOS EN EL CULTIVO DE PAPAYA (Carica papaya) EN 6 FINCAS LOCALIZADAS EN LOS MUNICIPIOS DE LA LIBERTAD Y MELCHOR DE MENCOS DEL DEPARTAMENTO DE EL PETÉN.

59 Presentación La papaya (Carica papaya) es uno de los frutales con mayor potencial de producción en el departamento de El Petén, situación derivada de la posibilidad de cultivarse en una zona libre de mosca del mediterráneo Ceratitis capitata, lo que le permite tener la ventaja de exportarse sin tratamiento cuarentenario a Estados Unidos. En marzo del 2007 se efectuó un reconocimiento preliminar de campo en cinco fincas productoras de papaya (C. papaya) en el departamento de El Petén, en el cual se detectaron problemas de enfermedades ocasionadas por hongos. En la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos no aparecían publicadas, hasta esa fecha, investigaciones acerca de enfermedades de papaya (C. papaya) en este departamento. Se realizó entonces una investigación de tipo descriptiva y de diagnóstico en la cual se determinaron los géneros de hongos fitopatógenos para el cultivo comercial de papaya (C. papaya) en el área central del departamento del Petén, su nivel de incidencia y severidad in situ. En total se efectuaron 35 muestreos en los cuales se colectaron cerca de 225 muestras en 6 fincas localizadas en la región central del departamento, siendo éstas: Cooperativa La Blanca, en el municipio de Melchor de Mencos; Empresa Campesina Asociativa (ECA) El Porvenir, La Estancia, Misión Taiwán, Tikal Papaya 1 y Tikal Papaya 2 en el municipio de La Libertad. Con ello se cubrieron 230 hectáreas cultivadas con papaya (C. papaya). Además se efectuaron colectas en huertos localizados en municipios de Flores y Dolores, y también se analizaron muestras ingresadas por brigadas del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) y por particulares. Las muestras se procesaron en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario del Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación para El Petén (MAGA-Petén) siguiendo protocolos ya establecidos. Se identificaron 7 géneros de hongos fitopatógenos: Botryodiplodia sp., Cercospora sp., Cladosporium sp., Colletotrichum sp., Corynespora sp., Mycosphaerella sp. y Phoma sp.(phylostycta sp.). Se consideró que el más importante de éstos fue Colletotrichum sp., debido a los altos niveles de incidencia y severidad presentados y por afectar al fruto.

60 Marco conceptual Taxonomía de la papaya Según el sistema taxonómico de Cronquist (13, 30), la papaya se encuentra clasificada de la siguiente manera: Reino Plantae, División Magnoliophyta, Clase Magnoliopsida; Subclase Dilleniidae; Orden Violales; Familia Caricaceae; Género Carica; Especie Carica papaya L. Esta planta y su fruta se conoce con varios nombres comunes: ababaya, árbol del melón, fruta bomba, lechosa, lechoso, mamao, mamâo, mamén, mamón, mamona, mamoneiro, melón zapote, olocotón, papaia, papaeira, papaw, papaya, papaya de mico, papayadero, papayer, papayero, papayo calentano, zapote macho (Grupo Océano 1999, OIRSA 2003) Descripción botánica y diversidad genética Es una planta arborescente de crecimiento rápido, de vida relativamente corta de dos años (aunque puede vivir hasta 20 años), el tallo es sencillo o algunas veces ramificado, de 2-10 metros de altura, tallo recto, cilíndrico, suave (esponjoso-fibroso), jugoso, de color gris o café grisáceo, de centímetros de diámetro y endurecido por la presencia de cicatrices grandes y prominentes (OIRSA 2002). Su sistema radicular es muy superficial, de forma engrosada y de color blancuzco en su interior. En suelos profundos y sueltos crece hacia abajo casi verticalmente hasta 60 centímetros; produce unas 25 raíces secundarias de centímetros de grueso. Las terciarias tienen poca duración y se extienden hasta 100 centímetros del tronco (OIRSA 2002). Las hojas son alternas, aglomeradas en la parte distal del tallo, pecíolo largo, conspicuas, lisas, más o menos profundamente palmeadas con venas medianamente robustas; la base es cordada con lóbulos sobrepuestos; de 7-11 lóbulos grandes (OIRSA 2002). Esta especie es considerada polígama y presenta plantas con flores femeninas, masculinas y hermafroditas. Tiene la particularidad de producir durante todo el año. La cosecha es en forma escalonada, debido a que el fruto se desarrolla de abajo hacia arriba, y en esa misma secuencia se presenta la maduración (OIRSA 2002). La fruta producida por flor femenina es esférica, lisa, oblonga u ovoidal, de gran tamaño, con muchas semillas y en la base presenta una cicatriz en forma de pentágono (OIRSA 2003). En la flor masculina o estaminada no produce frutos. Este caso es más frecuente en papaya criolla que incluye individuos con los tres sexos (OIRSA 2002, Zepeda 2006).

61 42 De forma general los frutos producidos por plantas hermafroditas son elipsoides o alargados, con surcos en la superficie y con una cicatriz redondeada en la base. Son más pequeños con más pulpa y menos semilla (OIRSA 2003). La planta puede producir unos 100 frutos por año (OIRSA 2003) El fruto es una baya (fruto con pericarpo suculento) de tamaño, peso y forma diferente, dependiendo del cultivar o selección, mide de 10 a 60 centímetros de largo y llega a pesar varios kilos (Flores-Vindas 1999, OIRSA 2002). Las semillas son esféricas, pequeñas y negras. Miden entre 4 y 5 milímetros de diámetro y están cubiertas por una capa mucilaginosa llamada sarcotesta o cubierta. Un fruto bien polinizado llega a producir de 300 a 700 semillas. (Grupo Océano 1999, OIRSA 2002). En las zonas subtropicales se han obtenido, por medio de cruces entre variedades y control de las polinizaciones, verdaderos cultivares, como el Solo, en Hawai; El Betty, en Florida; el Hortus Gold, en África del Sur; el Maradol en Cuba, y otros. En el Solo hawaiano se ha observado que la autopolinización durante muchas generaciones no implica pérdida de vigor. (Grupo Océano, OIRSA 2002). Cuadro 7. Cultivares e híbridos de papaya y países que los cultivan. País Cultivar Brasil Amazon red, Sunrise solo, Red lady # 786, Golden Belice Tipo solo, Maradol, Tainung Cuba Maradol Hawai (EUA) Kapoho, Sunrise, Sunset, Waimanalo, Matsumoto, Puna, Strawberry S X, Tropical dream Florida (EUA) Cariflora, FL 775, Red lady Costa Rica Costa Rica red, Solo México Maradol, Solo Guatemala Maradol, Tainung Jamaica El Salvador, tipos Solo Malasia Tipos Solo Filipinas Honey gold, tipos Solo, Carite special Taiwán Tainung, Cariflora, Red lady # 786 India Co 1, Co 2, Pusa dwarf, Honey dew, Coorg honey dew Sur África Sunsire Solo, Papito Fuente: Horticultural products newsletter papayas, 1989 (modificado).

62 43 El ciclo de la papaya (C. papaya) puede dividirse en 6 etapas: A) Crecimiento y desarrollo (8 meses), B) Producción de los primeros botones florales (entre los 5 y 8 meses después de germinado), C) Primeras cosechas (8 y 10 meses), D) Estabilización de la cosecha (12 meses); E) Adulto productivo (12 a 24 meses); F) Período de cosecha (Todo el año) Enfermedades Las enfermedades constituyen la principal limitante en la producción de papaya (C. papaya). Por ejemplo, un ataque de virus puede lograr que el ciclo de una plantación se reduzca a un año cuando potencialmente puede llegar hasta tres, además de inhabilitar el área para cultivarla nuevamente con papaya (C. papaya) (Pernezny y Linz s.f). La planta puede ser atacada tanto por bacterias, hongos, virus, viroides, fitoplasmas como por plagas de artrópodos (insectos y ácaros), moluscos, nemátodos e inclusive algas. También son de importancia ciertas deficiencias y problemas fisiológicos (Nishijima 1999). Se reportan 148 especies de hongos y oomicetos que ocasionan alrededor de 50 síntomas de enfermedades diferentes, 8 enfermedades por bacterias, 3 por fitoplasmas, 8 por virus (Farr et al 1989, Nishijima 1999, Crop Knowledge Master 2005, CABI 2006).En cuanto a plagas se tienen reportados 80 géneros de artrópodos, 6 géneros de nemátodos, 1 género de moluscos y 1 género de algas. (Nishijima 1999, CABI 2006) Enfermedades ocasionadas por hongos y oomicetos Nishijima (1999) reporta las siguientes enfermedades ocasionadas por hongos y oomicetos en papaya: Mancha del fruto por Alternaria: Alternaria alternata (Fr.:Fr.) Keissl. Mancha angular de la hoja: Leveillula taurica (Lév.) G. Arnaud Antracnosis: Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. in Penz. Mancha negra: Asperisporium caricae (Speg.) Maubl., Cercospora papayae Hansf. Phomopsis caricae-papayae Petr. & Cif. Mancha de las flores: Choanephora cucurbitarum (Berk. & Ravenel) Thaxt. Mancha café: Corynespora cassicola (Berk. & M. A. Curtis) C. T. Wei (=Cercospora melonis Cooke; = C. vignicola E. Kawamura; =Helminthosporium cassiicola Berk. & M.

63 44 A. Curtis; =H. vignae Olive in Olive, Bain, & Lefebvre); = H. vignicola (E. Kawamura) Olive Mancha chocolate: Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. Penz. Pudrición del cuello: Cylindrocladium crotalariae (C. A. Loos) D. K. Bell & Sobers (teleomorfo: Calonectria crotalariae (C. A. Loos) D. K. Bell & Sobers) Damping off: Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. In Penz.; Phytophthora palmivora (E. J. Butler) E. J. Butler; Phytophthora nicotianae Breda de Haan var. parasitic (Dastur) G. M. Waterhouse (=Phytophthora parasitica Dastur); Pythium aphanidermatum (Edson) Fitzp. Pythium debaryanum Auct. non R. Hesse; Pythium ultimum Trow; Pythium sp.; Rhizoctonia solani Kühn (teleomorfo: Thanatephorus cucumeris (A. B. Frank) Donk) Pudrición seca: Phoma caricae-papayae (Tarr) Punithalingam (=Ascochyta carica Pat. y A. caricae-papayae Tarr) (teleomorfo: Mycosphaerella caricae Syd. & P. Syd.) Pudrición de la base del tallo: Pythium aphanidermatum (Edson) Fitzp.; Pythium ultimum Trow Pudrición del fruto: Monilia sp. Mancha del fruto: Cercospora mamaonis Viégas & Chupp Pudrición del fruto por Fusarium: Fusarium solani (Mart.) Sacc. Fusarium spp. Mancha por Guignardia: Guignardia sp. Mancha grasosa: Corynespora cassiicola. (Berk. & M. A. Curtis) C. T. Wei (=Cercospora melonis Cooke; = C. vignicola E. Kawamura; =Helminthosporium cassiicola Berk. & M. A. Curtis; =H. vignae Olive in Olive, Bain, & Lefebvre); = H. vignicola (E. Kawamura) Olive. Pudrición interna: Cladosporium sp.; Fusarium sp.; Penicillium sp. Pudrición de la fruta por Lasiodiplodia: Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl. (=Botryodiplodia theobromae Pat.; =B. gossypii Ellis. & Barth.; =Diplodia theobromae (Pat.) W. Nowell; =D. gossypina Cooke; =D. natalensis Pole-Evans; =Lasiodiplodia triflorae Higgins) Manchas de la hoja: Alternaria sp.; Asperisporium caricae (Speg.) Maubl. Cercospora mamaonis Viégas & Chupp; Cercospora papayae Hansf.; Choanephora cucurbitarum (Berk. & Ravenel) Thaxt.; Curvularia carica-papayae Srivastava and Bilgrami;

64 45 Gloeosporium sp.; Phoma caricae-papayae (Tarr) Punithalingam (teleomorfo : Mycosphaerella caricae Syd. & P. Syd.); Phyllosticta sp. Pudrición del peciolo: Didymella sp. Destrucción por Phytophthora: Phytophthora palmivora (E. J. Butler) E. J. Butler; Phytophthora nicotianae Breda de Haan var. parasítica (Dastur) G. M. Waterhouse (=Phytophthora parasítica Dastur) Mildiús polvorientos: Erysiphe cichoracearum De Candolle; Erysiphe sp.; Oidium caricae F. Noack ; O. indica Kamat; Ovulariopsis papayae van der Bilz ; Sphaerotheca fuliginea (Schlecht.) Poll.; S. humuli (D.C.) Burr. Pudrición del fruto por Phytophthora: Phytophthora capsici Leonian; Phytophthora nicotianae Breda de Haan var. parasitica (Dastur) G. M. Waterhouse (=Phytophthora parasítica Dastur); Phytophthora palmivora (E. J. Butler) E. J. Butler; Pudrición tenue por Rhizopus: Rhizopus stolonifer (Ehrenb.:Fr.) Vuill. (=R. nigricans Ehrenb.) Pudrición de raíz: Phytophthora palmivora (E. J. Butler) E. J. Butler; Pythium aphanidermatum (Edson) Fitzp.; Pythium ultimum Trow; Pythium spp.; Rhizoctonia solani Kühn (teleomorfo: Thanatephorus cucumeris (A. B. Frank) Donk) Destrucción por Sclerotium: Sclerotium rolfsii Sacc. (teleomorfo: Athelia rolfsii (Curzi) Tu & Kimbrough). Muerte de semilla: Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. in Penz. Pudrición en brotes del tallo: Alternaria alternata (Fr.:Fr.) Keissl.; Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. In Penz.; Fusarium sp.; Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl (=Botryodiplodia theobromae Pat. =B. gossypii Ellis. & Barth.; =Diplodia theobromae (Pat.)W. Nowell; =D. gossypina Cooke; =D. natalensis Pole-Evans;=Lasiodiplodia triflorae Higgins); Phoma caricae papayae (Tarr) Punithalingam (=Ascochyta carica Pat. y A. caricae-papayae Tarr) (teleomorfo: Mycosphaerella caricae Syd. & P. Syd.); Phomopsis sp.; Rhizopus stolonifer (Ehrenb.:Fr.) Vuill. (=R. nigricans Ehrenb.) Pudrición del fruto por Stemphylium: Stemphylium lycopersici (Enjoji) W. Yamamoto (=Thyrospora lycopersici Enjoji; =S. floridanum Hannon & G. F. Weber)

65 46 Pudrición del tallo: Fusarium solani (Mart.) Sacc. (teleomorfo: Nectria haematococca Berk. & Broome); Fusarium sp.; Phytophthora palmivora (E. J. Butler) E. J. Butler ; Pythium aphanidermatum (Edson) Fitzp.; Pythium ultimum Trow Pudrición por Phyllosticta: Phyllosticta caricae-papayae Allesch. Marchitez por Verticillium: Verticillium dahliae Kleb. Pudrición acuosa del fruto: Phomopsis sp. El Crop Protection Compendium (2006) reporta para el cultivo de papaya las siguientes enfermedades ocasionadas por hongos y oomicetos: Alternaria alternata (mancha foliar), Alternaria zinniae (mancha foliar), Aspergillus niger (pudrición del cuello), Asperisporium caricae (mancha negra), Chalara elegans (pudrición negra de la raíz), Choanephora cucurbitarum (pudrición del fruto), Cladosporium cucumerinum, Cladosporium oxysporum (pudrición de las semillas), Cochliobolus lunatus, Colletotrichum capsici (mancha foliar), Colletotrichum dematium (mancha foliar), Colletotricum papayae, Corynespora cassiicola (mancha foliar), Corticium rolfsii (pudrición), Drechslera biseptata, Fusarium oxysporum (pudrición basal), Giberella intricans (damping-off), Glomerella cingulata (antracnosis), Lasiodiplodia theobromae, Leveillula taurica (mildew polvoriento, cenicilla), Monilinia fructicola (pudrición café), Mycosphaerella tassiana (pudrición), Myrothecium roridum, Nectria haematococca (pudrición húmeda), Oidium caricae-papayae (mildew polvoriento, cenicilla), Ovulariopsis papayae (mildew polvoriento, cenicilla), Penicillium digitatum (moho verde), Phoma caricae-papayae (mancha foliar), Phomopsis caricae-papayae (pudrición del tallo), Phytophthora nicotianae, Phytophthora palmivora (pudrición del fruto), Podosphaera xanthii (mildew polvoriento, cenicilla), Pythium aphanidermatum (damping-off), Pythium debaryanum (damping-off), Pythium myriotylum (pudrición café), Pythium vexans (damping-off), Rhizopus arrhizus (pudrición), Rhizopus stolonifer, Stemphylium lycopersici (mancha foliar gris). Tomando como referencia cinco fuentes diferentes se elaboró el siguiente cuadro con las especies de hongos y oomicetes fitopatógenos reportados para la papaya (C. papaya). El cuadro refiere un total de 148 géneros de hongos y oomicetos que ocasionan unos 50 síntomas diferentes.

66 47 Cuadro 8. Enfermedades ocasionadas por hongos y oomicetos en papaya (C. papaya) Reportado por Reportado por No Patógeno A B C D E No Patógeno A B C D E 1 Alternaria alternata 75 Helminthosporium vignae 2 Alternaria caricae 76 Helminthosporium vignicola 3 Alternaria sp. 77 Lasiodiplodia theobromae 4 Alternaria tenuis 78 Lasiodiplodia triflorae 5 Alternaria zinniae 79 Leveillula taurica 6 Amerosporium caricae 80 Macrophomina phaseolina 7 Ascochyta carica 81 Monilia sp. 8 Ascochyta caricae 82 Monilinia fructicola 9 Ascochyta caricae-papayae 83 Mycena citricola 10 Asperisporium caricae 84 Mycosphaerella caricae 11 Aspergillus niger 85 Mycosphaerella sp. 12 Asterina caricarum 86 Mycosphaerella tassiana 13 Asterinella papayae 87 Myrothecium roridum 14 Asterostomella caricae 88 Nectria haematococca 15 Athelia rolfsii 89 Oidium caricae 16 Botryodiplodia gossypii 90 Oidium caricae-papayae 17 Botryodiplodia theobromae 91 Oidium erysiphoides 18 Calonectria crotalariae 92 Oidium indicum 19 Calonectria sp. 93 Ovulariopsis papayae 20 Cercospora caricae 94 Ozonium omnivorum 21 Cercospora mamaonis 95 Penicillium digitatum 22 Cercospora melonis 96 Penicillium sp 23 Cercospora papayae 97 Phoma caricae-papayae 24 Cercospora sp. 98 Phoma carisis 25 Cercospora vignicola 99 Phoma sp. 26 Chaetothyrina tennuisima 100 Phomopsis caricae-papayae 27 Chalara elegans 101 Phomopsis papayae 28 Choanephora americana 102 Phomopsis sp. 29 Choanephora cucurbitarum 103 Phyllosticta caricae-papayae 30 Cladosporium sp 104 Phyllosticta papaicola 31 Cladosporium cucumerinum 105 Phyllosticta sp. 32 Cladosporium herbarum 106 Phyllostictina sp. 33 Cladosporium oxysporum 107 Phymatotrichopsis omnivora 34 Cladosporium papayae 108 Phytophthora capsici 35 Cochliobolus lunatus 109 Phytophthora infestans 36 Colletotrichum capsici 110 Phytophthora fabei 37 Colletotrichum dematium 111 Phytophthora nicotianae 38 Colletotrichum falcatum 112 P. nicotianae var. parasitica 39 C. gloeosporioides 113 Phytophthora palmivora 40 Colletotrichum cingulata 114 Phytophthora parasitica 41 Colletotrichum papayae 115 Pleospora sp. 42 Colletotrichum sp. 116 Podosphaera xanthii 43 Corticium rolfsii 117 Poria vincta

67 48 Continuación cuadro 8. Reportado por Reportado por No. Patógeno A B C D E No. Patógeno A B C D E 44 Corynespora cassicola 118 Pucciniopsis caricae 45 Curvularia carica-papayae 119 Pythium aphanidermatum 46 Cylindrocladium crotalariae 120 Pythium chamaehyphon 47 Drechslera biseptata 121 Pythium debaryanum 48 Didymella caricae 122 Pythium myriotylum 49 Didymella sp. 123 Pythium sp 50 Dimerium guarapiense 124 Pythium ultimum 51 Diplodia cacaoicola 125 Pythium vexans 52 Diplodia caricae 126 Rhinotrichum gossypinum 53 Diplodia gossypina 127 Rhizoctonia solani 54 Diplodia nafalensis 128 Rhizoctonia sp. 55 Diplodia sp. 129 Rhizopus arrhizus 56 Diplodia theobromae 130 Rhizopus stolonifer 57 Epicoccum caricae 131 Rhizopus nigricans 58 Erysiphe cichoracearum 132 Septoria sp. 59 Erysiphe sp. 133 Sclerotium rolfsii 60 Fusarium diversisporum 134 Sphaceloma papayae 61 Fusarium heveae 135 Sphaerostilbe repens 62 Fusarium oxysporum 136 Sphaerotheca fuliginea 63 Fusarium sambucinum 137 Sphaerotheca humuli 64 Fusarium solani 138 Sphaerotheca sp. 65 Fusarium spp. 139 Stemphylium floridanum 66 Fusarium striatum 140 Stemphylium lycopersici 67 Fusicladium caricae 141 Stemphylium sp. 68 Gibberella intricans 142 Thanatephorus cucumeris 69 Gloesporium papayae 143 Thyrospora lycopersici 70 Gloesporium sp 144 Trichomerium didymopanacis 71 Glomerella cingulata 145 Vermicularia sp. 72 Guignardia sp. 146 Verticillium dahliae 73 Helminthosporium cassiicola 147 Verticillium sp. 74 Helminthosporium sp. 148 Zygosporium oscheoides Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. con base a: A Nishijima, W.T Common names of plant diseases: Diseases of papaya (Carica papaya). Disponible en: B Farr, D.; Bills, G; Chamurrs, G & Rossman, A Fungi on plants and plant products in the United States. The American Phytopathological Society (APS) Press. Minnesota, USA pp. C CAB International (CABI). Crop Protection Compendium (CPC). [CD-ROM]. United Kingdom Edition. D United States Department of Agriculture (USDA). Agricultural Research service (ARS). Sistematic mycology and Microbiology. Fungal Database. Disponible en: E Crop Knowledge Master Papaya: General Crop Information; Insects, Other Pests and Plant Disease Phatogens. Hawai. USA. Disponible en

68 49 Taxonomía En el siguiente cuadro se presenta la taxonomía de los hongos y oomicetos que ocasionan enfermedades en papaya (C. papaya). Cuadro 9. Taxonomía de los hongos y oomicetes fitopatógenos para la papaya (C. papaya). Patógeno Reino Phylum Clase Orden Familia Fuente 1 Alternaria alternata 2 Alternaria caricae 3 Alternaria sp. 4 Alternaria tenuis 5 Alternaria zinniae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 6 Amerosporium caricae Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E 7 Ascochyta carica Fungi Ascomycota Ascomycetes Diaporthales Valsaceae A 8 Ascochyta caricae-papayae 9 Ascochyta caricae Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales E 10 Aspergillus niger Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 11 Asperisporium caricae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 12 Asterina caricarum Fungi Ascomycota No aplica Dothideales Asterinaceae C Fungi Ascomycota Sordariomycetes No aplica Asterinaceae D 13 Asterostomella caricae Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E 14 Asterinella papayae Fungi Ascomycota Sordariomycetes Microthryales Mycrothryaceae D 15 Athelia rolfsii Fungi Basidiomycota Agaricomycetes Atheliales Atheliaceae D 16 Botryodiplodia gossypii 17 Botryodiplodia theobromae 18 Calonectria crotalariae 19 Calonectria sp. 20 Cercospora mamaonis 21 Cercospora melonis 22 Cercospora papayae 23 Cercospora sp. 24 Cercospora vignicola Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E Fungi Ascomycota Ascomycetes Hypocreales Nectriaceae A, B Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Dematiaceae B y E 25 Chaetothyrina tennuisima Fungi Ascomycota No aplica Dothideales Micropeltidaceae C 26 Chalara elegans Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 27 Choanephora americana 28 Choanephora cucurbitarum Fungi Zygomycota Zygomycetes Mucorales Choanephoraceae A, B 29 Cladosporium cucumerinum Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Dematiaceae B 30 Cladosporium herbarum 31 Cladosporium oxysporum 32 Cladosporium papayae 33 Cladosporium sp Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 34 Cochliobolus lunatus Fungi Ascomycota Dothideomycetes Pleosporales Pleosporaceae D

69 50 Continuación cuadro 9. Patógeno Reino Phylum Clase Orden Familia Fuente 35 Colletotrichum capsici 36 Colletotrichum cingulata 37 Colletotrichum dematium Fungi Anamórfico No aplica Melanconiales Melanconiaceae E 38 Colletotrichum falcatum Fungi Anamórfico Coelomycetes Melanconiales Melanconiaceae B 39 Colletotrichum gloeosporioides 40 Colletotrichum papayae 41 Colletotrichum sp. 42 Corticium rolfsii Fungi Basidiomycota Basidiomycetes Polyporales Corticiaceae A, B 43 Corynespora cassicola Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 44 Curvularia carica-papayae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 45 Cylindrocladium crotalariae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 46 Didymella caricae 47 Didymella sp. Fungi Ascomycota Ascomycetes Pleosporales Dothideomycetidae A 48 Dimerium guarapiense Fungi Ascomycota No aplica Dothideales Asterinaceae C 49 Diplodia cacaoicola 50 Diplodia caricae 51 Diplodia gossypina 52 Diplodia natalensis 53 Diplodia sp. 54 Diplodia theobromae Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E 55 Drechslera biseptata Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 56 Epicoccum caricae Fungi Anamórfico Moniliales Dematiaceae E 57 Erysiphe cichoracearum 58 Erysiphe sp. 59 Fusarium diversisporum 60 Fusarium heveae Fungi Ascomycota Ascomycetes Erysiphales Erysiphaceae A 61 Fusarium oxysporum Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Tuberculariaceae E 62 Fusarium sambucinum 63 Fusarium solani Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Tuberculariaceae B 64 Fusarium spp. 65 Fusarium striatum 66 Fusicladium caricae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 67 Gibberella intricans Fungi Ascomycota Ascomycetes Hypocreales Nectriaceae A, B 68 Gloesporium papayae Fungi Anamórfico No aplica Melanconiales Melanconiaceae E 69 Gloesporium sp Fungi Anamórfico Coelomycetes Melanconiales Melanconiaceae B 70 Glomerella cingulata Fungi Ascomycota Ascomycetes Ascomicetales Glomerellaceae A, B 71 Guignardia sp. Fungi Ascomycota Ascomycetes Dothideales Botriosphaeriaceae A, B 72 Helminthosporium cassiicola 73 Helminthosporium sp. 74 Helminthosporium vignae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 75 Helminthosporium vignicola 76 Lasiodiplodia theobromae 77 Lasiodiplodia triflorae Fungi Anamórfico Coelomycetes Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae A,E

70 51 Continuación cuadro 9. Patógeno Reino Phylum Clase Orden Familia Fuente 78 Leveillula taurica Fungi Ascomycota Ascomycetes Erysiphales Erysiphaceae A, B 79 Macrophomina phaseolina Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E 80 Monilia sp. Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Moniliaceae B 81 Monilinia fructicola Fungi Ascomycota Leotiomycetes Helotiales Sclerotiniaceae D 82 Mycena citricola Fungi Basidiomycota Agaricomycetes Agaricales Tricholomataceae D 83 Mycosphaerella caricae 84 Mycosphaerella sp. 85 Mycosphaerella tassiana Fungi Ascomycota Ascomycetes Mycosphaerellales Mycosphaerellaceae A, B 86 Myrothecium roridum Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Tuberculariaceae E 87 Nectria haematococca Fungi Ascomycota Ascomycetes Hypocreales Nectriaceae A, B 88 Oidium caricae Fungi Ascomycota Ascomycetes Erysiphales Erysiphaceae A 89 Oidium caricae-papayae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 90 Oidium erysiphoides Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Moniliaceae B 91 Oidium indicum 92 Ovulariopsis papayae Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Moniliaceae B 93 Ozonium omnivorum Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 94 Penicillium digitatum 95 Penicillium sp 96 Phoma caricae-papayae 97 Phoma carisis 98 Phoma sp. Phomopsis caricaepapayae Phomopsis papayae 101 Phomopsis sp. Phyllosticta caricaepapayae Phyllosticta papaicola Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E 104 Phyllosticta sp. Fungi Anamórfico Coelomycetes Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae B 105 Phyllostictina sp. Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae C,E 106 Phymatotrichopsis omnivora Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 107 Phytophthora capsici 108 Phytophthora fabei 109 Phytophthora infestans 110 Phytophthora nicotianae Phytophthora nicotianae 111 var. parasitica 112 Phytophthora palmivora 113 Phytophthora parasitica Chromista Oomycota Oomycetes Phytiales Pythiaceae B 114 Pleospora sp. Fungi Ascomycota Dothideomycetes Pleosporales Pleosporaceae D 115 Podosphaera xanthii Fungi Ascomycota Leotiomycetes Erysiphales Erysiphaceae D 116 Poria vincta Fungi Basidiomycota Agaricomycetes Polyporales Polyporaceae D 117 Pucciniopsis caricae Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Tuberculariaceae E

71 52 Continuación cuadro 9 Patógeno Reino Phylum Clase Orden Familia Fuente 118 Pythium aphanidermatum 119 Pythium chamaehyphon 120 Pythium debaryanum 121 Pythium myriotylum 122 Pythium sp 123 Pythium ultimum 124 Pythium vexans 125 Rhinotrichum gossypinum 126 Rhizoctonia solani 127 Rhizoctonia solani 128 Rhizoctonia sp. 129 Rhizopus arrhizus 130 Rhizopus nigricans 131 Rhizopus stolonifer Chromista Oomycota Oomycetes Saprolegniales Pythiaceae B Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E Fungi Anamórfico Aganomycetes Aganomycetales Aganomycetaceae B Fungi Zygomycota Zygomycetes Mucorales Mucoraceae A 132 Sclerotium rolfsii Fungi Basidiomycota Basidiomycetes Polyporales Coriticiaceae A 133 Septoria sp. Fungi Anamórfico No aplica Sphaeropsidales Sphaeropsidaceae E 134 Sphaceloma papayae Fungi Anamórfico No aplica Melanconiales Melanconiaceae E 135 Sphaerostilbe repens Fungi Ascomycota Sordariomycetes Hypocreales Nectriaceae D 136 Sphaerotheca fuliginea 137 Sphaerotheca humuli 138 Sphaerotheca sp. 139 Stemphylium floridanum 140 Stemphylium lycopersici Fungi Ascomycota Ascomycetes Erysiphales Erysiphaceae A Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E 141 Stemphylium sp. 142 Thanatephorus cucumeris Fungi Basidiomycota Basidiomycetes Ceratobasidiales Ceratobasidiaceae A 143 Thyrospora lycopersici Fungi Ascomycota Sordariomycetes Dothideales Pleosporaceae C, D 144 Trichomerium didymopanacis Fungi Ascomycota Sordariomycetes Capnodiales Capnodiaceae D 145 Vermicularia sp. Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Tuberculariaceae E 146 Verticillium dahliae Fungi Anamórfico Hiphomycetes Moniliales Moniliaceae B 147 Verticillium sp. Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Moniliaceae E 148 Zygosporium oscheoides Fungi Anamórfico No aplica Moniliales Dematiaceae E Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. con base a: A B C D E CAB International (CABI). Crop Protection Compendium (CPC). [CD-ROM]. United Kingdom Edition. Dictionary of the Fungi Cybernome. Nomenclador para hongos y sus organismos asociados. Disponible en: Internacional Mycological Association. Mycobank: Fungal Database-Numenclature and species Bank-Oline Taxonmic Novieltes Submission. Disponible en: Sistema de Saccardo utilizado en 6. Barnett, H.L.; Hunter, B.B Illustrated genera of Imperfect Fungi. The American Phytopathological Society (APS) Press. Minnesota, USA. 218 pp.

72 53 Descripción de las enfermedades ocasionadas por hongos A continuación se describen las enfermedades más frecuentes en base a los reportes de varios autores como: Nishijima (1999), el Crop Protection Compendium (2006); el Crop Knowledge Master (2005), Farr et al (1989), Liberato et al (2007), Albornett y Sanabria (1994); Corado (1999); Daborío et al (s.f); entre otros. Manchas y pudriciones por Alternaria Se reportan en papaya A. alternata, A. caricae, A. tenuis, A. zinniae (Farr et al. 1989, Nishijima 1999, Crop Knowledge Master 2005, CABI 2006). Mycosphaerella sp. y Sphaerulina sp. son los ascomicetos asociados con este hongo (Hanlin 1990), sin embargo para papaya solo está reportado el primero. A. alternata ocasiona mancha del fruto; manchas foliares; pudrición en brotes del tallo. (Nishijima 1999, Knowledge Master 2005). Las manchas en el fruto se caracterizan por ser de forma oval a circular pudiendo formar depresiones en la superficie. Las lesiones eventualmente pueden volverse de color negro debido a la esporulación del patógeno, sin embargo éstas se restringen a la superficie y no penetran el mesocarpio. En algunos casos las lesiones pueden coalescer y expandirse, logrando cubrir toda la superficie del fruto. A. alternata también es un hongo saprófito (Crop Knowledge Master 2005). Mancha negra por Asperisporium Se reporta A. caricae ocasionando la mancha (viruela) negra en hojas y frutos. Estas manchas son irregulares de color café oscuro a negro de aproximadamente 15 a 50 mm de diámetro, observándose principalmente en el haz de hojas seniles. En el envés puede ocasionar leves depresiones en la superficie. Los síntomas también pueden observarse en la superficie de frutos aunque el daño no es tan severo como a nivel foliar. En el fruto el hongo no penetra el mesocarpo afectando principalmente su presentación (Crop Knowledge Master 2005). El hongo puede atacar junto a otros hongos, como las cenicillas, o también artrópodos, como los ácaros, ocasionando que el envés de la hoja afectada se doble hacia arriba produciéndose además un desecamiento de las mismas.

73 54 Pudriciones por Botryodiplodia (Lasiodiplodia) Se reportan B. gossypii, B. theobromae (Nishijima 1999). Sinonimia: Lasiodiplodia theobromae = Botryodiplodia theobromae = B. gossypii = Diplodia theobromae = D. gossypina Cooke; =D. natalensis Pole-Evans; = Lasiodiplodia triflorae Higgins (Nishijima 1999, Crop Knowledge Master 2005). Se le asocia con el teleomorfo Botryosphaeria sp. (Hanlin 1990) aunque no aparece reportado para papaya. B. theobromae ocasiona pudrición negra en la base del fruto y pudrición en brotes del tallo. En el fruto se observa al inicio una lesión necrótica en la zona peduncular y al avanzar la infección van apareciendo numerosos picnidios en la zona afectada (Albornett y Sanabria 1994). El Crop Knowledge Master (2005) reporta esta enfermedad como Lasiodiplodia theobromae, el cual ocasiona pudriciones en el fruto y en el tallo. Aunque se le describe como una enfermedad postcosecha, las infecciones suelen ocurrir en el campo. Sus síntomas en fruto suelen confundirse con la pudrición seca por Mycosphaerella pero la pudrición por L. theobromae se distingue por tener ésta un margen más extenso, ancho y traslúcido. Desarrolla un micelio gris sobre el área infectada que luego se vuelve de color negro debido a la masa de picnidios que forma. Pudrición del cuello por Calonectria Se reporta Calonectria crotolariae (Farr et al. 1989, Nishijima 1999, Crop Knowledge Master 2005). Su anamorfo Cylindrocladium crotolariae, también aparece reportado para esta enfermedad (Nishijima 1999). Los síntomas más comunes de la enfermedad son clorosis, cese del crecimiento de la raíz, pudrición del cuello y por último, muerte de la planta. La enfermedad inicia en la parte del tallo cercana al suelo (cuello de la plata), posteriormente avanza hasta afectar, además del cuello, todo el sistema radicular. Se observa además la formación de peritecios de color rojo a naranja en el área del cuello. Las hojas comienzan a sufrir clorosis, los peciolos se doblan y finalmente la planta muere. La enfermedad aparece durante o después de lluvias prolongadas cuando no existe un buen drenaje (Crop Knowledge Master 2005). El hongo produce numerosas conidias, ascosporas y microesclerocios. Las conidias y las ascosporas expanden la enfermedad a largas distancias mientras que los microesclerocios

74 55 son las estructuras de supervivencia del hongo. El hongo puede sobrevivir por más de 3 años en ausencia de un hospedero (Crop Knowledge Master 2005). Enfermedades por Cercospora Se reportan las especies: C. papayae, C. melonis, C. vignicola, C. mamaonis. Sinónimos: C. melonis= Corynespora cassicola = Cercospora vignicola = Helminthosporium cassiicola = H. vignae = H. vignicola. Teleomorfos (Hanlin 1990): Mycosphaerella y Sphaerulina, de los cuales solo Mycosphaerella caricae (Farr et al. 1989, Crop Knowledge Master 2005) y M. tassiana (CABI 2006) está reportada en papaya ocasionando pudrición seca del fruto. (Nishijima 1999). Cercospora papayae ocasiona la mancha negra en hoja y frutos; C. melonis = Corynespora cassicola = Cercospora vignicola = Helminthosporium cassiicola = H. vignae = H. vignicola, la mancha café y mancha grasosa en hojas; C. mamaonis, manchas foliares (Nishijima 1999). Cercospora papayae es considerada una de las enfermedades foliares más importantes de la papaya y tiene una mayor incidencia durante períodos cálidos y húmedos. La enfermedad se presenta inicialmente con el comienzo de las lluvias y se acentúa con la intensidad de la misma. Los síntomas iniciales son manchas de forma circular de 3 a 8 mm de diámetro en las hojas. Las manchas son de color blanco grisáceo en el haz de las hojas y negruzco en el envés y al unirse las lesiones secan la hoja completamente (Zepeda 2006). C. papayae también ocasiona manchas en el fruto, las cuales comienzan como pequeños puntos de color negro que luego se van alargando hasta alcanzar 3 mm de diámetro. Estas manchas son superficiales aunque pueden ocasionar levantamientos de la epidermis favoreciendo la formación de lesiones corchosas aunque no se reporta que desarrolle pudriciones. Cuando el fruto no ha madurado las manchas son de color oscuro sin embargo comienzan a ser más visibles cuando la epidermis cambia a color amarillo. El inóculo primario se encuentra en las hojas atacadas previamente por el hongo. C. melonis también ocasiona manchas foliares. Las manchas de C. melonis están relacionadas también con Cercospora vignicola, Helminthosporium casiicola, H. vignae, H. vignicola y Corynespora casiicola. (Nishijima 1999).

75 56 Enfermedades ocasionadas por Corynespora Aparece reportada Corynespora casiicola (Nishijima 1999, CABI 2006). Sinonimia: Corynespora cassicola = Cercospora melonis = Cercospora vignicola = Helminthosporium cassiicola = H. vignae = H. vignicola. C. casiicola afecta diferentes partes de la planta principalmente el tallo, fruto, peciolos y hojas (Crop Knowledge Master 2005). En las hojas las lesiones presentan una coloración amarillo pálido, son circulares o irregulares, de 1-2 mm de diámetro, con un centro necrótico. Algunas de éstas pueden llegar a tener hasta 10 mm de diámetro. En el haz de las hojas afectadas se observa lesiones de color gris a blanquecino, levemente hundidas, con un delgado margen rodeado de un halo amarillo, de unos 4 a 8 mm de ancho. Algunas veces la parte central de éstas puede romperse. En el envés primero aparecen pequeñas lesiones de color café claro, algunas con exudaciones, que después de un tiempo se vuelven necróticas tomando un color café más oscuro, levemente hundidas y con un margen café rojizo. Estas también pueden rodearse de un área amarilla que puede observarse a trasluz. Cuando la cantidad de lesiones es muy numerosa se puede dar el desprendimiento de la hoja (Crop Knowledge Master 2005). Cuando ocasiona tizón foliar éste se manifiesta mediante numerosas manchas de color pardo claro, circulares o irregulares, dando el aspecto de quemado (Corado 1999). Las manchas en los peciolos son largas y angostas de color castaño. Las que ocasiona en el fruto presentan centro traslúcido y borde marrón claro, de 1-3 mm de diámetro (Albornett y Sanabria 1994). Enfermedades por Cladosporium C. cucumerinum inicialmente ocasiona lesiones superficiales que luego se cubren con un moho de color verde oscuro (Albornett y Sanabria 1994). También es reportado como uno de los causantes de la pudrición interna del fruto (Crop Knowledge Master 2005) en la cual la cavidad en donde se encuentran las semillas (endocarpo) es cubierta por micelio del hongo lo que ocasiona ablandamiento de los tejidos internos. La pudrición avanza poco a poco hacia el exterior llegando a ser visible en la epidermis del fruto.

76 57 Enfermedades por Colletotrichum Las enfermedades provocadas por este hongo incluyen: antracnosis, marchitamiento, pudrición radical, mancha foliar, pudrición de flores y tizón en plántulas. (Kim 2001, Kumar 2001, Freeman 1996 citados por Zabala-León et al. 2005). Es una enfermedad que se presenta principalmente desde la floración, atacando flores y frutos. Se presenta como manchas acuosas hundidas, en forma de anillos concéntricos color marrón, con esporas de color rosado. En los frutos desarrollados causa pequeñas manchas que conforme madura se van extendiendo y profundizando. También puede atacar los pecíolos de las hojas inferiores (Zepeda 2006). En frutos de papaya C. gloesporoides ocasiona pelado del fruto, mancha chocolate y antracnosis (Álvarez y Nishijima 1987, citado por Zavala-León et al. 2005), enfermedades que afectan el exterior de la fruta. Las esporas del hongo germinan después de 48 horas y forman un tubo germinativo que penetra de manera directa la cutícula del fruto inmaduro (Casarrubias-Carrillo 2002, citado por Zavala-León et al. 2005) donde permanece latente, pero se reactiva la invasión durante la maduración del fruto. Una vez dentro del fruto el hongo es protegido del contacto con fungicidas. Enfermedades por Fusarium Fusarium ocasiona marchitez y pudrición de la base del tallo en las etapas iniciales (fase de vivero) del crecimiento de las plantas. Éstas presentan un hundimiento en el pie, donde ocurre una pudrición de coloración oscura y de consistencia acuosa. Si se arranca, la planta sale fácilmente observándose las raíces totalmente podridas. (FAO 1988 citado por Corado 1999). La enfermedad se presenta frecuentemente en los suelos con mucha materia orgánica, mal drenados, con riego excesivo o en plantaciones con altas densidades de siembra. (FAO, 1988 citado por Corado 1999). Enfermedades por Guignardia Se le relaciona con el anamorfo Phyllostica (Hanlin 1990). En papaya aparece reportado P. caricae-papayae (Farr et al. 1989, Nishijima 1999) y P. papaicola (USDA s.f)) ocasionando manchas foliares y pudrición del fruto (Crop Knowledge Master 2005). Los síntomas se manifiestan en los frutos, observándose formación de numerosas lesiones circulares a ovaladas, de color verde negruzco y de unos 15 mm de diámetro. El

77 58 hongo puede penetrar hasta el mesocarpo ocasionando una decoloración negruzca en el interior del fruto. Es una enfermedad postcosecha (Crop Knowledge Master 2005). Enfermedades por Mycosphaerella Las especies reportadas son M. caricae (Farr et al. 1989, Crop Knowledge Master 2005) y M. tassiana (CABI 2006). Anamorfos: Cercoseptoria, Cercospora, Cercosporella, Cercosporidium, Cladosporium, Fusicladiella, Ovularia, Paracercospora, Phaeoisariopsis, Pseudocercospora, Rumularia, Septoria, Stenella y Stigmina (Hanlin 1990). De estos aparecen reportados en papaya Cercospora (C. papayae: mancha negra en hoja y frutos; C. melonis = C. vignicola: mancha café y mancha grasosa en hojas; C. mamaonis: manchas foliares), Cladosporium (pudrición interna) y Septoria (manchas foliares) (Farr et al. 1989, Nishijima 1999, CABI 2006). El Crop Knowledge Master (2005) reporta a Phoma carica-papayae (previamente citado como Ascochyta carica y Ascochyta caricae-papayae) como el estado imperfecto de Mycosphaerella caricae ocasionando los mismos síntomas. En India y Brasil se reporta ocasionando lesiones en la superficie de frutos y en Hawai se le ha relacionado con pudrición apical del tallo. También ocasiona manchas en hojas, flores y frutos jóvenes. Las lesiones en frutos son circulares, de color negro y de unos 4 cm de diámetro ocasionando depresiones en su superficie (Crop Knowledge Master 2005). Enfermedades por Oidium Ocasiona mildiu polvoriento o moho blanco. Es una enfermedad que ataca hojas, frutos y tallos. Su incidencia es fuerte en los meses más secos y frescos, no necesitando agua libre para poder infectar; por lo contrario, las lluvias fuertes reducen la severidad de la enfermedad. En las hojas afectadas se observan manchas en la parte superior e inferior las que están recubiertas de un polvillo que al removerlo dan la apariencia de parches amarillos, especialmente cerca de las venas foliares. Las zonas amarillas se van agrandando y se tornan amarillo pálido, se secan y luego se caen. Todas las hojas son susceptibles, pero la infección se presenta más en hojas maduras. (Zepeda 2006). El ataque de esta enfermedad se asocia muchas veces con el ataque de ácaros foliares. Los ácaros actúan dispersando las esporas. Tanto los ácaros y el mildiu reducen la fotosíntesis, aumenta la senescencia de las hojas y reduce los azúcares de las frutas (Zepeda 2006).

78 59 Enfermedades por Phomopsis Ataca el fruto ocasionándole inicialmente pequeñas lesiones redondeadas de consistencia blanda que luego son cubiertas por una alfombra micelial de color blanco (Albornett y Sanabria 1994). En sus estados iniciales la pudrición húmeda del fruto ocasionada por Phomopsis sp. es muy similar a la pudrición blanda por Rhizopus sp. La pudrición húmeda por Phomopsis se manifiesta en el extremo apical del fruto, sin embargo, puede afectar cualquier parte de éste. No se reporta que efecte otro órgano de la planta excepto los peciolos (Crop Knowledge Master 2005). El área infectada presenta depresiones y ablandamiento. El hongo crece rápidamente causando lesiones que pueden expandirse y llegar hasta la cavidad donde se encuentran las semillas. Los picnidios oscuros suelen formarse a los siete días después de la infección. El tejido infectado se vuelve blando y húmedo pero generalmente no produce secreciones acuosas como en el caso de la pudrición por Rhizopus (Albornett y Sanabria 1994). La enfermedad se observa raramente en el campo cuando los frutos están verdes, sin embargo se manifiesta cuando los frutos comienzan a madurar. Phomopsis al igual que Rhizopus pueden aprovechar el ataque de enfermedades como la antracnosis y la mancha negra causada por Cercospora para infectar los frutos (Crop Knowledge Master 2005). Enfermedades por Rhizopus R. stolonifer ocasiona una pudrición blanda generalizada en el fruto, llegando hasta la cavidad donde se encuentran las semillas. El fruto enfermo se cubre con un micelio áereo de color blanco grisaceo (Albornett y Sanabria 1994). Pudrición de la base del tallo por Phythium, Rhizoctonia y Fusarium Esta enfermedad es producida por los hongos Phythium, Rhizoctonia y Fusarium, los cuales atacan las plántulas a nivel de los viveros. Atacan las células suaves del parénquima cortical, dañándolo y produciendo la muerte de las plantitas. Estos hongos pueden afectar aún después del trasplante, provocando una muerte paulatina de las

79 60 plantas en el campo; sin embargo, cuando las plántulas van madurando y lignificando sus tejidos, se desarrolla una resistencia al daño por estos hongos. Cuando las plántulas de papaya son trasplantadas muy jóvenes al campo, se producen problemas frecuentes con estos hongos, al presentarse lluvias abundantes y frecuentes (Zepeda 2006). Los síntomas de esta enfermedad son amarillamiento de las plantas y marchitez por la pudrición de las raíces, desprendiéndose fácilmente al se arrancadas. (Zepeda 2006). Pudrición del pie o pata negra por Phytophthora sp. Varias especies del género Phytophthora han sido citadas como los responsables directos de la enfermedad, entre ellos P. cinnamomi, P. parasítica Y P. palmivora; También se cita como agentes etiológicos de la enfermedad a Phytophthora sp. y Pythium sp. y se afirma además que es producida por un complejo formado por varios hongos, entre ellos especies de Phytophthora, Pythium, Rhizoctonia y Fusarium (Mora y Morales 1980). Cuando la enfermedad se encuentra en sus estados iniciales se manifiesta como una pudrición seca, color café oscuro en el ápice de las raíces más jóvenes. En estados avanzados se observa ausencia total de raíces secundarias y una pudrición ascendente del pivote central de la raíz, que pierde su consistencia sufriendo además desintegración de los tejidos; su coloración normalmente es café oscuro y presenta olor desagradable. Esta pudrición generalmente asciende hasta el nivel del suelo y con frecuencia la cavidad central del tallo se amplía, hasta que queda sólo la corteza. En muy pocos casos la pudrición alcanza alturas mayores a la del nivel del suelo (Mora y Morales 1980). Ramírez et al. (1994) en un ensayo realizado en Alajuela, Costa Rica demostraron que conforme la plántula de papaya criolla madura, se vuelve mas resistente a la infección por Phytophthora sp.

80 Marco referencial En este apartado se describen aspectos relacionados con la producción de payaya en el departamento de Petén. Se presenta además información relacionada con las fincas en donde se tomaron muestras y se hace mención de las investigaciones que han antecedido en el estudio de enfermeades de papaya en este departamento Producción de papaya en Guatemala Según estadísticas de la FAO en el año 2001 Guatemala mantuvo 700 hectáreas sembradas con papaya, produciendo para ese año 25,000 toneladas métricas, equivalentes a un rendimiento de toneladas métricas por hectárea (35,710 kg por hectárea) (Persley y Ploetz 2003). Por otra parte, datos del IV Censo Nacional Agropecuario revelan que para el año 2003 existían en Guatemala 5,678 fincas dedicas a la producción de papaya, con una superficie cultivada de hectáreas, de las cuales el 67.90% se encontraban en edad productiva. Para ese año la producción obtenida fue de 29,603 toneladas métricas (INE 2004). Las variedades con mejor potencial de adaptación a las condiciones de Guatemala son las hawaianas del tipo solo (cultivares Sunrise y Subset), Maradol e híbridos como Tainung (OIRSA 2003). Según datos del Proyecto Desarrollo de la Fruticultura y Agroindustria (PROFRUTA), en el año 2001 se establecieron 1,350 hectáreas en todo el país, de las cuales el 90% producían variedad Criolla y el restante 10% la Variedad Maradol. Durante el 2006 se estableció un área similar pero con un aumento de la Variedad Maradol cultivándose ahora en 30% del total de área establecida (Zepeda 2006). Con este cultivo un pequeño productor de una manzana puede, con su familia lograr ingresos de Q.120,000 hasta Q.150,000 es dos años (Zepeda 2006). En Guatemala los productores de papaya venden su producto en la Capital del País, ya sea en la Central de Mayoreo (CENMA) o en la Terminal de la Zona 4, los principales compradores en este caso son los mayoristas. Otra forma de vender el producto es a los compradores provenientes de El Salvador, los cuales muchas veces compran la plantación (Zepeda 2006).

81 62 Durante los últimos años, la papaya se ha convertido en una de las frutas que tiene potencial para exportar. En el año 2004 la Asociación de Productores de Papaya por medio de AGEXPRONT firmó con el gobierno de los Estados Unidos, un convenio para lograr las exportaciones, declarando algunas zonas libres de la mosca del mediterráneo Ceratitis capitata (Zepeda 2006). Para el año 2004 el 100% de la papaya de exportación se dirigió al mercado de Estados Unidos. En ese mismo año se exportaron alrededor de 450 toneladas métricas, lo que representó más de 16 millones de Quetzales ($2 millones) (Zepeda 2006) Producción de papaya en El Petén Al analizar el siguente cuadro, el cual describe la situación del cultivo de papaya para el año 2003 en El Petén, se puede pensar que la situación del cultivo en el departamento es incipiente y carente de importancia, máxime si se le compara con la producción de papaya (C. papaya) a nivel nacional para ese mismo año. Sin embargo esta situación comenzó a cambiar drásticamente en los años siguientes a la publicación del censo agrícola. Para el año 2005 se sembraron en todo el departamento de El Petén aproximadamente 75 hectáreas con papaya (Cigarroa 2005), llegando en el 2007 a cultivarse más de 200 hectáreas con esta fruta. Esto se traduce en un crecimiento de más del 500% en relación al año 2003 cuando se contabilizaban tan solo 39.2 hectáreas. Cuadro 10. Cultivo de papaya (Carica papaya L.) en Petén, año agrícola Municipio Número de fincas Superficie cultivada (Hectáreas) En edad En edad no Total productiva productiva Número de plantas dispersas Producción (1X10 6 Kg) Flores San José San Benito San Andrés La Libertad San Francisco Santa Ana Dolores San Luis Saxayché Melchor de Mencos Poptún Total Petén , Fuente: IV Censo Nacional Agropecuario 2004

82 63 En septiembre de ese año, se cosecharon aproximadamente 1 millón 350 libras de papaya, siendo Centroamérica el principal mercado para comercializar el producto, principalmente Honduras y el Salvador. Durante ese año no se exportó hacia Estados Unidos debido a que el precio en este mercado se encontraba más bajo que en el de Centroamérica (Cigarroa 2005) Aspectos importantes de las fincas estudiadas en la presente investigación Durante el año 2007, el Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación para asuntos específicos de Petén (MAGA Petén) tenía conocimiento de 6 fincas con la mayor actividad comercial de papaya (C. papaya), siendo éstas: La Estancia, Misión Técnica Agrícola de Taiwán, Tikal Papaya 1, Tikal Papaya 2, Empresa Campesina Asociativa (ECA) El Porvenir y Cooperativa La Blanca. Las cinco primeras se encuentran localizadas en el municipio de La Libertad y la última en el municipio de Melchor de Mencos. Los materiales producidos hasta el 2007 son la papaya Maradol y la Tainung, aunque algunas fincas continúan experimentando con nuevas alternativas, como el híbrido Golden, para comprobar su adaptabilidad a las condiciones de la región. El siguiente cuadro hace referencia a las 6 fincas antes mencionadas, su localización y la variedad o híbrido que producen. Cuadro 11. Fincas productoras de papaya con mayor actividad comercial en los municipios de La Libertad y Melchor de Mencos, año Finca Municipio Área cultivada Variedad / Híbrido (Há) La Estancia La Libertad 45 Maradol Misión Taiwán La Libertad 16 Tainung Tikal Papaya 1 La Libertad 48 Tainung Tikal Papaya 2 La Libertad 96 Tainung ECA El Porvenir La Libertad 14 Maradol Cooperativa La Blanca Melchor de Mencos 10.5 Maradol Fuente: Entrevista con coordinadores de Brigadas del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP), Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentació, Petén. 2007

83 64 La Estancia es una finca propiedad de la empresa Yalcachimba S.A. Ésta se encuentra localizada en la aldea Los Manueles, en el municipio de la Libertad a 600 Km de la ciudad capital y a 137 Km de Flores, la cabecerca departamental. Se trata de una finca con diversidad de cultivos que cuenta con una extensión de 154 caballerías (6930 hectáreas), de las cuales 45 hectáreas se encuentran sembradas con papaya (C. papaya) variedad Maradol. Su producción se destina al mercano nacional (Sosa 2005) La actividad principal de la finca es la ganadería y para ello cuenta con una extensión de 84 caballerías con pasto brizanta (Brachiaria brizantha), humidícola (Brachiaria humidicola) y estrella (Cynodon nienfuensis Vanderyst). El área restante se utiliza para producción de otros frutales, además de papaya (Carica papaya), dentro de los que se pueden mencionar limón persa (Citrus latifolia Tan.), rambután (Nephelium lappaceum), mandarina (Citrus aurantium), carambola (Averrhoa carambola), guayaba (Psidium guajaba), chico (Pouteria mamossa), pitaya (Hylocereus triangularis), mangostán (Garcinia mangostana), toronja (Citrus maxima) (Sosa 2005) La Misión Técnica Agrícola de la República de China se estableció por medio del Acuerdo de Cooperación Técnico Agrícola entre la República de Guatemala y la República de China, decreto número 32-77, emitido el 23 de junio de En julio del 2001 comienza a evaluar la posibilidad de trabajar un proyecto de desarrollo de papaya (C. papaya) en el departamento de Petén, decisión en parte influida por la declaración de MOSCAMED (programa para la erradiciación de la mosca del mediterráneo), en agosto del 2001, manifestando la eliminación de la mosca del mediterráneo (Ceratitis capitata) en este departamento. (La Prensa 2001, Cigarroa 2005) Esta declaración fue posteriormente ratificada por Estados Unidos en septiembre de ese mismo año por medio de la entrega de un certificado oficial en donde Petén es reconocido como Área Libre de la mosca del mediterráneo (C. capitata) (La Prensa 2001). Misión Taiwán desarrolló primero un proyecto experimental en el vivero El Subín, municipio de La Libertad, para determinar la variedad de papaya (C. papaya) que podría tener mayor éxito, destacando las variedades Maradol y Hawaiana y el híbrido Tainung. (Cigarroa 2005). Durante el desarrollo de la presente investigación Misión Taiwán producía de forma comercial únicamente el híbrido Tainung con un total de 16 hectáreas sembradas en una

84 65 finca localizada en la cabecera municipal de La Libertad. Una de las características de esta finca es su producción tecnificada. El producto se destina principalmente para la exportación. Misión Técnica Agrícola de Taiwán también brinda apoyo técnico a agricultores individuales, grupos organizados o empresas, que desem establecer un proyecto de papaya (Carica papaya) en el territorio de Petén, por ejemplo, han colaborado con la aseroría a productores de municipios de Poptún, La Libertad, San Benito y Melchor de Mencos Los primeros contactos para la producción de fruta en El Petén por parte de empresas brasileñas se dan a inicios del año Ya en el año 2005 una empresa de esta país sudamericano llamada Kaliman tenía en este departamento aproximadamente 8 hectáreas de papaya (Carica papaya) sembradas como prueba (Cigarroa 2005) En Guatemala esta empresa se conoce como Tikal Papaya y durante el desarrollo de la presente investigación contaba con dos fincas, Tikal Papaya 1 y Tikal papaya 2, localizadas en la aldea Las Cruces, municipio de La Libertad. Es importante indicar que esta empresa tiene entre las dos fincas un área total de 144 hectáreas, 46 hectáreas en la finca Tikal Papaya 1 y 98 en la 2, sembradas con el híbrido Tainung, lo cual representa el 62.1% del total del área cubierta con papaya (C. papaya) que se estudió en este diagnóstico. Su sistema de producción es de alta tecnología. Se dedica principalmente a la exportación de la fruta. Tanto la Cooperativa La Blanca, localizada en la aldea del mismo nombre en Melchor de Mencos, como la Empresa Campesina Asociativa (ECA) El Porvenir, en la cabecera municipal de la Libertad, iniciaron sus actividades de producción de papaya (C. papaya) en el año Estas dos fincas se caracterizan por su producción semitecnificada, la primera cuenta con un área de 10.5 hectáreas y la segunda con 14 hectáreas. Antes de dedicarse a la papaya (C. papaya) su actividad principal consistía en la siembra de maíz (Zea mays) y otros cultivos de tipo tradiconal. Su principal mercado es el nacional aunque en ciertas ocasiones han exportado a países centroamericanos.

85 Investigaciones publicadas acerca de enfermedades que afectan el cultivo de papaya (C. papaya) en El Petén En la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos no aparece publicada, hasta el año 2007, ninguna investigación de enfermedades de papaya (C. papaya) en el departamento de El Petén. Esto parece lógico si se considera que este cultivo comenzó a tomar relevancia en el Petén después del año Aparecen únicamente dos documentos relacionados con el tema, el primero es el de Corado Martinez (1999) titulado diagnóstico de enfermedades fungosas y bacterianas en el cultivo de papaya hawaiana (Carica papaya L.) en la aldea Mojarritas, Monjas, Jalapa. En el documento citado se hace referencia a enfermedades en otra variedad de papaya, la hawaiiana, y en otra región con características distintas a las de las fincas localizadas en Petén. Otro documento es un diagnóstico efectuado en la finca La Estancia, una de las fincas de estudio de la presente investigación, elaborado por Sosa Berganza (2005). Allí se describen aspectos generales relacionados con la finca, tales como: su localización, vías de acceso, topografía, fuentes hídricas, fisiografía, actividades que se realizan, área ocupada por cada cultivo, problemas de la finca, entre otros. Y no obstante se manifiestan dos hechos importantes como lo son los problemas con enfermedades en cultivo de papaya (C. papaya) y altos costos de producción en este cultivo debido a la fertilización, no se menciona la realización de ningún diagnóstico quedando abierta de este modo la posibilidad para efectuar uno. En la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia de la Universidad de San Carlos aparecen dos puplicaciones en donde se investigan bacterias fitopatógenas en el cultivo de papaya (C, papaya) en el departamento de El Petén. La primera, de Cano Alfaro (2006), se titula Determinación de bacterias fitopatógenas en cultivos de papaya (Carica papaya) en finca La Estancia, municipio de La Libertad, Petén, Guatemala. La segunda de Ventura Prera (2007), titulada Identificación de bacterias fitopatógenas en cultivos de papaya (Carica papaya) en las fincas El Pantanal y el Subín, ubicadas en el departamento de El Petén, Guatemala. Según estas dos investigaciones, tanto en la finca La Estancia como en la de El Pantanal existe la presencia de bacterias fitopatógenas, no así en la del

86 67 Subín. En la Estancia se identificó la presencia de Erwinia sp. ocasionando manchas y pudriciones en frutos. La misma bacteria fue encontrada en la finca El Pantanal (11, 60). Siempre relacionado con el tema de la papaya (C. papaya) aunque no con el de las enfermedades se encuentra la investigación de Cigarroa (14) del año 2005 titulada Misión Técnica Agrícola de la República de China, una oportunidad de desarrollo para Guatemala: Proyecto de papaya en El Petén. Esta publicación pertenece a la Escuela de Ciencia Política de la Universidad de San Carlos de Guatemala y hace referencia a la historia y avance del cultivo de papaya (C. papaya) en el departamento. Se puede observar que todas estas investigaciones tienen en común haber sido publicadas después del año 2005 y son una muestra de la importancia que ha tomado el cultivo de la papaya (C. papaya) en El Petén. Sin embargo la Facultad de Agronomía carece de publicaciones, por lo menos a nivel exploratorio o de diagnóstico, acerca de enfermedades fungosas o plagas que afecten este cultivo en el Petén y en donde se estudie el problema desde un punto de vista más agronómico.

87 Objetivos General Establecer la presencia de enfermedades ocasionadas por hongos en el cultivo de papaya en los municipios de La Libertad y Melchor de Mencos durante el ciclo agrícola Específicos Determinar los géneros de hongos asociados a enfermedades en el cultivo de papaya Caracterizar los síntomas típicos de cada uno de los géneros determinados Establecer la incidencia y severidad de los géneros identificados.

88 Metodología La presente investigación fue de carácter descriptivo y de diagnóstico. Se determinaron los géneros de hongos fitopatógenos aosicados al cultivo comercial de papaya (Carica papaya) en el área central y sur del departamento del Petén, además se cuantificó el nivel de incidencia y severidad de la enfermedad in situ Fase de Campo La fase de campo se efectuó desde marzo del 2007 hasta diciembre de ese mismo año. Se efectuaron un total de 35 muestreos durante los cuales se colectaron alrededor de 225 muestras tanto de hojas, frutos, ramas, tallos, raíz y suelo. Para la realización de esta fase se contó con la colaboración del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) a través de las brigadas de campo, proporcionando, además de varios materiales, vehículos para el traslado de las muestras desde las fincas hasta el laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén en Santa Elena, Flores. Ubicación de las áreas de muestreo Las muestras se colectaron en 6 fincas localizadas en la región central del departamento de El Petén: Cooperativa la Blanca, en el municipio de Melchor de Mencos; Empresa Campesina Asociativa (ECA) El Porvenir, La Estancia, Misión Taiwán, Tikal Papaya 1 y Tikal Papaya 2 en el municipio de La Libertad. Con ello se cubrieron 230 hectáreas cultivadas con papaya (C. papaya). Al mismo tiempo se colectaron muestras pertenecientes a huertos localizados en municipios de Flores y Dolores, y además de este material, también se analizaron muestras ingresadas por brigadas del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) y por particulares. Cuadro 12. Ubicación de los lugares donde se colectó material vegetal para la investigación. Nombre Comunidad Municipio Coordenadas Latitud Longitud 1 Cooperativa La Blanca La Blanca Melchor 16, , ECA El Porvenir Cabecera La Libertad 16, , La Estancia Los Manueles La Libertad 16, , Misión Taiwán Cabecera La Libertad 16, , Tikal Papaya 1 Las Cruces La Libertad 16, , Tikal Papaya 2 Las Cruces La Libertad 16, , Huertos Barrio Cobán Dolores Huertos Santa Elena Flores Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. en base a datos de campo. los

89 70 Figura 10. Localización de puntos de colecta de material vegetal para la investigación Fuente: Elaborado por Rodas Gaitán, H. con base a información de campo.

90 71 Figura 11. Vista de cada finca estudiada en la presente investigación. A. Aldea La Blanca; B. ECA El Porvenir; C. La Estancia; D. Misión Taiwán: E. Tikal Papaya 1 y F. Tikal Papaya 2. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

91 72 Criterios para la delimitación de áreas de muestreo Dos fueron los criterios tomados para elegir las 6 fincas: el primero, el área cultivada, todas las fincas tienen un área mayor de 10 hectáreas; el segundo, el sistema productivo, las fincas son de tipo comercial y en el caso de Misión Taiwán y Tikal Papaya exportan el producto. Tipo de muestreo El muestreo fue de tipo dirigido, efectuándose caminamientos dentro de las plantaciones para colectar plantas, o partes de éstas, con síntomas de enfermedades o con indicios de cualquier anormalidad. Toma y traslado de muestras Se realizaron caminamientos dirigidos en busca de plantas con sítomas de problemas patológicos. Se colectaron muestras con síntomas en diferentes fases del desarrollo, desde iniciales hasta aquellas en donde se manifestaban claramente los signos del patógeno. Se prefirió que la muestra contara con tejido sano y enfermo a fin de poder identificar la línea de avance del patógeno. Se describieron síntomas y se tomaron fotografías in situ. Las muestras de hojas y tallos se cubrieron con papel mayordomo y papel periódico y luego se introdujeron en bolsas de polietileno. Las muestras de fruto se envolvieron en papel periódico a fin de protegerlas de golpes. Se colectaron muestras de raíz y suelo. Cada muestra se identificó con el nombre de la finca y la fecha en que fue tomada. Esta información se anotó en una libreta de campo en la cual se adjuntaron los siguientes datos: variedad de papaya, geoposicionamiento de la finca, observaciones de sintomatología, incidencia y severidad, antecedes de la

92 73 enfermedad en la región, aspectos edafoclimáticos, aplicación de fertilizantes y pesticidas, entre otros. Las muestras fueron trasladas al Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén. Figura 12. Fase de campo de la investigación Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Cuantificación de la severidad La severidad se define como la cantidad de tejido afectado por la enfermedad en una planta, expresado generalmente en % de área. Para cuantificar la severidad se utilizaron dos tipos de escalas diagramáticas, una para enfermedades foliares y otra para enfermedades que afectaron el fruto. Estas escalas se muestran a continuación Cuantificación de la incidencia Para cuantificar la incidencia se relacionó el número de plantas afectadas por la enfermedad con el número total de individuos en la plantación mediante la siguiente fórmula

93 74 Figura 13. Escala diagramática utilizada para determinar severidad de enfermedades foliares en papaya. Fuente: Elaborada por Ortiz Cardona, K.A.

94 75 Figura 14. Escala diagramática utilizada para la determinación de severidad de enfermedades en fruto de papaya Fuente: Elaborada por Ortiz Cardona, KA.

95 Fase de Laboratorio Las muestras fueron ingresadas, procesadas y analizadas en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario del Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación (MAGA) de Petén ubicado en la Calle a las Cuevas Actun Kan, Santa Elena, Flores. La información recopilada en campo fue transcrita a las boletas utilizadas por el laboratorio para que de esta forma quedara un registro de los datos recopilados. Procesamiento de la muestra Luego de registrada la información de las muestras en la base de datos del laboratorio se procedió con la siguiente metodología Se realizó un examen microscópico directo con el estereoscopio estudiando lesiones en donde se pudieran encontrar signos de la enfermedad (cuerpos fructíferos como conidióforos, picnidios, acérvulos, peritecios, etc.) y se describieron los síntomas y signos visibles para complementar la información recopilada en campo Cuando el material recolectado no manifestó la presencia de signos, fue necesario promover la formación de estos en cámara húmeda por un tiempo de 24 a 48 horas. Se realizó un registro gráfico en cada uno de estos pasos Diagnóstico Dependiendo del tipo de signos observadose realizaron raspados superficiales de las lesiones o cortes perpendiculares de tejido. Posteriormente se efectuaron las tinciones colocando el corte o raspado en un portaobjetos con una gota de lactofenol claro, azul o rojo. Luego de la observación con microscopio, se identificó el género del hongo utilizando características de micelio, conidias, estructuras fructíferas. Para ello se cotejaron claves especializadas: Barnett, H.; Hunter, B Illustrated genera of imperfect fungi. Minnesota, US, The American Phytopathological Society (APS) Press. 218 p. Hanlin, R Illustrated genera of ascomycetes. St. Paul, Minnesota, USA, The American Phytophathological Society. 275 p.

96 77 Se procedió a la descripción del hongo en base a las estructuras encontradas y su sintomatología. Para concluir con el procedimiento se tomaron fotografía de los montajes elaborados. Figura 15. Vista interna y externa del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén, año Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, K.A. 2007

97 Resultados y discusión En esta sección se describen los resultados obtenidos después de procesar y analizar las muestras tomadas durante la fase de campo. Se presenta un cuadro con el resumen de los géneros de hongos determinados, el órgano de la planta afectado, el síntoma, la variedad o hibrido atacado, las fincas en donde se presentó la enfermedad y por último la incidencia y serveridad cuantificadas en campo. Después se hace una descripción más detallada en donde se incluye información de signos y síntomas observados por enfermedad. Previo a esto se mencionan varios aspectos como edad de las plantaciones, suelos, manejo agronómico, que deben tomarse en cuenta para comprender mejor los resultados y que pueden también complementar la información presentada Aspectos a considerar en esta investigación Los resultados se obtuvieron de muestras tomadas en un área de 230 hectáreas sembradas con papaya (C. papaya) a lo largo de la zona central y sur de Petén. Las muestras colectadas pertenecen a dos materiales genéticos diferentes: la variedad Maradol y el híbrido Tainung. En el siguiente cuadro se presenta el resumen de la información recabada durante la toma de muestras. Cuadro 13. Información de los lugares donde se colectó material vegetal para la Nombre investigación. Comunidad Localización Municipio Coordenadas Latitud Longitud Extensión (ha) Área relativa (%) Altura msnm 1 Cooperativa La Blanca La Blanca Melchor 16, , % 101 ECA El 2 Cabecera Porvenir La Libertad 16, , % La Estancia Los Manueles La Libertad 16, , % Misión Taiwán Cabecera La Libertad 16, , % Tikal Papaya 1 Las Cruces La Libertad 16, , % Tikal Papaya 2 Las Cruces La Libertad 16, , % Barrio Cobán Dolores % Huerto Santa Elena Flores % 157 Total de hectáreas muestreadas % Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, K. en base a datos de campo La edad de las plantaciones al momento de efecutar los muestreos era heterogéna inclusive dentro de una misma finca. Esta heterogeneidad se debe a un sistema de siembra escalonado el cual permite cosechar sin interrupciones y es que al terminar la

98 79 vida útil de un área y miestras ésta es resembrada, se tienen otras bajo producción. El rango de edad de las muestras colectadas va desde los 0 hasta los 18 meses. Los distanciamientos entre plantas y entre surcos encontrados en las fincas tampoco fueron homogéneos. En promedio se observó una separación de 1.6 m entre planta y 3.1 m entre surco para una densidad de 2016 plantas por hectárea. Los resultados de los análisis de suelo efectuados en las fincas Misión Taiwán, Tikal Papaya 2, en el municipio de La Libertad, y La Blanca en el municipio de Melchor de Mencos, mostraron que los suelos son menos básicos en las plantaciones ubicadas en La Libertad en comparación con la finca ubicada en Melchor de Mencos. Los resultados completos de estos análisis se incluyen en el siguiente cuadro. Cuadro 14. Resultados de los análisis químicos de suelo de 3 fincas de papaya, Petén, ppm Meq/100 gr. Ppm ph P K Ca Mg Cu Zn Fe Mn Rango medio Tikal Papaya Misión Taiwán La Blanca Fuente: Resulados de muestreos de suelos efectuados en las fincas. Según el manejo dado al cultivo, las fincas estudiadas en la presente investigación pueden dividirse en dos categorías: la tecnificada y la semitecnificada. En la primera categoría se consideraron las fincas caracterizadas principalmente por la mecanización de la mayor parte de actividades agrícolas, la implementación de programas preventivos para control de plagas y enfermedades además de tratamientos postcosecha. Dentro de esta categoría se incluyen las fincas: Tikal Papaya 1, Tikal Papaya 2, Misión Taiwán y La Estancia. Las tres primeras destinan un promedio del 90% de su producción a la exportación y el resto al mercado nacional. En la categoría semitecnificada la característica principal es la poca mecanización de las actividades agrícolas aunado a un programa de control más curativo que preventivo de plagas y enfermedades. La producción de estas fincas se destina a mercado nacional y centroamericano. Aquí se incluyen las fincas La Blanca y El Porvenir.

99 Descripción de las enfermedades ocasionadas por hongos Se identificaron 7 géneros de hongos fitopatógenos; Botryodiplodia sp., Cercospora sp., Cladosporium sp., Colletotrichum sp., Corynespora sp., Mycosphaerella sp. y Phoma sp./phylostycta sp. Se consideró que el más importante de éstos fue Colletotrichum sp., tomando como criterios, primero, el de presentar valores altos de incidencia y severidad y segundo, el de afectar el furto al producir antracnosis reduciendo su valor comerciall. En el siguiente cuadro se presentan los géneros de hongos identificados, el síntoma que produce, el órgano de la planta donde se presenta y la variedad (en el caso de Maradol) o el híbrido (en el caso de Tainung) afectado. Cuadro 15. Resultados del diagnóstico de enfermedades ocasionadas por hongos No Género del patógeno en el cultivo de papaya (C. papaya) en seis fincas de El Petén durante los meses de enero a diciembre del año 2007 órgano atacado Síntoma Variedad / Híbrido afectado 1 Botryodiplodia sp. fruto Pudrición negra Tainung 2 Cercospora sp hoja fruto Mancha necrótica con halo Manchas pudriciones 3 Colletotrichum sp. fruto Antracnosis y Maradol Tainung Tainung Maradol Tainung 4 Cladosporium sp. fruto Pudrición interna Tainung 5 Corynespora sp. fruto 6 Mycosphaerella sp. hoja 7 Phoma sp. Manchas pudriciones y mancha necrótica con halo Tainung Maradol Tainung hoja mancha necrótica Maradol Phyllostica sp. Fuente: elaborado por Ortiz Cardona, K:A y y y Fincas en donde se observó el problema Misión Taiwán, Tikal Papaya 2 y Barrio Cobán La Blanca, El Porvenir, La Estancia, Misión Taiwán, Tikal Papaya 1, Tikal Papaya 2, Huerto Santa Elena y Barrio Cobán Misión Taiwán y Tikal Papaya 2 La Blanca, El Porvenir, Misión Taiwán Misión Taiwán y Tikal Papaya 2 Misión Taiwán Y Tikal Papaya 2 La Blanca, Misión Taiwán, Tikal Papaya 2, Barrio Cobán La Blanca, Tikal Papaya 1 Incidencia máxima (%) Severidad máxima (%) A continuación se describen los síntomas, signos, incidencia y severidad de los patógenos identificados en la presente investigación, los cuales aparecerán en orden alfabétco.

100 81 Botryodiplodia sp. Signos: Picnidios de color oscuro y globoso. En su interior se encontraron dos clases de conidias: la primera, del tipo hialino, unicelular y de forma elíptica y la segunda, oscura, bicelular, elíptica y con estriaciones longitudinales. Aunque Barnett & Hunter (1998) identifican a las conidias hialinas y unicelulares como esporas pertenecientes a otro género de hongo anamórfico llamado Macrophoma sp., se les toma más bien como un estado inmaduro o inicial de Botryodiplodia sp. y no tanto como un género fúngico aparte. Para concluir el diagnóstico respecto a la identidad del patógeno observado, se tomó como criterio los reportes de enfermedades en papaya (C. papaya), en los cuales no se hace referencia al género Macrophoma sp. pero si aparece citado Botryodiplodia sp., conocido también como Lasiodiplodia sp. (Ferr et al. 1989, Nishijima 1999, Krop Knowledge Master 2005) Figura 16. Picnidios y conidias de Botryodiplodia. Los picnidios se pueden apreciar en la fotografía superior izquierda. Las conidias bicelulares y oscuras son las esporas maduras del hongo mientras que las esporas hialinas y unicelulares son las inmaduras. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

101 82 Síntomas: En las muestras analizadas únicamente se le encontró como patógeno de la pudrición negra del fruto, no obstante está reportado que puede ocasionar pudriciones en otros órganos de la planta, como en tallo y ramas (Nishijima 1999). Se describe principalmente como una enfermedad postcosecha (Krop Knowledge Master 2005) aunque durante la toma de muestras se observó varios casos en los cuales los frutos no había llegando al punto de corte y presentaban ya los síntomas iniciales de la enfermedad, a saber, pequeñas áreas de color gris en la punta o ápice del fruto. Los estados avanzados de esta enfermedad se caracterizaron por áreas entre 2 centímetros y 5 centímetros de longitud por unos 2 centímetros en la parte más ancha, con una coloración oscura o casi negra debido a la masa de picnidios maduros desarrollados en pericarpio del fruto. En varias muestras se produjo la coalescencia de las áreas afectadas las cuales prácticamente cubrieron la totalidad del fruto. Al efectuar cortes transversales en el fruto se observó daños tanto tanto a nivel del pericarpio como del mesocarpo. El avance de la enfermedad fue del ápice o punta del fruto hacia el extremo en donde éste se une al tallo (pedúnculo). En los casos más severos el hongo curbrió toda la superficie del fruto hasta provocar momificación del mismo. El híbrido Tainung resultó ser el único susceptible al ataque de este hongo (no se observaron infecciones en la variedad Maradol) con una severidad máxima del 80% y una incidencia del 25%. La enfermedad fue observada desde el mes de septiembre y continuó hasta el mes de diciembre. Figura 17. Sintomatología ocasionada por Botryodiplodia en fruto de papaya híbrido Tainung. Fuente: Ortiz Cardona, KA. 2007

102 83 Cercospora sp. Signos: Se observaron conidióforos oscuros, sobresaliendo en grupos sobre el tejido de la hoja; conidia ligeramente oscura, alargada, filiforme y multiseptada. Figura 18. Conidióforos y conidias de Cercospora Síntomas: Este hongo afectó hojas y frutos de la variedad Maradol y del híbrido Tainung. En las hojas se observó como síntoma inicial de la enfermedad áreas necróticas de color café claro, de forma irregular, con un diámetro no mayor de 5 o 6 milímetros rodeadas siempre de un halo amarillento. En todos los casos la sintomatología se presentó en plantas mayores de cinco meses. Figura 19. Lesiones foliares en su etapa inicial ocasionadas por Cercospora en hojas de la variedad Maradol. En la fotografía derecha se observa dentro de la lesión los conidióforos de Cercospora Fuente: Ortiz Cardona, KA. 2007

103 84 En muestras con estados avanzados de la enfermedad las áreas necróticas alcanzaron los 20 mm y su color se tornó a un café más oscuro. En varias hojas las lesiones se unieron hasta formar una superfice necrótica y quebradiza que cubrió casi toda la superficie de la misma. Figura 20. Deserrollo de los síntomas de Cercospora en hojas del híbrido Tainung. Se puede observar de izquierda a derecha la evolución de la enfermedad. Primero los síntomas se manifiestan como pequeñas lesiones necróticas de color café rodeadas de halo necrótico. Después las lesiones aumentan de tamaño y se produce una clorosis más evidente en toda la hoja. Por último se produce pérdida de tejido y defoliación. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, K La sintomatología hasta aquí descrita es reportada para: Cercospora melonis = Cercospora vignicola = Helminthosporium cassiicola = H. vignae = H. vignicola = Corynespora cassicola (Nishijima 1999, Krop Knowledge Master 2005) sin embargo, de éstos únicamente se encontraron en las lesiones conidias del tipo Cercospora sp. Corado (1999) reportó esta misma sintomatología en hojas de la variedad hawaiana en plantaciones localizadas en el departamento Jalapa, identificando como agente causal a Cercospora sp. y a Gloesporium sp.

104 85 En plantas con altos niveles de severidad se produjo el desprendimiento de hojas y ramas. En estos casos la caída de las ramas se dió en forma ascendente comenzando con las hojas maduras y luego con las jóvenes. Figura 21. Etapas avanzadas de Cercospora sp. En estas las etapas más avanzadas de la enfermedad se observa defoliación severa de las plantas Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA.2007 También se observó en estas etapas de la enfermedad signos del hongo ascomycota Mycosphaerella sp en las mismas lesiones ocasionadas por Cercospora sp. En relación a esto, Hanlin (1990) reporta al género Cercospora sp., como uno de los anamorfos (fase asexual) del hongo Mycosphaerella sp.

105 86 Cercospora sp. también fue encontrado en frutos de papaya Tainung y Maradol. El inicio de la enfermedad se manifestó con pequeñas manchas de borde irregular de color café oscurso, de unos 5 mm de diámetro, localizadas en en la parte del fruto que se une al tallo de la planta y que luego se fueron alargando. Esta descripción concuerda con lo reportadado por Nishijima en el Crop Knowledge Master (2005). En etapas finales de esta enfermedad se observaron lesiones más oscuras y de apariencia corchosa siempre en el pericarpio. Figura 22. Síntomas iniciales de Cercospora sp. en frutos del híbrido Tainung. Fuente: FotografíaOrtiz Cardona, KA En hojas la severidad máxima fue del 80% y su incidencia del 80% mientras en fruto la severidad máxima fue 40% y la incidencia de 25%. La enfermedad fue encontrada en todas las fincas y fue muy común observarla durante el transcurso de todo el año, desde el mes de marzo hasta el mes de diciembre, aunque su mayor incidencia ocurrió con la llegada de las lluvias.

106 87 Figura 23. Síntomas de Cercospora sp. en diferentes etapas. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

107 88 Cladosporium sp. Signos: Conidias unicelulares, café claro, ovoides a cilíndricas, algunas de forma irregular. Conidióforos largos y oscuros Figura 24. Conidióforos y conidas de Cladosporium Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Síntomas: El síntoma observado en las muestras colectadas fue el de pudrición interna del fruto, siedo el híbrido Tainung el único afectado por esta enfermedad. Ésta presentó una severidad máxima del 60% y una incidencia del 25%. Las primeras muestras con este síntoma fueron tomadas a finales del mes de julio en plantas de cinco meses. Figura 25. Síntomas ocasionados por Cladosporium en frutos del híbrido Tainung. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Los síntomas iniciales no fueron visibles externamente al no presentarse ningún daño a nivel de la epidermis del fruto y únicamente fueron observados al realizar un corte

108 89 transversal en frutos aparentemente sanos. En el mesocarpo de estos se observaron pudriciones húmedas de color marrón con poca formación de micelio en el ápice o punta del fruto. Una vez que la enfermedad comenzó a desarrollarse, la pudrición aumentó sus dimensiones hasta que los síntomas fueron visibles externamente. En estas etapas se observó formación de micelio de color grisáceo. El avance de la enfermedad fue del interior del fruto hacia afuera, iniciándose en la cavidad en donde se encuentran las semillas y dirigiéndose hacia el exterior, de modo que cuando se observaron los primeros síntomas en la epidermis del fruto, éste se encontraba en su interior totalmente invadido por el hongo. Figura 26. Corte transversal y vista externa de un fruto del híbrido Tainung con síntomas de pudrición ocasionada por Cladosporium. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 27. Comparación entre una semilla de un fruto sano y una de un fruto afectado por Cladosporium. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

109 90 En un 80% de las muestras analizadas con esta sintomatología se encontraron también micelio y conidias con las siguientes características: micelio blanco a ligeramente rosa; macroconidas hialinas pluricelulares, alargadas y ligeramente curvas, cuya descripción corresponde a las producidas por el hongo Fusarium sp. Los resportes que se tienen acerca de esta pudrición (Krop Knowledge Master 2005) indican que ésta puede ser ocasionada, aparte de Cladosporium, por el hongo Penicillium sp. no así por Fusarium. El hongo Fusarium sp. sí aparece reportado en papaya (C. papaya) pero ocasionando otro tipo de pudriciones (Farr et al. 1989, Nishijima 1999, Krop Knowledge Master 2005). Figura 28. Micelio y conidias de Fusarium encontrados en un 80% de frutos Tainung afectados por Cladosporium. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Según las observaciones realizadas la causa principal que permite la potencial entrada de las esporas de hongos al fruto del híbrido Tainung es un desorden fisiológico detectado únicamente en este híbrido, el cual consiste en que la flor al momento de formar el fruto no se fusiona completamente en el ápice, dejando un espacio lo suficientemente grande para el ingreso de esporas microscópicas de cualquier hongo. Estos espacios pueden permitir también la entrada de insectos o ácaros, los cuales pueden convertise en los medios por los cuales las esporas de estos hongos entren al fruto (Ochoa 1991). Esto explica el hecho que en un 60% de las muestras que fueron afectadas por la enfermedad, se encontraron también colonias de ácaros.

110 91 Figura 29. Problema fisiológico del híbrido Tainung Este problema fisiológico produce malformaciones que ocasionan que el fruto no cierre bien en la punta. Este orificio es lo suficientemente grande para que entren ácaros o esporas de hongos. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 30. Ácaros encontrados en frutos de Tainung afectados por Cladosporium Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA

111 92 Colletotrichum sp. Signos: Conidias hialinas, unicelulares, ovoides y elípticas, agrupadas en masas de color rosado o salmón y desarrolladas en acérvulos. En varios de estos acérvulos se logró observar setas simples y cortas. Figura 31. Acérvulo y conidias de Colletotrichum Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Síntomas: Se reporta para Colletotrichum pérdida del pericarpio, mancha chocolate y antracnosis en frutos (Zavala-León et al. 2005), lo cual afecta apreciablemene su calidad externa. De estos síntomas, se observó antracnosis acompañada de pérdida severa de pericarpio en frutos de Maradol y de Tainung. Figura 32. Síntomas de Colletotrichum sp. en frutos Los frutos de la variedad Maradol aparecen en la izquierda y los de Tainung a la derecha. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

112 93 Los síntomas iniciales consistieron en manchas más o menos circulares, de unos 5 a 8 mm, de color café claro, localizadas en la epidermis de los frutos. Estas manchas fueron expandiéndose y se conviertieron en depresiones de consistencia húmeda. En fases intermedias de la enfermedad se observaron en estas depresiones, masas de conidias de color rosado o salmón y en varias muestras las agrupaciones de esporas formaron círculos concentricos de color rosa. Figura 33. Masas conidiales de Colletotrichum sp. en frutos Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA En las etapas avanzadas, las depresiones aumentaron su diámetro, llegando a medir unos 7 cm, otras coalescieron a tal punto que deformaron el fruto. En esta etapa, en las concavidades formadas en la epidermis del fruto se observaron masas de acérvulos de color negro. Figura 34. Etapas avanzadas de antracnosis en frutos de Tainung Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

113 94 La severidad máxima alcanzada fue del 80% y su incidencia del 75%. La enfermedad fue encontrada en todas las fincas, observándosele durante el transcurso de todo el año. Un problema observado en las fincas muestreadas fue que muchos frutos con Colletotrichum sp. no eran cortados de la planta o permanecían dentro de las plantaciones, y por tanto se convertían en fuente de inóculo para la propagación de la enfermedad a frutos sanos y aun verdes. Figura 35. Colletotrichum sp en frutos con síntomas avanzados de la enfermedad Estos frutos permanecían en las planaciones lo que los convertía en una fuente de propagación de la enfermedad Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

114 95 Corynespora sp Signos: Conidióforos emergentes, oscuros, simples y anchos en el ápice. Conidias solitarias, alargadas, cilindricas, ligergamente curvadas, pigmentadas, pluricelulares, con una cicatriz visible en la base. Figura 36. Conidias de Corynespora Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

115 96 Síntomas: Este hongo puede afectar diferentes partes de la planta principalmente el tallo, fruto, peciolos y hojas (Krop Knowledge Master 2005). En las muestras analizadas se observaron únicamente formación de lesiones y pudrición en frutos. Los síntomas se manifestaron exclusivamente en el híbrido Tainung con una severidad máxima del 40% y una incidencia del 25%. Los síntomas dieron inicio a partir del mes de septiembre y continuaron presentándose con incidencias bajas hasta fin de año, manifestándose en frutos de plantas con edades de nueve meses en adelante. Figura 37. Conidióforos de Corynespora observados en lesiones foliares En la fotografía izquierda se puede observar los conidióforos emergentes de la lesión foliar ocasionada por Corynespora. En la fotografía derecha se tiene una vista en miscroscopio de estos conidióforos. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA En las etapas iniciales se observaron pudriciones de color café, de entre 0.5 a 2 cm de diámetro, que dieron inicio en la base del fruto (donde éste se une al tallo). En estapas más desarrolladas de la enfermedad se produce coalescencia de las lesiones, debido en parte a la excesiva esporulación del hongo, que cubre la epidermis del fruto con una coloración negra. Al hacer un corte trasversal del fruto, se comprobó la invasión del micelio del hongo en la región del mesocarpo y endocarpo. El resultado final fue el de una pudrición interna del fruto. Aunque se le considera como una enfermedad postcosecha los síntomas fueron observados en campo.

116 97 Figura 38. Síntomas iniciales de Corynespora en frutos de Tainung. En la fotografía de la izquierda aparece indicado en un círculo el síntoma inicial de la enfermedad. En la fotografía de la derecha se observa la vista ampliada con estereomicroscopio de este mismo síntoma. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 39. Corte transversal de un fruto de la variedad Taninung con síntomas ocasionados por Corynespora Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

117 98 Mycosphaerella sp. Signos: Ascosporas hialianas, algunas de color café pálido, elípticas, bicelulares, con septo aproximadamente a la mitad. Ascas oblongas y bitunicadas. Peritecio oscuro. Figura 40. Corte transversal de un peritecio de Mycosphaerella Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 41. Peritecios de Mycosphaerella En la fotografía de la izquierda se puede observar los peritecios en las lesiones foliares ocasionadas por el hongo. En la fotografía de la derecha se aprecia un corte transversal de estas estructuras vistas con microscopio. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

118 99 Figura 42. Ascas y ascosporas de Mycosphaerella En las fotografías se observan ascosporas con las siguientes características: hialinas (aquí aparecen coloreadas con lactofenol rojo) bicelulares y con septo aproximadamente a la mitad de la espora. También se aprecian las ascas (estructuras semejantes a bolsas en donde se encuentran las ascosporas) de tipo bitunicado. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

119 100 Síntomas: Este hongo fue identificado ocasionando los mismos síntomas que Cercospora sp., a saber, lesiones necrócticas rodeadas de un halo clorótico, en hojas de la variedad Maradol y del híbrido Tainung. Figura 43. Síntomas foliares ocasionados por Mycosphaerella Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 44. Lesiones foliares donde se observa los peritecios de Mycosphaerella Fuente: Ortiz Cardona, KA. 2007

120 101 Las primeras muestras en donde se identificó este patógeno fueron tomadas al final del mes de julio. Hanlin (1990) reporta para Mycosphaerella los siguientes anamorfos Cercoseptoria sp., Cercospora sp., Cercosporella sp., Cercosporidium sp., Cladosporium sp., Fusicladiella sp., Ovularia sp., Paracercospora sp., Phaeoisariopsis sp., Pseudocercospora sp., Rumularia sp., Septoria sp., Stenella sp. y Stigmina sp. apareciendo reportados en papaya (C. papaya) únicamente Cladosporium sp., ocasionando pudricones y Cercospora sp., ocasionando manchas necróticas. Por tanto Cercospora sp. y Mycosphaerella sp., pueden ser dos estados de desarrollo de la misma enfermedad. Esta observación se pudo comprobar en un 25% de las muestras colectadas con síntomas de manchas necróticas con halo, en donde en la misma lesión se encontraron signos de los dos hongos. En otras palabras, el hongo Mycosphaerella sp., apareció más en las etapas avanzadas de la enfermedad. Figura 45. Conidióforos de Cercospora y peritecios de Mycosphaerella en la misma lesión foliar Se puede observar los conidióforos de Cercospora sp. emergentes de la lesión mientras que los peritecios de Mycosphaerella presentan forma redondeada y se aprecian como puntos dentro de la lesión. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

121 102 Phoma sp. / Phyllosticta sp Phoma sp. y Phyllosticta sp. son dos géneros que aparecen muy relacionados en la literatura y morfológicamente en pocas ocasiones se les puede diferenciar (Barnett s.f) por lo que se les suele tomar como un solo género. Signos: Conidias pequeñas, unicelulares, hialinas, ovoides y en algunos casi esférica. Picnidio oscuro e inmerso en el tejido del hospedero. Figura 46. Picnidios de Phoma sp. Se observan en las fotografías los picnidios del hongo dentro de lesiones necróticas en hojas. También se muestra un corte transversal de la estructura del hongo visto con microscopio. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

122 103 Síntomas: Necrosis foliar en Maradol y Tainung, con una severidad máxima del 60% y una incidencia del 25%. Los síntomas ocasionados por este hongo se observaron con mayor frecuencia en la primera mitad del año. Inicialmente la enfermedad comenzó con pequeñas manchas necróticas de color café, de bordes más o menos regulares, de unos 5 mm de ancho, localizadas en los márgenes de la hoja. Coforme los síntomas se desarrollaron, éstas comenzaron a formar áreas necróticas más grandes y de un color más oscuro. Se observaron en el centro picnidios. Estas áreas son quebradizas y ocasionan destrucción del tejido foliar. El avance de la enfermedad fue del margen de la hoja hacia el interior de la misma. Se considera una enfermedad secundaria. Figura 47. Necrosis foliar ocasionada por Phoma sp. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

123 Conclusiones y recomendaciones Se identificaron 7 géneros de hongos en el área bajo estudio: Botryodiplodia sp., Cercospora sp., Cladosporium sp., Colletotrichum sp., Corynespora sp., Mycosphaerella sp. y Phoma sp. Las incidencias máximas encontradas para estos géneros fueron: Botryodiplodia sp. 25%, Cercospora sp. 80%, Cladosporium sp. 25%, Colletotrichum sp. 75%, Corynespora sp. 25%, Mycosphaerella sp.100% y Phoma sp. 25%. La severidad máxima encontradas para cada uno de estos géneros fue: Botryodiplodia sp. 80%, Cercospora sp. 80%, Cladosporium sp. 60%, Colletotrichum sp. 80%, Corynespora sp. 40%, Mycosphaerella sp.100% y Phoma sp. 60%. Se considera que la enfermedad más importante fue la ocasionada por el género Colletotrichum sp., debido a que presenta valores altos de incidencia y severidad y también por el hecho de afectar directamente al fruto de la planta por lo que reduce el valor comercial. Se recomienda profundizar en el estudio de los hongos determinados en este diagnóstico con énfasis en el tópico de la identificación de especies, principalmente en Colletotrichum. Se recomienda efectuar estudios respecto al control de las enfermedades diagnosticadas principalmente en el uso de variedades resistentes de papaya (C. papaya). Se recomienda efectuar el análisis económico de las pérdidas ocasionadas por estas enfermedades

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131 112 CAPÍTULO III SERVICIOS EFECTUADOS EN EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN CAPÍTULO 3 SERVICIOS EFECTUADOS EN EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO PETÉN

132 Presentación Los servicios que se describen a continuación tienen como objetivo contribuir a la documentación en el área fitopatológica del laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario de Petén con la presentación de datos obtenidos en esta región del norte de la República de Guatemala. Como primer servicio se procedió a ubicar áreas con problemas fitopatológicos potenciales mediante la colecta de material vegetal enfermo en distintos puntos del departamento de El Petén. Para esta etapa se contó con la ayuda de las brigadas del PROMIP encargadas del monitoreo de plagas en el departamento. Como resultado de este servicio se incluye el registro de los lugares donde se colectó este material. El segundo servicio consistió en el procesamiento de muestras en el laboratorio y la emisión de los diagnóstico, por lo que se analizaron tanto las muestras que se colectaron en las distintas visitas de campo efectuadas como parte del servicio 1 y también las que fueron ingresadas por las brigadas del programa de manejo integrado (PROMIP) y por particulares. La metodología para la determinación del agente causal de la enfermedad consistió en la elaboración de montajes, observación al microscopio y utilización de claves especializadas para identificar al patógeno. En los resultados de este servicio se incluyen las estadísticas de los resultados obtenidos y el resumen de los diagnósticos efectuados. Las descripciones de las sintomatologías, los hospederos afectados y la identificación de los agentes causales determinados durante la fase de diagnóstico se incluyeron en un documento titulado documentación de enfermedades ocasionadas por hongos diagnosticadas en el LDF Petén en cultivos propios del departamento y que constituye el servicio número 3. El servicio 4 consistió en la elaboración de un manual de procedimiento, en donde se describe los protocolos a seguir en análisis fitopatológicos en el laboratorio. Como servicio 5 se listan las exposiciones dirigidas a personal de campo acerca de temas de sanidad vegetal. En el acápite de servicios no planificados se describen actividades inicialmente no previstas pero en las cuales se tuvo participación directa. Estas actividades estuvieron orientadas en el apoyo de campo en monitoreo de plagas y en el reordenamiento del equipo y cristalería del laboratorio.

133 Identificación de áreas con problemas potenciales de fitopatógenos Objetivos General Identificar puntos en el departamento de El Petén con posibles problemas fitopatológicos. Específicos Proporcionar un registro con la ubicación de los lugares en donde potencialmente pueden presentarse problemas fitopatológicos. Identificar los cultivos que pueden presentar enfermedades ocasionadas por fitopatógenos. Colectar material vegetal enfermo para ser ingresado al Laboratorio de Diagnóstico Fitopatológico MAGA Petén Metodología Este servicio consistió en visitas de campo con colectas de material vegetal enfermo en distintos puntos del departamento de El Petén y se efectuó de marzo a diciembre del año Las colectas se realizaron en lugares próximos a puntos donde el VICEMAGA Petén mantiene monitoreo de plagas por medio del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP). Estas áreas se caracterizaron por tener actividad agrícola o forestal. También se colectó material en lugares de los cuales se tenían denuncias de posibles problemas con enfermedades. Durante la actividad se contó con la colaboración del personal de las brigadas del PROMIP, quienes proporcionaron los vehículos para el transporte de las muestras desde

134 115 el punto de colecta hasta el laboratorio. Los materiales fueron proporcionados por el LDF MAGA Petén La metodología utilizada fue la siguiente: Los muestreos fueron de tipo dirigido, durante los cuales se colectaron plantas, o partes de éstas, con síntomas de enfermedades o con indicios de cualquier anormalidad. También se colectaron muestras de raíces y suelo. Las muestras de hojas, ramas y tallos se cubrieron con papel mayordomo y papel periódico y luego se introdujeron en bolsas de plástico. Las muestras de raíz y muestras del suelo en bolsas de plástico. Cada muestra se identificó con el nombre de la finca o lugar de colecta y la fecha en que fue tomada. Esta información se anotó en una libreta de campo en la cual se adjuntaron observaciones importantes para el diagnóstico. El material para la colecta de las muestras consistió en: bolsas de polietileno, pisetas, espátulas, papel mayordomo, viales los cuales fueron proporcionados por el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén Resultados Se efectuaron entre marzo y diciembre del 2007 un total de 53 muestreos en diferentes puntos del departamento en los cuales se colécto material vegetal enfermo. En el cuadro siguiente aparecen descritos los lugares y los cultivos de los cuales se tomaron muestras que posteriormente se procesaron y analizaron en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario (LDF) Petén

135 116 Cuadro 16. Lugares donde se colectó material vegetal para la elaboración de diagnósticos fitopatológicos durante los meses de marzo a diciembre del Nombre Comunidad Municipio Coordenadas Latitud Longitud Cultivos muestreados 1 Cooperativa La Blanca La Blanca Melchor de 16,89441 Mencos 89,45336 Papaya 2 ECA El Porvenir Cabecera La Libertad 16, ,00628 Papaya 3 La Estancia Los Papaya, guayaba, La Libertad 16, ,59793 Manueles guanábana, mango 4 Misión Taiwán Cabecera La Libertad 16, ,09432 Papaya, cericote, frijol abono, ornamentales 5 Tikal Papaya 1 Las Cruces La Libertad 16, ,38184 Papaya Las 6 Tikal Papaya 2 Cruces La Libertad 16, ,39856 Papaya 7 Cooperativa Olazar Sacpuy San Andrés 16, ,04276 Limón persa 8 Estación Experimental El Remate El Remate Flores ,69104 Cítricos, chile 9 Hacienda Las Melchor de La Blanca 16,48839 Espuelas Mencos 89,33449 Limón persa 10 Barrio Cobán Dolores Papaya, piña 11 Cabecera La Libertad 16, ,00628 Maíz 12 Huertos Santa Elena Flores Papaya, maíz, mango, chile, almendro, Varios Varios 13 Cabecera municipal La Libertad puntos puntos Maíz, frijol 14 Comunidad Mario Méndez Sayaxché Varios Varios Cacao, tomate, pepitoria, puntos puntos otros Fuente: Ortiz Cardona, KA. Figura 48. Estación experimental El Remate, Flores, Petén. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

136 117 Figura 49. Hacienda Las Espuelas, Melchor de Mencos, Petén. Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 50. Cultivo de piña, Barrio Cobán, Dolores, Petén Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 51. Cultivo de pepitoria, comunidad Mario Méndez, Sayaxché, Petén Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007

137 118 Figura 52. Cultivo de limón persa, cooperativa Olazar, Sacpuy, San Andrés, Petén Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 53. Cultivo de Mango, Finca La Estancia, La Libertad, Petén Fuente: Ortiz Cardona, KA Evaluación El 70% de las muestras ingresadas al laboratorio para análisis fitopatológico procedieron de las colectas efectuadas durante esta actividad. Además en el laboratorio quedaron los registros de los lugares muestreados y de los cultivos que potencialmente pueden presentar problemas fitopatológicos. El laboratorio LDF Petén tiene ya disponibilidad de esta información.

138 Diagnóstico fitopatológico de las muestras ingresadas al laboratorio Objetivos General Proporcionar evidencia documentada de la presencia de problemas de enfermedades en cultivos propios de El Petén Específicos Proporcionar datos estadísticos de diagnósticos fitopatológicos efectuados en el LDF MAGA Petén. Identificar los hospederos afectados y los patógenos. Aumentar la proporción de diagnósticos fitopatológicos efectuados por el LDF MAGA Petén Metodología Las muestras ingresadas al laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén fueron las colectadas en los lugares visitados como parte del servicio 1. También se ingresaron y procesaron las muestras trasladas por las brigadas del PROMIP y por particulares. Los resultados de los ingresos y los diagnósticos que aquí se presentan también se encuentran registrados en los archivos del laboratorio en forma electrónica y en forma impresa (boletas de ingreso y egreso). El procesamiento y los diagnósticos fitopatológicos fueron realizados siguiendo protocolos de laboratorio ya establecidos (ver el manual de procedimientos en el anexo de este mismo capítulo). Un 90% de estos diagnósticos fueron realizados utilizando equipo (microscopios, estereoscopios, etc.) e instalaciones del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario (LDF) MAGA Petén mientras que para el restante 10% fue necesario utilizar equipo o instalaciones del laboratorio del Centro de Diagnóstico Parasitológico (CDP) de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos (FAUSAC), específicamente para efectuar análisis de nemátodos y oomicetos. La cristalería y materiales como portaobjetos, cubreobjetos, agujas de disección, pinzas, pinceles, bisturí fueron proporcionados por el LDF MAGA Petén así como también los reactivos utilizados para la tinción de montajes de hongos.

139 120 También se contó con el apoyo de otros laboratorios: el de Diagnóstico Fitosanitario del MAGA Km. 22; el de Suelo-Planta-Agua Salvador Castillo Orellana de la Facultad de Agronomía, Universidad de San Carlos y el de Protección Vegetal del Instituto de Investigaciones de la Universidad del Valle, quienes realizaron pruebas complementarias para confirmar o descartar algunos diagnósticos Para la determinación de los hongos se utilizaron características de micelio, conidias, estructuras fructíferas, cotejando con las siguientes claves especializadas: Barnett, H.; Hunter, B Ilustrated genera of imperfect fungi. Minnesota, USA. The American Phytopathological Society (APS) Press. 218 p Hanlin, R Illustrated genera of ascomycetes. St. Paul, Minnesota, USA. The American Phytophathological Society. 275 p. También se contó con la colaboración de profesionales del Laboratorio MAGA Petén, Laboratorio MAGA Km22 y del Centro de Diagnóstico Parasitológico (CDP) de la FAUSAC Resultados En el año 2007 se procesaron 126 muestras totales ingresadas oficialmente al laboratorio. Es importante acotar que durante los meses de enero, febrero, marzo y la primera quincena de abril no se procesaron muestras debido a que el laboratorio estaba fuera de servicio por trabajos de remodelación y ampliación. Las nuevas instalaciones fueron entregadas oficialmente el 13 de abril de Estadísticas Según el tipo de análisis para el cual fue ingresada la muestra, en el año 2007 se procesaron en el área fitopatológica el 48% del total de las muestras que ingresaron. Este porcentaje aumentó de un 2% en el 2006 a un 48% en el La distribución de las muestras según tipo de análisis durante el año 2007 aparece resumida en el siguiente cuadro.

140 121 Cuadro 17: Distribución de las muestras según el análisis para el cual fueron ingresadas. Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén. Año 2007 Tipo de análisis No. de muestras % Diagnósticos Entomológicos Fiagnósticos Fitopatológicos Ingresos totales Fuente: Datos recopilados por Ortiz Cardona, KA. en base a registro del laboratorio. De las 61 muestras para análisis fitopatológico, el 75% de éstas ingresó durante los meses de agosto, septiembre y octubre, que correspondió a la época más lluviosa en el departamento ese año. En el siguiente cuadro se presenta el número de muestras para análisis fitopatológico que se procesaron mensualmente en el laboratorio a partir de abril, mes en el cual el laboratorio entró nuevamente en funcionamiento después de los trabajos de remodelación. Cuadro 18. Número de muestras procesadas para análisis fitopatológico por mes en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén, durante el año 2007 Mes No de muestras No de muestras acumulado % Abril Mayo Junio Julio Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre Total Fuente: Datos recopilados por Ortiz Cardona, KA. en base a registro del laboratorio. A continuación se presenta dos gráficos con la distribución porcentual mensual de muestras para análisis fitopatológicos. No se incluyen los meses en que el laboratorio se encontró fuera de servicio.

141 Porcentaje 122 Ingresos de material vegetal para análisis fitopatológico por mes durante el año ABR MAY JUN JUL AG SEP OCT NOV DIC Mes Figura 54. Gráfico del número de muestras procesadas para análisis fitopatólogicos por mes durante el año 2007 en el LDF MAGA Petén Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. En base a registros del laboratorio El mayor número de muestras ingresadas y procesadas para análisis fitopatológicos durante el año 2007 se produjo durante la temporada de lluvias en el departamento teniendo su pico a finales del mes de agosto y principios del mes de septiembre. De aquí en adelante todos los resultados expuestos, aunque no se haga mención explícitamente de ello, hacen referencia a los análisis fitopatológicos efectuados en el laboratorio.

142 123 % Acumulado porcentual mensual de muetsras procesadas para análisis fitopatológicos durante el año 2007 en el LDF MAGA Petén ABR MAY JUN JUL AG SEP OCT NOV DIC Mes Figura 55. Acumulado porcentual de muestras procesadas para análisis fitopatológico en el LDF MAGA Petén Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA.en base a registros del laboratorio Respecto al lugar de procedencia de las muestras, el mayor porcentaje provino del municipio de La Libertad con un 41%, le siguen en su orden Melchor de Mencos y Flores. De estos tres municipios proceden las tres cuartas partes del total de muestras. El municipio de La Libertad es considerado como uno de los que posee mayor actividad agrícola en el departamento de El Petén.

143 Dolores Flores La Libertad Melchor Poptún Santa Ana San Andrés San Benito San Francisco San José San Luis Sayaxché Porcentaje 124 Cuadro 19. Procedencia de las muestras procesadas para análisis fitopatológico Municipio Número de muestras % Dolores Flores La Libertad Melchor Poptún Santa Ana San Andrés San Benito San Francisco San José San Luis Sayaxché Fuente: datos recopilados por Ortiz Cardona, KA. en base a registro del laboratorio Ingreso de material vegetal para análisis fitopatológico por municipio durante el año 2007 LDF MAGA Petén Municipio Figura 56. Ingreso de manterial vegetal para análisis fitopatológico al laboratorio durante el año 2007 Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. según registros del laboratorio.

144 125 Después de haber efectuado el proceso de diagnóstico fitopatológico se determinó que en el 89% de los casos se encontró sintomatología asociada directamente a algún patógeno y en el restante 11% los problemas se debieron a deficiencias, fitotoxicidad por agroquímicos o bien a desórdenes de tipo fisiológico. De las muestras en donde se determinó que el problema se debía a patógenos, el 80% de los casos fue ocasionado por hongos, y el restante 20% por bacterias u otros microorganismos. Diagnósticos de hongos Los géneros de hongos determinados durante los diagnósticos fueron: Alternaria sp., Botryodiplodia sp./ Macrophoma sp., Cercospora sp., Cladosporium sp., Colletotrichum sp., Corynespora sp., Fusarium sp., Guignardia sp., Helminthosporium sp., Lepthosphaeria sp., Mycosphaerella sp., Pestalotiopsis sp.. Phoma sp./phyllosticta sp., Phomopsis sp., Pleospora sp. y Ustilago sp. Los hospederos afectados por estos hongos fueron: Persea americana, Prunus dulcis, Annona muricata, Brachiaria brizantha, Theobroma cacao, Cordia dodecandra, Capsicum annum, Citrus sp., Mucuna prunens, Psidium guajaba, Yucca elephantipes, Zea mayz, Mangifera indica, Dypsis lutescens, Carica papaya, Cucurbita máxima, Musa sapientum, Citrullus lanatus. A continuación se presenta un cuadro con el resumen de los resultados de los diagnósticos efectuados a las muestras ingresadas al Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén durante el año 2007 y en el cual se indica el hospedero afectado por cada género de hongo determinado durante el diagnóstico.

145 Alternaria sp. Botryodiplodia sp. Cercospora sp. Cladosporium sp. Colletotrichum sp. Corynespora sp. Fusarium sp. Guignardia sp. Helminthosporium sp. Lepthosphaeria sp. Mycosphaerella sp. Pestalotiopsis sp. Phoma sp. Pleospora sp. Ustilago sp. 126 Cuadro 20. Géneros de hongos determinados en muestras de cultivos en el departamento de El Petén, año HOSPEDEROS HONGOS Nombre común Nombre científico aguacate Persea americana almendro Prunus dulcis anona Annona muricata brizantha Brachiaria brizantha cacao Theobroma cacao cericote Cordia dodecandra chile Capsicum annum cítricos Citrus sp. frijol abono Mucuna prunens izote Yucca elephantipes maíz Zea mayz mango Mangifera indica palma Dypsis lutescens papaya Carica papaya pepitoria Cucurbita maxima plátano Musa sapientum sandía Citrullus lanatus Fuente: Elaborado por Ortiz Cardona, KA. Diagnósticos de bacterias En el caso de bacterias el diagnóstico se limitó a determinar la presencia o ausencia en las muestras analizadas debido principalmente a las limitaciones de equipo y reactivos. La técnica utilizada fue la prueba de flujo bacteriano. Se obtuvieron resultados positivos en muestras de cultivos de piña (Ananas comosus). Diagnósticos de nemátodos Para la extracción y determinación de nemátodos fue necesario realizar el procedimiento en el laboratorio del Centro de Diagnóstico Parasitológico (CDP) de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos debido a que el Laboratorio de Diagnóstico

146 127 Fitosanitario Petén no contaba con todo el equipo necesario. La técnica utilizada fue por flotación y centrifugado. Los géneros de nemátodos determinados fueron Pratylenchus sp, Rotylenchus sp.y Xiphinema sp., los cuales fueron encontrados en muestras de suelo tomadas de plantaciones de limón persa (Citrus latifolia) de la cooperativa Olazar, Sacpuy en el municipio de San Andrés, Petén. Diagnóstico de otros patógenos En papaya (Carica papaya) varias muestras colectadas en la finca Tikal Papaya 2, Las Cruces, La Libertad, presentaron sintomatología asociada a virus o fitoplasmas (conocidos anteriormente como organismos semejantes a micoplasmas). Al efectuar las pruebas básicas se excluyó como agentes causales a hongos y bacterias. Para determinar si el agente causal era un virus o fitoplasmas se tomaron varias muestras en lugar y luego tres de éstas fueron al Laboratorio de Protección Vegetal del Instituto de Investigaciones de la Universidad del Valle en la ciudad de Guatemala para realizar pruebas serológicas y de PCR (reacción en cadena de la polimerasa). Según se hace constar en los dictámenes 16714, y en una de las tres muestras ingresadas al laboratorio se detectó la presencia de Bunchy Top. Se debe hacer la aclaración que el resultado corresponde a una muestra positiva de tres que se ingresaron y que para emitir un diagnóstico definitivo deben realizarse más muestreos y efectuarse más pruebas Evaluación Se incrementó el número y la proporción de muestras recibidas, procesadas y diagnósticas para análisis fitopatológicos en comparación con el año anterior, de un 2% en el año 2006 a un 48% en el Las estadísticas del año 2006 se presentaron en el capítulo I titulado diagnóstico del Laboratorio Fitosanitario Petén. Aunque durante el año 2006 se ingresaron más muestras (330 muestras) en comparación con el 2007 (126 muestras) esta diferencia pudo deberse a estos factores: Durante el año 2006 se efectuaron muestreos intensivos enfocados a monitorear la existencia de poblaciones de trips y langosta en el área norte del país de acuerdo a los lineamientos del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) Petén. Las

147 128 muestras colectadas por las brigadas PROMIP fueron ingresadas y procesadas en el laboratorio MAGA Petén. Durante el 2007 los muestreos de este tipo fueron menos frecuentes. Durante los meses de enero, febrero y marzo del 2007 el laboratorio no recibió oficialmente ninguna muestra debido a los trabajos de remodelación que se efectuaron en sus instalaciones. Con la información presentada en este acápite quedó evidenciada y documentada la presencia de problemas de enfermedades en cultivos propios de El Petén

148 Documentación de las enfermedades diagnosticadas en LDF Petén ocasionadas por hongos en cultivos propios del departamento Objetivos General Proporcionar un registro descriptivo y fotográfico de las enfermedades ocasionadas por hongos en cultivos del departamento de El Petén Específicos Describir las sintomatologías de las enfermedades ocasionadas por hongos que fueron identificadas durante los diagnósticos efectuados Documentar fotográficamente las sintomatologías y los agentes causales que fueron diagnosticados en el laboratorio. Contribuir con el proceso de documentación fitopatológica del LDF MAGA Petén Metodología Se procedió a realizar una descripción de las sintomatologías de las muestras ingresadas y procesadas en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén las cuales se anotaron en una libreta de control. También se realizó un registro fotográfico de las mismas Resultados Como resultado de este servicio se presenta un cuadro resumen que incluye información del hospedero afectado, la procedencia de éste, la descripción de la sintomatología de la enfermedad y fotografías del agente causal y el síntoma observado.

149 130 Cuadro 21. Descripción de las sintomatologías de enfermedades ocasionadas por hongos en cultivos de El Petén diagnosticadas en el LDF de este departamento durante el año 2007 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Aguacate Persea americana Procedencia: Las Pozas, Sayaxché, Petén Hospedero: Aguacate Persea americana Procedencia: Las Pozas, Sayaxché, Petén Hospedero: Aguacate Persea americana Procedencia: Las Pozas, Sayaxché, Petén Hospedero: Almendro Prunus dulcis Procedencia: Santa Elena, Flores, Petén SINTOMATOLOGÍA Lesiones foliares necróticas de forma irregular poco profundas de color oscuro. Adentro de las lesiones se pueden observar las masas de conidios de color negro. Los síntomas dieron inicio en los márgenes de las hojas. Lesiones necróticas de forma irregular, poco profundas, de color café. El avance de las lesiones fue del borde externo de las hojas hacia el interior de la superficie foliar. Dentro de las lesiones se observaron puntos de color negro correspondientes a los acérvulos del hongo. Antracnosis en fruto. Las lesiones dieron comienzo como pequeños puntos en la parte del fruto que se une al tallo. Estos puntos aumentaron de tamaño, se unieron y formaron depresiones de borde irregular que ocasionaron además pérdida del pericarpio. Antracnosis foliar caracterizada por lesiones necróticas de borde irregular de color pardo rojizo hundidas en la superficie foliar. AGENTE CAUSAL Conidias de Pestalotiopsis sp Conidias de Colletotrichum sp. Conidias de Colletotrichum sp. Conidias de Colletotrichum sp.

150 131 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Almendro Prunus dulcis Procedencia: Santa Elena, Flores, Petén Hospedero: Anona Annona muricata Procedencia San Benito, Petén SINTOMATOLOGÍA Manchas necróticas circulares de color café claro y bordes bien marcados de color oscuro. En el interior se observan cúmulos de masas de conidias de color negro que a simple vista dan la apariencia de puntos negros. Pudrición seca del fruto. Los frutos afectados presentaron pequeñas manchas hundidas, necróticas, de color marrón oscuro. En muestras con avanzado estado de la enfermedad se observó coalescencia de las áreas necróticas hasta que éstas cubrieron la totalidad del pericarpio del fruto. AGENTE CAUSAL Conidia de Pestalotiopsis sp Conidia de Colletotrichum sp. Hospedero: Brizantha Brachiaria brizantha Procedencia: Bella Guatemala, La Libertad, Petén Lesiones necróticas estriadas de color café claro y paralelas a la nervadura de la hoja Conidia Helminthosporium sp. de Hospedero: Cacao Theobroma cacao Procedencia: Comunidad Mario Méndez, Sayaxché Petén Pudrición negra del fruto. La pudrición dio comienzo en la parte del fruto que se une al tallo de donde se extendió hasta cubrir la totalidad del fruto. En algunas muestras se observó áreas con coloración grisácea o blanquecina Conidia de Botryodiplodia sp.

151 132 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Cericote Cordia dodecandra Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Hospedero: Chile Capsicum annum Procedencia: Cabecera de Santa Ana, Petén Hospedero: Chile Capsicum annum Procedencia: Santa Elena, Flores, Petén SINTOMATOLOGÍA Manchas foliares de color café claro con bordes irregulares más oscuros En el interior de las manchas se observaron los peritecios del hongo dispuestos en anillos concéntricos. Estos peritecios pueden apreciarse a simple vista como puntos de color negro. En la fase inicial de la enfermedad únicamente se observaron los peritecios de color negro dispuestos en forma de remolino sobre la superficie de la hoja. Manchas necróticas circulares de borde café oscuro, con formación de anillos concéntricos en su interior. El centro de la macha es de color grisáceo o blanquecino. En los anillos concéntricos se observaron los conidióforos del hongo. Necrosis foliar en toda la planta. Ésta dio comienzo en las hojas jóvenes de donde se trasladó hacia las hojas viejas AGENTE CAUSAL Peritecio y ascas de Guignardia sp. Conidias y conidióforos de Cercospora sp. Con idia s de Alte rnar ia sp. Hospedero: Frijol abono Mucuna prunens Procedencia: Cabecera de la Libertad, Petén Manchas necróticas circulares de color grisáceo, de borde oscuro, dispuestas en toda la lámina foliar Conidia de Cercospora sp.

152 133 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA SINTOMATOLOGÍA AGENTE CAUSAL Hospedero: Izote Yucca elephantipes Procedencia: Jobompiche, San José, Petén Lesiones necróticas de color café localizadas en la punta de las hojas. Los síntomas comenzaron como puntos de color negro que se esparcieron hacia el interior de la lámina foliar. Los bordes de la zona de avance de la enfermedad de color negro o café oscuro. Ascosporas Leptosphaeria sp. de Hospedero: Limón persa Citrus latifolia Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Manchas necróticas foliares de forma circular, color café claro con borde café oscuro. Alrededor de la macha se formó un halo clorótico. Las manchas dieron comienzo en los márgenes de las hojas. En varios casos las manchas se unieron y formaron áreas necróticas de mayor superficie. Hospedero: Limón persa Citrus latifolia Procedencia: Sacpuy, San Andrés Hospedero: Limón persa Citrus latifolia Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Necrosis de la copa del árbol, desecamiento y agrietamiento de ramas jóvenes. También se observó necrosis de tallos. En las grietas de las ramas se puede observar picnidios de de color negro. Manchas necróticas foliares de forma circular, color café claro con borde café oscuro. Alrededor de la macha se formó un halo clorótico Adentro de la mancha se observaron los peritecios del hongo como puntos de color negro. Los peritecios fueron encontrados en las mismas lesiones en donde se encontraron conidias de Alternaria sp. Conidia de Alternaria sp. Conidias de Bptryodiplodia sp. Asca y ascosporas de Pleospora sp.

153 134 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Maíz Zea mays Procedencia: Poza del Macho, Sayaxché, Petén SINTOMATOLOGÍA Lesiones necróticas alargadas paralelas a las nervaduras de la hoja, inicialmente de color salmón a café claro y que luego se volvieron pardas. En muestras con daño severo las áreas necróticas cubrieron la totalidad del lámina foliar AGENTE CAUSAL Conidia Helminthosporium sp. de Hospedero: Maíz Zea mays Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Formación de masas polvorientas de esporas de color negro semejante al carbón que cubrieron la inflorescencia masculina (espiga) de la planta. Teliosporas de Ustilago sp. Hospedero: Mango Mangifera indica Procedencia: Santa Elena, Flores, Petén Manchas poco profundas de color negro dispuestas esporádicamente sobre la superficie de la hoja. Las manchas no sobrepasaron los 3 mm en su parte más ancha y daban la apariencia de salpicaduras con mayor frecuencia en el envés de la hoja. Conidias inmaduras de Botryodiplodia sp. Hospedero: Mango Mangifera indica Procedencia: Santa Elena, Flores, Petén Manchas foliares irregulares de color café claro con bordes oscuros distribuidas en toda la superficie de la hoja. En el interior de la mancha se pudieron observar los conidióforos del hongo Conidióforos Cercospora sp. de

154 135 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA SINTOMATOLOGÍA AGENTE CAUSAL Hospedero: Palma Areca Dypsis lutescens Procedencia: Cabecera de Melchor de Mencos, Petén Manchas necróticas alargadas de color marrón oscuro localizadas en el centro de la lámina folia. En el interior de éstas manchas se observaron los peritecios del hongo como puntos negros distribuidos en la misma dirección de las nervaduras de las hojas Peritecio Mycosphaerella sp. de Hospedero: Palma Areca Dypsis lutescens Procedencia: Yaxhá, Flores, Petén Manchas necróticas alargadas de forma irregular y de color café claro. El borde de estas manchas de color café rojizo. Adentro de las manchas se observaron los picnidios del hongo. Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: La Blanca, Melchor de Mencos, Petén Pudrición negra del fruto. Los síntomas iniciales se manifestaron como pequeñas áreas de color gris en la punta o ápice del fruto. Los estados avanzados de esta enfermedad se caracterizaron por áreas con una coloración oscura o casi negra En varias muestras se produjo la coalescencia de las áreas afectadas las cuales prácticamente cubrieron la totalidad del fruto. En hojas se observó como síntoma inicial de la enfermedad áreas necróticas de color café claro, de forma irregular, con un diámetro no mayor de 5 o 6 milímetros. En varias muestras estas áreas aparecieron rodeadas de un halo clorótico. En síntomas avanzados la superficies necróticas se volvieron quebradizas. Picnidio de Phoma sp. Conidios de Botryodiplodia sp. Conidióforos y conidias de Cercospora sp.

155 136 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: Las Cruces, La Libertad, Petén Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén SINTOMATOLOGÍA Pudrición interna del fruto. Los síntomas iniciales no fueron visibles externamente. Al realizar un corte en el fruto se puedo observar pudriciones húmedas de color marrón con poca formación de micelio. Antracnosis en fruto acompañada de pérdida de pericarpio. Los síntomas iniciales consistieron en manchas más o menos circulares, de unos 5 a 8 mm, de color café claro, localizadas en la epidermis de los frutos. En fases intermedias de la enfermedad se observaron depresiones con masas de conidias de color rosado o salmón. En etapas avanzadas se produjo deformación del fruto y las depresiones tomaron un color negro AGENTE CAUSAL Conidióforos y condias de Cladosporiums sp. Conidias de Colletotrichum sp. Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Lesiones y pudriciones de color café, de entre 0.5 a 2 cm de diámetro, que dieron inicio en la base del fruto (donde éste se une al tallo). En etapas avanzadas las lesiones se volvieron de color oscuro y afectaron el mesocarpo y el endocarpo. Conidia de Corynespora sp. Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Lesiones necrócticas rodeadas de un halo clorótico. En algunas lesiones las superficies necróticas se volvieron quebradizas. En varias muestras se encontraron peritecios del hongo en lesiones en donde también se encontraron conidióforos de Cercospora por lo que puede tratarse de dos estados diferentes de la misma enfermedad. Peritecio de Mycosphaerella sp.

156 137 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Papaya Carica papaya Procedencia: La Blanca, Melchor de Mencos, Petén Hospedero: Pepitoria Cucurbita maxima Procedencia: Sacpuy, San Andrés, Petén Hospedero: Plátano Musa sapientum Procedencia: Cabecera de La Libertad, Petén Hospedero: Plátano Musa sapientum Procedencia: Cabecera de Melchor de Mencos, Petén SINTOMATOLOGÍA Inicialmente la enfermedad comenzó con pequeñas manchas necróticas de color café, de bordes más o menos regulares, de unos 5 mm de ancho, localizadas en los márgenes de la hoja. Conforme los síntomas se desarrollaron, estas manchas comenzaron a formar áreas necróticas más grandes y de aspecto quebradizo y de un color más oscuro. Manchas necróticas anilladas de color café claro, ubicadas inicialmente en los márgenes de las hojas. El avance de la enfermedad se dio desde las orillas de la hoja hacia el centro de la misma. En la zona cercanas a las manchas se observó clorosis Se observados primero pequeños puntos de color café claro en el margen de las hojas. Estos puntos se alargaron hasta formar estrías cafés con bordes bien marcados. Generalmente las estrías aparecieron rodeadas por un halo clorótico amarillo. Depresiones de color claro en la superficie foliar. Los bordes de las depresiones de color pardo oscuro. Adentro se observaron los acérvulos del hongo AGENTE CAUSAL Picnidio de Phoma sp. Conidia de Alternaria sp. Conidióforos y conidias de Cercospora sp. Conidias de Colletotrichum sp.

157 138 Continuación cuadro 21 HOSPEDERO Y PROCEDENCIA DE LA MUESTRA Hospedero: Plátano Musa sapientum Procedencia: Cabecera de Melchor de Mencos, Petén Hospedero: Sandía Citrullus lanatus Procedencia: Santa Elena, Flores, Petén SINTOMATOLOGÍA Inicialmente aparecieron manchas amarillas localizadas paralelamente a las nervaduras laterales de las hojas. Las manchas se alargaron y cambiaron a un color café claro. También se produjo coalescencia de las manchas, las cuales cubrieron una mayor extensión de la superficie foliar. Varias manchas aparecieron rodeadas de un halo clorótico amarillo. Lesiones necróticas en las puntas y en los bordes de las hojas. Las lesiones son de color café claro, de forma irregular y con borde más oscuro. En la zona de avance el tejido de la hoja presenta coloración amarilla. AGENTE CAUSAL Peritecio de Mycosphaerella sp. Conidióforo y conidias de Cladosporium sp. Figura 57. Fotografías de síntomas y agentes causales de enfermedades diagnosticadass en el LDF Petén ocasionadas por hongos en hospederos propios de la región Fuente: Ortiz Cardona, KA Evaluación Con este servicio se decomentó descriptiva y fotográficamente las enfermedades ocasionadas por hongos en cultivos de El Petén diagnosticadas en el LDF de este departamento. También se contribuyó con el proceso de documentación fitopatológica del laboratorio cuya ausencia fue uno de los problemas identificados en la fase de diagnóstico de este laboratorio

158 Manual de procedimientos para análisis fitopatológicos del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Objetivos: General Proporcionar al laboratorio una guía para uniformizar sus procedimientos de análisis fitopatológicos. Específicos Establecer una guía metodológica que el LDF MAGA Petén pueda utilizar en el procesamiento de muestras para análisis de hongos, bacterias y nemátodos. Contribuir con el proceso de documentación fitopatológica del LDF MAGA Petén Metodología Para la elaboración del manual de procedimientos se consultaron documentos referentes al tema de los siguientes autores: Cabezas (2004), Quispe (2005), Cuervo (2007) y ERIS (2009).Ver la bibliografía completa de los autores al final de este capítulo Se procedió a la compilación y ordenación de la información enfocada en los siguientes procedimientos: recepción e ingreso de muestras en el LDF Petén, emisión de resultados, diagnósticos de enfermedades ocasionadas por fitopatógenos (hongos y bacterias) y diagnósticos de enfermedades ocasionadas por nemátodos filiformes y de quiste Resultados Consistió en la redacción de un manual de procedimientos para el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén el cual se presenta en la sección de Anexos de este documento Evaluación Con este manual se estableció una guía metodológica que el LDF MAGA Petén puede utilizar en el proceso de ingreso, recepción de muestras y diagnóstico de muestras para análisis de hongos, bacterias y nemátodos. Con esta guía también se contribuyó a la documentación fitopatológica del laboratorio por lo que se cumplió con los objetivos planteados

159 Exposiciones de temas fitopatológicos Objetivos General Presentar a las brigadas del PROMIP temas fitopatológicos relacionados con las actividades de campo que realizan. Específicos Proporcionar al personal de campo de las brigadas PROMIP criterios básicos en las siguientes actividades de campo relacionados con la fitopatología: o Identificación de síntomas en campo o Técnicas para colecta de muestras para análisis fitopatológico o Materiales y equipo para colecta de material vegetal enfermo o Preservación de las muestras desde el punto de colecta hasta el laboratorio Mejorar la calidad de las muestras ingresadas al LDF MAGA Petén que son ingresadas por el personal de campo de PROMIP Metodología El programa de manejo integrado (PROMIP) mantiene contacto directo con los agricultores por medio de un sistema de vigilancia fitosanitaria que realiza en el departamento de El Petén. En estos casos es el personal de las brigadas del PROMIP el que selecciona y/o traslada las muestras hasta el laboratorio. Debido a que a partir del 2007 se comenzó también a dar énfasis al área fitopatológica del LDF MAGA Petén, se buscó la forma de coordinar con la brigadas PROMIP exposiciones acerca de temas de patología vegetal que pudieran serles de utilidad en las actividades de campo que realizan, principalmente lo relacionado a la colecta, identificación de síntomas, traslado y preservación de muestras para análisis de fitopatógenos Resultados Las exposiciones y las actividades realizadas se presentan en el siguiente cuadro.

160 141 Cuadro 22. Exposiciones efectuadas a personal de campo del PROMIP, año 2007 Fecha Nombre de la presentación 28/09/2007 Métodos de colecta y envío de material vegetal para el diagnóstico de enfermedades 05/10/2007 Guía para la identificación de síntomas en campo Contenido general 1. El diagnóstico fitosanitario 2. El proceso del diagnóstico 3. Diferencia entre síntoma y signo 4. Llenado de la boleta utilizada en el laboratorio 5. Colecta y envío de muestras para el diagnóstico 5.1 Importancia 5.2 Materiales 5.3 Pautas 1. Definición de síntoma 2. Síntomas consistentes en cambios de color 3. Síntomas necróticos 4. Desarrollo anormal de tejidos 5. Otros Objetivos Brindar conocimientos de técnicas de colecta de material para el diagnóstico de enfermedades Mejorar la calidad del material vegetal ingresado por el personal de campo al laboratorio Proporcionar conocimientos para la diferenciación de síntomas en campo. Mejorar la información contenida en las boletas de ingreso de muestras. Actividades realizadas Exposición con equipo multimedia Demostración práctica de las técnicas Utilización de los materiales para colecta Exposición con equipo multimedia Presentación de fotografías tomadas en visitas de campo y en laboratorio para ejemplificar los síntomas explicados en cultivos propios de la región 19/10/2007 Enfermedades en el cultivo de papaya (Carica papaya L.) ocasionadas por hongos y cromistas Explicación de sintomatologías ocasionadas en papaya por los siguientes patógenos: 1. Alternaria 2. Asperisporium 3. Botryodiplodia 4. Botrytis 5. Calonectria 6. Cercospora 7. Corynespora 8. Helminthosporium 9. Colletotrichum 10. Fusarium 11. Guignardia 12. Mycosphaerella 13. Phytophthora 14. Phoma Identificar síntomas en campo de un cultivo de importancia en la región Complementar la información de plagas que el personal de campo tiene del cultivo de papaya (Carica papaya) con la información de enfermedades. Exposición con equipo multimedia Presentación preliminar de resultados de investigación acerca de enfermedades en papaya (Carica papaya) Fuente: Ortiz Cardona, KA.

161 Evaluación Se mejoró la calidad de las muestras ingresadas al laboratorio por parte del personal del PROMIP. También se observó un mayor interés por parte del personal de campo en aspectos fitopatológicos de la sanidad vegetal, interés que fue trasladado a los agricultores y que puede ser utilizado más adelante como una forma de promoción del laboratorio. 3.7 Servicios no planificados Los siguientes servicios no fueron planificados inicialmente dentro de la programación de actividades a realizar durante el Ejercicio Profesional Supervisado (EPS). Reordenamiento del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén Al inicio de las actividades de EPS el laboratorio no había sido habilitado y se encontraba aún en proceso de remodelación. Las instalaciones del LDF Petén fueron entregadas el 13 de abril de Con motivo de agilizar la reactivación del laboratorio se colaboró en las diferentes actividades de reordenamiento de cristalería, equipo y materiales. Las actividades en las cuales se tuvo participación fueron las siguientes: Elaboración de un inventario de cristalería, equipo y reactivos Ubicación del mobiliario del laboratorio Limpieza del equipo Figura 58. Condiciones del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén durante los trabajos de remodelación, marzo de Fuente: Ortiz Cardona, KA. 2007

162 143 Figura 59. Equipo del laboratorio almacenado, marzo Fuente: Fotografía Ortiz Cadona, KA Figura 60. Actividades de reordenamiento de equipo y cristalería, abril 2007 Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA Figura 61. Área del laboratorio antes y después de la habilitación del LDF Petén, año 2007 Fuente: Ortiz Cardona, KA. 2007

163 144 Figura 62. Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén después de actividades de reordenamiento, año Fuente: Ortiz Cardona, KA Apoyo en actividades de campo a las brigadas del Programa de Manejo Integrado de Plagas (PROMIP) Petén Durante la realización del EPS se tuvo la oportunidad de acompañar y colaborar con el personal del PROMIP Petén en actividades de campo. Los lugares visitados y las actividades en las cuales se colaboró aparecen resumidas en el siguiente cuadro.

164 145 Cuadro 23: Lugares visitados y actividades realizadas como apoyo a personal de Nombre Puesto cuarentena 1 Aeropuerto Puesto cuarentena Los 2 Olivos Puesto de cuarentena 3 SEPA-OIRSA campo de brigadas del PROMIP, año Comunidad / aldea Municipio Santa Elena Flores Apoyo a actividad de: Monitoreo moscas fruta Los Olivos Sayaxché Monitoreo moscas fruta Cabecera Melchor de Mencos 4 Nueva Guatemala San Francisco Monitoreo moscas fruta Reconocimiento de sanidad vegetal fruutales de traspatio 5 Cabecera La Libertad Reconocimiento de plagas en plantacione Fuente: Ortiz Cardona, KA: en Figura 63. Puesto de cuarenta SEPA OIRSA localizado en la frontera de Guatemala con Belice, Melchor de Mencos, Petén. Fuente: Ortiz Cardona, KA

165 Bibliografía 1. Agrios, GN Fitopatología. 2 ed. México, Limusa. 838 p. 2. Barnett, HL; Hunter, BB Illustrated genera of imperfect fungi. Minnesota, US, The American Phytopathological Society (APS) Press. 218 p. 3. Cabezas, O Diagnóstico y evaluación de plagas (en línea). Perú, Universidad Nacional Agraria de la Selva, Facultad de Agronomía. Consultado 26 oct Disponible en agnostico_evaluacion_plagas_0.pdf 4. CABI (Commonwealth Agricultural Buraeu, UK) CPC crop protection compendium. UK, CAB International. 2 CD. 5. Castro Retana, JJ Cultivo de la anona (Anonna cherimola Mill) (en línea). Costa Rica, Ministerio de Agricultura y Ganadería. Consultado 26 oct Disponible en 6. Crop Knowledge Master, US Crop Knowledge Master Home Page (en línea). Hawai, US. Consultado 26 oct Disponible en 7. Cuervo Usán, Y Manual de prácticas de laboratorio de fitopatología (en línea). México, Universidad Nacional Autónoma de México, Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán (FESC). México. Consultado 15 oct Disponible en 8. Cybertruffle.org.uk. s.f. Cybernome, el nomenclador de los hongos y sus organismos asociados (en línea). UK. Consultado 1 oct Disponible en: 9. ERIS (Escuela Regional de Ingeniería Sanitaria y Recursos Hidráulicos, GT) Manual de prácticas de laboratorio Microbiología del agua. Facultad de Ingeniería, Laboratorio de Química y Microbiología Sanitaria. Guatemala, USAC. 52 p. 10. Fernández Jacinto, HS Diagnóstico de enfermedades en plantas (en línea). Perú, Universidad Nacional Agraria de la Selva, Laboratorio de Sanidad Vegetal. Consultado 15 oct Disponible en nostico_evaluacion_plagas_1.pdf

166 Fernández Solano, OM; Quesada Solís, AS Nemátodos asociados a los cultivos de Costa Rica (en línea). Costa Rica, Ministerio de Agricultura y Ganadería, Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario. Consultado 26 octubre Disponible en ogia.pdf 12. Hanlin, RT Illustrated genera of Ascomycetes. Minnesota, US, The American Phytopathological Society (APS) Press. 263 p. 13. Mejía Ajcucún, LA Estudio fitopatológico en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario de la Unidad de Normas y Regulación del Ministerio de Agricultura y Centro de Diagnóstico Parasitológico de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Trabajo de Graduación Ing. Agr. Guatemala, USAC, Facultad de Agronomía. 148 p. 14. Molina Llarden, M Microbiología de suelos y técnicas fitopatológicas. Guatemala, Editorial Universitaria. 287 p. 15. Quispe Villalba, C Manual de Laboratorio de Nematología (en línea). Perú, Laboratorio de Sanidad Vegetal. Consultado 15 oct Disponible en lematica_nematodos_peru.pdf 16. Rodríguez Carranza, MJ Trabajo de graduación realizado en el caserío Nuevo Amanecer (Pancoc), municipio de Purulhá, departamento de Baja Verapaz, Guatemala. Trabajo de Graduación Ing. Agr. Guatemala, USAC, Facultad de Agronomía. 117 p.

167 ANEXOS 148

168 149 ANEXO 1 MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO FITOSANITARIO (LDF) PETÉN El Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario en El Petén La importancia de la presencia del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario (LDF) en Petén, radica en la detección temprana de infecciones en cultivos agrícolas, en virtud que el departamento, dada su posición geográfica como zona fronteriza y de constante intercambio comercial con México y Belice, es considerado como zona de alta susceptibilidad al ingreso de plagas y enfermedades. El Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario de Petén además de servir de apoyo a los programas que impulsa el MAGA en el departamento (PROMIP, MOSCAMED, VISAN, PROFRUTA, entre otros), apoya al pequeño agricultor, empresas privadas y ONGs que se dedican a la producción agropecuaria y forestal, para la realización de diagnósticos relacionados con la identificación de plagas y enfermedades Objetivo general del laboratorio Realizar la detección temprana de plagas y enfermedades en cultivos de la región, de tipo cuarentenario, endémico y exótico por medio de diagnóstico e identificación en el laboratorio Objetivo específico del laboratorio Asistir por medio del diagnóstico de plagas y enfermedades de la región, a técnicos de campo de los diferentes programas del MAGA. Apoyar al agricultor en la identificación de plagas y enfermedades en cultivos de la región para disminuir pérdidas económicas.

169 150 Manual de procedimientos para la recepción e ingreso de muestras y entrega de resultados Introducción Este documento describe el procedimiento sugerido que puede seguirse para la recepción de muestras con propósito de ser analizadas en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén. Los procedimientos de recepción e ingreso de muestras pueden afectar el diagnóstico de la misma por lo que se hace necesario buscar las metodologías más adecuadas para evitar la interferencia de estas actividades en los resultados que puedan emitirse. Objetivo Ajustar los procedimientos de recepción de muestras para garantizar el resultado confiable y en tiempo de los diagnósticos requeridos por los usuarios. Campo de aplicación Se debe tener en cuenta que cada laboratorio dedicado al servicio de diagnóstico fitosanitario genera sus propios protocolos, es por esto que este manual es aplicable únicamente al Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario Petén. Condiciones de aplicación Para que el manual de procedimientos de recepción, ingreso de muestras y emisión de resultados sea aplicable al Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario éste debe contar con el siguiente personal básico: un receptor de muestras, un(a) analista, un(a) encargado(a) o jefe(a) de laboratorio y un(a) encargado(a) de redactar los informes de diagnóstico

170 151 Procedimiento El usuario presenta la muestra a un receptor o encargado(a) de recepción quien podrá atenderlo en las instalaciones del LDF ubicadas en la calle a las Cuevas Actun Kan, Santa Elena de la Cruz, Flores, Petén, interior del VICEMAGA Petén. El(la) encargado(a) de recepción debe tener conocimientos técnicos básicos ya que será éste quien considere si la muestra es viable o no para análisis. Debe considerar también la representatividad de la muestra (suficiente cantidad) caso contrario podría rechazarla. Es importante que el receptor consulte al usuario respecto a las condiciones de colecta, empaque y transporte de la muestra. El(la) encargado(a) de la recepción de muestras entrega al usuario la boleta fitosanitaria del laboratorio y le brinda asistencia en el llenado de la misma. Se procede a llenar la boleta en forma clara y ordenada. Una vez concluido el proceso de llenado, el(la) encargado(a) de recepción de muestras se queda con la boleta. El receptor también le indica al usuario el tiempo aproximado para la entrega del resultado según el análisis requerido. El tiempo puede variar entre 3 y 15 días. El receptor consigna la información pertinente en un archivo que éste deberá tener con el registro de las muestras ingresadas, asignará un código y/o número correlativo al reciente ingreso e identificará en el apartado superior derecho de la boleta, la fecha de ingreso y el número correlativo asignado. El código se utilizará únicamente para diferenciar las muestras que sean ingresadas por algún programa perteneciente al MAGA, las cuales llevarán las iniciales SVP (Servicio de Vigilancia Petén) antepuesto al número correlativo.

171 152 El receptor procede a identificar la muestra con el número de serie asignado y procede a trasladarla al analista, juntamente con la boleta fitosanitaria. El analista procede a realizar el análisis solicitado por el usuario. Una vez determinado el agente causal del problema, se informa al(a la) encargado(a) del Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario para que sea otorgado el visto bueno. Concluido este proceso, el resultado es llevado a la persona encargada de redactar y emitir el informe final de la muestra analizada. Redactado el informe final de resultados, nuevamente el(la) encargado(a) del laboratorio procede a la revisión del mismo para emitir las observaciones respectivas. Finalmente se debe tener un informe digitalizado del cual se imprimen dos copias. El usuario recibe el resultado o informe final original y la copia queda para el archivo del laboratorio. El usuario debe firmar una constancia por haber recibido el diagnóstico.

172 153 Manual de procedimientos para diagnóstico de fitopatógenos Introducción A continuación se describe una guía metodológica que puede utilizarse para el procesamiento, análisis y diagnósticos de fitopatógenos en el Laboratorio de Diagnóstico Fitosanitario MAGA Petén. Se sugiere que este manual sea continuamente revisado por el personal encargado del laboratorio con el fin de actualizar las metodologías más recientes posteriores a la publicación del mismo. Objetivo Estandarizar los procedimientos para el diagnóstico preciso y en tiempo de las enfermedades ocasionadas por fitopatógenos. Campo de aplicación Comprende la identificación de Ascomycetes, Basidiomycetes, Oomycetes, Zygomycetes, Hongos Anamórficos y Bacterias. Condiciones de aplicación Para que este manual sea aplicado adecuadamente en el LDF Petén es necesario que éste cuente con los materiales, equipo, cristalería y reactivos que se especifican en los diferentes acápites. Materiales básicos Estereomicroscopio Microscopio Láminas portaobjetos Láminas cubreobjetos Agujas de disección Hojas de Gillette o bisturí

173 154 Gotero con lactofenol azul Gotero con lactofenol claro Gotero con agua Cajas de camisas pláticas Cajas petri de vidrio o de plástico Bolsas de polietileno Hipoclorito de Sodio al 1% Alcohol al 95%. Procedimiento Observación visual directa. Consiste en la observación a simple vista de la muestra en busca de síntomas visibles en órganos afectados. La sintomatología observada se puede clasificar de acuerdo a varios criterios dentro de los que se pueden mencionar los siguientes (Cabezas 2004): Su distribución en el hospedero General: cuando se manifiesta de forma total en la planta Local: cuando se manifiestan en forma de cambios estructurales y fisiológicos en un área limitada del tejido del hospedero. La acción del patógeno Primario: cuando son el resultado de la acción directa del patógeno Secundario: cuando son el resultado de efectos fisiológicos originados indirectamente por el patógeno Tamaño en la planta Microscópico: alteraciones a nivel celular y que solo se pueden determinar mediante técnicas histológicas y con microscopio Macroscópico: síntomas visibles a simple vista Hipertrófico: síntomas que ocasionan desarrollo excesivo de tejido Atrófico: síntomas caracterizados por el subdesarrollo de órganos

174 155 Necrótico: síntomas caracterizados por muerte del tejido Pre-necrótico: síntomas que preceden la muerte de la célula o tejido. Complejo: cuando debido a su naturaleza no pueden ser ubicados dentro de las categorías anteriores. Algunas sintomatologías pueden asociarse con algunos patógenos (Agrios 2004, Cabezas 2004), las cuales solo deben interpretarse como guías. Estos síntomas se pueden agrupar en: Síntomas asociados a hongos: Agallas, antracnosis, Cancros, marchitez (vascular), podredumbre radicular o del tallo, podredumbre de frutos síntoma, podredumbre de madera, fumagina, manchas foliares, deformación, pudriciones en postcosecha. Síntomas asociados a cromistas: Pudrición radicular Síntomas asociados a bacterias: Manchas necróticas en hojas y frutos, cancro, marchitez (vascular), podredumbre blanda, tumor. Síntomas asociados a Virus: Mosaicos, atrofia por subrpoduccion de órganos (reducción de lamina foliar, enanismo o acaparamiento), necrosis, anillos necróticos, clorosis, epinastia y otros. Observación del patógeno con microscopio estereoscópico. Se debe realizar una observación a nivel del microscopio estereoscopio con preparaciones de tejido vegetal para observar estructuras o signos de patógenos. El signo del patógeno puede observarse como: micelio, exudaciones, rhizomorfos, esclerocios, esporas, conidias, basidiocarpos, acérvulos, picnidios, peritecios, cleistotecios y apotecios (Cabezas 2004, Fernández 2004). Nota: Si se encuentran cuerpos fructíferos durante la fase de observación debe procederse a hacer raspados y/o cortes. Raspados Al encontrase cuerpos fructíferos durante la fase de observación debe procederse a realizar raspados superficiales de las zonas afectadas con el filo de un bisturí o remover el

175 156 micelio con aguja de disección, todo con la ayuda del microscopio estereoscopio (Fernández 2004). Colocar luego una porción de material sobre un portaobjetos. Agregar una gota de lactofenol azul si se sospecha de un posible ascomiceto o lactofenol claro para cualquier otro patógeno. Cubrir con cubreobjetos y observar al microscopio. Algunas variantes de este proceso consisten en colocar el raspado en una gota de agua o de hidróxido de potasio al 3% (KOH 3%) sobre un portaobjetos, cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio (Fernández 2004). Cortes Bajo el microscopio estereoscopio, realizar cortes de material vegetal para obtener estructuras contenidas dentro del tejido. Los cortes de tejidos son útiles para observar estructuras como acérvulos, picnidios, peritecios, el contenido celular del sistema vascular, pudriciones radiculares. Utilizar bisturí u hoja de afeitar para seccionar finas porciones de tejido vegetal. Depositar los cortes en un portaobjetos y teñirlo con lactofenol azul si es se sospecha de un ascomiceto o agregar lactofenol claro si se trata de otro organismo. Observar al microscopio (Fernández 2004). Nota: Si no se observan signos del patógeno, preparar muestra para cámara húmeda. Preparación de la cámara húmeda Preparar la cámara húmeda según el material vegetal a analizar. Los tipos comunes de cámaras húmedas son: Bolsas de polietileno, cajas petri de plástico o vidrio y cajas de camisas plásticas (Cabezas 2004, Fernández 2004) Al utilizar cajas petri de plástico o de vidrio, desinfectar con Hipoclorito de Sodio al 1% y/o Alcohol al 95%. El hipoclorito también puede utilizarse a una concentración del 5%. Si se utilizan cajas desinfectar de la misma forma e incluir también la rejilla. Al utilizar bolsas de polietileno, cerciorarse que sean nuevas (Cabezas 2004, Fernández 2004).

176 157 Lavado del material vegetal para cámara húmeda Partes subterráneas: Lavar el material con agua de grifo para eliminar restos de suelo, residuos de productos químicos y/o tejidos diferentes a los que se desea observar. Si es necesario se puede colocar el tejido subterráneo dentro de un recipiente tapado con una malla (Fernández 2004) Partes aéreas: Lavar con agua de grifo principalmente en hendiduras o dobleces. Para el caso de áreas con cera o pubescencia debe realizarse una inmersión momentánea en alcohol etílico 70% antes de introducir en agua (Fernández 2004). Utilización de sustancias desinfectantes Opcionalmente si se desea evitar lo más que se pueda la presencia de organismos de contaminación ambiental o microorganismos secundarios del mismo hospedero se puede utilizar una solución de hipoclorito de sodio al 1% o alcohol etílico 70%. El tejido previamente lavado con agua de grifo se sumerge un instante en estas soluciones. Utilización de la cámara húmeda Si se ha utilizado cajas petri como cámara húmeda, añadir agua destilada e introducir trozos del material vegetal de aproximadamente 1 cm. de diámetro. Si son cajas de camisa, agregar en el recipiente agua estéril, la suficiente para mantener una buena humedad. Colocar la rejilla a manera de evitar el contacto directo de la muestra con el agua. Ubicar la muestra sobre la rejilla. En el caso de utilizar bolsas de polietileno, colocar una toalla de papel húmeda dentro de la bolsa y ubicar el material vegetal dentro de la misma. Llenar la bolsa de aire y cerrarla completamente. Estas cámaras húmedas deben ubicarse a temperatura ambiente. Es recomendable realizar tantas cámaras húmedas por muestra como sea posible, para realizar un mayor número de observaciones.

177 158 Lo más importante en todos los casos es que el material vegetal dentro de las cámaras húmedas se encuentre separado del agua para evitar en todo lo posible la proliferación de saprófitos (Fernández 2004). Nota: Al cabo de 24 horas revisar la muestra y determinar si han aparecido o no algún tipo de estructura. Si no se han encontrado estructuras entonces se puede esperar cierto tiempo adicional. Si después de un tiempo prudencial se concluye que el patógeno responsable de la enfermedad no es un hongo, proceder de la siguiente manera. Prueba de flujo bacteriano (PFB) Procedimiento (Cabezas 2004) Desinfectar el material sumergiéndolo por 3 minutos en una solución de hipoclorito de sodio al 2%. Enjuagar tres veces con agua destilada. Cortar con un bisturí estéril en forma vertical a la zona afectada y obtener trozos pequeños de la zona en transición (es decir, se debe tratar de abarcar tejido sano y tejido enfermo). Con una pinza, tomar un trozo de tejido y sumergirlo en una columna de agua contenida en un tubo de ensayo, un vaso alto de precipitados o un erlenmeyer Inmediatamente comienza a fluir hacia abajo un hilo continuo en forma de humo. A veces se debe esperar entre 5 a 10 minutos para poder observar el flujo. Este hilo está constituido por células bacterianas de uno o más vasos vasculares que luego se disipan en una nube lechosa. La tinción y la observación microscópica son esenciales para comprobar la presencia de éstas.

178 159 Tinciones Las tinciones son necesarias en bacterias debido a su tamaño diminuto de éstas y a la aparente ausencia de diferencias individuales. Son procedimientos que utilizan sustancias colorantes para poder observar las bacterias que normalmente no serían visibles al microscopio óptico, por ser transparentes. El procedimiento más general se efectúa generalmente sobre frotes de bacterias desecadas y calentadas que se tiñen con algún colorante y se examina después microscópicamente (ERIS 2009). La Tinción de Gram La coloración de Gram es probablemente la tinción más importante en bacteriología, es una coloración compuesta que divide a las bacterias en dos grades grupos según retengan el colorante original (solución de cristal violeta) o lo pierdan cuando el colorante es tratado con solución de lugol y luego lavado con alcohol /acetona. La tinción de Gram utiliza un colorante (cristal violeta), un fijador de colorante (lugol), un decolorante (alcohol) y otro colorante (safranina) para teñir de diferente color a las bacterias que se decoloran en la primer fase de la tinción con el alcohol (Cuervo 2007, ERIS 2009). Como se dijo anteriormente la tinción de Gram permite clasificar las bacterias en: Gram negativas. Se decoloran con el alcohol y vuelven a colorearse con el segundo colorante (safranina), por lo que se ven rojas al microscopio. Gram positivas. No se decoloran con el alcohol y siguen permaneciendo de color azul violeta. Materiales y reactivos para la tinción de Gram Para trabajar ésta técnica se requiere de (Cuervo 2007, ERIS 2009) Un tubo de cultivo con agar nutritivo de 24 horas de incubación de la bacteria que se va a estudiar Mechero Asa bacteriológica Desinfectante Microscopio Laminillas porta y cubreobjetos limpias

179 160 Solución de cristal violeta Solución de yodo (lugol) Alcohol/Acetona Solución de safranina o fucsina Metodología para la tinción de Gram Procedimiento (Cuervo 2007, ERIS 2009): Preparar un frote del tubo de cultivo en una lámina portaobjetos y fijar con calor Teñir el frote primero con cristal violeta y dejar la solución por 1 minuto, lavar la lámina con agua de grifo y tratar con una solución de lugol, dejar esta solución por 1 minuto. El yodo del lugol forma un complejo con el cristal violeta que sirve para fijarlo en las células. Posteriormente se lleva a cabo una decoloración, con alcohol o con acetona, que son sustancias en las cuales es soluble el complejo yodo cristal violeta. Se debe agregar este reactivo gota a gota hasta que salga el color violeta. Lavar nuevamente con agua de grifo solo para quitar excesos de colorante. Agregar el colorante de contraste, fucsina o safranina, dejar esta solución por un minuto. Lavar con agua de grifo y secar al aire. Observar al microscopio y determinar las células como gram positivas si tienen un aspecto azul, mientras que las gram negativas son células rojas. La diferencia esencial entre estos dos tipos de células es su resistencia comparativa a la decoloración

180 161 Manual de procedimientos para diagnóstico nematológico Introducción A continuación se describe la metodología para el diagnóstico de nemátodos filiformes así como aquellos formadores de quistes. Objetivo Proporcionar una guía de procedimientos para el diagnóstico de enfermedades ocasionadas por nematodos de quiste y filiformes. Campo de aplicación Comprende la identificación de nematodos filiformes y formadores de quistes. Condiciones de aplicación Para que estas metodologías puedan aplicarse en el LDF Petén éste debe contar con los materiales, equipo, cristalería y reactivos que se especifican en los diferentes acápites. Cuidados que deben tenerse con las muestras: Las condiciones que deben tenerse en cuenta al momento del manejo de muestras para diagnóstico de nematodos son las siguientes (Quispe 2005) Evitar el maltrato o la manipulación excesiva. Algunas especies de nemátodos son susceptibles al manipuleo. Evitar que se seque o se caliente demasiado. No dejarla expuesta a la acción directa del sol.

181 162 Etiquetar convenientemente las muestras, mediante dos etiquetas que se colocan una dentro de la bolsa y la otra en el exterior. Las etiquetas deben ser escritas con lápiz, si se usa lapicero de tinta, la humedad de la muestra puede correrla dificultando la lectura. Almacenarlas en lugares húmedos y fríos, de 4 a 7 O C. Principales métodos para la extracción de nemátodos de suelo y tejido vegetal Nemátodos en formas móviles Tamizado de Cobb Materiales Beaker de 1000 cc Beakers de 250 cc Espátula Tamices: 60 mesh, 100 mesh, 200 mesh, 325 mesh y 500 mesh 2 recipientes plásticos con capacidad de 4 litros (A y B) Pizeta Procedimiento (Quispe 2005) En el beaker de capacidad de 1000 cc agregar 600 cc de agua. Adicionar 300 cc de suelo sin terrones. Trasladar la mezcla anterior al recipiente plástico A. Adicionar agua hasta completar aproximadamente 2 litros. Con la ayuda de la espátula desmenuzar el suelo completamente a modo de que el mismo se suspenda. Agitar la mezcla para facilitar la separación de los nemátodos del suelo.

182 163 Dejar reposar la mezcla durante un minuto para que las partículas más grandes de suelo sedimenten. A continuación pasar la suspensión a través del tamiz 60 mesh sobre el recipiente plástico B para la colecta. Descartar los restos que han quedado dentro del plástico A y sobre el tamiz y limpiar ambos. Todos los nemátodos activos han pasado a través del tamiz y se encuentran en el recipiente plástico B. Algunos nemátodos muy largos de la familia Longidoridae no pasan rápidamente y es conveniente agitar suavemente dentro del agua los restos que quedaron en el tamiz. Agitar la suspensión colectada en el recipiente plástico B y dejar reposar la mezcla durante un minuto. Seguidamente, pasar la suspensión a través del tamiz 100 mesh sobre el plástico A para la colecta. Agregar un poco más de agua sobre los residuos que hayan quedado en el recipiente plástico B, agitar y vaciar lentamente sobre el mismo tamiz y sobre el plástico A. Repetir esta operación una vez más. Descartar el material que haya quedado en el plástico B y lavarlo. Lo que queda en el tamiz 100 mesh son los nemátodos activos muy grandes como Xiphinema. Para extraerlos enjuagar el tamiz con una pizeta y recoger la suspensión en el beaker A. Este procedimiento se realiza cada vez que se pase la suspensión del plástico B a través del tamiz de 100 mesh. Lavar el tamiz. Agitar la suspensión que se colectó en el plástico A del paso 4 y pasarla lentamente a través del tamiz 200 mesh sobre el plástico B el mismo número de veces y de la misma manera como en el paso 4. Descartar el suelo que haya quedado en el recipiente A y lavarlo. Lo que queda en el tamiz 200 mesh son nemátodos medianos como Helicotylenchus. Para extraerlos, enjuagar el tamiz con la pizeta y recibir la suspensión en el beaker B. Este procedimiento se realiza cada vez que se pasa la suspensión del plástico A sobre el tamiz 200 mesh. Lavar el tamiz.

183 164 Agitar la suspensión colectada en el plástico B del paso 6 y pasarlo lentamente a través del tamiz 325 mesh sobre el recipiente A de la misma manera y el mismo número de veces como en el paso 4. Descartar el suelo que quedó en el plástico 2 y lavarlo. Lo que queda en el tamiz 325 mesh son nematodos pequeños como Pratylenchus. Para extraerlos, enjuagar el tamiz con la pizeta y recibir la suspensión en el beaker C. Este procedimiento se realiza cada vez que se pasa la suspensión del plástico 2 sobre el tamiz de 325 mesh. Lavar el tamiz. Agitar la suspensión recibida en el plástico A del paso 8 y pasarla lentamente a través del tamiz 500 mesh, el mismo número de veces y de la misma manera como en el paso 4. La suspensión que pasa por el tamiz y el suelo que quedó en el plástico A se descartan. Lavar el recipiente. Lo que queda en el tamiz 500 mesh son los nemátodos más pequeños y larvas, para extraerlos enjuagar el tamiz con la pizeta y recibir la suspensión en el beaker D. Lavar el tamiz. Los nemátodos de los beakers A, B, C y D se observan bajo el microscopio en una cámara de conteo. Método de centrifugación Materiales Beaker de 1000 cc Espátula Tamices: 60 mesh, 100 mesh, 200 mesh, 325 mesh, 500 mesh Recipientes plásticos con capacidad de 4 litros

184 165 Pizeta Centrifugadora Solución de azúcar al 50% Procedimiento (Quispe 2005) En el beaker de capacidad de 1000 cc agregar 600 cc de agua. Adicionar 300 cc de suelo sin terrones. Trasladar la mezcla anterior al recipiente plástico A. Adicionar agua hasta completar aproximadamente 2 litros. Con la ayuda de la espátula desmenuzar el suelo completamente a modo de que el mismo se suspenda. Agitar la mezcla para facilitar la separación de los nemátodos del suelo. Dejar reposar la mezcla durante un minuto para que las partículas más grandes de suelo sedimenten. A continuación pasar la suspensión a través del tamiz 60 mesh sobre el recipiente plástico B para la colecta. Descartar los restos que han quedado dentro del plástico A y sobre el tamiz y limpiar ambos. Agitar la suspensión colectada en el recipiente plástico B y dejar reposar la mezcla durante un minuto. Seguidamente, pasar la suspensión a través del tamiz 100 mesh sobre el recipiente plástico A para la colecta. Con la ayuda de la pizeta, cuidadosamente deberán concentrarse los nemátodos retenidos en el tamiz en un solo lado y colectarse en el beaker de 50 cc. La colecta deberá ser de 5 cc. Agitar la suspensión colectada en el recipiente plástico A y dejar reposar la mezcla durante un minuto. Seguidamente, pasar la suspensión a través del tamiz 200 mesh sobre el recipiente plástico B para la colecta. Con la ayuda de la pizeta, cuidadosamente deberán concentrarse los nemátodos retenidos en el tamiz en un solo lado y colectarse en el mismo beaker y la misma cantidad.

185 166 Agitar la suspensión colectada en el recipiente plástico B y dejar reposar la mezcla durante un minuto. Seguidamente, pasar la suspensión a través del tamiz 325 mesh sobre el recipiente plástico A para la colecta. Con la ayuda de la pizeta, cuidadosamente deberán concentrarse los nemátodos retenidos en el tamiz en un solo lado y colectarse en el mismo beaker y la misma cantidad. Agitar la suspensión colectada en el recipiente plástico A y dejar reposar la mezcla durante un minuto. Seguidamente, pasar la suspensión a través del tamiz 500 mesh sobre el recipiente plástico B para la colecta. Con la ayuda de la pizeta, cuidadosamente deberán concentrarse los nemátodos retenidos en el tamiz en un solo lado y colectarse en el mismo beaker y la misma cantidad. La cantidad colectada al final de todo el proceso no debe exceder los 20 cc. Vaciar los 20 cc colectados en los tubos de la centrífuga. De preferencia debe vaciarse 10 cc de filtrado en cada tubo. Al realizar este paso, tener el cuidado de balancear la centrífuga. Realizar la centrifugación a 3000 rpm durante 5 minutos. Al término de la centrifugación, en el fondo de los tubos se depositarán los nemátodos y otros desechos, el sobrenadante deberá descartarse. Agregar a cada tubo 5 cc de solución de azúcar al 50% y agitar. Centrifugar durante 30 segundos a 3000 rpm. Los nemátodos flotarán en la solución azucarada, las partículas de suelo quedarán en el fondo del tubo. Verter el contenido de los tubos sobre el tamiz 500 mesh, de esta forma los nemátodos quedarán retenidos en el mismo. Inmediatamente después y muy cuidadosamente, con la pizeta que contiene agua corriente se enjuagarán los nemátodos retenidos en el tamiz para eliminar el azúcar y evitar que se plasmolicen.

186 167 Con la pizeta, concentrar los nemátodos en un solo lado del tamiz y colectarlos en un Beaker de 25 cc, procurando que la colecta no sea mayor a 20 cc. Realizar la lectura de nemátodos en una cámara de conteo bajo el microscopio. Nemátodos en formas enquistadas Método modificado de Fenwick Antes de desarrollar la metodología, es necesario secar el suelo para que los quistes floten en el agua mientras que las partículas de suelo sedimentan. La separación de los quistes del suelo, usando el principio de flotación se puede lograr de varias maneras. A continuación se describe el procedimiento general utilizado. Materiales Equipo de Fenwick modificado Tamices: 100 y 500 mesh Embudos de 10 cm de diámetro Papel filtro Erlenmeyers de 500 ml de capacidad Soporte de metal Cápsula de aluminio El equipo Fenwick consiste en un embudo colocado sobre una especie de jarra. El embudo en la base de su parte ensanchada, lleva un tamiz de 1 mm de tamaño de poro. La jarra tiene forma trapezoidal, en su parte superior presenta los soportes del embudo y una aleta inclinada que bordea la jarra como collar, pero que termina en un solo conducto. La jarra en su parte inferior tiene un tapón que se retira para enjuagarla y limpiarla.

187 168 Procedimiento (Quispe 2005) Colocar el tamiz 200 mesh en la base superior del embudo del equipo de Fenwick y el tamiz 500 mesh ubicarlo de manera que reciba el material que sale de la aleta inclinada. Lavar la muestra completa de suelo (1 kg) con agua corriente hasta que solo queden retenidas piedras, restos de raíces y material orgánico. Las partículas pesadas del suelo se van depositando en la base inclinada y la parte inferior de la jarra. Algunas partículas de suelo, quistes y restos orgánicos flotan, rebalsan, salen a través de la aleta y se depositan en el tamiz 500 mesh. Retirar el tapón de la parte inferior de la jarra para desaguarla y dejar limpio el equipo. Colocar el papel filtro de 10 x 10 cm dentro de un embudo sobre el círculo de metal soldado a la parte superior del soporte de metal. Ubicar debajo del embudo un erlenmeyer de 500 ml. Los quistes y material orgánico que quedaron en el tamiz 500 mesh deberán concentrarse con la pizeta y con un embudo transferirlos a un erlenmeyer de 500 ml. Los quistes y restos orgánicos flotan, algunos restos orgánicos y partículas de suelo sedimentan. Decantar la suspensión del erlenmeyer sobre el primer embudo. Los quistes y restos orgánicos quedarán retenidos en el filtro, el agua correrá y se depositará en el erlenmeyer. Cuidadosamente extraer el papel filtro del embudo y doblar los bordes para asegurar su contenido. Depositar el material en la cápsula de aluminio y dejar secar a temperatura ambiente. Puede utilizarse un desecador para que el proceso sea agilizado. Observar la muestra al estereomicroscopio cuando esté completamente seca.

188 169 Este método tiene el inconveniente de que la muestra contiene demasiadas partículas contaminantes, lo que dificulta su análisis si no se dispone de cierta experiencia, por lo que se propone un procedimiento complementario que es el de la acetona. Método de la acetona Materiales Erlenmeyers de 500 ml Acetona Embudos Papel filtro Pincel Frasco de vidrio capacidad de 1 litro Papel mayordomo Procedimiento (Quispe 2005) Cuando la muestra esté seca, utilizar el mismo principio del método de Fenwick para separar los quistes y sedimentar los restos orgánicos. Transferir el material con la ayuda de un pincel a un erlenmeyer de 500 ml (puede utilizarse un embudo para que esta operación sea más fácil). Agregar acetona hasta la mitad del erlenmeyer. Para que los quistes floten con facilidad, agitar el erlenmeyer. A continuación, llenar completamente con acetona hasta 1 cm del borde superior del erlenmeyer. La mayoría de restos orgánicos sedimentarán y los quistes flotarán. Inmediatamente decantar los quistes ubicados en la superficie de la acetona. Para ello, colocar un embudo con papel filtro sobre un erlenmeyer de 500 ml. Durante

189 170 este proceso deberá irse rotando el erlenmeyer para que no se retengan los quistes en el recipiente. Cuando no haya quistes en el erlenmeyer, agitar y decantar los restos orgánicos sobre un embudo de mayor diámetro que contenga un cono de papel mayordomo y este colocado sobre un frasco para recuperar la acetona. Cuando la acetona se haya evaporado completamente del papel filtro que contiene la muestra con quistes, estos se depositarán en una cápsula de aluminio. Observar al estereomicroscopio.

190 171 ANEXO 2. GLOSARIO Acérvulo: Cuerpo fructífero asexual, subepidérmico y en forma de plato que produce conidios en conidióforos cortos. Analista: Profesional encargado de realizar el examen minucioso de la muestra presentada por el usuario y de la cual ha solicitado el análisis. Antracnosis: Enfermedad que se manifiesta como lesiones negras profundas de la hoja, tallo o fruto y que es causada por hongos que producen sus esporas asexuales en un acérvulo. Apotecio: Ascocarpo abierto en forma de copa o de plato de algunos ascomicetos. Apresorío: Extremo hinchado de una hifa o tubo germinativo que facilita la fijación y penetración de un hongo en su hospedante. Asca: Célula en forma de saco de una hifa que pasa por meiosis y que contiene a las ascosporas (por lo común, ocho). Ascocarpo: Cuerpo fructífero de los ascomicetos que porta o contiene aseas. Ascogonio: Gametangio u órgano sexual femenino de los ascomicetos. Ascomicetos: Grupo de hongos que producen sus esporas sexuales, o ascosporas, dentro de ascas. Ascospora: Espora que se produce sexualmente en un asca. Atrófico: Se caracteriza por el subdesarrollo de órganos o subproducción de clorofila. Bacteria: Microorganismos unicelulares que se multiplican por división celular. Las células generalmente se encuentran recubiertas por una pared celular rígida y se caracterizan por carecer de núcleo (es decir, son células procariotas). Se clasifican en función de la forma que adoptan como cocos (esferas), bacilos (alargados como bastoncillos) y espirilos (en espiral). Basidiocarpo: Estructura fructificante de forma, tamaño, color y consistencia variable, que contiene la basidia y basidiosporas de hongos de la clase Basidiomycetes. Cámara húmeda: La cámara húmeda generalmente es una bolsa de nylon o un recipiente plástico con un trozo de papel húmedo. La cámara húmeda crea condiciones favorables para el rápido desarrollo de hongos involucrados en la producción de síntomas de enfermedad, pero cuya presencia no es detectada en el momento de la primera observación.

191 172 Centrífuga: Es un aparato que utiliza la fuerza centrifuga para separar las fases de una muestra, generalmente una fase sólida de una líquida. Clamidospora: Espora asexual de pared gruesa que se forma por la modificación de una célula de las hifas de un hongo. Cleistotecio: Ascocarpo totalmente cerrado. Clorosis: Amarillamiento de los tejidos normalmente verdes, debido a la destrucción de la clorofila o a la imposibilidad de sintetizarla. Conidio: Espora asexual de un hongo formada en el extremo de un conidióforo. Conidióforo: Hifa especializada sobre la cual se forman uno o más conidios. Cuerpo fructífero: Estructura compleja de los hongos que contiene esporas. Enfermedad: Cualquier mal funcionamiento de las células y tejidos del hospedante, que resulta de la irritación continua por un agente patogénico o factor ambiental y que lleva al desarrollo de síntomas. Esclerocio: Masa compacta de faifas que puede o no contener tejidos del hospedante, por lo común con una cubierta oscura y capaz de sobrevivir bajo condiciones ambientales desfavorables. Espora de resistencia: Espora sexual o de pared gruesa de un hongo que resiste las condiciones extremas de temperatura y humedad y que suele germinar sólo después de un período posterior a su formación. Espora: Unidad reproductiva de los hongos que consta de una o varias células; es análoga a la semilla de las plantas verdes. Esporangio: Estructura que contiene esporas asexuales. En algunos casos funciona como espora. Esporangióforo: Hifa especializada que porta uno o más esporangios. Esporangiospora: Espora asexual inmóvil que se produce en un esporangio. Esporodoquio: Estructura fructífera que consta de un racimo de conidióforos entretejidos que forman una masa de faifas. Esporóforo: Hifa o estructura fructífera que contiene esporas. Etapa imperfecta: Fase del ciclo de vida de un hongo en la que no se producen esporas sexuales. La fase anamórfica. Etapa perfecta: Etapa sexual del ciclo de vida de un hongo. Etapa teleomórfica.

192 173 Exudación: Es una secreción de la misma planta en la forma de cera o goma y que generalmente se encuentra entremezclada con estructuras propagativas de los hongos (esporas). En el caso de enfermedades provocadas por bacterias las exudaciones son de apariencia cerosa, esta especie de cera contiene gran cantidad de células bacterianas. Fitopatógeno: Es todo microorganismo que produce enfermedades en las plantas Fructificación: Producción de esporas por hongos. También un cuerpo fructífero. Hifa: Ramificación simple de un micelio Hipertrófico: Se caracteriza por un desarrollo excesivo de tejidos. Hongo: Los hongos son organismos multicelulares, que se alimenta mediante la absorción, no pueden sintetizar sus propios alimentos, viven sobre otros organismos es por ello que se dicen que son parásitos. Los hongos son organismos sin clorofila, por lo que no pueden realizar la función de fotosíntesis, obtienen sus alimentos en forma directa o indirecta, almacenando sustancias nutritivas Hongo imperfecto (anamórfico): Hongo del que no se sabe que produzca esporas sexuales Lactofenol azul: Es un compuesto que contiene lactofenol y azul de algodón. El fenol destruye la flora, el ácido láctico conserva las estructuras fúngicas al provocar un cambio de gradiente osmótico en relación al interior del fúngico generando una película protectora. El azul de algodón posee la capacidad de adherirse a la quitina presente en las hifas y conidios de los hongos Micelio: Hifa o masa de hifas que constituyen el soma de un hongo. Necrótico: Son caracterizados por la muerte del tejido. Nemátodo: Orden de gusanos de cuerpo alargado, cilíndrico, fusiforme o filiforme. Organismo pequeñísimo, que tiene forma de lombriz y es abundante en muchos suelos. Hay nematodos benéficos y maléficos. Causantes de pequeñas protuberancias en las raíces de las plantas, son parásitos. Peritecio: Ascocarpo de los pirenomicetos en forma de botella o globular y que tiene una abertura o poro (ostiolo). Picnidio: Cuerpo fructífero asexual, esférico o en forma de botella que en su interior contiene conidióforos y conidios.

193 174 Picnio: Llamado también espermagonio o espermatogonio. Picniospora: Llamada también espermacio; espora que se forma en el picnic. Pudrición: Reblandecimiento, decoloración y con frecuencia desintegración de los tejidos de una planta suculenta como resultado de infección bacteriana o fungosa. Quiste: Los nemátodos formadores de quistes son endoparásitos sedentarios. Estos toman el nombre de nemátodos formadores de quistes por las estructuras hinchadas y resistentes formadas por los cuerpos de las hembras donde los huevos están encerrados y protegidos. Los quistes que están llenos de huevos son de color marrón oscuro y son la etapa más resistente. La cutícula de la hembra adulta se vuelve amarilla y luego marrón oscuro debido a las quinonas que forman el quiste. Rhizomorfo: Es una estructura de conservación de los hongos en forma de cordones y están formados por hifas paralelas soldadas entre sí longitudinalmente. Signo: Patógeno o sus partes o productos que se observan sobre una planta hospedante. Síntoma: Reacciones o alteraciones internas y externas que sufre una planta como resultado de su enfermedad.

194 175 ANEXO 3. DIAGNÓSTICO DE BUNCHY TOP EFECTUADO POR EL LABORATORIO DE PROTECCIÓN VEGETAL DE LA UNIVERSIDAD DEL VALLE GUATEMALA Figura 64A. Diagnóstico de Bunchy Top efectuado por la Universidad del Valle de Guatemala Fuente: Universidad del Valle de Guatemala.

195 176 Figura.65A. Muestras colectadas para análisis de Bunchy top Fuente: Fotografía Ortiz Cardona, KA. 2007